急性白血病细胞免疫表型分析及临床意义

亚型 n CD 13 CD 14 CD 33 CD 68 M PO HLA 2DR CD 34 CD 41
M 1 6 6617 5010 10010 10010 10010 8313 1617 0
M 2 15 8010 3313 7313 8617 10010 8010 617 0
M 3 13 9213 1514 7619 7619 10010 2310 717 0
总之, 本研究进一步明确了 AL 免疫表型的特 点, 对弥补传统形态学分类的缺陷及指导临床治疗 具有重要价值。 有关免疫表型对 AL 患者预后的影 响, 有待进一步探讨。
[ 参考文献 ]
[ 1 ] 曾慧兰, 张学光, 陶瑞芳, 等 1 急性早幼粒细胞白血病免疫表型分 析[J ]1 中华血液学杂志, 1998, 19 (1) : 31232.
[ 关键词 ] 急性白血病; 免疫表型; 免疫组化 [ 中图分类号 ] R 73313 [ 文献标识码 ] B [ 文章编号 ] 10022266X (2007) 1720033202
急性白血病 (acu te leukem ia, AL ) 免疫分型是 用已知的单克隆抗体 (M cA b ) 鉴定细胞表面的免疫 标志, 可客观反映白血病细胞的来源及其分化阶段。 为 白 血 病 的 诊 断、治 疗 和 判 断 预 后 提 供 重 要 依 据。 2006 年 9 月～ 2007 年 2 月, 我们对 99 例初发急性 白血病患者进行了免疫表型检测, 现对结果进行分 析。 1 资料与方法 111 一般资料 观察对象为 99 例 2006 年 9 月～ 2007 年 2 月来我院收治的初发 AL 患者。 男 49 例, 女 50 例; 年龄 1～ 77 岁, 平均 31104 岁。均根据临床 症状、细胞学形态、细胞化学、免疫分型等综合指标 确诊。急性非淋巴细胞性白血病 (ANLL ) 52 例; 急性 淋巴细胞白血病 (ALL ) 31 例, 其中 B 2ALL 25 例, T 2 ALL 6 例; 混合细胞性白血病 (M AL ) 14 例,“裸细 胞”型白血病 2 例。 112 方法 采用免疫组织化学二步法, 选择国际上 公认的第一线单抗和部分常用的第二线单抗, 应用 碱性磷酸酶染色技术对骨髓涂片进行免疫分型 (玻 片法) , 试剂盒购于上海太阳生物技术有限公司。 抗 体选择: 髓细胞系为 CD 13, CD 14, CD 33, CD 68,M PO ; T 淋巴细胞系为 CD 3, CD 5, CD 7; B 淋巴细胞系为 CD 10, CD 19, CD 20; 巨核细胞系为 CD 41; 无系列特异性的抗 体为 HLA 2DR , CD 34。 二抗及缓冲液均来自试剂盒。 将骨髓涂片用 DA KO 笔分隔成若干小块, 对应相关 一抗并标记, 按试剂盒操作要求, 依次完成实验, 最 后用甘油—明胶封片, 镜检。免疫分型结果判断参考
糖 蛋白 A 和血小板糖蛋白 (CD 41) 可以明确的区分 M 6、M 7。本组中仅有 1 例M 7 患者, 其 CD 41表达率为 60% , 明显高于其他类型的髓系白血病。HLA 2DR 是 组织相容性复合物 (M HC ) 二类分子, 是一非系列相 关性抗原, 其表达也具有一定的诊断参考价值。本组 52 例 ANLL 中 HLA 2DR 表达率为 6015%。M 3 中 HLA 2DR 表达率是最低的, 表明M 3 可能源自于分 化较好的粒系祖细胞, 因此在有髓系抗原表达, 而 HLA 2DR 低表达时, 要考虑M 3 的可能性大。刘伟红
综合分型方案, 免疫分型是针对细胞内外的特异性 抗原, 采用单克隆抗体对白血病细胞的来源和分化 阶段进行检测和判定, 是对 FAB 分型的重要补充, 二者结合使用可使诊断符合率提高到 90%～ 99% , 有利于判断预后及治疗方案的选择。
311 ANLL 的 免 疫 表 型 分 析 本 文 结 果 显 示, M PO、CD 68、CD 33、CD 13 在髓系白血病诊断中最有价 值, 本组中M PO 高表达, 可以认为是最敏感的指标。 对于ANLL 而言, 其免疫标记缺乏明显的特异性, 有 一定的局限性。 但是对于ANLL 亚型中的M 0 (急性 髓细胞白血病未分化型)、M 6 (红白血病)、M 7 (巨核 细胞白血病) 的诊断至关重要。利用特异性抗原血型
山东医药 2007 年第 47 卷第 17 期
·临床研究·
急性白血病细胞免疫表型分析及临床意义
于桂兰1, 陈 玲2, 李元堂13 , 徐功立1 (1 山东省立医院, 山东济南 250021; 2 山东大学医学院)
[ 摘要 ] 探讨急性白血病细胞免疫表型及其临床意义。 采用免疫组织化学法, 对 99 例初发急性白血病患者 骨髓细胞行免疫表型分析。 结果: 52 例急性非淋巴细胞性白血病 (ANLL ) 中, 髓系相关标志表达率依次为M PO ( 9412% )、CD 68 (8615% )、CD 33 (8018% )、CD 13 (8018% ) ; 6 例 T 2ALL 中相关标志表达率依次为 CD 7 (10010% )、 CD 3 (8313% )、CD 5 ( 1617% ) ; 25 例 B 2ALL 中 相 关 标 志 表 达 率 依 次 为 CD 19 ( 9610% )、CD 10 ( 6810% )、CD 20 (4410% )。 结合 FAB 分类, 急性白血病细胞免疫表型, 可为白血病的诊断提供重要依据, 对于指导临床治疗及判 断预后具有重要临床价值。
阳性表达 例数
阳性率 (% )
CD 10 17
6810
CD 19 24
9610
CD 20 HLA 2DR CD 34
11
24
1
4410 9610 410
表 5 各主要标志在混合型急性白血病中的表达
表面标志 M T (6 例)
M B (3 例)
T B (4 例)
CD 3
1
1
3
CD 5
4
0
3
CD 7
4
0
m unop heno typ ing in 379 p atien tsW ith acu te m yelo id leukem ia [J ] 1 L euk R es, 2004, 28 (1) : 37323751
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[ 3 ] Chang H , Satam F , Y i QL , et al1P rogno stiC relevance of im 2
3 通讯作者
我国现行诊断标准及其欧美国家提倡的抗原积分系
统。 阳性判断标准[1]: 髓系抗原阳性细胞≥ 20% ; CD 34 及 HLA 2DR 阳性细胞≥20% ; 淋系抗原阳性 细胞≥30% 。 2 结果
52 例 ANLL 中髓系相关标志表达率依次为 M PO (9412% )、CD 68 (8615% )、CD 33 (8018% )、CD 13 (8018% ) , 见表 1。ANLL 中主要表面标志表达与 FAB 亚型的关系见表 2。表 2 显示 CD 13、CD 33、CD 68、 M PO、HLA 2DR 在各亚型中均为高表达。 其中 CD 13 在M 1、M 6 型中表达低于其他亚型; CD 14 在M 1、M 2、 M 3 中均为低表达, 在M 4 中达 10010% , 在 M 6 中不 表达;M PO 在各型中表达率最高。6 例 T 2ALL 中相 关标 志 表 达 率 依 次 为 CD 7 ( 100% )、CD 3 ( 8313% )、 CD 5 (1617% ) , 见表 3。25 例B 2ALL 中相关标志表达 率 依 次 为 CD 19 ( 9610% )、CD 10 ( 6810% )、CD 20 (4410% )。见表 4。各主要标志在急性混合型白血病 中的表达见表 5。
M 4 5 10010 10010 10010 8010 10010 10010 0 0
M 5 10 8010 3010 9010 9010 7010 5010 0 0
M 6 2 5010
0 10010 10010 10010 10010 5010 0
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山东医药 2007 年第 47 卷第 17 期
表 3 各主要标志在 T2ALL 中的表达率 (% )
阳性表达 例数
阳性率 (% )
CD 3 5 8313
CD 5 1 1617
CD 7 HLA 2DR CD 34
6
6
0
10010 10010
0
表 4 各主要标志在B 2ALL 中的表达率 (% )
表 1 各主要标志物在ANLL 中的表达率 (% )
阳性表达 CD 13
例数
42
阳性率 (% ) 8018
CD 14 5 916
CD 33 42 8018
CD 68 45 8615
M PO H IA 2DR CD 34 49 32 3 9412 6115 518
表 2 52 例ANLL 各亚型中主要标志物的表达率 (% )
p ro tein actiV ity in acu te m yelo id leukem ias is associated W ith poo r respon se to chem o therap y and reduced p atien t suevival[J ]1 B r J H aem ato l, 2002, 116 (4) : 83428381 [ 5 ] 陆进, 查庆桂, 吴天勤, 等 1CD 34在成人急性白血病中的表达及意 义[J ]. 实用临床医学, 2005, 6 (110) : 622631
1
CD 10
0
1
3
CD 19
0
3
4
CD 20
0
0
1
CD 13
5
1
0
CD 14
2
2
1
CD 33
3
3
0
CD 68
5
2
2
M PO
4
1
0
CD 34
1
2
1
HLA 2DR
5
3
3
3 讨论 在 白 血 病 的 分 ห้องสมุดไป่ตู้ 诊 断 中, 以 形 态 学 为 基 础 的
FAB 分类法已被普遍采用, 但据国内外报道其诊断 符合率仅为 60%～ 80%。白血病M IC 分型是由国际 白血病分型小组提出的形态学、免疫学、细胞遗传学
等[2 ] 报道 CD 117 是干 祖细胞的标志, 为判断 M 0, M 1 的指标之一。52 例患者中仅有 3 例 CD 34阳性, Chang H 等[3] 等认为 CD 34 是负性预后指标, 与多药耐药蛋 白的活性有关, CD 34阳性的 ANLL , 细胞分化更为不 成熟, 均提示预后欠佳[4]。 陆进等[5] 报道应用大剂量 阿糖胞苷为主的化疗方案可提高 CD 34阳性患者的疗 效。 312 ALL 免 疫 表 型 分 析 本 组 T 2ALL 中 CD 5、 CD 3、CD 7 表达率高, 其中 CD 7 最高 (100% ) ; B 2ALL 中 CD 19、CD 10、CD 20 表 达 率 高, 其 中 CD 19 最 高 (96100% ) , 是最具有诊断价值的主要抗原。 313 M AL 的免疫表型分析 M AL 是白血病细胞 来源于不同的细胞系, 因此可同时表达两种细胞系 (常为淋系和髓系细胞抗原) 的标志性抗原。 常分为 双表型、双系列型、双克隆型, 其中双表型、双系列型 较常见。M AL 疗效差、完全缓解率低、生存期短、预 后不良。本组 14 例M AL , 髓系 T 系双表型有 6 例, 髓系 B 系双表型有 3 例, T B 双表型 4 例, 还有 1 例 同时表达髓系、T 系、B 系。 对于M AL 仅靠 FAB 分 型常无法诊断, 免疫分型是根据白血病细胞表达两 系标志性抗原的特点诊断M AL , 准确率高, 对治疗 亦有重要的指导作用。 314 “裸细胞”型的免疫表型分析 所谓“裸细胞” 型白血病是指一些特殊不表达或仅表达少数几个造 血干 祖细胞抗原或非系列抗原的急性白血病。本组 2 例为“裸细胞”型白血病, 均为 AM L 患者, 该 2 例 患者各系列抗原表达率均很低, 说明白血病细胞处 于较为原始的阶段。