浆细胞疾病免疫表型分析(朱明清)

浆细胞疾病免疫表型分析

苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所

卫生部血栓与止血重点实验室

朱明清

浆细胞疾病分类

•多发性骨髓瘤（MM)•

其它疾病

•Monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS)

•冒烟型骨髓瘤 (SMM)•孤立性浆细胞瘤

»骨»髓外

•原发巨球蛋白血症•原发淀粉样变性(AL)•重链病

•POEMS 综合征/ 骨硬化性骨髓瘤 • I 和 II 型冷球蛋白血症 •轻链沉积病

多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM ）是恶性浆

细胞病中最常见的一种类型，又称骨髓瘤,是B细胞起源的，骨髓克隆性浆细胞恶性增殖和异常积累，并伴大量单克隆免疫球蛋白的出现及沉积为特征的一种衰竭性、不可治愈的恶性疾病。多发性骨髓瘤常伴有多发性溶骨性损害,高钙血症,贫血,肾脏损害,而且对细菌性感染的易感性增高,正常免疫球蛋白的生成受抑。临床表现复杂多样，无特异性，误诊率高达84%-85%。

多发性骨髓瘤发病概况

临床表现

•骨髓中异常浆细胞：骨质破坏（骨痛，骨折，高钙血症） 贫血（头晕乏力） 产生大量的异常蛋白

正常免疫球蛋白产生减少•异常蛋白质：血液粘滞度增高（头晕，手足麻木）

蛋白尿

肾功能不全

淀粉样变

•正常免疫球蛋白减少：反复感染

•高钙血症：乏力，恶心，呕吐，神智异常，影响肾功能

•淀粉样变：可以影响全身各个器官，主要为肾脏，心脏以及消化道等

球蛋白异常：增高或减低 蛋白尿 单克隆免疫球蛋白多发性骨髓瘤的诊断步骤

单克隆免疫球蛋白的鉴定血清蛋白电泳

血清和尿免疫固定电泳24小时尿轻链定量

血清游离轻链定量及比例骨髓穿刺和活检

组织活检

免疫表型、证实克隆性浆细胞IgH/L 基因重排

骨髓瘤相关器官损害评估血常规

生化检查：血清肌肝和血钙骨骼检查

浆细胞单克隆属性

骨髓瘤相关器官损害

蛋白水平

细胞及基因

水平

多发性骨髓瘤的诊断步骤

特殊检查

•腹壁脂肪或直肠粘膜活检•孤立性溶骨病灶活检•血粘度测定

•免疫固定电泳（针对IgD 或IgE ）•寡分泌型患者的MRI 、PET 检查

检查

优点

局限

骨髓穿刺涂片简便瘤细胞不均一性骨髓活检反映侵犯程度疼痛

SPE/UPE 简便

敏感性: 0.2-0.6 g/L IFE 敏感性: 0.12–0.25g/L 非定量sFLC 敏感性：10mg/L 费用较IFE 贵骨髓免疫组化识别克隆性浆细胞/形态学实验室要求高骨髓FCM 识别克隆性浆细胞实验室要求高MRI, PET

检测全身状况及不分泌肿瘤

价格贵

MM各种检查方法的比较

2014 IMWG （国际骨髓瘤工作组）更新的骨髓瘤诊断标准

MGUS

▪M 蛋白 < 3 g/dL

▪骨髓瘤克隆性浆细胞 < 10%▪无骨髓瘤确定性事件

冒烟型骨髓瘤

▪M 蛋白 ≥ 3 g/dL (血清) or ≥ 500 mg/24 hrs (尿)

▪骨髓中克隆性浆细胞≥ 10% to 60%

▪无骨髓瘤确定性事件

多发性骨髓瘤

▪浆细胞增生性疾病

▪AND 1个或多个骨髓瘤确定性事件

▪≥ 1 CRAB* 症状

▪骨髓克隆性浆细胞 ≥ 60%▪血清游离轻链 ≥ 100▪ > 1 MRI 局限性损害

*C: 血清钙升高 (> 11 mg/dL or 大于正常值上限1 mg/dL)

R: 肾功能不全 (肌酐清除率< 40 mL/min or 血清肌酐> 2 mg/dL)A: 贫血 (Hb < 10 g/dL or 2 g/dL < 正常值)

B: 骨病 (≥ 1 溶骨性损害，X 光片, CT, or PET-CT)

Lancet Oncol 2014; 15: e538–48

MM的实验室诊断

骨髓象检查对诊断本病具有决定性意义。骨

髓常增生活跃，骨髓瘤细胞一般都在5％以上，多者可达９５％。瘤细胞有时呈不均匀分布，须多部位多次骨穿方能确诊。

多发性骨髓瘤细胞形态特点

①细胞大小不一，有时可见巨型、多枚骨髓瘤细胞；②核染色质细致，有１～2个核仁；

③胞浆着色异常，部分呈嗜碱性，部分呈嗜酸性，有时胞浆内见红色或结晶状包涵体即罗氏小体。核周围淡染区常不明显或消失，可合少量嗜苯胺蓝颗粒或空泡。有时可见蓝色小球状，直径约２ｕ的充满胞浆的包涵体。

Flow cytometry of a bone marrow aspirate can permit assessment of plasma cell phenotype, confirm clonality and permit determination of the proportion in cell cycle (plasma cell labelling index ). It is important to assess abnormal

phenotype and clonality when the bone marrow plasma cells are <10%. Identification of an abnormal and unique plasma cell phenotype may be of value for later response evaluation.

Guidelines on the diagnosis and management of multipleMyeloma. British Journal of Haematology, 132, 410–451

流式免疫分析对MM 诊断的意义

细胞类型鉴定

Borowitz et al (1993) AJCP 100:534-40.

Steltzer et al (1993) Ann NY Acad Sci 667:265-280