手、设备表面微生物取样方法

手、设备表面微生物取样方法

一、携带物品：

酒精灯、75%酒精棉球若干、不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水、一次性手套。

备注：不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水须经高温蒸汽灭菌；10ml生理盐水根据实际所需准备多支；一次性手套需经辐照灭菌；

二、操作方法：

1、手取样

点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹车间人员手正背面，反复两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。

2、设备表面取样

点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹设备平滑表面（面积自己预先估计一个大概数值，25、50或100cm2等），反复涂抹两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。

三、细菌及大肠菌群的培养（具体操作时以GB4789.2-2010和GB4789.3-2003为准）

样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。配成1：10样液。根据污染情况，进行十倍递增稀释，吸取1ml 的1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液，以此类推。

细菌总数：

1、以无菌操作，选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿，及时将冷却至46℃左右的平板计数琼脂培养基倾注平皿，每皿约15-20ml，转动平皿使其充分混合均匀。

2、待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36℃±1℃培养48 h后计数。

3、结果报告：报告每25、50或100cm2数食品接触面或每只手的菌落数。

大肠菌群：

1、以无菌操作，选择3个稀释度各取1ml样液分别接种到乳糖胆盐发酵管内，每个稀释度接种三管。

2、将乳糖胆盐发酵管置于36℃±1℃培养24±2h。所有乳糖胆盐发酵管都不，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，根据标准做证实实验。

3、结果报告：按乳糖胆盐发酵管产气管数，查MPN表报告每25、50或100cm2食品接触面或每只手的大肠菌群数值。

四、记录

1、记录要尽量详实，对所能得到的数值都要做书面记录。在车间取样时，取样日期，取样时间，设备上具体的取样点，取样地点，车间人员，取样时温度，湿度等。

2、要对操作过程中出现的状况进行记录，总结调整。

五、注意事项及状况处理

1、不锈钢剪及镊子如遭污染或需重复使用，需用75%酒精棉球擦拭后再经酒精灯灼烧。

2、点燃酒精灯的作用是使酒精灯附近小范围成为一个无菌区域，在操作过程中，尽量合取样人员，工作人员及物品处于该区域附近。

3、取样人员携带的无菌物品要放置在无菌袋内带入车间，以避免途中污染。

4、在取样过程中可能会有各种状况出现，所需的物品可以自己多带备份并多做总结。

5、设备取样表面必须是平滑表面。

6、从取样到化验时间尽量控制在六小时内。