东魁杨梅树皮不同提取物体内外抗肿瘤作用的实验研究
桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究
桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究
实验采用小鼠肺癌细胞C126的体内植入瘤模型。
将小鼠随机分为对照组和实验组，实验组分为三个剂量组，每组6只小鼠。
实验组给予桑黄提取物不同剂量的腹腔注射，每周
注射三次，连续注射4周，对照组给予等量的生理盐水腹腔注射。
观察小鼠体重变化、肝
和肾功能及脾脏、心脏和肺组织病理学变化情况。
同时通过免疫细胞检测、MTT法和流式
细胞仪检测桑黄提取物的抗肿瘤作用。
结果显示，桑黄提取物能够抑制小鼠肺癌细胞的生长，具有显著的抗肿瘤作用。
其中，高剂量组的肿瘤抑制率最高，为61.2%。
在瘤组织中观察到大量的细胞凋亡和坏死现象，
说明桑黄提取物具有诱导肺癌细胞凋亡的作用。
同时，实验组小鼠的体重、肝和肾功能、
脾脏、心脏和肺组织都没有明显的毒副作用和病理学变化。
此外，桑黄提取物还能够明显提高小鼠免疫系统的活性，增强机体的免疫功能。
MTT
法的结果表明，桑黄提取物对小鼠淋巴细胞增殖有促进作用。
流式细胞仪检测显示，桑黄
提取物能够提高小鼠血清中白细胞、淋巴细胞和NK细胞的数量，同时减少调节性T细胞的数量。
综上所述，桑黄提取物具有良好的抗肿瘤作用，能够抑制小鼠肺癌细胞的生长，同时
具有提高小鼠免疫系统活性的作用。
本研究结果为桑黄的临床应用提供了一定的科学依据
和实验基础。
不同品种杨梅用途研究
杨梅是浙江省的重要特产水果 ， 其栽培面积 和产量均居全国首位 ， 在全 国推广主栽的许多品 种原产于浙江。 其中， 浙江的荸荠杨梅、 东魁杨梅 、 丁岙梅、 晚稻杨梅等 已成为全国性主栽品种【 １ 卜。 ２ 杨梅 营养价值 丰富 ， 含有碳水化合物 、 有机 酸、 花青素 、 类黄酮等成分 ， 具有 消食 、 消暑 、 御 寒、 止泻 、 利尿 、 治痢疾及生津止渴、 清肠 胃、 除烦 愤恶气等多种功用 ， 能清除 自由基 ， 具有抗氧化
１ 材 料 和 方 法
１１ 材 料 ．
本 研 究 选 用 浙 江市 场 上 主要 销 售 的 ４个 杨
梅 品种荸荠杨梅 、 东魁杨梅 、 丁岙梅 、 晚稻杨梅作 为试验材料 。 其中， 荸荠杨梅、 东魁杨梅 、 丁岙梅于
２ １ 年 ６月 摘 自浙 江 慈溪 ， ０１ 晚稻 杨梅 于 ２ １ 年 ０１ ７月摘 自浙 江 宁海 。
量 ×１０ ０ ％。
本研究通过对荸荠杨梅 、 东魁杨梅 、 丁岙梅 、 晚稻杨梅 ４个杨梅 品种 的主要 营养成分及性状 进行测定 ，并应用灰色关联度 分析法对适合制 汁、 制粉和保健 的杨梅品种进行筛选 ， 使杨梅得
Ｄｎａ’ ｅｅ ｏ ｅｔｄ ｒｍ ｄ ｅｅｔ ｅｓｏＺ ｅａ ｇ ｒ ｉｃ． ｈ ｓｌ ｏ ｅ ａ Ｄ ｎ ｋｉｓｈ ｉｖｒ ｔ ｆ ｉ ｎ ｉ ｏｗ ｒ ｃｌ ｃ ｏ ｉ ｒｎ ａ ａ ｈｊ ｏ ｎｅＴ ｅ ｅｕｔ ｓ ｗ ｄｔ ｔ ｏ ｇｕ ｉ ｔｅ ｕｔ ａｉｙ ｏ ｊ ｃ ａｄ ｇ ｌ ｅｆ ｆ ｒ ｆ ｉ ｐｖ ｎ ｒ ｓｈ ｈ ｓ ｅ ｒｕ ｅ
１ ． 方 法 ２
和抗Байду номын сангаас老的作用 。 杨梅果实储藏 、 运输难度大 ，
供应周期短 ， 不能满足人们周年消费需求 。而杨 梅加工成果粉和果汁 ， 就解决了这一问题 。有研 究表明， 杨梅果汁具有较强的清除 自由基的能力
GC-MS联用分析三个品种杨梅树叶的挥发油组分
GC-MS联用分析三个品种杨梅树叶的挥发油组分刁银军;许玲玲;麻佳蕾;杨晓东;吴永江【摘要】采用气相色谱-质谱联用技术对木叶、黑炭、东魁3个品种杨梅树叶中的挥发油进行分析比较.3种杨梅树叶挥发油中共检出14种相同成分,这些共有成分的相对含量分别占木叶梅叶、黑炭梅叶和东魁梅叶挥发油总相对含量的53. 3%、48. 4%、55. 15%.3种杨梅树叶挥发油中均舍有多种萜烯,对杨梅果实具有一定抗菌保鲜作用.东魁杨梅树叶挥发油萜烯含量最高,这可能是东魁杨梅果实保鲜期较长的原因;木叶杨梅叶含的特殊香味成分的含量较高,这可能是木叶梅果实香气最浓郁的原因.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2009(018)001【总页数】4页(P25-28)【关键词】杨梅树叶;挥发油;气相色谱-质谱联用;萜烯;香气物质【作者】刁银军;许玲玲;麻佳蕾;杨晓东;吴永江【作者单位】金华职业技术学院,金华,321007;金华职业技术学院,金华,321007;金华职业技术学院,金华,321007;金华职业技术学院,金华,321007;浙江大学现代中药研究所,杭州,310058【正文语种】中文【中图分类】O6杨梅(Myrica rubra Sieb. et Zucc.)是杨梅科(Myricaceae)，属多年生常绿乔木，主要分布于浙江、江苏、福建等省[1]。
杨梅的栽培面积、产量及品质等均以浙江为最，是浙江省的特色水果[2]。
目前对杨梅的研究主要集中在杨梅果实的保鲜和杨梅产品的开发上，而对杨梅叶的研究较少。
杨梅树叶资源丰富，如能开发利用杨梅叶资源可以在基本不增加投入的前提下增加果农的收入，具有重要的现实意义。
目前对杨梅叶成分的研究主要集中在其黄酮类、原花色素类以及鞣质等酚类成分[3-6]。
对杨梅叶挥发油的研究报道很少，仅见同科异属的矮杨梅叶精油的研究[3]。
芳香精油作为保护性次生代谢物是植物体抵御致病菌侵害的重要物质，绝大多数芳香精油具有优良的体外抗真菌作用[7-9]。
杨梅中一个新化合物的抗肿瘤活性的初步研究
Ｃ ｉ ｈｎＪＭｏ ｒｇＡ ｐ， ｙ ０ ９． ｏ． Ｎ ． ｄＤ ｕ ｐ ｌＭａ ０ ｖ Ｉ３． ｏ９ ２
・
１９・ １
杨 梅 中一 个 新 化 合 物 的 抗肿 瘤 活 性 的初 步 研 究
陈铭祥 王定 勇 刘 恩桂
定液， 以蒸 馏水清洗一次 ， Ｈ ｅｈｔ ３ ５ （ ｇ Ｌ 染 色 １ 用 ｏｃｓ ３ ２ ８ ５ｍ ／ ） ０
Ｈ３ ｅＯ
ｍｎ ｉ。用蒸馏水清洗 ２次后取细胞悬液 ， 滴于载玻 片 ， 自然 干
燥， 在荧光 显微 镜下 以 ３ ０ｎ ４ ｍ激 发光观察并 随机拍照 。Ｈ ｏ ｅｈｔ ３５ ｃｓ ３ ２ ８是一种 Ｄ Ａ荧光 染料 ， 以插入 并结 合于 Ｄ Ａ Ｎ 可 Ｎ
对 照组 Ｏ Ｄ值）×１０ 。 ０％
属植物 ， 化学成分主要为黄 酮类 、 其 三萜类 以及 环状二芳 基 庚烷类化合物 。近年来 的研究发 现 ， 二芳基庚烷 类化合 物 由 于其独特 的化学结 构具 有多 种生物 活性 如抗 肿瘤 、 肝毒 、 抗 抗氧化 、 消炎 、 排胆汁 、 解肝毒 、 杀虫等 … ， 了开 发富含二 芳 为 基庚烷类化合物 的湖南 杨梅 这一 植 物资 源 ，笔者 对采 自湖
现细胞凋亡 时 ， 细胞核或细胞质 内可见浓染致 密 的颗粒 块状
图 １ 杨梅新醇和杨梅新酮 的化学结构式
１ 仪 器 与试 剂
荧光 ， 核出现不 同程度 的 固缩 ， 常可 见 Ｄ Ａ荧光 碎片 （ Ｎ 凋亡 小体 ） 。
２ ４ Ｄ Ａ提取及琼脂 糖凝胶 电泳 ． Ｎ 将 收集 的细胞 （ ２×１ ０ 个） ００ ｒｍ ｎ 离心 ５ ｍｎ 移 去培 养基 ， Ｐ Ｓ洗两 次 ， １０ ｉ ， ／ ｉ， 用 Ｂ 加
二氢杨梅素抗肿瘤最新研究进展 (2)
二氢杨梅素抗肿瘤最新研究进展二氢杨梅素是黄酮类化合物之一，大量存在于藤茶植物中。
研究表明二氢杨梅素具有抗肿瘤、清除自由基、抗氧化、抗血栓和消炎等多种功效[1-3]。
本文主要综述二氢杨梅素抗肿瘤活性和5种抗肿瘤作用机制：诱导肿瘤细胞凋亡；诱导肿瘤细胞自噬；抑制肿瘤细胞侵袭、转移；抑制肿瘤血管形成以及细胞周期阻滞。
二氢杨梅素在体外和体内抗肿瘤方面效果明显，其对抗肿瘤药物的研究具有重要意义。
标签：二氢杨梅素；肿瘤；自噬。
Abstract：Dihydromyricetin is one of the flavonoids，abounding in rattan tea plants. Studies have shown that dihydromyricetin has anti-tumor，scavenging free radicals，antioxidation，antithrombotic and anti-inflammatory effect[1-3]. This article mainly reviews dihydromyricetin antitumor activity and 5 kinds of antitumor mechanisms：The function of inducing tumor cell apoptosis，the function of inducing tumor cell autophagy，inhibition of tumor cell invasion and metastasis，inhibition of tumor angiogenesis and cell cycle arrest. Dihydromyricetin in vitro and in vivo antitumor effects are obvious，having significance in antitumor drug research，especially.Keywords：Dihydromyricetin；Tumor；Autophagy1. 二氢杨梅素的来源和理化性质二氢杨梅素（Dihydromyricetin，DMY）是一种多酚羟基双氢黄酮醇（图1），该化合物首次由Kotake和Kubota于1940年从葡萄科蛇葡萄属植物福建茶即楝叶玉葡萄（A1Meliaefolia）的叶中分离得到，命名为蛇葡萄素。
桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究
桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究桑黄（Sophora flavescens）是一种传统中药，被广泛应用于中医临床实践中治疗多种疾病，包括肿瘤。
许多研究表明，桑黄提取物具有抗肿瘤的活性。
本实验旨在探究桑黄提取物在小鼠模型中的抗肿瘤作用。
我们从中药市场购买了粉碎后的桑黄根和根茎，并对其进行颗粒化处理。
接下来，我们使用乙醇对桑黄颗粒进行提取，得到了桑黄乙醇提取物。
为了评价桑黄提取物的抗肿瘤作用，我们采用了腹腔注射肿瘤细胞法，将小鼠随机分为实验组和对照组。
实验组小鼠腹腔注射了肿瘤细胞后，开始接受桑黄提取物的处理。
对照组则接受了相同的操作，但没有给予桑黄提取物处理。
通过监测实验组和对照组小鼠的生存时间和肿瘤大小，我们发现实验组小鼠的生存时间明显延长，肿瘤大小也明显减小，与对照组相比具有显著差异。
这表明桑黄提取物具有抗肿瘤的活性。
为了进一步研究桑黄提取物的抗肿瘤作用机制，我们进行了组织切片和免疫组化分析。
结果显示，在实验组中，肿瘤组织中的凋亡标志物（如活化的半胱氨酸蛋白酶-3）的表达明显增加，而增殖标志物（如Ki-67）的表达明显下降。
这表明桑黄提取物通过促进肿瘤细胞凋亡和抑制细胞增殖来发挥抗肿瘤作用。
我们还检测了实验组和对照组小鼠的免疫功能。
结果显示，实验组小鼠的免疫功能显著增强，包括NK细胞活性、淋巴细胞亚群比例和细胞因子水平。
这表明桑黄提取物通过增强机体免疫功能，加强对肿瘤的免疫监视来发挥抗肿瘤作用。
本实验证明桑黄提取物具有抗肿瘤作用，可能通过促进肿瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖和增强机体免疫功能来发挥其作用。
这为进一步研究桑黄提取物的抗肿瘤机制和开发新的抗肿瘤药物奠定了基础。
杨梅素抗肿瘤活性研究进展
Ｅ Ｒ Ｋ和 Ｐ ． Ｂ Ａ Ｄ蛋 白 的表 达 ， 还会促进 Ｂ ｃ ｌ － ２家 族 蛋
白中 的促 凋亡 蛋 白 Ｂ ａ ｘ释放 ， 进而促 进 细胞 凋亡 。另 据报 道 ， 通过 控制 Ｈ ｅ ｐ Ｇ一 ２细 胞 的量 可 以有 效 地 抑 制
吴 少花 ， 陈 吉林 吉 林 君 ， 刘亚 萌 综述 ， 徐 １ ３ ２ ０ １ ３ ） 冶 审校 （ 吉 林 医 药学 院 ： １ ． 检验 学 院 ， ２ ． 临床 医学 院 ， ３ ． 基础 医学 院 ，
摘 要 ：杨梅素（ ｍ ｙ ｒ ｉ ｃ ｅ ｔ ｉ ｎ ） 是广泛存在于天然植物中的一种黄酮类物质 ， 化学式为 ３ ， ５ ， ７ 一 三羟基一 ２ 一 （ ３ ， ４ ， ５ ・ 三
羟 基苯 基 ） ４Ｈ． １ 一 苯 并 呋喃＿ ４ ． 酮。杨 梅 素具 有 很 高 的 药用价 值 ， 近 年 来 人们 发 现 它抗 肿 瘤 方 面也 有 很 好 的效
果。本文将从杨梅素对肿瘤细胞细胞周期和细胞凋亡信号途径的影响以及杨梅素联合用药在抗肿瘤上的应用
等方 面进行 综述 。 关 键 词 ：杨梅 素 ； 肿瘤； 凋亡
期 为杨 梅素 在抗 肿瘤 领域 的进 一步研 究 提供参 考 。
１ 杨梅 素对 肿瘤 细胞 细胞 周 期的 影响 在 抗肿 瘤研 究 中 ， 抑 制肿 瘤细胞 的增殖 已成 为人 们 研究 的一 个 热点 ， 而杨 梅素 在这 方面 的作 用也 愈来
醇索氏回流提取等＿ ｌ 。此外 ， 高效液相色谱法 、 质谱
文 献标识 码 ：Ａ 中图分 类号 ：Ｒ ７ ３ － ３
杨 梅属 杨梅科 乔 木植 物 ， 具 有很 高 的药 用和 食用 价值 ， 在 中国华东 和湖 南 、 广东 、 广 西、 贵 州 等地 区均 有 分布 。杨 梅素 （ ｍ ｙ ｒ ｉ ｃ ｅ ｔ ｉ ｎ ） 又称 杨 梅树 皮 素 ， 杨 梅黄
杨梅黄酮的药物研究
杨梅黄酮的药物研究杨梅为杨梅科杨梅属植物，属多年生常绿乔木，是我国南方良好的经济生态树种，为长江流域以南的特产，杨梅果实甜酸可口，自古以来就被用于食疗。
杨梅除了含有丰富的碳水化合物、蛋白质、氨基酸、有机酸、矿物质、维生素外，还含有丰富的花色素和类黄酮成分，近年来杨梅提取物成为国内外学者研究的热点，其中杨梅黄酮是发挥药理作用的主要化学成分之一。
杨梅黄酮又称杨梅树皮素、杨梅酮，属于黄酮类化合物。
近年来发现其具有抗菌抗病毒、抗炎、抗氧化、防止血小板聚集以及抗癌防癌等多种生物活性。
抗氧化活性研究发现，利用3%浓度胆碱水进入小鼠体内产生血管内皮功能障碍和肝氧化应激，结果显示高摄入膳食胆碱能诱导肝损伤，而杨梅黄酮可以通过增加肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及减少肝脏丙二醛(MDA)的含量来改善胆碱诱导的血管内皮功能障碍和肝损伤。
研究表明，杨梅黄酮可以阻滞新生鼠因缺血再灌注损伤而导致的心肌中SOD、GSH-Px 的活性降低，使其活性升高，减少MDA、ROS的生成，还能够减少因缺血再灌注而致的大鼠肌酸激酶的释放，减轻心肌损伤。
杨梅黄酮对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎呈现较好的抗炎效应，能降低NO、髓过氧化物酶(MPO)和MDA，同时提高SOD、GSH-Px的活性。
抗炎炎症是当各种损伤因子作用于机体时，做出的以防御为主的反应，TNF-α（肿瘤坏死因子）和IL-12（白细胞介素）是目前公认的重要的炎症因子。
研究 表明杨梅黄酮类化合物由三个环结构（A、B 和C）组成，其中C 环上的3-OH 基团对抗炎活性至关重要，C-末端的特定位点磷酸化破坏了细胞表面和细胞骨架之间的蛋白质的三维结构，使得肌动蛋白结合位点可接近，C 环与肌动蛋白在细胞骨架中交联阻止炎症介质的分泌。
有学者通过角叉胶方法诱导的足水肿模型来检测杨梅黄酮抗炎活性，分别在诱导之后2、4、6 h 检查足垫肿胀程度，结果显示经杨梅黄酮处理的水肿明显减轻，它能减少IL-12和TNF-α的释放缓解由角叉胶诱导的急性炎症。
龙眼壳粗黄酮提取物体内外抗肿瘤研究
龙眼壳粗黄酮提取物体内外抗肿瘤研究宋佳玉;张清伟;刘金宝;郭秋兰【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2016(037)003【摘要】研究龙眼壳粗黄酮提取物体内外抗肿瘤作用.体外试验以MTT法检测龙眼壳粗黄酮提取物对食管癌细胞EC109、肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用.体内试验建立S180荷瘤小鼠模型,观察龙眼壳粗黄酮提取物(100、200、300 mg/kg)组和龙眼壳粗黄酮提取物+CTX(20 mg/kg)组的抑瘤率,计算提取物+CTX组小鼠的脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬指数、吞噬率,并采用ELISA法检测提取物组小鼠血清TNF-α的水平.体外试验显示龙眼壳粗黄酮提取物可显著抑制EC109、HepG2细胞的生长,并呈现一定的浓度依赖性.体内试验显示龙眼壳粗黄酮提取物(低)、(中)、(高)组均可抑制S180肉瘤生长,抑瘤率分别为28.24％、44.91％、60.65％;提取物(低)+CTX组、提取物(中)+CTX组、提取物(高)+CTX组抑瘤率分别为53.7％、65.74％、70.37％,均高于CTX组47.69％,且与CTX组比较,提取物+CTX组可不同程度地升高荷瘤小鼠的脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞的吞噬率、吞噬指数;和模型组比较,提取物(低)、(中)、(高)组不增加小鼠血清TNF-α水平.龙眼壳粗黄酮提取物可抑制肿瘤细胞生长,具有抗肿瘤作用,且对CTX化疗药物具有增效减毒作用.【总页数】4页(P40-43)【作者】宋佳玉;张清伟;刘金宝;郭秋兰【作者单位】河南漯河医学高等专科学校,河南漯河462002;河南漯河医学高等专科学校,河南漯河462002;河南漯河医学高等专科学校,河南漯河462002;河南漯河医学高等专科学校,河南漯河462002【正文语种】中文【相关文献】1.龙眼壳总黄酮的提取及其抗肿瘤的初步研究 [J], 宋佳玉;张清伟;刘金宝;郭秋兰2.东魁杨梅树皮不同提取物体内外抗肿瘤作用的实验研究 [J], 刘霞;戴关海;童晔玲;任泽明;陈璇;杨锋3.龙眼外果皮粗黄酮提取物对S180肉瘤的抑制作用研究 [J], 郭秋兰4.白藤梨根提取物体内外抗肿瘤作用研究 [J],5.苦参总黄酮体内外抗肿瘤作用实验研究 [J], 孙明瑜;左剑;段继峰;韩军;范士明;张炜;朱丽芳;姚明辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
杨梅树皮氯仿萃取物抗小鼠Lewis肺癌的实验研究
杨梅树皮氯仿萃取物抗小鼠Lewis肺癌的实验研究童晔玲;戴关海;任泽明;陈璇;杨锋【期刊名称】《中国中医药科技》【年(卷),期】2016(023)001【摘要】目的:观察杨梅树皮氯仿萃取物对C 57 BL/6J小鼠Lewis肺癌的抑制作用及对肿瘤坏死因子(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法:建立C 57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,分别设杨梅树皮氯仿萃取物高剂量组(13.2g生药/kg)、中剂量组(6.6g生药/kg)、低剂量组(3.3g生药/kg)、环磷酰胺(CTX)阳性对照组(30 mg/kg×3)及模型对照组(水30 mL/kg),给药12天后处死动物,称瘤重,计算抑瘤率(％);ELISA法测定血清TNF-α、MMP-9、TIMP-1含量.结果:杨梅树皮氯仿萃取物对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌有一定的抑制作用,抑瘤率在16.3％～41.6％,其中高、中剂量组的瘤重与模型组比较有显著性差异(P＜0.05 ～0.01);同时能明显增高血清TNF-α、TIMP-1表达,降低MMP-9表达.结论:杨梅树皮氯仿萃取物对C 57BL/6J小鼠Lewis肺癌有较好的抑制作用,且能上调TNF-α、TIMP-1表达,下调MMP-9表达.【总页数】3页(P50-52)【作者】童晔玲;戴关海;任泽明;陈璇;杨锋【作者单位】浙江省中医药研究院浙江杭州310007;浙江省中医药研究院浙江杭州310007;浙江省中医药研究院浙江杭州310007;浙江省中医药研究院浙江杭州310007;浙江省中医药研究院浙江杭州310007【正文语种】中文【相关文献】1.中药抗小鼠Lewis肺癌实验研究进展 [J], 刘静2.黄芪扶正汤抗小鼠Lewis肺癌机制的实验研究 [J], 薛松;钟美佐;刘巍;李建璜;黄进3.调衡方抗荷瘤小鼠Lewis肺癌转移的实验研究 [J], 张宏方;张奇;任丽红;白志超;王小平;环诚;张怡敏4.五加皮杨梅树皮及其复方制剂药对小鼠抗疼痛效果的研究 [J], 余红;郑冬;蔡健;李望田;杨静;胡方芳;Muhammad Naeem;韩淑英5.藤茶双氢杨梅树皮素抗肝癌H_(22)的实验研究 [J], 郑作文;阎莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
20种多孔类真菌乙醇提取物体外抗氧化和抗肿瘤活性的比较研究
20种多孔类真菌乙醇提取物体外抗氧化和抗肿瘤活性的比较研究陈永强;陈先晖;孙勇;缪倩;王力;蒋继宏【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2011(032)005【摘要】采用清除DPPH自由基的方法和Alamar Blue法比较20种多孔类真菌乙醇提取物抗氧化活性和对3株癌细胞体外增殖的影响,对它们的子实体和菌丝体乙醇提取物进行测定.结果表明:20种多孔菌子实体乙醇提取物清除自由基和抗肿瘤活性大部分都强于菌丝体乙醉提取物,其中有10株多孔类真菌子实体乙醇提取物质量浓度在5mg/mL时,自由基清除率超过70%;质量浓度在500μg/mL时,对人非小肺癌细胞NCI-H46.和人肝癌细胞HepG2两株癌细胞抑制率在90%左右,而对耐药细胞株Bel-7402/5-Fu抑制率略低于正常细胞株.【总页数】5页(P27-31)【作者】陈永强;陈先晖;孙勇;缪倩;王力;蒋继宏【作者单位】徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116【正文语种】中文【中图分类】TS201.2【相关文献】1.肉色香蘑子实体提取物的体外抗氧化与抗肿瘤活性研究 [J], 陈颖;孙红;张树斌;王立安2.灵芝属真菌乙醇提取物抗肿瘤活性的筛选 [J], 周月琴;糜可;杨庆尧;钟顺昌;李绪泉;杨晓彤3.不同“桑黄”类真菌水提取物的抗肿瘤活性研究 [J], 武晓林;王超儀;包海鹰4.10种多孔类真菌体外抗肿瘤活性的筛选 [J], 孙勇;蒋继宏;陈玉芹;高甜惠;陈凤美5.水柏枝乙醇提取物不同极性部位体外抗氧化活性研究 [J], 李芳龙;阿呷尔布;李家东;梁晓霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
东魁杨梅树叶和果实精油成分的比较与分析
东魁杨梅树叶和果实精油成分的比较与分析许玲玲;杨晓东;韩铮;吴永江;章庆辉【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2009(030)010【摘要】目的:比较分析杨梅树叶与果实、新鲜果与贮藏果的精油成分,为杨梅叶的开发和杨梅果实的保鲜及加工提供理论依据.方法:采用水蒸汽蒸馏泫提取东魁杨梅树叶、新鲜果、贮藏果精油,通过气相色谱-质谱技术对精油成分进行测定分析.结果:在贮藏过程中,杨梅果所含的一些挥发性成分的种类及其含量发生了明显变化;杨梅叶含有多种独特香味成分(如石竹烯、橙花叔醇)和抗菌成分.结论:贮藏过程中杨梅果精油中的萜烯、醛、酮、酯类等成分的种类及其含量明显减少,尤其是主要成分石竹烯的含量急剧降低,致使杨梅果的香气发生改变,容易腐烂;杨梅叶精油对杨梅果有一定的保鲜作用.【总页数】4页(P248-251)【作者】许玲玲;杨晓东;韩铮;吴永江;章庆辉【作者单位】金华职业技术学院,浙江,金华,321007;金华职业技术学院,浙江,金华,321007;浙江大学现代中药研究所,浙江,杭州,310058;浙江大学现代中药研究所,浙江,杭州,310058;兰溪市马涧镇_农业技术推广总站,浙江,兰溪,321100【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.柞树叶、构树叶和柳树叶的营养成分分析及比较研究 [J], 刘会娟2.广西樟树叶精油的化学成分分析 [J], 莫建光;黄艳;周翔3.樟树叶精油组成分析及抗氧化活性研究 [J], 李嘉欣; 孟斌斌; 朱凯4.四种柏树叶精油成分的比较研究与分类 [J], 丁洪美;马骥5.春夏两季杨梅树叶部精油成分及抗氧化活性比较研究 [J], 钟瑞敏;张振明;肖仔君;王羽梅;曾庆孝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
蚯蚓提取物抗肿瘤作用的实验研究
蚯蚓提取物抗肿瘤作用的实验研究
何道伟;周菲
【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》
【年(卷),期】2005(002)009
【摘要】目的:探讨蚯蚓提取物对Eca-109细胞生长抑制作用及机制.方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析,流式细胞仪测定细胞凋亡,细胞周期及检测小鼠体内肿瘤质量.结果:蚯蚓提取物成分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中,只有大、中剂量(900,450 mg·L-1)成分Ⅱ对Eca-109细胞有明显的抑制作用,300,600 mg·L-1灌胃对小鼠肿瘤有明显的抑制作用.细胞检测有凋亡细胞出现,细胞被阻滞在G0-G1期,DNA合成受阻故使肿瘤细胞受抑制,肿瘤体积缩小.结论:蚯蚓提取物成分Ⅱ对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,主要通过细胞凋亡和肿瘤细胞受阻于G0-G1期,使DNA合成减少.
【总页数】3页(P225-226,230)
【作者】何道伟;周菲
【作者单位】东南大学医学院,江苏,南京,210009;南京市第三医院干部科,江苏,南京,210003
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.东魁杨梅树皮不同提取物体内外抗肿瘤作用的实验研究 [J], 刘霞;戴关海;童晔玲;任泽明;陈璇;杨锋
2.蚯蚓提取物抗肿瘤作用的研究进展 [J], 余艳秋;陈洪
3.蚯蚓提取物体内和体外抗肿瘤作用的研究 [J], 何道伟;陈洪;叶银英
4.地胆草三萜提取物对S180小鼠体内抗肿瘤作用的实验研究 [J], 廖建华;
5.桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究 [J], 于彩云;赵晨;黄芳;宋爱荣;
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灵雷菌质提取物体内抗肿瘤作用的实验研究
灵雷菌质提取物体内抗肿瘤作用的实验研究熊浩仲;谢小梅;苏明声;庄毅;周雪娥;张普照;舒任庚【期刊名称】《中国食用菌》【年(卷),期】2009(028)001【摘要】采用小鼠肉瘤(S180)移植性肿瘤模型,观察灵雷菌质乙酸乙酯部位、正丁醇部位、石油醚部位和水部位提取物的肿瘤抑制作用,并测定小鼠的胸腺指数及脾脏指数.结果表明所有的提取物都呈现出明显的抑瘤效果,抑瘤率均大于35%.其中部分正丁醇部位的抑瘤率达到了68.88%.抑瘤效果由弱至强的顺序为石油醚部位<水部位<乙酸乙酯部位<正丁醇部位,而胸腺指数与脾脏指数则显示只有乙酸乙酯部位组有较明显的免疫抑制效果.双向性固体发酵可降低雷公藤的毒性,尤其正丁醇部位和水部位的毒性可能较弱.【总页数】3页(P45-46,52)【作者】熊浩仲;谢小梅;苏明声;庄毅;周雪娥;张普照;舒任庚【作者单位】江西中医学院菌物药研究中心,江西,南昌,330004;江西中医学院菌物药研究中心,江西,南昌,330004;江西中医学院菌物药研究中心,江西,南昌,330004;江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西,南昌,330004;江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西,南昌,330004;江西中医学院菌物药研究中心,江西,南昌,330004;江西中医学院菌物药研究中心,江西,南昌,330004【正文语种】中文【中图分类】S646.9【相关文献】1.东魁杨梅树皮不同提取物体内外抗肿瘤作用的实验研究 [J], 刘霞;戴关海;童晔玲;任泽明;陈璇;杨锋2.毛脉酸模提取物体内抗肿瘤作用的实验研究 [J], 王振月;唐先明;康毅华;赵海鹏;王宗权3.灵雷菌质的急性毒性实验研究 [J], 王卫倩;戴丹丹;罗闳丹;庄毅;谢小梅4.地胆草三萜提取物对S180小鼠体内抗肿瘤作用的实验研究 [J], 廖建华;5.桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究 [J], 于彩云;赵晨;黄芳;宋爱荣;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
马尾松树皮提取物抗肿瘤作用的研究
马尾松树皮提取物抗肿瘤作用的研究郑光耀;李若达;王成章;谢衡;叶建中;高彩霞【期刊名称】《林产化学与工业》【年(卷),期】2007(27)4【摘要】研究马尾松树皮提取物(MPBE)体外和体内的抗肿瘤作用.采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察MPBE对人结肠腺癌细胞株LoVo的体外抑制作用,采用小鼠移植性肿瘤模型考察MPBE对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用和艾氏腹水癌(EAC)小鼠的生命延长作用.结果表明:MPBE对LoVo细胞的生长有较强的抑制作用,在质量浓度为 500 mg/L 时,MPBE对LoVo细胞作用24、48和 72 h 时的抑制率分别为19.83 %、33.06 % 和 58.15 %;MPBE对小鼠S180肉瘤生长表现出明显的抑制作用,MPBE 50、100和 200 mg/kg 3个剂量的抑瘤率分别为30.3 %、37.8 % 和 42.3 %,MPBE达到 200 mg/kg 剂量时,反映免疫功能的胸腺指数和脾指数也明显增加;但MPBE对EAC腹水癌小鼠的生存时间没有明显的延长作用.【总页数】5页(P16-20)【作者】郑光耀;李若达;王成章;谢衡;叶建中;高彩霞【作者单位】中国林业科学研究院,林产化学工业研究所;国家林业局,林产化学工程重点开放性实验室,江苏,南京,210042;广东嵩珍营养源研究所,广东,乐昌,512229;中国林业科学研究院,林产化学工业研究所;国家林业局,林产化学工程重点开放性实验室,江苏,南京,210042;广东嵩珍营养源研究所,广东,乐昌,512229;中国林业科学研究院,林产化学工业研究所;国家林业局,林产化学工程重点开放性实验室,江苏,南京,210042;中国林业科学研究院,林产化学工业研究所;国家林业局,林产化学工程重点开放性实验室,江苏,南京,210042【正文语种】中文【中图分类】TQ424.19;O532.23【相关文献】1.东魁杨梅树皮不同提取物体内外抗肿瘤作用的实验研究 [J], 刘霞;戴关海;童晔玲;任泽明;陈璇;杨锋2.马尾松树皮提取物抗肿瘤作用的实验研究 [J], 张锦宏;冯冬茹;刘兵;戚康标;刘炎明;王宏斌;谢衡;李若达;王金发3.马尾松树皮提取物对牙本质小管的封闭效果及其耐磨损性能的体外研究 [J], 唐成芳;杨黎燕;曾辉;马新扬;王萌;李经纬4.马尾松树皮提取物(MPBE)抗肿瘤作用的研究报告 [J], 崔映宇;王金发5.桦树皮提取物抗肿瘤作用实验研究 [J], 韩淑英;宗瑞义;李岩;王志路因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
水杨梅根提取物的体外抗肿瘤活性
水杨梅根提取物的体外抗肿瘤活性叶勇涂先琴宋兴文施敏荣江虹【摘要】［目的］分离挑选水杨梅根中抗直肠癌细胞活性部位。
［方式］采纳系统溶剂法对水杨梅根水提取物进行分离，应用MTT 比色法对分离取得的部位进行体外抗肿瘤活性的测定。
［结果］乙酸乙酯提取物对直肠癌LS174T细胞表现出较强的抑制作用，在测定浓度范围内呈现出良好剂量依托性抑制作用，而正丁醇和氯仿提取部位的抑制作用较弱。
［结论］乙酸乙酯提取部位是水杨梅抗肿瘤要紧的活性部位。
【关键词】 MTT法水杨梅根直肠癌Abstract：［Objective］ To screen the anticancer fraction from extract of root of Adina rubella Hance.［Methods］To separate the water extract from root of Adina rubella Hance by different solvens，then determine their anticancer activities of the different extracts in vitro with MTT method.［Results］The ethylacetate extract strongly inhibited cell proliferation of LS174T,and showed significant dosage dependent response while the butanol extract and the chloroform extract showed lowanticancer activities in vitro.［Conclusion］The ethylacetate extract is the principal anticancer extract from root of Adina rubella Hance．Key words：MTT；root of Adina rubella Hance；rectal cancer中药水杨梅根为茜草科落叶灌木植物水杨梅Adina rubella Zucc.)Hance的根，散布于我国江南及华南一带。
杨梅叶精油成分分析及其对肺癌A549细胞增殖的抑制作用
杨梅叶精油成分分析及其对肺癌A549细胞增殖的抑制作用朱丽云;张春苗;高永生;宋林珍;陈玮;李素芳【期刊名称】《果树学报》【年(卷),期】2018(35)7【摘要】【目的】比较分析‘丁岙梅’‘东魁’‘晚稻杨梅’和‘荸荠种’4个品种杨梅叶精油的成分与抗癌活性差异。
【方法】以水蒸气蒸馏法提取4种杨梅叶精油,采用GC-MS技术分析其组成成分,并以3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT法)评价了4种杨梅叶精油对肺癌A549细胞增殖的抑制活性。
【结果】经GC-MS分析,‘丁岙梅’‘东魁’‘晚稻杨梅’和‘荸荠种’4种杨梅叶精油分别鉴定出34、33、41和33种成分,包括萜烯、萜醇和萜醚3大类主要成分和脂肪醛、烷酮和酚等微量成分。
‘丁岙梅’‘东魁’‘晚稻杨梅’和‘荸荠种’4种杨梅叶精油中共有的成分为11种,特有成分分别为7、6、9和5种。
β-石竹烯(12.85%~23.87%)、α-葎草烯(19.27%~24.255%)、橙花叔醇(1.15%~23.47%)、氧化香橙烯(3.82%~7.51%)、氧化石竹烯(2.93%~5.26%)和d-杜松烯(0.8%~5.2%)是杨梅叶精油中的主要成分,但含量存在显著差异。
根据MTT结果,‘丁岙梅’‘东魁’‘晚稻杨梅’和‘荸荠种’4种杨梅叶精油对肺癌A549细胞增殖抑制作用均存在时间和剂量依赖性,作用24 h后A549细胞半数致死量IC50分别为127.24、127.14、118.03和123.62μg·m L-1,‘晚稻杨梅’叶精油的抗增殖活性略优于其他3种杨梅叶精油。
【结论】‘丁岙梅’‘东魁’‘晚稻杨梅’和‘荸荠种’4种杨梅叶精油成分差异显著,对肺癌A546细胞增殖抑制活性较强,不同品种间无显著差异(p>0.05)。
【总页数】9页(P836-844)【关键词】杨梅叶精油;成分分析;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐MTT;肺癌细胞;增殖抑制【作者】朱丽云;张春苗;高永生;宋林珍;陈玮;李素芳【作者单位】中国计量大学浙江省海洋食品品质及危害物控制技术重点实验室;安徽汉芳生物科技有限公司;浙江理工大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】S667.6【相关文献】1.榄香烯对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响 [J], 张国民;王静2.丁酸钠联合X射线照射对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及其对细胞周期的影响[J], 李官虎;郎庆旭;刘纯岩;刘沁;耿梦柔;李晓倩;王珍琦3.口虾蛄总生物碱对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用 [J], 齐相薇;蔡康荣;林荣文;王槐高4.口虾蛄总生物碱对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用 [J], 齐相薇;蔡康荣;林荣文;王槐高5.肺癌原代细胞和细胞系A549对肿瘤浸润性淋巴细胞体外增殖的抑制作用 [J], 张国强;蒋耀光;王如文;林一丹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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ｂ ａ ｒ ｋ ｏ ｆ Ｄ ｏ ｎ ｇ ｋ ｕ ｉ Ｍｙ ｉｃ ｆ ａ ｒ ｕ ｂ ｒ ａ ｏ ｎ Ａ５ ４ ９ ｃ ｅ ｌ ｌ ｉ ｎ ｖ ｉ ｒｏ ｔ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｔ ｅ ｓ ｔ ｏ ｆ Ｈ —Ｔ ｄ Ｒ ｉ ｎ ｃ ｏ ｒ ｐ ｏ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ． Ｍｉ ｃ ｅ
・
５ １ ２・
中国中医药科技 ２ ０ １ ５年 ９月第 ２ ２卷第 ５期 Ｓ ｅ ｐ ． ２ ０ １ ５ Ｖ ｏ １ ． ２ ２ Ｎ ｏ ． ５
东 魁 杨 梅 树 皮 不 同提 取 物 体 内外 抗 肿 瘤 作 用 的 实验研 究
刘 霞 ， 戴 关海 ， 童晔玲 ， 任 泽 明 ， 陈 璇 ， 杨 锋
ｋ ｇ ） ， 水、 醇提取物低剂量组 （ ３ ． ３ ｇ生药／ ｋ ｇ ） 及模 型对照组 ， 每天灌 胃给 药 １次， 连续给 药 ｌ ０天。停 药次 日称各组小鼠体质量及瘤 重， 计算各组抑瘤 率。结果 ： 体 外实验结果显 示， 东魁 杨梅树皮 醇提 物（ ６ ． ２ ５— ２ ０ ０ ｍ ｓ ／ Ｌ ） 对Ａ ４ ９ 细胞的抑制率分 剐为 （ ７ ． ５ ％ 一８ ７ ． ０ ％） ， 而东魁杨梅树皮水提 物无明显作 用。体 内实验 结果显示 ， 东魁杨梅树皮醇提物（ １ ３ ． ２ ｇ生药／ ｋ ｇ 、 ６ ． ６ ｇ生 药／ ｋ ｇ 、 ３ ． ３ ｇ生药／ ｋ ｇ ） 能有效抑制小鼠 Ｓ ｔ ８ ０ 肉瘤
ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ｅ ｄ Ｓ １ ８ ０ ｅ ｘ ｐ ｅ ｉｍｅ ｒ ｎ ｔ ｗ ｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ｔ ｉ ｔ ｕ ｍｏ ｒ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｎ ｖ ｉ ｖ ｏ ．Ｔ ｈ ｅ Ｉ Ｃ Ｒ ｍｉ ｃ ｅ ｂ ｅ ａ ｒ ｉ ｎ ｇ Ｓ １ ８ ０ ｓ ａ ｒ ｃ ｏ ｍａ ｗ ｅ ｒ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍｌ ｙ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｓ ｅ ｖ ｅ ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ； ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｃ ｒ ｕ ｄ ｅ ｄ ｕｇ ｒ ｄ ｏ ｓ ａ ｇ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ｏ ｆ ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ｎｄ ａ ｌｃ ａ ｏ ｈ ｏ ｌ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ ｂ ａ ｒ ｋ
的生长（ Ｐ＜ ０ ． ０ ５— ０ ． ０ １ ） ， 抑瘤率在 ３ ５ ． ６ ％ ～ ４ ６ ． ８ ％； 东魁 杨梅树 皮水 煎液低 剂量组 （ ３ ． ３ ｇ生 药／ ｋ ｇ ） 对
ｓ 。 舯肉瘤有显著抑瘤作用 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 抑 瘤率 为 ３ ９ ． ４ ％ 。结 论 ： 东魁杨梅 树皮提 取物有 一定 的抗肿 瘤作
用， 东魁杨梅树皮醇提物（ １ ３ ． ２ ｇ生药／ ｋ ｇ ） 效果最佳 ， 与体外 实验结果相 符。 关键词 人 肺腺 癌 Ａ ； Ｓ 。 蚰肉瘤； 东魁 杨梅 树皮不同提取物 ； 小鼠
Ｃｏ ｍｐａ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｓｔ ｕｄ ｙ ｏ ｎ Ａｎ ｔ ｉ—ｔ ｕ ｍｏ ｒ Ｅｆ ｆｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｄｉ ｒ ｅ ｎｔ Ｅｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｓ ｔ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｂａ ｒ ｋ
ｏ ｆ Ｄ ｏ ｎ ｇ ｋ ｕ ｉ Ｙ ａ ｎ ｇ ｍｅ ｉ（ Ｄ ｏ ｎ ｇ ｋ ｕ ｉ Ｉ ｎ ｄ ｉ ｇ ｅ ｎ ｉ ｏ ｕ ｓ Ｍｙ ｒ ｉ ｃ ａ Ｒ ｕ ｂ ｒ ａ ）
Ｌ Ｉ Ｕ Ｘ ｉ ａ ， ＤＡＩ Ｇ ｕ ａ ｎ ｈ ｍ ，Ｔ ＯＮＧ Ｙｅ ｌ ｉ ｎ ｇ ，Ｒ ＥＮ Ｚ ｅ ｍｉ ｎ ｇ ，ＣＨＥ Ｎ Ｘｕ ａ ｎ ，Ｙ ＡＮＧ Ｆ ｅ ｎ ｇ
（ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆＢ ａ ｓ ｉ ｃ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ， Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ａ ｃ ａ ｄ ｅ ｍ ｙ ｆＣ ｏ ｈ ｉ ｅｓ ｎ ｅ Ｍｅ ｄ ｃ ｉ ｉ ｅ ， ｎ Ｈ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ３ １ ０ ０ ０ ７ ）
（ 浙江省 中
摘
要
目的 ： 探讨 东魁杨梅树皮水提 取物及 醇提 取物体 内外抗肿 瘤药效 。方法 ：。 Ｈ— Ｔ ｄ Ｒ掺入 法分
别观察 东魁 杨梅树 皮水提取物及其 醇提取物体外对 Ａ 细胞 的抑制率。采用 小鼠移植瘤模 型， 将Ｓ 荷 瘤 小鼠随机分成 东魁 杨梅树皮 水、 醇提 物 高剂 量组 （ １ ３ ． ２ ｇ生药／ ｋ ｇ ） ， 水、 醇提物 中剂量 组（ ６ ． ６ ｇ生药／
Ｄ ｏ ｎ ｇ ｋ ｕ ｉ Ｍｙ ｒ ｉ ｃ ａ ｒ ｕ ｂ ｒ ａ ｉ ｎ ｖ ｉ ｖ ｏ ａ ｎ ｄ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ．Ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ：Ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｔ ｗ ｏ ｋ ｉ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｆ ｒ ｏ ｍ