第三章药物的杂质检查医学

（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法 （Ag（DDC）法）
• 1.原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢， 与微量砷反应，生成具有挥发性的砷化氢； 砷化氢遇二乙基二硫代氨基甲酸银，使其 还原产生红色的胶态银，用目视比色法或 在510nm处测定吸收度，在与一定量标准 液用同法处理后得到的有色溶液进行比较。
铁盐可能会加速药物的氧化和降解，因此要控制其含量 硫氰酸盐法（Ch.P及USP采用，BP采用巯基醋酸法，这
里只讲硫氰酸盐法）
• 1.原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色 可溶性硫氰酸铁配位离子，再与一定标准铁溶液用同 法处理后所呈的颜色进行比较，颜色不得更深。
Fe3+ + 6SCN- H+ [Fe(SCN)6] 3-
4.供试品处理：
• (1). 供试液如不澄清：需过滤。滤纸先 用含稀硝酸的水洗涤出去氯化物。
• (2). 供试液如带颜色：按药典规定的方 法处理（常用内消色法）。
• (3). 不溶于水的药物：加水振摇使氯化 物溶解滤去不溶物、或加热溶解供试 品、也可加稀乙醇、丙酮溶解
二、硫酸盐检查法
• 1.原理：药物中存在的微量硫酸盐与氯化 钡在盐酸酸性介质中生成硫酸钡白色沉 淀，与一定量的标准硫酸钾溶液在相同 条件下生成的混浊比较，浊度不得更大
3.讨论：
酸度为50ml中含稀盐酸2ml（酸性条件 可防止碳酸钡或磷酸钡沉淀生成，但酸度 不能过大会导致硫酸钡溶解）；
标准硫酸钾溶液相当于100 ugSO4/ml
4.供试品的处理
• (1). 供试品需要过滤：滤纸先用盐酸的稀 溶液洗涤。
• (2). 供试品如有色：可采用内消色法处理
三、铁盐检查法
2.方法：（药典规定）
• 供试 50ml纳氏比色管
供试溶液（规定量供试品依法溶解使成40ml+稀盐酸2ml） +25%氯化钡溶液5ml+水使成50ml
• 标准 50ml纳氏比色管
对照溶液（规定量的标准硫酸钾溶液使成40ml +稀盐酸 2ml）+ 25%氯化钡溶液5ml +水使成50ml
10min后比较两者浊度，供试不得超过标准。
比较两者颜色，供试不得超过标准。
• 3.讨论
• （1）标准铁溶液是硫酸铁铵配制、需加 入硫酸防止铁盐水解。
• （2）铁溶液每1ml相当于10μgFe
• （3）酸性：稀盐酸、50ml溶液中含4ml为 宜(防止铁离子水解)。
• （4）加入过硫酸铵的目的： • 氧化供试品中的二价铁为三价 • 防止硫氰酸铁分解腿色。
S
• 例题
1. 对乙酰氨基酚中氯化物的检查
取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml,加热 溶解后冷却，滤过，取滤液25ml, 检查氯 化物，所发生的混浊与标准氯化纳溶液 5.0ml（每1ml相当于10µg的Cl-）制成的对 照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是 多少。
L=
C•V —————
×
100%
•
供试品量
• 3.杂质限量的控制方法
• 限量检查： 不要求测定杂质的含量，而只 检查其是否超过限量，常采用对照法，此外 还可采用灵敏度法和比较法。
• 定量测定：测出杂质的准确含量
药物杂质限量的计算式
标准溶液浓度×标准溶液体积
杂质限量（%）= —————————— × 100%
供试品量 C•V
L= ————— × 100%
三、杂质的限量
• 1.杂质的限量：药物中的杂质不可能也没必要完全 除去。在不影响药物疗效和不发生毒性的前提下， 允许药物中有一定量的杂质。药物中所含杂质的最 大允许量，叫做杂质限量。其检查多数为限量检查。
• 2 .杂质的限量表示：百分之几（%）、
百万分之几（ppm）
•
杂质的最大允许量
• 杂质限量（%）= ———————— × 100%
药用规格纯度与化学试剂纯度
• 药用规格：符合纯度要求的药品，考虑的 是对生物体引起的生理和毒副作用的杂质
• 化学试剂：对化学使用的目的考虑，对生 物体引起的生理和毒副作用不考虑。
二、杂质的来源与种类
• （一）来源： • 1.生产过程引入的杂质：
合成药生产过程中：原料不纯、未反应的原料药、 反应中间体和副产物在精制时未完全除去；所用试 剂、溶剂、还原剂等的残留。
药物制成制剂过程中：可能产生新的杂质（盐酸 普鲁卡因注射剂在灭菌过程中，可能水解为对氨基 苯甲酸）
2.储藏过程引入的杂质：外界条件（温度、湿度、 日光、空气、微生物等）可导致药品水解、氧化、 分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉产生 杂质
（二）杂质的种类
按来源可分为
• 1.一般杂质：自然界分布广泛、在多种药物 的生产和储藏过程中容易引入的杂质。（如 酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重 金属等）
一、药物的纯度及要求： • 即药物的纯净程度及要求 • 杂质是影响药物纯度的主要因素，如超过质量标
准规定的纯度要求，就可能使药物活性降低，毒 副作用增加。
• 对杂质的认识：是在防治疾病的实践中逐渐积累 起来的,并随分离检测技术的提高进一步发现药物 中新的杂质。
• 药物的纯度是质量标准中“检查”项下杂质检查 来控制，内容：杂质名称、检查项目、 检查方法、 允许的限量.
• 2.方法：
• 供试 50ml纳氏比色管 （规定量供试品依法溶解+10ml稀硝
酸+水使成40ml）+硝酸银试液1ml+水使成50ml
• 标准 50ml纳氏比色管
（规定量的标准氯化钠溶液+ 10ml稀硝 酸+使成40ml）+硝酸银试液1ml+水使成50ml
5min后比较两者浊度，供试不得超过标准。
• 适用于重金属含量低的药物 • 1. 原理：使重金属生成的硫化物富
集于微孔滤膜上，与标准铅溶液同 法处理产生的色斑比较，确定重
• 4. 注意事项：
• 供试品如有颜色或浑浊，应进行 预滤，更换滤膜，直至滤膜无污 染。再制备铅斑，检查。
五.砷盐检查法
• （一）古蔡(Gutzeit)氏法
• 2.方法：
• 除另有规定外，取25ml纳氏比色管两只，甲 管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液 （pH3.5）2ml后，加水或各药品项下规定 的溶剂稀释使成25ml，乙管加入按各药品项 下按规定方法制成的供试液25ml；再在甲乙 两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀， 放置2min，同置白纸上，自上向下透视，乙 管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。
3.讨论
• (1). 适宜目视比色浓度：25ml溶液相当加入标 准铅溶液1---2ml（ 每1ml相当 于10 μgPb2+ ）。
• (2). 弱酸性：PH 3.0-3.5醋酸盐缓冲液（硫化铅 沉淀较完全）。
• (3).供试品如是强酸溶解、或用过强酸处理过： 在加硫代乙酰胺试液前,应先加氨水成呈中性再 加PH 3.5醋酸盐缓冲液调节溶液酸度。
• 含钠盐或氟的有机物在炽灼时能腐蚀瓷 坩埚而引入重金属，改用铂坩埚或硬质玻 璃蒸发皿。
第三法 硫化钠
• 适用于难溶于稀酸而溶于碱性水溶液的药物。 • 1. 原理：碱性介质中，硫化钠为显色剂，使
Pb2+生成PbS微粒的混悬液，与一定量标准铅溶 液同法处理后所呈颜色比较，不得更深。
2. 方法：
第四法、微孔滤膜法
V = ————— = ——————
C
10 ×10-6
= 2.0(ml)
第二节 一般杂质的检查方法
• 一、氯化物检查法 (作为信号杂质，反映 纯净程度和生产过程是否正常)
• 1.原理：利用氯化物在硝酸酸性溶液中 与硝酸银试液作用，生成氯化银浑浊液， 与一定量标准氯化钠在相同条件下生成 的浑浊比较，不得更大。
4.供试品处理
• (1). 两管色调不一致：移至分液漏斗， 加正丁醇或异戊醇提取，分取醇层比色 （硫氰酸铁配位离子在醇中溶解度大， 可增加颜色深度；同时可排除某些干扰 物质的影响）
• (2). 具环状结构的有机药物：需炽灼破 坏，使铁盐转变为三氧化二铁留于残渣 再依法检查。
四、重金属检查法
• 重金属：实验条件下能与硫离子作用显色的金属离 子。如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等。 （影 响药物的稳定性与安全性） 中国药典对重金属的检查共收载四种方法。
3.讨论：
• (1). 酸性：（硝酸酸性可以避免弱酸银盐 如碳酸盐、磷酸盐沉淀而干扰检查）硝酸、 酸度：加稀硝酸10ml
• (2). 标准氯化钠：每ml相当10ug的CL-、 浓度以50ml中含50ug---80ug的CL-（所显 示梯度明显，便于比较）.
• (3). 观察前在暗处放置5min（避免单质银 析出），黑色背景从上向下观察、比较。
S
0.01×5
= ——————— = 0.01% 2 ×103 ×25/100
2. 葡萄糖中重金属检查 取葡萄糖4.0g,加水23ml溶解后，加醋酸盐
缓冲液(pH3.5)2ml,检查重金属含量，含重金属 不得过百万分之五。问应取标准铅溶液多少 毫升（每1ml相当于 10µg的Pb）?
L•S
5 ×10-6 ×4.0
• 标准砷斑的制备： 在A瓶中 加规定量供试品溶液 5ml盐酸，21ml水 （照标准的步骤）
• 注意事项：
• 1.标准液 三氧化二砷配制储备液，临用前取储 备液新鲜制备标准砷溶液，每1ml标液相当于 1μg的As
• 2.加入试剂的作用：
• 氯化亚锡与碘化钾还原五价砷为三价，提高生成 砷化氢速度；
• 氯化亚锡与碘化钾抑制锑化氢生成，排除干扰；
• 原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢， 与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性 的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至 棕色砷斑，与标准砷溶液比较，不得更 深。