柠檬酸摇瓶发酵实验

实验9-3 柠檬酸摇瓶发酵实验

1目的要求

掌握柠檬酸摇瓶发酵的方法。

2实验原理

目前，柠檬酸的生产都是采用微生物发酵法。由于所用的菌种、原料和其他生产条件的不同，生产方法也不一样。工业生产方法主要有深层液体发酵法、浅盘液体法以及固体原料的浅层制曲或厚层通风制曲法。

3实验器材

3.1 材料

黑曲霉CICC 2206。

3.2 试剂

3.2.1 试管斜面培养基

4 Be°麦芽汁，1.2 %的营养琼脂，pH自然。

2.2 平皿培养基

20 %玉米粉糖化液，0.05 % K2HPO4，0.3 % NH4NO3，0.05 % MgSO4•7H2O，0.0015 % FeSO4•7H2O，0.05 % KCl，1 %～2 %的营养琼脂，pH自然。

3.2.3 摇瓶培养基

玉米粉发酵液20 %，K2HPO4 0.05 %，NH4NO3 0.3 %，MgSO4·7H2O 0.05 %，FeSO4•7H2O 0.0015 %，KCl 0.05 %，1 %～2 %营养琼脂。

以上培养基在接种前均经过121 ℃，20 min灭菌。

3.3 仪器

摇床，培养箱，三角瓶等。

4实验步骤

（1）斜面试管菌种

将单菌落接种在麦芽汁培养基斜面上，35 ℃培养4～5 d。

（2）三角瓶液体摇床培养

500 mL三角瓶装50 mL发酵液，接种新鲜斜面两环孢子，351 ℃，235 r/min，摇床培养96 h，并称量上摇床质量M1，下床质量M2。

5实验结果

（1）详细记录各个指标的数据。

（2）根据测定的实验数据对整个发酵过程进行分析。6思考题

比较柠檬酸发酵与乳酸发酵的异同。