人凝血因子Ⅷ效价检验标准操作规程
凝血因子Ⅷ抑制物实验室检测
Southern Medical University
立即封板，37 ℃ 2h
Southern Medical University
Southern Medical University
ID
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1A
106
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
100
2B
80.6
−
Southern Medical University
定量检测性能评价
阳性率：61.19%，Bethesda方法为64.31% 经配对卡方检验：P＝0.144 一致性检验：Kappa=0.715， P＝0.000 灵敏度：87.22% 特异度：85.71% 阴性预测值：78.83% 阳性预测值：91.67% 诊断符合率：86.69%
160.0BU/mL
Southern Medical University
指标性能评价(n=261)：
定性检测性能评价
经ROC曲线分析(0.939)，APTTD（APTT2-APTT1）CUT-OFF值为1.6sec
APTTCI纠正指数CUT-OFF值为0.55(APTTCI=APTT*APTT1*APTT2* APTTD3/106)
rn Medical University
FⅧ抑制物自动化筛查的方法学研究
1. 以SYSMEX CA1500为检测平台 2. 以凝固法为检测原理 3. 分别设定即刻纠正试验（APTT1）及孵育后纠正
试验（APTT2）程序 4. 所有试剂均为商品化试剂 5. FⅧ抑制物筛查所需时间小于20min
Southern Medical University
人凝血因子检验方法
人凝血因子检验方法引言人凝血因子是一组在血液凝固过程中起关键作用的蛋白质。
凝血因子检验是评估一个人的凝血功能是否正常的重要方法。
本文将介绍人凝血因子检验的方法，包括常用的实验室检测方法和新兴的分子诊断技术。
1. 凝血因子简介人体内共有13种已知的凝血因子，它们按照其参与凝血反应的顺序被编号为Ⅰ至ⅩⅢ。
这些凝血因子在正常情况下相互协作，形成一个复杂而精确的平衡系统，以维持正常的止血和溶栓过程。
2. 常用实验室检测方法2.1 凝血酶原时间（PT）PT是评估外源性凝血通路功能的指标。
该测试使用钠柠檬酸抗凝剂处理患者的血液样本，然后添加磷酸钙和组织因子来启动凝血反应。
通过计算患者样本中形成凝块所需时间来确定PT值。
2.2 部分凝血活酶时间（APTT）APTT是评估内源性凝血通路功能的指标。
该测试使用钠柠檬酸抗凝剂处理患者的血液样本，然后添加磷酸钙和活化的部分凝血活酶来启动凝血反应。
通过计算患者样本中形成凝块所需时间来确定APTT值。
2.3 血小板计数和出血时间除了凝血因子本身，血小板也是维持正常止血过程中不可或缺的组成部分。
进行完整的凝血功能检查时，还需要评估患者的血小板计数和出血时间。
3. 分子诊断技术近年来，随着分子生物学技术的不断发展，越来越多的新兴检测方法被应用于人凝血因子检验中。
3.1 多重PCR多重PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种高效且灵敏的分子生物学技术，可以同时检测多个基因突变。
在人凝血因子检验中，多重PCR可以用于快速筛查常见突变引起的凝血因子缺陷。
3.2 基因测序基因测序是一种直接测定DNA序列的方法。
通过对凝血因子相关基因进行全序列测定，可以发现罕见突变或新的基因变异，为凝血功能异常的诊断提供更准确的依据。
3.3 基因芯片技术基因芯片技术是一种高通量的基因分析方法，可以同时检测上千个基因。
在人凝血因子检验中，基因芯片技术可以用于快速筛查多个凝血相关基因的变异。
人凝血因子Ⅷ效价测定一步法
人凝血因子Ⅷ效价测定一步法1 试剂1.1样品稀释液：取1容积的3.8%枸橼酸钠液加入5容积咪唑缓冲液。
1.1.1 咪唑缓冲液称0.68g咪唑和1.17g氯化钠溶于100ml蒸馏水中，加入42.2ml 0.1mol/L盐酸，然后被加入蒸馏水至200ml,pH为7.3。
1.1.23.8%枸橼酸钠溶液称9.5g枸橼酸钠溶解于250ml蒸馏水中。
1.2 血小板代用品“兔（人）脑组织的氯仿抽提液”。
用前用生理盐水稀释至适当倍数。
1.3白陶土生理盐水混悬液称0.5g白陶土加生理盐水至100ml即可使用。
1.4 基质血浆取人凝血因子Ⅷ含量低于2%的血友病病人血浆或人工基质血浆，然后分装于5ml安瓿，冻干或-30℃保存。
1.50.05mol/L氯化钙溶液称111g氯化钙溶于1000ml蒸馏水中，配制成1mol/L氯化钙贮存液，用前进行20倍稀释，配成0.05mol/L氯化钙溶液。
1.6 人凝血因子Ⅷ标准品及标准血浆人凝血因子Ⅷ国家标准品或经国家标准品标化的工作标准（定量分装冻干，置-30℃保存，一般2IU/ml左右），用前取样品稀释液溶解成1IU/ml。
标准血浆系取30份新鲜正常人血浆等量混合后，分装于小瓶内，置-30℃保存。
自采血后至分浆冻结整个过程不得超过4小时。
1.7待测样品按标示量加入注射用水溶解，测定时稀释成1IU/ml。
2 测定2.1取2支试管，每管加入0.1ml基质血浆和0.1ml样品稀释液，混匀，再加0.1ml血小板代用品和0.1ml白陶土悬液，混匀，将试管置37℃水浴保温一定时间（一般2～6分钟），然后加入0.1ml0.05mol/L氯化钙溶液，记录凝固时间，2管平均值为基质血浆的“空白”值（一般应大于3分钟）。
2.2 标准品或标准血浆用样品稀释液分别进行10倍、20倍、40倍、100倍和200倍稀释，用不同稀释浓度标准品代替2.1项试验中样品稀释液，按上述方法分别测定凝固时间。
2.3 待测样品稀释成约0.02～0.04IU/ml，代替2.1项试验中样品稀释液，同时分别测定凝固时间。
凝血因子Ⅷ定性检测试剂盒(凝血块溶解法)
凝血因子Ⅷ定性检测试剂盒(凝血块溶解法)简介：凝血因子Ⅷ在Ca 2+的参与下，能使可溶于尿素或单氯乙酸溶液的可溶性纤维蛋白单体聚合物变为纤维蛋白，因此含因子Ⅷ的血浆凝固后不再溶解于上述溶液。
如果待检血浆中缺乏因子Ⅷ，则聚合物可溶解于上述溶液。
Leagene 因子Ⅷ用于定性检测人、动物血浆中凝血因子Ⅷ。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 离心机2、 计时器3、 水浴锅操作步骤(仅供参考)：1、 制备待测血浆：取新鲜待测静脉血，与柠檬酸钠抗凝剂混合，轻轻混匀。
离心，收集上层液(缺乏血小板的血浆)，转移至塑料试管或离心管，以防止血小板被激活。
同时应设正常对照血浆。
2、 取待测血浆(包括正常对照血浆)、CaCl 2(25mM) l ，混匀。
3、 置于水浴，期间轻轻混匀数次，直至凝块形成。
4、 将凝块转移至F Ⅷ溶液，每5min 观察1次，共计2h ；2h 后每2～4h 观察1次，共计24h 。
参考区间： 24h 内纤维蛋白凝块不溶解则为阳性注意事项： 编号 名称 TC0321 100T Storage 试剂(A): 柠檬酸钠抗凝剂 30ml RT 试剂(B): CaCl 2(25mM) 10ml 4℃ 试剂(C): F Ⅷ溶液 10ml 4℃ 使用说明书 1份1、以上操作，应同时测定正常对照。
2、获得样本后，应及时检测，一般不应超过1h，4℃不应超过4h。
3、应精确控制孵育温度在37±1℃，过高或过低均会影响结果。
4、抽血要顺利，抗凝要充分。
5、分离血浆应在3000g离心10min，务必去除血小板。
6、本检测试剂盒敏感性低，特异性高。
有效期：6个月有效。
相关：编号名称CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)CS0201 细胞线粒体分离试剂盒DC0032 Masson三色染色液DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)DM0002 姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9)PW0040 Western blot一抗稀释液TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。
医疗机构医院医学实验室凝血因子活性测定技术要求
医疗机构医院医学实验室凝血因子活性测定技术要求1 范围本标准规定了凝血因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ）活性测定的技术要求，包括了一期法、二期法和发色底物法。
由于方法学不一致，本标准不涉及纤维蛋白原检测和凝血因子XIII的检测。
本标准适用于开展凝血因子活性检测的医学实验室，用于规范相应的检测过程和质量控制。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
WS/T 359-2011 血浆凝固实验血液标本的采集及处理指南WS/T 406-2012 临床血液学检验常规项目分析质量要求WS/T 407-2012 医疗机构内定量检验结果可比性验证指南3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件3.1凝血酶原时间prothrombin time, PT血浆与凝血活酶试剂（例如，组织因子）和氯化钙反应后发生凝固所需要的时间。
[WS/T 359-2011，定义2.1]3.2活化部分凝血活酶时间activated partial thromboplastin time, APTT血浆与适量的氯化钙（CaCl2）、部分凝血活酶试剂盒接触因子激活剂（如白陶土）反应后发生凝固所需要的时间。
[WS/T 359-2011，定义2.2]3.3定标曲线calibration curve校准曲线参考曲线定量反映凝血因子活性与纤维蛋白形成所需时间之间的相互关系的曲线。
3.4参考血浆reference plasma校准血浆定标血浆已知凝血因子活性的枸橼酸钠抗凝的正常混合血浆。
该血浆可以自备，亦可从制造商处购买，用于制备参考曲线。
3.5乏因子血浆factor-deficient plasma缺乏待测凝血因子的血浆。
3.6质控血浆control plasma源于人或动物血，或者人工制成的新鲜、冰冻或冻干的血浆，用于质量控制。
血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定
血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定摘要】目的讨论血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定。
方法对样本进行临床检验。
结论参考范围(一期法)FⅧ：C 54.29%～168.51%，FⅨ：C 50.09%～222.05%，FⅪ：C 81%～118%， FⅫ：C 61 %～148%。
因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性检测与Ⅱ：C、V：C、Ⅶ：C、X： C等一样，都是以相当正常人的百分活性来表示的，故工作参考值很重要，志愿者以100例为好，且年龄段分布要有代表性，制成的混合血浆在一30℃下也只能保持3个月。
每次检测都必须制作标准曲线。
【关键词】血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定参考范围(一期法)FⅧ：C54.29%～168.51%，FⅨ：C50.09%～222.05%，FⅪ：C81%～118%，FⅫ：C61 %～148%。
结果评价1.生理情况血浆凝血因子Ⅷ曾称为抗血友病因子(antihemophilic factor，AHF)或抗血友病球蛋白(antihemophilic globulin，AHG)，正常人血浆浓度很不稳定，一般为0.1mg/L，分子质量为3330000，肝脏可能是主要的合成场所，其基因定位于X性染色体(Xq28)，长度为186kb。
凝血因子Ⅸ也称为凝血活酶成分(plasma thromboplastin com-ponent，或叫christmas因子，分子质量为56000，正常血浆浓度为3～4mg/L，为肝脏合成的维生素K依赖性凝血因子，其基因定位于X染色体(Xq27.1)，长度为34kb。
凝血因子Ⅺ，又称血浆凝血活酶前质(plasma thromboplastin antecedent，PTA)，是一种较为稳定的凝血蛋白，血浆正常浓度为4～6mg/L，分子质量为160 000，由肝脏合成，基因定位于4号染色体(4q35)，长度为23kb。
因子Ⅻ，也称Hageman因子，正常血浆浓度为29mg/L，分子质量为80 000，主要由肝脏合成，基因定位于第5号染色体(5q33-ter)，长度为11.9kb。
冻干人凝血因子Ⅷ浓制剂制造及检定规程
冻干人凝血因子Ⅷ浓制剂制造及检定规程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的新鲜血浆分离、提纯、冻干并经病毒灭活制成。
主要成份为人凝血因子Ⅷ及少量纤维蛋白原，含适量枸橼酸钠，不含防腐剂。
本品对缺秒人凝血因子Ⅷ所致的凝血机能缺陷具有纠正作用，专供防治甲型血友病患者的出血症状。
1 制造1.1制造要求1.1.1 对血浆的要求1.1.1.1所用之血浆来源应符合《原料血浆采集（单采血浆术）规程》要求，血浆应无凝块、无纤维蛋白析出，非脂血，无溶血。
在采集时应减少皮肤损伤，保持血流通畅，并与抗凝剂充分混合，用塑料袋采集。
新鲜分离液体血浆或新鲜冰冻血浆及冻结冷沉淀，均可用于生产。
1.1.1.2分离后的血浆应保持无菌，并应及时冰冻保存。
自采血到冻结一般在8小时内完成。
液体血浆应在4±2℃贮放，贮放时间应不超过小时，最长不得超过12小时。
冰冻血浆（-30℃以下）保存期不超过6个月。
1.1.2 对制造工作室、设备及原材料的要求，与《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.1.3～1.1.4项要求相同。
1.2 制造工艺1.2.1 采用低温乙醇法或冻融法制得冷沉淀，经抽提、吸附、精制，亦可采用经卫生部批准的其他工艺制备，并经卫生部批准的适宜方法进行病毒灭活处理。
1.2.2 分批同一制造工艺、同一容器混合的制品作为一批，不同滤器和不同机柜冻干的制品分为亚批。
1.2.3 稳定剂及防腐剂制品内允许加稳定剂，制品应不含防腐剂。
1.2.4除菌过滤及分装本品应用微孔薄膜过滤，可直接分装无菌的成品瓶内，每瓶装量根据效价及规格确定。
1.2.5 半成品检定每批半成品应进行效价测定及热原质试验，并按亚批做无菌试验。
1.2.6 冻干除菌过滤分装的制品经外观检查后立即冻结，并按《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》1。
2。
5项规定进行冻干，但制品温度不得超过35℃。
1.3 规格每瓶含人凝血因子Ⅷ的效价可有50、100、200、300、400IU五种，制品的效价应标示在瓶签及包装上。
人凝血因子Ⅷ效价检验标准操作规程
人凝血因子Ⅷ效价检验标准操作规程1目的严格规范操作者的检测方法，使操作者能够快速有效和安全准确地完成检验操作，特制定本操作规程。
2适用范围本操作规程适用于冷沉淀、人凝血因子Ⅷ洗脱原液、原液、半成品、冻干及成品等含有人凝血因子Ⅷ的供试品效价检测。
3制定依据《中华人民共和国药典》（2015年版）三部，附录3521人凝血因子Ⅷ效价测定法（一期法）。
4职责4.1检验人员按本SOP对供试品进行检验和计算。
4.2复核人对检验中的计算进行复核。
4.3确认人按本SOP对检验过程及结果进行相应确认和判定。
5仪器及器具5.1仪器5.1.1凝血仪5.1.2电子天平5.1.3电子分析天平5.1.4漩涡混匀器5.2器具5.2.1微量移液器5.2.2吸头5.2.3移液管5.2.4洗耳球5.2.5试管5.2.6试管架5.2.7砂轮5.2.8凝血仪耗材（比色盘、供试品杯等）6试剂及试液6.1试剂6.1.1人凝血因子VIII国家标准品6.1.2人凝血因子VIII比较品6.2试液6.2.1人凝血因子Ⅷ缺乏血浆6.2.2稀释液（咪唑稀释液/因子稀释液/样本稀释液）6.2.3激活的部分促凝血酶原激酶时间试剂6.2.4氯化钙溶液7操作步骤7.1供试品溶液、比较品溶液及标准品溶液的制备7.1.1供试品及比较品溶液的制备7.1.1.1供试品及比较品的预稀释用人凝血因子Ⅷ缺乏血浆将供试品预稀释成约1IU/ml（冻干制品先按标示量加入水溶解；冷沉淀先取1~2g，加水溶解约为20倍。
具体稀释过程如下：7.1.1.2供试品预稀释液的工作稀释（供试品溶液）将上述含人凝血因子Ⅷ约1IU/ml的供试品预稀释液用稀释液稀释6倍、8倍、10倍。
具体稀释过程如下：先取500μl已预稀释成含人凝血因子Ⅷ约1IU/ml的供试品预稀释液，加500μl稀释液，稀释成含人凝血因子Ⅷ约0.5IU/ml，混匀，再分别从中取200μl移到3支试管中，分别加400μl，600μl和800μl稀释液。
人凝血因子Ⅷ效价凝固检测法的验证及应用
２ ４・
微生物学免疫学进展
２ ０ １ ３年第 ４ １卷第 ３期
Ｐ ｒ ｏ ｇ ｉ ｎ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ Ｉ ｍ ｍｕ ｎ ｏ ｌ Ｊ ｕ ｎ ．２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ４ １ ， Ｎ ｏ ． ３
பைடு நூலகம்．
， Ｕ 菩 ｝ ｊ ．
人 凝 血 因子 Ⅷ效 价凝 固检 测 法 的 验 证 及 应 用
Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｓ ｔ ｒ ｕ ｍｅ ｎ ｔ ＡＣ Ｌ ７ ０ ０ ０ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｍａ ｔ ｃ ｈ ｅ ｄ ｒ ｅ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ Ｆ Ⅷ ｐ ｏ ｔ ｅ ｎ ｃ ｖ ．Ｔ ｈ ｅ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｃ ｙ。ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ
ｐ ｏ ｔ ｅ ｎ ｃ ｙ ｏ ｆ ｈ ｕ ｍａ ｎ ｃ ｏ ａ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｖ ｍ
Ｌ Ｉ Ｎ Ｌ ｉ ａ ｎ — ｚ ｈ ｅ ｎ ， Ｐ Ｅ Ｎ Ｇ Ｙ ａ ｎ ， Ｚ Ｈ Ｏ Ｕ Ｚ ｈ ｉ － ｊ ｕ ｎ ， Ｌ Ｉ Ｃ ｅ — ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ
ａ ｎ ｄ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ， ｒ ｅ ｐ ｅ ａ ｔ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ， ｉ ｎ ｔ ｅ ｍｅ ｒ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｐ ｒ ｅ ｃ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｕ ｓ ｔ ｎ ｅ ｓ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｉ ｆ ｅ ｄ ， ａ ｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｛ Ｔ ｈ ｅ Ｖ ｅ ｒ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｇ ｕ ｉ ｄ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｝ （ ｐ ｕ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｉ ｎ ２ ０ ０ ３ ） ．Ｃ Ｐ Ｎ ａ ｎ ｄ Ｃ Ｒ Ｍ ｆ ０ ｒ Ｆ Ⅷｗ ｅ ｒ ｅ ｄ ｉ ｓ ｐ ｅ ｎ ｓ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ｆ ｒ ｏ ｚ ｅ ｎ ａ ｔ 一 ８ ０℃ ａ ｆ ｌ ｅ ｒ
人凝血因子效价检验标准操作规程
人凝血因子效价检验标准操作规程人凝血因子ⅷ效价检验标准操作规程1目的严苛规范操作者的检测方法，并使操作者能快速有效率和安全精确地顺利完成检验操作方式，特制订本操作规程。
2适用范围本操作规程适用于冷沉淀、人凝血因子ⅷ洗脱原液、原液、半成品、冻干及成品等含有人凝血因子ⅷ的供试品效价检测。
3制定依据《中华人民共和国药典》（2021年版）三部，第三章3521人凝血因子ⅷ效价测定法（一期法）。
4职责4.1检验人员按本sop对供试品进行检验和计算。
4.2复核人对检验中的计算进行复核。
4.3证实人按本sop对检验过程及结果展开适当证实和认定。
5仪器及器具5.1仪器5.1.1凝血仪5.1.2电子天平5.1.3电子分析天平5.1.4漩涡混匀器5.2器具5.2.1微量移液器5.2.2吸头5.2.3移液管5.2.4洗耳球5.2.5试管5.2.6试管架5.2.7砂轮5.2.8凝血仪耗材（比色盘、供试品杯等）6试剂及试液6.1试剂6.1.1人凝血因子viii国家标准品6.1.2人凝血因子viii比较品6.2试液6.2.1人凝血因子ⅷ缺乏血浆6.2.2稀释液（咪唑稀释液/因子稀释液/样本稀释液）6.2.3转化成的部分促发展凝血酶原激酶时间试剂6.2.4氯化钙溶液7操作步骤7.1供试品溶液、比较品溶液及标准品溶液的制备7.1.1供试品及比较品溶液的制备7.1.1.1供试品及比较品的预稀释用人凝血因子ⅷ缺少血浆将可供试品进度表吸收成约1iu/ml（冻干制品先按标示量加入水溶解；冷沉淀先取1~2g，加水溶解约为20倍。
具体稀释过程如下：人凝血因子人凝血因子ⅷ供试品区分热结晶ⅷ洗清原半成品、成品、冻干液、原液及比较品供试品1~2g100μl100μl人凝血因子ⅷ缺少血浆19~38g提纯水300μl100μl吸收倍数2042挑莲塘稀释液---50μl50μl人凝血因子ⅷ缺少血浆---450μl450μl总预吸收倍数2040207.1.1.2供试品进度表稀释液的工作吸收（供试品溶液）将上述含人凝血因子ⅷ约1iu/ml的供试品预稀释液用稀释液稀释6倍、8倍、10倍。
冻干人凝血因子Ⅷ使用说明
冻干人凝血因子Ⅷ【用法用量】用法：将装有冻干人凝血因子Ⅷ和灭菌注射用水的制剂瓶加温至25-37℃。
开启铝塑组合盖，露出橡皮塞。
用消毒剂如酒精消毒橡皮塞的暴露部分。
瓶塞上勿残留消毒剂。
取下配制用针一端的塑料套。
将配制用针短的一端插入稀释液瓶的瓶塞中央。
去掉配制用针另一端长针的塑料外套。
倒转稀释液瓶和配制用针并将配制用针的长针一端插入因子Ⅷ制剂瓶的瓶塞中央。
待稀释液完全流入因子Ⅷ制剂瓶内。
取下稀释液瓶，排气后拔去配制用针。
轻轻转动瓶子使产品完全溶解。
不得剧烈摇动以免产生泡沫及引起蛋白变性。
用注射器进行静脉注射用法如下：将过滤针头装在注射器上，通过过滤针将人凝血因子Ⅷ溶液吸入注射器。
偶尔溶液中会有微量细小蛋白颗粒，可被滤去而不影响制剂的效价。
拔去过滤针，代之以输注装置。
配制好的制剂需立即输用，并在一小时内用完。
给药速度宜慢，不要超过10ml/分。
如果病人的用药量超过一瓶，可用同一套输注装置经一次静脉穿刺给药。
配制好的溶液不可再冷藏。
使用完毕后丢弃一切输液用装置。
如静脉滴注，用于输注的输液器必须带有滤网装置以去除溶解液中可能存在的微量细小颗粒。
滴注速度一般以每分钟60滴为宜。
用量：给药剂量必须参照体重、是否存在抑制物，出血的严重程度等因素。
下列公式可用于计算剂量：所需因子Ⅷ单位(IU)/次=0.5×患者体重(kg)×需提升的因子Ⅷ活性水平（正常的%）例：所需因子Ⅷ单位(IU)/次=0.5×50(kg)×30(%)-750IU一般推荐剂量如下：1．轻度至中度出血：单一剂量10-15IU/kg体重，将因子Ⅷ水平提高到正常入水平的20-30%。
2．较严重出血或小手术：需将因子Ⅷ水平提高到正常人水平的30～50%，通常首次剂量15-25IU/kg体重。
如需要，每隔8-12小时给予维持剂量l0-15IU/kg体重。
3．大出血：危急生命的出血如口腔、泌尿系统及中枢神经系统出血或重要器官如颈、喉、腹膜后，骼腰肌附近的出血：首次剂量40IU/kg体重，然后每隔8-12小时给予维持剂量20-25IU/kg体重。
冻干人凝血因子Ⅷ浓制剂制造及检定规程
冻干人凝血因子Ⅷ浓制剂制造及检定规程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的新鲜血浆分离、提纯、冻干并经病毒灭活制成。
主要成份为人凝血因子Ⅷ及少量纤维蛋白原，含适量枸橼酸钠，不含防腐剂。
本品对缺秒人凝血因子Ⅷ所致的凝血机能缺陷具有纠正作用，专供防治甲型血友病患者的出血症状。
1 制造1.1制造要求1.1.1 对血浆的要求1.1.1.1所用之血浆来源应符合《原料血浆采集（单采血浆术）规程》要求，血浆应无凝块、无纤维蛋白析出，非脂血，无溶血。
在采集时应减少皮肤损伤，保持血流通畅，并与抗凝剂充分混合，用塑料袋采集。
新鲜分离液体血浆或新鲜冰冻血浆及冻结冷沉淀，均可用于生产。
1.1.1.2分离后的血浆应保持无菌，并应及时冰冻保存。
自采血到冻结一般在8小时内完成。
液体血浆应在4±2℃贮放，贮放时间应不超过小时，最长不得超过12小时。
冰冻血浆（-30℃以下）保存期不超过6个月。
1.1.2 对制造工作室、设备及原材料的要求，与《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.1.3～1.1.4项要求相同。
1.2 制造工艺1.2.1 采用低温乙醇法或冻融法制得冷沉淀，经抽提、吸附、精制，亦可采用经卫生部批准的其他工艺制备，并经卫生部批准的适宜方法进行病毒灭活处理。
1.2.2 分批同一制造工艺、同一容器混合的制品作为一批，不同滤器和不同机柜冻干的制品分为亚批。
1.2.3 稳定剂及防腐剂制品内允许加稳定剂，制品应不含防腐剂。
1.2.4除菌过滤及分装本品应用微孔薄膜过滤，可直接分装无菌的成品瓶内，每瓶装量根据效价及规格确定。
1.2.5 半成品检定每批半成品应进行效价测定及热原质试验，并按亚批做无菌试验。
1.2.6 冻干除菌过滤分装的制品经外观检查后立即冻结，并按《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》1。
2。
5项规定进行冻干，但制品温度不得超过35℃。
1.3 规格每瓶含人凝血因子Ⅷ的效价可有50、100、200、300、400IU五种，制品的效价应标示在瓶签及包装上。
凝血因子VIII活性（FVIII：C）测定
出凝血10.1 凝血因子V I I I活性（FV I I I：C）测定（第四版）出凝血10.2原理：凝血因子VIII活性是通过其纠正乏VIII因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。
将稀释已知凝血因子VIII活性的血浆与乏VIII 因子血浆的混合物做部分凝血活酶时间（APTT）测定，建立参考曲线，该曲线能将受检者血浆的APTT值转化为VIII因子活性单位。
受检者血浆与乏VIII因子的基质血浆混合，测其APTT值，将受检者血浆的测定结果在标准曲线上计算其凝血因子VIII的活性。
出凝血10.３标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外）。
采血者应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。
最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。
采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。
分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm离心10分钟，室温下可存放4小时。
全部试验不能在4小时内完成，应将乏血小板血浆分装在0.5～1.0ml的小试管中快速冷冻，储存于-20℃冰箱中。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。
冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化。
标本在-20℃可保存2周。
-70℃可保存6个月。
出凝血10.４试剂：试剂购于天津威士达公司1）APTT试剂：德灵Actin试剂（试剂盒代号527165）。
每瓶试剂内含磷脂（从兔脑中提取），1.0×104mol/L糅花酸，稳定剂；共2ml。
2）乏VIII因子血浆（德灵，产品号OTXW）3）0.025 mol/L氯化钙每瓶乏VIII因子血浆用蒸馏水1ml复溶。
室温平衡15min后上机分析。
复溶的乏VIII因子血浆分装为0.1ml/支，-70℃可保存60天。
实验前应37℃快速解冻，轻轻颠倒混匀备用。
人凝血因子Ⅷ效价测定二步法
人凝血因子Ⅷ效价测定二步法1 材料1.1试剂1.1.10.05mol/L CaCl2溶液称7.35gCaCl2·2H2O（分析纯），加蒸馏水溶解，稀释至1000ml。
1.1.20.025mol/L CaCl2溶液称3.675gCaCl2·2H2O（分析纯），加蒸馏水溶解，稀释至1000ml。
1.1.3 咪唑缓冲液称0.68g咪唑和1.17gNaCl，溶于约100ml蒸馏水中，加37.2ml0.1mol/l HCl，加蒸馏水至200ml，pH为7.3～7.4。
1.1.4 枸橼酸盐-氯化钠溶液1份3.8%枸橼酸三钠溶液加5份0.85%NaCl溶液混匀。
1.1.5Al(OH)3胶a称（NH4）2SO45.5g，溶于150ml63℃蒸馏水中。
B称氨明矾19.175g，溶于250ml58℃的蒸馏水中。
C最取12.5ml氨水（比重0.88），加12.5ml蒸馏水。
三种溶液配毕后，立即将c液迅速倒入a液中搅匀，然后在搅拌下将此混合液迅速倒入b液，用力搅拌10分钟（保持温度不低于58℃），离心（2500r/min，15分钟），弃上清，沉淀洗涤5次。
第一次：用75ml蒸馏水加0.055ml氨水（比重0.88）混匀，离心，弃上清。
第二次：用75ml蒸馏水加0.11ml氨水（比重0.88）混匀，离心，弃上清。
第三、四、五次分别用75ml蒸馏水洗。
将沉淀物悬浮于总体积为175ml蒸馏水中，混匀，分装，4℃保存。
1.1.6 正常人血清分别收集20份以上正常人血于干燥灭菌的玻璃瓶中，待血凝固后，放于37℃保温5～6小时，置4℃冰箱过液，分离血清，混匀，定量分装（0.5ml/安瓿），冷冻干燥，-20℃保存。
缓冲液作1∶10稀释，4℃冰箱过夜（使血清活化），试验当日再用咪唑缓冲液作最适浓度稀释（一般为1∶20），置冰浴备用。
1.1.7 牛Ⅴ因子收集公牛血于干燥灭菌的玻璃容器中，室温放置4小时，离心（2500r/min，30分钟），分离血清，取血清加10%（g/ml）BaSO4在室温下搅拌吸附40分钟，离心（2500r/min，40分钟），弃沉淀，定量（1ml/瓶）分装，冷冻干燥，-20℃保存。
百因止说明书
百因止说明书∙通用名称：∙注射用重组人凝血因子Ⅷ∙功能主治：∙本品用于血浆凝血因子Ⅷ（FⅧ）缺乏的甲型血友病治疗。
在纠正或预防出血、急诊或择期手术中，本品起到暂时代替缺失的凝血因子的作用。
∙用法用量：∙在瓶签上本品用国际单位标示rFⅧ（重组人凝血因子Ⅷ）的效价，其效价用一期法测定。
复溶后的药物必须在药物溶解后3小时内注射完毕。
建议使用包装内提供的静脉注射用器具。
一般性治疗方法和疗效评估下述剂量提供了一般性指导原则。
须强调的是不同患者达到止血所需要的本品剂量各不相同，应视患者的需要、FⅧ缺乏的严重程度、出血的严重程度、抗体存在的情况和期望达到的FⅧ水平而定。
治疗时监控患者的FⅧ尤为重要。
FⅧ水平为疗效评估的重要因素。
为达到满意疗效，必要时使用剂量可高于计算值。
如果按公式计算的剂量注射后未达到预期的FⅧ水平，或出血未得到控制，应怀疑患者体内是否存在抗体。
通过实验室检查可检测和定量抗体。
存在抗体时，不同患者所需的FⅧ剂量差异较大，可根据疗效优化治疗方案。
某些低抗体滴度(<10BU)的患者应用FⅧ制剂成功治疗后，并未产生免疫记忆应答抗体滴度升高。
通过评估FⅧ的水平和临床疗效进行适宜治疗。
对FⅧ产生记忆应答或具有高滴度抗体的患者，必要时可选择其他治疗药物，如凝血因子IX复合物制剂、抗血友病因子（猪源性）、重组激活凝血因子Ⅶa或抗抑制剂凝血因子复合物。
剂量计算体内FⅧ水平升高的百分比可用每公斤体重注射本品的剂量（IU/kg）乘以每公斤体重每个单位的2%(2%/IU/kg)计算而得。
计算方法依据血浆FⅧ和重组AHF在临床使用的剂量，下面举例说明：预计的FVIII升高值(%)=#注射单位2%/IU/kg/体重70kg的成年人：1400IU2%、/IU/kg/70kg或者需要的剂量(IU)=体重(kg)预计的FVIII升高值/(2%/IU/kg)15kg的儿童：15kg100%/(2%/IU/kg)=750IU参照下述指导原则，根据出血的类型和严重程度计算到达止血所需要的注射剂量。
人凝血因子检验方法(一)
人凝血因子检验方法(一)人凝血因子检验1. 什么是人凝血因子检验人凝血因子检验是一种通过检测人体凝血因子的活性和浓度水平来评估凝血功能和判断凝血疾病的一种方法。
根据不同的目的和需求，可以选择多种不同的检测方法进行凝血因子的检验。
2. 检测方法以下是几种常见的人体凝血因子检验方法：2.1 凝血酶原时间 (PT)•PT是一种常见的凝血因子检测方法，主要用于评估凝血因子Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ和纤维蛋白原活性。
2.2 部分凝血活酶时间 (APTT)•APTT是用来测量体内凝血因子的固有和共同通路的方法，常用于评估凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅱ。
2.3 国际标准化比值 (INR)•INR是一种标准化的凝血时间结果，用于监测和控制在接受口服抗凝药物治疗的患者的凝血功能。
2.4 凝血酶原活性 (FII)•通过比较未知样品和正常血浆的凝血时间，来测量凝血因子Ⅱ的活性。
2.5 凝血因子浓度检测•通过测量各凝血因子的浓度来判断凝血功能是否正常。
3. 使用注意事项在进行人凝血因子检验时，需要注意以下事项：•由于不同的凝血因子具有不同的正常活性和浓度范围，因此在进行检测时需要将结果与参考范围进行比较来做出评估。
•检测结果可能受到多种因素的影响，如药物使用、疾病状态等，因此需要综合考虑来做出准确的判断。
•在进行凝血因子检验前，需要告知医生关于个人的药物使用和疾病史等信息，以便医生能够更好地解读检测结果。
结论人凝血因子检验是评估凝血功能和判断凝血疾病的重要方法。
通过使用不同的检测方法，可以准确地评估人体内各凝血因子的活性和浓度水平，从而辅助医生做出准确的诊断和治疗方案。
但需要注意，检测结果需要综合考虑其他因素，并与参考范围进行比较，才能得出准确的结论。
4. 其他凝血因子检测方法除了上述提到的常见凝血因子检测方法之外，还有一些其他的方法可以用于评估凝血功能：4.1 纤维蛋白原测定（FIB）•纤维蛋白原测定是一种常用的方法，通过测量纤维蛋白原的浓度来评估凝血功能。
2019-重组人凝血因子Ⅷ临床试验技术指导原则
附件1重组人凝血因子Ⅷ临床试验技术指导原则目录1前言 (2)2适用范围 (3)3概述 (3)3.1 名词解释 (3)3.2研究人群 (4)3.3研究程序 (4)3.4样本量 (5)3.5 效价和抑制物检测 (5)4 rhFⅧ注册/上市前临床试验 (6)4.1 在≥12岁PTPs受试者中的研究 (6)4.1.1 药代动力学研究 (6)4.1.2 确证性临床试验 (7)4.1.2.1 受试者选择 (7)4.1.2.2 疗效评价 (8)4.1.2.3 安全性评价 (10)4.2 在<12岁PTPs受试者中的研究 (12)4.3 在PUPs受试者中的研究 (13)5 rhFⅧ制品的上市后临床试验 (14)6 rhFⅧ制品生产工艺变更时的临床试验 (15)7 风险管理计划 (16)8 参考文献 (17)附录一 (19)附录二 (21)—1 —重组人凝血因子Ⅷ临床试验技术指导原则1前言血友病A是一种由凝血因子Ⅷ（Coagulation Factor Ⅷ，F Ⅷ）缺乏而导致的出血性疾病，是X染色体连锁的隐性遗传性疾病，主要由凝血因子Ⅷ基因突变引起。
血友病A的临床表现主要为关节、肌肉和深部组织出血，也可有胃肠道、泌尿道、中枢神经系统出血以及拔牙后出血不止等。
若反复出血，不及时治疗可导致关节畸形和（或）假肿瘤形成，严重者可危及生命。
根据患者FⅧ活性水平可将血友病分为轻型（FⅧ水平：5—40 %）、中间型（FⅧ水平：1—5 %）和重型（FⅧ水平：<1 %）。
轻型患者一般很少出血，只有在损伤或手术后才发生；重型患者自幼可有自发性出血（可发生于身体的任何部位）；中间型患者出血的严重程度介于轻型和重型之间。
FⅧ替代治疗是目前血友病A的主要治疗手段，一般首选基因重组FⅧ或者病毒灭活的血源性FⅧ，在无法获得上述产品时可选用血浆冷沉淀或新鲜冰冻血浆等。
FⅧ替代治疗可分为按需治疗和预防性治疗。
本指导原则旨在为重组人凝血因子Ⅷ（Recombinant Human Coagulation Factor Ⅷ, rhFⅧ）用于治疗和预防血友病A患者申请上市许可、或已上市产品发生重要生产工艺变更需开展临床试验时提供建议。
凝血因子定标方法
凝血因子定标方法1、复溶试剂（乏因子血浆就是检测因子的试剂）并静置于室温下等待试剂稳定；2、复溶参比血浆（Hemostasis Reference Plasma）；3、复溶相关试剂：内源性因子使用APTT试剂、氯化钙；外源性因子使用PT试剂（注意：保证BUFFER和SOLUTION的量足够）；4、在这种情况下才可以进行定标；5、在试剂盘选项（Regent Block）里选择Reagent Block2；6、在光标停留在Calibration上的时候按回车键，在Test里以上下键选择到需要定标的因子项目，并按回车键确认，选择Fully Aut，其含义就是机器本身全自动定标的意思；这个界面中的各个部分的意义解释如下：Test定标的项目Reag在使用的试剂Date曲线的最后有效时间Lot试剂的批号Chart"Pos."一列代表定标过程中的稀释比率的血浆的位置，%代表相应稀释比率的活动度，s代表其秒值Min. value and max. value最大和最小值，其值在全自动定标的时候是由机器自动选择的，其作用是在限制坐标系中的上下限，当结果超过其时机器报警。
Calibration curves fully auto.机器自动定标Curve定标曲线7、光标停留在V alue的时候按回车键，这时光标停留在稀释比率的的第一格，这时候按方向键的上键，这时候光标停留在Reference，其上方一行是Calibration Dilution X1。
这时候需要做的是查找说明书对应某因子的Activity，把其靶值乘以Calibration Dilution X1后边的数值，并输入Reference=之后，按回车键；8、此时光标停留在第一个稀释比率的位置，可以用空格键进行更改，推荐稀释比率为1：5 1：10 1：20 1：40 1：80 1：100 （6点法）与1：4 1：8 1：16 1：32 1：64 1：128 1：200 1：400 （8点法）；9、每次在更改到相应数值的时候以回车键确认，（注意：Max和Min值不要随意更改），最后光标停留在Value之上；10、这时候按方向键盘的下键，光标停留在Start上，此时屏幕下放提示将参比血浆（Hemostasis Reference Plasma）放置的位置、稀释位的相应位置；11、在确认试剂、参比血浆、X位的杯子都放置无误的时候按回车键开始定标，在定标过程中尽量不要进行其他操作，以免引起不必要的误差；12、在机器全自动定标结束之后，此时光标停留Calibration的位置上，以回车键可以进入，观察曲线，按回车键或者ESC键退出，在曲线为机器认可的情况下机器会问是否接受该曲线，按回车键确认接受。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
人凝血因子Ⅷ效价检验标准操作规程
1目的
严格规范操作者的检测方法，使操作者能够快速有效和安全准确地完成检验操作，特制定本操作规程。
2适用范围
本操作规程适用于冷沉淀、人凝血因子Ⅷ洗脱原液、原液、半成品、冻干及成品等含有人凝血因子Ⅷ的供试品效价检测。
3制定依据
《中华人民共和国药典》（2015年版）三部，附录3521人凝血因子Ⅷ效价测定法（一期法）。
4职责
4.1检验人员按本SOP对供试品进行检验和计算。
4.2复核人对检验中的计算进行复核。
4.3确认人按本SOP对检验过程及结果进行相应确认和判定。
5仪器及器具
5.1仪器
5.1.1凝血仪
5.1.2电子天平
5.1.3电子分析天平
5.1.4漩涡混匀器
5.2器具
5.2.1微量移液器
5.2.2吸头
5.2.3移液管
5.2.4洗耳球
5.2.5试管
5.2.6试管架
5.2.7砂轮
5.2.8凝血仪耗材（比色盘、供试品杯等）
6试剂及试液
6.1试剂
6.1.1人凝血因子VIII国家标准品
6.1.2人凝血因子VIII比较品
6.2试液
6.2.1人凝血因子Ⅷ缺乏血浆
6.2.2稀释液（咪唑稀释液/因子稀释液/样本稀释液）
6.2.3激活的部分促凝血酶原激酶时间试剂
6.2.4氯化钙溶液
7操作步骤
7.1供试品溶液、比较品溶液及标准品溶液的制备
7.1.1供试品及比较品溶液的制备
7.1.1.1供试品及比较品的预稀释
用人凝血因子Ⅷ缺乏血浆将供试品预稀释成约1IU/ml（冻干制品
先按标示量加入水溶解；冷沉淀先取1~2g ，加水溶解约为20倍。
7.1.1.2 供试品预稀释液的工作稀释（供试品溶液）
将上述含人凝血因子Ⅷ约1IU/ml 的供试品预稀释液用稀释液稀释6倍、8倍、10倍。
具体稀释过程如下：
先取500μl 已预稀释成含人凝血因子Ⅷ约1IU/ml 的供试品预稀释液，加500μl 稀释液，稀释成含人凝血因子Ⅷ约0.5IU/ml ，混匀，再分别从中取2
00μl 移到3支试管中，分别加400μl ，600μl 和800μl 稀释液。
供试品稀释可根据本身效价高低及仪器环境等变化作适当适当调整。
7.1.2 标准品溶液的制备
7.1.2.1 预稀释：将标准品按标示量加入水溶解，取100μl 复溶品，加人凝
血因子Ⅷ缺乏血浆适量预稀释成约1IU/ml 。
7.1.2.2 工作稀释：将上述1IU/ml 的标准品用稀释液稀释2倍、4倍、8倍、
16倍、32倍。
7.2检验操作
7.2.1凝血仪准备：
7.2.1.1先打开凝血仪电源，在反应盘上放入比色盘，预热使反应仓温度
达到37℃。
7.2.1.2分别将激活的部分促凝血酶原激酶时间试剂和氯化钙溶液加入
凝血仪的相应区域。
7.2.2上机测试凝固时间
7.2.2.1将供试品杯加到供试品盘上，并按要求在相应的供试品杯中加入
供试液（标准品、比较品和供试品稀释液）和相应试剂。
具体加
入位置如下：
Dil杯加入稀释液；
18号杯加入人凝血因子Ⅷ缺乏血浆；
1~14号杯加入待测液；
7.2.2.2按仪器操作规程启动人凝血因子Ⅷ效价测定程序；
7.2.2.3测定结束后，记录返回的凝固时间
7.2.3测定时要求每个稀释度平行测定2管，两管之差不得超过均值10%，否
则重测。
7.3结果处理
7.3.1标准曲线制作：
将标准品5个不同稀释度所含人凝血因子Ⅷ效价（IU/ml），分别取对
数值；再将其各相应浓度所测得的凝固时间（秒，s），也分别取对数
值。
然后按统计学方法作直线回归方程（用excel计算）：
logy = blogx+a
其中：x为人凝血因子Ⅷ效价，IU/ml；
y为测得相应凝固时间，秒（s）。
7.3.2供试品及比较品效价计算：
将3个不同浓度的供试品所得到凝固时间（秒）分别代入方程式计算
x值；然后将所得x值分别乘以相应的供试品稀释倍数，即得到3个
相应的效价（IU/ml）；计算这3个效价值的平均值作为供试品中人凝
血因子Ⅷ效价。
7.4注意事项
7.4.1标准曲线直线回归相关系数应不低于0.98。
7.4.2每个稀释度的标准品或供试品平行测定2管，2管之差不得超过均值
10%，否则重测。
7.4.3直接接触标准品、供试品和血浆的器皿应为塑料制品或硅化玻璃制品。
7.4.4应急预案
7.4.4.1仪器与电脑无法连接（仪器无法将实验数据传到电脑上不易于对
实验的考察及结果分析，试验过程中数据未能在电脑上读取）。
检
查线接口，重新连接仪器电脑。
7.4.4.2如遇到供试品还未上机检验停电，则待来电后，检验照常进行。
如遇上机过程中断电在不影响检验结果的情况下继续检验直到结
束，否则重新检验。
7.4.4.3电源无法关闭，可能是电路短路，会导致机器死机。
7.4.4.4长期频繁的开关会导致仪器电源的松弛，仪器不容易关闭，应减
少开机次数，按仪器使用说明书定期维护。
7.4.4.5针头堵塞，操作仪器点击清洗，将针头冲干净。
8判定基准
检验结果的判定依据相应品种的质量标准进行
9生效日期
本规定自2015年12月01日起正式生效。