新等位基因人类白细胞抗原B15133的鉴定及其原核表达
人类白细胞抗原E基因全长序列测定及两个新等位基因的鉴定
人类白细胞抗原E基因全长序列测定及两个新等位基因的鉴定何柳媚;王宋兴;徐筠娉【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2017(021)025【摘要】背景：人类白细胞抗原E是非经典的人类白细胞抗原I类分子，目前的多态性分析研究主要针对其第3外显子人类白细胞抗原E*01:01及人类白细胞抗原E*01:03进行区分，然而其全基因序列测定方法及新等位基因报道尚不多见。
目的：利用中国深圳地区无偿献血正常个体建立人类白细胞抗原E基因全长序列测序分型方法，鉴定人类白细胞抗原E基因全长序列新的等位基因。
方法：提取研究对象外周血DNA，根据IMGT/HLA数据库中公布的人类白细胞抗原E基因序列，在保守区设计全基因扩增及测序引物，利用高保真反应体系对人类白细胞抗原E全长序列进行扩增，随后测序、拼接、序列确认及基因定型。
结果与结论：①成功建立了人类白细胞抗原E的全基因扩增及测序分型方法，发现了两个人类白细胞抗原E新等位基因——人类白细胞抗原E*01:01:01:06与人类白细胞抗原E*01:01:01:07，获得了WHO人类白细胞抗原命名因子委员会的命名；②人类白细胞抗原E*01:01:01:06与其最接近的等位基因人类白细胞抗原E*01:01:01:01相比，突变位点在5’-启动子区的NT-26(G->T)，人类白细胞抗原E*01:01:01:07与其最接近的等位基因人类白细胞抗原E*01:01:01:01相比，突变位点在3’-非翻译区的NT3345位(T->C)；③结果提示，中国人群中人类白细胞抗原E全基因序列多态性数据有待填补，试验建立的方法为该项研究提供了关键的技术。
【总页数】7页(P4071-4077)【作者】何柳媚;王宋兴;徐筠娉【作者单位】[1]深圳市血液中心,深圳市组织配型与免疫遗传重点实验室,广东省深圳市518035【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.人类白细胞抗原E基因全长序列测定及两个新等位基因的鉴定 [J], 何柳媚;王宋兴;徐筠娉2.人类白细胞抗原新等位基因B＊07：110的序列分析及确认 [J], 周月;李剑平;;;3.汉族人群中新等位基因人类白细胞抗原-DPA101:11的鉴定 [J], 何柳媚;王大明;徐筠娉;邓志辉4.汉族人群中新等位基因人类白细胞抗原-DPA1~＊01：11的鉴定 [J], 何柳媚;王大明;徐筠娉;邓志辉;5.新等位基因人类白细胞抗原B*15:133的鉴定及其原核表达 [J], 王琳;宋长兴;张志欣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HLA新等位基因的发现、鉴定方法及申报流程
网上复核比对
IMGT数据上传
HLA新等位基因的发现、鉴定方法及申报流程
HLA新等位基因的发现 HLA新等位基因的鉴定方法 NCBI数据上传的应用 IMGT数据上传的应用
HLA新等位基因发现的意义
HLA新等位基因发现的意义
由于每个地区、不同人种均有自己HLA等位基因的特殊性 即优势等位基因，因此发现和鉴定我国各地人群中的HLA 等位基因可以提高HLA 配型的准确性，避免漏检尚未被发 现的HLA等位基因，对提高骨髓及器官移植的存活率有一 定帮助
采用流式反向SSO技术，原理是PCR基因片段扩增后利用 序列特异性寡核苷酸探针，通过杂交的方法进行扩增片段 的分析鉴定。探针与PCR产物在一定条件下杂交具有高度 的特异性，严格遵循碱基互补的原则。探针用生物素非放 射性标记进行相应的标记物检测。流式细胞仪的激光束垂 直照射在样品流上，不同颜色的磁珠在光束的照射下，产 生散射光和激发荧光，根据这两种信号的接受分析判定结 果
SBT检测过程中HLA新基因的识别 Atria试剂测得的序列电泳图
HLA新等位基因的发现、鉴定方法及申报流程
HLA新等位基因的发现 HLA新等位基因的鉴定方法 NCBI数据上传的应用 IMGT数据上传的应用
HLA新等位基因发现的意义
HLA新等位基因的鉴定方法
HLA新等位基因的鉴定 分两步骤进行
重点回顾
• HLA新等位基因检测方法有：SSP检测方法、RSSO
检测方法、SBT检测方法 • 呈递的新基因序列必须是一条独立的基因序列 • HLA新基因申报时，如果新的序列差别只在内含子
或其他非编码的基因上，必须获得该部分的全长序 列；如果样本是杂合子，新等位基因序列的获得必须 完成与第二个等位基因分离
《人类白细胞抗原》课件
人类白细胞抗原（HLA） 在肿瘤免疫中的作用
HLA与肿瘤抗原的相互作 用
HLA与肿瘤免疫逃逸的关 系
HLA与肿瘤免疫治疗的研 究进展
PART SIX
检测方法：流式细胞术、PCR技术、ELISA等 检测意义：了解个体免疫系统状况，评估疾病风险 临床应用：器官移植、疾病诊断、疫苗研发等 检测结果解读：根据检测结果，评估个体免疫系统状况，制定治疗方案
的应用
人工智能与生 物信息学：利 用人工智能和 生物信息学方 法分析人类白 细胞抗原数据
免疫疗法：人 类白细胞抗原 在免疫疗法中
的应用，如 CAR-T细胞疗
法等
疾病诊断和治 疗：人类白细 胞抗原在疾病 诊断和治疗中 的应用，如肿 瘤免疫治疗等
免疫治疗：用于治疗癌症、自 身免疫性疾病等
疫苗研发：用于开发新型疫苗， 提高疫苗效果
检测方法：流式细胞术、PCR技术 等
诊断价值：确定移植供体与受体的 匹配程度，辅助诊断感染性疾病和 自身免疫性疾病
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
临床应用：移植排斥反应、感染性 疾病、自身免疫性疾病等
局限性：检测结果受多种因素影响， 需要结合其他检测方法进行综合判 断
应用领域：器官移植、肿瘤 免疫治疗、传染病防控等
预防疾病：通过检测HLA抗 原，预测器官移植排斥反应
治疗疾病：通过HLA抗原匹 配，提高肿瘤免疫治疗效果
检测方法：流式细胞术、 PCR技术等
传染病防控：通过检测HLA抗 原，预测传染病易感性和疫苗
效果
PART SEVEN
重要性：人类白细胞抗原是免疫系统的重要组成部分，研究其功能有助于理解免疫系统的工 作机制，为疾病治疗提供新的思路和方法。
人类白细胞抗原等位基因
人类白细胞抗原等位基因英文回答：Human leukocyte antigen (HLA) is a group of genes that encode proteins on the surface of cells. These proteins play a crucial role in the immune system by identifying foreign substances and distinguishing them from the body's own cells. HLA genes are highly polymorphic, meaning they have multiple variations or alleles.There are two major classes of HLA genes: class I and class II. Class I HLA genes encode proteins found on the surface of almost all nucleated cells in the body. These proteins help the immune system recognize and destroy infected or abnormal cells. Class II HLA genes encode proteins found primarily on immune cells, such as macrophages, dendritic cells, and B cells. They are responsible for presenting antigens to T cells, which triggers an immune response.Each individual inherits one set of HLA genes from each parent, resulting in a unique combination of alleles. The diversity of HLA alleles is vast, with thousands of known variants. This diversity is important for the immune system to effectively recognize and respond to a wide range of pathogens.HLA typing is a process that determines a person's specific HLA alleles. This information is important in various medical contexts, such as organ transplantation and disease susceptibility. For example, matching the HLA types of a donor and recipient is crucial in organtransplantation to minimize the risk of rejection. Additionally, certain HLA alleles have been associated with an increased risk of developing certain autoimmune diseases, such as type 1 diabetes or rheumatoid arthritis.中文回答：人类白细胞抗原（HLA）是一组编码细胞表面蛋白的基因。
白细胞抗原基因分型试剂
白细胞抗原基因分型试剂
白细胞抗原基因分型试剂是一种用于检测人类白细胞抗原（HLA）基因的试剂。
HLA基因是人类免疫系统中最重要的基因之一，它们编码着人体免疫系统中的主要组织相容性复合物（MHC）分子。
这些分子在识别和消灭外来病原体、癌细胞和自身异常细胞等方面发挥着重要作用。
因此，HLA基因的分型对于移植、免疫疾病、肿瘤等领域的研究和治疗具有重要意义。
白细胞抗原基因分型试剂的原理是利用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增HLA基因的特定区域，并通过序列特异性探针（SSP）或序列特异性引物（SSP）等方法检测HLA基因的多态性。
这些试剂可以分型HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRB1、HLA-DQB1等多个HLA基因，以及它们的亚型和等位基因。
在移植医学中，HLA基因分型可以用于确定供体和受体之间的MHC相容性，从而提高移植成功率和降低移植后的排斥反应。
在免疫疾病和肿瘤领域，HLA基因分型可以用于研究HLA基因与疾病的关联性，以及预测个体对某些药物的反应性和副作用。
白细胞抗原基因分型试剂的优点是快速、准确、可靠、高通量和高度自动化。
它们可以在短时间内同时分型多个HLA基因，且具有高度的特异性和敏感性。
此外，这些试剂还可以通过电子化数据管理系统进行数据分析和报告生成，从而提高实验室的工作效率和质量控制。
白细胞抗原基因分型试剂是一种重要的分子诊断工具，它们在移植、免疫疾病、肿瘤等领域的研究和治疗中发挥着重要作用。
未来，随着技术的不断发展和应用的不断扩展，白细胞抗原基因分型试剂将会更加普及和成熟，为人类健康事业做出更大的贡献。
汉族人群中新等位基因人类白细胞抗原-DPA1~＊01：11的鉴定
汉族人群中新等位基因人类白细胞抗原-DPA1~＊01：11的鉴定何柳媚;王大明;徐筠娉;邓志辉【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2012(016)053【摘要】背景：在群体遗传学研究中,发现一个样本人类白细胞抗原-DPA1位点结果异常,而国际上与人类白细胞抗原-DPA1等位基因相关的报道较少。
目的：鉴定一个人类白细胞抗原-DPA1＊01相关的新变异等位基因。
方法：在群体遗传学研究中,采用PCR产物直接测序分型方法,对人类白细胞抗原-DPA1基因第2外显子进行双向测序。
对出现异常分型结果的样本,进行分子克隆和单倍体测序。
结果与结论：发现一个样本的人类白细胞抗原-DPA1位点结果异常,经分子克隆和单倍体测序,检出了一个正常的人类白细胞抗原-DPA1＊01：03和一个DPA1＊01相关的新变异等位基因,该新等位基因的序列与DPA1＊01：03的序列最接近,其差异是在第二外显子区域的242位碱基发生A〉G的替换,并导致了相应的第50位密码子由CAA〉CGA,编码的氨基酸残基由谷氨酰胺变成精氨酸。
该等位基因为人类白细胞抗原新的等位基因,已被世界卫生组织人类白细胞抗原因子命名委员会正式命名为人类白细胞抗原-DPA1＊01：11（提交序列号HWS10015443）。
【总页数】5页(P9994-9998)【作者】何柳媚;王大明;徐筠娉;邓志辉【作者单位】深圳市血液中心,广东省深圳市518020【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.汉族人群中新等位基因人类白细胞抗原-DPA101:11的鉴定 [J], 何柳媚;王大明;徐筠娉;邓志辉2.人类白细胞抗原-B等位基因多态性与江苏地区汉族人群2型糖尿病的相关性研究 [J], 夏玲芝;曹鹏;李晓娥;许涛;Khawar Ali Shahzad;毛源;张厚智;沈传来3.蒙古族、汉族人群多发性硬化病人人类白细胞抗原DQB1、 DPB1等位基因多态性的对比研究 [J], 甄瑾;马翔凌;王梅玲;赵焱;陈向东;李敏4.济南汉族人群人类白细胞抗原B座位等位基因多态性分析 [J], 刘艳; 周媛; 张毅; 朱传福5.济南汉族人群人类白细胞抗原B座位等位基因多态性分析 [J], 刘艳; 周媛; 张毅; 朱传福因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《人类白细胞抗原》课件
HLA-Ⅲ类抗原
定义
HLA-Ⅲ类抗原主要包括一些血清蛋白和补体成分，如C4、 C2、Bf等。
功能
HLA-Ⅲ类抗原参与补体系统的活化，与免疫应答和炎症反应 等有关。
HLA在人体内的分布
HLA分子广泛分布于人体有核细 胞的表面，其中以白细胞表面的
密度最高。
在不同细胞类型中，HLA的表达 水平存在差异，专职抗原提呈细 胞表面的HLA分子表达密度最高
03
HLA与感染性疾病的关联机制涉及免疫应答的调节、抗原提呈等。了解这些机 制有助于为感染性疾病的预防、诊断和治疗提供新的策略和方法。
05
人类白细胞抗原的 检测与诊断
HLA基因检测技术
HLA基因分型技术
通过基因检测确定个体的HLA等位基 因型别，用于器官移植配型、遗传疾 病研究等。
高通量测序技术
01
感染性疾病是由病原体（如细菌、病毒、真菌等）引起的疾病。HLA不仅与自 身免疫性疾病和移植免疫有关，还与感染性疾病的发病和预后有关。
02
HLA通过影响免疫细胞对病原体的识别和反应，参与感染性疾病的发生和发展 。研究发现，某些HLA类型与对特定病原体的易感性或抵抗力存在关联，如 HLA-B57与HIV感染的保护作用等。
与自身免疫性疾病的关系
自身免疫性疾病是指机体对自身 抗原发生免疫反应而导致自身组 织损害所引起的疾病。人类白细 胞抗原（HLA）是影响自身免疫 性疾病发病的重要因素之一。
HLA通过影响免疫细胞的反应和 调节，参与自身免疫性疾病的发 生和发展。研究发现，某些HLA 类型与特定的自身免疫性疾病风 险存在关联，如HLA-DR3与 Graves病、HLA-B27与强直性脊 柱炎等。
特性
HLA基因位于人类的6号染色体上 ，对人类的免疫应答和移植排斥 反应等生理过程发挥重要作用。
人类白细胞抗原名词解释
人类白细胞抗原名词解释人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigen，简称HLA）是一种在人类体内广泛表达的蛋白质，主要存在于白细胞和其他组织细胞的表面。
HLA分子在免疫系统中起着重要的作用，具有抗原呈递、抗原识别和免疫调节等功能，被认为是人类免疫系统中最重要的分子之一。
下面对HLA的几个常用概念进行解释：1. MHC (Major Histocompatibility Complex)：MHC是HLA分子的组成基因。
在人类中，MHC基因位于染色体6上，分为两类：MHC-I和MHC-II。
MHC-I基因编码MHC-I分子，主要表达在几乎所有核细胞的表面，起到向免疫系统展示体内产生的抗原的作用。
MHC-II基因编码MHC-II分子，主要表达在抗原递呈细胞（如巨噬细胞、B细胞和树突状细胞）的表面，起到向免疫系统展示外源性抗原的作用。
2. HLA基因：HLA基因是人类MHC基因家族中与人体免疫相关的基因。
人类HLA基因区分为三个主要类别：HLA-A、HLA-B和HLA-C属于MHC-I基因；HLA-DR、HLA-DP和HLA-DQ属于MHC-II基因。
每个人所拥有的HLA基因是由父母遗传给子女的，因此每个人的HLA基因构成都是独特的。
3. HLA分型：HLA分型是指确定一个人的HLA基因的特定序列。
HLA分型通常通过基因分型、序列特异性引物扩增或测序技术来完成。
充分了解一个人的HLA分型对于移植、免疫治疗以及相关疾病的研究具有重要意义。
4. HLA匹配：HLA匹配是指供体和受体的HLA分型之间的相似度。
在器官移植过程中，HLA匹配是非常重要的，因为较高的HLA匹配度可以减少移植后的免疫排斥反应。
5. 免疫排斥反应：免疫排斥反应是指受体对于外源组织或细胞进行免疫攻击的现象。
当供体和受体之间的HLA差异较大时，免疫系统会将供体组织或细胞视为“外来物质”，从而导致移植排斥反应的发生。
免疫抑制剂可以帮助降低免疫排斥反应。
人类白细胞抗原的遗传结构分析
人类白细胞抗原的遗传结构分析人类白细胞抗原(HLA)是一种重要的免疫遗传学基因，它在机体的免疫应答中扮演着关键的角色。
HLA基因具有极高的多态性，表现为不同个体间存在大量不同的HLA亚型。
每个人在自己的生命历程中，都会产生一系列特定的HLA个体基因型，这其中包括了一些可能对疾病易感性、移植排斥和药物不良反应产生影响的关键因素。
因此，通过对人类白细胞抗原的遗传结构分析，对临床诊疗和疾病预防具有重要意义。
HLA基因属于组织相容性复合体(MHC)家族，位于第6号染色体的短臂上，包含了HLA-A，HLA-B和HLA-DR三大类基因。
在人类基因组中，每一类基因都有一个大约400kb的HLA区段负责其编码。
HLA-A和HLA-B是HLA基因中的I类抗原分子，它们广泛存在于人类各种细胞表面，主要参与细胞介导免疫应答。
与I类抗原分子相对的是II类抗原分子，其代表的是HLA-DR基因。
HLA-DR在激活免疫应答的过程中扮演着重要的角色，它能够与来自外界的特定抗原、细胞膜上的表面分子、再生酶以及其它许多免疫监视分子以亲和力高的方式结合。
由于HLA-A、HLA-B和HLA-DR这三类基因在人类组织同种性基础中都存在广泛的多态性，所以人类个体间存在着极为丰富的HLA变异层级。
在临床应用中，人类白细胞抗原被认为是一种关键的免疫诊断因子。
例如，在关节炎和类风湿性关节炎治疗中，对HLA-B27的检测可以帮助医生检测病人的易感性；而对于组织移植的医学实践和白血病治疗来说，HLA匹配的确立则至关重要。
在近年来的疫情中，HLA分析也被广泛地应用于新冠病毒患者的诊断和病情等级判断。
通过对不同HLA基因亚型与COVID-19影响的关联性研究，人们找到了许多潜在的抗体特异性、适应性免疫等方面的研究依据。
应用基于HLA基因的疫情筛查技术，可帮助筛选出易感者，为实现早期干预提供了帮助。
对HLA结构的分析也有着不同的方法。
一种常用的方法是PCR单碱基多态性分析。
人类白细胞抗原名词解释
人类白细胞抗原名词解释人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigen，简称HLA）是一类存在于人类细胞表面的蛋白质分子，它们的主要功能是识别和区分自身细胞和外来细胞。
HLA分子在免疫系统中起着至关重要的作用，它们能够识别和结合来自外部的抗原，从而激活免疫系统对这些抗原进行攻击和清除。
HLA分子主要存在于人类白细胞表面，包括淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞等。
它们由一组高度多态性的基因编码，这些基因位于人类染色体6号上的主要组织相容性复合体（Major Histocompatibility Complex，简称MHC）中。
MHC分子是HLA 分子的主要载体，它们能够结合和呈递抗原肽，从而激活T细胞和B 细胞的免疫反应。
HLA分子的多态性是指它们在不同个体之间存在着巨大的差异性。
这种多态性是由HLA基因的高度变异性所决定的，每个人的HLA基因组合都是独一无二的。
这种多态性使得HLA分子能够识别和结合多种不同的抗原肽，从而保证了免疫系统对外来抗原的广泛应对能力。
HLA分子在临床医学中具有重要的应用价值。
例如，HLA分子的多态性是造成移植排斥反应的主要原因之一。
在进行器官移植时，移植物的HLA分子与受体的HLA分子不匹配，会引起免疫系统的攻击和排斥反应。
因此，在进行器官移植前需要进行HLA配型，以确保移植物和受体的HLA分子尽可能匹配，从而降低移植排斥反应的风险。
此外，HLA分子还与多种自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。
例如，类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等疾病与HLA分子的特定基因型有关。
因此，HLA分子的检测和分析在自身免疫性疾病的诊断和治疗中也具有重要的意义。
总之，人类白细胞抗原是一类存在于人类细胞表面的蛋白质分子，它们的多态性使得免疫系统能够对多种不同的抗原进行应对。
HLA分子在临床医学中具有重要的应用价值，包括器官移植、自身免疫性疾病的诊断和治疗等方面。
人类白细胞抗原基因研究进展
Ⅲ三类基因（ 图 １ 。Ｈ Ａ— Ｉ 见 ） Ｌ 类基 因区靠 近染色
体顶端 ， 长约 １５０ ｂ 区内基 因被命 名为经典 的 Ｈ Ａ ，０ ｋ ， Ｌ
Ⅱ类基囚区
曩 星 票重§ 量量 藿星 墓 堇Ｏ 童 量重 量墓 量 虽星蚕 量星 蕈 ｋ － ， ｒ 圣
Ｈ Ａ— Ｉ和 Ⅱ类 基 因 的 编码 产 物 是 抗 原 分 子 ， Ｌ
及炎症 反应 ， 属以下 四个家族 ： 瘤坏死 因子基 因 分 ①肿 家族 ； 转录调节因子或类转录因子基 因家族 ； ② ③人类 主要组织相容性（ Ｈ ）Ｉ 相关 基 因家族 ； Ｍ Ｃ 类 ④热休 克
蛋 白基因家族 Ｊ 。
２ Ｈ Ａ 的抗 原 结 构 Ｌ
Ｈ Ａ复合体 目前分为 Ｈ Ａ— Ｉ、 Ｌ Ｌ Ｌ Ｈ Ａ一Ⅱ和 Ｈ Ａ Ｌ
维普资讯
・
２・
生 物学教学 ２０ 年（ ２ 第１期 ０７ 第３ 卷） １
人 类 白细胞 抗原 基 因研 究 进展
刘 越 米 佳 黄耀江 （ 央 族 学 命 环 科 学 中 民 地 环 资 保 研 所 北 ｌｏ ） 中民大生与境学院 国族 区境源护究 京 ｏ８ ｏ１
人类基因组 的 １３０ ， 已完 成其 全序 列的测 定 … 。 ／０ ０ 现
它是人类基 因组 中至今为 止最复 杂、 最具 多态性 的遗
传体系。其等位基因的多态性影响着免疫应答 和 Ａ的分子结构 、 原结 Ｌ 抗
构、 尤其 Ｈ Ａ一Ⅱ类 分子 的组 成 及抗 原 递 呈过 程 及 Ｌ
下将其切割成合适 长短 的肽段 ， 以复合 形式运 送到 细
似， 其膜 结合部位较恒定 ， 内部分 的氨基 酸数量则 有 胞 所不 同， 因此 ， Ｌ Ｈ Ａ—Ａ Ｂ Ｃ的多态性 主要 位于 ｏ 和 、、 【 ． ｄ 结 构域 。Ｈ Ａ— Ｉ类抗 原广 泛分 布 于全身 有核 细 ， Ｌ 胞表面 ， 主要参与呈递外 来抗 原给 Ｃ ８ Ｄ Ｔ细胞 ， 束 约
人类白细胞抗原基因的命名及多态性
ｄ ｘ ｈｍｌ Ｇｅ Ｂａ ｋ：ｗｗｗ． ｃ ｉ ｌ ． ｉ ．ｇ ｖ ｅ． ｔ ： ｎ ｎ ｎ ｂ ．ｎｍ ｎ ｈ ｏ ／Ｇｅ ｂ ｎ ／ ｎ ａｋ
织相容性 复合 体蛋 白（ ａ ｒ ｉｏｏ ｐｔ ｉ ｙｃｍ ｌ ｍ ｊ ｓ ｃｍ ａ ｂｌ ｏ ｐｅ ｏ ｈｔ ｉｉ ｔ ｘ
ｐｏｅｎ ， ｒｔｉｓ ＭＨＣ ｐｏｅ ｓ ， 一 个 由 一 系列 紧 密 连 锁 的基 ｒｔｉ ） 是 ｎ
（０ 实验所用 的 Ｄ Ａ或其他材料 ， １） Ｎ 最好是细胞株 应该可 以在公共 资料库 中获得 ， 或者 至少可 以从 发现
该序 列 的原 实 验 室 里 获得 。
（ １ 向命名委 员会 提交 基 因序 列 时应 通 过 网上 Ｉ） 的序列提交工具 ， 该工具可 以在以下网址 ｗ ｗ ｅｉａ． ｗ ．ｂ．ｃ ｕ／ｍ ｔ ｌ ｓｂ／ｕ ｍｔｈｍ 中获得。提交者 应 同时 ｋ ｉｇ ｈａ ｕ ｓｓｂ ｉ ｔ ｔ ／ ／ ．
因座位所组成 的具 有 高度 多态性 的遗传系统 ， 位 于 定 人类 ６号染 色体 短臂 区域 （ ｐ １３ ） 长度 为 ４ ｂ左 ６２ ．１ ， Ｍ 右。 目前 已经确认 了 Ｈ Ａ ｇｎ ｏ ｐ ｘ包含 ２ ４个基 Ｌ ｅｅｃｍ ｌ ｅ ２ 因座位 ， 中 １８ 为功能 性基 因， 其 ２个 有产物 表达 ， 等位
等有关 ； 在器官和骨髓移植 中， Ｌ Ｈ Ａ是影响移植存活率 的主要因素之一 。本文对 ＨＡ 的命 名、 Ｌ Ｉ Ｈ Ａ基 因的多
IL-1β的基因克隆及在原核中的表达
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人类白细胞抗原的名词解释
人类白细胞抗原的名词解释人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigen，简称HLA）是一类存在于人类细胞表面的重要分子，它们在免疫系统中发挥着关键的作用。
HLA分子的主要功能是识别和区分自身细胞和外来侵入体，从而保护机体免受病原微生物和异体（如器官移植）的威胁，调节免疫应答过程，并影响相关疾病的发生发展。
HLA分子一般由细胞表达，主要存在于白细胞和其他核细胞表面。
它们是免疫识别的重要基础，可以携带或呈递抗原片段，通过与T细胞和B细胞受体结合，触发特异性免疫应答。
根据其特征和功能的不同，HLA分子可以分为两类主要类型：类I和类II。
类I型HLA分子主要由A、B和C三个基因位点编码，它们广泛分布于几乎所有人群的细胞表面。
类I型HLA分子与使用CD8受体的细胞共同作用，主要在细胞介导的免疫中发挥作用。
当病原体感染细胞后，细胞内产生的抗原片段会与类I型HLA分子结合，从而由免疫系统识别并引发免疫应答。
类II型HLA分子主要由DP、DQ和DR三个基因位点编码，它们主要分布在抗原呈递细胞上，如B细胞、巨噬细胞和树突状细胞等。
类II型HLA分子与CD4受体结合，主要在体液介导的免疫中发挥作用。
它们通过抗原呈递，激活和调节T细胞的免疫应答。
HLA分子对于个体的免疫特异性和自身耐受性具有重要的影响。
它们在选拔和配对移植器官时的重要性得到广泛认可。
由于HLA的多样性和多种基因型的存在，HLA配型在器官移植、造血干细胞移植等领域起着关键的作用。
合适的HLA配型可显著减少器官移植的排斥反应，并提高患者的生存率。
除了器官移植外，HLA分子还与一些自身免疫性疾病、感染性疾病和肿瘤的易感性相关。
例如，某些HLA基因型与类风湿关节炎、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病具有密切关联。
另外，HLA分子也在感染性疾病的易感性和疫苗应答中起重要作用。
例如，HLA-B27与强直性脊柱炎、结核病等疾病的感染易感性有关。
人体白细胞抗原等位基因
人体白细胞抗原等位基因
摘要：
1.人体白细胞抗原的定义与作用
2.人体白细胞抗原的英文缩写
3.人体白细胞抗原与强直性脊柱炎的关系
4.检测人体白细胞抗原的应用
正文：
人体白细胞抗原（HLA）是一种存在于人体各种细胞表面的蛋白质，由父母遗传，能够识别自己和非己，并通过免疫反应排除非己，从而保持个体完整性。
HLA 抗原决定造血干细胞移植的成败，因此在进行造血干细胞移植时，捐献者和接受移植者需要进行HLA 配型。
HLA 抗原分为A、B、C、D、DR、DQ 和DP 七个系列，已发现HLA 抗原有144 种以上。
这些抗原在其他细胞表面上也存在。
人体白细胞抗原与强直性脊柱炎有一定的关联。
强直性脊柱炎是一种慢性炎症性关节病，其发病与HLA-B27 等位基因密切相关。
然而，HLA-B27 只是强直性脊柱炎的高危因素，不能作为确诊的唯一依据。
诊断强直性脊柱炎需要根据症状、体征以及骶髂关节的CT 或MRI 等检查结果综合判断。
检测人体白细胞抗原主要用于评估个体患某种疾病的风险，以及确定造血干细胞移植的合适供者。
然而，检测结果并不能作为确诊的依据，还需要结合其他检查方法进行综合分析。
总之，人体白细胞抗原是一种重要的生物学标志物，与个体的免疫反应、
移植成功率和某些疾病的发病风险密切相关。
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中国组织工程研究与临床康复 第15卷 第5期 2011–01–29出版Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research January 29, 2011 Vol.15, No.5P .O. Box 1200, Shen yan g 110004 8781Beijing Tuberculosis and Thoracic Tumor Research Institute, Beijing 101149, China; 2Beijing Red Cross Blood Center, Beijing 100088, ChinaWang Lin ☆, Doctor, Technician, Beijing Tuberculosis and Thoracic Tumor Research Institute, Beijing 101149, Chinacod_wang@hotmail. comCorrespondence to: Zhang Zhi-xin, Professor, Beijing Red Cross Blood Center, Beijing 100088, ChinaReceived:2010-07-07 Accepted:2010-08-231北京市结核病胸部肿瘤研究所，北京市 101149； 2北京市红十字血液中心，北京市 100088王琳☆，女，1979年生，湖北省十堰市人，汉族，2010年北京市结核病胸部肿瘤研究所院校毕业，博士，技师，主要从事移植免疫方面的研究。
cod_wang@ 通讯作者：张志欣，教授，北京市红十字血液中心，北京市 100088 zzxhla@yahoo. 中图分类号:R318 文献标识码:B文章编号:1673-8225 (2011)05-00878-04收稿日期：2010-07-07 修回日期：2010-08-23 (20100507002/W ·Z)新等位基因人类白细胞抗原B*15:133的鉴定及其原核表达☆王 琳1，宋长兴2，张志欣2Identification of a human new allele human leucocyte antigen-B*15:133 and its prokaryotic expressionWang Lin 1, Song Chang-xing 2, Zhang Zhi-xin 2AbstractBACKGROUND: In total 4 633 alleles have been reported in world up to April 2010. More than 200 new alleles have been found in China, most of which need to be further studied.OBJECTIVE: Serologic and genetic studies were performed to confirm the identity of a new human leucocyte antigen (HLA) allele within the Chinese population to construct an expression vector containing the heavy chain of HLA-B*15:133 in a prokaryotic system and to identify its activity.METHODS: During routine typing work, genomic DNA was typed by PCR-SSO and PCR-SBT. An ambiguous result was found and identified as a novel allele by Serologic and DNA sequence analysis. The extra-membrane gene fragment of HLA-B*15:133 (digested with BamH and Hind ) was inserted into vector pET 30a(+). The expression vectorⅠⅠpET30a(+)-B*15:133 was transfected into the BL21(DE3) cells, and western-blotting was used to identify its expression. RESULTS AND CONCLUSION: A new allele which had one nucleotide substitution at position 419 from C to T (condon116 TCC->TTC) was identified, resulting in an amino acid change from Serine (S) to Phenylalanine (F). Serologic specificity is B71 (70) genetic and serological analysis indicated that the novel HLA-B allele of the donor was inherited from his mother. The restriction endonuclease digestions and PCR suggested the expression vector pET 30a(+)-B*15:133 was constructed successfully. A Western-blot identified the extra-membrane polypeptide chain of HLA-B*15:133. The expression vector pET30a(+)-B*15:133 can express the extra-membrane polypeptide chain of HLA-B*15:133 in BL21(DE3).Wang L, Song CX, Zhang ZX. Identification of a human new allele human leucocyte antigen-B*15:133 and its prokaryotic expression. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang K angfu. 2011;15(5): 878-881. [ ]摘要背景：国际上至2010-04共报告人类白细胞抗原4 633个等位基因，中国自2000年至少发现200个新的等位基因，由于资金和时间有限，大部分新等位基因未作血清分型、家系研究以及进一步的功能性研究。
目的：在健康志愿者人群中发现新等位基因，并对其进行家系研究,同时构建重链胞外区多肽的原核细胞表达载体，鉴定其在原核细胞中是否表达。
方法：利用PCR-SSO 和PCR-SBT 技术，对人群的人类白细胞抗原进行筛选。
使用血清学和SBT 技术对拥有新等位基因的供者进行家系分析。
用分子克隆的方法构建表达载体转染原核细胞，运用Western-blot 鉴定是否表达。
结果与结论：发现一个新等位基因与人类白细胞抗原B*15:18:01在第419位相差一个核苷酸，C->T, 即Codon116位 TCC->TTC ，导致氨基酸由丝氨酸改变成苯丙氨酸。
最终确定命名为人类白细胞抗原B*15:133。
血清学表达B71(70)抗原。
发现此供者的新等位基因来自于母亲。
表达载体pET30a(+)- B*15:133在原核细胞中表达的多肽可被抗HIS 标签单克隆抗体特异性识别。
结果表明，使用分子生物学技术在大样本的筛查下发现了新等位基因人类白细胞抗原B*15:133，利用分子克隆的方法成功构建表达载体pET30a(+)- B*15:133,并在原核细胞中有大量高纯度蛋白表达。
关键词：新等位基因；人类白细胞抗原B ；PCR-SSO ；PCR-SBT ；原核表达；表达载体pET30a(+) doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.05.028王琳，宋长兴，张志欣.新等位基因人类白细胞抗原B*15:133的鉴定及其原核表达[J]. 中国组织工程研究与临床康复，2011，15(5):878-881. [ ]0 引言准确的人类主要组织相容性抗原-人类白细胞抗原(human leucocyte antigen ，HLA)分型和HLA 抗体的检测为器官移植的成功提供了良好的基础，由于分型技术的不断进步，越来越多的新等位基因被发现。
中国在2000年二次启动了国家骨髓库计划，全国范围内进行了大规模HLA 分型，据统计全国范围内至少发现了200个新的等位基因，尽管发现了很多新等位基因，但很少对于这些新等位基因家系分析，蛋白表达及功能进行深入研究。
HLA-B*15:133是由本实验室发现的一个新的等位基因，属于B*15群，在HLA-I 类等位基因中HLA-B*15的等位基因最多，已被WHO 命名的B*15的等位基因以达220多个[1-2]，相对应的血清学特异性抗原有9个，还有部分等位基因相对应的血清学特异性有待研究。
HLA —B*15在东方人的表现频率较高，相对应的血清学分布有一定特征。
因此，本文将以HLA-B*15:133为例介绍新等位基因的发现和鉴定、家系分析，分子克隆建立原核表达系统。
为王琳，等.新等位基因人类白细胞抗原B*15:133的鉴定及其原核表达ISSN 1673-8225 CN 21-1539/R CODEN: ZLKHAH879www.CRTER .org更深入地研究新等位基因及其所表达分子的结构和功能打下基础。
5~10 mL ，利用Ficoll 分离液分离淋巴细胞，加入HLA 一类单克隆抗体干燥板(细胞浓度为2×109 L -1)，然后每孔加1 µL 一类补体，37 ℃孵育1 h 。
每孔加5 µL FQAE(用伊红染色：每孔加5 µL 伊红，2 min 后加5 µL 甲醛液)，用泰萨奇密封板密封试剂板。
结果判读方法参见HLA 一类单克隆抗体干板操作步骤说明书(NIH 计分法)。
人外周血总RNA 抽提及cDNA 合成：取先证者EDTA抗凝静脉血5 mL ，利用淋巴细胞分离液分离白细胞，TRIzol 试剂提取总RNA ，按文献所报道的方法进行反转录反应[4]，合成第一链cDNA ，用于下一步的PCR 扩增或储存于-20 ℃备用。