融合蛋白sCARTSP1原核表达纯化及诱导白血病细胞K562凋亡的研究

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三氧化二砷对K562及其多药耐药细胞系K562／A02细胞的诱导凋亡研究

Ｐ７Ｉ０表达阳性的白血病细胞往往对多种不同化学结构和作用靶点的药物同时发生而药。我们观察了三氧化二砷寸（Ｏ）Ａ３对体外培养的人急性红白血病细胞系Ｋ６５２及其多药耐药细胞系Ｋ６１０５２Ａ２细胞的凋亡诱导作用，以探讨Ａ是嘎对多药耐药白血病细胞的作用
８流式细胞术检测Ｐ７１０表达取经Ａ
作用后的各组
验前无药传代３改
３哪作用法测定Ａ对Ｋ６５２及Ｋ６／０细胞的生长抑制５２Ａ２
Ｋ６Ｊ０细胞ｌ，０ｇＬ多聚甲醛溶液固定细胞，５２Ａ２１／与小鼠抗ＭＫ１Ｒ一６单抗和藻红蛋白（Ｅ标记兔抗鼠二抗３Ｐ）７℃作用３０
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２００２年１月第２３
ＶＪ３Ｎｏ２．ｏ
・
研究报告・
三氧化二砷对Ｋ６５２及其多药耐药细胞系Ｋ６ｔ０５２Ａ２细胞的诱导凋亡研究
邹俊晖潘祥林冯长伟郭娟娟
公司提供）要求操作。
１药品
０【
公司干Ｈｎｓ冲液中，，／２细胞株及细胞培捧Ｋ６５２受其多药耐药细胞系Ｋ６／５２
（Ｈ７５，ｐ）体积分数为９％的甘油，￣ｌｙｒ９０，７－，０４ｎ／ｒ］ｏ３Ｌｌ ℃水浴１ｈ。在３Ｏ岫激发波长和４０岫发散波长下用荧６４
ｒｎｌ焦磷酸钠］０，复用嗳头吹打并振荡，ｍｏＬ／１０反室温作用３ｉ，心取上清液，后加人半咣无冬酶３底物Ａ－０ｍｔ离ｔ而Ｃ

白血病抑制因子对K562细胞增殖、凋亡及p53蛋白表达的影响

１５统计学方法．采用ＳＳＩ．ＰＳＯ０软件进行统计学处理。计量数据以 ±ｓ表示，行正态检验和方差检验，检验水准ｏ＝．５【００。
２结果
于含１％牛血清及５Ｕｍ青霉素、０Ｉ／ｌ霉００Ｉ／ｌ５ｍ链Ｕ素的ＲＭＩ６０完全培养基中，３Ｐ１４于７℃ 、％Ｃ２５Ｏ培养箱中培养。取对数生长期细胞接种于９６孔板中，
上测定波长为５０ｎ７ｍ处的吸光度（Ｄ值）Ｏ。②细胞凋亡：收集１２各组细胞并离心涂片，培养有细．将胞的盖玻片取出，ＢＰＳ洗３遍，固定液固定１ｉ，０ｒｎａＰＳ１；Ｂ洗遍滴加Ｈｅｓ染色液，ｏｃｔｈ室温１ｉ，Ｂ０ｍｎＰＳ洗片，用吸水纸吸去多余水分，封片后在荧光显微镜
白血病抑制因子（Ｉ）由Ｔｍｄ等于１８ＬＦ是ｏｉａ９４
年研究鼠骨髓样白血病Ｍ１细胞时发现的，Ｉ－属Ｌ６家族，是一种新型的多功能细胞因子。国内外研究
人十二烷基硫酸钠（Ｄ）０ｌ置于自动酶标仪ＳＳ１０，
山东医药２１年第５卷第４０１１３期
白血病抑制因子对Ｋ６５２细胞增殖、亡凋及ｐ３蛋白表达的影响５
陈蕾邸大琳王鲁娟孟，，，洁。孙。萍王占聚，（１潍坊医学院附属医院，东潍坊２１３；山６０１２潍坊医学院免疫学教研室）

小剂量K562细胞成功建立NOD_SCID小鼠白血病的病理模型

κB、mTOR、Par-4、p21等 [10]。

在本研究中发现PESV 能显著降低K562细胞的PI3K，p-Akt的表达，有一定的时间依赖性。

两个蛋白的表达随PESV作用时间的延长下调更为明显,与其诱导凋亡的效应相一致，其效应均优于环磷酰胺。

说明PESV较好的抑制了PI-3k/Akt信号转导途径及该通路作用的下游通路，从而通过影响调控因子促进K562细胞的凋亡。

由此，可以认为慢粒患者造血干细胞的恶性转化可能是通过BCR/ABL 融合蛋白P210 表达，激活信号传导途径，影响下游因子，发挥抑制细胞凋亡的作用。

慢性粒细胞白血病的发病机制提示我们通过研制新的酪氨酸激酶抑制因子，抑制蛋白酶体或通过作用于BCR/ABL下游的靶向信号途径[11],对慢性粒细胞白血病的治疗可能是一个新的有效的途径。

本研究在一定程度阐明中药全蝎提取物PESV促进慢性粒细胞白血病细胞的凋亡，干预PI-3K、p-Akt信号蛋白的表达，进而起到调控下游信号因子的表达，促进人慢性粒细胞白血病细胞K562细胞凋亡的作用。

小剂量K562细胞成功建立NOD/SCID小鼠白血病的病理模型郝征7 杨文华于文俊张佳NOD/SCID（非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷）小鼠是在SCID（重症联合免疫缺陷）小鼠的基础上与非肥胖性糖尿病小鼠（NOD/Lt）品系回交的免疫缺陷鼠[1]。

NOD/SCID小鼠既有先天免疫缺陷,又有T和B淋巴细胞缺乏,各种肿瘤细胞可以植入，且较少发生排斥反应及移植物抗宿主病(GVHD)，所以NOD/SCID小鼠已成为血液学实验研究的有用工具。

人白血病细胞株注射于NOD/SCID小鼠体内，可以在外周血、脾脏、淋巴结等处检测到并长期存在，各类白血病细胞及杂交瘤细胞均能在其体内迅速增殖。

本研究取白血病人K562细胞系尾静脉接种到NOD/SCID小鼠体内，观察建立NOD/SCID小鼠白血病模型病理组织变化。

1.材料和方法1.1实验动物及预处理SPF级NOD/SCID小鼠，3-4周龄，雌雄各半，购于中国医学科学院实验动物研究所，饲养于中国医学科学院血液学研究所动物实验中心SPF级层流室，标准颗粒饲养，饮水酸化处理，垫料及一切与鼠接触物品均灭菌处理。

羟基喜树碱联合丝裂霉素诱导人白血病K562细胞凋亡

第４期
羟基喜树碱联合丝裂霉素诱导人白血病Ｋ６５２细胞凋亡
・９・３
基喜树碱终浓度分别是２５５，．，０，ｌ．，１．／Ｌ；（）．，７５１２５５ｇｍ３丝裂霉素组：１，１，０，５，０ｇ；５，０５２２３．／ｍＬ
和湿度。每３５传代一次，取对数生长期的细胞进行试验，接种密度为５ｄ万个／Ｌｍ。．
１．台盼蓝拒染法检测药物联合应用的效果．２３
取对数生长期的Ｋ６５２细胞，实验共分４组：（）１对照组：不加任何药物；（）２羟基喜树碱组：羟
收稿日期：２１－３１０１０— ６
基金项目：黑龙江省自然科学基金项目（２０２；黑龙江省教育厅科学技术项目（１１４７２１６１Ｃ０６４）１５１４，１５１１）作者简介：陈琳（９５，女，江苏泰兴人，在读硕士研究生，主要从事分子细胞生物学方面研究，ｓｓ１＠１３ｏ。１８一）ｈｈ３６．ｒ２ｃｎ
陈琳，邵淑丽，武广慧，张伟伟
（齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江齐齐哈尔１１０６０６）
摘要：观察羟基喜树碱与丝裂霉索联合应用对人白血病细胞Ｋ６５２的作用效果，并探讨其机制。不同浓度羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合作用于人白血病细胞Ｋ６５２后，应用台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率，计算合用指数（Ｉ，流式细胞仪（Ｃ检测Ｋ６细胞凋亡率，吖啶橙（Ｏ）荧光染色和透射电镜观察凋亡形态学变化。ｃ）ＦＭ）５２Ａ结果表明：单独应用时羟基喜树碱和丝裂霉素的Ｉｃ分别是８ｔｍ￣／Ｌ和１．￣／，ｇ２ｇ５ｍＬ联合应用时Ｉ，ｃ。下降为４ｌ／ＬｍＩｇＨＰ和３￣，ＣＴ）．ｔｍＬ（６ｇ／ＭＭＣ）Ｉ０７，为协同效应。羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合应用均可诱导Ｋ６细胞，Ｃ＝．８５２凋亡。２种药物联合应用时的凋亡率高于各自单独用药。羟基喜树碱与丝裂霉素联合应用可以通过共同诱导细胞

大黄素对白血病K562细胞抑制增殖和诱导凋亡体外研究近况

大黄素对白血病Ｋ５６２细胞抑制增殖和诱导凋亡体外研究近况孟　晋天津中医药大学第一附属医院　３００１９３摘要　白血病（ｌｅｕｋｅｍｉａ）是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病，是最常见的血液系统恶性疾病。

大黄（Ｒｈｕｂａｒｂ）为中医临床常用中药，具有泻下攻积、凉血解毒、清热利湿等作用。

现代药理研究及临床应用表明，大黄具有良好的抗肿瘤及改善脏腑功能等多种作用。

其有效成分之一的大黄素（Ｅｍｏｄｉｎ，ＥＭ）是一种蒽醌类化合物，对于白血病细胞有明显的抑制杀灭作用。

关键词　白血病　中药　大黄素　Ｋ５６２细胞中图分类号：Ｒ７３３．７　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－７５８５（２０１２）１６－１９７８－０３白血病（ｌｅｕｋｅｍｉａ）是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病，是最常见的血液系统恶性疾病。

我国白血病的发病率约为２．７６／１０万，且近年有上升的趋势。

在恶性肿瘤所致的死亡率中，白血病居第６位（男性）和第８位（女性），但在儿童和３５岁成人中则居第１位。

随着新的化疗药物的出现和造血干细胞移植技术的不断提高，白血病患者的治疗疗效和生存率有了很大的提高。

但是仍有３０％左右的患者经过治疗后不能缓解或者缓解后再复发。

造成治疗失败的主要原因是治疗过程中出现原发或继发耐药（ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ），特别是多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅ－ｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ），导致化疗失败。

因此积极寻找新的有效、低毒的化疗药物和化疗方案已经成为血液学工作者的重要任务之一。

大黄（Ｒｈｕｂａｒｂ）为中医临床常用中药，具有泻下攻积、凉血解毒、清热利湿等作用。

现代药理研究及临床应用表明，大黄具有良好的抗病毒、止血、健胃、利胆、泻下、解热、镇痛、抗炎、利尿、降脂、降压、抗肿瘤及改善肾功能等多种作用。

其有效成分之一的大黄素（Ｅｍｏｄｉｎ，ＥＭ）是一种蒽醌类化合物，具有广泛的作用，如抗肿瘤、抗菌、抗老化及促进胃肠平滑肌运动［１～５］。

１　大黄素对血液系统肿瘤的影响Ｋａｗａｉ等首先发现，大黄素能够抑制鼠白血病Ｌ１２１０细胞的生长，随后发现大黄素对多种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用［６］。

天南星醇提取液诱导人K562细胞凋亡的实验研究

Ｋ５２６细胞的增殖，可能是通过诱导Ｋ６细胞的凋亡来实现的。５２
ｌ键词ｌ天南星；Ｋ５２胞；胞凋亡；式细胞术关Ａ．６细细流
Ｉ中图分类号】１９５１６
ｌ文献标识码】Ａ
Ｉ文章编号Ｊ６２１７２１）４—０１＿１７ —８５（０１０２４－３０
ＭｅｈｄｓＴｈｎｉｉｏｆｅｔｆｌｏｏｉｘｒｃｆｒｉｏｒｓｅｔｎｈｍａ６ｅｌｉｅｗａｅｅｍｉｅｙＭＴＴａｓｙｔｏ：ｅｉｈｂｔｎｅｃｃｈｌｅｔａｔｏｚｍａａｉａｍａｉｏｕｎＫ５２ｃｌｌｓｄｔｒｎｄｂｉｏａｃｈｓｎｓａ
ＺＡＮＧ－ｎ，ＡＮＧｉｎｈａＹＨＨｅｍｉｇＴＪａ－ｕ，ＡＮＧｈｎ－ｏｇ，ＺｏｇｈｎＧＡＯｎ — ｎＤｐｒｅｔｆｌｉｌｈｒａｏｇ，ｉｔｆｌｔＹｏｇｒｇ（ｅａｔｎｏＣｉｃａｍｃｌｙＦｒｆｉｅｏｍｎａＰｏ士研究生，男，研究方向：临扇药理学。－ａ：Ｅｍｉｌ
ｊｔｎ２０＠ｓｈ．ｏｈａｇ０２ｏｕｔｍ【作者简介ｌ张鹤鸣，，男副主任药师，研究方向：临床药学及药事管理。
・
１．天南星醇提取液（ＡＥ）．１３Ｒ的制备除菌，调浓度为１０ｍｇ～４℃保存。－，ｍＬ
Ｔｅｄｆｒｎｅｂｔｅｅｅｐｒｎａｇｏｐａｄｃｎｒｌｒｕｓｓｔｔａｉｎｆａｃ尸＜０１．Ｃ０ａ５７。～ｈｉｅｅｃｅｗｅｎｔｘｅｉｔｒｕｎｏｔｏｐｗａｔｉｉｌｇｉｃｎｅ（ｈｍｅｌｏｇａｓｃｓｉ．）Ｉ５ｗｓ．ｇｍＬ．０６０

过表达对K562细胞增殖、凋亡及Survivin、Cox-2表达的影响 ---

大连菜谱制作 lmqcp
大连废旧物资回收
lmqhs
� 通过对糖尿病肾病（ diabetic nephropathy, DN）病人临床穿刺样本和 DN小鼠模型中肾脏组织以及肾脏细胞在模拟糖尿病肾病条件刺激下的体外研究，探讨 NLRP3炎症体在糖尿病肾病病理条件下的表达变化。方法：通过对 DN 病人穿刺样本进行免疫组化和 real-time RT-PCR检测，观察 NLRP3在 DN病人穿刺样本中的表达变化；通过高脂喂养（ HFD ）/STZ 尾静脉注射联合建立 DN 小鼠模型，并通过 Western Blot和半定量 PCR 方法观察 NLRP3在DN 小鼠模型中的表达变化；在体外实验中进一步探讨足细胞和系膜细胞在高糖、 TNFα 、TGF-β条件下 NLRP3蛋白的表达。结果： DN病人小鼠模型中肾脏组织中的 NLRP3 表达水平显著升高；足细胞在高糖、 TNF-α或 TGF-β刺激下 NLRP3表达明显升高且具有统计学意义，而系膜细胞在高糖刺激下 NLRP3蛋白表达升高，在 TNF-α 、TGF-β刺激下 NLRP3 蛋白表达没有显著的变化。结论： NLRP3炎症体的表达上调在 DN的发病机制中可能发挥重要作用，对肾脏固有细胞的体外实验表明 NLRP3的表达变化具有细胞特异性，深入研究 NLRP3炎症体的作用机制将为糖尿病肾病的治疗提供新的靶点和思路。
表达对K562细胞增殖、凋亡及 Survivin、Cox-2表达的影响
�
üppe样因子 Sp1样蛋白（ Sp1-like proteins）和 Kr Krü （ Kr üppel-like factors， KLFs) 是一个具有多个结构高度相似成 Krü 员的锌指蛋白家族，在真核细胞的基因转录调控过程中起着重要作用。哺乳动物机体中包含这个家族的大部分成员，在人类基因组中至少编码 21种Sp1-like/KLF蛋白。 KLF4 是目前研究较多的一个 KLF家族成员，它能够通过与下游基因启动子区的 KLF4结合元件相结合，从而直接调控下游基因的转录，是生物体内一种重要的转录因子。研究发现， KLF4 在细胞增殖和分化、肿瘤发生和血管重构等生理、病理过程中均起到重要作用。本文就 Sp1-like/KLF蛋白家族结构， KLF4的结构特性及其生物学功能进行综述。源自大连废旧物资回收 lmqfj

青蒿琥酯诱导人白血病细胞K562胀亡和凋亡作用的研究

ｈｍａｅｋｍｉｅｌｌｅｕｎｌｕｅａｃｌｉｎ
ＴｌＡＮｅｌａｅｔｏｈｓｌｙＣｌｇｆＢｓｄｃｅＣｇｉｇＭｅｉｌＵｉｒｔ）ＤｐｒｎｆＰｙｉｏ，ｏｅｅｏａｉＭｅｉｎ，ｈｎｑｎｄｃｎｅｓｙｍｏｇｌｃｉｏａｖｉ
效关系。
【关键词】青蒿琥酯；５２胀亡；Ｋ６；凋亡【中国图书分类法分类号】２５５Ｒ８．【文献标识码】Ａ【收稿日期】０７１ — １２０ — ０３
ＴｅｏｃｓｓａｄａＯｔｓｓｉｄｃｎｆｃｆａｔｓｎｔｎｔｅＫ５２ｈｎｏｉｎｐｐＯｉ— ｎｕｉｇｅｆｔｏｒｕａｅｏｈ６ｅｅ
要】目的：探讨青蒿琥￣（ｒｓｎｔ，Ｒ）￣ＡｔｕａｅＡＴＸ人慢性粒细胞性白血病细胞株Ｋ６ｅ５２增殖抑制的影响。方法：采用ＭＴ比色Ｔ
法检测青蒿琥酯对体外培养的Ｋ６５２细胞的生长抑制作用，、光电镜下观察青蒿琥酯作用后的Ｋ６５２细胞形态学变化特征，流式细胞仪检测在不同浓度、同时间作用下青蒿琥酯诱导Ｋ６不５２细胞的细胞胀亡率和凋亡率。结果：青蒿琥酯对Ｋ６５２细胞有明显的增殖抑制作用，４、８、２２ｈ４ｈ７ｈ的半数抑瘤浓度ＩＩｇｍ）ｃ（／１分别为６．７３．、０５。ｘ５１、１３１．１青蒿琥酯主要引起Ｋ６６５２细胞的胀亡和凋亡变化，但胀亡率与凋亡率无明显差别。结论：青蒿琥酯主要通过胀亡和凋亡２种方式抑制Ｋ６５２细胞增殖，并呈明显量效时

K562白血病株树突状细胞诱导及其抗肿瘤功能的体外研究

：Ｄａ｝ＤＣ８、ＤａｄＣ，Ｆｎｔｎａｐａａ：ｄｐｈｍｇｎｉａａｔｉｍｈｃｔｒｃｏ，Ｃｌ、｛１Ｒ、Ｄ３ＣｎＤ ③ ｕｃｏｐｒｓＡｏｔｏｏｅｅｙｖｒｘｌｐｏｙａｔｎｉｉｌｔｉｍｅｙｎｄｅｅｉ（）ＵｅｔｅｏＴｒｏｅａｉｅｅａｔｉｆＣｉｉｕｉｇＣＬＲｓｌ（）０ｅｖｎａ，ｅｅｓ３ｓｈｍｔｄｏＭｘｍｎｃｖｏｄｃ．ｅｕｔｅｈｆｔｈｔｉｔＤｎｎｎＴｙｓ１ｎｔｅｔｄｙｔｌｈｓｈｅｈｃｌ
ＣＬ杀伤肿瘤细胞的能力且随效靶比例增高而增强，Ｔ并显著高于未负载肿瘤可溶性抗原的ＤＣ及单纯Ｔ细胞组（Ｐ＜００），５。结论
一
以Ｋ６５２细胞为靶细胞，察ＶＡ对Ｋ６观Ｐ５２细胞诱导向树突状细胞分化作用。进
步的实验证实，ＰＶＡ可以诱导Ｋ６５２细胞向树突状细胞分化，而且诱导的树突状细胞具有较强的抗原呈【关键词】丙戊酸钠；５２树突状细胞；．Ｋ６；白血病
ＤｐｒｅｔｆＢｏｄ１ｅｅｔｏｉｌＣｎｚｏｉ，ＨｂｉＣｎ￣ｕ０１０ｅａｔｎｏｌ，ｈｎｒｓｔａｇｈｕＣｔｅ，ａｇ６０１ｍｏＣｅＨｐａｏｆｙｅ【ｌａｔＯｊｃｖＴｎｅｔａｈｕｃｏｆｄｎｒｃｃｌＤＡ￣ｒｅ】ｂｅｔｅｏｉｓｇｔｔｆｎｔｎｏｅｄｉｅｉｖｉｅｅｉｉｔｌ（Ｃ）ｄｒｅｒｍｔ（６ｅｓｉｅｖｄｆｈｌ２ｃｌｎｉｏｅ５

应用DNA微阵列研究斑蝥酸钠诱导K562细胞凋亡前后的基因变化

应 ” 。相差显微镜下可见，同药物组干预后，Ｗ５９细胞不Ｓ７
［］王文海，８周荣耀，倪爱娣，．等夏枯草注射液为主治疗中晚期胃、
大肠癌３Ｏ例临床观察［］Ｊ，山西中医，０３１（）２２０，９３：４—２．６［］ＣｌｒｓＪａａｉｍｌｓ，ｐｒｄｇｕｄｔｅｒｍｅｇｎｅ９ａａｅｅＥ．Ｐｒｄｇｔａａｉｆｎ：ｈｅ—ｅｒｅｃｂｏｍｏ
［］张海波，３周荣耀，章晓鹰，夏枯草及抗炎一号注射液经肝动等．脉联合灌注治疗大鼠肝癌作用机制的初步探讨［］现代肿瘤Ｊ．
医学，０６，４６６６— ４．２０１（）：鹰，夏枯草对ＳＣ一７０董章等．Ｇ９１细胞的影响
ｏｈｍｏｅｓｔｉｅｔｇｆｒｐｔｎｓｗｔｏｏｅｔｌｃｎｅｓｎｆｃｅｓｎｉｖｔｔｓｉｏａｉｔｉｈｅｌｒｅａａｃｒｕｉｇｉｙｎｅ
７１９０痛细胞的凋亡，其作用点可能在Ｇ和Ｇ细胞生长间，
中药夏枯草治疗甲状腺疾病已经有很长的历史了，研究表明夏枯草具有一定的抗肿瘤作用。夏枯草水浸液、水浸乙醇提取物水溶部分及水浸乙醇提取后残渣，对小鼠子宫颈癌一１（４的抑制率分别为４．％，４１％和３．％。４号Ｕ１）２２３．６２夏枯草水浸液对小鼠肉瘤一１０Ｓ８）８（１０抑制率为５５，．％对小鼠艾氏腹水癌亦有抑制作用。王琨等选用人胃腺癌ＳＣＧ

SU11248诱导K562白血病细胞凋亡的分子机制研究

Ｆｏｙｏｔｙｔｓｎｉａｅｈｓｄｕｏｌｌｃｈｅｌｃｃｅｉ０ｈｓ．ＩｄｒｃｍｍｕｏｕｒｓｅｃｎｏｄｄｔａｙｏｌｗｅｔｍｅｒｅｔｉｄｃｔｄｔｉｒｇｃｕｄｂｏｋｔｅｃｌｙｌｎＧ／Ｇ１ｐａｅｎｉｔｉｅｎｆｏｅｃｎｅｕｆｌｅｈｔｃｔ — ｌ
ｔｙ，ＦｊｎＭｅｉｌｎｖｒｔＦｚｏ５０４，Ｃｈｎｏｒｕａｄｃｉｓｙ，ｕｈｕ３００ｉａｉａＵｅｉ
［ｂｔａｔＯｊｃｖ：ｏｅｐｏｅｔｅｏｅｕａｃａｉｓｆＵ１２８Ｓｎｔｉ）ｉｕｅｐｐｏｉｏｈｏｉｍｅｉｌｕＡｓｃ］ｂｅｔｅＴｘｌｒｈｌｃｌｒｈｎｓ１４（ｕｉｎｂｎｃｄａｏｔｓｎｃｒｎｃｙｌｄｅ— ｒｉｍｍｅｍｏＳｉｄｓｏ
ｌｕｋｅｉｅｌｅｍａｃｌｓ
Ｌ／Ｄｏｇ— ｎ，ＣＵＩＺｈｏＬｉＮｎＨｏｇａ — ｅ，ＫＯＮＧＬｎＹｎＩｈｎＸｎ，ｉ — ａｅａｔｅｔｆＣｉｉｌａｏａｉｇ－ｉｇ，ＬＮＺｅ— ｉｇＨＵＪｎＤ．ＤｐｒｎｌｃｂｒａｍｏｎａＬ
０３及Ｎ．Ｂｐ５７ＦＫ６表达变化不明显。结论：Ｕ１４Ｓｌ２８可通过阻滞细胞周期进程及激活内源性线粒体凋亡通路诱导Ｋ６５２细胞调亡。
［关键词］Ｓ１２８Ｋ６Ｕ１４；５２细胞；凋亡；分子机制
ＴｈｏｅｕａｅｈｎｓｓｕｎｒｙｎｇＳＵｌ２８ｉｕｃｄａｏｔｓｓｏ６ｅｍｌｃｌｒｍｃａｉｍｄｅｌｉ４・ｎｄｅｐｐｏｉｆＫ５２１

p-糖蛋白在人白血病多药耐药细胞株K562A02线粒体上表达的研究的开题报告

p-糖蛋白在人白血病多药耐药细胞株K562A02线粒体上表达的研究的开题报告【开题报告】一、选题背景及研究意义多药耐药是白血病治疗中一个普遍存在的问题，当前临床上使用的大多数抗肿瘤药物都存在多药耐药的现象，这就给临床治疗带来了很大的挑战。

因此，研究白血病多药耐药的分子机制已成为当前研究的热点问题之一。

P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）是一种跨膜输运蛋白，能够将多种化合物从内部输送到细胞外，包括许多抗癌药物。

P-糖蛋白在多药耐药的癌细胞中高度表达，已成为临床上诊断多药耐药的主要指标。

因此，研究P-糖蛋白在多药耐药白血病细胞中的表达和其对癌细胞的作用机制更加具有现实意义。

线粒体是细胞内储能和凋亡的重要场所，多药耐药癌细胞的线粒体功能异常是引起化疗患者治疗失败的一个主要因素。

因此，研究P-糖蛋白在白血病多药耐药细胞株K562A02线粒体上的表达及其对线粒体功能的影响将有助于深入了解多药耐药的分子机制。

二、研究目的本研究旨在探讨P-糖蛋白在人白血病多药耐药细胞株K562A02线粒体上的表达情况以及其对线粒体功能的影响，为临床治疗多药耐药白血病提供新的治疗策略。

三、研究内容与方法1、建立人白血病多药耐药细胞株K562A02模型将K562细胞株连续压制5-20次，筛选出具有多药耐药性的细胞株作为实验材料。

2、检测K562A02细胞株P-糖蛋白表达情况及线粒体功能Western blot和RT-qPCR方法检测K562A02细胞株P-糖蛋白的表达水平；采用荧光探针，检测K562A02细胞株线粒体功能如膜电位、呼吸、自由基等参数的变化。

3、通过基因克隆技术构建P-糖蛋白过表达和沉默的K562A02细胞株采用基因克隆技术将P-糖蛋白基因克隆至真核表达质粒，转染至K562A02细胞株中，通过Western blot检测P-糖蛋白的表达情况。

利用siRNA技术对P-糖蛋白进行沉默，通过Western blot及RT-qPCR检测P-糖蛋白的表达水平。

苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡的实验研究

成。
１３主要试剂ＲＭＩ６０ｃ蚣．Ｐ１４：ｉ
司。胎牛血清：天津市正
检验，两样本均数比较采用ＩｅｅｄｎＳｍｐ检验，ａｎｐｎｅｔａｌｔｄｅ以＝００．５为检验水准，采用ＳＳ１．数据胞生长的影响（４ｓ５２ｉ．）－
ＲＭＩ６０Ｐ１４培养液常规３℃ 、％ｃ￣饱和湿度的培养箱中培７５ｏ、２２细胞毒性实验．对数生长期Ｋ细胞以２×ｌ＇￣接种Ｏ／Ｌ
（温州医学院附属第一医院・温州３５１ ‘ ｅｏｎｅｉ —ＭｕＳａＭｄａｅｔ）２０１ＮｗＹｒＵｉｒｔｋｖｓｙｏｔｉｉｅｉｌｎｒｎｃＣｅ摘要目的：究苦瓜蛋白对诱导ｌ细胞凋亡相关基因Ｐ和Ｂｌ表达的影响。方法：研５３ｃ一２采用ＣＫ一８Ｃ细胞体外生长的影响；用Ｇｅｓ色和电镜观察细胞形态学变化；用流式细采ｉａ染ｍ利
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４６・１
中国中医药科技２Ｏ年ｌ月第１０７１４卷第６期Ｎｖ２Ｏｏ．４Ｎ．ｏ．０７Ｖ１１ｏ６
苦瓜蛋白诱导Ｋ细胞凋亡的实验研究＊５
尹丽慧熊术道韩义香章圣辉昊建波刘新华
观察。
酶活性，能专一地使真核细胞核糖体２ＳＮ３３位的腺嘌８ｒＡ４２Ｒ呤糖苷键水解断裂，导致６ｓ０亚基失活，而使蛋白质合成从
不可逆地受到抑制… 。研究表明，苦瓜蛋白具有良好的抗肿

SHP-1基因表达检测在急性髓系白血病和慢性粒细胞白血病中的意义的开题报告

SHP-1基因表达检测在急性髓系白血病和慢性粒细胞白血病中的意义的开题报告研究背景：白血病是一种以造血干细胞克隆增生和抑制正常造血的恶性肿瘤性疾病。

髓系白血病根据患者体内异常细胞的发展速度可分为急性和慢性两种类型。

其中，急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia, AML）是一种髓母细胞的恶性克隆，具有高度增殖性和分化障碍的特点，严重威胁患者生命，患病率逐年上升。

而慢性粒细胞白血病（Chronic Myeloid Leukemia, CML）则属于一种分化成熟细胞恶性转化的肿瘤，在临床表现上相对缓慢，但容易转化为急性白血病，危害也不小。

SHP-1是一种重要的非受体型酪氨酸磷酸酶，是T细胞和B细胞受体的信号负反馈调节器，能够通过调节多种细胞信号通路来控制细胞增殖、分化、存活和凋亡等生命过程。

在髓系白血病中，SHP-1的表达水平通常会下降，从而造成白血病细胞的过度生长和存活。

因此，研究SHP-1基因的表达状态对于白血病的预后和治疗具有重要意义。

研究目的：探究SHP-1基因在急性髓系白血病和慢性粒细胞白血病中的表达情况，探讨其在白血病中的作用及意义。

研究方法：1. 病例选择：选取20例AML和20例CML患者进行研究，同时收集20例健康人的外周血做对照组。

2. 血样处理：使用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法将外周血进行分离，获取单个细胞后，采用RNA纯化试剂盒提取总RNA。

3. 实时荧光定量PCR：采用反转录酶链反应法 (reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR) 基于SYBR Green荧光染料的定量RT-PCR测定SHP-1基因表达水平。

4. 数据分析：通过SPSS软件对数据进行统计分析，采用单因素方差分析和t检验来分析SHP-1基因在不同组间的表达水平差异。

研究意义：本研究将有助于了解SHP-1在AML和CML中的表达变化及其在白血病发生发展中的作用机制，有助于深入探讨白血病的发生机理，并对白血病的预后和治疗提供实验基础和理论支持。

SPARC和Tiam1基因在HL-60与K562髓系白血病细胞株中的表达及其意义

SPARC和Tiam1基因在HL-60与K562髓系白血病细胞株中的表达及其意义李虹颖;彭志刚;刘列;罗军;邓东红;赖永榕;苏良焱;黄莹;刘振芳【摘要】目的:探讨SPARC和Tiam1基因在人早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)与人慢性粒细胞白血病细胞株(K562)中的表达的水平及其意义.方法:常规细胞培养,取在对数生长期的HL-60、K562细胞进行mRNA抽提;以HUVEC细胞的mRNA 作为对照组,逆转录后采用实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)法检测SPARC和Tiam1在HL-60、K562细胞中mRNA的表达水平.结果:①SPARC和Tiam1在HL-60、K562细胞中均为低表达;②SPARC和Tiam1在HL-60、K562细胞中的表达差异均有统计学意义(P＜0.05);③SPARC与Tiam1在HL-60细胞中的表达呈负相关(r=-0.886,P＜0.01);SPARC与Ti-am1在K562细胞中的表达无相关关系(r=-0.086,P=0.872).结论:在髓系白血病中,评价SPARC与Tiam1的表达水平可能具有一定的预后价值;在急性早幼粒细胞白血病中,SPARC和Tiam1可能通过共同的信号通路调控下游基因.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2014(031)006【总页数】4页(P891-894)【关键词】SPARC;Tiam1;髓系白血病【作者】李虹颖;彭志刚;刘列;罗军;邓东红;赖永榕;苏良焱;黄莹;刘振芳【作者单位】广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;柳州市人民医院血液科柳州 545000;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021;广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R733.7髓系白血病(Myeloid leukemia, ML)是一类具有高度异质性的造血系统的髓系原始细胞克隆性恶性增殖血液肿瘤。

Sp1基因与白血病的研究进展

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Sp1基因与白血病的研究进展丘国彬 200671149 06本硕四班指导老师：蒋纪恺摘要转录因子Sp1是存在于哺乳动物细胞中的一种基因调控锌指蛋白，它特异性地结合GC 盒启动因子，选择性地活化从含功能识别位点的基因到mRNA的转录，它的c端含有3个连续的cys2His2型的锌指。

有许多蛋白能与sp1作用，它是通过磷酸化和在单糖乙酰葡萄糖胺的O键的糖基化而被修饰的。

在与白血病的关系的研究中，也有部分成果：1.Sp1能调控PML(promyelocytic leukemia早幼粒细胞白血病基因)的转录，降解PML-RARα蛋白诱导APL 细胞分化；2.Sp1能调控EFN的表达，限制EFN的过量表达而达到治疗白血病的效果；3.Sp1对K562白血病细胞增殖、凋亡及耐药性产生影响。

前言Sp1转录因子的简介：Sp1最早是在类人猿病毒40的启动子中被发现的，它可以和GC盒结合而激活基因转录[1]。

1987年Kadonaga等人从Hela细胞中克隆出了人SP1的部分cDNA序列，在通过聚丙烯酰胺葡聚糖和磷酸纤维素纯化后被命名为Sp1。

随着Sp1的纯化和克隆，证实Sp1只是特异蛋白(specificity protein)家族的一员，它们通过GC盒调节转录[2]。

它的c端含有3个连续的cys2His2型的锌指。

锌指(Zinc finger)，是存在于真核细胞转录因子中的重要的DNA结合蛋白结构域(DNA-binding protein domain)之一。

1.Sp1的结构与功能（Fig1 sp1的结构区。

右侧标明为氨基酸的含量和分子量）Sp1基因编码105kDa的蛋白质，2000年从cDNA序列推算出了人类Sp1氨基酸序列[3]。

Sp1蛋白被分为数个功能亚区[4](Fig.1)。

转录激活区包括A、B两个亚区，当通过DNA结合区与DNA结合后，它们都可以发挥促转录活性。

一种液相色谱分离与质谱鉴定白血病K562细胞蛋白的方法

一种液相色谱分离与质谱鉴定白血病K562细胞蛋白的方法陈曼;王骊丽;耿信笃【期刊名称】《分析测试技术与仪器》【年(卷),期】2007(013)002【摘要】分别通过3种色谱模式:反相高效液相色谱(RPLC)、弱阴离子交换-反相高效液相色谱(WAX-RPLC)和排阻-反相高效液相色谱(SEC-RPLC)对K562细胞的蛋白质进行分离,收集的色谱馏分采用基质辅助电离解析时间飞行质谱(MALDI-TOF MS)进行鉴定后,比较所获得的蛋白质数据.结果显示:当选择SEC-RPLC模式构建K562细胞蛋白质图谱时,检测到的蛋白质数目最多,信息最为全面.此法的建立为白血病的临床研究提供了一种有效的手段.【总页数】4页(P98-101)【作者】陈曼;王骊丽;耿信笃【作者单位】西北大学,现代分离科学研究所,现代分离科学陕西省重点实验室,陕西,西安,710069;西北大学,现代分离科学研究所,现代分离科学陕西省重点实验室,陕西,西安,710069;西北大学,现代分离科学研究所,现代分离科学陕西省重点实验室,陕西,西安,710069【正文语种】中文【中图分类】O657.32【相关文献】1.纳升液相色谱-飞行时间质谱鉴定HaCaT细胞膜蛋白 [J], 曾卓颖;张航;黄爱博;夏菠;洪文旭;刘建军;郭时印2.纳升电喷雾毛细管液相色谱-串联质谱鉴定K562细胞株中混合蛋白质 [J], 蒙根;岑坚;王海龙;刘炳玉;王鸿丽;李卫华;王红霞;魏开华;张学敏;杨松成3.酸性丝氨酸蛋白酶ASPNJ对K562白血病细胞热休克蛋白基因表达的影响 [J], 贾博;吴昕哲;王鎏越;张建一;崔佳乐;刘剑凯4.融合蛋白sCAR-TSP-1原核表达纯化及诱导白血病细胞K562凋亡的研究 [J], 梁天祥;谌贺宽子;陈磊;武虎;唐斌5.墓头回提取物作用白血病K562细胞蛋白双向电泳方法的建立 [J], 刘婷婷;卫东锋;赵春燕;苏刚;吴剑华;卢艳;曹慧明;程卫东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

奥沙利铂诱导人白血病细胞株凋亡的研究

奥沙利铂诱导人白血病细胞株凋亡的研究陈姝;汤为学;娄世锋;陈林【期刊名称】《现代医药卫生》【年(卷),期】2004(020)013【摘要】目的:研究第三代铂类化合物奥沙利铂对人早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)的影响.方法:采用MTT法检测奥沙利铂对HL-60细胞作用的时间效应和剂量效应;流式细胞仪检测细胞的DNA含量,分析细胞周期的改变;光镜和电镜观察奥沙利铂作用后细胞形态变化.结果:随着作用时间及药物浓度的增加,奥沙利铂对HL-60细胞增殖的抑制作用就越明显.0.032 mmol/L奥沙利铂作用72小时,细胞生长抑制率86.5%,流式细胞仪检测HL-60细胞G2/M期细胞增多,形态学显示细胞凋亡.结论:奥沙利铂有明显抑制恶性白血病细胞生长和促进细胞凋亡的作用.【总页数】3页(P1194-1196)【作者】陈姝;汤为学;娄世锋;陈林【作者单位】重庆医科大学附属第二医院血液科,重庆,400010;重庆医科大学病理生理教研室,重庆,400016;重庆医科大学附属第二医院血液科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院血液科,重庆,400010【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.青藤碱诱导人红白血病细胞株K562凋亡的实验研究 [J], 牟凤林;陈华2.重组人白血病抑制因子体外诱导人巨核细胞白血病DAMI细胞株凋亡与P73蛋白表达 [J], 毛彦娜;徐学聚;白松婷;王飞;卢洁;张艳华3.奥沙利铂诱导人舌鳞癌细胞株Tca8113凋亡抑制基因survivin表达的研究 [J], 郑直;曲延征;陈伟辉4.熊果酸诱导人急性髓系白血病细胞株U937细胞凋亡的实验研究 [J], 潘莉萍;袁伟;郭静明5.人参皂甙诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的实验研究 [J], 凌昌全;俞超芹;黄雪强;潘瑞萍;张登海因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡

苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡张翠梅;高建慧;李德乐;李璟;施玉麒;林骏;罗深秋【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2008(028)003【摘要】目的体外研究苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随的细胞凋亡改变.方法体外培养K562细胞,采用不同浓度的苦参碱诱导K562细胞4 d.分别采用倒置显微镜、透射电子显微镜观察诱导前后细胞的形态学和超微结构改变,进一步采用免疫细胞化学方法检测细胞周期调控蛋白p27kipl表达变化.结果与阴性对照组K562细胞相比,0.10/gL浓度的苦参碱诱导后K562细胞形态学和超微结构均显示有凋亡特征,同时细胞内p27kipl蛋向表达明显增加.结论苦参碱在体外诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡.可能与p27kipl蛋白表达增加相关.【总页数】3页(P478-480)【作者】张翠梅;高建慧;李德乐;李璟;施玉麒;林骏;罗深秋【作者单位】南方医科大学附属中山市博爱医院儿保科,广东,中山,528403;南方医科大学附属中山市博爱医院儿保科,广东,中山,528403;南方医科大学附属中山市博爱医院儿保科,广东,中山,528403;南方医科大学附属中山市博爱医院儿保科,广东,中山,528403;南方医科大学附属中山市博爱医院儿保科,广东,中山,528403;南方医科大学基础医学院细胞生物教研室,广东,广州,510515;南方医科大学基础医学院细胞生物教研室,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R329【相关文献】1.苦参碱联合伊马替尼对K562细胞红系分化的影响 [J], 刘小珊;蒋纪恺2.苦参碱上调K562细胞γ珠蛋白 mRNA表达和诱导红系分化 [J], 张翠梅;尹晓娟;封志纯3.苦参碱诱导K562白血病细胞分化和凋亡的实验研究 [J], 张彦;蒋纪恺;刘小珊;刘北忠;许相儒;何渝军;戴碧涛4.CGI-100基因在苦参碱诱导K562细胞分化和凋亡中的作用研究 [J], 黄凤霞;曹励民;张彦5.氯化高铁血红素诱导K562细胞红系分化对其细胞周期的影响 [J], 马艺戈;王冰蕊;高洁;刘金花;佟静媛;刘丽君;石莉红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。