9章 弧菌科
兽医微生物学课件- 弧菌科及气单胞菌科
副溶血性弧菌在自然界不同的水中生 存时间很不一致,在淡水中1天左右 即死亡,而在海水中则能存活47天以 上。在pH6以下不能生长,但在含盐 6%的酱菜中,虽然pH值降到5.0以下, 仍能存活30天。
致病性
副溶血性弧菌是一种海洋性细菌,主要 存在于海水及海产品中,但在其它食品 如肉类、禽类产品、淡水鱼类中也有本 菌存在。
所致的食物中毒主要由海产品引起,居 沿海地区食物中毒之首。
所引起的食物中毒多呈爆发性,较少散 发。温暖月份易发生大爆发,寒冷季节 少见。
主要由于生食海产品,烹调加热不足或 交叉感染引起。
临床上以急性发病,腹泻、腹部痉挛、 恶心、呕吐、头痛、发烧、畏寒为主, 严重者脱水、休克。
副 溶 血 增菌液 性 弧 菌 检 验 程 序
检样
37℃ 8--16h
氯化钠蔗糖琼脂平板(或选择 性琼脂平板)和S.S琼脂平板
37℃
18--24h
3.5%氯化钠三糖铁
革兰氏染色镜检
嗜盐性试验
生化试验
动物试验 报告
为需氧菌,对营养要求不高,但生长需要盐, 在无盐环境中不生长,在含0.5%的培养基 中即可生长,但在含盐3-3.5%的培养基中 生长最好。
神奈川(Kanagawa)现象
从患者样品中分离的副溶血性弧菌菌株在 含有人血和家兔红细胞的培养基中生长, 能产生β型溶血(致病菌),而从海水中 及海产品中分离的菌株则不溶血(非致病 菌),这种现象称为神奈川现象。
第九章 弧菌科及气单胞菌科
这两个科的细菌均为革兰氏阴性、 兼性厌氧菌,均可存在于水源中,
引起鱼类发病。
副溶血性弧菌Βιβλιοθήκη 生物学特性副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)又 称为嗜盐杆菌,嗜盐弧菌。
细菌学各论课件:弧菌科
鮰疱疹病毒1型(Ictalurid herpeovirus 1)
• 呼肠孤病毒科(Reoviridae )
草鱼出血病病毒(Grass carp hemorrhag)
传染性胰坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus, IPNV)
淋巴囊肿病毒(lymphocystis disease virus, LCV)
• 病毒特性 虹彩病毒科,基因组双股DNA ,有囊 膜 ,核衣壳20面体对称
• 致病性 感染多种淡水鱼及海水鱼,特征为鳍及皮 肤的结缔组织过度肥大,形成肉眼可见的囊肿
• 诊断 病理切片
鮰疱疹病毒1型(Ictalurid herpeovirus 1)
血清学试验
嗜水气单胞菌 (A. hydrophila)
形 态 革兰氏阴性,短杆状, 有鞭毛和菌毛。
培养特性
• 普通营养琼脂上即可生长 • 血平板上可产生β溶血圈 • 麦康凯培养基上生长良好 • 在弧菌选择培养基TCBS或在6%
NaCl中不生长 • 对弧菌抑制菌O/129不敏感,多数
不发酵乳糖
致病性引致败血症或皮肤溃疡等局部感染,是水生 动物尤其是鱼类最常见的致病菌。人类感染引致急 性胃肠炎等,是食品卫生检验的对象。
• 致病性 4-5月龄的草鱼易感,死亡率可达70%,病变以充血 出血为特征。
• 诊断 取病鱼组织作冰冻切片,用荧光抗体染色。必要时可 作病毒分离。
传染性胰坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis
virus, IPNV)
• 病毒特性 双RNA病毒科,无囊膜,有一层外壳,20面体对 称。基因组含两个线状双股RNA分子
医学微生物学-第9章弧菌属PPT课件
医学微生物学
霍 乱 肠 毒 素 的 作 用 机 制
19.11.2020
医学微生物学
• 所致疾病
——霍乱(甲类法 定传染病02)
传染源:病人、无 症状感染者的粪 便污染的水源或 食品
传染途径:经口 (暴饮暴食者)
19.11.2020
医学微生物学
• 潜伏期:2-3d
• 临床表现:剧烈吐泻、米泔样,每日数十 次,持续2-3天,失水12000ml,严重吐泻 引起水电解质紊乱,脱水酸中毒,肾衰、 循环衰竭、休克、死亡,及时补充液体和 弧菌(多形性),单鞭毛 2 、具有耐盐性(与霍乱弧菌的显著差别),在含 有3.5%NaCl培养基中生长良好,无盐不长,>8% 也不长。 3 、神奈川试验(KP):在高盐培养基上中使人或 兔红细胞发生溶血(β溶血)——耐热性溶血毒素
19.11与.202致0 病性平行(KP+,医学K微生P物-学)。
4. 快速诊断 荧光菌球法,SPA 协同凝集试验
19.11.2020
医学微生物学
• 防治
❖ 加强国境检疫,加强水源及粪便管理 ❖ 及时检出病人,隔离封锁疫区 ❖ 疫苗接种 ❖ 对症治疗,抗菌治疗
19.11.2020
医学微生物学
第二节 副溶血弧菌
嗜盐性弧菌,沿海地区常见,存在于近海海水、 海泥、海产品中,1950年首发于日本大阪,主要引 起食物中毒
怕酸,不耐热
对消毒剂敏感,可用漂白粉处理病人的排泄物或呕吐物。
19.11.2020
医学微生物学
致病性与免疫性
• 致病物质
– 侵袭力 鞭毛:鞭毛运动有利于细菌穿过黏膜表面黏液 菌毛:使细菌定植于小肠
– 霍乱肠毒素——最强烈的致泻毒素 其致病机制与ETEC的LT相似,但作用强烈得多
弧菌
分 类
WHO腹泻控制中心将该菌属为四类
O-1群霍乱弧菌
不典型O-1群霍乱弧菌
非O-1群霍乱弧菌
其他弧菌
致病性
致病物质
定居因子:菌毛(acf、tcpA基因)、鞭 毛、溶血溶细胞蛋白(hlyA基因)、血 凝素(hap基因)、荚膜等 霍乱肠毒素(c为强烈的致泻毒素。
鉴定
根据霍或乱弧菌在各种选择培养基上的特点, 挑选可疑菌落进行鉴定。鉴定以血清学(玻 片凝集)为主,结合形态学、生化反应作出 判断。
鉴定
1) 玻片凝集试验:从分离培养基上挑取可疑菌落于霍乱弧菌 多价诊断血清作玻片凝集试验。诊断血清应稀释成1:321:64的效价使用,立即出现凝集者为阳性,同时设生理盐水
和阳性细菌株对照。
2) 形态学检查:取纯培养物涂片革兰氏染色,观察菌体形态 及染色性。用悬滴法或半固体穿刺法检测动力。
鉴定
3) 生化反应:霍乱弧菌氧化酶试验、靛基质试验、粘丝试验 和霍乱红试验均阳性。 ①粘丝试验:用于测定霍乱弧菌形成粘丝的特性。将0.5%去氧 胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓厚菌液,1min内悬液由 混变清,并变得粘稠,以接种环挑取时可以拉出丝来。霍乱 弧菌古典生物型和El Tor生物型均呈阳性。
鉴定
② 霍乱红试验:出现蔷薇色,为霍乱红试验阳性。由
于霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应,故无特异性。 霍乱弧菌含有色氨酸酶,能分解色氨酸产生吲哚,霍 乱弧菌液能还原硝酸盐为亚硝酸盐,因此当霍乱弧菌 培养在含有硝酸盐成分的蛋白胨水中,所产生的亚硝 酸盐可与吲哚结合成亚硝酸吲哚,滴加浓硫酸即可出 现蔷薇色,称为霍乱红试验阳性)
免 疫 力
病后免疫力不强,可重复感染。
生物学性状
1、形态:弧状、杆状、丝状等多形性,G-,单端单鞭毛
检验微生物学 弧菌科
26
霍乱弧菌
致病物质
*霍乱肠毒素
A亚单位 活性亚单位 ctxA
B亚单位 ctxB
与受体结合,介导A亚单位进入细胞
1A+5B
27
霍乱弧菌
致病机理
B亚单位与小肠粘膜上皮细 胞GM1神经节苷脂受体结 合,介导A亚单位进入细胞
A亚单位裂解为A1和A2两条多 肽,A1亚单位发挥毒性作用
28
霍乱弧菌
致病机理 A1
庆大霉素琼脂平板(含亚碲酸钾)
同双洗
15
16
17
18
霍乱弧菌
生化反应
迟发酵
霍乱红
+
19
霍乱弧菌
抗原结构与分型
O抗原 耐热(100℃2h不被破坏) 特异性高,具有群特异性和型特异性, 是霍乱弧菌分群和分型的基础
H抗原 不耐热 弧菌属共同抗原,特异性低
20
霍乱弧菌
分群、型
O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础
血清型 小川型(AB) 稻叶型(AC) 彦岛型(ABC)
A抗原 + + +
B抗原 + +
C抗原 + +
22
霍乱弧菌
生物分型:二个生物型
O1群根据生物学特性上的差异分为两个生物型
鉴别试验 50U/片多粘菌素B 鸡红细胞凝集试验 羊红细胞溶血试验
V-P Ⅳ组噬菌体裂解 Ⅴ组噬菌体裂解
古典生物型 S + -
14
霍乱弧菌 霍乱弧菌常用培养基
碱性蛋白胨水
增菌6-9h,液体表面大量繁殖形成菌膜
碱性琼脂平板
圆形、较大、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落
硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS)
弧菌科
不耐热的H抗原
为共同抗原
耐热的O抗原
具有群特异性和型特异性,是霍乱弧菌分群和 分型的基础
分型
根据O抗原的不同,现有155个血清群 O1群、O139群引起霍乱
O139血清群的抗原编码基因中出现了36kb的新基因 缺少了O1群高分子量的O抗原侧链 与O1群抗血清无交叉反应,但可与O22血清群和 O155血清群产生交叉反应,遗传学特征和毒力基因 与O1群相似。
培养特性
TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小,蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落 普通血平板: 不溶血或只产生α溶血 从腹泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻(wagatsuma)琼脂上产生 β溶血现象,称为神奈川现象(Kanagawa phenomenon, KP) 嗜盐性选择平板: 较大,圆形,隆起,稍浑浊,半透明或不透 明,无粘性
(二)生物学特性
1. 形态
革兰阴性杆菌,有鞭毛(极单毛),无荚膜, 无芽胞
2. 抗原结构
耐热的菌体(O)抗原,具有群特征性,副溶 血性弧菌的O抗原有13种 鞭毛抗原,不耐热,无型特异性
3.培养特性
营养要求不高 在无盐培养基上不能生长,最适合生长的 氯化钠浓度为3.5%,超过8%不能生长 最适pH为7.7~8.0,但pH9.5时仍能生长, 最适生长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜
用于霍乱弧菌的鉴别试验
霍乱红试验 霍乱弧菌有色氨酸酶和硝酸盐还原能力。 霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应 粘丝试验(String Test) 弧菌属细菌除副溶血性弧菌部分菌株外,均有此反应 O/129敏感试验 O/129 (2,4-Diamino-6,7-Diisopropylpteridine,2,4二氨基 -6,7-二异丙基喋啶) 10μg及150μg纸片周围出现任何大小的抑菌环均为敏感。 O1群和非O1群霍乱弧菌均敏感。 但已有对O/129耐药的菌株出现。用此试验作鉴定时,需特别谨 慎。需结合其他试验结果如耐盐生长试验等综合考虑
弧菌科和气单胞菌科ppt课件
2021/5/11
1
分类
• 弧菌属
霍乱弧菌
弧菌科
弧菌属
副溶血弧菌
拟态弧菌
发光杆菌属
······
O1群霍乱弧菌 O139群霍乱弧菌 非O1群霍乱弧菌
2021/5/11
2
霍乱弧菌血清群、型
是否与 O1 抗血清凝集
O1 群
根据 O 抗原组成不同 (O1 群)
稻叶型 (Inaba)
-
-
2021/5/11
26
检验方法
鉴定 l)初步鉴定:与O1群和O139群抗血清(多价和单 价)凝集,菌落和菌体形态、氧化酶试验等作 出初步报告。 2)最后鉴定:根据纯培养后全面生化反应、血 清学分群及分型。
2021/5/11
27
检验方法
鉴别试验:
霍乱红试验
粘丝试验
O/129敏感试验 鸡红细胞凝集试验
生物学性状 (纯培养革兰染色)
革兰阴性,弯曲 弧形或逗点状, 首尾相接鱼群 样平行排列
单端极鞭毛,有 普通菌毛和性 菌毛
2021/5/11
霍乱弧菌革兰染色
18
生物学性状 (纯培养扫描电镜)
描述:弯曲弧形或逗点状
霍乱弧菌的扫描电镜图(金属镀膜)
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生物学性状 (电镜)
霍乱弧菌的鞭毛(↑)和它可溶解的鞘膜(↑↑)
+
-
第 IV 组噬菌体裂解试验
+
-
第 V 组噬菌体裂解试验
-
+
2021/5/11
4
临床意义(所致疾病)
• 肠道内感染(霍乱) • 肠道外感染(胃肠炎、伤口感染、中耳
微生物学--弧菌
分离培养与鉴定
分离培养 粪便或肛拭标本:直接接种改良Campy-BAP
选择平板 血、脑脊液标本:布氏肉汤增菌后转种分离培
养基 微氧环境培养 不同细菌培养温度不同
Key Points
革兰阴性逗点状或S形的菌,运动活泼 微需氧:最佳生长环境为含5%O2、10% CO2、
85%N2 最适生长温度因菌种而异 营养要求高 氧化酶、触酶阳性,不能利用、不发酵各种糖类,
(3)快速诊断:O1和O139抗体做玻片凝集
(4)霍乱毒素的测定
二 分离培养和鉴定
初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水,经4~6小时 液体表面大量繁殖,形成菌膜。
二 分离培养和鉴定
TCBS(硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板)
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成 发酵蔗糖的较大的黄色菌落
含亚碲酸钾的培养基:4号琼脂 庆大霉素琼脂
临床意义 (致病因素)
1.侵袭力
进入小肠,鞭毛、菌毛、分泌黏液,O139群有荚膜
穿过小肠黏膜表面黏液层
黏附于小肠黏膜上皮细胞刷 状缘的微绒毛上大量繁殖
临床意义 (致Βιβλιοθήκη 因素)2.霍乱肠毒素 MW:80000-90000 A1:活性亚单位 21812 A2:连接亚单位 5000 B:结合亚单位
霍乱弧菌肠毒素(CE, cholera enterotoxin)
鉴
定
定
生物学特性(培养特征)
需氧或兼性厌氧 营养要求不高,嗜盐(无盐不生长,最适盐浓度
3%) TCBS上形成绿色菌落
副溶血弧菌在TCBS 上菌落
鉴定特征
革兰阴性弧菌或杆菌,动力(+) 氧化酶(+),临床分离株脲酶常(+) TCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验 神奈川现象(+) 各种生化试验 TDH和TRH的检测:毒素和基因检测
兽医微生物学重难点 -(二)细菌学各论
兽医微生物学各章重难点第二篇细菌学各论第7章革兰阳性球菌葡萄球菌属与链球菌属是最具代表性的革兰阳性菌。
金黄色葡萄球菌可致动物乳腺炎等疾病,α溶血素、凝固酶、耐热核酸酶等均是其重要的毒力因子。
它的SPA特殊结构不仅具有抗吞噬活性,而且被广泛用于免疫学诊断。
链球菌属的若干成员与乳腺炎、败血症等有关,根据多糖抗原及溶血特性可将其分类;其胞壁的M蛋白等结构及产生的溶血素毒素等与致病性有关。
猪链球菌2型不仅对猪有较强的致病性,也是人类的机会致病菌。
形态观察对这两属细菌的鉴定有重要意义,溶血作用往往需作CAMP试验强化,有时还需接种动物以证实其致病性。
肠球菌属原先归于链球菌属,近年来发现某些成员对动物有致病性。
第8章肠杆菌科(Enterobacteriaceae)肠杆菌科广泛分布,具有重要致病意义。
埃希菌属的血清型、肠毒素、志贺毒素与菌毛粘附素等毒力因子、毒力岛以及致病机理等在革兰阴性菌中具有代表性,有关研究推动了微生物学的发展。
沙门菌属中最常见的为肠道沙门菌,其血清型繁多,抗原结构有独特的表述形式,致病类型亦有专嗜、偏嗜与泛嗜的差异。
肠杆菌科的检验有重要的实际意义,检验手段主要是依据生化特性、血清学试验、PCR等。
有常规疫苗及基因工程疫苗可用于免疫预防。
耶尔森菌属中的鼠疫、假结核及小肠结肠炎耶尔森菌三种是重要的病原菌。
克雷伯菌属及变形杆菌属的某些成员有一定致病性,迟缓爱德华菌是人及水生动物等共患的病原菌,值得重视。
第9章弧菌科(Vibrionaceae)弧菌属成员众多,其中副溶血弧菌及鳗弧菌具有代表性。
副溶血弧菌常污染海产品导致人类食物中毒,具有公共卫生意义。
鳗弧菌等弧菌是海水养殖鱼类的致病菌。
气单胞菌可分为运动性与非运动性两大类,前者分布广泛,是较常见的致病菌,主要引致淡水养殖鱼类败血症及人类腹泻等,最常见的为嗜水气单胞菌,目前分为三个亚种,其致病株具有胞外蛋白酶、溶血毒素、S蛋白等毒力因子。
非运动性气单胞菌的代表为杀鲑气单胞菌,是冷水鱼的重要致病菌之一。
9弧菌科和气单胞菌科
➢ Aeromonas is the only family within Aeromonaceae and is pathogenic for humans. Aeromonas spps need to be identified from other oxidase-positive fermenters, such as Vibrio and Plesuimonas spps.
第九章 弧菌科和气单胞菌科 Vibrionaceae and Aeromonas
KEY POINTS
➢ The genus Vibrio is calssified in the family Vibrionaceae, and it is the type genus for the family.
和O139群引起霍乱,O2~O138血清群可引起人类的胃肠炎,不 引起霍乱流行 ➢ V. cholerae O1的O抗原由A、B、C三种抗原成分组成,其中A是 O1群的群特异性抗原,通过三种抗原成分的不同组合可分成3个 型:AB构成小川型,AC构成稻叶型,ABC构成彦岛型
是否与 O1 抗血清凝集
O1 群
根据 O 抗原组成不同 (O1 群)
稻叶型 (Inaba)
AC
弧菌科及检验
弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。
弧菌科包括4个菌属,即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。
前三属细菌均可引起人类感染,发光杆菌属对人无致病性。
一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛,以水中最多。
世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类:①O1群霍乱弧菌;②不典型01群霍乱弧菌;③非01群霍乱弧菌;④其他弧菌(副溶血性弧菌)。
对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌,分别引起霍乱和食物中毒。
(一)霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌,该病为一种急性烈性肠道传染病,发病急,传染性强,死亡率高。
1.生物学特性(1)形态染色:本菌呈弧形或逗点状,无芽胞,有菌毛,有些菌株有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛,运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察,可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检,可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
(2)培养特性:需氧或兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好。
耐碱不耐酸。
可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水中,经35℃培养6~9h,在液体表面大量繁殖形成菌膜,可达快速增菌的目的。
碱性琼脂平板上,经培养18~24h,形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS)上,形成较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板上,因还原亚碲酸钾成金属碲,使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。
(3)生化反应:能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖,产酸不产气。
迟缓发酵乳糖,不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质,霍乱红反应(即亚硝基靛基质试验)阳性。
(4)抗原结构与分型:霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。
H抗原为弧菌属所共有,特异性低。
O抗原特异性高,具有群特异性和型特异性,是分群和分型的基础。
弧菌科
+ 致病物质:
KP阳性株产生耐热直接溶血素(TDH)和耐 热相关溶血素(TRH)两种致病因子,都具有 细胞毒性 和 心脏毒性,与人或兔红细胞膜上的 神经节苷脂结合引起溶血,致病性与溶血能力 呈平行关系。
+ 所致疾病:
食入被副溶血性弧菌污染的海产品或盐渍食 品,引起食物中毒。潜伏期5—72h,多数为 24小时左右,起病急骤,常有腹痛、腹泻、呕 吐、低热 ,粪便呈水样或糊状,较少为粘液血 便。
致病物质
1.霍乱肠毒素choleratoxin :
A亚单位 ctxA B亚单位 ctxB
活性亚单位
与受体介导A亚单位进入细胞
1A+5B
致病机理
A亚单位裂解为A1和A2两条多 肽,A1亚单位发挥毒性作用
A1 G蛋白 Gs 活化腺苷酸环化酶
ATP
cAMP
胞内cAMP↑,导致肠腺上 皮细胞分泌功能亢进,分泌 Na+、K+、HCO3-和水,大 量水和电解质在肠腔堆积, 引起剧烈腹泻与呕吐
标本
血标本
分离培养 (BAP、MAC)
增菌
氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验
+
+ +
+
+
+ ElTor型抵抗力较古典型强
+ 在水中存活时间长,1-3周 + 怕酸耐碱,常用消毒剂敏感
+ 对庆大霉素耐受
+ 形态变异
多次传代可失去典型形态而成为杆状 + 菌落变异 S型→R型 + 血清型别变异 + 毒力变异
致病物质: 霍乱肠毒素 导致小肠上皮细胞分泌功能亢进,分泌大量肠 液。 鞭毛、菌毛及其他毒力因子 所致疾病: + 经肠道传染,引起烈性肠道传染病--霍乱,为 甲类传染病。 + 典型病人粪便呈“米泔水”样 + 病后可获得牢固免疫,以SIgA为主。 + 我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。
[病原生物学] 第9章 弧菌属
(一)生物学特性
3.抗原结构
有H抗原和O抗原,根据O抗原不同,分为 155个血清群,引起霍乱的是O1群和 O139群,其他血清群可引起人类胃肠炎 等疾病,
O1血清群的霍乱弧菌包括两个生物型,即 古典生物型与El tor生物型。
根据O抗原的成分不同,O1群霍乱弧菌又 进一步分为3个血清型。
(一)生物学特性
1.致病性
霍乱弧菌主要通过污染的水源或饮食经口 传染。在小肠粘膜局部繁殖和产生霍乱肠 毒素使肠液过度分泌,使大量体液和电解 质进入肠腔而发生严重的腹泻及呕吐,由 于大量脱水和失盐,可发生代谢性酸中毒, 血循环衰竭,甚至休克或死亡。
(二)致病性与免疫性
2.免疫性
感染霍乱弧菌后可获得牢固免疫力,再感 染者少见,以特异性体液免疫为主。一般 认为局部 SlgA可在肠粘膜与病菌之间形成 免疫屏障,有阻断粘附和中和毒素的作用。
1854年伦敦
• 616人死亡; • 127人仅在三天内死亡 • 瘴气 • Ghost map
水泵
• John Snow
病原生物学
弧菌属
一、霍乱弧菌(Vibrio)
(一)生物学特性
1.形态与染色 革兰染色阴性,弯曲呈弧 型或逗点状,菌体极端有一根单鞭毛,运 动活泼,鱼群状排列,有菌毛,无芽胞。
4.及时补充液体和电解质,应用抗 菌药物如链霉素、氯霉素、强力霉素、 复方SMZ-TMP等。
二、副溶血性弧菌
1、生物学特性
革兰染色阴性,兼性厌氧菌,为多形态球 杆菌或稍弯曲弧菌。菌体一端有单根鞭毛, 运动活泼。
本菌有嗜盐性,最适宜的培养基为含盐 2%~4%。
二、副溶血性弧菌
2、致病性
人因进食未煮熟的海产品或含有副溶血性 弧菌的盐腌的食物而感染。
第9章 弧菌属
–检疫传染病,是指鼠疫、霍乱、黄热病以及国务院 确定和公布的其他传染病。
–监测传染病,由国务院卫生行政部门确定和公布。
History and spread of epidemic cholera
• Cholera has smoldered in an endemic fashion on the Indian subcontinent for centuries.
– First, the ratio of cases to carriers is much less than in cholera due to classic biotypes (1: 30-100 for El Tor vs. 1: 2 - 4 for "classic" biotypes).
• There are references to deaths due to dehydrating diarrhea dating back to Hippocrates and Sanskrit writings.
• The mode of transmission of cholera by water was proven in 1849 by John Snow, a London physician.
第九章 弧菌属
(Vibrio)
第一节 霍乱弧菌 第二节 副溶血性弧菌
• 弧菌属(Vibrio)细菌是一大群菌体短小,弯 曲成弧形、一端有单鞭毛的革兰阴性菌,运 动极活泼。
• 分布广泛,多存在于水中。 • 对人有致病性主要为霍乱弧菌(V. cholerae)
和副溶血弧菌(V. parahaemolyticus )。
• O antigens do distinguish strains of V. cholerae into 139 known serogroups.
弧菌科及检验
最适生长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜
TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小,蔗糖不发酵而呈蓝绿色 菌落
一般血平板: 不溶血或只产生α溶血 从腹泻患者中分离到旳菌株95%以上在我妻琼脂上产生β
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O139霍乱弧菌病原体起源
EVC流行株O抗原变异 ? 非O1霍乱弧菌获产毒基因 ?
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全国霍乱O139流行情况(1)
1992年在印度、孟加拉首次发觉霍乱O139后, 短期内在这两个国家造成流行,发病人数高 达10多万例,并在几年间已传入亚洲、欧洲、 美洲等20多种国家
霍乱能引起机体剧烈吐泻、失水、电介质紊乱以 致死亡
病死率高下与病情轻重以及医疗条件、急救旳时 效性有关。病情重、医疗条件差、急救不及时病 死率可高达20%-50%
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霍乱预后及危害
霍乱属烈性传染病,一旦暴发和流行,累及 面广,病死率高,对人民身体健康以及国民 生活、生产秩序、社会稳定、投资环境、对 外贸易等造成直接影响
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检验措施-显微镜检验
涂片染色: -标本直接涂片革兰染色,注意形态、排列
动力观察: -压滴法或暗视野镜检,注意运动方式
制动试验: -诊疗血清与菌体结合,动力消失
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形态染色
革兰阴性 弧形或逗点状 单鞭毛,运动呈“穿梭样”或“流星样” 无芽胞,无荚膜(O139有薄旳荚膜) 在新鲜粪便中成“鱼群样”排列
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鉴定
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第一节 弧菌属(Vibrio) 弧菌属(
是一大群菌体短小,弯曲成弧形或逗号状的G- 弧形或 是一大群菌体短小,弯曲成弧形 逗号状的 一端单鞭毛。 菌,一端单鞭毛。 广泛分布于自然界,以水中最多,也见于人与动 广泛分布于自然界,以水中最多, 物的消化道。 物的消化道。 本菌属目前有36个种 有的有致病性。 个种, 本菌属目前有36个种,有的有致病性。其中至少 12个种与人类感染有关 最重要的是: 个种与人类感染有关。 有12个种与人类感染有关。最重要的是: 霍乱弧菌 副溶血弧菌 对禽类有致病性的: 对禽类有致病性的:麦氏弧菌 此外,有许多感染水生动物致病的弧菌。 此外,有许多感染水生动物致病的弧菌。
形态及培养特性
菌株短杆状,有时也可呈双球状或丝状。 菌株短杆状,有时也可呈双球状或丝状。 在普通培养基上即可生长,嗜温菌于25℃ 48h长 在普通培养基上即可生长,嗜温菌于25℃、48h长 成光滑型2 3mm的菌落 的菌落。 成光滑型2-3mm的菌落。 在血平板上产生β溶血。 在血平板上产生β溶血。 在麦康凯琼脂上生长良好,多数不发酵乳糖。 在麦康凯琼脂上生长良好,多数不发酵乳糖。 在弧菌选择培养基TCBS上或6%NaCl中不生长。 TCBS上或6%NaCl中不生长 在弧菌选择培养基TCBS上或6%NaCl中不生长。 VBNC状态 活的非可培养状态, VBNC状态:活的非可培养状态,是一种休眠状 状态: 其菌体缩小成球状,耐低温及不良环境, 态,其菌体缩小成球状,耐低温及不良环境,接 种培养基在常规条件下不生长。 种培养基在常规条件下不生长。一旦温度回升及 获得所需的营养条件,又可恢复到正常状态, 获得所需的营养条件,又可恢复到正常状态,重 新具有致病力。 新具有致病力。
微生物学诊断
未污染病料 血平板、麦康凯、 血平板ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ麦康凯、TSA 污染病料 选择培养基
涂片镜检: 杆菌 涂片镜检:G-杆菌 生化试验 致病性鉴定
确诊
致病性及毒力因子
气单胞菌有广泛的致病性,感染包括冷血动物在 气单胞菌有广泛的致病性, 内的多种动物,如鱼类、禽类及哺乳类, 内的多种动物,如鱼类、禽类及哺乳类,引起败 血症或皮肤溃疡等局部感染。 血症或皮肤溃疡等局部感染。 是水生动物,尤其是鱼类最常见的致病菌。运动 是水生动物,尤其是鱼类最常见的致病菌。 性气单胞菌在水温高的夏季可造成鱼类细菌性败 血症暴发流行。 血症暴发流行。 人类感染运动性气单胞菌引致急性胃肠炎等。 人类感染运动性气单胞菌引致急性胃肠炎等。 嗜水气单胞菌还见于人类败血症、腹膜炎、出血 嗜水气单胞菌还见于人类败血症、腹膜炎、 性尿综合征等病例。 性尿综合征等病例。
二、副溶血弧菌
于1950年从日本一次暴发性食物中毒时分离发现。 1950年从日本一次暴发性食物中毒时分离发现 年从日本一次暴发性食物中毒时分离发现。 本菌存在于近海海水、海底沉积物和鱼类、贝壳 本菌存在于近海海水、海底沉积物和鱼类、 类等海产品中。主要是引起食物中毒,特别是日 类等海产品中。主要是引起食物中毒, 东南亚、美国及我国台湾地区多见, 本、东南亚、美国及我国台湾地区多见,也是大 陆沿海地区食物中毒中最常见的一种病原菌。 陆沿海地区食物中毒中最常见的一种病原菌。 本菌嗜盐 培养基中含3.5%NaCl最为适宜 嗜盐, 最为适宜, 本菌嗜盐,培养基中含3.5%NaCl最为适宜,无盐 则不能生长,但当NaCl浓度大于 时也不能生长 浓度大于8%时也不能生长。 则不能生长,但当NaCl浓度大于8%时也不能生长。 不耐热,90℃ 1min可杀死 不耐酸,1%醋酸或 可杀死; 不耐热,90℃ 1min可杀死;不耐酸,1%醋酸或 50%食醋中1min 死亡。 50%食醋中 食醋中1min 死亡。
第二节 气单胞菌属(Aeromomas) 气单胞菌属(
本属细菌广泛存在于淡水、污水及土壤中,某些 本属细菌广泛存在于淡水、污水及土壤中, 种的致病菌株对人和动物有致病性,有些是环境 种的致病菌株对人和动物有致病性, 及动物正常菌群的组成部分。 及动物正常菌群的组成部分。 16SrRNA等序列分析表明 16SrRNA等序列分析表明,本属菌的分类地位实 等序列分析表明, 际上介于弧菌科与肠杆菌科之间, 际上介于弧菌科与肠杆菌科之间,已建议独立为 气单胞菌科。 气单胞菌科。 分类:1984年确定的成员只有 年确定的成员只有4 嗜水气单胞菌、 分类:1984年确定的成员只有4种:嗜水气单胞菌、 豚鼠气单胞菌、温和气单胞菌及杀鲑气单胞菌。 豚鼠气单胞菌、温和气单胞菌及杀鲑气单胞菌。 此后,不断发现新种,目前至少确认15种 此后,不断发现新种,目前至少确认15种。分为 两大类:运动性/嗜温性: 两大类:运动性/嗜温性:以嗜水气单胞菌为代表 非运动性/嗜冷性: 非运动性/嗜冷性:以杀鲑气单胞菌为代表
第九章 弧菌科 Vibrionaceae
弧菌科是一类G 短杆菌,弧形或短杆状, 弧菌科是一类G- 短杆菌,弧形或短杆状, 无芽胞,大多数具有端鞭毛 能运动。 具有端鞭毛, 无芽胞,大多数具有端鞭毛,能运动。 兼性厌氧,生长温度35℃ 37℃ 兼性厌氧,生长温度35℃-37℃。生长时需 Na+。 均能发酵葡萄糖 多能利用铵盐作为氮源。 发酵葡萄糖, 均能发酵葡萄糖,多能利用铵盐作为氮源。 氧化酶和触酶均为( 氧化酶和触酶均为(+)。 主要存在于水中(淡水、海水), ),有水产 主要存在于水中(淡水、海水),有水产 动物的病原菌和人的病原菌。 动物的病原菌和人的病原菌。 目前, 个属, 目前,本科有 5 个属,对公共卫生及兽医 学有意义的主要是弧菌属 气单胞菌属。 弧菌属和 学有意义的主要是弧菌属和气单胞菌属。
• G- ,逗点状,1 根鞭毛,有菌毛。 逗点状, 根鞭毛,有菌毛。 • 病人粪便作悬滴标本,可见“鱼群样穿梭”。 病人粪便作悬滴标本,可见“鱼群样穿梭” • 无芽胞,无荚膜。 无芽胞,无荚膜。
一、霍乱弧菌
是引起人类烈性传染病霍乱的病原体,1817年以 是引起人类烈性传染病霍乱的病原体,1817年以 已发生过7次世界性霍乱大流行。 来,已发生过7次世界性霍乱大流行。 本菌可分泌霍乱肠毒素 本菌可分泌霍乱肠毒素,是目前已知的致泻毒素 霍乱肠毒素, 中最为强烈的毒素,是肠毒素的典型代表。 中最为强烈的毒素,是肠毒素的典型代表。 此外,鞭毛、 此外,鞭毛、菌毛及其他一些毒素和酶均与致病 性有关。 性有关。 霍乱为我国甲类法定传染病。 霍乱为我国甲类法定传染病。
致病性气单胞菌具有多种毒力因子: 致病性气单胞菌具有多种毒力因子:
毒素和酶 毒素:又称为气溶素 气溶素, HEC毒素 具有溶血性、 毒素, 毒素:又称为气溶素,或HEC毒素,具有溶血性、 细胞毒性及肠致病性。 穿孔毒素。 细胞毒性及肠致病性。属穿孔毒素。 胞外蛋白酶:重要的毒力因子 胞外蛋白酶: 金属蛋白酶: 金属蛋白酶:耐热 丝氨酸蛋白酶: 丝氨酸蛋白酶:不耐热 黏附素: 黏附素: S 层蛋白 4型菌毛 外膜蛋白。 外膜蛋白。 载铁体等 载铁体等