弧菌科及检验PPT课件
临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十五章_弧菌科及检验
第十五章弧菌科及检验本章内容一、弧菌属（一）霍乱弧菌（二） O139 型霍乱弧菌（三）副溶血性弧菌（四）其他弧菌二、气单胞菌属与邻单胞菌属（一）气单胞菌属（二）邻单胞茵属革兰阴性直杆菌或弧菌有极端鞭毛氧化酶阳性动力阳性发酵葡萄糖弧菌属——分类根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：① O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌 : 能被 O1群血清凝集但不产生致病毒素；③非 O1 群霍乱弧菌；④其他弧菌：包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。
大多数为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。
霍乱弧菌——生物学特性形态与结构形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。
人工培养后呈杆状。
染色： G-。
特殊结构：有菌毛，无芽胞，部分有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。
·培养特性营养要求：不高，可无盐生长。
气体环境：兼性厌氧。
菌落特征：耐碱不耐酸。
pH8.5 的碱性蛋白胨水：培养6～ 9h，增菌形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖琼脂平板（ TCBS）：较大黄色菌落。
亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。
·抗原·变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。
霍乱弧菌——微生物检验及鉴定·标本采集：以粪便（米泔水样便）为主，尽可能在用药之前采取。
及时接种适宜培养基。
常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文- 腊二氏保存液和卡 - 布运送培养基等。
·形态学检查：①动力观察：米泔水样粪便悬滴观察可见流星或穿梭状运动的细菌。
②制动试验：加霍乱多价诊断血清后弧菌凝集，运动停止。
③涂片染色：革兰染色，观察革兰染色阴性呈鱼群状排列的弧菌。
弧菌和弯曲菌PPT课件
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二、致病性和免疫性
1．致病物质 （1） 鞭毛、菌毛、粘液素酶
（2） 霍乱肠毒素（cholera enterotoxin） 霍乱肠毒素本质是蛋白质，不耐热。对蛋
白酶敏感而对胰蛋白酶抵抗。 该毒素属外毒素，具有很强的抗原性。
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1个A亚单 毒性
霍位
单位
乱
肠
毒
素 5个B亚单 结合
位（4～6） 单位
－
＋
＋ ９０％以上为阳性；－ ９０％以上为阴性；ｄ １０－８９％阳性
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（五）变异性：
形态变异
弧型→直杆状→ 多形
霍
乱 菌落变异
弧 菌 的
溶血性变异 （ El Tor型）
变 异 毒力变异
性
S ←→R←→L 溶血性 ←→非溶血性
传代
强毒株←→ 弱毒株 ←→无毒株
血清型别变异 小川型←→ 稻叶型
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10
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• 常用的选择培养基为硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖 琼脂平板（TCBS），霍乱弧菌在其中可形成较大的菌 落，因发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色。
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（三）生化反应
• 两个生物型的霍乱弧菌都能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、 麦芽糖，产酸不产气。迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。
• 噬菌体分型： 对噬菌体的敏感性进行分 型，其中较为实用的是第Ⅳ组和第Ⅴ组 噬菌体。
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19
霍乱弧菌两个生物型的鉴别
性状
古典型
E1 Tor 型
溶血（1%绵羊红细胞）
－
d
血凝（2.5%鸡红细胞）
检验微生物学 弧菌科
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霍乱弧菌
致病物质
*霍乱肠毒素
A亚单位 活性亚单位 ctxA
B亚单位 ctxB
与受体结合，介导A亚单位进入细胞
1A+5B
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霍乱弧菌
致病机理
B亚单位与小肠粘膜上皮细 胞GM1神经节苷脂受体结 合，介导A亚单位进入细胞
A亚单位裂解为A1和A2两条多 肽，A1亚单位发挥毒性作用
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霍乱弧菌
致病机理 A1
庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）
同双洗
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16
17
18
霍乱弧菌
生化反应
迟发酵
霍乱红
+
19
霍乱弧菌
抗原结构与分型
Ｏ抗原 耐热(100℃2h不被破坏) 特异性高，具有群特异性和型特异性， 是霍乱弧菌分群和分型的基础
Ｈ抗原 不耐热 弧菌属共同抗原，特异性低
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霍乱弧菌
分群、型
O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础
血清型 小川型（AB） 稻叶型（AC） 彦岛型（ABC）
A抗原 + + +
B抗原 + +
C抗原 + +
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霍乱弧菌
生物分型：二个生物型
O1群根据生物学特性上的差异分为两个生物型
鉴别试验 50U/片多粘菌素B 鸡红细胞凝集试验 羊红细胞溶血试验
V-P Ⅳ组噬菌体裂解 Ⅴ组噬菌体裂解
古典生物型 S + -
14
霍乱弧菌 霍乱弧菌常用培养基
碱性蛋白胨水
增菌６-９ｈ，液体表面大量繁殖形成菌膜
碱性琼脂平板
圆形、较大、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落
硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）
(完整PPT)弧菌
弧菌科共同特征
革兰阴性菌，短小弯曲弧状,无芽胞， 多数有鞭毛、有菌毛。
需氧兼性厌氧 具有一端单一鞭毛、运动迅速
氧化酶＋
发酵葡萄糖产酸不产气,许多菌株生长 需要2%~3%氯化钠
弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中 最为多见。其中有一些种对人类致病。
2020/2/5
2
3.分离培养与鉴定
(1)增菌培养 标本接种1%NaCl碱性胨水或4%NaCl蛋白胨水 中进行选择性增菌
(2)分离培养 标本直接接种或增菌后接种TCBS平板或嗜盐菌 选择平板 TCBS平板：绿色或蓝绿色菌落，不透明，直径 1~2mm微突起菌落 嗜盐菌选择性平板：较大、圆形、隆起，稍混 浊、半透明或不透明、无粘性菌落
耐热直接溶血素相关溶血素（TRH），生物学特性与 TDH相似
生物学特性
1. 形态
革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛），无荚膜， 无芽胞
2. 抗原结构
耐热的菌体（O）抗原，具有群特征性，副溶 血性弧菌的O抗原有13种
鞭毛抗原，不耐热，无型特异性
3．培养特性
营养要求不高 在无盐培养基上不能生长，最适合生长的
动力观察： -压滴法或暗视野镜检，注意运动方式
制动试验： -诊断血清与菌体结合，动力消失
2020/2/5
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形态染色
革兰阴性 弧形或逗点状 单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样” 无芽胞，无荚膜（O139有薄的荚膜） 在新鲜粪便中成“鱼群样”排列
2Hale Waihona Puke 20/2/527霍乱弧菌电镜照片
2020/2/5
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作用机制示意图
霍乱流行病学特点（1）
霍乱（O139与O1群霍乱），具有传染性强、传播 迅速、易出现暴发和流行特征；世界卫生组织将 其纳入霍乱范畴，我国将它列入法定报告的甲类 烈性传染病
微生物学--弧菌
分离培养与鉴定
分离培养 粪便或肛拭标本：直接接种改良Campy-BAP
选择平板 血、脑脊液标本：布氏肉汤增菌后转种分离培
养基 微氧环境培养 不同细菌培养温度不同
Key Points
革兰阴性逗点状或S形的菌,运动活泼 微需氧：最佳生长环境为含5%O2、10% CO2、
85%N2 最适生长温度因菌种而异 营养要求高 氧化酶、触酶阳性，不能利用、不发酵各种糖类，
（3）快速诊断：O1和O139抗体做玻片凝集
（4）霍乱毒素的测定
二 分离培养和鉴定
初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水，经4～6小时 液体表面大量繁殖，形成菌膜。
二 分离培养和鉴定
TCBS（硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板）
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成 发酵蔗糖的较大的黄色菌落
含亚碲酸钾的培养基：4号琼脂 庆大霉素琼脂
临床意义 (致病因素)
1.侵袭力
进入小肠，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有荚膜
穿过小肠黏膜表面黏液层
黏附于小肠黏膜上皮细胞刷 状缘的微绒毛上大量繁殖
临床意义 (致Βιβλιοθήκη 因素)2.霍乱肠毒素 MW：80000-90000 A1:活性亚单位 21812 A2:连接亚单位 5000 B：结合亚单位
霍乱弧菌肠毒素（CE, cholera enterotoxin）
鉴
定
定
生物学特性（培养特征）
需氧或兼性厌氧 营养要求不高，嗜盐（无盐不生长,最适盐浓度
3%） TCBS上形成绿色菌落
副溶血弧菌在TCBS 上菌落
鉴定特征
革兰阴性弧菌或杆菌，动力（＋） 氧化酶（＋），临床分离株脲酶常（＋） TCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验 神奈川现象(+) 各种生化试验 TDH和TRH的检测：毒素和基因检测
微生物检验第十五章 弧菌科及检验讲义
第十五章弧菌科及检验本章内容一、弧菌属（一）霍乱弧菌（二）O139型霍乱弧菌（三）副溶血性弧菌（四）其他弧菌二、气单胞菌属与邻单胞菌属（一）气单胞菌属（二）邻单胞茵属革兰阴性直杆菌或弧菌有极端鞭毛氧化酶阳性动力阳性发酵葡萄糖弧菌属——分类根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌:能被O1群血清凝集但不产生致病毒素；③非O1群霍乱弧菌；④其他弧菌：包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。
大多数为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。
霍乱弧菌——生物学特性形态与结构形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。
人工培养后呈杆状。
染色：G-。
特殊结构：有菌毛，无芽胞，部分有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。
·培养特性营养要求：不高，可无盐生长。
气体环境：兼性厌氧。
菌落特征：耐碱不耐酸。
pH8.5的碱性蛋白胨水：培养6～9h，增菌形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。
亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。
·抗原·变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。
·抵抗力：对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。
但耐碱力较强。
霍乱弧菌——微生物检验及鉴定·标本采集：以粪便（米泔水样便）为主，尽可能在用药之前采取。
及时接种适宜培养基。
常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文-腊二氏保存液和卡-布运送培养基等。
·形态学检查：①动力观察：米泔水样粪便悬滴观察可见流星或穿梭状运动的细菌。
②制动试验：加霍乱多价诊断血清后弧菌凝集，运动停止。
③涂片染色：革兰染色，观察革兰染色阴性呈鱼群状排列的弧菌。
霍乱弧菌实验室检验技术PPT医学课件
快速诊断初步报告
1、快诊断实验阳性者同时涂片染色和悬 滴法观察，如镜检为革兰染色阴性弧菌 或悬滴细菌呈“鱼群穿梭样”运动，氧 化酶试验阳性，可作初诊报告。为开展 疫情处理提供依据；
2024/1/24
制动试验
暗视野/相差显微镜直接镜检，水样便滴 在玻片上，可见流星状动力的细菌；当 加入01/0139免疫血清后，运动停止即凝 集成块，根据这种特殊动力和制动试验， 可提早做出初步诊断。
注意：免疫血清使用浓度1：64，并尽可 能不加防腐剂
2024/1/24
胶体金免疫层析快诊
采用胶体金免疫层析双抗体夹心法， 检测标本中霍乱弧菌。以胶体金作 为标记物，交联抗霍乱弧菌单克隆 抗体，与样品中的霍乱弧菌结合。 形成双抗体夹心一步法，呈现出目 测可见的红色条带，显色程度与抗 原含量成正比。
霍乱实验室检测技术
2024/1/24
内容
一、霍乱概述 二、霍乱病原学 三、霍乱弧菌常规检验 四、霍乱弧菌的快速诊断 五、霍乱弧菌的噬菌体-生物分型 六、霍乱菌株的管理、保存与上送
2024/1/24
一、霍乱概述
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌 （V．cholerae）引起的急性肠道传染 病，发病急、传播速度快、波及范 围广、危害严重的甲类传染病。
增菌/二次增菌分离培养 所有粪便标本都 应接种碱性蛋白胨水培养基，放37℃增 菌6～8h后，从菌膜下表层取一接种环培 养物，划线接种于强选择性碱性琼脂和 TCBS琼脂平板各两个。必要时进行二次 增菌
2024/1/24
疑似菌落初步鉴定：
每个碱性琼脂、TCBS琼脂平板上各挑取 5个以上(少于5个的全部挑取)疑似菌落接 种于营养琼脂平板/营养琼脂斜面或克氏 双糖置37℃18-24h纯培养(即每份样品至 少从2个分离平板上获得约10株可疑菌落 菌株)，取斜面纯培养物进行血清鉴定、 并涂片进行革兰氏染色及氧化酶试验等。
弧菌科及检验
弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。
弧菌科包括4个菌属，即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。
前三属细菌均可引起人类感染，发光杆菌属对人无致病性。
一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛，以水中最多。
世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型01群霍乱弧菌；③非01群霍乱弧菌；④其他弧菌（副溶血性弧菌）。
对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。
（一）霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。
1.生物学特性（1）形态染色：本菌呈弧形或逗点状，无芽胞，有菌毛，有些菌株有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
（2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。
耐碱不耐酸。
可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水中，经35℃培养6～9h，在液体表面大量繁殖形成菌膜，可达快速增菌的目的。
碱性琼脂平板上，经培养18～24h，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）上，形成较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板上，因还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。
（3）生化反应：能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。
迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。
（4）抗原结构与分型：霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。
H抗原为弧菌属所共有，特异性低。
O抗原特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。
弧菌科和气单胞菌科ppt课件
2021/5/11
1
分类
• 弧菌属
霍乱弧菌
弧菌科
弧菌属
副溶血弧菌
拟态弧菌
发光杆菌属
······
O1群霍乱弧菌 O139群霍乱弧菌 非O1群霍乱弧菌
2021/5/11
2
霍乱弧菌血清群、型
是否与 O1 抗血清凝集
O1 群
根据 O 抗原组成不同 (O1 群)
稻叶型 (Inaba)
－
－
2021/5/11
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检验方法
鉴定 l）初步鉴定：与O1群和O139群抗血清(多价和单 价）凝集，菌落和菌体形态、氧化酶试验等作 出初步报告。 2）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血 清学分群及分型。
2021/5/11
27
检验方法
鉴别试验：
霍乱红试验
粘丝试验
O/129敏感试验 鸡红细胞凝集试验
生物学性状 (纯培养革兰染色)
革兰阴性，弯曲 弧形或逗点状， 首尾相接鱼群 样平行排列
单端极鞭毛，有 普通菌毛和性 菌毛
2021/5/11
霍乱弧菌革兰染色
18
生物学性状 (纯培养扫描电镜)
描述：弯曲弧形或逗点状
霍乱弧菌的扫描电镜图（金属镀膜）
2021/5/11
19
生物学性状 (电镜)
霍乱弧菌的鞭毛（↑）和它可溶解的鞘膜（↑↑）
＋
－
第 IV 组噬菌体裂解试验
＋
－
第 V 组噬菌体裂解试验
－
＋
2021/5/11
4
临床意义（所致疾病）
• 肠道内感染（霍乱） • 肠道外感染（胃肠炎、伤口感染、中耳
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气单胞菌属－－临床意义
致病物质：溶血毒素、细胞毒素 所致疾病： 肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌 肠外感染：败血症、伤口感染等 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药
.
检验程序
涂片 染色镜检
标本
分离培养 （血平板、Mac）
血标本 增菌
氧化酶 TCBS生长
O/129 耐盐试验
可疑菌落 初步生化反应
全面生化反应 肠毒素测定 .
Ⅳ组噬菌体裂解 Ⅴ组噬菌体裂解
古典生物型 S + -
.
ElTor生物型 + + R + +
霍乱弧菌分群、型
O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础 根据O抗原不同分为139个血清群 O1群包括古典生物型和ElTor生物型 其他群称为非O1群（非凝集弧菌） O1群血清型（见下表）
血清型 小川型（AB） 稻叶型（AC） 彦岛型（ABC）
d 7％、10％ NaCl
+
.
结果 + + + + + -
抗原结构和分型
O抗原 H抗原
.
霍乱弧菌生物型
O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生 物型 两种生物型具有相同的抗原结构 两种生物型多数生物学性状相似
.
霍乱弧菌两种生物型的鉴别
鉴别试验 V-P
羊红细胞溶解 50U多粘菌素 鸡红细胞凝集
.
霍乱弧菌常用培养基
碱性蛋白胨水 碱性琼脂平板 庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾） 硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平 板（TCBS） 亚碲酸钾琼脂平板
.
试验名称 氧化酶
硝酸盐还原 赖氨酸 鸟氨酸
精氨酸双水解
V-P 明胶液化
生化反应
结果 + +
试验名称 吲哚 葡萄糖
+
蔗糖
+
甘露醇
-
0％、1％NaCl
涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注 意形态、排列 动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意 运动方式 制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动 力消失
.
分离培养
标本接种碱性蛋白胨水增菌6～8小时， 转种TCBS或庆大霉素琼脂， TCBS：出现黄色菌落 庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落
.
鉴定
生化反应：粘丝试验、霍乱红反应 确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片 凝集，以确定是否为O1群 确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以 确定血清型别 确定生物型： 第Ⅳ组噬菌体裂解试验 多粘菌素B敏感试验 鸡红细胞凝集试验 溶血试验
.
邻单胞菌属－－临床意义
腹泻、食物中毒，多见于夏季 败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下 者，感染率低，但死亡率高。
.
邻单胞菌属－－检验程序
涂片 染色镜检
标本
分离培养 （血平板、Mac）
血标本 增菌
氧化酶 TCBS生长
O/129 耐盐试验
可疑菌落 初步生化反应
全面生化反应.
邻单胞菌属－－鉴定
.
副溶血性弧菌－－生物学性状
革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢， 无荚膜 营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5％ NaCl，无盐培养基不生长 TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解 人或兔红细胞，不溶解马红细胞
.
副溶血性弧菌－－临床意义
致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和 耐热相关溶血素） 所致疾病： 食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引 起食物中毒
.
作用机制示意图
.
.
微生物检验－－标本采集
发病早期采集标本 以“米泔水”样便为主，及时送检 卡－布培养基保存 严密包装，专人送检
.
快速诊断
标本
增菌培养 碱性蛋白胨水
直接涂片 动力、制动试验
分离培养（TCBS、碱性平板）
血清学鉴定
初步报告
检验程序
生化鉴定分型 确诊报告 .
检验方法－－显微镜检查
.
邻单胞菌属－－主要性状
只有一个菌种：类志贺邻单胞菌 革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无 荚膜 兼性厌氧，营养要求不高 在SS平板形成不发酵乳糖菌落 氧化酶＋，葡萄糖发酵＋ O/129：S TCBS：不生长 6.5％NaCl：不生长 赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均＋ 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药
弧菌科常规检验
.
1
弧菌科种类
弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光菌属等
.
弧菌科共同特征
革兰阴性菌 需氧兼性厌氧 营养要求不高 氧化酶＋ 发酵葡萄糖产酸不产气
.
试验
弧菌属
甘露醇
+/-
鸟氨酸
+/-
精氨酸
+/-
O/129敏感
S
TCBS生长
+
嗜盐性
+/-
气单胞菌 属 + +/R -
.
弧
邻单属胞菌菌科 -三
.
气单胞菌属
形态染色： 革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端 鞭毛，无芽孢 生长条件： 兼性厌氧；营养要求不高 生长温度较宽，0℃～45℃ 嗜冷菌37℃以下生长 嗜温菌10～42℃生长
.
气单胞菌属
生长现象 TCBS上不生长 血平板：灰白、光滑、凸起菌落 肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落 生化反应 氧化酶＋、触酶＋ 发酵葡萄糖产酸产气 6.5％NaCl不生长 O129不敏感 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药
+ +
个 菌 属
S的
-鉴
-别
霍乱弧菌
是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体 包括古典生物型和ElTor生物型 O139是新的流行菌株
.
形态染色
革兰阴性 弧形或逗点状 单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样” 无芽孢，无荚膜 在新鲜粪便中成“鱼群样”排列
.
霍乱弧菌
革 兰 染 色
鞭 毛 染 色
.
培养特性
兼性厌氧 营养要求不高 耐碱不耐酸，常用pH8.4～9.2碱性培养 基 在液体培养基中形成菌膜 菌落圆形、较大、扁平
A抗原 + + +
.
B抗原 + +
C抗原 + +
抵抗力与变异
ElTor型抵抗力较古典型强， 在水中存活时间长 对酸性物质敏感 对庆大霉素耐受 多次传代可失去典型形态而成为杆状
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临床意义
致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮 细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。 所致疾病： 经肠道传染，引起烈性肠道传染病－－ 霍乱，为甲类传染病。 典型病人粪便呈“米泔水”样 病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。 我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。
鉴定试验
与肠道杆菌、非发酵菌鉴别 与邻单胞菌属和弧菌属鉴别 气单胞菌属种间鉴别
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肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别
鉴定试验 肠杆菌科 非发酵菌 弧菌科
氧化酶
－
＋
＋Leabharlann 葡萄糖氧化/ 发酵（O/F）鞭毛
F 周鞭毛
O／－
F
单、丛、周 单、丛
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鉴定依据
革兰阴性杆菌，丛鞭毛 肠道选择平板上无色透明菌落 氧化酶＋、葡萄糖发酵＋ O/129：R TCBS：－ 6.5％NaCl：－