利用同工酶、RAPD技术及形态学标记对不同地域木豆品种的遗传多样性研究
DNA分子标记在中药材鉴定中的应用研究
DNA分子标记在中药材鉴定中的应用研究一、本文概述中药材作为中华传统医学的瑰宝，其品质与真伪直接关系到患者的疗效与健康。
然而，随着市场需求的增加，中药材的掺假、混淆现象日益严重，因此，中药材的鉴定成为了中医药领域的重要研究课题。
近年来，DNA分子标记技术的快速发展为中药材鉴定提供了新的解决方案。
本文旨在探讨DNA分子标记在中药材鉴定中的应用，以期为提高中药材品质、保障患者用药安全提供科学依据。
本文首先介绍了中药材鉴定的传统方法及其局限性，包括形态学鉴定、化学鉴定等，并指出了这些方法在面临复杂中药材鉴定时的不足。
随后，详细介绍了DNA分子标记技术的基本原理、分类及其在中药材鉴定中的应用案例。
通过对比分析，本文阐述了DNA分子标记技术在中药材鉴定中的优势，如准确性高、稳定性好、操作简便等。
在此基础上，本文进一步探讨了DNA分子标记技术在中药材鉴定中的具体应用，包括中药材真伪鉴别、品种鉴定、产地溯源等方面。
本文也关注了DNA分子标记技术在应用中面临的挑战与问题，如技术成本、操作标准化等，并提出了相应的解决策略。
本文总结了DNA分子标记技术在中药材鉴定中的应用价值及前景，认为随着技术的不断完善与成本的降低，DNA分子标记技术将在中药材鉴定中发挥越来越重要的作用，为保障中药材品质、促进中医药产业健康发展提供有力支持。
二、DNA分子标记技术概述DNA分子标记技术，也被称为DNA指纹技术，是一种通过直接分析生物体DNA序列的多态性来鉴定生物种类和个体间遗传差异的方法。
该技术基于DNA分子的独特性质，如高度的稳定性、个体间的特异性以及可遗传性等，为中药材鉴定提供了新的视角和有效手段。
DNA分子标记技术的核心在于通过特定的方法识别DNA序列中的多态性，这些多态性可以是单核苷酸多态性（SNP）、插入或删除、倒位、易位等。
这些多态性在DNA序列中形成独特的“标记”，可以作为鉴定生物种类和个体间遗传关系的依据。
在中药材鉴定中，DNA分子标记技术具有显著的优势。
RAPD检查方法及意义
RAPD检查方法及意义
RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA)即随机扩增多态性DNA，是一种利用特定引物与无结构DNA作用，从而扩增出其特異或通用性DNA片段的技术。
它可以扩增出庞大的片段，也可以扩增出裂解服从于经典的单倍体型的微不足道的片段。
RAPD技术借助于PCR（聚合酶链反应）技术，可以仅用少量的DNA，用非特异性引物进行扩增，从而得到很多特定碱基序列，并测定这些片段在不同样本间的差异，有利于生物遗传信息学的研究。
RAPD技术的最大特点之一是能检测大范围内的遗传多态性，可以检测不同的DNA序列，RAPD技术使用的引物一般无特异性，也可以利用这些引物检测基因组中的不同位置的片段，从而在基因组结构与遗传多态性的研究方面，具有很大的潜力。
RAPD技术主要用在生物学的分子标记技术、基因组学、植物种质资源分子识别等方面，在动物育种，植物育种以及遗传改良，在动物种群族群结构研究中。
这种技术可以为鉴定和追踪遗传变异提供快速和高效的证据，为改善品种而进行的育种遗传改良和变异研究提供依据。
DNA分子诊断技术在中药鉴定中应用
究,以阐明防治肝纤维化的现代作用机理中药复方抗肝纤维化的现代药理学研究包括药效学和药动力学,其中药效学研究开展的较早相对容易,但多数研究局限于药物效应方面,真正涉及到作用机制方面的研究还不广泛和深入。
而药动学的研究尚处在起步阶段,更深层次的研究较为少见,故中药复方药效学和药代动力学的研究应是今后重点研究方向之一。
由于中药复方对器官或组织的选择性不明显,药物活性不强烈,药效作用温和,往往长期服用才显现药效,所以应用中药复方进行抗肝纤维化的防治研究时应注意时效和量效关系的研究,但由于复方药物成分复杂,各药配合后药性、药效的变异,给复方抗肝纤维化的药动学研究增加了很多困难,所以目前从时效和量效关系方面着手的抗肝纤维化复方研究并不很多。
杜以兰等[3]提出采用由量—效关系和时—效关系求效量半衰期的方法研究其药动学。
还有人提出证治药动学伪说,根据证候与治疗的关系探讨方剂的效应,并相继提出“效应成分动力学”“中药复方活性成分群”等概念,代表了复方药理学研究的新思路。
中药复方抗肝纤维化的药效学和药动学研究是研究中药的药理效应及引起这种效应的有效成份在体内吸收、分布、代谢和排泄等量变规律的科学,可为临床抗肝纤维化时合理用药,优选用药方案及精选复方中的药味提供重要的理论依据,所以应是中药复方抗肝纤维化现代研究中新的研究思路和研究方向。
综上所述,若能立足于中药复方抗肝纤维化多靶点、多环节、多层次的整体优势,把握肝纤维化复杂的病理变化,建立起方证相符的病理学模型,有效开展中药复方的药理学研究,以中医理论为指导,筛选出疗效确定、临床与实验结果一致、经得起重复的复方制剂,那么,相信中药复方抗肝纤维化的防治研究和临床疗效将会跨上一个新的台阶。
参考文献:[1]王宝恩.中药复方861冲剂治疗肝纤维化远期疗效的观察[J ].中西医结合肝病杂志,1993,1(2):69.[2]董筠.乙肝抗纤方治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床与实验研究[J ].南京中医药大学学报,1998,14(6):335-338.[3]李成韶,杜以兰.以药效为指标进行中药药动学研究的思路和体会[J ].中药药理与临床,1998,4(1).(收稿日期:2004-03-16)DNA 分子诊断技术在中药鉴定中应用刘雯霞1 雷国莲2(1.陕西中医学院研究生,陕西咸阳712046;2.陕西中医学院药学系生药教研室,陕西咸阳712083)摘 要:综述DNA 分子诊断技术在中药鉴定中的应用研究,重点论述分子诊断技术的分类及常用RAPD 技术,AFL P 技术及基因片段序列研究状况。
SRAP和ISSR分子标记研究进展
SRAP与ISSR分子标记的研究进展摘要：SRAP与ISSR等分子标记技术已广泛应用到科研工作中。
本文简单的介绍SRAP与ISSR的原理、功能、应用以及对使用分子标记技术揭示生物菌的作用机理进行了展望。
DNA分子标记是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA片段，它能直接反映基因组DNA间的差异，是继形态学标记、细胞学标记及生化标记之后，近年来广泛应用的一种新的遗传标记。
近年来,随着DNA 标记技术的研究日渐成熟,其应用也日益广泛。
目前,各种分子遗传标记技术在科研中的应用已深入开展，为种质资源的鉴定、基因的定位与克隆、数量性状位点的遗传分析、遗传多样性评估、物种起源和分子标记辅助育种等遗传研究提供了有价值的工具。
目前常用的分子标记有RFLP、AFLP、RAPD、SSR、ISSR 、SRAP等。
1 SRAP分子标记的发展与应用1.1 SRAP分子标记的发展SRAP(Sequence-Related Amplified Polymorphism)即相关序列扩增多态性是一种基于PCR 的新型标记，由美国加州大学作物系Li和Quiros博士提出的序列相关扩增多态性(sequence-related amplifiedpolymorphism, SRAP)。
SRAP 技术是与RAPD 技术相似的一种标记技术，即SRAP 可用一对引物，但所用的引物是在SSR 的基础上设计的。
SRAP 标记原理是利用基因外显子里G、C 含量丰富，而启动子和内含子里A、T含量丰富的特点设计两套引物，对开放阅读框架进行扩增。
SRAP 技术是一种无需任何序列信息即可直接PCR 扩增的新型分子标记技术。
SRAP分子标记技术具有重复性强、简便、易于分离条带和测序、中等产量高、高共显性、便于克隆测序目标片段等特点,目前SRAP 标记已在植物遗传多样性检测、遗传图谱构建、重要基因定位、品种鉴定和种子纯度检测上得到了广泛应用，而在真菌界的应用相对较少。
杂交水稻品种鉴定方法（综述）
杂交水稻品种鉴定方法（综述）作者：丁健美刘之熙来源：《南方农业·上》2022年第07期摘要通过查阅文献，归纳总结了目前用于杂交水稻品种鉴定的几类方法。
种子形态鉴定法、幼苗形态鉴定法、田间种植鉴定法、计算机模拟形态分析技术等形态学方法，难以辨别种子形状差异和形态不太明细的真假品种，且鉴定周期长，在一定程度上受鉴定人员的自身技术与经验制约。
同工酶电泳鉴定、蛋白质电泳鉴定等生化鉴定法，受限条件较多，实际工作中应用较少。
DNA分子技术鉴定法主要有RAPD标记鉴定、RFLP标记鉴定、AFLP标记鉴定、SSR标记鉴定、SNP标记鉴定。
DNA分子标记鉴定，可应用于杂交水稻品种纯度与真实性鉴定、审定监管等各环节，具有鉴定快速、周期短、准确、简便、经济等诸多优点，是农作物品种鉴定的发展方向。
关键词杂交水稻;品种鉴定中图分类号：S511.5 文献标志码：C DOI：10.19415/ki.1673-890x.2022.13.040品种鉴定是种子市场监管和品种审定准入的主要内容，是育种工作的重要阶段，也是衡量成果能否转化的重要环节。
因此，品种鉴定在种子生产、加工、储藏及经营贸易等流通过程中具有重要意义和应用价值。
但在种子流通中，为节省成本与缩短时间周期，往往忽略品种鉴定的重要性，导致仍有种子掺假的案件发生，给生产造成了难以挽回的损失[1]。
杂交水稻是我国最主要的农作物，对保障国家粮食安全起到举足轻重的作用，因此，随着全国杂交水稻种植面积比重逐年增大，对杂交水稻种子的质量（主要是真实性和纯度）检查和监督尤为重要。
目前，杂交水稻品种鉴定的方法主要有形态鉴定法、生化鉴定法、DNA分子技术鉴定法。
1 形态鉴定法1.1 种子形态鉴定法种子形状比较稳定，故形态鉴定方法简单，快速经济。
主要通过观察种子的外观形态特征，包括种子的长宽度与大小、形状、颜色、光泽、种皮形态、垩白、胚乳等性状，借助仪器或工具（如放大镜、解剖镜等）观察，进行品种鉴定，一般情况下可鉴定出杂交水稻样品的真实性[2-3]。
基于ISSR和RAPD标记的八株灰树花栽培菌株遗传多样性分析
食用菌学报 ２０１３．２０（４）：１～５收稿日期：２０１３－０４－０９原稿；２０１３－０６－０７修改稿基金项目：湖南省科技计划项目（编号：２０１１ＮＫ２００７）的部分研究内容作者简介：王春晖（１９６５－），男，１９９４年毕业于湖南师范大学，硕士，副研究员，主要从事食用菌遗传育种研究。
＊本文通讯作者 Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｉｎｙｏｎｇｇａｎｇ０７２１＠１２６．ｃｏｍ文章编号：１００５－９８７３（２０１３）０４－０００１－０５基于ＩＳＳＲ和ＲＡＰＤ标记的八株灰树花栽培菌株遗传多样性分析王春晖，尹永刚＊，胡汝晓，彭运祥（湖南省食用菌研究所，湖南长沙４１００１３）摘 要：育种亲本的选择一般以所选亲本亲缘关系的远近为基础，本研究采用ＩＳＳＲ和ＲＡＰＤ分子标记技术对８株灰树花（Ｇｒｉｆｏｌａ ｆｒｏｎｄｏｓａ）栽培菌株进行遗传多样性分析。
１６个ＩＳＳＲ引物共扩增出２１４条位点片段，其中多态性片段１９６条，占总片段条数的９１．６％，菌株间相似系数变化范围为０．２６４９～０．８７７２，在相似系数为０．４８８处将８个菌株分为４大类；１９个ＲＡＰＤ引物共扩增出２６５条位点片段，其中多态性片段２３８条，多态性比率为８９．８％，相似系数变化范围为０．３３８２～０．８５８２，在相似系数为０．４４２处将８个菌株分为４大类。
同时将ＲＡＰＤ与ＩＳＳＲ扩增结果进行综合性分析，亲缘关系树状图在分子水平上显示了供试菌株之间的亲缘关系，为今后灰树花的遗传多样性研究及遗传育种亲本的选配提供了理论依据。
关键词：灰树花；分子标记；亲缘关系；多态性 灰树花（Ｇｒｉｆｏｌａ ｆｒｏｎｄｏｓａ）又称栗蘑、千佛菌、贝叶多孔菌、舞茸，野生灰树花大多发生在板栗、栎树、栲树等壳斗科树种及阔叶树树桩基部或倒腐的近地树干上，以分解树木的心材为营养，造成树木心材腐朽，是一种典型的白腐菌［１］，同时也是一种珍稀的大型食药用真菌，子实体味道鲜美，柔软脆嫩，富含蛋白质、纤维、维生素，深受人们喜爱［２］，在药用价值上具有抗肿瘤、免疫刺激、抗血栓、抗菌、抗病毒及抗氧化等多重功效［３］。
利用RAPD技术研究6种蜘蛛的遗传多样性
左右 ，在冰 上迅 速剪 碎 ，加入 ４ Ｉ ０ 裂解液 ，再加上 ２ ｇ蛋 白酶 Ｋ和 ２ ｇＲ ｓ ，于 ５ ０ ０ Ｎａｅ ６℃ 消化 ０５ ，然 ．ｈ 后分别用 亲和剂 、吸附剂 和沉淀 剂处 理 ，最 后用 Ｔ Ｅ调整浓度 至 ｌ ｇ Ｉ ０ｎ ／ ，４℃ 保 存备用 。
化 、种质鉴 定 、种 间亲缘关 系及群体 遗传 结构 分析 等方 面的研究 中 ，取得了 飞速的发展 ，但 利 用 Ｒ Ｄ 技 ＡＰ 术研 究蜘蛛 的报道很 少 ，仅徐 湘” 穴居 、结 网和 游猎 ３种不 同类型 的 ４个个体 的系统演 化进行过 描述 。 等就
本研究 利 用 Ｒ Ｄ技术从 Ｄ ＡＰ ＮＡ水平对 园蛛科 （ ａ ｅ ａ ）６ 蜘蛛 的遗传 多样性 进行研 究 ，以期 从分 子 Ａｒ ｉ ｅ 种 ｎｄ
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浙江省 教委资助项 目 （１９ ０ ２ ９ ９ ２ ２） 作者简 介：童丽 娟 （ ９ ９一），女 ，浙 江宁海人 ，实验师 ，从 事生物 、分 子生物学实验 。 １６
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１４ ＰＣＲ 反 应 ．
水平探 讨其 分类地 位和亲缘关 系 ，旨在为补充和 完善园蛛科 的系统 分类方法提供 分子水 平的依据 。
ｌ 材 料 和方法
１１ 材 料 ．
用 于 Ｒ Ｄ分 析 的 金 蛛属 （ ｒｉｐ 悦 目金 蛛 （ ． ｍｏｎ ＡＰ Ａ ｇｏ ｅ） Ａ ａ ｅａ）、小悦 目金 蛛 （ ． ｎ ｔ Ａ ｍｉｕａ）、 目金 蛛 （ ． ｏ ｕａ）、伯 氏 金蛛 （ ． ｏ ｅｅｂ ｒｉ ｃｌ Ａ ｂ ｏｓｎ ｅｇ ）、横 纹 金蛛 （ ． ｒｅ ｎｃｉ）和云 斑蛛 属 （ ｙｔｐ ｏａ） 鹿 加云 斑 蛛 Ａ ｂｕｎ ｉ ｉ ｈ Ｃ ｒ ｈｒ 摩 ｏ
利用RAPD和ISSR标记探讨我国茶树遗传多样性
利用RAPD和ISSR标记探讨我国茶树遗传多样性陈荣冰，林郑和，陈常颂，游小妹(福建省农业科学院茶叶研究所，福建福安 355000)摘要：利用RAPD和ISSR两种标记技术，分别对我国12个省(区)39个茶树种质资源进行遗传多样性检测和亲缘关系分析。
从供试的引物中筛选出具有多态性良好的RAPD引物20条，ISSR引物15条，对其39份茶树种质资源进行扩增。
结果表明：(1)20条RAPD引物共扩增出196条清晰的多态性条带，多态性条带比率为87.2%；15条ISSR引物共扩增到143条清晰的多态性条带，多态性条带比率为91.6%，ISSR检测出的多态性条带的能力优于RAPD。
(2) 基于RAPD分析的条带大小在300bp一3000bp之间，而ISSR条带大小在200bp一3000bp之间，故ISSR能检测到比RAPD 更多的遗传变异。
(3)虽然ISSR和RAPD的聚类分析结果存在一定的差异，对两种标记结果进行UPGMA聚类分析，还是呈极显著的正相关(r=0.842 )。
两种标记均能准确地把属原始类型的崇庆枇杷茶与英红1号与其它较原始类型与进化类型茶树种质资源区分开，聚类结果与传统经典分类相符，并揭示不同省区或同一省区不同地域的茶树种质资源的遗传差异与亲缘关系。
关键词：茶树；RAPD；ISSR；遗传多样性；亲缘关系Assessment of Genetic Diversity of Tea Detected byRAPD and ISSRCHEN Rong-bing LIN Zheng-he CHEN Chang-song YOU Xiao-mei(Tea Research Institute,Fujian Acaedemy of Agricultrual Sciences, Fu’an Fujian 355014,China)Abstract：RAPD and ISSR were used to detect the genetic diversity and relationships of thirty-nine tea germplasms from twelve provinces in china . A total of 20 RAPD primers and 15 ISSR primers were indentified with polymorphism among the primers. For RAPD markers, 196 polymorphic bands were produced and percentage of polymorphic bands(PPB) were (87. 2%). For ISSR marker, 143 polymorphic bands were generated, and PPB were 91.6%. Appearance,ISSR detection (91.6%) was higher than that in RAPD(87. 2%).Although the differences between the RAPD and ISSR dendrograms were observed. The significantly high correlation between RAPDs and ISSRs among 39 accessions was observed (r=0.842). Two kind of markers can accurately separate the primitive type Chongqingpipa and Yinhong 1 with other more primitive type and the evolution type tea. Molecular cluster results were obtained from RAPD and ISSR analysis, and they also matched well with the results of typical classification,and promulgated different provincial area or the identical provincial area but different region tea tree Genetic Variation and the relationship.Key words: tea tree；RAPD；ISSR；genetic diversity；relationships本研究采用RAPD和ISSR标记对我国12个省(区)39份茶树种质资源进行遗传多样性分析，其目的：(1)对比RAPD和ISSR在检测茶树种质资源遗传多样性时的效率和分辨力，评价它们在应用茶树居群遗传学和保护遗传学研究中的前景；(2)研究茶树种质资源DNA水平的遗传多样性的基础上，讨论我国茶树起源与进化。
李属果树的RAPD分子标记研究进展
中 ， 明 美 国桃 种 质 资 源 还 是 很 有 限 的 。 说 吴 树 敬 等 口 以新 世 纪 和 红 丰 等 ２ 个 杏 品 种 为 Ｏ
为基础 ， 以一 系列人工 合成 的 、 机寡核 苷酸序列 为 随
引 物 （ ８ １ ｐ ， 过 Ｐ Ｒ 技 术 对 所 研 究 的 目 的 约 ～ ０ｂ ） 通 Ｃ
品 种 鉴 定 。结 果 表 明 ， 分 析 的 １ 个 樱 桃 品种 均 扩 所 ５
增 出了特有 的 ＤＮＡ 条 带 ， 个 樱 桃 种 特 有标 记 带 每 在 ２ １ ～ ７条之 问 ， 共扩增 出 １ ９条特 有标记 带 ， ４ 据此 可 以进行樱 桃 品种及砧 木准 确鉴 定 。Ｚ ｅｇ等 用 ｈｎ ６个 Ｒ Ｄ 引物就 区分 了 １ ＡＰ ８个桃砧 木 品种 ， 聚类 分 析结 果与 以前 系谱分 析完全 吻合 ， 明 ＲＡＰ 证 Ｄ技术 能 够进 行 桃 品种 鉴 定 。Ｍａｉ ｎ等 ＿］ ＲＡ Ｄ 技 ｒｙ ｌ ｌ用 ０ Ｐ 术 将美 国桃 资 源 圃 的 １ ６个 栽 培种 分 为 １ ３ ２类 ， Ｏ ９ 个 美 国品种 和从欧 洲 、 丁美 洲 引 进 的 品种分 布 在 拉 ３类 中 ， 来 自其 它洲 的 ２ 个 种 则分 布 于其 它 ９类 而 ３
遗传多样性分析的方法与步骤
遗传多样性分析的方法与步骤摘要：本文对生物的遗传多样性进行阐述，并综述了检测遗传多样性的形态学标记、细胞学标记、生物化学标记和分子标记4种遗传标记的发生与发展过程,并比较了各自的优缺点及其应用。
关键词：遗传多样性；形态学标记；细胞学标记；生物化学标记；DNA分子标记Genetic Diversity Analysis Method and StepsAbstract:In this paper, the biological genetic diversity were summarized, and elaborates the detection of genetic diversity morphology mark, cytology mark, biochemical markers and molecular marker and genetic markers of the occurrence and development of the process, and compare their advantages and disadvantages and application.Keywords:genetic diversity; Morphological markers; Cytology mark; Biochemical markers; DNA molecular markers前言遗传多样性是生态系统多样性和物种多样性的基础,任何物种都有其独特的基因库或遗传组织形式[1]。
广义的遗传多样性是指地球上所有生物所携带的遗传信息的总和,但通常所说的遗传多样性是指种内的遗传多样性,即种内不同种群之间或一个种群内不同个体的遗传变异[2]。
遗传多样性的表现形式是多层次的,可以从形态特征、细胞学特征、生理特征、基因位点及DNA序列等不同方面来体现,其中DNA多样性是遗传多样性的本质[3]。
基于分子标记的植物品种鉴定和遗传多样性研究
基于分子标记的植物品种鉴定和遗传多样性研究植物是地球上最重要的生物资源之一，它们可以提供食物、药品、材料以及保持生态平衡。
而植物品种鉴定和遗传多样性研究则是保护植物资源、促进植物遗传改良等领域非常重要的一环。
基于分子标记的技术已经成为当今最具前景和实用的辨认和分类植物品种以及研究遗传多样性的方法之一。
一、基于分子标记的植物品种鉴定方法植物品种是通过对植物形态、生物学、化学性状以及遗传特征的综合研究，确定其不同的品种和种属。
而传统的植物鉴定方法通常是基于形态学、生理和生化特征等进行的。
但这种方法存在很多局限性，如同种植物因地理环境等原因会产生一定的变异性，有时不利于明确鉴别。
而基于分子标记的植物品种鉴定方法，主要是利用分子生物学技术，运用多样的分子标记鉴定不同的植物品种。
现代分子标记技术为鉴定植物提供了一个新的角度，常用的分子标记主要包括核酸序列标记、蛋白质标记和DNA指纹图谱。
其中，核酸序列标记是现代分子生物学技术中最常用的技术之一。
它通过分析DNA序列的变异性和多样性，鉴定出不同品种之间的区别。
DNA指纹图谱则是对核酸序列基本特征与区别进行简化分析，建立一个可见的标记图谱，帮助准确辨认不同的品种和种属。
目前，基于分子标记的植物品种鉴定方法已经成功推广应用于许多植物学研究领域。
二、基于分子标记的植物遗传多样性研究植物遗传多样性研究是指通过对植物的遗传多样性进行系统、全面的观测、调查、分析和评价，以了解不同植物品种的基因组成、遗传变异特征等信息，评估植物资源的遗传多样性和遗传结构变化，以及制定有效的保护和利用策略等。
基于分子标记的植物遗传多样性研究是通过对植物基因组中的某些特定基因序列的变异聚类进行分析，来研究物种分化、育种和遗传演化等问题。
在分子标记方面，最常用的是RAPD、AFLP、SSR和SNP等技术。
这些分子标记通过对植物DNA序列特定的保守区域进行密集的扫描分析，从而揭示出其中存在的多态性位点和变异性系列。
作物分子育种
一、作物分子育种作物育种基本任务：1.在研究和掌握作物形状遗传变异规律的基础上，发掘研究和利用作物种植资源；2.选育优良品种或杂种以及新作物；3.繁殖生产用种。
作物分子育种：即在经典遗传学和分子生物学等理论指导下，将现代生物技术手段整合于传统育种方法中，实现表现型和基因型选择的有机结合，培育优良新品种。
分子标记育种：又称为分子标记辅助选择，是利用与目标基因紧密连锁的分子标记，在杂交后代中准确鉴别不同个体基因型，从而进行辅助选择育种。
特点：能有效结合基因型与表现型鉴定，显著提高选择的准确性。
转基因育种：利用基因重组DNA技术，将功能明确的基因通过遗传转化手段导入受体品种的基因组，并使其表达期望形状的育种方法。
特点：能打破基因不同物种交流障碍，克服传统育种的困难问题。
分子设计育种（刚起步）：目的——通过各种技术的集成与整合，在育种家的田间试验之前，对育种程序中的各种因素进行模拟、筛选和优化，确立目标基因型，提出最佳亲本选配和后代选择策略，提高育种试验可见性。
我国作物分子育种中存在的问题：1.基因资源挖掘力度有待加强；2.实用分子标记和具重要育种价值的基因十分贫乏；3.作物分子育种技术尚待突破；4.通过分子育种培育的突破性品种不多，产业化程度不高；5.作物分子育种的组织体系和实施机制需要创新。
作物分子育种意义：1.发展作物分子育种是保障国家安全的重大需求；2.全面实现作物分子育种相关技术突破；3.加速作物分子育种研发和产业化。
常规育种和分子育种比较：1.常规育种表现型选择时，会受时空因素影响，而分子育种不会；2.常规育种来源广，育种亲本贫乏；分子育种基因来源广，基因资源丰富。
3.常规育种基因局限于种内，少数局限于亚种间；分子育种基因交流不受物种限制。
4.常规育种目标性状有不明确性；分子育种目的基因功能已知，目标性状明确。
5.最明显特征：常规育种选择时间长；分子育种选择时间短，可调控基因及其产物的功能、表达。
形态标记与RAPD标记在青蒿种质资源分类中的应用
的某些局限性 ， 因同工酶是基 因表达加工后 的产物 ， 但 具有组
供试青蒿种质材料 １ ， 源不 同地区（ １ 。 ５份 来 表 ）
表 １ 青 蒿 种质 材 料 来 源
编号
１ ２ ３ ４
林 缘
试 验 方 法
１２ １ 形态标记研究 ．．
试验材料于 ２０ ０ ７年 ３月盆栽 于怀化
１２ ２ １ Ｄ Ａ提取 与 Ｐ Ｒ 扩增 用 Ｃ Ａ ． ． ． Ｎ Ｃ Ｔ Ｂ法 从 供 试 材 料 的 幼 嫩 叶 片提 取 基 因组 总 Ｄ Ａ ８， １０对 Ｐ Ｒ扩 增 引 物进 行 Ｎ ＿ 对 ０ Ｊ Ｃ
５
１２ ．
种质来源
湖南怀化 （ Ｈ） Ｈ 四川酉 阳（Ｙ） Ｓ 湖南吉首（ ） ＨＪ 湖南益阳（ Ｙ） Ｈ
湖南长沙（ ） ＨＣ
生态环境
河边 荒地 林缘 林缘
路 旁
编号
６ ７ ８ ９
１ ０
种质来源
湖北襄樊（ Ｘ） Ｈ 江西萍乡（Ｐ Ｊ） 四川绵 阳（ Ｍ） Ｓ 云南昆明（ ＹＫ）
关键词 ： 形态标记 ； Ａ Ｄ标记 ； Ｒ Ｐ 青蒿 ； 种质资源 ； 分类 中图分类号 ： ９４ １ Ｑ ４ ． 文献标 志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ ８ ０ ０ ７ １０ ３ ２ ２ ０ ）６— ０ ６一ｏ ３ 织特异性和发育阶段性 ； 分子标记类型多 、 数量大 ， 不受环 境影 响， 准确率高 ， 但应用成本高 ， 受实验条件 限制 ， 田间无法 操作 。因此 ， 采用多种标记综合应用手段 ， 以提高种资鉴定 可 的准确性与鉴定效率 。郑丽屏等 对 ｌ Ｏ份青蒿种质材料进 行 ＲＰ Ａ Ｄ分析发现 ， Ｊ青蒿具有明显的遗 传分 化 ， 其遗传分化与 青蒿素的变化及地理分布有一定 的相关性 ， 青蒿 素含量高的 青蒿与其他地 区的青 蒿在形态上有 一定 区别 。本研究 对 １ ５ 份青蒿种质材料 ， 采用形态标记和 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ分子标记综合应用 手段进行 聚类分析 ， 以筛选和确立适合 于青 蒿种 质资源分类 与鉴定的形态标记 和 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ分子标记 ， 为青蒿的 品质改 良和 良种选育奠定基础。
大蒜种质遗传多样性研究
大蒜种质遗传多样性研究作者：陈义勇来源：《农业与技术》2018年第12期摘要：大蒜是人们生活中很常见的一种食物。
大蒜不仅可以作为食物还具有一定的药性。
长期食用对人体有很大的好处。
为了多方位地了解大蒜的好处及药用价值，并进行大蒜新品种的培育，本文对大蒜的种质遗传进行分析。
关键词：大蒜；种质遗传；多样性中图分类号：S633.4 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20180632019据资料统计，我国现在是大蒜种植的大户，世界上一多半的大蒜是由我国种植且出口的，是我国出口的主要蔬菜之一。
而且由于大蒜的药用价值，近年来也将其应用到了林业、牧业等方面。
随着大蒜事业的不断发展，大蒜的种植创新及新品种的培育问题就越来越急切地需要解决。
本文就以此进行对大蒜种质遗传的多样性研究。
1 关于大蒜种质遗传多样性的研究目的及意义大蒜的成分复杂，它含有丰富的氨基酸、矿物质、微量元素等营养。
而且它还具有很高的药用价值，比如消毒、杀菌等。
近几年经过研究发现，大蒜还具有良好的抗病毒、抗癌、抑制血小板凝聚、增强免疫力及预防和治疗心血管疾病的功效。
而且我国是世界上的产蒜大国，每年有大量蒜头出口。
所以，为了提高大蒜的产量及其质量，也为了培育新的品种，现在进行大蒜种质遗传多样性的研究很有必要。
大蒜虽然是无性繁殖植物，但是在不同的地理环境和气候环境中，厂量也会受到不同的影响。
研究发现，可以通过人为地定向培育来进行选择和操控，对大蒜来进行一定的优化，增加营养的同时还可以增加产量。
因此，进行大蒜的种质遗传多样性研究，掌握好大蒜的种质资源，了解大蒜的分布规律，明确大蒜最适合的生长环境，对于培育新品种、优化产量具有重要意义。
2 关于大蒜种质遗传多样性的研究遗传多样性是植物本身具有的特征，是植物存在的基础。
任何一种植物的内部都存在着不同的基因库和遗传组织形式。
所以，如果要了解植物，最好的办法就是从它的基因库和遗传组织形式来下手，会得到最清楚的分析结果。
大豆遗传图谱的构建
大豆遗传图谱的构建摘要大豆是严格的自花授粉作物，是由古四倍体演变而来的二倍体，基因组较大，染色体又很小，难于进行细胞遗传学研究，因此构建分子遗传图谱并对重要性状进行QTL定位，对于重要性状基因的图位克隆及分子标记辅助育种具有重要意义。
就大豆遗传图谱构建过程和研究进展进行综述，并对有待进一步研究领域进行了分析讨论，以期促进大豆遗传图谱的构建，促进育种工作的发展。
关键词大豆；遗传图谱；分子标记大豆是人类优质蛋白和脂肪的重要来源，同时也是饲料蛋白的重要来源[1-2]。
因此，大豆的遗传研究一直受到广泛的重视。
但由于大豆的遗传变异程度低，基因组较大并含有广泛的复制区和丰富的重复序列，染色体又很小，难于进行细胞遗传学观察等研究，导致大豆的遗传研究尤其遗传作图明显滞后于其他作物。
随着分子遗传学的发展和RFLP、RAPD、SSR、ARLP等分子标记技术的发展，尤其是高密度遗传图谱的构建，不但对数量性状位点（QTLs）进行精确定位，而且能利用图位克隆克隆出控制数量性状的基因。
因此，可以利用高密度的大豆遗传连锁图谱，结合现代分子操作技术，对有重要价值的性状进行QTL定位，尽可能地挖掘有利用价值的等位基因，将分子标记辅助选择用于育种实践，以培育优质高产的新品种。
1遗传图谱的构建过程遗传图谱是数量性状基因定位（QTL）、基因图位克隆、比较基因组学研究以及分子标记辅助育种等的基础。
图谱的构建过程主要包括：①选择建立适合的作图群体；②选择适合作图群体的遗传标记；③确立连锁群；④基因排序与遗传距离的确定。
1.1群体的选择适合于作图的遗传群体有F2、BC、NIL、DH、RIL等，作图群体的选择取决于使用的标记类型。
由于SSR标记具有较高的多态性，可以用于在亲缘关系较近的亲本甚至一些近交获得的群体中构建图谱。
另外，对于共显性的标记使用F2群体可以获得最多的遗传信息，而对于显性标记，使用DH、RIL则可以获得最多的遗传信息。
1.1.1F2群体或其衍生的F3、F4家系。
如何利用遗传标记技术进行植物品种鉴定和选育
如何利用遗传标记技术进行植物品种鉴定和选育遗传标记技术在植物品种鉴定和选育中的应用人工选择和培育植物品种是提高农作物产量和质量的重要手段之一，而遗传标记技术则为植物品种鉴定和选育提供了一种更为准确和高效的方法。
本文将介绍遗传标记技术的原理、常见的鉴定和选育方法，并探讨其在农业生产中的应用前景。
一、遗传标记技术的原理遗传标记技术是一种基于遗传物质中特定DNA序列的变异来进行鉴定和选择的方法。
其原理基于不同个体间的遗传差异，通过检测DNA中的特定位点，从而确定个体之间的遗传关系，并进一步对个体进行鉴定和选育。
遗传标记可分为分子标记和形态标记两种类型，分子标记以DNA序列上的遗传变异为依据，形态标记则以植物个体的形态特征为依据。
本文主要介绍基于分子标记的遗传标记技术。
二、植物品种鉴定中的遗传标记技术1. RAPD分子标记技术RAPD（Random Amplified Polymorphic DNA）是一种常用的分子标记技术，它通过PCR扩增特定位点上的DNA片段，从而区分不同个体之间的遗传差异。
该技术简便易行，无需事先了解待分析物种的基因组信息，因此在植物品种鉴定中得到广泛应用。
2. SSR分子标记技术SSR（Simple Sequence Repeat）是一种以重复单元为基础的分子标记技术，它通过PCR扩增具有特定重复序列的DNA片段，从而实现对植物品种进行鉴定。
相比于RAPD技术，SSR技术具有更高的位点稳定性和遗传信息丰富性，因此在植物品种鉴定和亲本筛选中被广泛应用。
三、植物品种选育中的遗传标记技术1. QTL定位QTL（Quantitative Trait Locus）即数量性状基因座，是影响植物数量性状的基因所在的特定位点。
通过遗传标记技术，可以对数量性状与遗传标记之间的关系进行研究，进而定位QTL，从而为植物品种的选育提供依据。
QTL定位技术在提高农作物产量、抗病虫害性等方面具有重要应用价值。
32份中国南瓜种质资源的遗传多样性研究.doc
32份中国南瓜种质资源的遗传多样性研究南瓜(Cucurbita spp)是一种重要的园艺植物，中国南瓜(Cucurbita moschata)类的育种，已形成了丰富品种资源。
对中国南瓜种质资源的遗传多样性研究，有利于其种质资源的收集、保存、鉴定、创新和合理利用。
分子标记能直接从DNA水平反映种质之间的遗传差异，是研究植物遗传多样性的有效工具。
本研究采用了形态学标记和RAPD标记相结合，运用谱系聚类分析、主成分分析，主坐标分析对32份中国南瓜种质的遗传多样性进行了研究。
主要结果如下： 1．南瓜形态学性状观察标准，对形态学性状的遗传多样性参数统计结果显示，有50个性状的变异系数较大(8.43％～101.22％)，表现了丰富的多样性。
其中突出的是茎刺毛，嫩瓜和老瓜的皮色、斑纹形状、斑纹颜色，商品嫩瓜纵径，嫩瓜横切而形状，老瓜单瓜重等性状(35％～60％)。
变异系数最大的是瓜形的性状(101.22％)。
2．从形态学性状的主成分分析得到，前3个主分量的累计方差贡献率达79.70％。
第一主分量方差贡献率68.53％，其所包括的性状的特征值差异较小，概括了茎、叶、花、果、种子各类性状，说明了各种性状都表现出了丰富的形态学多样性。
3．形态学性状聚类中，32份材料在相似系数0.29处依据在分枝性，主茎色，茎刺毛，叶色，叶缘，叶面茸毛，叶面白斑，瓜形等性状可分为2个类群。
其中材料Ⅱ5Bb 159，Ⅱ5Bb 233的相似系数最大，为0.70。
其中第一类群中Ⅱ5Bb 188，Ⅱ5Bb 189，Ⅱ5Bb 222，Ⅱ5Bb 201，Ⅱ5Bb 206聚得较近；第2类群Ⅱ5Bb 200，Ⅱ5Bb207，Ⅱ5Bb 230，Ⅱ5Bb 208聚得较近。
因其各种性状均相似之处。
4．100条随机引物中筛选出12条引物用于RAPD标记分析，在扩增出的112条带中，多态性带有79条，多态带比率为70.5％。
RAPD分析供试材料在相似系数0.53处可划分为2个类群。
十大功劳属6个种的遗传多样性及亲缘关系RAPD分析
十大功劳属6个种的遗传多样性及亲缘关系RAPD分析农志欢;张启伟;杨平;何飞;曾宪彪;苏华;韦宝伟;唐毓凡;毛长智【摘要】[目的]分析十大功劳属6个种的遗传多样性及亲缘关系,为其资源保护和开发利用提供参考依据.[方法]采集十大功劳属6个种植物样品,提取基因组DNA,采用优化的RAPD反应体系和条件进行多态性检测,分析多态性条带规律,并用NTSYS-pc Version 2.11a进行数据分析,计算遗传相似系数,用非加权配对算术平均法(UPGMA)进行聚类分析,生成聚类图.[结果]十大功劳属6个种的21条重复性好、稳定性高的有效引物共扩增出264条条带,其中多态性条带234条,多态性比例为88.64％,多态性信息含量(PIC)为0.373～0.414;6个种的遗传相似系数为0.45～0.78.UPGMA聚类分析结果表明,在遗传相似系数0.53处,6个种可分为3个组,其中阔叶十大功劳M.bealei和小果十大功劳M.bodinieri Gagnep.为一组,靖西全缘叶十大功劳M.jingxiensis为一组,其他3个种为一组;在遗传相似系数0.59处,细叶十大功劳M.fortunei单独为一组,长柱十大功劳M.duclouxiana Gagnep.和靖西十大功劳M.subimbricataW.Y.Chun et F.Chun为一组.[结论]十大功劳属6个种植物具有较丰富的遗传多样性,部分种之间有较近的亲缘关系.【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2016(047)007【总页数】6页(P1077-1082)【关键词】十大功劳;遗传多样性;亲缘关系;RAPD;聚类分析【作者】农志欢;张启伟;杨平;何飞;曾宪彪;苏华;韦宝伟;唐毓凡;毛长智【作者单位】广西中医药研究院,南宁530022;广西中医药研究院,南宁530022;广西中医药研究院,南宁530022;广西中医药研究院,南宁530022;广西中医药研究院,南宁530022;广西中医药研究院,南宁530022;广西中医药研究院,南宁530022;广西都安县人民医院,广西都安530700;南宁市第三人民医院,南宁530003【正文语种】中文【中图分类】S567.19【研究意义】十大功劳是小檗科十大功劳属（Mahonia）植物，拥有约60个种，其中在我国发现有35个种，主要分布在广西、四川、云南及西藏等地（余天虹等，2015）。
分子标记辅助选择讲解
第十七章分子标记辅助选择育种传统的育种主要依赖于植株的表现型选择(Phenotypieal selection)。
环境条件、基因间互作、基因型与环境互作等多种因素会影响表型选择效率。
例如抗病性的鉴定就受发病的条件、植株生理状况、评价标准等影响；品质、产量等数量性状的选择、鉴定工作更困难。
一个优良品种的培育往往需花费7～8年甚至十几年时间。
如何提高选择效率，是育种工作的关键。
育种家在长期的育种实践中不断探索运用遗传标记来提高育种的选择效率与育种预见性。
遗传标记包括形态学标记、细胞学标记、生化标记与分子标记。
棉花的芽黄、番茄的叶型、抗TMV的矮黄标记、水稻的紫色叶鞘等形态性状标记，在育种工作中曾得到一定的应用。
以非整倍体、缺失、倒位、易位等染色体数目、结构变异为基础的细胞学标记，在小麦等作物的基因定位、连锁图谱构建、染色体工程以及外缘基因鉴定中起到重要的作用，但许多作物难以获得这类标记。
生化标记主要是利用基因的表达产物如同工酶与贮藏蛋白，在一定程度上反映基因型差异。
它们在小麦、玉米等作物遗传育种中得到应用。
但是它们多态性低，且受植株发育阶段与环境条件及温度、电泳条件等影响，难以满足遗传育种工作需要。
以DNA多态性为基础的分子标记，目前已在作物遗传图谱构建、重要农艺性状基因的标记定位、种质资源的遗传多样性分析与品种指纹图谱及纯度鉴定等方面得到广泛应用，尤其是分子标记辅助选择(molecular marker-as—sisted selection，MAS)育种更受到人们的重视。
第一节分子标记的类型和作用原理一、分子标记的类型和特点按技术特性，分子标记可分为三大类。
第一类是以分子杂交为基础的DNA标记技术，主要有限制性片段长度多态性标记(Restriction fragment length polymorphisms，RFLP标记)；第二类是以聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction，PCR反应)为基础的各种DNA指纹技术。
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中 图分 类 号 ：６ ３ ９ ￥４ ． 文 献 标 识 码 ： Ａ
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２１ ０ ０年 ２ ３卷 ２期
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利 用 同工 酶 、 Ａ Ｄ技 术 及 形 态 学 标 记 Ｒ Ｐ 对 不 同 地 域 木 豆 品 种 的 遗 传 多 样 性 研 究
蒋慧萍 李杨瑞 ，
（． １ 广两农 业科学院生物技术研究所 ， 广西 南宁 ５ ０ ０ ；．广西农 业科学院 广西作物遗传 改良生物技 术重点开放实验室 ， 西 ３０７２ 广
南宁 ５００不同地 理来源的木豆品种（ 分别来 自广 西、 海南、 非洲、 甸和 印度） ３个 Ｉ ＲＳ Ｔ杂交木 豆品种（ Ｃ Ｈ 、 缅 和 Ｃ ＩＡ Ｉ Ｐ ８
ＩＰ ８０ １ ＩＰ ８ ｌ９ 作为供试材料。分别采用形态标记、 Ｃ Ｌ７９ 、 Ｌ７ １） Ｃ 过氧化物酶 同工酶标 记和 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ标记 对 ８个 品种 资源 的遗传 多样 性 进行研 究， 并对形 态标记及 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ试 验结果进行 了聚类分析 ， 结果表 明： 通过 对过氧化物酶 同工酶 酶谱分 析， ① 发现 ８ 木豆 品种 个 的 电泳 图谱谱 带 每敢和迁 移距离相 同， 说明 ８ 个木 豆品种遗传相似性高 ； ②通过对 ８个品种 １ 年的表 型性状观察 ， 发现各 品种在表 型上存在一定 差异 ， 生育期、 色和粒色等。将表型的 ｌ 个数 量性状进行 聚类分析 ， 现各 品种间的遗传相似 系数 高； 如 花 ８ 发 同时对 ８
个 品种进行 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ标记分析 ， 并绘制亲缘关系系谱图 ， 同样也得到各 品种 间的遗传距 离很近 ， 平均 为 ０ ２ 。从 而证 实 了 ８个木 豆 ．５ 品种遗传基础接近 ， 具有 较近 的亲缘关 系。 关 键词 ： 木豆 ； 遗传 多样性 ； 氧化物酶 同工酶； 型性状 ；ＡＰ 过 表 Ｒ Ｄ标记 ； 聚类分析