Agilent-1260LC液相色谱仪使用、维护保养规程
Agilent1260液相色谱仪操作规程
Agilent 1260 液相色谱仪操作规程一、准备工作a)启动计算机：打开计算机,登陆windows操作系统。
b)启动工作站：开启Agilent 1260各模块电源，待Agilent 1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击LC1260(联机)。
c)开启工作站：进入工作站，点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图：选择“视图->系统视图”，即可显示仪器控制视图。
d)配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标左键，点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵；溶剂要求：色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇，二次蒸馏水。
e)冲洗流动相管路：反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。
右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%，冲洗至管线内无气泡为止; 设置溶剂比例为初始比例，“流速”为1ml/min，关闭Purge阀。
f)开启模块：开启模块：鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框，选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”。
g)监视基线：点击“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
h)平衡色谱柱、进样分析：监视压力和信号基线等待平稳后，可以进样采集分析。
二、数据采集方法编辑a)方法编辑：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“新建方法”，调用化学工作站的默认方法DEF-LC.M ，选择“方法”菜单下的“编辑完整方法”，设置好泵参数、进样方式、柱箱温度、波长、积分参数等，即可开始编辑一个完整地方法。
b)方法存贮：在“方法和运行控制”状态下，单击“方法”菜单，选择菜单中“方法另存为”选项，方法以检测项目名存贮。
三、样品信息编辑a)运行单个样品：在“方法和运行控制”状态下，单击“运行控制”菜单，选择“样品信息”进行样品信息编辑。
Agilent1260液相色谱系统操作规程
Agilent 1260液相色谱系统标准操作及维护保养规程1目的规范 Agilent 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养，保证仪器的正常运转，确保检测工作的顺利进行。
2适用范围适用于 Agilent 1260 系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。
3职责实验室分析人员负责Agilent 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4系统组成4.1 Agilent 1260系列四元泵(G1311C)和脱气机；4.2 可变波长紫外检测器（ VWD G1314F）；4.3 Chemstation A.01.04色谱工作站4.4 国产柱温箱（ AT-550）色谱柱；4.5 电脑、打印机等辅助设备。
5定义无6操作程序6.1 开机前的准备6.1.1 检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。
6.1.2 检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态，确认仪器处于正常状态；6.1.3 流动相的制备：6.1.3.1 按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。
6.1.3.2 用前超声脱气（一般 10～ 20min）。
6.1.4 更换流动相：6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出，用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中，并盖好瓶盖；6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖。
6.1.5 供试溶液的配制：Agilent 1260液相色谱系统标准操作及维护保养规程6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。
6.1.5.2定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2 份。
6.1.5.2如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。
6.1.6 选择色谱柱：6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱；6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同，若不同则需进行更换。
6.1.7 更换色谱柱6.1.7.1拆卸原色谱柱：先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线；松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线；用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内。
Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
Agilent1260⾼效液相⾊谱仪操作规程1、⽬的确保Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪的正确使⽤及管理。
2、范围研发分析中⼼实验室Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪。
3、责任仪器使⽤者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机，进⼊Windows 画⾯。
4.1.2⾃下⽽上打开1260LC各模块电源，待各模块⾃检完成后，双击电脑桌⾯上LC1260-1(Online)图标，化学⼯作站⾃动与1260LC通讯，进⼊⼯作站画⾯。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项，也可单击⼯作站画⾯左下⾓【Method and Run control】项，进⼊⽅法和运⾏控制窗⼝。
4.2 安装⾊谱柱正确安装实验所需的⾊谱柱，注意⾊谱柱流速箭头⽅向，试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒⼊相应的溶剂瓶中，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】，在参数设置处输⼊各溶剂瓶（A、B、C、D）内溶液实际体积和停泵体积，单击【OK】键，即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运⾏，并设置清洗时间，每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱⽓逆时针旋开Purge阀，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运⾏。
设置“solvents”⼀栏中相应参数，将试验中所⽤到的管道逐⼀脱⽓，直⾄管内（由溶剂瓶到泵⼊⼝）⽆⽓泡为⽌所需时间，3ml/min冲洗⼤约需5min～10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵，顺时针旋紧Purge阀。
agilent1260高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程STANDARD OPERATING PROCEDURE的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于Agilent 1260高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows 7画面。
4.1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。
待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。
（注意：在“仪器1脱机”关闭的情况下，“仪器1联机”方能打开。
）4.1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。
4.1.4 保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。
单击“确定”。
（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。
4.1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。
右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量，从0 ml/min 逐渐变为3ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。
右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
4.1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。
4.2 数据采集方法、系列编辑：4.2.1 编辑完整方法：4.2.1.1 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。
4.2.1.2 方法信息：在“方法注释”中写入方法的相关信息。
(完整版)Agilent1260液相色谱系统操作规程
1目的规范Agile nt 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养，保证仪器的正常运转，确保检测工作的顺利进行。
2适用范围适用于Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。
3职责实验室分析人员负责Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4系统组成4.1 Agile nt 1260 系列四元泵（G1311C）和脱气机；4.2可变波长紫外检测器（VWD G1314F ；4.3 Chemstation A.01.04 色谱工作站4.4国产柱温箱（AT-550）色谱柱；4.5电脑、打印机等辅助设备。
5定义无6操作程序6.1开机前的准备6.1.1检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。
6.1.2检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态，确认仪器处于正常状态；6.1.3流动相的制备：6.1.3.1按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。
6.1.3.2用前超声脱气（一般10〜20min）。
6.1.4更换流动相：6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出，用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中，并盖好瓶盖；6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖。
6.1.5供试溶液的配制：6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。
6.1.5.2定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2份。
6.1.5.2如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。
6.1.6选择色谱柱： 6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱；6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同，若不同则需进行更换。
6.1.7更换色谱柱6.1.7.1拆卸原色谱柱：先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线；松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线；用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内6.1.7.2安装新色谱柱：从专用包装盒内取出色谱柱，松动并取下色谱柱出入口的止动塞；将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端，拧紧螺帽；（注意：安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。
1260维护保养规程
安捷伦1260高效液相色谱仪维护保养规程
1、用洁净的湿布擦拭仪器表面，确保仪器表面清洁无杂物。
2、更换Purge Valve内的白色过滤芯。
（当打开Purge Valve时，压
力高于10bar，表明过滤芯已堵）。
3、更换液相色谱柱的保护柱。
4、保持泵系统的清洁：（1）选用优质的、经微孔滤膜脱气处理的
溶剂冲洗泵系统。
（2）确保密封圈密封良好。
5、如色谱柱长期不用，用适当的有机溶剂保存并密封或定期给柱
子补充合适的流动相。
6、定期检查溶剂瓶内溶剂过滤器，确保过滤器没有堵塞，发生堵
塞后，用超声波清洗仪清洗。
编制：审核：批准：。
安捷伦使用
目的：建立安捷伦1260LC液相色谱仪的标准操作规程。
使液相色谱仪的操作规范化、标准化，符合检验操作和GMP的管理要求，使操作人员，使操作人员能够正确、安全、合理的操作气液相色谱仪。
内容：
1.编制依据：安捷伦1260LC液相色谱仪使用说明书
3.工作原理：该色谱柱液体流动洗脱来检测样品中成分的含量。
4.标准操作规程
4.1做好开机前的准备工作，换好流动相，分别打开泵、自动进样器、检测器，柱温箱电脑，检查是否正常。
(如果使用蒸发光检测器，还要打开氮气，流速调为1.6L/min）
4.1.1启动工作站：打开Agilent1260工作站，待各模块自检完成后（各模块右上角指示灯为黄色或无色），点击屏幕左下角“仪器”“仪器配置”选择“配制模块”
来配制仪器，选择IP地址，默认地址为192.168.254.11.点击确定。
系统会根据指定的IP地址来找到所配置的模块及其相关信息，点击确定。
点击右上角“启动”仪器进入测量界面。
4.1.2模块右上角模块灯颜色说明：无色：模块准备就绪，黄色：模块为准备就绪，绿色：正在进样分析，红色：模块出错，所有模块红色，仪器有漏液。
工作站图形颜色说明：绿色：模块准备就绪，黄色：模块未准备就绪，蓝色：正在进样分析，红色：出错或者不能联机，灰色：此模块没启用。
将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏“黄色仪器未就续”，系统会自动显示未就续或出错原因。
Agilent 1260液相简明操作规程
1260液相色谱仪操作规程
一． 仪器的操作
1.开机：电脑→液相→工作站图标
2.新建方法（或调用已有方法）
3.设置参数：
自动进样器:进样量、标准进样/洗针进样（洗针位） 泵:流速→溶剂比例（等度/梯度）→采集时间→打开泵 柱温箱:温度→打开柱温箱
检测器:波长→打开紫外灯
4.等待系统平衡：（打开系统）→系统就绪→基线平
5.设置单针进样：
操作者→子目录→前缀/计数器→样品位置→运行方法 6.设置序列进样：
序列参数：操作者→子目录→前缀/计数器
序列表：样品瓶→方法名称→进样次数→（数据文件）→运行序列
7.冲柱：
10%有机溶剂（甲醇或乙腈）+90%水 20分钟→100%有机有机溶剂（甲醇或乙腈）20分钟
8.关机：
关闭模块→关闭仪器电源→关闭工作站→关闭电脑
二． 数据的分析
1.调用方法
2.调用信号
3.图形优化：
信号选项→范围（时间范围、响应范围）
4.积分优化：
积分事件→积分开/关→斜率灵敏度、峰宽→最小峰面积、最小峰高→保存退出
5.校正：
新建校正表→化合物→含量→确定
6.报告：
设定报告→定量结果（百分比法/外表法）→报告类型
（简短报告/性能报告）→色谱尺寸（时间80，响应20）→预览报告→打印
7.保存方法：方法另存为
三． 仪器的维护
1.泵 :
过滤白头、被动阀、泵杆和密封圈
2.脱气机 ：
冲洗、保存在有机相、交替使用AD路
3.自动进样器 ：
洗针进样、更换针、更换针座、更换密封垫
4.检测器：
更换氘灯、流通池
5.溶剂：需要抽滤
6.样品：需要过滤。
Agilent 1260高效液相色谱仪实验操作
实验十七 Agilent 1260高效液相色谱仪实验操作一、实验目的1．熟悉液相色谱仪的整套装置、工作原理、工作流程；熟练操作和使用液相化学工作站。
2．掌握高效液相色谱仪定性、定量描述未知物含量的实验方法。
3．了解高效液相色谱仪的基本维护与保养细则。
二、实验原理液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106次）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。
根据各组分在色谱图上的保留时间（或保留距离），可直接进行组分的定性；根据各组分峰面积的大小，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定相应组分的含量。
液相色谱仪工作原理图三、仪器与试剂1．仪器Agilent 1260 高效液相色谱系统（包括G4212B型二级管阵列检测器、G1311B 型四元泵、标准自动进样器、液相色谱工作站），电子分析天平，微波消解萃取工作站，超声波清洗器。
2．试剂色谱甲醇、超纯水、99.8% A标准对照品。
3. 色谱条件色谱柱：ZORBAX-SB-C18 色谱柱(150 mm×4.6 mm，5μg )；流动相：甲醇:水= 60:40，流速为1mL/min；检测波长：250 nm，柱温：室温25℃。
四、实验操作内容1．标准溶液配制准确称取一定量的A标准对照品，用甲醇配成一定浓度的对照品溶液。
2. 供试样品溶液的制备准确称取0.5g粉碎均匀的试样( 精确到0.0001g )于萃取罐中，加入超纯水25 mL，在60℃下微波提取30 min，冷却至室温，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液供测定。
Agilent 1260高效液相色谱仪操作规程
1、目的确保Agilent 1260高效液相色谱仪的正确使用及管理。
2、范围研发分析中心实验室Agilent 1260高效液相色谱仪。
3、责任仪器使用者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机，进入Windows 画面。
4.1.2自下而上打开1260LC各模块电源，待各模块自检完成后，双击电脑桌面上LC1260-1(Online)图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项，也可单击工作站画面左下角【Method and Run control】项，进入方法和运行控制窗口。
4.2 安装色谱柱正确安装实验所需的色谱柱，注意色谱柱流速箭头方向，试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒入相应的溶剂瓶中，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】，在参数设置处输入各溶剂瓶（A、B、C、D）内溶液实际体积和停泵体积，单击【OK】键，即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运行，并设置清洗时间，每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱气逆时针旋开Purge阀，单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行。
设置“solvents”一栏中相应参数，将试验中所用到的管道逐一脱气，直至管内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止所需时间，3ml/min冲洗大约需5min～10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵，顺时针旋紧Purge阀。
4.5 平衡色谱柱单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】项下“Quat Pump”, 在“solvents”一栏将试验中要用到的有机相通道（甲醇/乙腈）设置为100%，并将“Flow”从低流速逐级设为1ml/min，在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行，冲洗约10min钟后，设定与测试方法相同的柱流速和流动相比例平衡色谱柱(梯度采用起始流动相比例)，冲洗色谱柱，直至基线走平，一般需要30 min ～60 min。
Agilent 1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程
Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程，规范人员操作。
2 适用范围适用于Agilent（四元泵）高效液相色谱仪的使用与维护。
3 责任与监督检验人员负责执行本规程，部门负责人监督本规程的实施。
4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.2仪器操作4.2.1系统组成：本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。
4.2.2操作前准备：4.2.2.1流动相的选择分类：组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。
（溶剂最好为HPLC级，水为纯化水）其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相，通过调节各组分的比例改变流动相的极性，已达到最佳的分离效果，对于部分情况还可以加入缓冲盐，调节出峰时间和达到改善峰型的效果。
4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质，保护系统和色谱柱，在流动相使用完，装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。
4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡，降低基线噪音，在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。
对于溶解在流动相中的极微气体，安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机，可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。
4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后，由于水分子振动摩擦，使水温上升，因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。
(完整word版)Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
四川中安检测有限公司作业指导书Agilent1260高效液相色谱仪操作规程1.目的正确使用仪器，确保化验结果的准确度、精密度，延长仪器使用寿命。
2.范围适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。
3.职责3.1操作人员：按照本操作规程操作仪器，对仪器进行自检，作使用登记。
3.2负责人：负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期自检、仪器综合管理。
4.要求4.1开机4.1.1溶剂准备按要求准备所需流动相，每瓶均超声10min排气，将原来浸泡在甲醇中的滤头取出对应放在各个流动相中（A：二次蒸馏水；D:缓冲溶液；B:色谱纯甲醇C：色谱纯乙腈）。
4.1.2开启工作站4.1.2.1启动计算机打开计算机电源，登陆windows 操作系统。
4.1.2.2启动工作站打开Agilent 1260 各模块电源，待Agilent 1260 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击屏幕桌面图标“HPLC -1260（联机）”，则进入工作界面。
模块右上角状态灯颜色说明：无色：未开电源或者模块准备就绪；黄色：模块未准备就；绿色：正在进样分析；红色：模块出错；所有模块红色：仪器有漏液工作站图形颜色说明：绿色：模块准备就绪；黄色：模块未准备就绪；蓝色：正在进样分析；红色：出错或者不能联机；灰色：此模块没启用。
将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏，系统会自动显示未就绪或出错的原因。
4.1.3冲洗流动相管路反时针旋开泵模块上的溶液排空阀，右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
将实验中需要的各个通道分别设置“溶剂”为100%，点击确定开始冲洗，每个通道冲洗3-5分钟，若冲洗通道时压力显示超过10 bar，则可换过滤白头。
4.1.4平衡柱子冲洗完柱子，按要求调整流动相速率及流动相比例，顺时针旋转排空阀，关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min)，然后右键点击需用检测器模块视图的空白处，选择“方法”进入检测器的参数设置界面，按要求设置参数（停止时间与泵一致），后点击右键，选择“控制”，在弹出的窗口选择打开，开始平衡柱子，监视信号基线和压力，等待平稳后即可进样（若用缓冲溶液和有机相作为流动相，先用水和有机相平衡30 min，比例与所要求的缓冲溶液和有机相比例一致），待基线平稳后换用所要求的缓冲溶液和有机相按比例混合平衡柱子30 min）。
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的：建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程，保证正确使用。
二、适用范围：适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。
三、职责：研发部对本标准的实施负责。
四、正文：1 仪器组成及电源：1.1 仪器组成：本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。
1.2 电源：泵为110V稳压电源，检测器为220V稳压电源，工作站为220V稳压电源。
1.3开机运行前，更换溶剂瓶中的流动相，若管道为第一次使用，先用针管排空各管道中的气泡。
2 仪器硬件开启：自上而下或自下而上顺序开启各模块（真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器），打开电源指示灯，指示灯亮，显“绿色”；状态指示灯指示当前的状态，各模块进行自检（自动进样器的门板必须关上）。
3安捷伦化学工作站的操作：3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面，各模块的软件图标均为绿色。
3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”，来调用所需界面（或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。
3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。
3.1.4打开“Purge”阀，点击泵图标，点击“设置泵”，进入泵编辑画面，设置流速为3-5ml/min，点击“确定”，则系统开始排空管道内的气泡，切换通道继续排空，直至所有要用的通道无气泡为止。
3.1.5点击泵图标，选“控制”选项，选中“关闭”关泵，关闭“Purge”阀。
3.1.6点击泵图标，设置流速冲洗柱子。
3.1.7点击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。
3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项，选中除“数据分析”外三项，点击“确定”，进入下一画面。
Agilent-1260LC液相色谱仪使用、维护保养规程
.Agilent 1260-LC液相色谱仪使用、维护操作规程目录一、目的 (1)二、适用围 (1)三、容 (1)四、附件 (17)五、变更历史 (17)一、目的明确Agilent 1260 LC型液相色谱仪硬件使用、维护保养操作方法，使质量部检验人员有章可循。
二、适用围本规程适用于公司Agilent 1260-LC型液相色谱仪使用、维护保养操作。
三、容1.制定依据《Agilent 1260 LC system Operating Manual》《Agilent OpenLAB Control Operating Manual》2.工作原理：2.1.高效液相色谱法是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱，在色谱柱各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
利用色谱图色谱峰面积或峰高大小可对待测样品进行定性定量分析。
Agilent 1260 LC型液相色谱仪主要由G1329B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316柱温箱、G4212B二极管阵列检测器和Open LAB色谱工作站等部件组成。
3.基本操作步骤3.1.开机准备3.1.1.启动计算机：打开计算机电源，登陆windows操作系统。
3.1.2.启动工作站：打开Agilent1260LC各模块电源。
待Agilent 1260LC各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击屏幕左下角“开始”，选择“所有程序”，选择”Agilent Technologies”选择“Open LAB”，选择OpenLAB Control,或单击桌面图标则会进入到上图的界面。
上面步骤如果已经配置过，则不需要操作。
3.2.仪器配置：3.2.1.通过点击菜单左上方的，可以分别创建位置和仪器，得到如下的界面：3.2.2.输入相关信息，注意仪器类型一栏要选择Agilent LC System，输入完后点击确定。
(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程
Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程，规范人员操作。
2 适用范围适用于Agilent（四元泵）高效液相色谱仪的使用与维护。
3 责任与监督检验人员负责执行本规程，部门负责人监督本规程的实施。
4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.2仪器操作4.2.1系统组成：本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。
4.2.2操作前准备：4.2.2.1流动相的选择分类：组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。
（溶剂最好为HPLC级，水为纯化水）其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相，通过调节各组分的比例改变流动相的极性，已达到最佳的分离效果，对于部分情况还可以加入缓冲盐，调节出峰时间和达到改善峰型的效果。
4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质，保护系统和色谱柱，在流动相使用完，装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。
4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡，降低基线噪音，在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。
对于溶解在流动相中的极微气体，安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机，可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。
4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后，由于水分子振动摩擦，使水温上升，因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。
76安捷伦1260型液相色谱仪使用清洁维护保养操作规程
目的：建立1260型液相色谱仪使用清洁维护保养操作规程。
范围：1260型液相色谱仪。
责任人：质量管理部经理、化验室主任、化验员。
内容：1. 开机准备：1.1启动计算机：打开计算机电源，登陆 windows操作系统。
1.2启动液相：打开各模块电源。
待各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，双击“EZChrom Elite”图标，或者“开始->所有程序->Chromatgraphy-> EZChrom Elite”。
1.3开启工作站：工作站打开，点击“控制”。
打开仪器控制视图：选择“控制->仪器状态”，即可显示仪器控制视图。
视图模块右上角状态灯颜色说明：无色：未开电源或者模块准备就绪黄色：模块未准备就绪绿色：正在进样分析红色：模块出错所有模块红色，仪器有漏液工作站图形颜色说明：绿色：模块准备就绪黄色：模块未准备就绪蓝色：正在进样分析红色：出错或者不能联机灰色：此模块没启用2.进样2.1配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标左键，出现图形，点击“瓶填充”设置溶剂瓶中流动相实际体积。
冲洗流动相管路：旋开溶液排空阀。
左键单击“流速”，设置“流速”为5ml/min。
2.2开启模块：单击每个模块右下角的按钮，可以单独启动模块或者单击检测器按钮灯未点亮，检测器图形为黄色或者单击右键“控制->打开”按钮，启动全部模块，检测器灯也将点亮。
2.3监视基线：点击按钮或者“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
点击“改变”按钮，选择“可选信号”中需要监视的信号，“添加”到“选定信号中”。
调整“窗口”中“X 周范围”，如需要画“0”点基线，请选择“画零线”。
调整 Y 轴“Y 轴范围”与“偏移量”或者选择“Y 轴自动调整”来选择合适的监视图形。
2.4平衡色谱柱、进样分析：关闭溶液排空阀(确认泵流量为 1ml/min)，监视压力基线，等待平稳后，可以进样采集分析。
Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程 武佳
Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程4B509 负责人：武佳老师 6651821 开机1.1 打开电脑。
1.2 从泵到检测器依次打开液相色谱各个模块的电源。
1.3 双击桌面“仪器—联机”，进入联机界面。
1.4 排气：1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约半圈）。
1.4.2 右键单击“泵”图标区域，选择“方法…”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min（一般为3－5ml/min），点击“确定”。
1.4.3 右键单击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
1.4.4 右键单击“泵” 图标，点击“方法…”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。
1.4.5 右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。
1.4.6同理右键单击“柱温箱”，“检测器”图标，点击“方法…”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器。
2 编辑方法2.1 点击“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法。
2.2 选中除“数据分析”外的三项，进入下一选项卡。
2.3 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。
进入下一选项卡。
2.4 泵参数设定：在“流速”处输入流量, 如1.0ml/min，停止时间：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75％即可。
进入下一选项卡。
2.5 自动进样器参数设定: 选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下一选项卡。
2.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。
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Agilent 1260-LC液相色谱仪使用、维护操作规程目录一、目的 (2)二、适用范围 (2)三、内容 (2)四、附件 (18)五、变更历史 (18)一、目的明确Agilent 1260 LC型液相色谱仪硬件使用、维护保养操作方法，使质量部检验人员有章可循。
二、适用范围本规程适用于公司Agilent 1260-LC型液相色谱仪使用、维护保养操作。
三、内容1.制定依据《Agilent 1260 LC system Operating Manual》《Agilent OpenLAB Control Operating Manual》2.工作原理：2.1.高效液相色谱法是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由色谱工作站进行记录处理。
利用色谱图色谱峰面积或峰高大小可对待测样品进行定性定量分析。
Agilent 1260 LC型液相色谱仪主要由G1329B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316柱温箱、G4212B二极管阵列检测器和Open LAB色谱工作站等部件组成。
3.基本操作步骤3.1.开机准备3.1.1.启动计算机：打开计算机电源，登陆windows操作系统。
3.1.2.启动工作站：打开Agilent1260LC各模块电源。
待Agilent 1260LC各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击屏幕左下角“开始”，选择“所有程序”，选择”Agilent Technologies”选择“OpenLAB”，选择OpenLAB Control,或单击桌面图标则会进入到上图的界面。
上面步骤如果已经配置过，则不需要操作。
3.2.仪器配置：3.2.1.通过点击菜单左上方的，可以分别创建位置和仪器，得到如下的界面：3.2.2.输入相关信息，注意仪器类型一栏要选择Agilent LC System，输入完后点击确定。
出现如下界面：3.2.3.选定刚刚创建的仪器名称，点击“配置仪器”，3.2.4.选择“配置模块”，注意不要选择“使用经典驱动程序”。
如果仪器中包括DAD、FLD，则需要选择“3D光谱评估”。
点击确定。
3.2.5.选择“是”，来配置仪器；3.2.6.选择IP地址，输入仪器IP，默认地址为192.168.254.11。
点击确定。
3.2.7.系统会根据指定的IP 地址来找到所配置的模块及其相关信息，点击确定。
3.2.8.再次点击确定，使配置生效。
3.2.9.点击“启动”或者“离线启动”来打开在线或离线工作站，也可点击“创建快捷方式”来生成。
3.3.开启工作站：3.3.1.双击桌面图标，工作站打开，点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图：选择“视图>系统视图”，即可显示仪器控制视图，选择“视图>样品视图”，即可显示样品信息视图。
颜色说明：颜色位置无色黄色绿色红色蓝色灰色模块右上角状态灯未开电源或者模块准备就绪。
模块未准备就绪。
正在进样分析。
模块出错；所有模块红色，仪器有漏液。
——工作站图形颜色—模块未准备就绪。
模块准备就绪。
出错或者不能联机。
正在进样分析。
此模块没启用。
3.3.2.可将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏，系统会自动显示未就绪或出错的原因。
3.3.3.配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形单击鼠标左键，出现图形如右图所示：点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵。
3.3.4.冲洗流动相管路：反时针旋开泵模块上的溶液排空阀（注：旋动半圈即可）。
右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为3ml/min，四元泵应分别将A,B,C,D四个通道设置“溶剂”为100%(点击右图中各个通道后面的方框，即可开启“%”设置框，输入需要设置的数值百分比后，单击右侧的空白框，A 相即可自动配置为100%-(%B+%C+%D)的百分比)，冲洗，冲洗时间为2～5min为宜。
3.3.5.开启模块：鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框，选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”，监视基线：点击“视图>在线信号”打开“在线图谱”点击“改变”按钮，选择“可选信号”中需要监视的信号，“添加”到“选定信号中”。
调整“窗口”中“X轴范围”，如需要画“0”点基线，请选择“画零线”。
调整Y轴“Y轴范围”与“偏移量”或者选择“Y 轴自动调整”来选择合适的监视图形平衡色谱柱、进样分析：关闭溶液排空阀（确认泵流量：1ml/min），监视压力和信号基线等待平稳后，可以进样采集分析。
3.4.建立全新完整方法向导：3.4.1.新建完整方法：选择“方法>新建方法”后，点击“方法>编辑完整方法”编辑新方法。
3.4.2.选择“方法信息”、“仪器/采集”、“数据分析”,“数据分析”也可以在“数据采集后”后再加入方法中。
3.4.3.写入方法注释，而后按照数据采集方法编辑与数据分析方法编辑中所述内容，根据具体的仪器配置完成所有模块参数的设置。
3.4.4.数据采集方法编辑：a.泵设置：设置泵右键点击泵模块视图空白处，选择“方法”或者点击进入泵的参数设置界面（如右图）。
在“压力限-上限”＞200时，流速设置范围为：0～5.00ml/min；在“压力限-上限”≤200 时，流速设置范围为：0～10.00ml/min➢停止时间—设置泵停止分析的时间，时间范围为：0.0～99999.00min 或“无限制”➢后运行时间—泵在后运行时间保持后运行状态，从而延迟下一个分析的开始。
在溶剂成分改变后(如，在梯度洗脱后)，可以使用“后运行时间”是色谱柱达到平衡，时间范围为：0.0～99999.00min或“无限制”。
➢压力限—“上/下限”是最大/小压力限制，达到“上限”或者“下限”值时，泵将自动关闭，从而防止分析系统压力超限（压力上限低于实际值时，设备会出现错误信息。
）。
➢溶剂—溶剂B、C和D的百分比可以设置为0 到100%之间的任何值。
“溶剂A”通常输送剩余的量：100%-(%B+%C+%D)。
➢➢时间表—通过在“时间”字段中输入时间并在时间表的以下字段中输入适当的值，可以使用时间表对分析过程中参数进行设置。
泵时间表中的值随时间从初始值到时间表中定义的时间所对应的值发生线性变化（如，流速和压力最大限值）。
b.泵的运行控制右键点击泵模块视图空白处，选择“控制”进入泵的控制界面。
（如右图）➢泵—控制泵的“启动”，“关闭”或者“待机”状态。
➢泵密封垫清洗组件（Seal-Wash）—控制泵密封垫清洗蠕动泵的开关以及定期开关的程序。
（运行周期一定要设置，不能长期运行，防止部件损坏。
）c.设置自动进样器右键点击进样器模块视图的空白处，选择“方法”后进入进样器的参数设置界面。
（如右图）➢标准进样—简单的进样，在“进样量”字段中制定进样量。
进样量取决于自动进样器的配置设置（进样量为1～100μl）。
➢洗针进样—可以指定进样包括在抽取样品后，将针移动到针座之前进行针清洗，在“针清洗”字段中指定装有清洗溶剂的位置（瓶），清洗瓶应不加密封盖。
➢使用进样器程序—可以使用当前的进样器程序，将显示当前进样器程序中的行数。
选择“编辑”可以显示“进样器程序”，以进行编辑。
➢最优化—启用重叠进样，可适当减少运行时间。
d.柱温箱设置：右键点击柱温箱模块视图空白处，选择“方法”进入柱温箱的参数设置界面（如右图）➢温度—控制柱温箱温度。
限值：-5.0到80.0度。
柱温箱只能冷却到比环境温度低10度的温度。
➢停止时间—设置柱温箱停止分析的时间。
一般设置为“与泵一致”即可。
➢时间表—此处可以变化的参数包括左右加热模块的温度。
e.设置DAD参数：右键点击DAD模块视图的空白处，选择“方法”进入DAD 的参数设置界面（如右图）➢信号—样品：检测到的样品吸光度所对应的波长。
参比波长对应的吸光度将从样品波长对应的吸光度中扣除；带宽：样品波长的带宽。
带宽决定了检测吸光度的波长范围通常小于20nm，如，样品波长为254nm，样品带宽为20nm，则从244～264nm的波长范围检测吸光度；参比：参比吸光度对应的波长。
参比波长可以补偿由于基线吸光度中的变化(如，由于梯度洗脱中溶剂组成的变化)而引起的波动；带宽：参比波长的带宽通常设定为小于100nm。
二极管阵列检测器可以存储8个信号➢停止时间—设置DAD停止分析时间。
一般设置为“与泵一致”即可。
➢光谱—存储：定义了在信号A上提取并保存光谱的点。
“无”，未提取光谱；“顶点+基线”，在风的顶点和基线处提取光谱；“顶点+斜率+基线”，在峰的顶点、基线、上升斜率和下降斜率提取光谱；“峰中的全部”，提取峰内的所有光谱；“每个一条光谱”，选择“全部”，将连续提取光谱，但是只每个一条光谱存储一条光谱，其他光谱将被弃用，这样可以减少必要的数据存储量；“全部”，根据“峰宽”设置连续提取光谱。
每个峰宽采集八条光谱，一条光谱的采集时间略少于峰宽除以8，即大于或者等于0.01s且小于或等于2.55s➢范围—定义光谱存储的波长范围。
从190nm到950nm➢步长—定于光谱存储的波长分离度。
从0.10nm到100.00nm➢阈值—预期的最小峰高度。
峰检测器忽略低于阈值的所有峰且不保存光谱。
限值：0.001到1000.00mAU，步长为0.001mAU➢狭缝—设置检测器的光学带宽；狭缝越窄，仪器的光学带宽就越小，但其灵敏度也越低。
光学带宽越小，光谱的分离度就越高。
➢温度控制—二极管阵列检测器的光学设备的温度控制。
保持光学设备在一个恒定的温度可以提高不稳定高温环境下的基线稳定性。
➢时间表—DAD中可改变的参数包括自动平衡、更改信号、更改阈值、更改峰宽、更改光谱采集模式。
3.5.方法的保存与调用3.5.1.保存方法：选择“方法>保存方法/方法另存为”3.5.2.保存即时改变的方法：通过在线改变数据采集或者在线/离线改变数据分析参数而变更方法，可以通过选择“方法>保存方法/方法另存为”或者保存新的参数到现在的方法中或者另存为新方法3.5.3.调用方法：通过选择“方法->调用方法”或者调用已有的方法。
方法调用后便立即生效。
3.6.进样设置：3.6.1.单针进样：选择“运行控制>样品信息”。
查看单针，点击。
➢路径—选择数据文件存储路径；➢选择手动或者前缀/计数器—命名数据文件名；➢样品位置—设置样品位置，直接填写数字即可，不需要写“样品瓶”；➢运行方法—保存样品信息并运行方法；➢确定—保存样品信息，后“运行控制->运行方法”；3.6.2.序列进样：➢利用自动进样器自动批量进样。