细胞核膜蛋白提取方法
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产品简介： 贝博核膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞中提取细胞核的
膜蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。制备的核膜蛋白不仅纯度高，保持天然活 性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝 胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
细胞核膜蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成 BB-3174-1 BB-3174-2 规格 50T 100T 细胞核提取液A 20ml 40ml 细胞核提取液B 25ml 50ml 膜蛋白溶解液 10ml 20ml 蛋白酶抑制剂混合物Baidu Nhomakorabea250ul 500ul
储存条件： 蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。 本试剂盒提取的蛋白不可用于 2D 电泳。如下游实验需要用于 2D 电泳，请使用贝博其 他货号的试剂盒。 产品特点： 1、 使用方便，从细胞中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。 2、 将蛋白提取的时间缩短至 1 小时。 3、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 4、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。 5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包 含 6 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。 该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白 酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 使用方法： 1. 提取液制备：每 500ul 冷的提取液 A 和 B 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物， 混匀后置冰上备用。 2. 取 5-10×106 个细胞①，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基， 尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 细胞沉淀中加入 400μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒，置冰上振荡 15 分 钟。 5. 在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟。 6. 弃上清。 7. 在沉淀中加入 500μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒，置冰上振荡 20 分钟。
8. 37℃水浴 10 分钟。 9. 在 37℃② 1000×g 离心 5 分钟。 10. 此时溶液分为两层，小心吸掉上层③，留着备用分析，分离出管底部下层大约 50ul 液体。 11. 用 80-150ul 溶解液 C 稀释该下层溶液，即得细胞核膜蛋白样品。 12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
产品简介： 贝博核膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞中提取细胞核的
膜蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。制备的核膜蛋白不仅纯度高，保持天然活 性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝 胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
细胞核膜蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成 BB-3174-1 BB-3174-2 规格 50T 100T 细胞核提取液A 20ml 40ml 细胞核提取液B 25ml 50ml 膜蛋白溶解液 10ml 20ml 蛋白酶抑制剂混合物Baidu Nhomakorabea250ul 500ul
储存条件： 蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。 本试剂盒提取的蛋白不可用于 2D 电泳。如下游实验需要用于 2D 电泳，请使用贝博其 他货号的试剂盒。 产品特点： 1、 使用方便，从细胞中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。 2、 将蛋白提取的时间缩短至 1 小时。 3、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 4、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。 5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包 含 6 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。 该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白 酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 使用方法： 1. 提取液制备：每 500ul 冷的提取液 A 和 B 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物， 混匀后置冰上备用。 2. 取 5-10×106 个细胞①，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基， 尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 细胞沉淀中加入 400μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒，置冰上振荡 15 分 钟。 5. 在 4℃，12000×g 条件下离心 5 分钟。 6. 弃上清。 7. 在沉淀中加入 500μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒，置冰上振荡 20 分钟。
8. 37℃水浴 10 分钟。 9. 在 37℃② 1000×g 离心 5 分钟。 10. 此时溶液分为两层，小心吸掉上层③，留着备用分析，分离出管底部下层大约 50ul 液体。 11. 用 80-150ul 溶解液 C 稀释该下层溶液，即得细胞核膜蛋白样品。 12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。