仔猪黄白痢大肠杆菌耐药性检测及ERIC图谱分析_陈俭
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验程子兵1 董春霞2石国界3沙里塔那4 马长丽1（1. 塔城地区动物疾控与诊断中心新疆塔城834700；2. 重庆市武隆县畜牧兽医局重庆市武隆县408500；3. 塔城市畜牧兽医工作站新疆塔城834700；4. 额敏县兽医工作站新疆额敏县834600）摘要:对塔城地区一农户饲养猪群中仔猪发生的临床症状以水肿病、白痢、黄痢为特征的病例进行了样品采集，后经麦康凯、伊红美蓝分离培养，糖发酵生化试验、动物试验等结果显示均为大肠杆菌，同时通过药敏试验筛选出敏感抗生素。
关键词：仔猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验Abstract：Specimens with dropsy and dysentery clinical symptoms were isolated from one household raises pig group in Tacheng area. By bacteria culture, biochemical test and animal test, the results indicate the bacterium is pathogenic Escherichia Coli. Meanwhile, we ascertain sensitive antibiotics to this E coli by medicine test.Key words:pig; Escherichia Coli; isolate indentify; medicine test仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪白痢、黄痢和水肿病，其中黄痢多发生于1周内哺乳仔猪，病猪主要表现为排黄色糊状粪便；白痢多发于10～30日龄，病猪主要表现为排乳白色或灰白色腥臭糊状粪便；水肿病多发于断奶仔猪，主要有神经症状、胃壁、肠黏膜等组织水肿，四季均可发生，发病率和致死率高低不等，严重者同窝仔猪中发病率可达90％以上，致死率可达100％，幸存者则影响生长，甚至成为僵猪【l】。
仔猪黄痢的病原分离鉴定及药敏试验
２ 试 验 方 法
２ ． １ 细菌分 离 取 每窝 腹 泻严 重仔 猪 ３头 ， 灭 菌棉
签采 集肛 门拭 子 ， 病 料 分别 接 种 于 麦 康 凯琼 脂 平 板
用庆 大霉 素 、 硫酸 卡那 霉素 和氧 氟沙 星等 药物 治疗 。
第４ １ 卷
第 １ 期
仔猪黄痢的病原分离鉴定及药敏试验
陈 颖 ，徐 雨 ，韦登雄 ， 王 海 ，黄向岚 ，徐孝会 ，雷棉 雨
（ 贵州省关 岭县动物疫病预防控制 中心 ， 贵州 关 岭 ５ ６ １ ３ ０ ０ ）
摘要 ： 对贵州省某养猪场发 生仔 猪黄痢的病例进行病原分离鉴定 ， 病仔 猪直肠拭 子接种至普 通营养琼脂 平板 、 麦康 凯琼 脂平 板 ， 经革兰 氏染色镜检 和生化试验 ， 鉴定为大肠埃希 氏菌 ； 药敏试验表 明 ， 该菌对 头孢 哌酮 、 头孢 曲松高度敏 感 ， 对 环丙沙 星、 庆大霉素和卡那霉素等药物不敏感 。根据药敏试 验指导用药后 ， 仔猪恢 复健康 。
关键词 ： 仔猪黄痢 ； 大肠埃希 氏菌 ； 分离； 药敏试验
中图分类号 ： ￥ ８ ５ ８ ． ２ ８ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文章 编号 ： １ ０ ０ ７ —１ ４ ７ ４ （ ２ ０ １ ７ ） ０ １ — ０ ０ １ ０ — ０ ３
仔 猪 黄痢是 由一定血 清 型 的大 肠埃 希 氏菌 引起 的常见猪 病 之一 ， 在 世 界 各 地 均 有 流行 ， 有 季 节性 ， 多 发于 １ — ３日龄仔 猪 。 主要 以排 出黄 色 稀粪 和 急 性
然而， 随着广谱抗菌药物的广泛使用与大量滥用 ， 产 生耐药细菌 ， 耐药性增强＿ ２ ］ 。大肠大肠埃希氏菌病
仔猪腹泻症大肠杆菌耐药性的监测
李 梦 潇 （ 黑龙 江省 依 安 县 动 物 检 疫 站 黑 龙 江 依 安 １ １ ０ ） ６５ ｛ ）
科
仔猪腹 泻症 大肠 杆菌 耐药性 的监 测
摘 要 ： 杆 菌分 离与鉴 定最 常规的 方 法是 生化 试验 、 物接 种 、 大肠 动 药敏 试验 、 清型鉴 定等 ：现 介绍应 用 这几种 方 法对规 模化 猪场 大肠 杆 菌的诊 断情 血
翟
Ｄ ． 种的 耐 药率 达 到 近乎 １０ ， ％ 即氨 苄 青 霉素 、 ０ 林可 和ｉ 切 ． 霉素 、 复方新诺明、 青霉素 Ｇ、 罗红霉素、 利福平 、 强 力霉素 、阿莫西林对大肠杆菌已经没有任何抑制 或杀灭作用 可见多年来滥用抗生素的后果是多 么严重 此， 加强牛物安全措施， 合理使用疫苗 ，
以夺场（ 菌株灭活苗免疫为主， 地） 结合使月 敏 ｊ 感抗生素及加强兽医卫生管理是 防治规模化 猪场 仔猪 黄 、 白痢 最为 经济有 效 的措施 。 ４ 在药物监测方面及多重耐药研究 ． １ 由于大肠杆菌易产生耐药 ，其主要原 。 ２ ４ ３ ０ ０Ｏ ０ ７ ６ ６０ 冈足大肠杆菌的耐药性既能通过 自身复制垂 直传播，又能转化存不同的菌株间水平传播 ， 从而 使耐 药菌 引起 的疾 病流 行不 止 。 治本病 防 有效 的许多抗生素现在某些猪场已无明显效 果 ，而且 费用很 昂贵 ４ ７株分 离菌株 药敏 试验 显示 ， 均有不 同程 度 的耐绚 『 测试 的 １ 种抗 生。 ８ 菌药 中耐 药率 达 ７ ％以上 的有 ８ ， 率在 ０ 种 耐药 ３～０ ０ ７ ％之 间有 ５ ，在 选用 时 应芎虑 作 为次 种 选药物 ；耐药率在 ３ ％以 Ｆ的药物有 ５ ， ０ 种 为 林 可霉章 、 一 盯 ０ １０Ｏ ０ ０ ０Ｏ ０ ｎＯ ０ 大 、孢唑啉（ 先锋霉素 Ｖ、 ） 头孢他啶（ 复达欣）阿 刊 福 平 ４ 、 ４ ｊ ０ １ ０ ０Ｊ Ｏ ０Ｏ ０ ００ 卡米星（ 丁胺卡那） 、 壮观霉素和新霉素 ， 这些药 兰 堕 ！ ！ 堑 翌 ： 一 ： ！ ：： ！ 竺 ！ － ！！ ： ！ 细 可作 为 苗选药 ４ ‘ ７株大 肠杆 菌共有 ４ 种 耐药 注： 菌 对 药 物 的敏 感性 按 药敏 试 纸 使 用说 明 书进 ７ 谱型， 而且 全 部为 多重 耐 药 ，７株 可 同时 耐受 行 判 断 ４ 选择何效抗 ，素，才是控制大肠卡： ｌ １ 茼病最经济有 ７ 抗菌 药物 ？ 种 效 的方 法 。 大 肠杆 菌肠 毒 素 是 引 起 人类 和 动 物 腹 泻 的 ４ ． ２抗菌 药物 联合用 药 导 泻 凶子 ，肠 毒素 质粒 和耐 药性 质粒 能经 接 合配 在 抗 茼药 物 的应 用方 法 上 ， 还应 考 虑采 取联 对传递给其它肠道细菌 ，使这些细菌成为能产肠 毒 素并 且有 耐 药 ｆ 生的致 病菌 。多 重耐 药 株大 量 出 合、交叉用药等方法。建议停用 已普遍产生耐药 现可能与耐药性质粒（ Ｒ质粒 ） 通过接合 、 转导和 性 ，临床上已明显无效 的药物 ，选用目前应用较 转化在微生物ｒ传播、 日 Ｊ 菌体细胞膜通透 性的改变 ， 少，经药敏试验征明对大肠杆菌敏感的头孢菌素 壮观霉素、 新霉素等药物。由于敏感药物的选 特别是菌体能量依赖ｌ 生的主动外排系统的作用等 类 、 而研发新药又需要大量的人力 、 有关。随着耐药株的不断增多和耐药性的不断变 择空间十分狭小 ， 物力和财力的投资， ＝ 并Ｊ 还有研制周期长 、 Ｌ 风险大 迁， 阐明 耐药 肚特 别是 多重 耐 药 的机 制 ， 得 十分 显 等问题 ， 此 ， 开艉联合应用抗菌药物 的研究 ， 充 迫切。 大肠杆菌对用于试验的 １ ８种抗菌药 中的 ８ 分发 挥抗 菌药 物之 间 的协 同作腹泻； 仔 大肠 杆 菌 ； 验 试
规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定
规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定仔猪黄白痢又称新生仔猪腹泻，是仔猪黄痢和白痢的总称，很大一部分是由致病性大肠杆菌引起的一种高致病性的传染病，以排出白色或黄色稀粪和迅速死亡为特征。
由于大肠杆菌血清型众多，且不同年龄的猪感染大肠埃希菌的主要血清型不同，因而疫苗的使用保护性差，且由于耐药性的产生，都给本病的防治造成一定的难度。
本试验对某猪场发生仔猪黄白痢的病原菌进行分离鉴定，旨在为该养猪场制定有效的防制措施提供依据。
1材料与方法1．1病料与试剂来源于镇江地区某规模化猪场11窝30日龄内发生黄白痢的仔猪，用灭菌棉拭子从腹泻仔猪直肠采集粪便55份，进行细菌的分离鉴定。
营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂、SS培养基、三糖铁培养基；生化鉴定培养基购自杭州天和微生物试剂公司；药敏纸片购自杭州天和微生物试剂公司；大肠杆菌O抗原定型血清购自中国兽医药品卫生监察所。
1．2试验动物体重20-25 g健康小白鼠90只，雌雄各半，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供。
1．3细菌分离中国猪网网友建议用棉拭子采集发生黄白痢的仔猪的肛门粪便，混悬于装有灭菌生理盐水的灭菌离心管中，摇动离心管彻底洗涤拭子粪便于管中，并靠壁旋动拭子，挤出液体。
用接种环取上述大便悬液1—3环，接种于麦康凯琼脂培养基平板，置37℃培养24 h后观察培养特性。
将以上麦康凯培养基中的红色菌落，再接种于SS培养基、麦康凯培养基中，置37℃培养24 h后进行纯化培养，观察菌落的生长情况，并取麦康凯培养基上的单个菌落进行涂片，革兰氏染色、镜检。
1．4生化特性试验按文献方法进行。
取纯培养细菌接种于营养肉汤中，37℃培养24 h后，接种到各微量发酵管及种生化培养基中，置37℃培养24 h后，观察记录结果。
1．5致病性试验将接种细菌后的营养肉汤37℃培养24 h后，分别腹腔接种体重20 g左右的小白鼠，每株接种10只，每只0．2 mL(含菌量约为8．0×108CFU／mL)，同时用10只小白鼠接种无菌肉汤作对照。
仔猪黄白痢大肠杆菌病原的分离鉴定及其药效试验
Ｋ ｙｗｏｄ ：ｐ ｋ ｅ ｏ — ｈｅ ｄｓｎｅ ；Ｅｅｉｓｐｒｔ ｇ ｄｕ ｅｓｉｉ ｅ ｒｓ ｉ ０ ｙｌ ｗ ｗ ｉ ｙｅ ｔ ｙ ． ｅ ａ ｉ ； ｒｇｄ ａｉｖ ｙ ｇ ｌ ｔ ｒ ｄ ａｎ ｔｔ
１ 材 料 和 方 法
１１ 材 料 ．
１ 致病性试 验 ．３ ２ ２ ０ 年 ８月￣ ０月 间 ， ０１ １ 四川 自贡 市 太 安 区三
Ｅ．ｏ ｌ ｏ ｇ ｅ ｅ ａ ａ ｉ ｇ Ａｐ ｒ ｉａ ｎ ｕ ｎ ｉｉ ｉ ｒ ｍ ｇ ｔ Ｓ ｃ ｉ ｆ Ｐｉ ｌ ｔ Ｓ ｐ ｒ ｔｎ ｐ ａ ｓ ｌ ａ ｄ Ｄｒ ｇ Ｄｅ ｓｔｖ ｔ ｆ ｏ ｙ Ｐｉ ｕ ’ Ｙｅ ｌｗ— ｈ ｃ ｓ ｎ ｅ ｙ ｌ ｏ Ｗ ｉ ｅ Ｄｙ ｅ ｔ ｒ
摘要： 本文从 自贡市大安 区仔猪黄 白痢疾病例 中分 离到 ３椿细菌， 经培养、 态、 形 生化试验、 动枷试验确定 为致病 性 大脑 杆茸 ． 药敏试验蛄果表喁其均对甲砜 霉素、 氨苄青霉素 、 阿米卡 星高度敏感 ， 对其它抗 茵药枷的敏感性各 异， 担
提 示 自贡 市大 安 区 ；起 仔 猪 黄 白痢 疾 的 大 脑杆 茸不 同椿 『对 药 特 的敏 感 性存 在 差异 ， ｆ ］ 日 临床 用 药时 应 ｊ起足 够 重视 。 ｌ 关键词 ： 猪 ； 白痢； 仔 黄 大腑 杆 茵 ； 药敏 试 验
将 小 白 鼠 随 机 分 成 ４组 ， 组 ５只 ， 菌 每 即
株 １组 、 ２组 、 及 对 照组 。将 分离 到 的 ３株 灭 菌 用 灭 菌 生 理 ３组 盐 水分 别 配戚 ８ ９ ｌ 个／ Ｌ菌 液 ， 只 小 鼠腹 腔 接 种 ０３ ， ￣ ｘ ｍ 每 ｍＬ 只 ， 照 组 注 射 生 理 盐水 ０ ｍ ／ ． 察 接 种 菌 液后 ７ ｈ内 小 对 ． Ｌ只 观 ３ ２ 白 鼠死 亡 情 况 ，井 将 死 亡 小 白 鼠心 血 接 种 于 ｓ ｓ琼 脂 平 扳 上 ． ３ ℃培 养 ２ ｈ后 ， 片 、 色 、 检 ， 察 是 否 为接 种 菌 株 。 ７ ４ 抹 染 镜 观
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析吴学敏;陈秋勇;陈如敬;王隆柏;车勇良;王晨燕;严山;刘玉涛;周伦江【摘要】为了研究福建省闽北地区某猪场猪大肠杆菌的耐药情况,通过采集32份发生仔猪黄、白痢的粪便,经麦康凯琼脂培养基分离培养,再经普通肉汤纯培养,用镜检方法、PCR扩增方法和生化试验进行鉴定,结果共分离到29株大肠杆菌.生化试验结果表明,分解甘露醇、葡萄糖、乳糖和麦芽糖产酸产气,V-P试验为阴性,M.R.试验呈阳性,硫化氢试验阴性,枸橼酸盐试验阴性,吲哚试验阳性,硝酸盐试验阳性.药敏试验结果显示,分离的大部分菌株对四环素、林可霉素、先锋霉素Ⅳ耐药;大多数菌株对多黏菌素B、复方新诺明和痢特灵高度敏感.该研究为当地猪场临床用药提供参考,为猪大肠杆菌病的预防控制提供理论依据.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2017(053)010【总页数】4页(P86-89)【关键词】大肠杆菌;分离;鉴定;敏感性【作者】吴学敏;陈秋勇;陈如敬;王隆柏;车勇良;王晨燕;严山;刘玉涛;周伦江【作者单位】福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013【正文语种】中文【中图分类】R378.2+1大肠杆菌是自然界中一种最常见的革兰阴性菌，普遍存在于环境中，在猪的肠道中与猪属于共生情况。
仔猪黄白痢致病大肠杆菌的分离鉴定
多 ． 发 病 率 ９ ％以 上 ，病 死 率 也 非 常 ０
高 。 目前 ，虽 然 国 内外 已 经 研 发 预 防 大 肠 杆 菌 病 的 各 种 疫 苗 ，如 基 因 丁 程
化反应特性。
２３ 分 离茵 血 清型 鉴 定结 果 － 取全部 １ ２株 菌 纯 培 养 物 。分 别 用 少量 ０ ５ ． ｍＬ石 炭 酸 生 理 盐 水 洗 下 后 置 ０
２２ 分 离茵 生化 试 验 结 果 ．
１ 材料 与方 法
１１ 试 验 材料 ．
将 纯化所得的 １ ２株 菌 进 行 糖 类 发 酵 、吲 哚 、ＨＳ等 试 验 ，结 合 大 肠 杆 菌 ２ 的生化 特 征 （ ２ 表 ）进 行 判 断 ， 得 知
ｌ ２株 分 离 菌 中 有 ９株 符 合 大 肠 杆 菌 生
生 于 生 后 １周 以 内 ， 以 １ ３ 日龄 者 居 ～
猪 场 所 采 的病 料 能 培 养 出 典 型 菌 落 ，
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
共 得 １ 菌 ，分 别 挑 取 单 个 典 型 菌 落 ２株
接 种 于 普 通 琼 脂 培 养 基 进 行 纯 培 养 和
涂 片 染 色镜 检 ，其 结 果 如 表 １ 示 。 所
型 菌 落 进 行 生 化 试 验 、细 菌 血 清 型 鉴 定及致病性试验。
２ 结 果 与分 析 ２１ 细 茵分 离结 果 ． 用 两 猪 场 剖 检 所 采 集 到 的 病 料
型 包括 有 ｏ ｏ 、０， ０ 及 Ｋ 等 ５个 型 ，其 中 有 ４株 属 ｏ 占 总 数 的 ，
离 茵 在 分 离培 养 基 上 的 生 长 特 性 、 茵
落 染 色镜 检 、 生 化 试 验 、致 病 性 试 验
三种抗菌药物对仔猪黄白痢大肠杆菌的MPC测定
不仅抗菌活性较高 ，Ｉ ｓ 也低于环丙沙星、 麻保沙星 ， 即多粘菌素 Ｂ的防耐 药突变能力 比麻保 沙星
与环 丙 沙星 要 强。
［ 关键 词 ］ 仔猪 黄 白痢 ； 肠杆 菌 ； 大 环丙 沙 星 ； 保 沙 星 ； 麻 多粘 菌素 Ｂ； Ｃ ＭＰ Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｏ ｕ ａ ｔＰｒ ｖ ｎ ｉ ｎ Ｃｏ ｅ ｒ ｔＯＩ ｆＴｈｒ ｅ Ａｎ ｉ ａ ｔ ｒａ ｔ ｒ ｎａ ｉ ｎ ｆＭ ｔ ｎ ｅ ｅ ｔｏ ｎｃ ｎｔａ ｉ Ｉ ｏ Ｓ ｅ ｔｂ ｃ ｅ ｉ ｌ Ａｇ ｎ ｓ ａ ａ ｎ ｔＥｓ ｈｅ ｉｈｉ ｏ ｒ ｍ ｇ ｅ ’ ｌｏ — ｗｈ ｔ ｓ ｎｔ ｒ ｅ ｔ ｇ ｉ ｓ ｃ ｒｃ ａ ｃ ｉ ｆ ｏ Ｐｉ ｌｔ Ｓ Ｙｅｌ ｗ ｌ ｉｅ Ｄｙ ｅ ｅ ｙ
（ Ｃ ＭＩ ＭＰ ／ Ｃ）ｏ ｅｔｏｑ ｉｏ ｎ ｓ ｏｔｅｓｎｉｖ ｔ ｉｓ ｔｅＭＰ ｆ ｏｙ ｙｉ ｄｉ １ ａ ｆ ｈ ｕｎｌ ｅ ｅ ｓ ｉ ｓ ａｎ 。 ｈ Ｃｏ ｌｍ ｘｎＢ ａ ｓ ｓ ｔ ｗ ｏ ｔ ｈ ｔｅ ｒ ｐ ｎ ｔ Ｓ ｗ ４～１ ｇ ｍ ６ｔ ／ Ｌ ｒ
［ 摘
要 ］ 采 用 琼脂 二倍 稀 释 法使 平板 上接 种 细 菌量分 别 为 １５Ｘ１ Ｆ １２ｘ１ ｍＣ Ｕ， 定 ． ０ Ｃ Ｕ、． ０ Ｆ 测
环 丙 沙星 、 麻保 沙星 、 多粘 菌 素 Ｂ对 仔猪 黄 白痢 大肠 杆 菌 的 ＭＩ 、 Ｃ， Ｃ ＭＰ 并计 算 Ｓ（ Ｃ Ｍ Ｃ） ＩＭＰ ／ Ｉ 。试 验 结果 表 明 ， 试 菌 对 多 粘 菌 素 Ｂ 麻 保 沙 星 、 丙 沙 星 的 敏 感 率 分 别 为 ８ ． ５ 、７ ０ ％ 、 受 、 环 ０ ８ ％ １． ２ １ ．６ ， ２ ７ ％ 两种 喹 诺 酮 类 药 物 已 有 交 叉 耐 药 产 生 ； 种 喹 诺 酮 类 药 物 对 敏 感 菌 的 ＭＰ 为 两 Ｃ １～１ ￣ ｍＬ Ｓ 为 ４～ ２， ６ｐ／ ，Ｉ ｇ ３ 多粘 菌 素 Ｂ的 ＭＰ Ｃ为 ４～１ ｇｍＬ Ｓ 为 ２～ ， ６￣／ ，Ｉ ８ 因此认 为 多粘 菌素 Ｂ
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析
Ａｌ ｒｃ ： Ｆ ｒ ｓ ｈ ｒ ｈ ａ ｃ ｌ ｓ ａｎ ｒ ｏ ａ ｅ ｏ ４ ｃ ｌ ａ ｌ ｓ ｆ ｉ Ｃ Ｕ ｎ ｅｌ ｗ ｃ ｕ ￣ ａｔ ｏ ｔ Ｅ ｃ ｅ ｉ ｉ ｏ ｉ ｔ ｉ ｓｗｅ ｅ ｉ ｌｔ ｄ ｆ ｍ ０ ｆ ａ ｍｐ ｅ ｗｈ ｔ Ｓ Ｏ ｒａ ｄ ｙ ｌ ｙ ｃ ｒ ｓ ｒ ｅ ｓ ｏ ｅ ｏ ｓｏ ｒ
猪 的一种 急性 传染 病 ， 本病 在世 界 各地 均 有发 生 。 在 我 国 ， 别 是养 猪业 发达 的广 东 地 区 ， 病 造 成 特 本
・
３ ・ 试验研 究 ８
广 东畜牧兽 医科技 ２１ 年 （ ３ 卷） ５ ０１ 第 ６ 第 期
仔 猪致病性大肠杆 菌 的分 离鉴 定与耐药性分析
谢 为天 ，徐春 厚 ，陈 （ 东海 洋 大学 动物 医学 系 ，广 东 广 晗 湛江 ５４ ８ ２ ０ ８）
摘 要 ：由湛江市 ３ 养猪 场采 集到 ４ 份仔猪 黄痢 、白痢腹 泻粪便样 品，共分 离到 ４ 株 大肠杆 菌， 个 ０ ０ 其中 ７ 株是致病性 大肠杆 菌，三个猪场致病性大肠杆 菌的分 离率分别为 １ ． ％ 和 ４ ％ ４ 、１％ 。对 ７ ５ ０ ３ 株致 病ｌ 挂
关 键词 ： 大肠 埃 希 氏茵 ；分 离鉴 定 ；耐 药率 ；仔 猪
中 图分 类 号 ：￥ ５ ． １ ８２６＋ ２ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ０ — ５ ７ ２ １ ） ５ ０ ３ － ２ ０ ５ ８ ６ （０ １ ０ － ０ ８ ０
Ｉ ・ ｔｏ ，‘ ｅ ｉ． ａ ｉ ｎ ｎｄ ａ ｔｂ ｏ ｉ ｅ ｉｔ ｎ ｅ ｏ＾ ｔ ｇ ｎ‘ 一 ｏ ｉ 一 ｏ ａ ・ ｎ ｉ ｔｎｃ ｔｏ ａ Ｊ ｎ ｉ ｉ ｔｃｒ ｓ ａ ｃ ｆ ａｈｏ ｅ ｉ ｃ ｌ ｓｌ ｉ ｄ ｎ ‘ ‘ － ， … ・ ‘ ｓ ｐ ｃＥ． ‘
规模化猪场仔猪致病性大肠埃希菌的耐药性检测
１ １ ３ 实验动 物 昆 明系小 鼠，８ｇ ４ｇ 购 自青 ． ． １ ～２ ，
海 省地 方病 研究所 。
１． ） ７重耐 药 ２株 （／ ８ ｌ ． ） ８重耐 药 ２株 （ ／ ８ １ ． ） ９重 耐 药 ３株 （ ／ ８ １ ． ） １ １１ ， ２ １ ， １１ ， ２ １ ， １１ ， ３ １ ， ６ ７ ，Ｏ重耐
药 ４株 （／ ８ ２ ． ） １ 重 耐 药 １ （ ／ ８ ５ ６ ） 抑 茵作 用 最 强 的为 复 达 欣 （ ７ １ ，４ ４ ， 次为 菌 ４ １ ，２２ ，ｌ 株 １ １ ，． ； １ ／ ８ ９ ． ％） 其 必 治（ ６ １ ，８ ８ ） 氯霉 素（ ５ １ ，３ ３ ） 氧 氟沙 星（ ４ １ ， ７ ７ ， １ ／ ８ ８ ． ， １／８ ８． ％ ， １ ／ ８ ７ ． ％） 阿米卡 星（ ４ １ ，７ ７ ） 而 青霉 １ ／ ８ ７ ． ， 素 完全没 有抑 茵作 用 。
国药 品生 物制 品检 定 所 ， 号 ： ７ ｌ ７ 糖 发酵 管 购 批 ９０ ｌ ；
自湖 北省 医药公 司 ； 肠 埃 希 菌 Ｏ 因子 血 清购 自中 大 国兽 医药 品监 察所 ； 脂 粉 购 自天 津 市 大茂 化 学 试 琼
剂 厂 ， 号 ２ ０ ０ ２ ； 白 胨 ， 自浙 江 玉 壤 星 生 化 批 ０ ５ ７４ 蛋 购 制 品厂 ， 号 ９０ ２ 。 批 ３ ５ ０
粪样 ， 共计 ３ ６份 。 １
１ ２ ２ 大肠 埃 希 茵 的分 离纯 化 将 所 采集 的 ３ ６ ． ． １ 份仔猪 的粪 样先 用 ９ｇ Ｌ的 生 理 盐 水 稀 释 、 匀后 ／ 摇 用 灭菌 的 接种 环勾 取 １环 ～２环接 种 于营 养 肉汤 中 ３ ７℃ １ ～２ ， 从 营养 肉 汤 中勾 取 １环 ～２环 ８ｈ ４ｈ 再
猪大肠杆菌病病原鉴定及药敏试验
（2）生化试验：糖发酵、M．R、硫化氢、V-P、吲哚试验等。③药敏试验：利用庆大霉素、丁胺卡那霉素、头孢噻肟、链霉素、环丙沙星、恩若沙星、红霉素等8种药物按常规纸片法进行。
2、观察结果
（1）病原菌的形态：观察到6个疑似菌株在麦康凯琼脂培养16小时后均为红色菌落，在伊红美蓝琼脂上培养16小时后均为紫黑色带金属光泽的中等大小圆形菌落，革兰氏染色镜检均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
猪大肠杆菌病病原鉴定及药敏试验
猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪黄白痢和水肿病。随着养猪业规模化发展，该病呈上升趋势，致使仔猪成活率和断乳窝重降低，严重影响了养猪业的发展。由于致病性大肠杆菌存在广泛的耐药性，而且血清型多，抗原复杂，给防治带来了极大的困难。
针对某猪场提供的腹泻严重的仔猪黄白痢病料，我们进行了细菌分离鉴定和药敏试验，以期为仔猪大肠杆菌病的有效防治提供一些技术参考资料。
仔猪黄白痢大肠杆菌耐药性检测及ERIC图谱分析
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山西省仔猪黄白痢大肠杆菌耐药性研究
山西省仔猪黄白痢大肠杆菌耐药性研究冯晓东1，刘风波2，连亮亮3(1.吕梁农业学校，山西 吕梁 032200；2. 长治市襄垣职业技术学校，山西 长治 046200；3.长治市农业综合行政执法队，山西 长治 046000)仔猪黄白痢为新生仔猪常见的大肠杆菌病，会严重危害养猪生产，并会造成巨大的经济损失。
对于本病的防治，猪场除了加强饲养管理和卫生消毒措施，以及用自家流行菌株免疫母猪，唯有多选用敏感药物进行治疗；然而，大肠杆菌具有众多的血清型，各地流行菌株的血清型各不相同。
随着抗生素的大量使用，大肠杆菌的耐药性菌株也不断出现。
为了摸清山西省各地仔猪黄白痢流行病原菌株，指导猪场临床用药，本研究对省内各地猪场的新生仔猪黄白痢病例进行了病原分离、鉴定和耐药性监测。
1 试验材料与方法1.1 试验材料1.1.1 病料因发生仔猪黄白痢，山西省10家规模化猪场仔猪病死60例，在仔猪死后24 h 内，采集病变的组织或器官样本，采集过程中要尽可能避免样本被污染。
1.1.2 质控菌株大肠埃希菌ATCC25922购于中国兽药监察所。
1.1.3 主要仪器设备试验所用仪器设备有比浊管、试管、培养皿、接种环、酒精灯、恒温培养箱、冰箱、打孔器、真空抽气机、干燥器、测量尺、电子天平、超净工作台。
1.1.4 标准比浊管的制备取10支比浊管，给第1支比浊管装入0.048 mol/L(即浓度为1.175％)氯化钡 0.5 mL，加0.18 mol/L(即浓度为1％)硫酸溶液99.5 mL，充分搅匀，随后的9支浊管依次类推，浓度逐渐升高。
选管径与接种菌液相同的试管，每支分装10 mL，密闭，在室温下置于暗处保存,其浊度为0.5麦氏比混标准(Mcfarland standard)，相当于108 CFU/mL 的含菌量。
使用前应充分摇匀[1]。
1.1.5 接种菌液的制备称取营养琼脂4.5 g 溶于100 mL 蒸馏水中，加热溶解，然后放入高压锅高压灭菌 20 min。
仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定与耐药分析
仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定与耐药分析郑礼洲;黄冬艳;王玉来;左明开;黎家祥;吴家斌;王萍【期刊名称】《江西农业大学学报》【年(卷),期】2013(000)006【摘要】为研究临床上仔猪黄痢大肠杆菌的耐药性与整合子之间是否存在一定的相关性，从仔猪黄痢临床病例中分离鉴定了两株大肠杆菌，采用K-B法检测这两株菌对21种抗菌药物的敏感性，并对I类整合酶和qacE△1-sull基因进行PCR检测。
结果表明：这两株大肠杆菌只对氯霉素敏感或中介，对其他20种药物耐药。
PCR检测结果表明这两株菌均能扩增出I类整合酶基因和qacE△1-sull基因，且这两株菌均携带了几个大小不同的基因盒，为从基因水平上了解大肠杆菌的耐药性提供了一定的参考。
【总页数】6页(P1255-1260)【作者】郑礼洲;黄冬艳;王玉来;左明开;黎家祥;吴家斌;王萍【作者单位】江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌 330045;江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌 330045;江西省彭泽县黄岭乡兽医站，江西彭泽332700;江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌 330045;江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌 330045;江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌330045;江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌 330045【正文语种】中文【中图分类】S852.61+2【相关文献】1.潍坊地区仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定 [J], 朱明恩2.仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定及耐药特性分析 [J], 王军明;王龙华;王静;顾爱弟;张国华3.仔猪早发性大肠杆菌病——仔猪黄痢的诊治 [J], 高曙光;佘德勇4.仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定 [J], 刘泽文; 田永祥; 袁芳艳; 刘威; 高婷; 周丹娜; 杨克礼; 段正赢; 郭锐; 梁婉5.仔猪大肠杆菌四价提纯苗对仔猪黄痢的预防效果 [J], 彦桂军;丁家波;周明荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
仔猪大肠杆菌病分析.doc
仔猪大肠杆菌病分析概述：本病是由病原性大肠杆菌引起的一类传染病。
由于病原性大肠杆菌类型的不同以及猪年龄、个体及生理机能的差异，因而发生不同的疾病，常用的有仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病。
本病对新生仔猪危害很大，常带来严重损失。
1、仔猪黄痢：本病是初生仔猪的一种急性、高度致死性传染病。
主要发生于一周龄以内的哺乳仔猪，尤以1―3日龄最多见。
若不及时治疗，死亡率可达100%，本病传播源主要是带菌母猪。
症状：突然发病，病初拉黄色混有气泡的稀粪，味腥臭。
在病的沉重期，肛门松弛，捕捉时，由于挣扎和嚎叫，肛门流粪。
病猪口渴，不吃乳，最后因脱水、衰竭而死。
治疗：（1）用本公司猪免疫球蛋白配合头孢噻呋钠冻干粉（美国进口），一天一次，连用2天。
（2）用本公司猪基因工程干扰素IFN配合头孢噻呋钠冻干粉（美国进口），一天一次，连用2天。
（3）用本公司尚科至尊八联血清抗体冻干粉配合头孢噻呋钠冻干粉（美国进口），一针可达治愈效果。
预防：平时搞好猪栏、环境、饲料和饮水卫生工作，改善母猪的饲养管理。
母猪临产前，将猪圈打扫干净，消毒后再垫上干净的褥草。
接产时，用0.1%高锰酸钾溶液洗净母猪乳房和乳头，并把每个乳头的乳汁挤掉几滴，然后及时让仔猪吃到足够的初乳。
怀孕母猪临产前21天左右（前后不超过三天），于耳根部皮下注射黄白痢疫苗，使母猪产生足够的抗体，通过哺乳使仔猪获得母源抗体。
2、仔猪白痢：本病是10―30日龄仔猪常发的一种肠道传染病，气候突变，阴雨潮湿，栏舍污染，母猪饲料配合不当，乳汁中含脂率过高和泌乳量不足都是促发本病的重要因素。
症状：病猪排出乳白、灰白或黄白色糊状稀粪，味腥臭，有时混有气泡。
体温一般正常、精神、食欲尚好，但若不及时治疗，病情可逐渐加重，病猪拱腰，发抖，喜钻入垫草中，饮水增多，吃乳减少或停止，逐渐消瘦，被毛粗乱无光，尾和后肢被粪便污染，脱水，终因昏迷虚脱而死亡。
治疗：必须及时治疗，用本公司猪转移因子配合头孢噻呋钠冻干粉（美国进口），一天一次，连用2天可治愈。
仔猪黄白痢大肠杆菌细菌分离及抗原鉴定
仔猪黄白痢大肠杆菌细菌分离及抗原鉴定
海力千木;闫中元
【期刊名称】《新疆畜牧业》
【年(卷),期】1991(000)003
【摘要】病原性大肠杆菌是仔猪黄、白痢的病因之一。
近年来,我们通过细菌分离培养、鉴定,证实致病性大肠杆菌在我区猪群中普遍存在,给养猪业带来很大损失。
现已查明我区仔猪黄、白痢的主要致病菌株
有:(1)O(?)(2)O_(133)(3)O(?):K(?)K(?)(4)O(?):K_(30)·F_(41)(5)O_(141):K_(35)(B) H_4;(6)O_(140):K_(81)(B)K_(?)、(7)O_(140):K_(?):H_(10)。
【总页数】2页(P43-44)
【作者】海力千木;闫中元
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S858.285.1
【相关文献】
1.会泽县仔猪黄白痢大肠杆菌的分离与鉴定及耐药性实验 [J], 张世永;严玉霖;王文梅;吕忠芬
2.仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定 [J], 王孝友;曾秀;孔路军;范守城
3.仔猪黄白痢大肠杆菌病源的分离与鉴定 [J], 陶思源;高庆海;吕仁洪;王印双
4.仔猪黄白痢致病大肠杆菌的分离鉴定 [J], 黄金山;黄伟
5.规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定 [J], 李静;刘庆新;王丽群;曹霞;赵勇
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仔猪大肠杆菌的分离鉴定及耐药试验
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及耐药试验
李运龙;李继伟;任家琰
【期刊名称】《甘肃畜牧兽医》
【年(卷),期】2009(039)002
【摘要】从32份仔猪黄白痢粪样中分离鉴定出32株致病性大肠杆菌. 血清型鉴定表明,32株大肠杆菌除8株没有定型血清型鉴定外,其余24株血清型分别属于: O20、O138、O149、O107、O141,共五种血清型.用K-B法进行10种抗生素耐药性检测.对阿莫西林、氨苄青霉素、氯霉素、氧氟沙星、环丙沙星、青霉素耐药率分别为65.6%、68.7%、71.8%、43.7%、43.7%、96.8%.试验表明部分分离菌株对头孢噻肟、多粘菌素、丁胺卡那、呋喃妥因敏感.
【总页数】4页(P4-7)
【作者】李运龙;李继伟;任家琰
【作者单位】山西农业大学,动物科技学院,山西,太谷,030801;宁夏大学农学院动科系;山西农业大学,动物科技学院,山西,太谷,030801
【正文语种】中文
【中图分类】S852.61+2
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瑜;陈洁;周丹娜;邵志勇;金尔光;姚艳丰;王富国;陈夏冰;何斌;杨文海
3.致仔猪水肿病大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析 [J], 李求知;杭柏林;王青;胡建和
4.粤北地区仔猪腹泻大肠杆菌分离鉴定及耐药性分析 [J], 黄健强;南文金;胡鸿惠;吴静波;彭国良;肖正中
5.仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定及耐药特性分析 [J], 王军明;王龙华;王静;顾爱弟;张国华
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仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定及耐药特性分析
仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定及耐药特性分析
王军明;王龙华;王静;顾爱弟;张国华
【期刊名称】《上海畜牧兽医通讯》
【年(卷),期】2015(000)006
【摘要】仔猪黄痢是由致病性大肠杆菌引起的,主要危害7日龄以内仔猪,临床上表现为拉黄色稀粪或黄色水样粪便、迅速脱水死亡的一种传染性疾病,其发病率和死亡率较高,给养猪业造成了巨大的经济损失〔1~2〕。
近年来,该病在规模化养猪场内时有发生,且呈上升趋势。
近期在深入养殖场开展防疫工作中,
【总页数】2页(P46-46,50)
【作者】王军明;王龙华;王静;顾爱弟;张国华
【作者单位】上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299;上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299;上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299;上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299;上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299
【正文语种】中文
【相关文献】
1.仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定与耐药分析 [J], 郑礼洲;黄冬艳;王玉来;左明开;黎家祥;吴家斌;王萍
2.潍坊地区仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定 [J], 朱明恩
3.仔猪黄痢病原地方株分离鉴定和耐药性检测 [J], 王思芦;杨柳
4.仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定 [J], 刘泽文; 田永祥; 袁芳艳; 刘威; 高婷; 周丹娜;
杨克礼; 段正赢; 郭锐; 梁婉
5.藏猪仔猪黄痢病大肠杆菌耐药基因检测及分析 [J], 王旭;张宏莉;高语馨;付剑波;王权
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仔猪黄痢病原地方株分离鉴定和耐药性检测
仔猪黄痢病原地方株分离鉴定和耐药性检测
王思芦;杨柳
【期刊名称】《上海畜牧兽医通讯》
【年(卷),期】2009(000)003
【摘要】仔猪黄痢是危害仔猪较严重的传染性疾病之一，目前在一些大型和个体养猪场中，由于饲养管理不良、环境卫生差、用药不规范，常暴发初生仔猪发生腹泻、消瘦衰弱，严重时可导致大量仔猪死亡；同时由于在临床上缺乏化验条件，加之生产上盲目滥用抗生素及化学抗菌药物，导致临床上不断出现大肠杆菌的耐药菌株，使该病的控制越来越难，从而给养猪业带来了严重的经济损失。
生产实践中，为了对该病进行确诊，了解地方菌株耐药情况，为防治仔猪黄痢提供可靠依据，我们进行了一系列试验，现报告如下。
【总页数】1页(P21)
【作者】王思芦;杨柳
【作者单位】西昌学院动物科学系,四川,西昌,615013;重庆市药品检验所,401121【正文语种】中文
【中图分类】S8
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1.仔猪黄痢病原分离鉴定及防治试验 [J], 白静;刘豫红
2.仔猪黄痢的病原分离鉴定及药敏试验 [J], 陈颖;徐雨;韦登雄;王海;黄向岚;徐孝会;雷祎雨
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4.13株仔猪黄痢病原菌的分离鉴定及致病基因的PCR检测 [J], 路振香;崔磊;郭伟娜;龚争;刘畅
5.藏猪仔猪黄痢病原菌分离鉴定及药敏试验 [J], 王旭;张宏莉;高语馨;付剑波;王权;周贵凤
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Oxio d 公司产品 ; P CR 全套试剂购自上海生工 生物 工 程 有 限 公 司 ; 100 bp marke r 由 美 国 P romega 公司生产 ; 壮观霉素 、 庆大霉素 、 丁胺 卡那霉素 、 链霉素 、 新霉素 、氨苄青霉素 、 羧苄青 霉素 、 先锋霉素 V 、 复方新诺明 、诺氟沙星 、 环丙 沙星 、 痢特灵 、 强力霉素 、红霉素 、氯霉素 、多黏 菌素 B 等 16 种药敏纸片 ( 批号 080515) 及 VP 甲液 、 VP 乙液 、甲基红试剂 、Kovacs 靛基质等 试剂( 批号 071106) 均购自杭州天和微生物试 剂有限公司 . 1. 1 . 2 菌 株 来 源 大 肠 杆 菌 质 控 菌 株 A T CC25922 购自中 国兽医药品监 察所 . 47 株 强毒力病原性大肠杆菌临床分离株 : 用直肠棉 拭子采集浙江嘉兴和杭州 2 个规模化猪场黄白 痢仔猪的病料 , 经过分离 、 纯化 , 革兰氏染色 、 镜 检 , 生化试验 , 小鼠致病性试验等最终得到 47 株致病性大肠杆菌 , 同时保留 4 株来自同一猪 场的非致病性大肠杆菌 . 1. 2 方 法 1. 2 . 1 耐 药 性 检 测 按 世 界 卫 生 组 织 ( W HO ) 推荐的 Ki rby-Bauer 法进行 , 每次试验 前用标准菌株 A T CC25922 进行质控 , 药敏试 验结果判断参照 NCCLS ( 1999) 标准[ 4] . 各耐药 谱菌株分别以 A ( 耐 5 种药 物) 、B ( 耐 7 种药 物) 、 C( 耐 8 种药物) 、D( 耐 14 种药 物) 、E ( 耐 12 种药物 ) 、F ( 耐 13 种药物) 、G ( 耐 10 种药 物) 、 H( 耐 9 种药物) 和 I( 耐 11 种药物) 表示 ; N1 、N2 、 N3 和 N4 表示 4 株非致病菌株 . 1. 2 . 2 Ⅰ 型整合酶基因及 E RIC-PCR 检测 1. 2 . 2 . 1 PC R 模板 提 取 . 采 用 煮沸 法 提取 PC R 反应模板
抗菌药物的使用 , 有效控制了细菌性疾病 的快速蔓延 , 但随着抗菌药物长期大量的应用 , 特别是近年来的盲目滥用 , 由大肠杆菌耐药株 引起的感染在临床上明显增多 , 各种机制引起 的多重交叉耐药株的出现使仔猪黄白痢大肠杆 菌病的治疗变得十分困难 , 同时也出现了动物 源性食品的安全问题 . 1991 年 , Hall 等 提出基因盒 -整合子系统 的概念 , 这对细菌耐药性特别是多重耐药性的检 测有着重要意义 . 目前 , 在整合子介导的细菌多 重耐药性耐药机制上的研究较多 , 且已阐明多种 类型的整合子结构与耐药表型的关系 , 然而其耐 药机制仍尚未完全明确 , 因此从不同视角分析耐 药性及多重耐药特征十分必要 . 重复 DNA 序列 是细菌基因组的一个重要组成部分 , 尽管细菌的 基因组通常都比较小 , 但仍然包含有大量不同类 型的重复序列 , 有时重复序列在细菌基因组的比 例可以达到甚至超过 10 %. 肠杆菌科基因间重 复一 致 ( enterobacterial repetitive intergenic consensus , ERIC) 序列 是在肠道细菌基因组 中发现的一种基因间重复序列 , 长为 126 kb , 具 有一定的保守性 , 大肠杆菌作为主要的肠道细 菌 , 其基因组中存在 ERIC 序列 . 本试验用 ERIC-PCR 扩增办法分析了 47 株 强毒力 病 原 性 仔 猪黄 白 痢 大 肠 杆菌 基 因 组 DNA , 并以非致病菌作对照 , 通过比较不同耐药 谱菌株 、 相同耐药谱来自同一猪场及不同猪场菌 株 ERIC 指纹图谱 , 探讨耐药表型与基因多态性 DNA 间的关系 , 这对耐药菌株分子流行病学及 深化细菌耐药机制的研究具有重要意义 .
36( 2) : 125 ～ 132 , 浙江大学学报( 农业与生命科学版)
2010
Journal of Zhejiang University ( Ag ric . & Life Sci . ) 文章编号 : 1008-9209( 2010) 02-0125 -08 DOI : 10 . 3785/ j. issn . 1008 -9209 . 2010 . 02 . 002
CH EN Jian , JIA N G Z hong -qi , T A NG Yi -ming ( Col lege o f Animal Sciences , Z he jiang University , H angzhou 310029 , China) Antimicrobial resistance of Escherichia coli from piglets with pre -weaning diarrhea and analysis of its enterobacterial repetitive intergenic consensus fingerprinting profiles . Journal o f Zhejiang U niver sity ( Ag ric . & Life Sci . ) , 2010 , 36( 2) : 125 -132 Abstract : In order to investigate the relationship between fingerprinting and antimicrobial resistance patterns , 47 isolates of Escherichia coli from piglets with pre -weaning diarrhea from 2 local larg e piggeries were collected for susceptibility testing by Kirby -Bauer method and studied the presence of integ ron integ rase gene by polymerase chain reactio n ( PCR ), respectively . T he isolates with different pheno ty pes were then geno ty ped by enterobacterial repetitive intergenic co nsensus ( ERIC) -PCR fingerprinting and fur ther clustered on the basis of the profiles using statistical so ftware SPSS 16 . 0 .The results showed that the 47 iso lates were all multi -drug resistant and exhibited 9 phenotypes , whereas 45 of the 47 isolates ( 95 . 7% ) were integro n I positive .ERIC PCR was found to g enerate the reproducible fingerprinting profiles ;two dominant profiles were sho wn in fing erprints of isolates resistant to 9 -13 antimicrobial agents , each standing for iso lates from the relevant pig farm .T he cluster analy sis demonstrated that the similarity among the iso lates with the same patterns of resistance from the same piggery and different piggeries was 68 . 7 % and 53 . 5 %, respectively , significantly ( P <0 .05) higher than that of 47 isolates ( 37 .3 %) . It is indicated that specific ERIC fingerprints might have
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农业与生命科学版) 浙 江 大 学 学 报(
第 3 6 卷
relations with resistance pattern , and ERIC -PCR fing er printing could be applied as a novel too l to the characterizations of multi - resistant phenotypes and genotypes of E . coli from piglets with diarrhea . Key words :Escherichia coli ;drug-resistant phenoty pe ;ente robacterial repetitive inter genic consensus ( ERIC) sequence ; cluster analysis
收稿日期 : 2009 -01-19 基金项目 : 浙江省科技厅资助项目( 2009C32077) ; 浙江省嘉兴市南湖区科技局资助项目( 2008Q N 02) . 作者简介 : 陈俭( 1983 —) , 男 , 江西九江人 , 硕士研究生 , 从事兽医药理与毒理学研究 . E - mai l : happycareer @yah oo . cn . 通信作者 : 姜中其 , 男 , 副教授 , 主要从事耐药性机制及其控 制和腹泻 防治新技 术等方面 的研究 . Tel : 0571 - 85977115 ; E - mai l : z qjian g @z ju . edu . cn .
仔猪黄白痢大肠杆菌耐药性检测及 ER NhomakorabeaC 图谱分析