E_钙黏蛋白在大肠癌中的表达及意义

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讨论 Ecad 是一种广泛分布于上皮细胞间的钙依赖
基质间黏附反应的重要媒介， 对维持组织结构形态 因其可通过促进同型细胞间的黏附 ， 使 起重要作用， 癌细胞间保持密切接触， 难以脱离原发灶进入周围 组织和脉管， 被认为是一个重要的肿瘤转移抑制基 因
10 例腺瘤及 20 例正常大肠黏膜组织中 Ecad 蛋白表达。结果 组化 SP 法， 检测 101 例大肠癌原发灶、
分化， 有无淋巴结转移及远处转移相关（ P < 0. 05 ） ；与肿瘤组织类型、 浸润深度、 部位、 大小以及性 表达与肿瘤分期、 cad 阳性表达组与阴性组之间比较， 别和年龄无相关性（ P > 0. 05 ） ；E生存期无显著性差异（ P > 0. 05 ） 。 结论 cad 低表达与大肠癌发生、 发展、 侵袭转移有关。 肠癌组织中 E［关键词］ 结肠直肠肿瘤； E钙黏蛋白；免疫组织化学 ［中图分类号］ R735. 34 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1000 － 1905 （ 2009 ） 06 － 0576 － 04
2. 2
Ecad 蛋白表达与大肠癌病理关系 Ecad 的阳性表达率与患者的性别、 年龄及肿
瘤的大 小、 部位和浸润深度均无明显关系 （P > 0. 05 ） ， 而与肿瘤的分化、 分期和淋巴结转移以及是 cad 表达 其中 E否有肝转移密切相关 （ P < 0. 05 ） ， 在分化程度低和有转移者的阳性表达率明显低于分 化程度高和无转移者（ P < 0. 05 ， 表 2） 。 2. 3 Ecad 蛋白在大肠癌中的异常表达与患者预 Ecad 阳性 在有完整随访资料的 88 例患者中， 表达组与阴性组之间比较， 生存期无显著性差异， KaplanMeier 生存曲线见图 1 。 后的关系
cad（ + ） ， cad （ ）， 浅色线代表 E深色线代表 E二者无差别（ P >
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哈尔滨医科大学学报
第 43 卷
图2
Ecad 阴性 × 100
图3
Ecad 阳性 × 100
表2
类别 部位 结肠 直肠 性别 男性 女性 年龄 ≥60 < 60 肿瘤大小 <5 ≥5 组织学分级 高分化 中分化 低分化 Dukes 分期 A+B C+D 肝转移 有 无 淋巴结转移 有 无 肉眼形态 隆起型 溃疡型 浸润型 浸润深度 侵及浆膜 未侵及浆膜 81 20 48 35 18 48 53 29 72 46 55 19 53 29 47 54 53 48 62 39 42 59 n
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第 43 卷 第 6 期 2009 年 12 月
哈尔滨医科大学学报 JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
Vol. 43 ， No. 6 Dec. ， 2009
E-钙黏蛋白在大肠癌中的表达及意义
* 林树森， 王锡山 ， 邹德龄， 陈洪生， 尤
琦
（ 哈尔滨医科大学第三临床医学院 结直肠外科 ， 黑龙江 哈尔滨 150081 ） ［摘要］ 目的 cadherin，Ecad） 蛋白表达与大肠癌的发生 、 探讨 E钙黏（ E发展及预后的关系。 方法 利用免疫 Ecad 的低 大
［1 ］
cadherin ， 大肠癌的侵袭转移情况。 E钙黏附素 （ EEcad） 是一种钙依赖性细胞黏附分子， 存在于正常 Ecad 的下 上皮细胞中以维持组织结构的完整性， ［2 ］ 调与肿瘤的浸润、 转移及预后密切相关 。 本研究 应用免疫组化法检测大肠正常黏膜组织 、 腺瘤、 癌组 cad 的表达情况， 织和转移灶中 E并分析其与大肠 癌生物学特性及预后的关系。 1 1. 1 材料与方法 材料 随机 选 取 哈 尔 滨 医 科 大 学 第 三 临 床 医 学 院 2001 年 1 ～ 12 月存档的大肠癌蜡块 101 例， 病理证
Expression and significance of Ecadherin protein in colorectal cancer
LIN Shusen，WANG Xishan，ZOU Deling，et al （ Department of Abdominal Surgery，The Third Clinical College， Harbin Medical University，Harbin 150081 ，China） Abstract： Objective To investigate the correlation between the expression of Ecadherin （ Ecad ） proThe expression
［34］
cad 阳性表 肝转移灶中 E达率为 35. 3% （ 12 /34 ） ， cad 在大肠癌原发灶、 正常 达率为 29. 4% （ 5 /17 ） ；E组织、 腺瘤组织、 淋巴结转移灶、 肝转移灶中表达存 在差异 （ P < 0. 05 ， 表 1） 。
表1 Ecad 在大肠癌、 腺瘤、 淋巴结转移及 肝转移和正常黏膜组织中的表达
35. 7 42. 4 37. 1 43. 6 39. 6 39. 6 38. 3 40. 7 73. 7 41. 5 20. 7 51. 2 29. 1 24. 1 45. 8 25. 0 52. 8 37. 5 40. 0 44. 4 38. 3 45. 0 0. 31 > 0. 05 0. 27 > 0. 05 8. 2 < 0. 01 4. 1 < 0. 05 5. 58 < 0. 05 13. 7 < 0. 01 0. 06 > 0. 05 0. 00 > 0. 05 0. 42 > 0. 05 0. 45 > 0. 05
。近些年来， 人们对有关大肠癌的侵袭和转移
相关分子机制进行了许多研究， 认识到细胞黏附能 力的改变对肿瘤细胞的侵袭和转移能力的获得极其 重要， 肿瘤细胞间黏附的丧失是肿瘤侵袭 、 转移的第 一步， 也是关键的一步。 目前有多种方法用于预测
［收稿日期］ 2008 － 10 － 21 ［作者简介］ 林树森（ 1981 － ） ， 男， 黑龙江齐齐哈尔人， 硕士， 现在齐 齐哈尔医学院附属二院工作 。* 通讯作者
Ecad 的表达与大肠癌的临床病理关系
Ecad + － 阳性率 χ2 P
15 25 23 17 21 19 18 22 14 22 6 24 16 7 33 12 28 18 14 8 31 9
27 34 39 22 32 29 29 32 5 31 23 22 39 22 39 36 25 30 21 10 50 11
tein and invasion，metastasis and prognosis in colorectal cancinoma （ CRC ） . Methods colorectal adenoma and 20 specimens of normal tissues. Results
of Ecad protein were measured by immunohistochemistry in 101 specimens of CRC ，10 specimens of The reducedexpression of Ecad protein was associated with Dukes stages and degree of differentiation，lymph nodes and distant organs metastasis （ P < 0. 05 ） ； there was no correlation with types of neoplasms，depth of infiltration，location， size，gender and age （ P > 0. 05 ） . The difference of survival periods between positive and negative groups on Ecad protein was not signficant （ P > 0. 05 ） . Conclusion The reducedexpression of Ecad protein is closely associated with invasion and metastasis in colorectal cancer. Key words： colorectal neoplasm； Ecadherin protein； immunohistochemistry 大肠癌（ colorectal carcinoma，CRC ） 是常见的消 化道恶性肿瘤， 随着我国人口老龄化， 生活习惯， 饮 CRC 的发病率 呈 上 升 趋 食结构以及环境的改变， 势
第6 期
林树森， 等. E钙黏蛋白在大肠癌中的表达及意义
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实为大肠癌， 其中黏液腺癌 10 例， 淋巴结转移阳性 肝转移阳性的 17 例。 男性 62 例， 女性 39 的 34 例， 例。年龄 23 ～ 79 岁， 中 位 年 龄 51. 8 岁。 结 肠 42 例， 直肠 59 例； 高分化腺癌 19 例， 中分化腺癌 53 例， 低 分 化 腺 癌 29 例。 临 床 Dukes 分 期： A 期 17 B 期 29 例， C 期 26 例， D 期 29 例。 另取大肠腺 例， 瘤 10 例和正常大肠黏膜组织 20 例。所有标本经常 10% 甲醛液固定， 4 μm 厚连续切 规取材， 石蜡包埋， 片， 免疫组化染色， 所有患者术前均未作化疗、 放疗 或免疫治疗。其中 5 年随访资料完整的 88 例。 1. 2 试剂 Ecad 鼠抗人单克隆抗体； 两步法免疫组化检 9000 、 DAB 显色试剂盒均购自北京中杉 测试剂 PV生物技术有限公司。 1. 3 免疫组织化学染色 P 法， 采用 S主要步骤：4 μm 连续石蜡切片， 常 规脱蜡水化；0. 3% H2 O2 室温孵育 10 min， 以阻断 将 切 片 浸 入 沸 腾 的 0. 01 内源性过氧化 物 酶 活 性， mol / L 柠檬酸缓冲液 （ pH = 6. 0 ） ， 置于高压锅内进 4 ℃ 过夜， （ 一抗为 Ecad 即 行抗原修复；滴加一抗， 用型） ；滴加试剂 1 （ 即用型 Polymer Helper） ， 室温 20 min， PBS 冲洗， 5 min × 3 次；滴加试剂 2 （ 即用型 Polyper oxidase anti mouse / IgG ） ， PBS 冲 室 温 20 min， 5 min × 3 次； 应用 DBA 显色， 苏木素复染， 盐酸 洗， 酒精脱色， 梯度酒精脱水， 二甲苯透明， 中性树胶封 片。 PBS 代替一 用已知阳性组织切片作阳性对照， cad 定位于细胞膜或细胞浆， 抗作阴性对照。 E结 果判定参照文献