5种来源三颗针药材的显微与薄层色谱鉴别_李路扬

Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 3 期 2014 年 3 月
·419·
管、木纤维及木薄壁细胞组成； 木射线细胞 2 ～ 8 列 （ 图 1-B） 。上述根横切面中，较细根的木栓层细胞 列数较少； 皮层较宽，所含石细胞较少； 韧皮部较窄， 韧皮纤维较少； 韧皮射线中纤维、石细胞及草酸钙方 晶较少，有时甚至没有。 2. 3 湖北小檗( 直径 2 ～ 6 mm) 木栓层为数列至 10 余列细胞。皮层细胞 4 至 10 余列，其间分布有 大量石细胞及许多纤维。石细胞单个散在或 2 至数 个相聚，多呈长条形、长三角形、类三角形、椭圆形、 类圆形； 纤维单个散在或 2 至 10 数个相聚成群，多 分布于近韧皮部处。韧皮部有众多纤维和少量石细 胞，纤维单个散在或 2 至 10 余个相聚，有时较规则 而略呈切向延长的条状分布，形成多层硬韧部，与薄 壁性细胞构成的软韧部相间排列。韧皮射线较直， 有时近皮层时向一侧弯曲； 韧皮射线中有大量草酸 钙方晶，有时也有单个散在或数个相聚的石细胞和 纤维。石细胞和纤维均呈绿黄色。形成层明显。木 质部主要由导管、木纤维及木薄壁细胞组成； 导管较 多，分布不规则； 木射线细胞 1 ～ 4（ 8） 列（ 图 1-C，图 2-B） 。上述根横切面中，较细根的木栓层细胞列数 较少，皮层中石细胞分布较密，韧皮射线及木射线较 窄，木质部导管分布较稀。 2. 4 拟豪猪刺( 直径 2 ～ 7 mm) 木栓层为数列至 10 余列细胞。皮层细胞 3 至数列，其间分布有较少 （ 有时较多） 的石细胞和纤维，外侧韧皮部也有纤维 和石细胞。石细胞和纤维多单个散在，有时 2 至数 个相聚； 石细胞多呈椭圆形、类圆形、长条形。韧皮 射线较直或向一侧倾斜，其中密布或有大量草酸钙 方晶，有时也有少量石细胞和纤维。石细胞和纤维 均呈绿黄色。形成层明显。木质部主要由导管、木 纤维及木薄壁细胞组成； 导管较少，略呈径向排列； 木射线细胞 1 ～ 7 列（ 图 1-D） 。上述根横切面中，较 细根的纤维和石细胞分布较稀疏，韧皮射线中草酸 钙方晶较少。 2. 5 汉源小檗( 直径 1. 8 ～ 5 mm) 木栓层为数列 至 10 余列细胞。皮层细胞数列，其间分布有相对较 少或较少的石细胞和纤维； 石细胞多呈椭圆形、类圆 形、长条形、类方形，单个散在或 2 至数个相聚； 纤维 单个散在或 2 至 10 余个（ 有时达数十个） 相聚，多 分布于近韧皮部处。韧皮部有少量纤维和石细胞， 纤维单个散在或 2 至 10 余个相聚，多分布于外侧韧 皮部； 韧皮射线中方晶通常较少，有时也有单个散在 或 2 至数个相聚的纤维和石细胞，韧皮射线有时在 近皮层处向一侧弯曲。石细胞和纤维均呈绿黄色。 形成层明显。木质部主要由导管、木纤维和木薄壁
碱具有消炎抗菌、降血压、降血脂及抗肿瘤等药理活 性〔3-6〕。2010 年版中国药典收录的三颗针中，规定
其来源为拟豪猪刺 Berberis soulieana Schneid. 等小
檗属数种植物的干燥根。但据市场调查发现，商品
三颗针还混有大量的地上茎。为保证用药的有效性
与安全性，笔者对 5 种小檗属植物的根进行了横切
5 种植物茎与根的薄层色谱虽有较大的相似 性，但与根相比，茎的荧光斑点的数目通常略少、形 状较小且颜色较浅，利用薄层色谱方法基本可以区 分根与茎。
关键词 三颗针； 小檗属植物； 显微鉴别； 薄层色谱 中图分类号： Ｒ282. 5 文献标识码： A 文章编号： 1001-4454（ 2014） 03-0418-03
三颗针是一种常用中药材，具有清热燥湿、泻 火解毒之 功 效〔1〕。其 有 效 成 分 有 小 檗 碱 （ berber-
ine） 、小檗胺 （ berbamine） 、巴马汀 （ palmatine） 及药 根碱（ jatrorrhizine） 等生物碱类化合物〔2〕，其中，小檗
图 2 2 种来源（ A. 川鄂小檗，B. 湖北小檗） 三颗针药材根横切面详图（ × 200）
1. 木栓层 2. 皮层 3. 石细胞（ 群） 4. 韧皮部 5. 纤维 （ 群） 6. 草酸钙方晶 7. 形成层 8. 射线 9. 木质部
2. 6 5 种小檗属植物根横切面显微构造的共性与 差异 5 种小檗属植物根的横切面有较多共性显微 特征： 皮层和韧皮部均有绿黄色的纤维（ 群） 和石细 胞（ 群） ； 韧皮射线中均有大量草酸钙方晶，有时还 有石细胞（ 群） 和纤维（ 群） ； 形成层明显。但 5 种同 属植物的根仍有一定的显微特征的差异。如川鄂小 檗的木栓层较宽，为 10 至 30 余列细胞，木质部导管 多呈较明显的切向排列； 芒齿小檗的皮层的石细胞 和纤维较少，多分布于近韧皮部处，韧皮部仅有少量
Fedde、湖北小檗 Berberis gagnepainii Schneid. 以及
汉源 小 檗 Berberis bergmanniae Schneid. 的 干 燥 根
（ 带有茎） 。每种样品采自同一采集地多个采集点
的不同植株。样品来源见表 1。
OlympusCX41光学显微镜（ 日本Olympus公司） 。
5 种小檗属植物的茎与根的薄层色谱也均非常 相似，均有小檗碱与药根碱 2 个主斑点，其余斑点也 绝大部分对应。其中，湖北小檗、汉源小檗的茎有 5 个相同的荧光斑点（ 与根相对应） ，均无其根所具有 的 Ｒf 值约为 0. 98 的荧光斑点； 芒齿小檗、川鄂小檗 的茎均有 6 个与根相对应的荧光斑点，但芒齿小檗 的茎在 Ｒf 值约为 0. 40、0. 52 和 0. 98 处的荧光斑点 较弱； 拟豪猪刺的茎有 5 个与根相对应的荧光斑点， 但茎在 Ｒf 值约为 0. 40、0. 52 和 0. 98 处的斑点明显 较弱，且无其根所具有的 Ｒf 值约为 0. 23 的荧光斑 点。 4 小结与讨论
·420·
Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 3 期 2014 年 3 月
纤维和石 细 胞，皮 层 及 韧 皮 部 无 成 层 排 列 的 纤 维 （ 石细胞） 群； 湖北小檗的皮层及韧皮部的石细胞和 纤维众多，韧皮纤维有时呈切向延长的条状分布，形 成多层硬韧部，韧皮射线中有大量草酸钙方晶； 拟豪 猪刺的韧皮射线中密布或有大量草酸钙方晶； 汉源 小檗的皮层及韧皮部的石细胞和纤维相对较少，韧 皮射线方晶通常较少，导管较少，略呈径向排列。 3 薄层色谱鉴别
·418·
Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ第 3 期 2014 年 3 月
5 种来源三颗针药材的显微与薄层色谱鉴别
李路扬1 ，万定荣1，2* ，张 飞1 ，丁 奇1 ，梅之南1 （ 1. 中南民族大学药学院，湖北 武汉 430074； 2. 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验 室，湖北 武汉 430074）
5 种小檗属植物根的横切面具有很多显著的共 性显微特征，但在木栓层细胞列数的多少、皮层和韧 皮部的石细胞的多少及形态、纤维的多少及排列、韧 皮射线形状及内含方晶多少、导管的多少及排列等 方面有明显差异，利用显微特征能达到鉴别的目的。
5 种小檗属植物根的薄层色谱具有很好的一致 性，说明小檗属多种植物根的化学成分具有极大的 相似性，中国药典对三颗针基原的规定是合理的。
分别取拟豪猪刺、川鄂小檗、芒齿小檗、湖北小 檗、汉源小檗的根、茎的粉末各 1 g，加甲醇 20 mL， 超声处理 20 min，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 另分别取盐酸小檗碱和盐酸药根碱对照品，加甲醇 制成每 1 mL 各含 0. 5 mg 的溶液，作为对照品溶液。 吸取上述 12 种溶液各 3 μL，分别点于同一以 0. 4% 羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上，以三 氯甲烷-甲醇-水（ 30∶ 15∶ 4） 的下层溶液为展开剂，置 氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光 灯（ 365 nm） 下检视，观察所显出的荧光色谱斑点。 见图 3。
收稿日期： 2013-08-26
基金项目： 国家科技支撑计划项目（ 2012BAI27B06） 作者简介： 李路扬（ 1989-） ，女，在读硕士研究生，专业方向： 中药民族药资源与品质研究； Tel： 13016408450，E-mail： luckyliluyang@ 163. com。 * 通讯作者： 万定荣，E-mail： wandr666@ 163. com。
摘要 目的： 研究比较 5 种小檗属植物（ 拟豪猪刺、川鄂小檗、芒齿小檗、湖北小檗、汉源小檗） 根的显微特征及 根、茎（ 非药用部位） 的薄层色谱，为三颗针药材的鉴定提供新的依据。方法： 对 5 种小檗属植物根的横切面进行显 微观察，对其根和茎进行薄层色谱研究，通过比较，确立不同来源的三颗针的鉴别特征。结果： 5 种小檗属植物根横 切面的显微特征明显； 5 种植物根的薄层色谱一致，并多与茎的薄层色谱有所差异。结论： 研究结果为三颗针药材 的鉴别与应用提供了参考依据。
面显微观察研究，并对其根和茎进行薄层色谱比较
研究，以期为三颗针药材鉴定提供新的依据。
1 材料与仪器
5 种基原的三颗针药材样品采自湖北省建始县
和长阳县，经笔者万定荣教授鉴定，分别为拟豪猪刺
Berberis soulieana Schneid. 、川鄂小檗 Berberis henry-
ana Schneid. 、芒 齿 小 檗 Berberis triacanthophora
细胞组成； 导管较少，略呈径向排列； 木射线细胞 1 ～ 6 列（ 图 1-E） 。上述根横切面中，较细根的皮层 和韧皮部的纤维较稀疏，韧皮射线中方晶较少。
图 1 5 种来源三颗针药材根横切面简图（ × 20） A. 川鄂小檗 B. 芒齿小檗 C. 湖北小檗 D. 拟豪猪刺 E. 汉源小檗 1. 木栓层 2. 皮层 3. 纤维（ 群） 4. 韧皮部 5. 射线 6. 木质部 7. 石细胞（ 群）
表1
三颗针药材样品来源
样品编号 1 2 3 4 5
基原
采集地
川鄂小檗 湖北建始茅田王家坦
芒齿小檗 湖北建始龙坪姜家坪
湖北小檗 湖北建始龙坪姜家坪
拟豪猪刺 湖北长阳榔平乡
汉源小檗 湖北长阳黄岩
凭证标本 1206001 1206002 1206003 120720LY002 1207010
硅胶 G（ 青岛海浪硅胶干燥剂厂） 。盐酸小檗碱（ 批 号： 1100713-200911 ） 、盐 酸 药 根 碱 （ 批 号： 110733201108） 对照品购自中国食品药品检定研究院； 化 学试剂均为分析纯。 2 根横切面显微特征 2. 1 川鄂小檗( 直径 2. 5 ～ 7 mm) 木栓层为 10 ～ 30 余列细胞。皮层细胞 2 至数列，其间分布有少量 石细胞和较多纤维。韧皮部有大量韧皮纤维，单个 散在或 2 至 10 余个相聚。皮层及韧皮部的石细胞 和纤维均呈绿黄色，其中纤维群多略呈切向延长的 条状分布，与薄壁细胞略相间成层排列。韧皮部近 木质部侧通常无纤维； 韧皮射线较直，有时接近皮层 时略向一侧弯曲，射线中分布有大量的草酸钙方晶， 有时有少量石细胞和纤维。形成层明显。木质部主 要由导管、木纤维及木薄壁细胞组成； 导管较多，单 个散在或 2 至数个相聚，呈较明显的切向排列或排 列不甚规则； 木射线细胞 1 ～ 4 列（ 图 1-A，图 2-A） 。 上述根横切面中，较细的根的韧皮部中纤维较少，木 质部导管直径也较小。 2. 2 芒齿小檗( 直径 2. 5 ～ 6. 5 mm) 木栓层为数 列至 10 余列木栓细胞。皮层细胞 2 至数列，其间散 有石细胞和纤维，单个散在或 2 至数个相聚，分布于 近韧皮部侧； 石细胞呈椭圆形、长条形、类圆形。韧 皮部有较多纤维及少量石细胞，纤维单个散在或 2 至 10 余个相聚成群，多分布于外侧韧皮部； 韧皮射 线较直，有时在近皮层处向一侧弯曲或向两侧略扩 大呈喇叭状，射线中多分布有较多的草酸钙方晶，有 时也有纤维、石细胞或纤维群及石细胞群。石细胞 和纤维均呈绿黄色。形成层明显。木质部主要由导