康欣胶囊对血管性痴呆模型大鼠皮质顶叶、海马CA1区

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$ $ 〔 摘$ 要〕 $ 目的$ 观察补肾健脾养血活血中药制剂康欣胶囊对血管性痴呆 （ )* ） 模型大鼠皮质顶叶、 海马 !"# 区神经生长因子 （ +,- ） 的表达 以及神经突触形态和数量的影响。方法$ 光化学反应法制作 )* 模型大鼠， 康欣胶囊高、 中、 低剂量及阳性西药喜得镇给药 # 个月， 同时设立模型组 和空白组， 电镜观察各组大鼠皮质顶叶、 海马 !"# 区神经突触形态， 计算突触数密度， 免疫组化染色观察皮质顶叶、 海马 !"# 区 +,- 阳性细胞情况。 结果$ 电镜下， 康欣胶囊各给药组及阳性西药组皮质顶叶、 海马 !"# 区突触形态完好， 数量正常， 与空白组情况接近， 优于模型组；两部位 +,- 阳性 细胞显著多于模型组 （ ! . (/ (# ） ， 与空白组接近。结论$ 康欣胶囊可提高 )* 模型大鼠皮质顶叶、 海马 !"# 区 +,- 的表达， 保护突触形态和数量， 从 而保护缺血损伤后神经系统功能。 〔 关键词〕 $ 康欣胶囊； 血管性痴呆； 神经生长因子 （ +,-） ； 神经突触 )#+)’*$+), 〔 中图分类号〕 ! "#$$% $&’! ! 〔 文献标识码〕 ! (! ! 〔 文章编号〕 ! ’))*+&#)# （ #))* ）
应， 对照试验切片不加一抗以 ,-. 替代， 其余步骤相同， 结果为 阴性。主要试剂单克隆兔抗大鼠 /01 抗体、 .3-4 试剂盒均购 自博士德公司。 !" $ 2 突触数密度计算方法 2 按常规电镜标本制作要求包埋、 超薄切片后， 每例大鼠取 5 张铜网， 每张铜网在左上角至右下 角斜线上移 动， 随 机 拍 摄 6 7 % 张， 共 &! 7 &% 张。底 片 放 大 #! !!! 倍， 印相， 实际面积 8" 6 !’# 。用绘有 !" #% 9’ : !" #% 9’ 标准测试方格透明薄膜覆盖照片， 计算突触数量、 突触连接带 和测试线的交点数， 计算突触数密度： 突触数密度 /; < /=（ * +* 。为保证突触计数的正确性， 所计突触必须 >( ? @） （ 个 * !’5 ） 具备增厚的突触前后膜和突触间隙， 如有突触小泡、 突触前膜 终端的线粒体等结构则更为明确。 !" % 2 /01 阳性神经元分析2 在 6! 倍高倍镜下， 随机选取各张 切片 % 个 视 野， 用 A,B3.C%!! 多 媒 体 彩 色 图 文 分 析 系 统 以 !" D8% !’ 像素点长， 测取 /01 阳性神性元染色深浅的光密度 值 （ EF 值） ， 以 EF 值定量反映 /01 阳性神经元染色深浅， 以 此来定量反映神经元内 /01 的活性。 !" & 2 统计学处理2 所有数据均以 ! G " 记录， 在 ,4 机上运用 .,..&#" ! 统计软件包进行单因素方差分析。 ’( 结( 果 ’" ! 2 皮质顶叶、 海马 43& 区神经细胞、 突触电镜观察一般情 况2 空白组大鼠皮质顶叶、 海马 43& 区神经细胞结构清晰， 突 起明显， 细胞器丰富， 胞浆着色均匀； 细胞核大， 染色稍深， 无固 缩、 边聚现象； 突触丰富， 结构正常， 清晰可见突触前后膜和突 触间隙， 也能见到完整的突触小泡、 突触前膜终端线粒体等结 构。模型组大鼠皮质顶叶、 海马 43& 区神经细胞结构不清晰； 细胞器数量减少， 细胞核有固缩、 分离现象， 神经髓鞘水肿增 多， 突触数量减少， 见到较多空泡融合现象。康欣胶囊各给药 组皮质顶叶、 海马 43& 区神经细胞结构清晰， 细胞器数量丰富， 细胞核完整， 没有固缩、 分离现象， 神经髓鞘稍有水肿增厚， 突 触数目较多， 突触内微结构基本完整， 尤其康欣胶囊高剂量组 突触数目最多， 结构最完整， 神经髓鞘水肿增厚程度最轻微， 和 空白组情况接近。阳性西药组大鼠神经细胞结构完整， 细胞核 没有固缩、 边聚现象， 神经髓鞘稍有水肿增厚， 突触数量和结构 尚正常。 ’" ’ 2 各组大鼠皮质顶叶、 海马 43& 区突触数密度的比较 2 无 论是皮质顶叶， 还是海马 43& 区， 模型组的突触数密度均最低。 经单因素方差分析 （ # < %" HD8 5， $ I !" !& ） ， 各组突触数密度有 显著性差异。各给药组皮质顶叶和海马 43& 区突触数密度较模 型组显著增高， 其中尤以康欣胶囊高剂量组增高明显 （表 &） 。 ’" ) 2 各组大鼠 /01 阳性神经元 EF 值比较 2 /01 阳性神经 元密度以模型组为最低， 空白组和各给药组均较模型组显著增 高， 经单因素方差分析 （ # < 6" DH8 ， $ I !" !& ） ， 继以组间 % 检验，