性激素六项的检测及临床应用ppt课件
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性激素检测与临床ppt课件
Androstenedione
第二性征 5 6 7 8 9 10
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性发育与实验室检测
性早熟:女童8岁前,男童9岁前出现第二性征
肾上腺来源的雄激素
胆固醇
孕烯醇酮 垂体
孕酮(P)
17~α 羟化酶
脱氢表雄酮 雌酮 (E1) C17~C20裂解酶 雄烯二酮
肾上腺
肾脏
睾酮(T) 雌二醇 (E2) 芳香化酶 卵巢 睾丸
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常见女性生殖系统疾病与检测
女性一生各时期的生理特点及主要疾病
实验室检测与生殖系统常见疾病
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女性一生各阶段的生理特点
儿童期 青春期 性成熟期
硫酸脱氢表雄酮:绝大部分来自于肾上腺分泌,是体内其他形式的雄激素的前体, 具有较弱的雄激素作用。其升高主要见于肾上腺来源的雄激素增多,对女性男性 化、多毛症、多囊卵巢综合症等具有鉴别诊断作用。 雄烯二酮:肾上腺和卵巢均可分泌,在女性体内总量远高于睾酮,但活性只有睾 酮的1/10
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性激素六项解读 PPT
雌二醇(E2),月经期和早卵泡期通常维持在较低的水平。在排卵前 有一个高峰,黄体期则维持较长时间的平台期, 月经来潮则迅速下降。 孕激素(P)在排卵前始终维持低水平。排卵后黄体逐渐成熟并分泌 大量孕激素。排卵后8-9天(就是周期的第22-24天)黄体达到成熟的 高峰。 这就是为什么大夫通常在月经期让你查的是内分泌五项,而不是六项。 因为排卵前检查孕激素没有意义。大夫建议你在月经的第22-24天抽 血查孕激素水平,目的是检查有没有排卵。 卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH), 它们代表卵巢的功能。 这2种激素只有在排卵前1-2天突然出现一个高峰并维持暂短时间, 其 它时间都维持在较低水平。LH 峰值通常出现在排卵前的24-48小时, 这是我们LH试纸监测排卵的原因。 睾酮(T)垂体泌乳素(PRL)没有明显的周期变化,通常在周期的 任何一天检查都是可以的。
正常育龄非孕期妇女的孕激素水平:
卵泡早中期:
小于1 ng/ml
晚卵泡期和围卵泡期: 1-3 ng/ml
黄体中期:
大于10ng/ml
妊娠期孕酮水平可预示胚胎发育。
妊娠3个月之前, P主要由卵巢黄体分泌, P小于5ng/ml预示胚胎可能死亡; P<15ng/ml提示胚胎发育不良或者宫外孕; P≥25 ng/ml,可基本排除宫外孕; 正常早孕6周以上的妇女,P值通常≥25 ng/ml,维持在≥30 ng/ml的水平比较适宜。
大家应该也有点累了,稍作休息
大家有疑问的,可以询问和交流
2、孕激素P
非孕期 P是卵巢分泌的,主要是黄体分泌的。P在早卵泡期均值为 0.92±0.52ng/ml,排卵前始终维持< 2 ng/ml的低水平。排卵后黄体 逐渐成熟分泌大量孕激素,孕激素维持在高水平并持续10-14 天 。在 月经周期第22-24天测量P值,如果>3巢分泌。正常的基础值为0.29±0.14ng/ml。 多囊卵巢综合征时可能睾酮增高。多囊卵巢综合征有的人虽然睾酮检 测值不高,但是有高雄的表现, 比如座疮、毛发重、黑棘皮征等,这 可能是雄激素受体比较敏感等。 血液中的睾酮高或者高雄的表现是诊断多囊卵巢综合征的一个重要指 标。但是它并不是一个必须有的指标。 高雄血征还要注意有否其它疾病, 比如分泌睾酮的肿瘤,或者肾上腺 皮质增生症等。
女性常用激素检查及解读ppt课件
●雄激素和合成 雌激素的原材料, 在雌激素高的时 候,雄激素也会 高。
●雌激素是泌乳素的刺激因子,也就是说雌 激素水平越高,泌乳素水平越高
泌乳素的24小时节律变化
月经2-4天抽血检测
E
2pg/ml
P
ng/ml
FSH
ml
mIU/
LH
ml
mIU/
PRL
ml
ng/
T
ng/ml
32.50
0.110
3.25
0.12
6.71
0.130
E
2pg/ml
P
ng/ml
FSH
ml
mIU/
LH
ml
mIU/
PRL
ml
ng/
T
ng/ml
13.42
0.140
55.12
37.57
18.71
0.160
0.198
6.63
4.70
11.20
0.240
E
2pg/ml
P
ng/ml
FSH
ml
mIU/
LH
ml
mIU/
PRL
ml
ng/
T
ng/ml
56.45
0.690
16.67
4.76
17.20
0.350
E
2pg/ml
P
ng/ml
FSH
ml
mIU/
LH
ml
mIU/
PRL
ml
ng/
T
ng/ml
12.50
0.480
8.43
5.70
13.28
0.182
月经2-4天抽血检测
性激素六项的检测及临床应用PPT课件
性激素项目临床应用
孕酮(P):
孕酮系21碳类固醇,由胆固醇经孕烯醇酮通过异构酶转化而成。首先来自卵 巢由正常月经周期后半期黄体分泌发育卵泡中的泡膜细胞a产生一定量的孕酮。 主要生理作用是保证受精卵着床和维持妊娠,降低子宫对催产素的敏感性, 以防止流产。
临床意义:孕酮检测广泛用做确证排卵,以及对妊娠前三个月的妊娠意外, 如先兆流产、异位妊娠处理参考,血清孕酮增高常见于双胎或多胎妊娠,并 与胎盘分泌功能和胎盘体积有关。故双胎妊娠孕酮含量高于单胎,三胎又高 于双胎。另外,子宫内膜癌、先兆子痫、妊娠高血压,妊娠合并糖尿病、胎 儿宫内生长迟缓,血清孕酮也可增高。血清孕酮降低常见于无排卵性子宫功 能性出血,原发性或继发性闭经不孕症,早产,黄体功能不全,异位妊娠等。
性激素项目临床应用
睾酮(T):
是男性体内主要的和唯一具有临床意义的雄性激素,同时也是女性体内活性最强的雄 性激素,男性血浆中睾酮95%来自睾丸,肾上腺分泌很少。女性则主要由肾上腺皮质分 泌,卵巢分泌很少。血浆中睾酮98%成结合型,游离睾酮仅占2%但只有游离态具有生 物活性。胎儿时期睾酮促进附睾、输精管和精囊的发育,青春期促使外生殖和第二性 征的生长发育影响精子的生成。睾酮测定可以做男性性功能减退或睾酮分泌不足诊断, 作为评价男性不育症项目。临床意义:血液睾酮含量增高常见于睾丸间质细胞瘤。真 性男性性早熟患者睾酮、FSH、LH均升高。女性多毛症、皮质醇增多症、完全性雄性 激素不应综合症等均可见不同程度升高,血液睾酮含量降低原发性睾丸功能减退,包 括先天性无睾症、睾丸萎缩等,双侧隐睾者睾酮明显减低,PRL升高;单侧隐睾者65% 睾酮减低。其他如系统性红斑狼疮、男性慢性肝病、慢性肾功能衰竭等均可不同程度 的睾酮减少。
适应症:女性出现月经周期紊乱、闭经、生殖道异常出血、妇科相关 肿瘤等等,需要常规检查性激素。 在男性,出现精液异常、阳痿、 激素相关肿瘤等,需要检查性激素。
(完整)性激素六项解读精品PPT资料精品PPT资料
P≥25 ng/ml,可基本排除宫外孕; 血液中的睾酮高或者高雄的表现是诊断多囊卵巢综合征的一个重要指标。
P在早卵泡期均值为0. 排卵后8-9天(就是周期的第22-24天)黄体达到成熟的高峰。
正常早孕6周以上的妇女,P值通常≥25 P<15ng/ml提示胚胎发育不良或者宫外孕;
在月经周期第22-24天测量P值,如果>3 ng/ml估计可能有排卵。 P在早卵泡期均值为0.
4、黄体生成素LH 也是评价卵巢功能的指标之一。 基础LH水平应该是<10IU/L。LH在排卵前24-48小时有一个高峰,均值为52.98±24.35 IU/L。 突然升高的LH分泌到尿中,维持数小时消失,然后排卵发生。 因此如果我们在尿中用LH试纸测到阳性,那么可能24小时至48小时之间就排卵了。 除了监测排卵的用途以外, LH和FSH测定还可鉴别中枢性或卵巢性闭经。 LH和FSH>40IU/L为高促性腺激素(卵巢性)闭经,即绝经; FSH和LH均<5IU/L,为低促性腺激素(下丘脑或垂体性)闭经,如席汉综合征; 血LH/FSH比值>2~3或LH>25 IU/L为多囊卵巢综合征(PCOS)参考诊断指标之一。 (注意LH 及LH/FSH比值并不是诊断多囊卵卵泡期和围卵泡期: 1-3 ng/ml
黄体中期:
大于10ng/ml
妊娠期孕酮水平可预示胚胎发育。
妊娠3个月之前, P主要由卵巢黄体分泌,
睾酮(T)垂体泌乳素(PRL)没有明显的周期变化,通常在周期的任何一天检查都是可以的。
P小于5ng/ml预示胚胎可能死亡; E2>9pg/ml,为性腺功能启动的标志,青春期前测定可辅助判断是否为性早熟;
二、如何抽血?
除了孕激素(P) 以外, 其它五项的抽血时间应该是在月经周期的第2-4天(见血算是 第一天),这时候查的结果代表一个人的基础激素水平。 通常空腹、上午抽血为宜。抽血前静坐半小时以上, 避免激素水平因为运动而产生波动。 孕激素(P)应该在月经周期的第22-24天抽血(见血算是第一天)。 睾酮(T)和泌乳素(PRL)不受月经周期的限制, 也就是说在任何一天抽血均可。 泌乳素抽血最好在上午9:00至10:00之间, 抽血之前静坐半小时以上方好。 如果你闭经3-6个月以上, 并且没有怀孕,你可以任何一天抽血均可。 如果你已经怀孕了, 那么通常只查孕激素和雌激素(和HCG), 其它激素就不必查了。
P在早卵泡期均值为0. 排卵后8-9天(就是周期的第22-24天)黄体达到成熟的高峰。
正常早孕6周以上的妇女,P值通常≥25 P<15ng/ml提示胚胎发育不良或者宫外孕;
在月经周期第22-24天测量P值,如果>3 ng/ml估计可能有排卵。 P在早卵泡期均值为0.
4、黄体生成素LH 也是评价卵巢功能的指标之一。 基础LH水平应该是<10IU/L。LH在排卵前24-48小时有一个高峰,均值为52.98±24.35 IU/L。 突然升高的LH分泌到尿中,维持数小时消失,然后排卵发生。 因此如果我们在尿中用LH试纸测到阳性,那么可能24小时至48小时之间就排卵了。 除了监测排卵的用途以外, LH和FSH测定还可鉴别中枢性或卵巢性闭经。 LH和FSH>40IU/L为高促性腺激素(卵巢性)闭经,即绝经; FSH和LH均<5IU/L,为低促性腺激素(下丘脑或垂体性)闭经,如席汉综合征; 血LH/FSH比值>2~3或LH>25 IU/L为多囊卵巢综合征(PCOS)参考诊断指标之一。 (注意LH 及LH/FSH比值并不是诊断多囊卵卵泡期和围卵泡期: 1-3 ng/ml
黄体中期:
大于10ng/ml
妊娠期孕酮水平可预示胚胎发育。
妊娠3个月之前, P主要由卵巢黄体分泌,
睾酮(T)垂体泌乳素(PRL)没有明显的周期变化,通常在周期的任何一天检查都是可以的。
P小于5ng/ml预示胚胎可能死亡; E2>9pg/ml,为性腺功能启动的标志,青春期前测定可辅助判断是否为性早熟;
二、如何抽血?
除了孕激素(P) 以外, 其它五项的抽血时间应该是在月经周期的第2-4天(见血算是 第一天),这时候查的结果代表一个人的基础激素水平。 通常空腹、上午抽血为宜。抽血前静坐半小时以上, 避免激素水平因为运动而产生波动。 孕激素(P)应该在月经周期的第22-24天抽血(见血算是第一天)。 睾酮(T)和泌乳素(PRL)不受月经周期的限制, 也就是说在任何一天抽血均可。 泌乳素抽血最好在上午9:00至10:00之间, 抽血之前静坐半小时以上方好。 如果你闭经3-6个月以上, 并且没有怀孕,你可以任何一天抽血均可。 如果你已经怀孕了, 那么通常只查孕激素和雌激素(和HCG), 其它激素就不必查了。
性激素6项的临床意义课件
卵巢:分泌雌激素(雌二醇,雌酮,雌三醇等)。分泌少量雄激素。 睾丸:分泌雄激素(睾酮,双氢睾酮,脱氢异雄酮,雄烯二酮等)。
分泌少量雌激素。 • 肾上腺:分泌少量雄激素、雌激素 • 调控器官:下丘脑-分泌促性腺激素释放激素;
腺垂体-分泌卵泡刺激素、黄体生成素、催乳素等。
性激素特性
性激素特性:一少三大 • 含量极少(nmol/L、pmol/L) • 效能大:具有高效能生物放大作用。如一分子激素与受体结合,效能放大1
月经周期、卵巢周期及激素调节
• 卵泡期——相当于月经周期的第1-14天,此期的子宫内膜表现为月经期和增生期。 • 卵泡期开始时,子宫内膜剥落出血,正值月经期(约第1-5天),此时血中的E2、P均处于
低水平。E2、P对腺垂体分泌的FSH、LH的反馈抑制作用减弱,血中GnRH、FSH、LH释放 逐渐增多,促进卵泡发育,继之血中E2逐渐升高。 • 约在月经周期第8-14天,卵巢中只有一个卵泡生长变快,其余逐渐退化,成熟卵泡分泌的 E2进一步增多,在E2作用下子宫内膜表现增生期变化。此时由于E2正反馈作用,E2明显 升高,到排卵前1天(第14天),E2升至第一个最高峰。由于E2正反馈作用,下丘脑分泌 GnRH和腺垂体分泌FSH、LH也明显增多,从而形成LH高峰。LH达到顶峰12h后即发生排卵。
下丘脑-腺垂体-睾丸轴
➢睾丸生精作用和内分泌功能均受到下丘脑-腺垂体的调控。 • 腺垂体分泌的FSH与LH对生精过程均有调节作用。 • 腺垂体分泌的LH可促进睾丸间质细胞合成和分泌睾酮。 ➢睾丸分泌的激素又对下丘脑-腺垂体进行反馈作用。 • 睾丸分泌的雄激素和抑制素在血液中的浓度变化,也可对下丘脑和腺垂体的
性激素来源
➢ 雌孕激素主要由卵巢分泌,肾上腺皮质和睾丸产生少量 • E2(雌二醇)
分泌少量雌激素。 • 肾上腺:分泌少量雄激素、雌激素 • 调控器官:下丘脑-分泌促性腺激素释放激素;
腺垂体-分泌卵泡刺激素、黄体生成素、催乳素等。
性激素特性
性激素特性:一少三大 • 含量极少(nmol/L、pmol/L) • 效能大:具有高效能生物放大作用。如一分子激素与受体结合,效能放大1
月经周期、卵巢周期及激素调节
• 卵泡期——相当于月经周期的第1-14天,此期的子宫内膜表现为月经期和增生期。 • 卵泡期开始时,子宫内膜剥落出血,正值月经期(约第1-5天),此时血中的E2、P均处于
低水平。E2、P对腺垂体分泌的FSH、LH的反馈抑制作用减弱,血中GnRH、FSH、LH释放 逐渐增多,促进卵泡发育,继之血中E2逐渐升高。 • 约在月经周期第8-14天,卵巢中只有一个卵泡生长变快,其余逐渐退化,成熟卵泡分泌的 E2进一步增多,在E2作用下子宫内膜表现增生期变化。此时由于E2正反馈作用,E2明显 升高,到排卵前1天(第14天),E2升至第一个最高峰。由于E2正反馈作用,下丘脑分泌 GnRH和腺垂体分泌FSH、LH也明显增多,从而形成LH高峰。LH达到顶峰12h后即发生排卵。
下丘脑-腺垂体-睾丸轴
➢睾丸生精作用和内分泌功能均受到下丘脑-腺垂体的调控。 • 腺垂体分泌的FSH与LH对生精过程均有调节作用。 • 腺垂体分泌的LH可促进睾丸间质细胞合成和分泌睾酮。 ➢睾丸分泌的激素又对下丘脑-腺垂体进行反馈作用。 • 睾丸分泌的雄激素和抑制素在血液中的浓度变化,也可对下丘脑和腺垂体的
性激素来源
➢ 雌孕激素主要由卵巢分泌,肾上腺皮质和睾丸产生少量 • E2(雌二醇)
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获得理想的妊娠率。
4、基础FSH﹥12IU/L,下周期复查,连续﹥12IU/L提示DOR。 5、多囊卵巢综合征(PCOS):基础LH/FSH﹥2~3,可作为诊断PCOS的主要指标
(基础LH水平﹥10IU/L即为升高,或LH维持正常水平,而基础FSH相对低水平,
就形成了LH与FSH比值升高)。 6、检查2次基础FSH>20IU/L,可认为是卵巢早衰隐匿期,提示1年后可能闭经
早黄素化。
在IVF-ET长方案促排卵中,肌注HCG日即使并无LH浓度的升高,若P(ng/ml)×1000/E2(pg/ml)>1,提示卵泡 过早黄素化,且该类患者临床妊娠率明显降低。过早黄素化也是DOR的表现。 4、鉴别异位妊娠:异位妊娠血P水平偏低,多数患者血P﹤47.7nmol/L (15ng/ml)。仅有1.5%的患者
一 不孕不育检查
先查丈夫,再查妻子
先检查丈夫,简单又经济。武大中南医院男科主任李世文为不孕不育 患者总结了第一个窍门。有些人认为不生孩子肯定是女方的原因,总 是把女方查来查去。其实不然,李教授说,导致不孕不育的原因极其 众多,总体上来讲由妻子单方面造成的不孕占50%,男性单方面的原 因占30%,双方共同的原因占20%。如果外观检查无异常,男方首先 做精ye检查(100元左右)。如果精ye检查正常,基本上可排除男方造成 不育的可能,则可从女方着手找原因。
(一)FSH和LH:基础值为5~10IU/L 正常月经周期中,卵泡早期(月经2~3天)血FSH、LH均维持在低水平,排 卵前迅速升高,LH高达基础值的3~8倍,可达160IU/L甚更高,而FSH 只有基础值的2倍左右,很少﹥30IU/L,排卵后FSH、LH迅速回到卵泡
期水平。监测卵泡早期的FSH、LH水平,可以初步判断性腺轴功能。
性激素检测ppt课件
检验结果解读基本路径
• 根据E2、P、FSH、LH动态检测结果变化来推算卵巢 周期或月经周期,进而评价检验结果与疾病联系以 及临床应用价值。 • 解读检验结果的关键点,对于青春期或生育期女子, 只有知晓月经起始的准确日期,才能更好的将E2、P、 FSH、LH等检验结果灵活应用于对疾病的诊断、鉴别 诊断、治疗及预后的评估。 • 对于实验室而言,特别需要医师申请单务必填写清 楚病人姓名、性别、年龄、诊断和月经起始日期。 这对于实验室质量控制与保证检验结果的准确性至 关重要。也利于医师对检验质量的评价和检验结果
性化表现。
胰腺:胰岛素依赖型糖尿病患者常伴有卵巢功能
低下。胰岛素拮抗的高胰岛素血症患者,从而促 进卵巢产生过量雄激素,可导致月经失调、闭经。
内容提要
• 第一节 • 第二节 • 第三节 性激素的基本知识 性激素检测与临床疾病 性激素检测的质量控制及
要求
第二节 性激素检测与临床疾病
• 卵泡刺激素(FSH)与临床 • 黄体生成素(LH)与临床
月经周期、卵巢周期及激素调节
黄体期
阶段1 阶段2 阶段3 阶段4
排卵后,生成的黄 体产生大量E2和P。 约在月经周期的第 19-25天,E2升至 第二个高峰。 卵子受精,妊娠黄体 继续分泌E2和P。 卵子未受精,E2第二个高峰负反 馈作用于下丘脑和腺垂体,FSH、 LH分泌减少,使黄体在月经周 期第25天自动退化,此时血中 E2、P明显降低。 月经期第28天,E2、P降 到最低水平,子宫内膜缺 少E2、P支持,子宫内膜 发生脱落出血,进入下一 个月经周期。
腺垂体
LH(黄体 生成素) PRL(催乳 素)
性激素来源
雌孕激素主要由卵巢分泌,肾上腺皮质和睾丸产生 少量 • E2(雌二醇)来源:女性,卵泡、黄体为主,胎盘、 肾上腺皮质少量。 • P(孕酮)来源:女性,黄体、胎盘。男性,睾丸、 肾上腺皮质。 雄激素主要由睾丸和肾上腺皮质分泌,卵巢产生少 量 • T(睾酮)来源:女性来自卵泡内膜及肾上腺皮质。 男性来自睾丸及肾上腺皮质。
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射线计数仪放射性(125I)。对环境的污染及对身体的危害, 已经为重视环保的国家逐步取消。(如整个欧洲仅尚存几个放 免试验室)
125I的半衰期短而导致其试剂有效期短 Nhomakorabea
标记物125I的稳定性差,导致试剂盒批间、批内的变异较大;
标准曲线有效期短,必须每次定标,造成浪费。
操作繁琐,出报告时间长。
化学发光与放免的对比表
性激素六项的检测 及临床应用
免疫学检测发展简介
免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行
检测的一种手段,由于其可以利用同位素、酶、化学
发光物质等对检测信号进行放大和显示,因此常被用
于检测蛋白质、激素等微量物质。
免疫学检测发展简介
免疫分析经历了放射免疫检验、荧光免疫检验、酶标 免疫检验等不同时期,化学发光免疫检验是免疫分析 发展的一个新阶段,它环保、快速、准确的特点已得 到人们的普遍认识。 因此化学发光免疫分析是通往免疫检验完美境界 的必经之路。
6.安全性好及使用期长:在上述优点前提下,更免除了使用放射性 物质。到目前为止,还未发现CLIA的危害性。有效期可长达1年以上, 放射免疫分析由于放射性同位素的衰变,一般有效期只有一个月,而 酶联的底物贮存性差,都无法与化学发光相比,有效期长可以提高劳 动效率,也利于推广应用。
基本性能对照表
化学发光免疫分析种类
免疫测定(immunoassay)是利用抗原体反应来测定标本中微量物质的方法。
化学发光免疫分析技术原理
1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其 免疫活性。 2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这 种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活 性。
3.洗涤后加入发光底物,酶促使发光底物发光,通过
反应体系 接近中性
不透明微量孔壁吸附, 包被技术 提高分析灵敏度,降低 本底
技术性
新技术,很成熟
干扰因素 干扰极小 测试项目 项目齐全
化学发光免疫分析的优点
1 . 灵 敏 度 高 : 这 是 CLIA 关 键 的 优 越 性 , 其 灵 敏 度 可 达 1016mol/L(RIA为10-12mol/L)。又如化学发光底物(如AMPPD)
可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏 5х105倍。
2.宽的线性动力学范围:发光强度在 4~ 6个量级之间与测定
物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度( OD 值)为2.0的范围相比,优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动 力学范围,但放射性限制了其应用。
3 .光信号持续时间长:辉光型( glow type )的 CLIA 产生的
光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。
化学发光免疫分析的优点
4 .分析方法简便快速:绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂 (或复合试剂)的一步模式。
5.结果稳定、误差小:样品系直接自己发光,不需要任何光源照射, 免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析 带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。
化学发光免疫检测的灵敏度与可测范围远远高于酶免产品,兼 具ELISA法简便的操作方法与较短的反应时间。
化学发光与酶免的对比表
酶 测量精度 人体伤害 有效期 干扰因素 测试项目 标 化学发光 定量测量 无 长 极少 多 定性/半定量测量 底物有致癌性 较短 多 少
化学发光与放免的对比
放免原理是使用具有放射性的I125作标记物,然后用测量
专用的仪器检测光子的数量,从而反算出未知抗原或 抗体的浓度。
化学发光免疫检测原理
在化学发光免疫 分析,基本原 理同酶联免疫 技术(ELISA), 常采用双抗体 夹心法、竞争
法、等反应模
式。
检测方法的比对
1、化学发光与酶免的对比 2、化学发光与放免的对比 3、化学发光与时间分辩荧光检测的对比 4、化学发光的突出优点
放 免
测量精度 人体伤害 有效期 较高 放射性 较短
化学发光
高 无 长
干扰因素
测试项目
较多
较少
极少
多
化学发光与时间分辨的对比
时间分辨免疫检测原理和化学发光基本一样,
只是标记物改为稀土元素,不用发光底物但需要外在的稳
定光源照射,光的波长产生stoke位移,并有一个时间滞后
以便于检测波长改变后的光子数量。 1、化学发光成本低于时间分辨荧光免疫分析 。 2、化学发光比时间分辨荧光免疫试剂盒更稳定 3、化学发光免疫分析试剂盒对对测试环境条件要求低 。
化学发光与酶免的对比
酶免原理:
1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或
抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
3.洗涤后加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物 的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深 浅刊物定性或定量分析。
化学发光免疫分析技术原理
化学发光免疫分析 (Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)是将化学发光或生物发光体系与免疫 反应相结合,用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。
化学发光是在常温下由化学反应产生的光的发射。其机制为某些化合物
(发光剂或发光底物)可以利用一个化学反应产生的能量使其产物分子或反 应中间态分子上升至电子激态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时, 以发射光子的形式释放能量(即发光)。
1.直接化学发光
A 吖啶酯发光
原理:纳米磁珠分离后的吖啶酯标记的抗原抗体复合物,在含H2O2的
强酸、强碱激发底物的作用下,快速发出可见光,通过光电倍增管进
行光子计数,相对光强度RLU与待测抗原浓度成函数关系。
特点:发光过程在 5秒内完成,激发发光程序简单,测试速度快,但
4、化学发光不需要外光源,仪器可靠性更高
化学发光与时间分辩荧光的对比
化学发光
标记物 稳定性 灵敏度
酶-发光底物两级放大 稳定性非常好 灵敏
时间分辩荧光
稀土离子,如铕 影响被标记物的生物活性与免疫活性 稍高于化学发光 酸性,易引起蛋白质变性 采用透明微量孔壁吸附,孔壁的透明度 会引起,本底干扰 新技术,不成熟 容易受内外源稀土离子的干扰 缺少部分项目。如:贫血(叶酸,铁蛋 白,维生素B12)
125I的半衰期短而导致其试剂有效期短 Nhomakorabea
标记物125I的稳定性差,导致试剂盒批间、批内的变异较大;
标准曲线有效期短,必须每次定标,造成浪费。
操作繁琐,出报告时间长。
化学发光与放免的对比表
性激素六项的检测 及临床应用
免疫学检测发展简介
免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行
检测的一种手段,由于其可以利用同位素、酶、化学
发光物质等对检测信号进行放大和显示,因此常被用
于检测蛋白质、激素等微量物质。
免疫学检测发展简介
免疫分析经历了放射免疫检验、荧光免疫检验、酶标 免疫检验等不同时期,化学发光免疫检验是免疫分析 发展的一个新阶段,它环保、快速、准确的特点已得 到人们的普遍认识。 因此化学发光免疫分析是通往免疫检验完美境界 的必经之路。
6.安全性好及使用期长:在上述优点前提下,更免除了使用放射性 物质。到目前为止,还未发现CLIA的危害性。有效期可长达1年以上, 放射免疫分析由于放射性同位素的衰变,一般有效期只有一个月,而 酶联的底物贮存性差,都无法与化学发光相比,有效期长可以提高劳 动效率,也利于推广应用。
基本性能对照表
化学发光免疫分析种类
免疫测定(immunoassay)是利用抗原体反应来测定标本中微量物质的方法。
化学发光免疫分析技术原理
1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其 免疫活性。 2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这 种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活 性。
3.洗涤后加入发光底物,酶促使发光底物发光,通过
反应体系 接近中性
不透明微量孔壁吸附, 包被技术 提高分析灵敏度,降低 本底
技术性
新技术,很成熟
干扰因素 干扰极小 测试项目 项目齐全
化学发光免疫分析的优点
1 . 灵 敏 度 高 : 这 是 CLIA 关 键 的 优 越 性 , 其 灵 敏 度 可 达 1016mol/L(RIA为10-12mol/L)。又如化学发光底物(如AMPPD)
可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏 5х105倍。
2.宽的线性动力学范围:发光强度在 4~ 6个量级之间与测定
物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度( OD 值)为2.0的范围相比,优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动 力学范围,但放射性限制了其应用。
3 .光信号持续时间长:辉光型( glow type )的 CLIA 产生的
光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。
化学发光免疫分析的优点
4 .分析方法简便快速:绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂 (或复合试剂)的一步模式。
5.结果稳定、误差小:样品系直接自己发光,不需要任何光源照射, 免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析 带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。
化学发光免疫检测的灵敏度与可测范围远远高于酶免产品,兼 具ELISA法简便的操作方法与较短的反应时间。
化学发光与酶免的对比表
酶 测量精度 人体伤害 有效期 干扰因素 测试项目 标 化学发光 定量测量 无 长 极少 多 定性/半定量测量 底物有致癌性 较短 多 少
化学发光与放免的对比
放免原理是使用具有放射性的I125作标记物,然后用测量
专用的仪器检测光子的数量,从而反算出未知抗原或 抗体的浓度。
化学发光免疫检测原理
在化学发光免疫 分析,基本原 理同酶联免疫 技术(ELISA), 常采用双抗体 夹心法、竞争
法、等反应模
式。
检测方法的比对
1、化学发光与酶免的对比 2、化学发光与放免的对比 3、化学发光与时间分辩荧光检测的对比 4、化学发光的突出优点
放 免
测量精度 人体伤害 有效期 较高 放射性 较短
化学发光
高 无 长
干扰因素
测试项目
较多
较少
极少
多
化学发光与时间分辨的对比
时间分辨免疫检测原理和化学发光基本一样,
只是标记物改为稀土元素,不用发光底物但需要外在的稳
定光源照射,光的波长产生stoke位移,并有一个时间滞后
以便于检测波长改变后的光子数量。 1、化学发光成本低于时间分辨荧光免疫分析 。 2、化学发光比时间分辨荧光免疫试剂盒更稳定 3、化学发光免疫分析试剂盒对对测试环境条件要求低 。
化学发光与酶免的对比
酶免原理:
1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或
抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
3.洗涤后加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物 的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深 浅刊物定性或定量分析。
化学发光免疫分析技术原理
化学发光免疫分析 (Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)是将化学发光或生物发光体系与免疫 反应相结合,用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。
化学发光是在常温下由化学反应产生的光的发射。其机制为某些化合物
(发光剂或发光底物)可以利用一个化学反应产生的能量使其产物分子或反 应中间态分子上升至电子激态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时, 以发射光子的形式释放能量(即发光)。
1.直接化学发光
A 吖啶酯发光
原理:纳米磁珠分离后的吖啶酯标记的抗原抗体复合物,在含H2O2的
强酸、强碱激发底物的作用下,快速发出可见光,通过光电倍增管进
行光子计数,相对光强度RLU与待测抗原浓度成函数关系。
特点:发光过程在 5秒内完成,激发发光程序简单,测试速度快,但
4、化学发光不需要外光源,仪器可靠性更高
化学发光与时间分辩荧光的对比
化学发光
标记物 稳定性 灵敏度
酶-发光底物两级放大 稳定性非常好 灵敏
时间分辩荧光
稀土离子,如铕 影响被标记物的生物活性与免疫活性 稍高于化学发光 酸性,易引起蛋白质变性 采用透明微量孔壁吸附,孔壁的透明度 会引起,本底干扰 新技术,不成熟 容易受内外源稀土离子的干扰 缺少部分项目。如:贫血(叶酸,铁蛋 白,维生素B12)