米曲霉的制备
米曲霉的研究及应用进展
⽶曲霉的研究及应⽤进展
⽶曲霉的研究及应⽤进展
摘要:介绍了⽶曲霉的⽣物学特性,并综述了⼯业上的相关应在基础相关领域、发酵产物领域、宏观诱变及微观诱变领域的研究与应⽤并提出展望。
关键词:⽶曲霉⽣物学特性⼯业应⽤
1 ⽶曲霉的⽣物学特征
⽶曲霉(Aspergillus oryzae)是⼀种好⽓性真菌,分类学归属于半知菌亚门、曲霉属。菌落⽣长快,10d直径达5~6cm,质地疏松,菌丝⼀般呈黄绿⾊,酸度较⼤的培养基上呈绿⾊,酸度较⼩的培养基上呈黄⾊,⽼化后逐渐为褐⾊。分⽣孢⼦梗⽣长在厚壁的⾜细胞上,分⽣孢⼦头呈放射形,顶囊球形或瓶形。培养适温37℃。⽶曲霉主要存在于粮⾷、发酵⾷品、腐败有机物、⼟壤等处,是我国传统酿造⾷品酱、酱油和酒类的⽣产菌种,也可⽤于⽣产各种酶制剂、有机酸、糖化饲料、益⽣素等。在众多曲霉属家族中,⽶曲霉占有着重要的地位。随着应⽤领域的蓬勃发展,⼈们对⽶曲霉的关注⽇渐增长。
2.⽶曲霉基础领域的研究
2.1 ⽶曲霉基因组的破译
⽇本研究⼈员历经四年零四个⽉时间成功的破译了⽶曲霉基因组,并于2005年12⽉在《⾃然》杂志上发表了分析结果:⽶曲霉基因组⼤约有3800万个碱基对,共有8条染⾊体,包含约1.2万个基因。这⼀成果为从微观领域研究⽶曲霉打下了⼀个良好的基础。
2.2⽶曲霉原⽣质体制备、再⽣和融合
为了更进⼀步研究⽶曲霉,制备原⽣质体就变得尤为重要。原⽣质体(Protoplast)即在⾼渗压溶液中,⽤酶法将细胞壁分解除掉,剩下由原⽣质膜包住的球状胞体。它保持了原细胞的⼀切活性。原⽣质体因去掉细胞壁屏障⽽对诱变剂的敏感性增强、变异率提⾼,⽽且表⾯易形成电极性,使不同种原⽣质之间相互易于吸引、脱⽔粘合⽽形成聚集物,因⽽原⽣质体诱变、融合是菌种选育的⼀种⾏之有效的⽅法。
米曲霉生产糖化酶工艺
米曲霉生产糖化酶工艺
1.米曲霉是一种好气性真菌,菌丝一般呈黄绿色,米曲霉的菌丝由多细胞组成,是一类产复合酶的菌株,除产蛋白酶外,还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解,提高营养价值、保健功效和消化率,广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业。
米曲霉在工业上的应用:用于发酵生产豆豉、豆酱;与黑曲霉、绿色木霉复合发酵用于酱油生产;用于饲料工业;用于酿酒制曲、生产低醇乳糖饮料。
2.葡萄糖淀粉酶又称γ一淀粉酶, 简称糖化酶,糖化酶是一种含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖和糖醛酸的糖蛋白,在工业中应用的糖化酶主要是从黑曲霉、米曲霉、根霉等丝状真菌和酵母中获得,从细菌中也分离到热稳定的糖化酶, 人的唾液、动物的胰腺中也含有糖化酶生产方法:
a.黑曲霉固体发酵法
工艺流程:试管菌种→三角瓶款曲扩大培养→帘子曲种→通风制曲→成品。
b.液体深层发酵法.
工艺流程:试管斜面种子→种子扩大培养→发酵→过滤→浓缩→干燥→粗酶制剂。
糖化酶成品提取工艺
成品糖化酶可分为液体酶和固体酶2 种, 而固体酶的制备方法又可分为盐析法、有机溶剂沉淀法和附吸法等, 采用一条合理的提取工艺, 可制备系列酶产品以满足不同行业的需求及降低成品的成本.
目前国外糖化酶生产一般采用液体深层培养, 发酵罐最大可达200m , 罐体都采用不锈钢制造, 冷却系统采用罐外冷却盘管关键阀门都采
米曲霉
1.菌种特点:
米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快,10d直径达5~6cm,质地疏松,初白色、黄色,后变为褐色至淡绿褐色。背面无色。分生孢子头放射状,一直径150~300μm,也有少数为疏松柱状。分生孢子梗2mm左右。近顶囊处直径可达12~25μm,壁薄,粗糙。顶囊近球形或烧瓶形,通常40~50μm。上覆小梗,小梗一般为单层,12~15μm,偶尔有双层,也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。分生孢子幼时洋梨形或卵圆形,长大后多变为球形或近球形,一般4.5μm,粗糙或近于光滑。(半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种)。菌落生长较快,质地疏松。初呈白色、黄色,后转黄褐色至淡绿褐色,背面无色,分布甚广,主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。会引起粮食等工农业产品霉变。米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。米曲霉
米曲霉
米曲霉是一类产复合酶的菌株,除产蛋白酶外,还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解,提高营养价值、保健功效和消化率,广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业,并已被安全地应用了1000多年。米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵
米曲霉的介绍
1.菌种特点:
米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快,10d直径达5~6cm,质地疏松,初白色、黄色,后变为褐色至淡绿褐色。背面无色。分生孢子头放射状,一直径150~300μm,也有少数为疏松柱状。分生孢子梗2mm左右。近顶囊处直径可达12~25μm,壁薄,粗糙。顶囊近球形或烧瓶形,通常40~50μm。上覆小梗,小梗一般为单层,12~15μm,偶尔有双层,也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。分生孢子幼时洋梨形或卵圆形,长大后多变为球形或近球形,一般4.5μm,粗糙或近于光滑。(半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种)。菌落生长较快,质地疏松。初呈白色、黄色,后转黄褐色至淡绿褐色,背面无色,分布甚广,主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。会引起粮食等工农业产品霉变。米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。
米曲霉
米曲霉是一类产复合酶的菌株,除产蛋白酶外,还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解,提高营养价值、保健功效和消化率,广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业,并已被安全地应用了1000多年。米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵的条件,这将有助于提高食品酿造业的生产效率和产品质量。米曲霉基因组的破译,也为研究由曲霉属真菌引起的曲霉病提供了线索。曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。
【精品】米曲霉的制备
毕业论文
课题名称米曲霉的制备
姓名学号
所在系制药与生物工程系专业年级P09生物制药指导教师职称讲师
指导教师职称
二O一二年六月八日
摘要
微生物在酱油生产制曲工艺和发酵过程中起着至关重要的作用,在高盐稀态发酵工艺过程中,培养良好的米曲霉菌种不仅可以提高酱油中总氮、氨基酸态氮含量和酱油风味,而且还可以提高原料利用率。因此米曲霉种曲培养是生产优质酱油的有效保证。本论文主要介绍米曲霉在不同阶段的扩大培养方法,包括试管菌种、锥形瓶菌种、种曲罐菌种、种曲等方面的培养方法及注意事项。米曲霉培养温度为28~32℃,培养时间为72h,米曲霉生长最旺盛作用,此时,曲料的曲酶孢子数大于8×109个/g,蛋白酶活力可达1000mg/100g以上。
关键词米曲霉;温度;时间;试管菌种;三角瓶菌种;扩大培养
目录
引言............................................. 错误!未指定书签。1菌种的种类..................................... 错误!未指定书签。
1.1米曲霉....................................... 错误!未指定书签。
1.2黑曲霉....................................... 错误!未指定书签。2菌种的选择条件................................. 错误!未指定书签。
2.1不产生黄曲霉毒素及其他真菌毒素 ............... 错误!未指定书签。
米曲霉元素原辅料及菌种工艺流程
米曲霉元素原辅料及菌种工艺流程
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米曲霉培养实验报告
米曲霉培养实验报告
一、引言
米曲霉(Aspergillus oryzae)是一种常见的真菌,广泛应用于食品工业中的米酒、酱油、米糕等发酵过程中。本实验旨在了解米曲霉的生长特性和培养条件,以便优化米曲霉的产量和品质。
二、实验方法
1. 实验材料
- 米曲霉菌种
- 米饭
- 培养基:含有葡萄糖、蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾和磷酸二钠的培养基2. 实验步骤
1. 在消毒柜中,用酒精喷雾器清洁实验台面,做好无菌操作准备;
2. 取一小块米曲霉菌种,放入无菌瓶中;
3. 将培养基加热至沸腾,然后冷却到室温;
4. 将培养基倒入无菌瓶中,摇匀;
5. 将米饭放入无菌烧杯中,加入适量的蒸馏水,煮至米饭熟烂,捣碎;
6. 将捣碎好的米饭加入培养基中,摇匀,并将培养基倒入无菌培养皿中;
7. 用无菌火针将米曲霉菌种接种在培养皿上,标注好实验日期和菌株信息;
8. 盖上培养皿盖子,放入恒温箱中,设定适宜的温度(通常为28);
9. 每隔一段时间观察培养皿中米曲霉的生长情况并进行记录。
三、实验结果
在28的恒温箱中培养了10天,观察到米曲霉开始生长。在培养皿上可以清晰
地看到米曲霉形成的白色菌丝,呈放射状向外生长。随着时间的推移,菌丝的长度逐渐增加,并覆盖了整个培养皿。同时,培养皿中出现了黑色的孢子团,表示米曲霉已经进入了繁殖阶段。
四、实验讨论
米曲霉的生长是一个动态的过程,受到温度、湿度、pH值等多个因素的影响。在本实验中,我们使用了28的恒温箱进行培养,这个温度被证明是米曲霉最适宜的生长温度。此外,我们使用了含有葡萄糖和蛋白胨等养分的培养基,为米曲霉提供了足够的养分支持其生长发育。
米曲霉
1.菌种特点:
米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快,10d直径达5~6cm,质地疏松,初白色、黄色,后变为褐色至淡绿褐色。背面无色。分生孢子头放射状,一直径150~300μm,也有少数为疏松柱状。分生孢子梗2mm左右。近顶囊处直径可达12~25μm,壁薄,粗糙。顶囊近球形或烧瓶形,通常40~50μm。上覆小梗,小梗一般为单层,12~15μm,偶尔有双层,也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。分生孢子幼时洋梨形或卵圆形,长大后多变为球形或近球形,一般4.5μm,粗糙或近于光滑。(半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种)。菌落生长较快,质地疏松。初呈白色、黄色,后转黄褐色至淡绿褐色,背面无色,分布甚广,主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。会引起粮食等工农业产品霉变。米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。米曲霉
米曲霉
米曲霉是一类产复合酶的菌株,除产蛋白酶外,还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解,提高营养价值、保健功效和消化率,广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业,并已被安全地应用了1000多年。米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵的条件,这将有助于提高食品酿造业的生产效率和产品质量。米曲霉基因组的破译,也为研究由曲霉属真菌引起的曲霉病提供了线索。曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。
米曲霉的介绍
1.菌种特点:
米曲霉( Asp.oryzae) 属于真菌菌落生长快,10d直径达5~6cm,质地疏松,初白色、黄色,后变为褐色至淡绿褐色。背面无色。分生孢子头放射状,一直径150~300μm,也有少数为疏松柱状。分生孢子梗2mm左右。近顶囊处直径可达12~25μm,壁薄,粗糙。顶囊近球形或烧瓶形,通常40~50μm。上覆小梗,小梗一般为单层,12~15μm,偶尔有双层,也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。分生孢子幼时洋梨形或卵圆形,长大后多变为球形或近球形,一般4.5μm,粗糙或近于光滑。(半知菌亚门丝孢钢丝孢目从梗孢科曲霉属真菌中的一个常见种)。菌落生长较快,质地疏松。初呈白色、黄色,后转黄褐色至淡绿褐色,背面无色,分布甚广,主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和曲酸等。会引起粮食等工农业产品霉变。米曲霉(Aspergillus oryzae)具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,其稳定性高,能耐受较高的温度,广泛地应用于食品、医药及饲料等工业中。米曲霉也是美国食品与药物管理局和美国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌种之一。
米曲霉
米曲霉是一类产复合酶的菌株,除产蛋白酶外,还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。在淀粉酶的作用下,将原料中的直链、支链淀粉降解为糊精及各种低分子糖类,如麦芽糖、葡萄糖等;在蛋白酶的作用下,将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸,而且可以使辅料中粗纤维、植酸等难吸收的物质降解,提高营养价值、保健功效和消化率,广泛应用于食品、饲料、生产曲酸、酿酒等发酵工业,并已被安全地应用了1000多年。米曲霉是理想的生产大肠杆菌不能表达的真核生物活性蛋白的载体。米曲霉基因组所包含的信息可以用来寻找最适合米曲霉发酵
纯种米曲霉发酵制备阳江豆豉及其抗氧化活性研究
纯种米曲霉发酵制备阳江豆豉及其抗氧化活性研究摘要:
豆豉是一种常见的调味品,具有丰富的营养价值和独特的风味,因此备受消费者青睐。本研究旨在采用纯种米曲霉进行豆豉的发酵制备,并评价其抗氧化活性。结果表明,经过
米曲霉的发酵处理后,豆豉中的总酚含量和抗氧化酶活力均得到提高,同时在抗氧化实验
中也观察到了显著的抗氧化效果。纯种米曲霉发酵制备的阳江豆豉具有显著的抗氧化活性,可为人们提供更多健康营养的食品选择。
关键词:米曲霉;阳江豆豉;抗氧化活性;发酵;营养价值
引言
豆豉是一种由黄豆经过发酵制作而成的传统食品,在中国饮食中有着悠久的历史。豆
豉富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等营养物质,具有增加食欲、促进消化、平肝潜阳、解毒明目等功效,是人们餐桌上不可或缺的佳品。豆豉还含有丰富的天然
抗氧化物质,具有一定的抗氧化活性,有助于预防氧化应激相关的疾病,如心血管疾病、
癌症等。
材料与方法
1. 实验材料
阳江豆豉:购自当地市场,经过初步处理后,用于发酵制备。
纯种米曲霉菌种:购自当地微生物学研究所。
其他试剂:包括乙醇、正丙醇、硝酸银、H2O2等,均为分析纯。
2. 实验方法
2.1 米曲霉的培养和活化
将纯种米曲霉菌种接种于琼脂培养基中,置于恒温培养箱中37℃培养48小时,待成
熟后收集并活化备用。
2.2 豆豉的发酵
将清洗干净的阳江豆豉放入发酵罐中,加入适量的水和活化后的米曲霉菌种,保持适
宜的温湿度条件,进行发酵处理。
2.3 抗氧化活性的测定
采用双酚A方法测定豆豉中的总酚含量,以过氧化氢为底物测定豆豉中的过氧化物酶(POD)活力,同时采用清除DPPH自由基的方法测定豆豉的抗氧化活性。
米曲霉培养及蛋白酶分析
米曲霉培养及蛋白酶的分析
•实验目的及要求:通过固态三角瓶培养米曲霉,掌握固态培养微生物原理和技术,并掌握蛋白酶活性的分析方法。
•实验原理:
固态培养方法( solid state cultivation ):主要有散曲法和块曲法。部分黄酒用曲,红酒及酱油米曲霉培养属散曲法,而黄酒用曲及白酒用曲一般采用块曲法。
固态制曲设备:实验室主要采用三角瓶或茄子瓶培养;种子扩大培养可将蒸热的物料置于竹匾中,接种后在温度和湿度都有控制的培养室进行培养;工业上目前主要是厚层通风池制曲;转式圆盘式固态培养装置正在试验推广之中。
固态培养微生物,主要用于霉菌的培养,但细菌和酵母也可采用此法。其主要优点是节能,无废水污染。单位体积的生产效率教高。
米曲霉( Aspergillus oryzae )属于曲霉菌( Aspergillus )。菌落初为白色,黄色,既而变为黄褐色至淡绿褐色,反面无色。
•实验过程:
•米曲霉菌种的纯化,制成斜面,将斜面菌种接入 250ml 三角瓶培养成种曲,再将种曲扩大培养( 500ml )三角瓶。培养物经过水溶液萃取,制得粗酶制剂,取粗酶制剂进行蛋白酶活性测定。
•米曲霉培养:本实验分为斜面培养和三角瓶培养两个阶段。三角瓶培养物在工厂中作为一级种子。试管斜面培养基:豆饼浸出汁: 100 克豆饼,加水 500ml ,浸泡 4 小时,煮沸 3-4 小时,纱布自然过滤,取液,调整至 5 波美度。没 100ml 豆汁加入可溶性淀粉 2 克,磷酸二氢钾 0.1 克,硫酸镁 0.05 克,硫酸铵 0.05 克,琼脂 2 克,自然 pH 。
米曲霉的制作方法
米曲霉的制作方法
米曲霉(米麴菌,学名:Aspergillus oryzae)是一种常用的食用发酵菌,是由霉菌属中的曲麸霉(Aspergillus)所产生的。它在亚洲被广泛应用于食品发酵工业中,如日本的酱油、味噌、酒类等制作过程中常用到米曲霉。本文将详细介绍米曲霉的制作方法。
1. 材料准备
制作米曲霉所需要的材料非常简单,仅需准备以下两种原料:
•糯米:500克
•米曲菌种:适量(可在市场上购买)
2. 米曲霉的制作步骤
下面将详细介绍米曲霉的制作步骤:
2.1 清洗糯米
将糯米放入容器中,用清水漂洗数次,直至水变得清澈。然后将水倒掉,将洗净的糯米沥干。
2.2 蒸煮糯米
将清洗干净的糯米放入蒸锅中,加水至淹没糯米,然后用中小火蒸煮糯米约30分钟,直至糯米熟透。蒸煮好的糯米应具有一定的湿度,但不要过于湿润。
2.3 冷却糯米
将蒸煮好的糯米取出,放置在通风干燥的地方,让其自然冷却至室温。冷却后的糯米应保持一定的湿度,以利于米曲霉的培养。
2.4 撒菌种
将制作好的糯米均匀地撒上米曲菌种。菌种的用量要适中,一般来说,以每500克糯米搭配5克米曲菌种为宜。将撒好菌种的糯米放入干净的容器中,用保鲜膜或湿布盖上。
2.5 培养米曲霉
将容器放置在通风良好的环境中,温度控制在25-30摄氏度之间。每天需要将盖子揭开,用干净的手或餐具翻动糯米,以促进霉菌的生长和均匀培养。培养的时间一般在3-4天内,待糯米表面长满白色的霉菌丝,即可完成制作。
3. 注意事项
在制作米曲霉的过程中,需要注意以下几点:
•避免受到外界的污染,保持操作环境的卫生。
米曲霉培养过程
米曲霉(学名:Aspergillus oryzae)是一种常见的真菌,被广泛应用于食品工业和酿造业中。它是一种产生酶类的真菌,具有很高的生物活性和营养价值。米曲霉通过发酵过程产生的酶可以促进食品的成熟、改善口感和增加营养价值。下面,我将为您详细介绍米曲霉的培养过程。
1. 培养基准备
米曲霉的培养基需要提供适宜的环境条件来支持其生长和繁殖。通常,米曲霉的培养基由以下成分组成:
- 淀粉:提供碳源,促进生长。
- 氮源:例如蛋白胨或氨基酸,用于合成蛋白质。
- 矿物质:提供微量元素,如钙、镁、铁等。
- 维生素:例如硫胺素、核黄素等,促进生长和代谢。
- pH缓冲剂:用于调节培养基的酸碱度。
2. 消毒处理
为了防止其他细菌和真菌的污染,培养基需要进行消毒处理。一般的方法是将培养基装入试管或烧杯中,用自闭式高压锅或高压蒸汽灭菌器进行高温高压处理,通常在121摄氏度下加压15-20分钟。
3. 接种
消毒后的培养基降温到适宜的温度(一般为30-35摄氏度),接种米曲霉孢子或菌丝。可以通过将米曲霉孢子均匀撒播在培养基表面,或者在含有米曲霉的液体培养基中进行接种。
4. 培养条件
米曲霉的培养需要提供适宜的温度、湿度和通气条件。一般来说,温度保持在28-32摄氏度之间,湿度控制在80-90%左右,通气量要适度,避免过大或过小。
5. 培养时间
米曲霉的培养时间因具体需求而异。一般情况下,培养时间为
24-48小时,但在某些特殊情况下,可能需要更长的培养时间。
6. 酶提取
当米曲霉生长到一定程度时,可以收获培养液进行酶提取。提取酶的方法有多种,可以通过离心、过滤和超声波处理等方式将酶从培养液中分离出来。
米曲霉的应用研究进展
内容摘要
蛋白质是生物体功能的主要执行者,因此蛋白质组学研究对于理解米曲霉的 生物学特性和发酵过程具有关键作用。通过比较不同发酵条件下的蛋白质表达谱, 可以发现与特定发酵过程相关的关键蛋白,从而为优化发酵过程提供依据。例如, 一项研究发现,在特定发酵条件下,与糖代谢和细胞壁合成相关的蛋白质表达水 平上调,这可能反映了米曲霉在特定环境中的生存策略。
1、全转录组数据统计
1、全转录组数据统计
通过对米曲霉RIB40转录组进行RNASeq测序,得到了高质量的测序数据。实 验中获得了每个样品的大量读数,其中大部分读数的长度超过了200 nt,适用于 进一步的分析。
2、基因表达谱分析
2、基因表达谱分析
利用HTSeq工具对每个样品的基因表达量进行了计算,得到了基因表达谱数据。 通过对基因表达谱数据的分析,发现不同生长阶段和环境因素下,米曲霉RIB40 的基因表达模式存在明显的差异。同时,通过对比先前的研究,发现本实验的结 果与先前报道的结果基本一致,但本实验的基因表达数据更加丰富和精准。
内容摘要
近年来,通过全基因组测序和基因表达谱分析,对米曲霉的基因功能和表达 调控有了更深入的了解。例如,一项研究发现,米曲霉中一组与氮代谢相关的基 因在特定发酵条件下被显著上调表达,这可能与米曲霉在缺氮环境中的生存策略 有关。此外,米曲霉的基因组中还包含大量与环境适应性和次生代谢物合成相关 的基因,这些基因的功能研究和调控机制对于提高米曲霉发酵生产的效率和产物 的质量具有重要意义。
麦麸曲制作方法
麦麸曲是一种传统的中药制剂,它是由麦麸、米曲霉或其他有益微生物发酵制成的。在中医中,麦麸曲被认为有健脾和胃、消积导滞的功效,常用于治疗消化不良、食积、腹泻等症状。以下是一种简化的麦麸曲制作方法:
材料
麦麸:1000克
米曲霉菌种:适量(通常可以从中药店购买或自行培养)
温水:适量
制作步骤
1. 准备菌种:如果使用市售的米曲霉菌种,需要按照说明书或供应商的指导进行活化。如果自行培养,需要先培养出米曲霉。
2. 准备麦麸:将麦麸清洗干净,去除杂质,并尽量晾干。
3. 混合:将活化好的米曲霉菌种与麦麸混合均匀。
4. 加水:向混合好的麦麸中加入适量的温水,搅拌均匀,让麦麸吸收水分。
5. 发酵:将湿润的麦麸放入容器中,保持适宜的温度和湿度,让米曲霉生长发酵。通常发酵温度控制在25-30℃,湿度保持在60%-70%。发酵时间根据温度和菌种的活性而定,一般需要3-7天。
6. 翻曲:在发酵过程中,需要定期翻曲,以确保麦麸均匀发酵。
7. 干燥:发酵完成后,将麦麸放在通风良好的地方进行干燥,直到达到一定的干燥程度。
8. 储存:干燥后的麦麸曲应该放在干燥、阴凉、通风的地方储存,以防霉变。以上步骤是一个大致的指导,具体的制作方法可能因地区、菌种和目的而异。在制作麦麸曲时,需要严格控制卫生条件,确保发酵过程中的无菌操作,以避免污
染和霉变。此外,发酵过程中的温度和湿度控制非常关键,需要根据实际的菌种特性和环境条件进行调整。
由于中药制剂的制作涉及到对人体健康的影响,因此在实际操作前,建议咨询有经验的中药师或医生,以确保制作过程的正确性和安全性。
米曲霉培养过程
米曲霉(学名:Aspergillus oryzae)是一种重要的真菌,被广泛应用于食品发酵和酿造工业中。它具有高产酶、高产代谢产物的特点,是制作酱油、酒类、味精等食品和调味品的重要发酵微生物。米曲霉培养过程是一个多步骤的复杂过程,涉及到培养基的选择、发酵条件的控制、以及后续的分离和提取等环节。下面将详细介绍米曲霉培养的全过程。
**1. 前处理**
米曲霉的培养从选种开始,选择优质的母菌进行培养。首先,将所需的米曲霉母菌接种到琼脂平板上,经过培养后挑选出生长良好的菌落。然后,将这些菌落移植到培养基中进行扩大培养,以备发酵使用。
**2. 培养基的选择**
米曲霉的培养基主要包括碳源、氮源、矿盐和其他添加剂。一般而言,米曲霉最适宜的碳源为米糠、小麦麸皮等,氮源可以选择大豆粉、蛋白酶胨等,矿盐可以添加适量的钙、镁、铁等微量元素。通过合理配比这些成分,可以获得适宜的培养基,为米曲霉的生长提供营养。
**3. 发酵条件的控制**
米曲霉的培养需要控制一系列发酵条件,包括温度、pH、通气量等。一般而言,米曲霉的生长适宜温度在25-32摄氏度之间,pH值在5.0-6.0之间。此外,适当的通气量也是确保发酵顺利进行的重要条件之一。在实际生产中,通常会采用发酵罐等设备,通过控制发酵罐内部的温度、pH值和通气量等参数,来满足米曲霉生长的需要。
**4. 发酵过程**
米曲霉的发酵过程通常分为固态发酵和液态发酵两种方式。在固态发酵中,将培养基和米曲霉孢子混合均匀,装入容器中静置发酵。在液态发酵中,将培养基和米曲霉孢子悬浮在液体培养基中,通过搅拌或者通气等方式进行发酵。发酵过程中,米曲霉通过代谢产生各种酶和代谢产物,完成对培养基的利用,达到生长繁殖的目的。
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毕业论文
课题名称米曲霉的制备
姓名学号
所在系制药与生物工程系专业年级P09生物制药指导教师职称讲师指导教师职称
二O一二年六月八日
摘要
微生物在酱油生产制曲工艺和发酵过程中起着至关重要的作用,在高盐稀态发酵工艺过程中,培养良好的米曲霉菌种不仅可以提高酱油中总氮、氨基酸态氮含量和酱油风味,而且还可以提高原料利用率。因此米曲霉种曲培养是生产优质酱油的有效保证。本论文主要介绍米曲霉在不同阶段的扩大培养方法,包括试管菌种、锥形瓶菌种、种曲罐菌种、种曲等方面的培养方法及注意事项。米曲霉培养温度为28~32℃,培养时间为72h,米曲霉生长最旺盛作用,此时,曲料的曲酶孢子数大于8×109个/g,蛋白酶活力可达1000mg/100g以上。
关键词米曲霉;温度;时间;试管菌种;三角瓶菌种;扩大培养
目录
引言 (1)
1 菌种的种类 (1)
1.1 米曲霉 (1)
1.2 黑曲霉 (1)
2 菌种的选择条件 (1)
2.1 不产生黄曲霉毒素及其他真菌毒素 (1)
2.2 酶系全、酶活力高 (2)
2.3 对环境适应能力强,生长繁殖快 (2)
2.4 酿制的酱油风味好 (2)
3试管实验 (2)
3.1 灭菌 (2)
3.2 培养基的制备 (2)
3.3 培养基的鉴别 (2)
3.4 接种培养 (3)
3.5 菌种的留选 (3)
4 锥形瓶培养 (3)
4.1 原料配比 (3)
4.2 接种培养 (3)
5种曲制备 (3)
5.1 种曲原料要求 (3)
5.2 做料前检查事项 (4)
5.3 做料 (4)
5.4 蒸料 (4)
5.5 抽真空 (4)
5.6 降温 (4)
5.7 接种 (5)
5.8 自动培养 (5)
5.9 开罐 (5)
5.10操作过程中应注意的问题 (5)
6种曲的质量标准 (6)
6.1感官特性 (6)
6.1.1外观 (6)
6.1.2香气 (6)
6.1.3手感 (6)
6.2孢子数的测定 (6)
6.2.1样品的稀释 (6)
6.2.2制片 (7)
6.2.3观察计数 (7)
6.2.4注意事项 (7)
参考文献 (9)
谢辞 (10)
引言
米曲霉是一类产复合酶的菌株,半知菌亚门,丝孢纲,属真菌中的一种常见种。菌落生长较快,质地疏松,初成白色、黄色,后转黄褐色至淡绿褐色,背面无色,分布甚广,主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。米曲霉具有丰富的蛋白酶系,能产生酸性、中性和碱性蛋白酶,广泛应用于食品、酿酒等发酵工业中,培养良好的米曲霉菌种不仅可以使酱油产生浓郁的酱香及酯香,提高酱油的的风味而且还可以提高其原料利用率。因此培养优良的米曲霉种曲是生产优质酱油的重要保障。
1 菌种的种类
1.1米曲霉
米曲霉沪3.042菌株是目前国内酱油生产厂家普遍使用的优良菌,其来源是福建省永春县酱园中筛选出来米曲霉,中国科学院编号为3.863菌株,后经上海酿造科学研究所进一步诱变筛选获得沪酿3.042,中科院保藏好3.951。该菌株分生孢子大,数量多,生长繁殖速度快,对杂菌抵抗力强,易制曲,制曲时间为48h,其蛋白酶活力比原处发的菌株提高30%以上。
1.2黑曲霉
黑曲霉AS3.350与米曲霉沪酿3.042混合制曲,对提高蛋白质原料的利用率以及产品风味均有一定的效果。
2菌种的选择条件
2.1 不产生黄曲霉毒素及其他真菌毒素
目前国内外生产中应用的米曲霉、酱油米曲霉、溜曲霉等菌株,虽然属于黄曲霉菌群,但均未发现黄曲霉素,因而是安全的。
2.2酶系全、酶活力高
尤其是蛋白酶活力要求高。酱油的成分绝大部分来自制曲过程中微生物分泌的多种酶类对原料的分解,除蛋白酶、淀粉酶等酶系以外,还有谷氨酰胺酶、脂肪酶和植物组织分解酶(包括果胶酶、纤维素酶、、半纤维素酶)等,当前国内普遍推广的米曲霉沪酿3.042,酶系比较全,酶活力较高,适于酿造酱油,但其酸性蛋白酶及纤维素酶活力不高。因此,将其和酸性蛋白酶活力高的黑曲霉混合制曲发酵,能够明显的提高原料的利用率。
2.3 对环境适应能力强,生长繁殖快
这样的菌株生长适应期短,孢子萌发快,能迅速居于生长优势地位,抑制杂菌的生长。沪酿3.042米曲霉十几年来在酿造工业一直保持着生命力,最主要原因就在于它对环境适应性强,制曲管理容易。
2.4酿制的酱油风味好
优良的菌株不仅要求无毒性、酶系全,酶活力高、生长快、制曲容易,而且酿造出来的酱油风味必须良好,否则就不适用。
3试管实验
3.1灭菌
凡用于菌种培养的皿具要彻底清洗和灭菌,试管灭菌前需要配上棉塞并用防潮纸包扎管口。
3.2培养基的制备
试管菌种用土豆培养基(配制方法:将300g去皮马铃薯切块加1000ml蒸馏水煮沸10~20min再用纱布过滤,滤液补加蒸馏水至1000ml再加20g葡萄糖和20g琼脂,加热溶化分装后,在121℃的条件下灭菌20分钟)。
3.3培养基的鉴别
把新配制并经灭菌的斜面菌种于25~30℃条件下培养3~4天,然后检查确保无污染方可使用。
3.4接种培养
把在无菌条件下移接的米曲霉斜面菌种于25~30℃条件下培养72h待菌种发育成熟后方可使用。
3.5菌种的留选
为使菌种保持良好特性应定期做好分纯工作宜半年进行一次留选产生性能好的菌株。
4锥形瓶培养
4.1原料配比
锥形瓶种培养基每瓶采用麸皮20g面粉4g经混合后,拌入20ml清水,充分拌匀装入预先洗涤,干燥配制好棉塞及经1kg/c㎡蒸汽压、灭菌30min的300ml锥形瓶中装瓶量及料厚1cm为准。
4.2接种培养
菌种培养过程,摇两次瓶,首次在曲料开始发白结块时(约20小时)进行,相隔4-6h 当曲料再行结块,则进行第二次摇瓶,经过两天培养后把三角瓶轻轻倒置过来(也可不倒置)继续培养1天,全部长满黄绿色孢子米曲霉发育成熟即可使用,或4℃冰箱待用。
5种曲制备
5.1种曲原料要求
制种曲是为了培养优良的种子,原料必须适应曲霉菌旺盛繁殖的需要。曲霉菌繁殖时需要大量糖分,而豆粕含淀粉较少,因此在生产加工时,在加入豆粕的同时还要加入一定量的面粉或炒麦。
为了使曲霉菌繁殖旺盛,大量着生孢子,保持曲料松散和空气流通是很必要的,炒麦或麸皮过细会影响通风,应时刻注意曲料的生长情况,随时开风机看曲料是否发白结块,进行翻曲。