秋水仙提取工艺的研究
HPLC法测定秋水仙药材中秋水仙碱的含量
・
药 物 研 究
Ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ
１ ０・
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｊ Ｏ Ｕ １ Ｔ Ｉ ａ ］ｏ ｆ ｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｍｅ ｄ ｉ ｅ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ ｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｙ
为４ ． ５ ８ ％。
任公司 、新疆华康药业股份有限公司提供。
２ 方法 与结果
２ ． １ 秋水仙提取分离
取秋水仙粉末 （ 过 ３号筛 ）２ ｇ ，精
２ ． ２ ． ９ 专 属性试验
将 制得 的供试品溶液 、空 白溶液和 秋
密称定 ，置具 塞锥形 瓶 中 ，精密加 入 ０ ． ０ ３ ｍｏ ｌ ／ Ｌ的盐 酸 乙 醇溶液 （ ２ ． ７ —１ ０ ｏ ）２ ０ ｍ ｌ ，振 荡 １ ５ ｍ ｉ ｎ ，放置 ２ ４ ｈ ，滤 过 ，
５次 ，结果 秋水 仙 峰面 积 的 Ｒ Ｓ Ｄ值为 ０ ． ５ ６ ％ 。结果 表 明 ， 供试 品溶液室温下 ２ ４ ｈ内稳定。 ２ ． ２ ． ８ 加样 回收试验 精密称取 已测定 的秋水仙药材供 试
物制品检定 所） 。 甲醇为色谱纯 ，水 为去 离子水 ，其余试剂 均为分析纯。１ Ｏ批秋水仙 Ｃ ｏ ｌ ｃ ｈ ｉ ｃ ｕ ｍ ａ ｕ ｔ ｕ ｍ ｎ ａ ｌ ｅ Ｌ 供试 品药
材分别从伊朗 、巴基 斯坦进 口，由新 疆维吾 尔药业 有 限责
品６ 份 ，每份 ０ ． ５ ｇ ，另取 ０ ． ２ ４ ６ ８ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ 秋水 仙碱 对照 品溶
液ｌ ｍ ｌ ，因所用秋 水仙 对 照品含量 为 ９ ３ ． ０ ％ ，实 际加 入量
为０ ． ２ ２ ９ ５ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ ，按 供试 品 溶液制 备 方法 同法 操作 ，进样 量１ ０ 。结 果 秋 水 仙 碱 平 均 回 收 率 为 １ ０ ３ ． ５ ７ ％ ，Ｒ Ｓ Ｄ
从百合中提取分离秋水仙素的研究进展
从百合中提取分离秋水仙素的研究进展应化1班U202010305 杨杰摘要：秋水仙素是从百合科植物秋水仙球茎中提掏出的一种天然生物碱，其代谢产物为去甲秋水仙素，为高效抗痛风药，临床应用已有200年历史[1]，用于医治关节疼痛和痛风。
目前，秋水仙素及其衍生物除作为抗痛风、抗肝炎、抗肿瘤等新药外[2]，在农业培育及生物研究中也有较多的应用。
从百合中提取分离秋水仙素的方式有：有机溶剂萃取法、回流提取法、超临界二氧化碳流体萃取法、超声波提取法等。
本文就以上方式进行了较为详细的讨论。
关键词：百合；秋水仙素；提取分离方式1.百合及秋水仙素的简介1.1百合简介：百合，是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)所有种的总称,是连年生草本植物,大多都具有根状茎、块茎或是鳞茎,少数种为乔木、半灌木或灌木[3]。
要紧散布在亚洲东部、欧洲、北美洲等北半球温带地域。
全世界已发觉有百多个品种，中国是其最要紧的起源地。
贺世洪等[4]利用极谱法,采纳二阶导数直接测定了百合中秋水仙碱的含量。
1.2 秋水仙素简介：秋水仙素，又名秋水仙碱，是一种生物碱，因最初从百合科植物秋水仙中提掏出来，故名，结构式如图1。
纯秋水仙素呈黄色针状结晶，熔点157℃。
易溶于水、乙醇和氯仿。
味苦，有剧毒。
秋水仙素能抑制有丝割裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在割裂中期[5]。
图1 秋水仙素的结构式1.2.1.秋水仙素在医学上的应用1）秋水仙素对原发性痛风[6]有特异作用，可在12～24h内减轻炎症并迅速止痛。
2）秋水仙素是抑制细胞有丝割裂的一个典型代表，可抑制DNA的合成。
由于秋水仙素能抑制癌细胞的增加，因此临床上普遍用于医治癌症，专门对乳腺癌疗效明显，对皮肤癌、肝癌、白血病和何杰金氏病等亦有必然作用。
1.2.2 秋水仙素在科研中的应用秋水仙素具有独特的性质，能阻碍细胞割裂中纺锤体的形成，故可使植物细胞染色体倍增。
因此，秋水仙素在农业上被普遍用于制备有二倍染色体的三倍体、四倍体种子。
正交试验法秋水仙碱滴丸工艺研究
公司 ） ， 甘油（ 南 京 中恒 化 工材料 有 限公 司 ） ， 乙醇（ 石 家庄 新宇 三 阳实业 有 限公
司） ， 均 为药 用 规格 。
１ ． ２ 仪 器
显达 到滴 丸剂 速效 的 目的 ， 故采 用聚 乙二 醇６ ０ ０ ０ ￣为 基质 ； 选 择二 甲硅 油作 冷
却剂 所制成 的滴丸 外形 圆整 ， 光滑， 不拖尾 ， 且 无气泡 产生 ， 圆整 度最好 ， 冷 却剂 与液 滴 比重相 近 ， 以利逐 渐下沉 及 凝 固。 ４ ． ２ 由本 文结果 可见 ， 秋 水仙 碱与 聚 乙二醇 ６ ０ ０ ０ 以１ ： １ ０ （ 质量 比） 配 比加 热
Ａ＞Ｃ。
４讨 论 ４ ． １ 本 文将 不 同的基质 与药物 按 比例 混溶 ， 滴 人８ ０ ｃ ｍ长的不 同种 类的冷 却 剂中， 观 察滴丸 的混合 状况及 成型情 况 ， 以滴制 的难易 程度 、 丸形 圆整度及 成型
１ ． １ 材 料
秋 水仙碱 （ 自制 ） ， 聚 乙二醇６ ０ ０ ０ 、 聚 乙二醇４ ０ ０ ０ （ ｒ ＇ － 东汕 头市西 陇化 工厂 ） ，
时滴 丸下沉 无气泡 ， 得 到的滴丸 硬度好 ， 表 面光滑 。 因此选择 二 甲硅 油作为 冷却
剂。
２ ４ 滴制 条件 的筛 选
《 中国药典》 。 作 为抗痛 风药 ， 秋水 仙碱 还有 抗肿瘤 作用 ， 可用 于乳腺癌 、 肺癌、 胃 癌、 皮肤 癌及慢 性粒 细胞 白血病 ， 但 由于毒 性大 ， 临床应 用受 到限制 。 此外 ， 秋 水 仙碱 在 治疗 晚期血 吸虫病 、 系统性 红斑 狼疮血 管炎 、 腰 椎 间盘 突 出症等 方面 亦 有 一定 作用 。 目前临床 常用 制剂有 秋水仙 碱 片 ， 主 要治疗 痛 风性关 节炎 的急性
苏润江片中秋水仙的醇提取工艺研究
（、 ） ９９ （ 、、 ） ６ ６６
（ ．、 ．） １５ １５ （ 、 、） １１ １
７ ０ ７ ０ ７ ０
素考察 ， 滤液定容 至 １０ ｌ ０ ｍ 测定秋 水仙总碱含 量 ， 果见表 结
５表 ６ 表 ７ 表 ８ 、 、 、 。
病 、 风湿性关节炎 、 类 坐骨神 经痛 等症 的传 统古方 。应用现
代 制 药 技 术 和 检测 手 段 ， 过 多次 药 效 学 试 验 筛 选 和 临 床 经 验 证 ， 以新 疆 特 色 药 材 为 主 而 制 成 的具 有 调 节 异 常 黏 液 并 质 、 气通 络 、 肿 止 痛 等 多 种 功 能 的 片 剂 。 散 消 ｌ 实 验 材 料 与 仪 器
度 、 醇 用 量 、 取 时 问进 行 考 察 ， 秋 水 仙 总 碱 含 量 为 指 乙 提 以 标评价 ， 选最佳提取条件 。 筛
２ ３ ４ ２ ３ ４
表 ｌ 提 取次 数 的 单 因 素 考 察
ｌ ８
３
７ ０
２１１ 秋水仙总碱 测定 ： 中 国药 典）ｏｏ ．． 照《 ２ｏ 版二部 ， 水 秋
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Ｏ． ５ ９ １５ Ｏ． ６ ４ １ｏ ０． ８ ８ １ １
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Ｏ． Ｏ． ３ ｌ ９ Ｏ
ｌ ｌ Ｏ
提 取 次数 秋 水 仙 总 碱 （ 收度 ） 吸
１次
维普资讯
超声波辅助提取百合秋水仙碱工艺优化
文献综述
百合属植物中秋水仙碱的研究已有一定历史，但现有的提取方法大多存在步 骤繁琐、提取效率不高等问题。此外，不同种质资源中秋水仙碱的含量存在差异， 因此优化提取方法对提高产率和纯度具有重要意义。同时，建立简便、准确的含 量测定方法对百合各株系中秋水仙碱的进一步研究具有指导作用。
实验设计与材料选择
本实验选取了不同种质的百合各株系为研究对象，采用溶剂萃取法进行秋水 仙碱的提取。通过单因素和正交实验，探讨了溶剂浓度、料液比、提取时间等影 响因素，确定了最佳提取条件。此外，为了确保实验结果的可靠性，本实验还采 用了高效液相色谱法（HPLC）对秋水仙碱的含量进行测定。
实验结果及分析
通过对比不同提取方法，我们发现采用优化后的溶剂萃取法可以有效提高秋 水仙碱的提取效率。此外，HPLC法测定秋水仙碱的含量具有简便、快速、准确等 优点，适用于百合各株系中秋水仙碱含量的测定。实验结果表明，不同种质资源 中秋水仙碱的含量存在差异，优化提取方法可有效提高其产率和纯度。
2、通过优化提取条件，可得到高稳定性和高重复性的黑豆皮色素提取物， 有利于工业化生产。
缺点： 1、对设备要求较高，需要超声波清洗器等设备辅助提取过程。 2、在某些条件下，超声波的作用可能会对黑豆皮造成一定的破坏，影响产 品品质。
结论
本次演示通过优化超声波辅助提取黑豆皮色素工艺，得到了高效率、高稳定 性、高重复性的提取物。然而，仍需进一步研究不同条件对黑豆皮色素提取效果 的影响机制，以及超声波作用对黑豆皮造成的破坏程度。在此基础上，可尝试采 用其他新型技术提高黑豆皮色素的提取效果，为工业化生产提供更多可行性方案。
为百合资源的充分利用提供依据。同时，还可以结合其他现代分离技术，对 百合中秋水仙碱进行深入研究，为其开发利用提供更多有价值的信息。
秋水仙碱检测方法
实施例1取秋水仙鳞茎细粉10Kg，加入pH=10的氨水溶液中浸泡过夜，烘干，置于CO2超临界萃取装置中超临界萃取，CO2流量为1ml/min/g生药，选用90%乙醇水溶液为夹带剂，流量为0.1ml/min/g生药，萃取温度20℃，压力10MPa，萃取时间0.5h；萃取物加入2%的盐酸水溶液溶解，滤过，滤液加入三氯甲烷萃取，取下层液，调节pH至13，加入三氯甲烷萃取，取三氯甲烷层，通过AB-8型大孔吸附树脂柱分离，以1%乙酸水溶液为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，浓缩，加入丙酮重结晶，洗涤、干燥即得秋水仙碱201mg，经HPLC检测，其纯度为94.3%。
实施例2取秋水仙鳞茎细粉10Kg，加入pH=14的三乙胺水溶液中浸泡过夜，烘干，置于CO2超临界萃取装置中超临界萃取，CO2流量为5ml/min/g生药，选用90%乙醇水溶液为夹带剂，流量为0.8ml/min/g生药，萃取温度80℃，压力30MPa，萃取时间4h；萃取物加入2%的盐酸水溶液溶解，滤过，滤液加入三氯甲烷萃取，取下层液，调节pH至13，加入三氯甲烷萃取，取三氯甲烷层，通过H-103型大孔吸附树脂柱分离，以5%盐酸水溶液为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，浓缩，加入丙酮重结晶，洗涤、干燥即得秋水仙碱238mg，经HPLC检测，其纯度为90.4%。
实施例3取秋水仙鳞茎细粉10Kg，加入pH=12的三乙胺水溶液中浸泡过夜，烘干，置于CO2超临界萃取装置中超临界萃取，CO2流量为2ml/min/g生药，选用90%乙醇水溶液为夹带剂，流量为0.4ml/min/g生药，萃取温度40℃，压力20MPa，萃取时间2h；萃取物加入2%的盐酸水溶液溶解，滤过，滤液加入三氯甲烷萃取，取下层液，调节pH至13，加入三氯甲烷萃取，取三氯甲烷层，通过D-101型大孔吸附树脂柱分离，以2%盐酸水溶液为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，浓缩，加入丙酮重结晶，洗涤、干燥即得秋水仙碱222mg，经HPLC检测，其纯度为96.2%。
秋水仙碱的提取纯化
前言：生物碱一般是指来源于植物界的一类含氮有机化合物，广泛存在于自然界，大多具有较复杂的氮杂环结构，并具有生理活性和碱性，是许多药用植物的有效成分，目前用于临床的生物碱药品已达80种之多，相当多的生物碱具有抗肿瘤、低毒性和低成本的特性。
生物碱在植物界分布较广，但主要分布在高等植物中，尤其是双子叶植物中的毛莨科、防己科、罂粟科、茄科、夹竹桃科、芸香科、豆科等100多科的植物中。
单子叶植物中分布较少，裸子植物中更少，低等植物中的蕨类及菌类只有极个别的植物中存在生物碱。
生物碱大多为结晶型固体，只有少数是非结晶型的粉末，一般是无色或白色的化合物，只有少数有色，多具苦味，一般无挥发性，少数有挥发性。
秋水仙碱的提取及分离1.秋水仙简介及民间药用情况秋水仙是百合科秋水仙属植物，拉丁名：Colchicum autumnale，多年生草本球根药用花卉，有单瓣和重瓣不同品种。
原产于欧洲中部和南部及非洲北部，它的球茎是一个古老的草药，称为“秋水仙”，传统上用于治疗痛风，植株高10厘米左右，8～10月开花。
花蕾呈纺缍形，开放时似漏斗，与春天开放的番红花（属鸢尾科）相似，白、粉、淡紫色花朵成丛配植，鲜嫩娇丽，疏密自然，优雅别致。
秋水仙喜冷凉阴湿气侯，耐寒。
忌粘质土壤，宜排水好、肥沃的沙壤土。
球茎夏季有休眠习性。
我国自七十年代起从国外引进种子和球茎，分别在北京、庐山、昆明等地试种，已取得可喜成果。
由于进口的种球价格昂贵，为加速种球的繁殖，现多采用生物工程栽培技术，通过增殖小鳞茎的数量，扩大种植面积，以适应观赏及药用需要。
我国民间常用秋水仙的花及球茎治疗坐骨神经痛和关节炎等。
2.秋水仙碱秋水仙碱（colchicine）属于有机胺类生物碱，为淡黄色针状结晶或结晶粉末，口服6毫克秋水仙碱即可致人死亡。
但是同时它是很有效的抗肿瘤药物，起作用机制是直接作用于细胞分裂，使纺锤结构无法形成，抑制有丝分裂，使其停止于中期，结果使细胞发育不正常和畸形，最后导致细胞死亡，分裂旺盛的细胞最先受到影响，高浓度时可完全使细胞停止于分裂中期。
超声波法提取黄花菜中秋水仙碱的研究
用 ６％的 乙醇 为提 取剂 ， ２ ０ 于 ０℃下 ２０ 超 声分 ０Ｗ 别 提取 ｌ 、２ 、３ 、４ 、５ 、６ ｎ ０ ０ ０ ０ ０ ０ｍｉ，确定 其最
佳 提取 时间 ． １ ． 提取 温度 对黄 花 菜 中秋 水仙碱 提取 率影 响 ．６ ２
准 确称取 黄 花菜样 品 ，以 １： ５的料液 比 ， １
收稿 日期 ：２ １ －ｌ２ ０ １１一 ０
本岛津仪器公 司） ；恒温振荡器（Ｈ ． Ｓ Ａ Ｂ，常州澳 华 仪 器 有 限 公 司 ） 数 控 超 声 波 清 洗 器 ； （ ５ ０ Ｅ，昆山市 超声仪 器有 限公 司） ＫＱ一０ Ｄ ． 供试 材 料 ：市 售鲜 黄 花菜 ，经烘 干 后 ，粉 碎 备用． 试 验试剂 ：秋水 仙碱 标准 品（ｉ 公 司 ，美 Ｓｇ ｍａ 国） 用试 验试 剂均 为分 析纯 ． ，所
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｓ ｒ ｃ ：Ｕｌ ｓ ｎ ｃ ａ ｓｓｅ ｘ ｒ ｃ ｉ ｎ ｗａ ｐ ｌ ｄ ｔ ｘ ｒ ｃ ｏ ｃ ｉ ｉ ｅ ｆｏ Ｈｅ ｒ ｃ ｌ ｓ ｃ ｔｉ ａ 仃ａ ｏ ｉ — ｓ ｉｔｄ ｅ ｔａ ｔｏ ｓ ａ ｐ ｉ ｏ ｅ ｔａ ｔ ｃ ｌｈ ｃｎ ｒ ｍ ｍｅ ｏ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ｉ ｒ
ｅ ｔ ｃｉ ｎ ｔｍ ｐ ｒ ｔ ｒ ．Ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｈ ｗｅ ｈ ｔｔ ｅ ｏ ｔ ｕ ｃ ｎ ｉ ｏ ｂ ａ ｎ ｄ ｗｅ ｅ ａ ｏ ｌｗｉ ｇ ：６ ％ ｘ ｒ ｔ ｅ ｅ ａｕ ｅ ｈ ｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｄ ｔ ａ ｈ ｐ ｉ ｍ ｏ ｄ ｔ ｎ ｏ ｔｉ ｅ ｒ ｓ ｆ ｌ ａ ｏ ｓ ｍ ｉ ｏ ｎ ｓ ０ ｅｈ ｎ ｌ ｓ ｌ ｌ ｕ ｄ ｏ ： ５ ｕ ｄ ｒ ｈ ｍｐ ｒ ｔ ｒ ｆ ８℃ ｆ ｒ ０ ｍ ｉｕ ｅ ． ｔ ａ ｏ ， ｏ ｉ ｉ ｉ ｆ１ １ ， ｎ ｅ ｅｔ ／ ｄ ｑ ｔ ｅ ｅａ ｅｏ ３ ｕ ｏ ｎ ｔｓ ４ Ｋｅ ｒ ｓ Ｈｅ ｒ ｃ ｌ ｓ ｃｔｉ ａ Ｂａ ｏ ｉ ｃ ｌｈ ｃｎ ； ｌ ａ ｏ ｉ ｖ ； ＬＣ ｙ ｗｏ ｄ ： ｍｅ ｏ ａ ｌ ｉ ｎ ｒ ｎ ； ｏ ｃ ｉｉ ｅ ｕ ｔ ｓ ｎ ｃｗａ ｅ ＨＰ ｉ ｒ ｒ
秋水仙碱综述
秋水仙碱生物药物研究进展[摘要]综述秋水仙碱生物药物的理化性质、发现过程、药理药效、生物学机理、生产工艺等方面的研究进展，旨在把握秋水仙碱在药物研究上的现状和未来的发展方向。
[Abstract]summary colchicine biological drug discovery process, physicochemical properties, pharmacological effect, biological mechanism, production process and other aspects of the research progress of it, to grasp the current situation and the future development direction in pharmaceutical research.[关键词]秋水仙碱；生物技术制药；发现过程；药理药效；药物生产。
秋水仙碱（colchicine），一种生物碱，因最初从百合科植物秋水仙中提取出来[1]，故名，也称秋水仙素。
纯秋水仙碱呈黄色针状结晶，熔点157℃。
易溶于水、乙醇和氯仿。
味苦，有毒。
秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。
为了未来更方便，更有目标性研究秋水仙碱在药物生产方面的研究，现将其现阶段的发展情况综述如下。
一、化学结构它是一种卓酚酮类生物碱,其结构经合成所证实[ 2]。
分子式为C22H25NO6，分子量399.44，结构如图1。
迄今为止,已从百合科的5个属的多种植物中发现了45个秋水仙碱类化合物,它们具有与秋水仙碱基本相似的骨架,但取代基有所不同或C环发生了异构化。
这些化合物大体可分为以下4种类型: ( 1)天然型, ( 2)降解型, ( 3)光化型, ( 4)其它型[3]。
二、生物学作用秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期[4]。
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的确定文章类型本文属于科普文章，主要介绍山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的选择及其注意事项。
引言在引言中，我们将简要介绍山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的概念和重要性，为后续的段落打下基础。
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺分类在这一段中，我们将对山慈菇中秋水仙碱醇提工艺进行分类，例如按照提取温度、溶剂浓度、提取时间等因素进行分类。
优选工艺的依据这一段将介绍优选山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的依据，例如提取效率、产品质量、生产成本等因素，并简要说明各种因素的权重。
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺优化方法在这一段中，我们将介绍优化山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的方法，如通过单因素实验、正交实验、均匀设计等方法进行优化。
注意事项最后一段将介绍山慈菇中秋水仙碱醇提工艺中的注意事项，包括安全生产、环保等方面的问题。
通过查阅相关文献和实地调研，了解山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的研究现状及其优缺点。
总结各种优化方法的效果和适用范围，并分析不同优化方法的优势与劣势。
针对山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的安全生产、环保等方面的问题，提出相应的解决方案和建议。
引言在引言中，我们将简要介绍山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的概念和重要性，为后续的段落打下基础。
同时，我们还将提出文章的目的和主要内容。
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺分类在这一段中，我们将详细介绍山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的分类情况，包括提取温度、溶剂浓度、提取时间等因素的分类方法及其适用范围。
同时，我们还将介绍不同分类方法的优缺点。
优选工艺的依据这一段将详细介绍优选山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的依据，包括提取效率、产品质量、生产成本等因素，以及各种因素的权重。
同时，我们还将介绍如何在这些因素之间进行权衡和优选。
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺优化方法在这一段中，我们将详细介绍优化山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的方法，如通过单因素实验、正交实验、均匀设计等方法进行优化。
同时，我们还将介绍不同优化方法的优缺点及其适用范围。
注意事项最后一段将强调安全生产和环保问题的重要性，并提出相应的解决方案和建议。
一种高效提取秋水仙碱的方法
高效提取秋水仙碱的方法生物碱是一类重要的天然有机化合物，它是指含负氧化态氮原子存在于生物有机体的环状化合物。
自从1806年德国学者从鸦片中分出吗啡碱以后，迄今已从自然界分出约1000种生物碱。
生物碱大多具有生物活性，是许多药用植物的有效成分。
研究发现，从天然植物中提取的生物碱，具有更多的药用价值，已远远超过植物本身的价值。
百合中的生物碱——秋水仙碱就是一个典型的例子。
秋水仙碱最初是从百合科植物秋水仙中发现的重要生物碱，能抑制细胞有丝分裂、抑制癌细胞的增长，临床上用来治疗癌症、痛风等；秋水仙碱还是细胞生物技术常用试剂。
制备方法分为植物提取和合成生物。
一、植物提取从植物中提取秋水仙碱的传统方法一般是溶剂提取法。
此法的优点是仪器和材料简单易得，方法比较简便，但试剂消耗量大。
溶剂提取法的基本原理是：根据秋水仙碱的性质，利用它在不同溶剂中溶解度的差别，按一定的步骤和方法进行分离。
根据所用溶剂的不同，传统提取方法可分为水提法、酸提法、有机溶剂提取法。
提取出来的含秋水仙碱的混合物还需经柱层析、薄层层析、离子交换色谱等分离方法进行进一步分离纯化。
1）水提取法植物粉末经水提尽秋水仙碱，于浓缩的提取液中加碱碱化后，再用与水不相混溶的有机溶剂提取游离秋水仙碱，蒸去溶剂可得浓缩的秋水仙碱粗制品。
水当然是最便宜的溶剂，安全是其优点，但也存在一定的局限性。
例如，被水溶出的亲水性杂质太多，后期处理困难，秋水仙碱不易被精制提纯。
2）烯酸提取法一般用浓度在0.1-1%的稀酸溶液进行提取。
此法常用的酸为盐酸、硫酸或醋酸，其目的是使植物中的秋水仙碱(生物碱)转化为盐类，提高其在水中的溶解度，从而易于提取。
这种方法是在常温下将样品置于带塞的容器内，准确加入一定量的稀酸，摇匀后静置，浸泡12-48小时。
稀酸提取法的优点是不需高温加热，因此不会破坏有效成份，是一种经济而又简便的提取方法。
但稀酸提取法和水提取法一样，浸取液中存在着较多的水溶性杂质，如皂甙、蛋白质、糖类、水溶性色素等。
秋水仙碱提取分离研究进展
江苏农业学报(ＪｉａｎｇｓｕＪ.ｏｆＡｇｒ.Ｓｃｉ.)ꎬ２０２３ꎬ３９(１):２９５￣３０４ｈｔｔｐ://ｊｓｎｙｘｂ.ｊａａｓ.ａｃ.ｃｎ崔光芬ꎬ杜文文ꎬ金鹏程ꎬ等.秋水仙碱提取分离研究进展[Ｊ].江苏农业学报ꎬ２０２３ꎬ３９(１):２９５￣３０４.ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１０００￣４４４０.２０２３.０１.０３３秋水仙碱提取分离研究进展崔光芬１ꎬ２ꎬ㊀杜文文１ꎬ㊀金鹏程２ꎬ㊀段㊀青１ꎬ㊀王祥宁１ꎬ㊀贾文杰１ꎬ㊀马璐琳１ꎬ㊀王继华１(１.云南省农业科学院花卉研究所ꎬ云南昆明６５０２０５ꎻ２.云南省农业科学院农产品加工研究所ꎬ云南昆明６５０２２１)收稿日期:２０２２￣０３￣２４基金项目:云南省重大科技专项(２０２００２ＡＡ１００００７)ꎻ云南省绿色食品牌打造科技支撑行动(花卉)专项(５３００００２１００００００００￣１３７４２)作者简介:崔光芬(１９７９－)ꎬ女ꎬ云南曲靖人ꎬ硕士ꎬ研究员ꎬ从事球根花卉资源评价与开发研究ꎮ(Ｅ￣ｍａｉｌ)１０９５７６８４７６＠ｑｑ.ｃｏｍ通讯作者:王继华ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｗａｎｇｊｈ０５０５＠ｓｏｈｕ.ｃｏｍ㊀㊀摘要:㊀秋水仙碱是一种功能较多的植物源生物碱ꎬ在医药行业发挥着重要作用ꎮ系统地了解秋水仙碱提取㊁分离的技术类型有助于推动高纯度秋水仙碱的生产ꎮ本文介绍了秋水仙碱不同提取技术的特点㊁原理和应用效果ꎬ阐述了秋水仙碱在不同种类植物㊁植物不同部位中的含量以及影响含量的因素ꎬ总结了传统的浸提法㊁回流法与超声波提取㊁超临界ＣＯ２提取㊁微波提取㊁酶促提取等新提取方法ꎬ以及膜分离法㊁色谱分离法等秋水仙碱分离纯化方法的研究进展ꎬ分析了不同提取分离技术的效果和影响因素ꎬ探讨了秋水仙碱提取技术的发展方向ꎬ以期为秋水仙碱的提取分离技术的研究和应用提供参考ꎮ关键词:㊀秋水仙碱ꎻ嘉兰属ꎻ提取方法ꎻ分离纯化中图分类号:㊀Ｒ２８４㊀㊀㊀文献标识码:㊀Ａ㊀㊀㊀文章编号:㊀１０００￣４４４０(２０２３)０１￣０２９５￣１０ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅＣＵＩＧｕａｎｇ￣ｆｅｎ１ꎬ２ꎬ㊀ＤＵＷｅｎ￣ｗｅｎ１ꎬ㊀ＪＩＮＰｅｎｇ￣ｃｈｅｎｇ２ꎬ㊀ＤＵＡＮＱｉｎｇ１ꎬ㊀ＷＡＮＧＸｉａｎｇ￣ｎｉｎｇ１ꎬ㊀ＪＩＡＷｅｎ￣ｊｉｅ１ꎬＭＡＬｕ￣ｌｉｎ１ꎬ㊀ＷＡＮＧＪｉ￣ｈｕａ１(１.ＦｌｏｗｅｒＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＹｕｎｎａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０５ꎬＣｈｉｎａꎻ２.Ａｇｒｏ￣ＰｒｏｄｕｃｔｓＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＹｕｎｎａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２２１ꎬＣｈｉｎａ)㊀㊀Ａｂｓｔｒａｃｔ:㊀Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｉｓａｐｌａｎｔ￣ｄｅｒｉｖｅｄａｌｋａｌｏｉｄｗｉｔｈｍａｎｙｆｕｎｃｔｉｏｎｓꎬｗｈｉｃｈｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉ￣ｃａｌｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ.Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｏｆｔｈｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｔｙｐｅｓｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｉｓｈｅｌｐｆｕｌｆｏｒｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｉｇｈ￣ｐｕｒｉｔｙｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ.Ｉｎｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅꎬｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃ￣ｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｗｅｒｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄꎬａｎｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｅｓｏｎｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｌａｎｔｓａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｒｔｓｏｆｐｌａｎｔｓａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅａｆｆｅｃｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｓｗｅｒｅｄｅｓｃｒｉｂｅｄ.Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｓｕｃｈａｓｍａｃｅｒａｔｉｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｒｅ￣ｆｌｕｘｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｅｒｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ.ＮｅｗｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｓｕｃｈａｓｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎꎬｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＣＯ２ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎꎬｍｉｃｒｏｗａｖｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｅｎｚｙｍａｔｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｅｒｅａｌｓｏｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ.Ｂｅｓｉｄｅｓꎬｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｓｕｃｈａｓｍｅｍｂｒａｎｅｓｅｐｅｒａｔｉｏｎａｎｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｓｅｐａｒａｔｉｏｎｗｅｒｅｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ.Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄꎬａｎｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｄｉｒｅｃｔｉｏｎｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｗａｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:㊀ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅꎻＧｌｏｒｉｏｓａꎻｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓꎻｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ㊀㊀秋水仙碱是一种三环脂溶性生物碱ꎬ于１８２０年由法国化学家从秋水仙属(Ｃｏｌｃｈｉｃｕｍ)植物[１]中分离获得ꎬ其化学结构见图１ꎮ秋水仙碱作为治疗痛风的药物应用历史悠久ꎬ近年来ꎬ其药用价值被不断挖掘并被广泛用于治疗家族性地中海热[２]㊁皮肤病[３]㊁心脏病[４]等疾病ꎬ甚至用于治疗新冠肺炎引起的急性呼吸窘迫综合征[５]ꎮ秋水仙碱在细胞中５９２可与微管蛋白β亚基上第１~４６位和第２１４~２４１位２段氨基酸残基发生交联ꎬ抑制微管聚合进而影响细胞信号转导㊁细胞分裂㊁迁移和细胞运输等多种细胞过程[６￣８]ꎮ除药用价值外ꎬ秋水仙碱还可用于植物多倍体育种ꎬ作为诱变剂诱导植物的茎尖㊁花粉㊁根尖㊁种子等器官或组织获得多倍体品种ꎬ进而得到更高的作物产量[９￣１０]ꎬ或通过改变基因组倍性水平来影响植物代谢物的浓度[１１￣１２]ꎬ甚至在水果保鲜领域也有所应用[１３]ꎮ随着秋水仙碱的用途不断拓展ꎬ人们对秋水仙碱的需求也快速增长ꎮ生物碱是植物体内产生的次生代谢物ꎬ能够保护植物免受食草动物采食和病原体侵害ꎬ其传统提取方法包括煎煮㊁浸渍㊁渗漉等[１４]ꎮ秋水仙碱作为生物碱的一类ꎬ常用提取方法有溶剂提取㊁超声提取等[１５￣１６]ꎮ目前ꎬ生物碱提取技术不断创新和发展ꎬ更多含秋水仙碱的植物被发现ꎬ秋水仙碱的提取范围不断扩大ꎬ提取效率也得到较大提升ꎮ本研究通过对不同植物中秋水仙碱含量及其影响因素㊁提取方法㊁分离纯化等相关研究进行综述ꎬ结合目前国内外有关秋水仙碱合成的最新进展ꎬ以期阐明不同提取技术的优势和适用范围ꎬ为促进秋水仙碱的生产和应用提供参考ꎮＦｉｇ.１㊀Ｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ１㊀秋水仙碱的植物来源１.１㊀含秋水仙碱的植物种类秋水仙碱最早是从秋水仙属植物中提取获得的ꎮ近年来ꎬ人们在山慈姑属(Ｉｐｈｉｇｅｎｉａ)[１７]㊁宫灯百合属(Ｓａｎｄｅｒｓｏｎｉａ)[１８]㊁摇船花属(Ａｎｄｒｏｃｙｍｂｉ￣ｕｍ)[１９]㊁安圭拉氏兰属(Ｗｕｒｍｂｅａ)[２０]等秋水仙科不同属植物中发现了秋水仙碱ꎬＶｉｎｎｅｒｓｔｅｎ等[２１]研究认为秋水仙科的植物中普遍含有秋水仙碱ꎬ因此提出秋水仙碱可作为秋水仙科植物分类扩展的化学标志物ꎮ秋水仙科植物分布于非洲㊁亚洲㊁澳大利亚㊁欧洲和北美的温带和热带地区ꎬ科内各属植物均为多年生ꎬ地下球茎或块茎发达ꎬ全株含秋水仙碱[２２]ꎬ除秋水仙科外ꎬ百合科百合属(Ｌｉｌｉｕｍ)[２３]㊁萱草属(Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓ)[２４]的多种植物中也含秋水仙碱ꎬ秋水仙科与百合科是含秋水仙碱植物中最丰富的２个科ꎮ另外ꎬ菊科风毛菊属的水母雪莲(Ｓａｕｓｓｕｒｅａｍｅ￣ｄｕｓａ)[２５]和唐古特雪莲(Ｓａｕｓｓｕｒｅａｔａｎｇｕｔｉｃａ)[２６]ꎬ天南星科天南星属的曲序南星(Ａｒｉｓａｅｍａｃｕｒｖａ￣ｔｕｍ)[２７]ꎬ泽泻科慈姑属的慈姑(Ｓａｇｉｔｔａｒｉａｓａｇｉｔｔｉｆｏ￣ｌｉａ)[２８]也曾有关于秋水仙碱被提取分离的报道ꎮ目前秋水仙碱生产上常用的提取植物为秋水仙属(Ｃｏｌｃｈｉｃｕｍ)㊁山慈姑属(Ｉｐｈｉｇｅｎｉａ)和嘉兰属(Ｇｌｏｒｉｏ￣ｓａ)[２９￣３０]ꎮ嘉兰是一类攀缘植物ꎬ在印度分布广泛ꎬ其种子和块茎被大量出口至欧美用于药用秋水仙碱提取[３１]ꎬ而山慈姑属的丽江山慈姑则是中国药企生产秋水仙碱常用的基源植物[３２]ꎮ１.２㊀不同植物中的秋水仙碱含量秋水仙碱虽然在越来越多的植物中被发现和提取ꎬ但已报道的不同种类植物在秋水仙碱含量上差别较大(表１)ꎮ商业用途的秋水仙碱最早从秋水仙(Ｃｏｌｃｈｉｃｕｍａｕｔｕｍｎａｌｅ)中提取获得ꎬ该物种的种子中秋水仙碱质量分数为０.５％~０ ６％[３３]ꎮＰａｎｄｅｙ等[３４]从嘉兰(Ｇｌｏｒｉｏｓａｓｕｐｅｒｂａ)的干燥块茎中提取秋水仙碱ꎬ其质量分数可高达０ ９１％ꎮ除秋水仙属和嘉兰属外ꎬ前人还在山慈姑属㊁宫灯百合属和摇船花属植物中发现了一些秋水仙碱含量高的种类ꎬ如宫灯百合(Ｓａｎｄｅｒｓｏｎｉａａｕｒａｎｔｉａｃａ)的块茎中秋水仙碱含量为１ ０７％(质量分数)[１８]ꎬ山慈姑属植物(Ｉｐｈｉ￣ｇｅｎｉａｉｎｄｉｃａ)球茎中秋水仙碱含量为３ ２５０ｍｇ/ｇ[１７]ꎬ摇船花属植物(Ａｎｄｒｏｃｙｍｂｉｕｍｈｉｅｒｒｅｎｓｅ)的种子中秋水仙碱含量为４ ５００ｍｇ/ｇ[２１]ꎮ即使是在相同属内ꎬ不同种间植物的秋水仙碱含量差异也较大ꎬ在６种安圭拉氏兰属植物中ꎬＷｕｒｍｂｅａｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ和Ｗ ｔｅｎｅｌｌａ的秋水仙碱含量分别为１ ７００ｍｇ/ｇ和０ ３００ｍｇ/ｇ[２０]ꎮ１.３㊀影响植物秋水仙碱含量的因素１.３.１㊀环境因素㊀在不同气候土壤条件下生长的植物种群其生化代谢方面存在差异ꎮ李慧芳等[３５]采用超高效液相色谱￣质谱联用(ＵＰＬＣ￣ＭＳ)法分析野罂粟(Ｐａｐａｖｅｒｎｕｄｉｃａｕｌｅ)不同居群的生物碱含量ꎬ结果表明ꎬ野罂粟中主要的３种生物碱包括野罂粟碱㊁黑龙辛甲醚和瑞芙热米定的含量在不同居群中各不相同ꎬ前２种生物碱含量最大值均出现在乌兰６９２江苏农业学报㊀２０２３年第３９卷第１期布统居群ꎬ分别为２.０１８５ｍｇ/ｇ和１.１３８２ｍｇ/ｇꎮ而瑞芙热米定含量的最大值则出现在多伦居群(１.２８７８ｍｇ/ｇ)ꎮ综合比较各居群间生物碱含量差异ꎬ结果显示ꎬ乌兰布统地区的野罂粟品质最佳ꎬ生物碱类成分含量最高ꎬ由此说明生物碱在植物中的含量与生长区域相关ꎮＰａｎｄｅｙ等[３６]对来自印度３２个不同地理位置的嘉兰居群进行秋水仙碱含量检测ꎬ结果显示ꎬ在印度１１个州３２个不同地区的嘉兰居群中ꎬ秋水仙碱含量为２.１２~７ ５８ｍｇ/ｇꎮ秋水仙碱含量最高的居群为印度东部地区的大吉岭￣西孟加拉邦居群(７ ５８ｍｇ/ｇ)和甘托克￣锡金居群(７ ３７ｍｇ/ｇ)ꎬ东喜马拉雅高海拔地区嘉兰居群的秋水仙碱含量明显高于西喜马拉雅地区和印度￣恒河平原的居群ꎬ说明在２０４５ｍ海拔范围内生长的嘉兰居群的秋水仙碱含量受到生境海拔的调控ꎬ这种受海拔影响次生代谢物合成的变化归因于一些生理㊁生态和环境因素ꎬ即紫外线辐射水平的高低㊁温度水平差异等ꎮ袁理春等[３７]对云南西北部及四川越西县分布的２２个丽江山慈姑(Ｉ.ｉｎｄｉｃａ)居群中秋水仙碱含量的测定结果表明ꎬ分布在金沙江两岸贫瘠砂砾土壤上的丽江红岩居群秋水仙碱质量分数最高ꎬ达０ ６１％ꎬ而生长在较肥沃的草丛中的永胜县板桥乡居群质量分数仅为０ １３％ꎬ说明丽江山慈姑秋水仙碱含量与生境土壤的土质关系较大ꎮ表１㊀不同植物中的秋水仙碱含量Ｔａｂｌｅ１㊀Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｌａｎｔｓ序号植物属名㊀㊀㊀㊀植物拉丁名㊀㊀㊀㊀植株器官秋水仙碱含量参考文献１秋水仙属(Ｃｏｌｃｈｉｃｕｍ)Ｃ.ａｕｔｕｍｎａｌｅ种子０.５００％[３３]２嘉兰属(Ｇｌｏｒｉｏｓａ)Ｇ.ｓｕｐｅｒｂａ块茎０.９１０％[３４]３山慈姑属(Ｉｐｈｉｇｅｎｉａ)Ｉ.ｉｎｄｉｃａ球茎３.２５０ｍｇ/ｇ[１７]４摇船花属(Ａｎｄｒｏｃｙｍｂｉｕｍ)Ａ.ｇｒａｍｉｎｅｕｍ全株２.８８０ｍｇ/ｇ[１９]Ａ.ｈｉｅｒｒｅｎｓｅ种子４.５００ｍｇ/ｇＡ.Ｐａｌａｅｓｔｉｎｕｍ种子０.８１０ｍｇ/ｇＡ.Ｐｓａｍｍｏｐｈｉｌｕｍ种子０.７８０ｍｇ/ｇＡ.ｒｅｃｈｉｎｇｅｒｉｉ种子０.７１０ｍｇ/ｇＡ.ｗｙｓｓｉａｎｕｍ种子３.２７０ｍｇ/ｇ５安圭拉氏兰属(Ｗｕｒｍｂｅａ)Ｗ.ｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ全株１.７００ｍｇ/ｇ[２０]Ｗ.ｄｉｏｉｃａ１.２００ｍｇ/ｇＷ.ｉｎｆｒａｍｅｄｉａｎａ１.２００ｍｇ/ｇＷ.ｔｅｎｅｌｌａ０.３００ｍｇ/ｇ６百合属(Ｌｉｌｉｕｍ)Ｌ.ｂｒｏｗｎｉｅｖａｒ.ｖｉｒｉｄｕｌｕｍ鳞茎３.６４０ｍｇ/ｇ[２３]７萱草属(Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓ)Ｈ.Ｍｉｎｏｒ花蕾０.２５５μｇ/ｇ[２４]Ｈ.Ｌｉｌｉｏａｓｐｈｏｄｅｌｕｓ花蕾０.３０１μｇ/ｇ８宫灯百合属(Ｓａｎｄｅｒｓｏｎｉａ)Ｓ.ａｕｒａｎｔｉａｃａ块茎１.０７０％[１８]９凤毛菊属(Ｓａｕｓｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａ)Ｓ.ｍｅｄｕｓａ全株０.００２％[２５]１０慈姑属(Ｓａｇｉｔｔａｒｉａ)Ｓ.ｓａｇｉｔｔｉｆｏｌｉａ球茎０.４０６ｍｇ/ｇ[２８]％为质量百分比含量ꎮ１.３.２㊀生长周期和栽培措施㊀植物中的生物碱含量受生长年限和季节的影响ꎮＡｋｒａｍ等[３８]研究石蒜球茎中生物碱含量时发现ꎬ两年生球茎中的加兰他敏和石蒜宁碱的含量最高ꎬ而在三年生球茎中网球花胺的含量最高ꎬ一年生球茎中的高石蒜碱含量较高ꎬ综合比较可知ꎬ两年生球茎中的生物碱含量最高ꎮ在约旦原产的２种秋水仙属植物中ꎬＡｌａｌｉ等[３９]发现Ｃ.ｔｕｎｉｃａｔｕｍ在花期㊁营养生长期和苗期的秋水仙碱含量较高ꎬ而在Ｃ.ｂｒａｃｈｙｐｈｙｌｌｕｍ中ꎬ花期和苗期的秋水仙碱含量较高ꎮ此外ꎬ在栽培过程中ꎬ施肥也有利于秋水仙碱在球茎和叶片中的积累ꎮＡｌ￣Ｆａｙｙａｄ等[４０]按照氮磷钾５ʒ１０ʒ５的施用比例ꎬ在种植１０ｄ后施用３种用量的配方肥ꎬ结果显示ꎬ在不同施肥水平下ꎬＣ.ｈｉｅｒｏｓｏｌｙｍｉｔａｎｕｍ和Ｃ.ｔｕｎｉｃａ￣ｔｕｍ球茎中的秋水仙碱含量均高于对照ꎬ尤其是氮磷钾配比为７５ʒ１００ʒ７５的处理秋水仙碱含量最７９２崔光芬等:秋水仙碱提取分离研究进展高ꎬ秋水仙碱含量分别为０ ８０６ｍｇ/ｇ和０ ８０３ｍｇ/ｇꎬＣ.ｈｉｅｒｏｓｏｌｙｍｉｔａｎｕｍ球茎中秋水仙碱含量甚至高于未施肥(对照)８０％以上ꎬ说明施肥能够促进植物中秋水仙碱的合成ꎮ２㊀秋水仙碱的提取方法生物碱为含氮有机物ꎬ传统提取方法包括煎煮㊁浸渍㊁渗漉等ꎬ由于大多数生物碱能溶于三氯甲烷㊁乙醚㊁乙醇㊁丙酮等有机溶剂ꎬ也能溶于酸性㊁碱性水溶液形成盐类ꎬ因此可选用不同溶剂提取植物中的生物碱ꎮ随着提取技术不断发展ꎬ双水相萃取[４１]㊁低共熔溶剂提取[４２]等新技术也被应用到生物碱提取中ꎮ天然秋水仙碱在植物中的分布因器官组织不同而不同ꎬ因此提取方法也可根据原材料特点及提取效率等要素进行选择ꎮ２.１㊀浸提法２.１.１㊀水提取法㊀水提法直接以水为溶剂ꎬ适用于提取在水中溶解度较高的化合物ꎮ秋水仙碱易溶于水ꎬＡｇｒａｗａｌ等[１５]以水为溶剂在室温下浸渍嘉兰茎块的干燥粉末ꎬ获得的秋水仙碱质量分数可达０ ３１％ꎮ除纯水外ꎬ酸和碱的水溶液也常用于生物碱提取ꎮ生物碱通常与盐酸形成生物碱氯化物ꎬ其在水中的溶解性优于碱性生物碱ꎬÇａｎｋａｙａ等[４３]用浓度０ １ｍｏｌ/Ｌ的盐酸提取Ｃ.ａｕｔｕｍｎａｌｅ球茎中的秋水仙碱ꎬ提取过程辅以超声技术ꎬ结果表明ꎬ提取时间㊁提取介质的ｐＨ值㊁液料比㊁提取温度和超声功率对提取效率影响较大ꎮ在ｐＨ值为１㊁料液比为１ʒ３０(质量体积比)㊁超声时间为４０ｍｉｎ㊁温度为６４ħ时ꎬ提取效率最高ꎬ秋水仙碱质量分数达０ ２３８％ꎮ黄晨熙等[４４]以ｐＨ２.８~４ ５的柠檬酸或苹果酸水溶液烫漂百合花瓣干粉ꎬ将烫漂液制作成浸膏后加入乙醇制成提取液ꎬ浸膏与乙醇的料液质量比为１ʒ１５~１ʒ３０ꎬ提取温度为４０~６０ħꎬ提取时间为３０~５０ｍｉｎꎬ提取液经固相萃取后可获得秋水仙碱提取物ꎬ纯度７８％以上ꎮ２.１.２㊀有机溶剂提取法㊀甲醇㊁乙醇㊁三氯甲烷等有机溶剂是秋水仙碱提取中常用的提取溶剂ꎮ针对不同的提取材料ꎬ秋水仙碱提取剂可选用单一的有机溶剂ꎬ也可用混合溶剂ꎮ姚红锐等[４５]用百合鳞茎干粉和乙醇混合物(１ʒ３ꎬ体积比)进行冷浸提ꎬ提取时间４ｈꎬ提取３次后秋水仙碱的提取率为１ ９６％ꎮ而陈莉华等[４６]同样以百合干燥粉末为材料ꎬ以体积分数９５％的乙醇浸泡后在８０ħ下提取８ｈꎬ提取液浓缩溶于水后再分别用石油醚㊁乙醚和三氯甲烷萃取ꎬ将每种萃取剂获得的萃取物合并得到秋水仙碱粗提物ꎬ分步提取使百合原料中秋水仙碱的提取率最大化ꎬ此试验结果说明ꎬ对百合中秋水仙碱提取率产生影响的因素按其作用大小排序分别为:提取温度>料液比>乙醇体积分数>提取时间ꎮ２.２㊀回流法回流提取是以乙醇等沸点低的有机溶剂与原料混合后在水浴中加热ꎬ溶剂挥发后经冷凝作用重新回流到提取容器中提取目标成分ꎮ田素英等[１７]以一定粒度范围内的山慈姑药粉为原料ꎬ以体积比７５％的乙醇溶液作为提取剂ꎬ经４次回流提取后ꎬ秋水仙碱提取量为２９８３.６ｍｇ/ｋｇꎮ对于山慈姑中秋水仙碱回流提取的效果而言ꎬ粉末的粒径越小ꎬ提取效果越好ꎬ并且乙醇浓度㊁提取次数㊁乙醇用量对提取得率的影响较大ꎮ管伦兴等[４７]以体积比７０％的甲醇对丽江山慈姑粉末中的秋水仙碱进行回流提取ꎬ结果表明ꎬ回流２次可将原料中的秋水仙碱完全提取出来ꎬ提取效率明显高于超声提取法ꎮ２.３㊀超声提取法超声波是一种高频机械波ꎬ可产生高速㊁强烈的空化效应高效破碎细胞ꎬ增强细胞壁和细胞膜的通透性及溶剂的穿透力ꎬ使提取溶剂更易接触目标成分ꎬ从而提高目标化合物的溶出速度和溶出量[４８]ꎮＯｕ等[２８]采用超声法对慈姑球茎干粉中的秋水仙碱进行提取ꎬ体积分数为６０％的乙醇溶液在５０ħ的温度条件下超声提取３０ｍｉｎꎬ料液比(质量体积比)为１ʒ２５ꎬ秋水仙碱的平均提取得率可达０ ２７％ꎬ在此研究中秋水仙碱的提取率随超声时间增加而增加ꎬ但超声时间为３０ｍｉｎ时ꎬ秋水仙碱的提取率达到峰值ꎬ之后虽然提取时间延长但秋水仙碱提取率逐渐降低ꎬ原因可能与提取物中非靶标物质的增加有关ꎮÇａｎｋａｙａ等[４３]以超声辅助法提取Ｃ ａｕｔｕｍ￣ｎａｌｅ球茎中的秋水仙碱ꎬ结果显示ꎬ超声波功率为６０２ ４Ｗ㊁提取时间为４２ｍｉｎ㊁温度为６４ħ时ꎬ秋水仙碱的得率最高ꎬ超声处理４０ｍｉｎ后提取率升高ꎬ表明超声波可促进目标化合物在溶剂中扩散ꎬ并在短时间内实现溶解平衡ꎮ同时ꎬ当料液比(质量体积比)从１ʒ１５增加到１ʒ３０时ꎬ提取效率提高２１％ꎬ但是料液比大于１ʒ３０(质量体积比)以后ꎬ提８９２江苏农业学报㊀２０２３年第３９卷第１期取效率变化不显著ꎬ原因可能是溶剂与溶质比增加时ꎬ溶质扩散过程加快ꎬ且迅速达到溶解力最大值ꎮ２.４㊀超临界ＣＯ２萃取法超临界ＣＯ２萃取法以处于临界状态的ＣＯ２为媒介ꎬ其具有双重优点ꎬ既有液体对物料的高渗透性和溶解能力ꎬ又有气体的高扩散性和低黏度ꎬ仅通过控制压力和温度即可选择性地把不同极性㊁不同沸点和不同相对分子质量的成分萃取出来ꎬ而且在提取物中溶剂无残留[４９]ꎮＢａｙｒａｋ等[１６]将Ｃ.ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ的种子磨碎后经脱脂处理去除油分ꎬ以超临界ＣＯ２技术萃取秋水仙碱ꎬ选用０ ５ｍｌ/ｍｉｎ甲醇为改性剂ꎬＣＯ２流速为１ ５０ｍｌ/ｍｉｎꎬＣＯ２密度为０ ９０ｇ/ｍｌꎬ获得的萃取物中只含有秋水仙碱ꎬ得率为１ ４４％ꎬ说明超临界ＣＯ２流体对秋水仙碱具有选择性ꎬ脱脂和添加甲醇改性剂可提高种子中秋水仙碱的萃取率ꎮ对于含有大量淀粉和多糖的百合鳞茎而言ꎬ经过氨水充分碱化后ꎬ更多的秋水仙碱可从原料中释放出来ꎬ有利于后续的超临界ＣＯ２流体萃取ꎮ此外使用提携剂萃取也可提高秋水仙碱萃取率ꎬ乙醇因渗透力较强ꎬ与秋水仙碱之间以氢键结合有利于萃取ꎬ适合作为超临界ＣＯ２流体萃取百合中秋水仙碱的提携剂[５０]ꎮＥｌｌｉｎｇｔｏｎ等[３３]通过考察ＣＯ２不同密度㊁改性剂百分比㊁提取温度和萃取时间ꎬ建立从Ｃ.ａｕｔｕｍ￣ｎａｌｅ种子中提取秋水仙碱的超临界ＣＯ２萃取法ꎬ即在恒定的ＣＯ２密度(０ ９０ｇ/ｍｌ)和通量(１ ５ｍｌ/ｍｉｎ)条件下ꎬ以体积分数３％的甲醇为改性剂ꎬ可在１１０ｍｉｎ内提取９８％的秋水仙碱ꎬ与传统提取方法相比ꎬ超临界ＣＯ２萃取法更高效㊁快速㊁环保ꎮ２.５㊀微波助提法微波辅助提取的作用力主要来源于微波对细胞膜的生物效应ꎮ微波能穿透组织细胞ꎬ导致细胞内压力和温度升高ꎬ当压力超过细胞承受能力时细胞膜破裂ꎬ各种有效成分将从细胞进入溶剂中[５１]ꎮＰａｎｄｅｙ等[３６]以微波助提法对嘉兰中的秋水仙碱进行提取ꎬ主要参数设置为:微波功率３００~６００Ｗꎬ提取时间３~９ｍｉｎꎬ溶剂为２０％~４０％(体积分数)的乙醇水溶液ꎬ溶剂ｐＨ为２~６ꎮ通过比对获得最优提取条件:微波功率４６０Ｗꎬ微波处理时间６ ４ｍｉｎꎬ乙醇水溶液的体积分数为３０％ꎬｐＨ值为３ꎬ在此条件下获得的秋水仙碱含量达到最大值(７ ５１ｍｇ/ｇ)ꎮＡｇｒａｗａｌ等[１５]同样以微波助提法提取嘉兰块茎中的秋水仙碱ꎬ结果显示ꎬ在最佳提取条件下ꎬ即微波功率２４５Ｗ㊁微波处理时间１５ｍｉｎ㊁提取溶剂为１００％甲醇时ꎬ秋水仙碱的质量分数为０ ６４％ꎮ２.６㊀酶促提取法酶在提取过程中可降解细胞壁及细胞间质中的成分ꎬ通过破坏细胞渗透阻力ꎬ将细胞内的有效成分分离出来[５２]ꎮ黄旖旎等[５３]将百合粉与磷酸盐缓冲液混合加热糊化ꎬ之后采用ＮａＯＨ溶液碱化和α￣淀粉酶溶液恒温酶解ꎬ最后以三氯甲烷萃取ꎬ结果显示ꎬ在２~１０Ｕ的酶量范围内ꎬ随着酶量提高ꎬ提取液中葡萄糖浓度增加ꎬ秋水仙碱的提取率也相应提高ꎮ淀粉酶不同用量处理的秋水仙碱提取率均高于对照ꎬ原因可能是α￣淀粉酶在降解淀粉时ꎬ淀粉被水解成较小的葡萄糖分子ꎬ能够使更多被淀粉结构包围的秋水仙碱释放出来ꎬ由此说明加入淀粉酶可提高百合鳞茎中秋水仙碱的提取率ꎮ２.７㊀双水相萃取法双水相萃取系统是由２种化学结构不同的亲水性聚合物ꎬ或一种亲水性聚合物㊁低相对分子质量亲水性有机溶剂与无机盐在水中以适当浓度形成的互不相容的两水相系统ꎬ当目标物进入双水相体系后ꎬ因相对分子质量大小㊁电荷作用和各种力的存在以及环境影响使其在上相和下相中浓度不同而实现分离[４１]ꎮ石瑶等[３０]以聚乙二醇(ＰＥＧ)与(ＮＨ４)２ＳＯ４形成的双水相体系萃取丽江山慈姑中的秋水仙碱ꎬ发现ＰＥＧ相对分子质量大小与双水相成相体系的组成及成相后的相比有关ꎬ随着ＰＥＧ相对分子质量增加ꎬ相同浓度的ＰＥＧ成相所需的盐量逐渐减少ꎬ成相能力为ＰＥＧ６０００>ＰＥＧ４０００>ＰＥＧ２０００>ＰＥＧ６００>ＰＥＧ４００ꎮ当ｐＨ为７ ０㊁ＰＥＧ６０００质量分数为８％㊁(ＮＨ４)２ＳＯ４质量分数为２０％时ꎬ秋水仙碱主要集中于上相(ＰＥＧ相)ꎬ质量浓度为０ ７４９６ｍｇ/ｍｌꎮ双水相体系对丽江山慈姑粗提液中秋水仙碱的萃取率达８２ ０９％ꎬ富集倍数为６ ８４倍ꎮ此方法与传统的液液萃取㊁固相萃取等方法相比ꎬ具有操作简单㊁萃取条件温和㊁不使用有机溶剂等优点ꎬ除在蛋白质㊁酶㊁核酸的分离和纯化方面具有广阔的应用前景外[５４]ꎬ也为生物碱类化合物的萃取分离提供了一种有效方法ꎮ２.８㊀其他方法除上述方法外ꎬ生物碱提取已从使用单一方法演变为多种方法的集成应用ꎮ李璐等[５５]采用正交试验法建立了淫羊藿生物碱的超声波￣微波协同提取工艺ꎬ淫羊藿叶片粉末密封浸泡４０ｍｉｎ后在超声９９２崔光芬等:秋水仙碱提取分离研究进展波￣微波协同作用下萃取１８ｍｉｎꎬ微波功率２５０Ｊ/ｓꎬ液固比为３０ｍｌ/ｇꎬ乙醇溶液体积分数为７０％ꎬ淫羊藿生物碱的提取率可达１６ １４６ｍｇ/ｇꎬ显著高于超声波提取法㊁微波提取法和加热提取法ꎮ刘谋盛等[５６]采用超声波辅助双水相萃取系统从山慈姑中提取秋水仙碱ꎬ原料中加入其质量３~５倍的乙醇(８０％~９５％ꎬ体积分数)和原料质量４~６倍的水ꎬ浸泡后加入原料质量０ ５~２ ０倍的硫酸铵㊁硫酸钠或甲酸钠中的一种ꎬ在温度４０~７０ħ㊁频率３０~２００ｋＨｚ的超声波作用下进行双水相萃取３０~６０ｍｉｎꎮ富含秋水仙碱的上层溶液减压浓缩形成含秋水仙碱的浸膏ꎬ经脱盐纯化和大孔吸附树脂柱分离后得到纯度大于９５％的高纯度秋水仙碱ꎮ此方法以超声波辅助萃取ꎬ提高了秋水仙碱的萃取率ꎬ双水相萃取同时又对目标化合物起到分离纯化的作用ꎬ在秋水仙碱的生产上具有一定的应用前景ꎮ２.９㊀不同提取方法的比较秋水仙碱的不同提取方法均具有各自的优点和局限性ꎬ并且由于含秋水仙碱的植物种类多样且含量差异较大ꎬ因此相同提取方法在不同植物上的应用效果也有一定差别ꎮＡｇｒａｗａｌ等[１５]同时采用５种方法提取嘉兰茎块中的秋水仙碱ꎬ结果显示ꎬ与其他方法相比ꎬ微波助提法的用时最短ꎬ溶剂消耗量最少ꎬ提取效率最高ꎮ浸提法以水为提取剂经２４ｈ提取得到的秋水仙碱质量分数为０ ３１０％ꎬ超声提取法以体积分数５０％的甲醇水溶液提取４ｈꎬ秋水仙碱得率为０ ２７０％ꎬ而微波助提法在功率２４５Ｗ时以甲醇为提取剂仅需提取１５ｍｉｎꎬ秋水仙碱含量即可达０ ６４０％(质量分数)ꎮＢａｙｒａｋ等[１６]通过比对超临界ＣＯ２萃取与传统提取法对Ｃ ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ种子中秋水仙碱的提取差异时发现ꎬ经过脱脂处理的种子膏状物用２００ｍｌ体积比为９５ʒ５的甲醇￣水混合液振荡浸提２４ｈꎬ同时在提取过程中采用２次各３０ｍｉｎ的超声波辅助提取ꎬ可获得最高的提取得率(４ １２％)ꎬ但所得提取产物中除秋水仙碱外还含有秋水仙苷㊁３￣去甲秋水仙碱２种秋水仙碱的衍生物ꎬ秋水仙碱的提取率取决于溶剂体积和振荡周期ꎮ而超临界ＣＯ２萃取在３５ħ㊁ＣＯ２流速１ ５０ｍｌ/ｍｉｎ㊁ＣＯ２密度０ ９０ｇ/ｍｌ提取５ｈ的条件下ꎬ秋水仙碱的得率为１ ４４％ꎬ提取物仅含有秋水仙碱和另一种未知化合物ꎮ由于超临界ＣＯ２萃取过程使用甲醇作为改性剂ꎬ因此除节约时间外ꎬ超临界ＣＯ２萃取并未体现出更多区别于传统提取法的优势ꎮ黄旖旎等[５３]将百合粉末在８５ħ高温下糊化处理后用α￣淀粉酶进行酶解ꎬ再以三氯甲烷为溶剂浸提原料中的秋水仙碱ꎬ结果证实α￣淀粉酶酶解可以提高百合粉末中秋水仙碱的提取得率ꎬ此方法操作步骤简便ꎬ用时较短ꎬ但需使用三氯甲烷为提取溶剂ꎬ对环境有一定污染ꎮ表２简要比对了各种提取方法的提取时间㊁试剂㊁技术要点及秋水仙碱提取得率ꎬ微波助提法在提取时间和得率方面显示出极大的优势ꎬ具有较高的实际应用价值ꎮ表２㊀不同方法提取秋水仙碱的差异Ｔａｂｌｅ２㊀Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓ序号提取方法㊀㊀提取试剂㊀㊀㊀提取时间技术要点㊀㊀㊀㊀㊀秋水仙碱含量(％ꎬ质量分数)参考文献１浸提法水２４ｈ振荡提取时间㊁料液比０.３１０[１５]乙醇水溶液８ｈ０.０３６[４６]２回流法甲醇水溶液６ｈ高温加热回流㊁回流次数０.４８０[１５]甲醇４ｈ０.２２３[４７]３超声波辅助提取法甲醇４ｈ超声波功率㊁提取时间及提取温度０.２７０[１５]盐酸溶液１ｈ０.２３８[４３]４超临界ＣＯ２萃取法二氧化碳流体５ｈＣＯ２流速㊁密度㊁改性剂种类０.２６０[１６]２ｈ０.０４９[５０]５微波助提法甲醇１５ｍｉｎ微波功率㊁提取剂浓度㊁料液比０.６４０[１５]甲醇１０ｍｉｎ０.７５８[３６]６酶促提取法三氯甲烷２ｈ恒温糊化㊁碱化㊁酶解０.０８０[５３]７双水相萃取法聚乙二醇及硫酸铵水溶液５ｍｉｎ聚乙二醇相对分子质量大小㊁双水相成相体系的相比０.０９０[３０]００３江苏农业学报㊀２０２３年第３９卷第１期３㊀秋水仙碱的分离纯化３.１㊀膜分离技术膜分离技术是以选择性透过膜为分离介质ꎬ借助液体的浓度差或电位差为推动力ꎬ对混合物中的特定组分实现分离㊁提纯和浓缩的分离技术[５７]ꎮ在药物分离上常用的膜技术主要包括微滤(滤膜孔径ȡ０ １μｍ)㊁超滤(滤膜孔径１０.０~１００ ０ｎｍ)㊁纳滤(滤膜孔径１.０~１０ ０ｎｍ)和反渗透(滤膜孔径ɤ１ ０ｎｍ)４类ꎮ微滤膜为均匀的多孔薄膜ꎬ厚度为９０~１５０μｍꎬ操作压力为０.０１~０ ２０ＭＰａꎬ过滤粒径为０.０２５~１０ ０００μｍꎬ常用于截留粒径大于０ １μｍ的微粒[５８]ꎮ以微滤膜过滤粗提液是秋水仙碱提取纯化中常用的方法ꎬ０ ４５μｍ的微滤膜适用于对不同提取方法获得的秋水仙碱粗提液进行分离纯化ꎬ为后续采用ＨＰＬＣ定量测定秋水仙碱的浓度提供高纯度溶液[１５ꎬ２４ꎬ３７ꎬ４３]ꎮＧｕｍｕｓｔａｓ等[５９]从Ｃ.ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ和Ｇ.ｓｕｐｅｒｂａ的种子中提取秋水仙碱时发现ꎬ以甲醇为溶剂稀释秋水仙碱提取物再以０ ４５μｍ的微滤器进行过滤ꎬ在随后的浓度检测中没有观察到由基质引起的其他化合物干扰ꎬ说明选择甲醇溶剂和微滤分离结合的提取效果较好ꎮ３.２㊀色谱法３.２.１㊀薄层色谱法㊀薄层色谱利用涂布于平板上的物质的吸附能力的差异ꎬ使混合溶液流经固定相时被吸附ꎬ从而获得目标提取物ꎮＡｌａｌｉ等[６０]以石油醚提取２种秋水仙球茎㊁叶和花中的秋水仙碱ꎬ将粗提物溶于体积分数７０％的乙醇并以硅胶制备的薄层色谱板进行分离ꎬ秋水仙碱经分离后显示为黄色区域ꎬ将其从平板上取出溶于乙醇盐酸溶液即可用紫外分光光度法测定秋水仙碱含量ꎮＢｏｄｏｋｉ等[６１]为检测秋水仙种子中秋水仙碱的含量ꎬ采用薄层色谱法分离秋水仙碱的乙醇提取物ꎬ在温度２０~２４ħ和湿度４６％~５６％的条件下以三氯甲烷￣丙酮￣二乙胺(５ʒ４ʒ１ꎬ体积比)的溶剂体系作为流动相ꎬ混合物分离后在３５０ｎｍ反射率和２５４ｎｍ荧光模式下进行密度扫描测定ꎬ结果显示ꎬ对于来源未知的待检样品ꎬ薄层色谱法更容易消除其背景干扰ꎬ可作为快速㊁准确定性和定量测定不同基质中秋水仙碱的标准技术ꎬ具有样品预处理流程简单㊁成本较低和可高通量检测样品的优点ꎮ３.２.２㊀柱色谱分离法㊀柱色谱分离原理与薄层色谱法相同ꎬ但柱色谱分离通量大且效率高㊁适用范围广㊁操作更简单ꎮ柱色谱常用的吸附剂或载体主要有硅胶㊁聚酰胺㊁葡聚糖凝胶㊁环糊精键合凝胶㊁氧化铝㊁大孔树脂㊁纤维素粉和离子交换树脂等[６２]ꎮＫａｎｎａｎ等[６３]采用柱色谱法分离得到嘉兰种子的秋水仙碱粗提物ꎬ分离柱填充中性氧化铝ꎬ洗脱剂为体积比９７ʒ３的三氯甲烷和甲苯混合液ꎬ分离后的秋水仙碱结晶纯度高达９９ ９％ꎮＪｏｓｈｉ等[６４]用体积分数为９０％的甲醇对嘉兰种子中的秋水仙碱进行第一次提取ꎬ甲醇提取物通过真空浓缩后再用二氯甲烷进行第二次提取ꎬ获得的干物质经多步清洗去除酚类杂质之后溶于乙醇ꎬ乙醇溶液经过活性炭柱洗脱ꎬ得到分数为９６ ７％的秋水仙碱ꎬ再经中性氧化铝柱进一步纯化ꎬ最终获得质量分数为９９ ８２％的秋水仙碱ꎮ由此说明氧化铝柱可分离高纯度的秋水仙碱ꎬ并且氧化铝柱色谱可与其他分离手段结合使用ꎬ将氧化铝柱分离作为最后的纯化步骤能够使化合物的分离效果达到最优ꎮ３.３㊀树脂吸附法常规树脂分为离子交换树脂和吸附树脂ꎬ大孔吸附树脂是一类高分子聚合物ꎬ具有大孔网状结构和较大的比表面积ꎬ理化性质稳定ꎬ吸附力强且易洗脱ꎬ可循环使用[６５]ꎮ李晓静等[６６]以秋水仙碱提取液为大孔树脂的上样液ꎬ比较５种不同型号的大孔树脂(Ｄ１０１为非极性ꎬＬＳＡ５Ｂ㊁ＬＳＡ２１为弱极性ꎬＨＰＤ６００和ＬＳＤ００１为极性大孔吸附树脂)的吸附解吸性能ꎬ不同极性的大孔吸附树脂依次用ＮａＯＨ溶液㊁ＨＣｌ溶液和９５％(体积分数)乙醇浸泡㊁水洗后再进行筛选ꎬ结果表明ꎬ树脂的极性㊁比表面积和平均孔径的大小直接影响树脂的吸附容量和解析率ꎬ非极性树脂Ｄ１０１和弱极性树脂ＬＳＡ５Ｂ和ＬＳＡ２１对秋水仙碱的吸附量较大ꎬ但ＬＳＡ２１和Ｄ１０１吸附达到平衡所需时间较长ꎬＬＳＡ５Ｂ吸附达到平衡所需时间较短ꎬ且有较高解析率ꎮ在ｐＨ值２ ５㊁上样体积流量１ ５ＢＶ/ｈ㊁秋水仙碱饱和吸附量２６ ４９ｍｇ/ｇ时ꎬ用体积分数７０％的乙醇洗脱ꎬ洗脱体积流量１.５ＢＶ/ｈ的条件下ꎬＬＳＡ５Ｂ大孔树脂对秋水仙碱的吸附率达９８ １６％ꎬ秋水仙碱的质量浓度比富集前提高２５倍ꎮ近年来ꎬ树脂吸附除应用在分离纯化粉末状原料中的秋水仙碱外ꎬ用树脂吸附培养基中的秋水仙碱也有相关研究报道ꎮＮａｓｒｅｅｎ等[６７]在秋水仙种子的培养基中发现ꎬ占总含量４０％~７０％的秋水仙碱是由标记前体合成的秋水仙碱ꎬ表明在种子内合成的秋水仙碱被释放到培养基中ꎮＡｒｏｕｄ[６８]对Ｃ.ａｕｔｕｍｎａｌｅ和Ｇ.ｓｕｐｅｒｂａ进行愈伤组织及根组织的悬浮培养ꎬ用非极性的大孔树脂ＸＡＤ￣１０３崔光芬等:秋水仙碱提取分离研究进展。
秋水仙碱复合制剂用于治疗肝病或增进疗效的制作技术
秋水仙碱复合制剂用于治疗肝病或增进疗效的制作技术秋水仙碱复合制剂是一种用于治疗肝病或增进疗效的中药制剂。
秋水仙碱是一种有效成分，具有抗肝纤维化、抗肝氧化损伤和调节免疫功能的作用，对肝病有良好的治疗作用。
制作秋水仙碱复合制剂的技术需要经过以下几个步骤：1.材料准备：-秋水仙碱提取物：根据需要掌握的剂量，提取秋水仙碱。
-辅料：如淀粉、乳糖、微晶纤维素等。
2.秋水仙碱提取：-混合草药粉末：将切碎的秋水仙碱草药与适量的水混合。
-提取秋水仙碱：采用浸出、煮沸、浓缩等工艺，提取秋水仙碱成分。
3.制剂工艺：-液体制剂制备：将提取的秋水仙碱溶液与辅料充分混合，制备成液体制剂，如口服液。
-固体制剂制备：将提取的秋水仙碱溶液与辅料充分混合，通过干燥、压片等工艺制备成固体制剂，如片剂或胶囊。
4.工艺控制：-质量控制：根据药物标准，控制药物的提取效率、含量和纯度等指标，并进行质量检验。
-工艺参数控制：控制提取工艺中的温度、时间、浓度等参数，以保证制剂的质量。
5.包装与贮存：-包装：将制备好的秋水仙碱复合制剂进行包装，通常采用密封、防潮、防光等的包装材料。
-贮存：将包装好的制剂储存在阴凉、干燥的地方，避免阳光直射和湿气侵入，以保持良好的保存状况。
制作秋水仙碱复合制剂需要严格控制药品的提取和制剂工艺，以确保药物的质量和疗效。
同时，还需要进行药物的质量检验和合理的包装与贮存，以延长制剂的保质期和维护药品的稳定性。
总之，秋水仙碱复合制剂的制作技术需要在药理学和制剂学的基础上，合理选择材料、掌握提取技术和制剂工艺，以确保制剂的质量和疗效。
这将为肝病患者提供一种有效的治疗选择，增进治疗效果，改善患者的健康状况。
秋水仙碱的提取方法
共1张当前1张上一张下一张∙百合秋水仙碱的提取加工与市场前景∙技术编号：TEC00048640专利号：所属行业：农牧业[该行业投资商]成熟度：构思阶段投资额度：面议∙转让方式：面议转让费：面议我要评估关注度：1183∙标签：百合秋∙技术评估：未评估∙对接次数：0 次∙技术荣誉证书：0个技术描述:如何申请技术通会员技术简介：一、产品简介百合秋水仙碱，外文名称为Liliaceae colchicine，系从百合科植物秋水仙球茎中提取出的一种天然生物碱，其代谢产物为去甲秋水仙碱（colchiceine）。
秋水仙碱为治疗痛风最有效的药物之一，近年来有些研究者用以治疗肝硬化等，获得一定疗效；秋水仙碱还可提高癌细胞中CAMP水平，抑制癌细胞有丝分裂，抑制癌细胞的增殖。
百合又名中庭、中逢花、夜合花等，因秋天开花，故又名秋水仙；别名白百合、蒜脑藸，系属百合科（Liliaceae）多年生宿根草本植物。
其食用部分是地下由一百多片肉鳞片抱合而成的大鳞茎，由此得"百合"之名，相传，百合还有团结友爱之意。
鳞茎中有芽，鳞片自芽中心形成，渐次向外扩大。
鳞茎一般白色、灰白色或稍带浅黄色，性凉微苦。
地上茎高50～150cm，直立无分枝、茎上叶无柄。
5～9月茎顶开花一至数朵，呈总状花序排列，全花呈漏斗状或环状。
百合科类繁多，花形变化很大，花瓣有平展，有反卷；花朵有横向、直立、下垂之别；花色有白、黄、紫、红等深浅各色及复色、条纹、斑点等。
鲜花香味幽雅、千姿百态，历来为人们所赞赏，很早就被作为花卉栽培于园林花室。
在法国，人们还把百合花尊为"国花"，备受推崇。
百合性平，味甘微苦，作为一种常用中草药，百合最早收载于《神农本草经》，尔后历代本草如《金匮要略》、《本草纲目》等均有记载。
李时珍在《本草纲目》（1578年）中对百合的药性作了如下记述："味甘平无毒，主治邪气、腹胀、心痛，利大小便，补中益气。
双水相萃取丽江山慈菇中的秋水仙碱
双水相萃取丽江山慈菇中的秋水仙碱石瑶;杨亚玲;李晚谊;刘谋盛【摘要】建立了由聚乙二醇( PEG6000)与(NH4)2SO4形成的双水相体系萃取丽江山慈菇中秋水仙碱的新方法.考察了PEG分子量、PEG的浓度、(NH4)2SO4的浓度和pH值对双水相成相及秋水仙碱萃取率的影响,并结合HPLC对萃取相进行检测.结果表明:PEG6000质量分数为8％,(NH4)2SO4质量分数为20％,pH为7.0时,双水相体系对丽江山慈菇粗提液中秋水仙碱萃取率达82.09％,富集倍数为6.84倍.此方法可用于丽江山慈菇中秋水仙碱的初步分离富集,且操作简单,绿色无污染.%A new method to extract the colchicine of Iphigenia indica in aqueous two-phase system(ATPS) formed by macromolecular compound PEG6000 and (NH4 )2SO4 was investigated. The effect of the molecular weight of PEG, the concentration of PEG, the concentration of (NH4) 2SO4 and pH on phase behavior of the ATPS and extraction efficiencies of colchicines was investigated systematically. Determination the content of colchincine in the extraction phase combined with HPLC. The results showed that the best ATPS was composed of 8% PEG6000 and 20% (NH4)2SO4 ,pH 7.0. The extraction efficiency of colchicine of crude extract could reach to 82.09% ,fold enrichment reach to 6. 84. This method could be used to initial separate and enrichment the colchicine of Iphigenia indica, simple operation and friendly to the environment.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2012(024)010【总页数】5页(P1412-1416)【关键词】丽江山慈菇;秋水仙碱;双水相体系;HPLC【作者】石瑶;杨亚玲;李晚谊;刘谋盛【作者单位】昆明理工大学生命科学与技术学院,昆明650500;云南省农业科学院药用植物研究所,昆明650223;昆明理工大学生命科学与技术学院,昆明650500;云南省农业科学院药用植物研究所,昆明650223;昆明理工大学生命科学与技术学院,昆明650500【正文语种】中文【中图分类】R284.2秋水仙碱是由百合科植物秋水仙中发现的一种重要的卓酚酮类生物碱，对细胞有丝分裂有明显抑制作用，在临床中主要作为抗癌药物使用，此外，对急性痛风性关节炎有特异治疗作用，作为抗痛风药使用。
正交试验优选秋水仙提取工艺
正交试验优选秋水仙提取工艺
刘砥威;雷燕;薛桂蓬
【期刊名称】《新疆医学》
【年(卷),期】2008(038)009
【摘要】秋水仙为百合科植物秋水仙Colchicum autumnaleL的干燥鳞茎，其鳞茎、种子和全草含秋水仙碱、秋水仙胺、去甲秋水仙碱、秋水仙酰胺、秋水仙苷等，此外还含大量淀粉、黄酮苷、有机酸类，糖类、脂肪和鞣质等。
主要有效成分为秋水仙碱（Colchicine）。
其功能为：镇咳、祛痰、除风湿、临床上用于咳嗽气喘，慢性气管炎，风湿痛等疾病，对急性痛风性关节炎有特异的诊断治疗作用。
【总页数】4页(P257-260)
【作者】刘砥威;雷燕;薛桂蓬
【作者单位】新疆西部加斯特药业有限公司,830004;新疆石河子大学药学
院,832002;新疆药物研究所,830004
【正文语种】中文
【中图分类】TQ46
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秋 水 仙 为 百 合 科 （ｌ ｃａ） 植 物 秋 水 仙 １ｉ ｅｅ ｉａ （ｏｃｉ ｍ ａｔｍｎｌ Ｌ）的干燥 鳞茎 。维药 名 Ｃ ｌ ｃ ｕｕ ａ ． ｈｕ ｅ
通 阻滞 ， 消肿 止痛 。用于 治疗 关节 炎 ， 炎 ， 肝 风湿 痛 ，
甘草酸的含量叨． 解放军药学学报 ，０２ １（）３４３５ ２０ ，８６ ｉ６—６ ． 【 韦向红 ．Ｈ Ｌ ７ 】 Ｐ Ｃ法测定复ｙ＆梗止咳片中甘草酸的含量叨 ．广 ｙａ － ＝ 西 中医学院学报 ，０６９ ） ７６． ２０ ，（ ： －９ ２６
（ 收稿 日期 ：０７ ０ － ２ ２０ －５２ ）
参考文献
【 国家药典委员会 ．中华人民共和国药 典（ ｌ 】 一部） 】 【．北京 ： ｓ 化学
根据上述试验结果 ， 考虑到实际生产中药材的 来源 ， 以及制剂生产、 储藏等因素 ， 故暂定本品每粒 含甘草 以甘草 酸计 ， 不得少 于 ０８ｍｇ ． ５ 。
４ 讨 论
４１ 色谱 条件 的选择依 据Ｉ］ ． １ － ３
９ ． ％（＝ ）Ｒ Ｄ为 １ ２ ｎ ９ 。 ９３ ３ ｎ ９ ，Ｓ ． ％（ ＝ ） ７
３７ 三批样 品测 定 ．
类 风 湿 性 关 节 炎 等 Ｉ 秋 水 仙 碱 为 秋 水 仙 ３ ］ 。 （ｏ ｈ ｕ ａｔ ｎｌ） ｃ ｌ ｉ ｍ ｕ ｍ ａ 中的一种酚酮类 生物碱Ｉ 为 ｃｃ ｕ ｅ ４ ］ ， 高效抗痛风药 ， 临床应用已有 ２０多年历史嗍 从其 ０ 。 Ｋ ｏ ａｉ １４ ｘ０ｍ ５ ｍ）检测波长 ２ ０ｍ； ｒ ｓＣ８ ． ２０ ｍ，ｔ ； ｍ ｌ （６ ｘ ５ｎ 流 动相 ： 甲醇一 ． ｏＬ醋酸铵一 ０ ｍｌ ２ ／ 冰醋酸（５ ５１ ）流 ５ ： ：３ ； ４ ．
制忉．中国药房 ， ０ ，６ ７ ：ｌ－ ｌ ． ２ ５ １（ ）５ １５ ２ ０ ［ 曹红 ， ６ 】 翟红莉 ， 刘云．高效液相 色谱法测定复方乌贼墨胶囊中
相 中水相的比例以增加流动相的极性， 从而提高分
离度 ， 在等度洗脱条件下 ， 当流动相 比例调节为 甲 醇一 ． ｏ Ｌ醋酸铵一 ０ ｍｌ ２ ／ 冰醋酸（５ ５１ ） ， ５ ： ：３时 样品的 ４ ． 保 留时间、 与其 它峰 的分离度 、 理论板数等色谱参
数均符合要求 ，故最终确定色谱条件为 ：色谱柱 ：
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新疆 中医药 ２ ０ ０ ７年 第 ２ ６卷 第 ６期 （ 总第 １２期 ） １
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鳞茎 中提取 的主要成份秋水仙碱具有细胞毒作用 ， 能抑制癌细胞增长 ， 且对痛风急性发作有特异性作 用 。临床用 于治疗癌症 ， 作为抗肿瘤药 和抗痛风药同 。 本文以秋水仙碱为质量控制标准 ， 以紫外分光光度 法测定秋水仙碱含量 ， 方法准确可行 。 １ 材料 及仪器
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新疆 中医药 ２ ０ 年 ０７
第２ 卷 ６
第６ （ 期 总第 １２ ） １期
秋水仙提取工艺的研究
蒋宇宁， 付 玲， 李 茜
乌鲁木齐 ８０ ０ ） ３ ００ （ 新疆医科大学附属 中医医院 ， 新疆
摘 要 目的： 筛远秋水 仙最佳提取 工艺。方法 ： 以秋水仙碱为考察指标 ， 采用单因素及正交实验设计。结果 ： 最佳提取工艺是加药材的 １ 倍量 的 ７ ％Ｇ醇， ２ ０ 煎煮 ２次 ， 每次 １ ． 时。结论 ： ５小 按最佳工艺提取 的秋水仙碱含 量最 高， 说明提取工艺是合理 可行。
１ ． 材料 １
结果 ： 在各浓度的乙醇 中 ， ７％７醇提取的 以 ０ ， 秋水仙碱含量最高。
称： 索龙江【 １ ］ 。多年生草本 ， 喜生长在潮湿草地Ｉ ２ ］ 。秋 水仙性三级热二级干 ，功能为清泻多余粘液质 ， 开 三 个 浓 度 的 平 均 回 收 率 分 别 为 ９． ％ ， ８３ ６ １０ ３ ０ ． ％和 ９ ． ％ ， ４ ８ ３ ９次 测 定 的 平 均 回 收 率 为 ９
工业 出版社 ，０ ５ ２０ ．
［ 赵晨 ， ２ 】 黄威．高效液相色谱法测定咽清冲剂中甘草酸单 铵盐的 含量叨．时珍国医国药 ，０２ １ （０ ：９ ． ２ ０ ， １ ）５ ２ ３
【 陈万里 ， ３ 】 史蕙 ， 任渝江．Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法测定复方草玉梅含片中甘草酸
的含量［ ．药学实践杂志 ， ０ ，２ ２ ：５ ８ ． Ｊ 】 ２ ４ ２ （ ）８ — ７ ０ ［ 朱臻宇 ， ４ 】 刘宇 ， 白云 ， 赵 等．Ｈ Ｌ ／ Ａ Ｐ Ｃ Ｄ Ｄ法 同时测 定小柴胡汤 中黄芩 苷和甘草酸 的含 量 阴． 药学实 践杂志 ， ０ ，４ ６ ： ２ ６２ （） ０
速 ：． ｍ ℃。
分别取三批样品内容物， 按供试品溶液制备法 处理 ， 在含量测定色谱条件下重复测定 ２次 ， 结果 见表 ３ 。
表 ３ 三批样品测定结果
４ 样品超声时间的选． ． ２ 参考文献我们对样品选择超声提取 ， 并在实验 中对样品超声时间（５２ 、０４ ｍｎ 进行 了研究 ， １、０ ３ 、５ ｉ） 结果分别对应为 ２ ３３２ ４７２ ０ ６２ ２ ７ ｇ ｇ ． ０ ， ５ １，． ４ ，． ４ｍ ／ ２ ． ９ ９ （＝ ）从表 中数据可看 出： ｎ３ ， 超声提取 ３ｍ ｎ样品含 ０ ｉ， 量保持恒定 ， 故超声时间定为 ３ｍｎ ０ ｉ。
３ ，３ ． ３１ ３ ４
按照中国药典 ２０ ０５年版关于甘草药材项下的
流动相 比例甲醇一 ． ｏＬ醋酸铵一 ０ ｍｌ ２ ／ 冰醋酸（７ ３ ） ６： ： ３１
进行实验 ， 样品的分离度较差 ， 降低流速可使保 留 时间延长 ， 不利于高效率 的分析样 品， 故提高流动
【 李 彩东 ， ， ５ 】 田薇 梁云 ， 等．复方苦味叶下珠胶囊 的制备及质量控