茶树不同外植体组织培养与试管苗保存研究初探
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展【摘要】茶树是一种重要的经济作物，其组织培养技术的研究对于提高茶叶产量和质量具有重要意义。
本文首先介绍了茶树组织培养的背景和意义，然后详细讨论了茶树组织培养中常见的问题，包括生长激素、光照条件、营养液配方以及病原微生物的影响。
在我们指出茶树组织培养研究的发展趋势，提出了未来研究的方向，并展望了其应用前景。
通过对茶树组织培养技术的深入研究，可以为茶叶产业的发展提供重要的理论基础和技术支持，有助于推动茶叶产业的持续健康发展。
【关键词】茶树、组织培养、生长激素、光照条件、营养液配方、病原微生物、研究进展、发展趋势、研究方向、应用前景。
1. 引言1.1 研究背景茶树作为重要的经济作物之一，其繁殖和栽培一直是茶叶产业发展中的重要环节。
传统的茶树繁殖方式主要是以种子繁殖，然而这种方式存在着繁殖速度慢、品质不一致、易受环境限制等问题。
为了解决这些问题，茶树组织培养技术应运而生。
茶树组织培养是利用茶树的组织细胞进行离体培养，通过适当的培养条件，使其分化生长成新植株。
这一技术能够大大提高茶树的繁殖速度，保证茶树品种的纯度和一致性，同时减少病虫害传播的风险，对茶叶产业的发展具有重要意义。
茶树组织培养过程中仍然存在许多问题亟待解决。
茶树组织生长速度缓慢、质量不稳定、易受环境影响等。
为了更好地理解和解决这些问题，研究人员进行了大量的实践和研究，取得了一系列进展。
本文将就茶树组织培养的常见问题及研究进展进行探讨，以期为该领域的发展提供参考和启示。
1.2 研究意义茶树组织培养是茶叶产业中的重要技术手段，可以有效地改善茶树的繁殖速度和产量。
随着茶叶市场需求的不断增加，茶树组织培养技术的研究和应用已成为茶叶产业的热点。
研究茶树组织培养的意义主要体现在以下几个方面：茶树组织培养可以提高茶树的繁殖效率和质量。
传统的茶树繁殖方式主要是依靠种子繁殖，这种方式存在繁殖速度慢、繁殖率低、遗传稳定性差等问题。
通过茶树组织培养，可以大大提高茶树的繁殖速度和产量，同时保证茶树的遗传稳定性，提高茶叶的品质和产量。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树组织培养是一种重要的组织工程技术，可以用于快速繁殖和改良茶树的性状。
然而，在茶树组织培养中常常遇到一些问题，例如低发芽率、组织黑化、污染等，这些问题会影响茶树组织培养的效果。
本文将介绍茶树组织培养中常见问题的研究进展。
1. 低发芽率低发芽率是茶树组织培养中比较常见的问题之一。
该问题的主要原因是茶树组织的营养状况不好，营养不良会导致细胞分裂和生长减慢，从而影响茶树的发芽率。
为了解决这个问题，研究人员已经做了很多努力，例如优化培养基的成分、增加光照强度、调节温度和湿度等。
研究表明，添加一定量的麦芽糖和植物生长调节剂可以促进茶树的发芽，同时保证其生长健康。
2. 组织黑化组织黑化是茶树组织培养中另一个比较常见的问题。
该问题通常是由污染引起的，例如容器、培养基、试管、植物生长调节剂等等，都有可能造成组织黑化。
组织黑化会对茶树的组织工程和繁殖产生不利影响。
严重的情况下，茶树组织甚至会死亡。
为了解决这个问题，研究人员已经采取了一系列的措施，包括选用无菌材料、使用无菌技术、加强消毒等。
3. 污染如上所述，污染也是茶树组织培养中一个非常普遍的问题。
污染通常是由脏器具、不干净的手、不洁净的培养箱、培养基等造成。
污染会导致培养中的茶树受到病毒或微生物的感染，进而影响茶树的生长发育。
研究显示，使用无菌技术和可重复使用的培养器具可以显著降低污染的概率。
4. 培养周期长茶树的组织培养周期通常比较长，这是因为茶树的生长特点和细胞分裂的速率有关。
为了缩短茶树组织培养的周期，一些研究人员提出了一些方法，例如改变培养温度和光照条件、优化培养基成分、适当加入植物生长调节剂等。
这些方法可以促进茶树的生长和分裂，从而提高茶树组织培养的效率。
综上所述，茶树组织培养中存在一些问题，包括低发芽率、组织黑化、污染、培养周期长等。
为了解决这些问题，研究人员已经做了很多努力，例如优化培养基成分、改变培养条件和采用无菌技术等。
茶树不同外植体组织培养与试管苗保存研究初探
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茶树的茎段快繁与组培苗内含物变化的研究的开题报告
茶树的茎段快繁与组培苗内含物变化的研究的开题报告一、研究背景茶叶是世界三大饮料之一，而茶树是茶叶的主要原料。
传统的茶树繁殖方式为扦插繁殖，但这种方式繁殖速度慢，受气候、土壤等因素影响较大。
因此，茶树的快速繁殖技术日益受到关注。
茎段快繁是一种较为常见的快速繁殖技术，其原理是将茶树茎段移植到培养基上进行组织培养，通过分化再生形成新的茶树幼苗。
同时，茶树幼苗内含物的变化与其生长发育及适应环境的能力密切相关。
因此，研究茶树茎段快繁过程中幼苗内含物的变化情况，对于提高茶树幼苗的生长发育和适应能力具有重要意义。
二、研究目的本研究旨在通过对茶树茎段快繁的研究，探讨茶树幼苗内含物的变化情况，为茶树快速繁殖提供科学依据。
具体目标如下：1. 研究茶树茎段快繁的适宜条件和技术要点；2. 分析茶树幼苗内含物的变化情况，探讨其与生长发育及适应能力之间的关系；3. 优选茶树茎段快繁产生的优质幼苗，为茶树快速繁殖提供优良苗源。
三、研究内容本研究包含以下内容：1. 茶树茎段快繁的研究方法：确定茶树的繁殖材料、制备培养基，设置适宜的环境条件等。
2. 茶树快繁幼苗生长状况的研究：通过对茶树幼苗的形态、生理和生化指标的测定，探究茶树幼苗在茎段快繁过程中的生长规律和生理生化变化情况。
3. 茶树快繁幼苗的适应能力研究：通过对茶树快速繁殖幼苗的耐逆性、抗病性和适应性等方面的测定，分析茶树快繁产生的幼苗的生态适应性，为优选高质量的茶树繁殖苗源提供依据。
四、研究意义1. 探索茶树快速繁殖的新技术，提高茶树的繁殖效率和质量，为茶产业的发展提供技术支持。
2. 研究茶树幼苗内含物变化的规律，揭示茶树长势生长发育和适应环境的机理，为制定茶树生长管理措施提供理论依据。
3. 优选高质量的茶树繁殖苗源，为茶树生产提供优良的原材料，推动茶产业的发展。
五、研究方法1. 茶树茎段快繁技术：选择天气晴朗、温度适宜的时候采集健康茶树的新梢或下部健康茎段，切成3-5cm长的茎段，去除叶片和芽，避免微生物污染，然后将茎段消毒后移植到含有适宜营养物质和生长调节剂的培养基上，在恒温恒湿条件下进行组织培养。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树是一种重要的经济作物，其组织培养技术已经成为茶叶育种的重要手段之一。
然而，在茶树组织培养过程中，常常会出现一些问题，比如愈伤组织的形成、愈伤组织的生长和分化，以及植株的再生等问题。
本文将围绕这些问题展开讨论，并介绍一些相关的研究进展。
一、愈伤组织的形成愈伤组织的形成是茶树组织培养中一个重要的起始步骤。
然而，在实践中，愈伤组织的形成并不总是顺利的。
有研究发现，添加某些激素（如2,4-D和NAA）可以促进茶树愈伤组织的形成，但是激素的种类和浓度对愈伤组织的形成有着不同的影响，因此需要进行具体的试验。
同时，环境因素（如光照和温度）也会影响愈伤组织的形成。
研究表明，适宜的光照和温度可以促进愈伤组织的形成和生长，但是过高或过低的温度都会导致愈伤组织的死亡。
二、愈伤组织的生长和分化一旦形成了愈伤组织，接下来要做的就是让其生长和分化。
然而，在实践中，常常会出现愈伤组织长成植株的难题。
研究表明，愈伤组织的生长和分化受到多种因素的影响，如培养基的组成、激素的种类和浓度、光照和温度等。
此外，愈伤组织的生长和分化还受到植物体内生长素和细胞壁松弛酶等物质的调控。
因此，要想让愈伤组织生长和分化成植株，需要设计合适的培养条件，并进行详细的试验和调节。
三、植株的再生愈伤组织的生长和分化成功后，就可以将其转化为植物体。
然而，在实践中，植株再生也会面临一些问题，如低再生率、植株发育不良、染色体畸变等问题。
为了解决这些问题，研究者们采取了多种方法，如：调节培养基的组成、添加转化因子、优化培养条件、诱导染色体重组合等方法。
这些方法可以帮助提高植株再生率和质量，并有望为茶叶育种和生产提供一定的支持。
综上所述，茶树组织培养中常见问题的解决，需要进行详细的实验和调节，并将不同的因素合理地组合在一起，才能取得较好的效果。
相信随着技术的不断发展和深入研究，茶树组织培养技术将有望为实现茶叶增产和品质提高等目标提供有力的支持。
基于茎段外植体的茶树组培苗快繁技术研究
茶叶学报 2024，65 （1）：28−36Acta Tea SinicaDOI：10.20045/ki.issn.2096-0220.2024.01.004引文格式：李家兴，朱俊彦，张有泽，等. 基于茎段外植体的茶树组培苗快繁技术研究［J］. 茶叶学报，2024，65（1）：28−36.基于茎段外植体的茶树组培苗快繁技术研究李家兴1，朱俊彦1，张有泽1，朱木兰3，陈泓蓉1，任露露1，刘升锐1，姚明哲2*，韦朝领1*（1. 安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室/农业农村部茶树生物学与茶叶加工重点实验室，安徽 合肥 230036； 2. 中国农业科学院茶叶研究所，浙江 杭州 310024； 3. 中国科学院分子植物科学卓越创新中心，上海 200032）摘 要：【目的】目前，茶树组培苗繁育存在诱导出芽效率不高、繁殖系数较低等问题。
因此，为提高茶树种质资源保存繁育效率，丰富保存手段与技术，建立一种高效、快速、实用的基于茎段外植体的茶树组织培养高效快繁技术体系非常必要。
【方法】选用来自安徽省六安市舒城县鲍家村群体种的一个国家级品种‘报春1号’作为研究试材，对该品种进行组织培养快繁技术的探索，包括消毒、定芽诱导、不定芽诱导（I期和II期）、芽伸长、以及生根等阶段。
【结果】离体快繁：最佳定芽诱导培养基为MS+3 mg·L−1 6-苄基腺嘌呤（6-BA），诱导率达82.2%；不定芽增殖I期最佳培养基为 MS基础培养基（MS）+2 mg·L−1 6-BA+0.2 mg·L−1 萘乙酸（NAA），诱导率为77.78%，平均芽数为5.4个；不定芽增殖II期最佳培养基为MS+1 mg·L−1 6-BA +0.3 mg·L−1 NAA+2 mg·L−1噻苯隆（TDZ），诱导芽数最多（平均值为10.43个），芽苗呈绿色，叶片舒展；不定芽伸长最佳培养基为MS+0.8 mg·L−1 6-BA+0.08 mg·L−1 NAA，伸长率为63.33%；不定根诱导培养基以1/2MS培养基+3 mg·L−1 IBA效果较佳。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树组织培养是茶树繁育和增殖的一种重要手段，对茶树品种改良、遗传资源保护和利用具有重要意义。
随着现代生物技术的发展，茶树组织培养技术也得到了迅速的发展。
在实际应用中，茶树组织培养也面临着一些常见问题。
本文将对茶树组织培养常见问题的研究进展进行介绍。
问题一：细胞分化能力低茶树是一种木本植物，其组织培养中细胞的分化能力一直是制约因素之一。
目前，研究人员主要通过调节培养基成分和外激素的添加来提高茶树细胞的分化能力。
可以通过增加激素的浓度或者改变激素的比例来促进茶树愈伤组织的快速增殖和分化，从而提高茶树组织培养的成功率。
问题二：愈伤组织生长缓慢茶树组织培养中，愈伤组织的生长速度对于整个培养过程非常重要。
在实际操作中，研究人员发现茶树愈伤组织的生长速度往往比较缓慢，这不仅增加了培养周期，也增加了操作的复杂性。
针对这一问题，研究人员通过优化培养基成分、调节光照条件和温度等因素，显著提高了茶树组织的生长速度，为茶树组织培养提供了更多的选择。
问题三：组织失活和变异在茶树组织培养过程中，组织失活和变异是难以避免的问题。
这既增加了培养的难度，也影响了培养结果的稳定性。
针对这一问题，研究人员提出了一系列改进措施，包括选择适合的母本材料、加强对培养过程中环境因素的控制、建立完善的培养技术规范等，从而有效降低了茶树组织失活和变异的发生率。
问题四：植株再生率低茶树组织培养的最终目的是获得健康的植株，然而在实际操作过程中，植株再生率往往比较低。
这不仅增加了培养的成本，也限制了茶树组织培养技术的广泛应用。
为了解决这一问题，研究人员不断优化培养方法，采取了多种途径提高植株再生率，包括优化培养基成分、改善培养环境、选择适宜的植株萌发器官等，取得了一定的进展。
茶树组织培养在实际应用中存在一些常见问题，但通过科学合理的研究和技术手段，这些问题都可以得到一定程度的解决。
相信随着科学技术的不断进步，茶树组织培养技术将会得到进一步的提高和完善，为茶树繁育和遗传资源保护提供更为有效的技术手段。
茶树组培和扦插快繁体系的建立及扦插不定根发生相关因素探究
茶树组培和扦插快繁体系的建立及扦插不定根发生相关因素探究本研究以无性系'陕茶1号’、'安吉黄茶’、'龙井43’为试验材料,通过组织培养和扦插的无性繁殖的方式进行生根培养,研究两种无性繁殖方式生根的影响,初步建立了茶树组织培养快繁技术体系。
通过研究扦插生根过程中一系列生理生化指标的动态变化及不定根发生基因ARRO-1的表达分析进行研究,为快速大量生产优质茶树苗奠定技术基础,对茶树良种繁育提供理论指导意义。
试验结果如下:1、茶树组培快繁体系的建立研究外植体建立方法,筛选初代、继代和生根培养基。
(1)外植体建立。
研究了外植体种类、取样地点、取样季节、不同抗氧化剂对外植体的增殖的影响。
结果表明:在3~5月取自温室培养的半木质化的嫩枝是比较合适的外植体材料,萌发效果最好。
(2)初代培养基筛选。
研究了不同浓度的生长素及不同抗氧化剂对茶树腋芽增殖的影响结果表明:'陕茶一号’的离体新梢初代培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 3.0 mg/L+PVP 4 mg/L。
'安吉黄茶’最佳培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+3.0 mg/L GA3+PVP 4 mg/L。
附加4 g/L PVP处理,其新梢外植体的褐化率低于其它处理浓度,相对应其成活率高于其它处理。
(3)增殖培养基筛选。
考察了激素种类、浓度、配比等不同激素组合对茶树腋芽继代的增殖影响。
结果表明:'陕茶一号’离体腋芽继代培养的最佳培养基为MS+0.1IBA mg/L+6-BA 3mg/L+GA3 1.0 mg/L。
'安吉黄茶’:MS+TDZ 0.02 mg/L+IBA 0.1 mg/L。
TDZ不利于茶树叶片的展开与伸长,将'陕茶一号’继代苗转至MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 1 mg/L+GA3 1.0 mg/L;'安吉黄茶’转至MS+NAA 0.1 mg/L+TDZ 0.005mg/L的壮苗培养基培养20天有助于茶苗的叶片展开与伸长。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树是一种重要的经济作物，茶树组织培养是茶树繁殖与育种的关键技术之一。
随着现代生物技术的发展，茶树组织培养技术逐渐成熟，并在茶树种质资源保存和利用、茶树品种改良、茶树生物学研究等领域中广泛应用。
茶树组织培养中仍存在一些常见问题，需要进一步研究和解决。
茶树组织培养中的高频无菌苗形成问题。
茶树组织培养的前提是获得无菌苗，在茶树体内进行组织培养的基础上进行繁殖。
由于茶树的生理特性和离体培养条件的限制，茶树组织培养中高频无菌苗的形成率较低，影响了后续的繁殖和育种工作。
如何提高茶树组织培养的无菌苗生成率是一个亟待解决的问题。
茶树组织培养中的愈伤组织的快速形成和稳定生长问题。
茶树的茎、叶、根等组织容易形成愈伤组织，在培养基中迅速增殖。
茶树愈伤组织的形成和生长受到多种因素的制约，例如激素配比、培养基成分、光照条件等，容易出现快速失活和不稳定生长的情况。
如何优化培养基配方和培养条件，促进茶树愈伤组织快速形成和稳定生长，是茶树组织培养中需要进一步研究的问题。
茶树组织培养中的遗传稳定性问题。
茶树组织培养过程中，由于外部培养条件的改变，容易导致茶树细胞的基因组稳定性降低，出现染色体畸变、基因突变等现象，影响茶树组织培养后代的遗传稳定性和品质。
如何保持茶树组织培养代际之间的遗传稳定性，是茶树组织培养中需要进一步研究的问题。
茶树组织培养是茶树育种和繁殖的重要技术，但仍存在一些常见问题需要进一步研究解决。
通过优化培养条件、改良培养基配方、筛选遗传稳定的苗木以及研究抗性和耐逆性相关基因等方面的工作，可以推动茶树组织培养技术的发展，并为茶树的种质资源保存和利用、品种改良以及抗病虫害和逆境育种提供有力支持。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树组织培养是指利用组织培养技术对茶树进行繁殖和改良，是茶树种质资源保护和利用的重要手段。
在茶树组织培养过程中，常常会出现一些问题，这些问题不仅影响茶树组织培养的效果和品质，也制约了茶树组织培养技术的进一步发展。
本文将对茶树组织培养常见问题进行研究进展的综述。
1. 茶树组织培养的培养基培养基是茶树组织培养中最关键的因素之一。
茶树是喜肥慢生的亚热带乔木，茶树组织培养的培养基中必须包含适量的营养元素和植物生长因子，以满足茶树生长的需求。
但是，茶树对培养基的要求非常高，不仅需要适量的营养元素和植物生长因子，还需要确保培养基的质量和配方的准确性。
因此，在茶树组织培养中，开发高质量的培养基是关键技术之一。
目前，国内外学者对茶树组织培养的培养基进行了大量的研究。
其中，MS培养基是一种最经典的培养基，也是茶树组织培养的基础培养基。
MS培养基中含有17种多元素元素和3种植物生长因子，可以促进茶树的生长和繁殖。
另外，还有一些专门用于茶树培养的培养基，比如茶树MSG培养基、茶树B5培养基等。
植株再生率是衡量茶树组织培养成功与否的重要指标。
植株再生率低不仅会导致茶树组织培养效果不理想，而且会浪费大量的资源和时间。
因此，提高茶树组织培养的植株再生率是茶树组织培养技术研究的重点之一。
目前，提高植株再生率的方法主要有以下几种：（1）优化培养基的配方：根据茶树不同发育阶段的需求，优化培养基的配方，调整培养基中营养物质和植物生长因子的浓度。
（2）选择合适的外源激素：外源激素对茶树的生长和分化起到重要作用，选择合适的外源激素可以促进茶树的生长和再生。
（3）利用生物技术：茶树组织培养中利用生物技术手段，如基因转化和病毒清除技术等，可以增加植株再生率和改善植物品质。
（4）合理控制培养条件：适宜的光照、温度、湿度等条件可以改善茶树的生长环境，提高植株再生率。
茶树组织培养中的病毒感染是一个非常严重的问题，它会使茶树的生长受到影响，甚至会导致茶树发生变异或死亡。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树组织培养是一种重要的茶树苗繁育技术，可以大大提高茶树苗的育苗速度和质量。
在茶树组织培养过程中，常常会遇到一些问题，例如组织培养过程中的污染、植物激素的运用、培养基的选择等等。
为了解决这些问题，科研人员们进行了大量的研究，取得了一些进展。
下面就让我们一起来了解一下茶树组织培养常见问题的研究进展。
一、组织培养中的污染问题在茶树组织培养过程中，微生物和真菌的污染是一个常见的问题，会导致培养过程的失败。
如何有效地防止和处理污染是茶树组织培养中的一个重要课题。
近年来，一些研究表明，利用抗生素可以有效地抑制微生物和真菌的污染。
研究人员对茶树组织培养过程中常见的污染微生物和真菌进行了筛选实验，发现一些抗生素如青霉素、氨苄青霉素、链霉素等可以有效地抑制这些污染微生物和真菌的生长，从而提高茶树组织培养的成功率。
一些研究者还尝试利用化学消毒剂和紫外线等方法对培养容器和工具进行消毒，有效地控制了污染的发生。
这些研究成果为茶树组织培养中的污染问题提供了有效的解决途径。
二、植物激素的运用问题植物激素在茶树组织培养中起着至关重要的作用，可以影响茶树的生长、分化和再生。
植物激素的种类和浓度的选择对茶树组织培养的成功与否有着重要的影响，因此如何合理地运用植物激素成为茶树组织培养中的一个重要问题。
针对这一问题，科研人员进行了大量的研究。
他们在茶树的愈伤组织培养和再生过程中，对不同种类和浓度的植物激素进行了系统地筛选和比较研究，找到了对茶树再生和生长具有最佳效果的植物激素组合和浓度配比。
这些研究成果为茶树组织培养过程中植物激素的运用提供了重要的理论和实践指导。
三、培养基的选择问题在培养基的选择和优化方面，科研人员还尝试了利用生物技术手段进行改良和优化。
他们通过基因工程技术，将一些对茶树组织培养生长具有重要调控功能的基因导入到茶树的基因组中，使得茶树对特定培养基成分的需求量和利用效率得到了显著提高。
四、其他相关问题的研究进展除了上述几个方面的研究进展，茶树组织培养还涉及到一些其他相关问题的研究。
茶树的茎段快繁与组培苗内含物变化的研究
茶树的茎段快繁与组培苗内含物变化的研究本研究以茶树的茎段为材料，比较系统地研究了茎段离体培养的技术体系，初步探讨了影响茎段培养的各种因素，如：基因型、基本培养基、生长调节剂等，并进一步探讨了茶树组培苗生化成分的改变。
结果表明：（1）初代培养基因型：适制绿茶品种诱导率有明显差异，适制红茶品种如‘黔湄701<sup>#</sup>’和‘越南大叶’的诱导率差异很大，红绿茶兼制品种即适制乌龙茶品种如‘梅占’和‘楮叶齐’的诱导率没有差异。
取材部位和时间：5、6、9月时采摘的半成熟新梢的未木质化的部位为最佳离体材料。
由于品种之间的差异，各个品种的最适取材时间和取材部位约为不同。
最佳培养基：‘乌牛早’：NN69+BA3.0 mg╱L，诱导率达76％，平均芽长为0.97cm；‘平阳特早’：MS+BA1.0mg／L，诱导率达97％，平均芽长1.20 cm。
ER 基本培养基不利于茶树的初代培养基，接种在ER基本培养基上的外植体诱导时间长，诱导率低，芽短而且弱。
（2）增殖培养在茶树试管苗在进行增殖培养前，需要进行壮苗培养，有利于提高茶苗的成活率。
‘平阳特早’和‘龙井43<sup>#</sup>’的最佳增殖培养基为MS+BA3.0 mg╱L+IBA0.5mg╱L，增殖倍数分别可达2.30和3.50，平均株高分别为1.91 cm和2.59 cm。
‘乌牛早’的最适合的培养基为NN<sub>69</sub>+BA5.0mg╱L+IBA1.0mg／L，增殖倍数可达4.57，平均株高为4.46 cm。
‘黔湄701<sup>#</sup>’的最佳培养基为MS+BA1.0mg╱L+IBA1.0mg／L，增殖倍数为2.75，平均株高为2.17 cm。
附加GA<sub>3</sub>对‘黔湄701<sup>#</sup>’的增殖倍数影响不大，但平均株高能达4.92 cm。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展一、茶树组织培养常见问题1. 再生难度大茶树是一种木本作物，其再生难度较大是茶树组织培养中的一个常见问题。
从茶树叶片等组织中分离培养时，往往会出现再生率低的情况，严重影响了组织培养的效率和成本。
这是由于茶树再生难度大、再生过程受到外界环境和内部激素等因素的影响，导致了再生率低的现象。
2. 突变频繁在茶树组织培养的过程中，容易出现突变频繁的情况。
这是由于茶树在组织培养过程中容易产生异型体和变异型，导致了遗传稳定性差的问题。
突变频繁不仅会影响到茶树的再生率和生长发育，还会影响到育种和研究工作的进行。
以上所述只是茶树组织培养中存在的一些常见问题，针对这些问题，研究人员进行了大量的研究，取得了一些进展。
二、研究进展1. 诱导再生技术的改进针对茶树组织培养中再生难度大的问题，研究人员通过对培养基和激素组合的优化，改进了诱导再生技术，提高了茶树再生率。
利用生物技术手段对茶树再生的生理和分子机制进行深入研究，为提高茶树再生率提供了理论依据。
2. 遗传稳定性的保护针对茶树遗传稳定性差的问题，研究人员通过组织培养与分子标记相结合的方式，对茶树再生植株进行遗传分析和鉴定，保护了茶树的遗传稳定性，为茶树的遗传改良和新品种选育提供了技术支持。
3. 突变频繁的减少针对茶树组织培养中突变频繁的问题，研究人员通过激素处理和光照控制等方式，减少了茶树在组织培养过程中的突变频繁现象，改善了茶树再生的质量和稳定性。
三、展望茶树组织培养常见问题的研究进展取得了一定的成果，如再生率的提高、遗传稳定性的保护、突变频繁的减少等，为茶树组织培养技术的进一步完善和茶树育种、疫病防治等方面的应用提供了技术支持。
茶树组织培养仍然面临着一些挑战，如再生机制的深入研究、突变频繁的根本控制等，需要研究人员进一步加强研究，提出更加切实可行的解决方案。
茶树组织培养技术的进步不仅对茶叶生产和市场具有重要意义，还为茶树的遗传改良、抗病育种等提供了新的思路和方法。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树（Camellia sinensis）是一种经济作物，被广泛用于茶叶的生产。
茶树的培养是茶叶产业的关键环节之一，近年来受到了越来越多的关注。
在茶树组织培养过程中，常会遇到一些问题，包括愈伤组织的获取、培养基的选择、植株的再生、病原菌的污染等。
针对这些问题，科研人员进行了一系列的研究，取得了一定的进展。
一、愈伤组织的获取和培养基的选择
茶树愈伤组织的获取对于后续的组织培养非常重要。
目前常用的方法包括叶片切割、幼嫩茶芽切割等。
还有一些研究对愈伤组织的获取进行了优化，比如利用激素处理茶芽，增加愈伤组织的产生。
在培养基的选择上，研究人员发现，添加适量的激素可以促进茶树组织的生长和分化。
二、茶树植株的再生
茶树植株的再生是茶树组织培养的关键步骤之一。
通过研究，科研人员发现，适宜的培养基和激素配比可以促进茶树愈伤组织的分化和生长，从而提高茶树植株再生的效率。
研究人员还发现，光照条件和温度等环境因素也对茶树植株再生有重要影响。
三、病原菌的污染
茶树组织培养过程中，病原菌的污染是一个常见的问题。
研究人员通过种子消毒、培养基消毒等方法来控制病原菌的污染。
还有研究对培养基进行了改良，添加适量的抗生素和抗真菌剂，可以有效地抑制病原菌的生长。
茶树组织培养常见问题的研究已经取得了一定的进展。
目前，培养基的优化、愈伤组织的获取、植株的再生和病原菌的污染控制等方面的研究正在不断进行。
这些研究成果将为茶树组织培养技术的改进和茶叶产业的发展提供重要支持。
部分山茶属植物引种保育及扦插技术浅析
部分山茶属植物引种保育及扦插技术浅析摘要：山茶科（Family Theaceae)山茶属植物(Genus Camellia)具有较高观赏价值，对其原种的保育扩繁也是一重要的工作，本文应用扦插技术通过比较不同地区山茶属原种在不同的三种基质中的生长及成活状况，来探究在杭州地区合适的扦插山茶属原种的土壤基质和方法。
关键词：山茶属；引种；扦插；养护1.引言在中国悠久的花卉植物栽培历史长河中，山茶花有着不可替代的重要地位。
从最早的《神农本草经》中记载的“神农尝百草，日遇七十二毒，得茶而解之。
”可以了解到最初茶花是由于其较高的药用价值所被发现利用。
在漫漫历史发展中，人们因茶花的美观花型、花色从一开始的利用其药用价值逐渐将其应用到园林栽培之中。
据统计在山茶科（Family Theaceae)中现定名的 280个山茶属(Genus Camellia)物种中有 238个原种原产于中国，主要分布在我国浙江、江西、四川、广西、广东及山东青岛崂山地区[1]。
这也从侧面体现出了对山茶属植物的研究的重要价值及意义之所在。
在山茶属植物园艺品种丰富的今天，保存、扩繁山茶属植物原种是一项非常重要且有意义的工作。
杭州植物园山茶花栽培养护及新品种选育技能大师工作室现收集到华东地区的山茶原种22种，引入其他具有优良性状的山茶属植物39种、山茶品种105种、茶梅品种38种，建立了华东地区山茶基因库，整个基因库山茶原种保存量103种，山茶、茶梅品种401种。
山茶属植物喜林下散射光及温暖湿润、通风透光的环境。
其繁殖方法主要有播种、嫁接、压条、扦插及组培繁殖，但其中最实用的是扦插和压条繁殖[2]，本文选用扦插的方式进行相关实验，为探究不同原产地山茶属植物在杭州地区用不同基质扦插的成活率做的相关实验。
2.扦插试验前期准备为完成相关实验，提前做好扦插前的各项准备，其中包括研究植物材料的选择及备材、扦插用药的准备、扦插插床的准备、不同扦插基质的准备、以及插床保温保湿工作及材料准备。
茶树组织培养常见问题研究进展
茶树组织培养常见问题研究进展茶树组织培养是一种重要的茶树繁殖技术，其应用在茶树育种、种质资源保存和茶园更新等方面具有重要意义。
随着科学技术的不断发展，茶树组织培养技术也得到了很大的进展，许多常见问题得到了深入的研究和解决。
本文将从不同角度分析茶树组织培养中的常见问题研究进展，并展望未来的发展方向。
一、茶树组织培养中的生物学问题1.1 植物激素的调控激素是调节植物生长和发育的关键因素，其在茶树组织培养中起着至关重要的作用。
过去，茶树组织培养中常使用的植物激素组合是固定不变的，这限制了茶树的生长和发育。
近年来，研究人员通过调控植物激素的种类和浓度，成功地改善了茶树的组织培养效果，提高了茶树再生植株数量和质量。
1.3 生物材料的筛选茶树组织培养需要使用到各种生物材料，如愈伤组织、离体叶片等。
来自不同茶树品种和不同生长环境的生物材料之间存在着较大的差异，这直接影响了茶树组织培养的效果。
近年来，研究人员通过对不同生物材料的筛选和优化，成功地提高了茶树组织培养的效率和稳定性。
2.1 抗氧化物质的应用茶树组织培养过程中，受到外界环境的影响，易产生氧化损伤，导致再生植株的生长受到抑制。
近年来，研究人员通过添加抗氧化物质到培养基中，成功地提高了茶树再生植株的生长速度和存活率。
2.2 营养物质的供应茶树组织培养需要提供适当的营养物质来满足植株的生长需求。
过去常使用的培养基中营养物质含量和比例并不合理，无法满足茶树再生植株的需求。
现在，研究人员通过对营养物质的供应进行优化，成功地提高了茶树再生植株的生长速度和质量。
2.3 生长调节剂的利用生长调节剂在茶树组织培养中具有重要作用，它可以调节植物生长发育过程中的生理代谢和分化。
过去，茶树组织培养中对生长调节剂的利用并不充分，导致了植株的生长和发育受到了抑制。
现在，研究人员通过合理利用生长调节剂，成功地改善了茶树再生植株的生长状况。
3.1 培养条件对遗传稳定性的影响茶树组织培养过程中，培养条件的变化会对植株的遗传稳定性产生影响，甚至导致了植株的遗传变异。
茶树组织培养的研究进展
茶树组织培养的研究进展曹丹，金孝芳湖北省农业科学院果树茶叶研究所，湖北武汉430064摘要：从茶树外植体的选取、表面灭菌、培养基的确定及生长调节物质的确定等方面对茶树组织培养技术体系的研究进行综述，指出目前研究中存在的问题，并对今后的研究进行了展望，为进一步开展茶树组织培养研究提供参考。
关键词：茶树；组织培养；研究进展Research Advance on Tissue Culture of TeaCAO Dan,JIN XiaofangFruit and Tea Research Institute,Hubei Academy of Agricultural Science,Wuhan,Hubei 430064,ChinaAbstract:The choices and disinfections of the explants,the determinations of medium and growth regulators were reviewed for tissue culture of tea in this paper.The present problems and the research in future were pointed out.It would provide a scientific basis for further research on tissue culture of tea.Key words:tea;tissue culture;research advance茶树[Camellia sinensis (L.) O. Kuntze]属山茶科山茶属茶组，是多年生、常绿、异花授粉、木本植物。
其叶经过加工后的饮品是世界上三大消费量最大的饮料之一，对人体具有营养价值和保健功效[1]。
组织培养技术不仅可以生产大量的优良无性系，也可以打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲和等障碍，对于开展茶树种质资源的保存、新品种的培育及种性改良等方面的研究具有重要的意义。
茶树组织培养研究进展
茶树组织培养研究进展作者：郝姗来源：《南方农业·下旬》2017年第11期摘要与其他植物相比，茶树的组织培养起步较迟，但在当今组织培养迅速发展的阶段，其发展速度较快。
因为可重复性差、外植体褐化、完整植株获得困难等情况的存在，茶树组织培养至今仍未建立完善的高频再生体系。
基于此，总结了茶树组培过程中，前人对外植体、培养条件选择的研究结果，并从次生代谢产物生产、种植资源保存和良种繁育推广、加强基础研究、与新的育种方法相结合四个方面对茶树组织培养的研究工作提出展望。
关键词茶树；组织培养；外植体中图分类号：S571.1 文献标志码：B DOI：10.19415/ki.1673-890x.2017.33.0681 茶树组织培养的意义农业现代化是当前农业工作的重中之重。
茶树是我国传统的特色经济作物，近年来随着产业的不断发展，对优良茶树新品种的需求越来越迫切。
传统育种方法已培育出了一些产量高和品质优的品种，但生产上仍缺乏一些符合特定人群消费需求的优良品种，这主要是因为茶树基因具有高度的杂合性，传统的育种方法在改良茶树品种方面难度较大。
为更好地为茶农创造较好经济效益，提升茶树育种科技含量，将植物生物技术与茶常规育种技术相结合非常必要。
生物技术在育种中的需要建立高频率的遗传转化体系，高频率的遗传转化体系则依赖于高频率再生体系。
茶树组织培养快繁技术能够在短时间内用较少的植物材料进行快速培育，生产出较多植株。
茶树组织培养具有生产周期短、繁殖系数高、易继承亲本的优良性状等特点。
在茶树实际生产中，对于优良无性系品种快速繁殖体系的建立，加快茶新优品种的推广种植具有重大的实践意义。
组织培养由于具有繁殖迅速、去除病毒等优点而在茶树繁殖上得以利用。
但茶树组培过程中的一些问题，如愈伤组织易褐化、难以分化、基因不能按序表达等制约了茶树组织培养的进程。
目前，要获得经过多次继代培养的完整植株，同时保证植株在大田中存活仍有较大的难度，使组织培养在茶树无性快繁、保存种质资源、建立外源基因转化的受体系统等育种中的应用还有较大距离。
第五组茶树组培
4.2茶树组织培问题的原因
4.2.1褐化原因
植物组织培养中的褐变主要是由酶催化引起的
褐 化 机 理
非酶促褐变是由于细胞受胁迫或其他不利条件影响所 造成的细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡，即坏 死形成的褐变现象，并不涉及酚类物质的产生 1. 植物的种类与基因型
褐 化 原 因
2. 外植体的部位
3. 培养基的组成成分
2.2解决茶树育种问题
培育有特殊功能的茶树
如：
（1）低咖啡碱茶树； （2）高GABA（γ-氨基丁酸）茶树； （3）高甲基化酯型儿茶素茶树；
参考文献： 1.Prashant et al.(2010) Producing low-caffeine tea through post-transcriptional silencing of caffeine synthase mRNA.Plant Mol Biol 2. 倪娟桢,等.γ-氨基丁酸茶的研究进展[J]茶叶,2014 3.Masanobu et al. (2010)Cloning of a Novel O-Methyltransferase from Camellia sinensis and Synthesis of O-Methylated EGCG and Evaluation of their Bioactivity. Agri. Food. Chem.
茶树组织培养
1
• 茶树组织培养发展历史及现状 • 组织培养解决茶树育种、生产上的问题 • 茶树组织培养的方法 • 茶树组织培养存在的问题及解决办法 • 茶树组织培养的未来研究重点
2
3
4
5
1.茶树组织培养发展历史及现状
组 织 培 养 定 义
组 织 培 养 历 史
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茶树再生体系的建立一直是茶树生物技术研究 中的难题，因此转基因等生物技术在茶树中应用及 茶树基因功能研究进展缓慢。茶树组织培养研究虽 然已有较长历史 ， ［１－３］ 许多学 者 以 茶 树 不 同 组 织 和 器官为材 料 做 了 较 深 入 研 究： 包 括 腋 芽 培 养 ； ［４－５］ 茎 段 培 养 ； ［１，６－８］ 叶 片 培 养 ； ［９－１２］ 子 叶 培 养 ； ［１３－１４］ 下 胚 轴 培 养 ； ［１５－１６］ 胚 培 养 ； ［１７－１８］ 花 药 培 养［１９－２０］ 等。同时 还 进 行 了 遗 传 转 化 研 究 。 ［２１－２６］ 但 通 过 愈 伤组织途径分化出完整茶树植株的再生体系尚未稳 定建立。福鼎大白茶是目前国内种植面积最大的品 种之一，也是许多茶树品种如 福 云 ６ 号、７ 号 等 的 亲本之一。本试验通过对茶树品种福鼎大白茶自然 结实种子及其幼苗，较全面地取其不同组织和器官 作为外植体，对茶树再生体系的建立做初步探索。
福建农业学报 ２５（６）：７２６～７３０，２０１０
Ｆｕｊｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
文章编号：１００８－０３８４ （２０１０）０６－７２６－０５
茶树不同外植体组织培养与试管苗保存研究初探
陈志辉
（福 建 省 农 业 科 学 院 茶 叶 研 究 所 ， 福 建 福 安 ３５５０００）
１４ｈ， 并 观 察 愈 伤 组 织 继 代 培 养 生 长 情 况 。 １．２．４ 愈伤组织分 化 培 养 继 代 培 养 后 得 到 大 量 愈伤组织，在无菌超净工作台上把愈伤组织转到不 同分化培 养基 上分 化 培 养，放 置 于 光 照 培 养 室， ２６℃，每天光 照 １４ｈ， 并 观 察 愈 伤 组 织 分 化 培 养 情况。 １．２．５ 试 管 苗 保 存 试 验 选 用 ２ 种 不 同 培 养 基 ，每 种培养基分装５根 试 管，取 含 一 腋 芽 的 短 穗 接 种 于 试 管 培 养 基 中 ，一 个 短 穗 一 根 试 管 ，先 放 置 于 光 照 培 养室，２６℃，每天光照 １４ｈ，后 移 入 暗 室 生 长，２５℃， 获得完整植株后移回光照培养室。
化培养基中分化生长，绝大多数愈伤能长出绿色小突起，有一部分愈伤能分化出根。
关键词：茶树；愈伤组织诱导培养；愈伤组织继代培养；愈伤组织分化培养；试管苗
中 图 分 类 号 ：Ｓ ５７１．１；Ｑ ８１３
文 献 标 识 码 ：Ａ
Ａ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｅｘｐｌａｎｔ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｌａｎｔｌｅｔ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｅａ
摘 要：选取福鼎大白茶的种子、子叶、叶片、根、短穗作为外植体，进行愈伤组织诱导培养、愈伤组织继代
培养和愈伤组织分化培养，结果表明：（１）叶片是诱导愈伤组织最好的外植体，适合的诱导 培 养 基 为 Ｎ６＋２，４ Ｄ
（２．５ｍｇ·Ｌ－１）；（２） 愈伤组织 通 过 多 次 继 代 培 养 扩 大 繁 殖 ，可 获 得 充 足 的 愈 伤 组 织 ； （３） 愈 伤 组 织 在 ２０ 种 分
ｂ），还有部分分化培养基能使愈伤 组 织 分 化 培 养 出根 （表３和图１ ｃ），但在２０种分化培养基中都 没有分化出芽，最终没有获得完整植株。茶树再生 体系的建立一直是茶树生物技术的难题，本试验虽 然没有完整的建立起再生体系，但愈伤组织的诱导 和继代培养已不是问题，试验中愈伤组织分化出根 也给我们提供了信心，因为根和芽只是植物不同方 向生长的器官，能分化出完整的根，是否预示着通 过合理的激素搭配有可能分化出芽，当然这还需要 大量的实验去验证。
ｂｙ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ；ａｎｄ （ｃ）ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｏｆ ｍｏｓｔ ｃａｌｌｉ ｗｅｒｅ ｇｒｅｅｎ ｏｎ ｔｈｅ ２０ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａ ｔｅｓｔｅｄ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｒｏｏｔｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｃａｌｌｉ ｏｎｌｙ ｏｎ ｓｏｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｄｉａ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｔｅａ （Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）；ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ；ｃａｌｌｕｓ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ；ｃａｌｌｕｓ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ；ｔｅｓｔ－ｔｕｂｅ ｐｌａｎｔｌｅｔ
７２８
福建农业学报
第 ２５ 卷
养基进行摸 索，每 种 分 化 培 养 基 分 装 ８ 个 三 角 瓶 （１００ｍＬ 的三角瓶里装约 ５０ ｍＬ 分化培养 基）， 每 瓶 放 ６～７ 颗 愈 伤 ， 分 化 情 况 见 表 ３。 从表３中可以看出绝大多数分化培养基能使愈 伤转绿，并在愈伤上长出大量的绿 色 小 凸 起 （图 １
表 ２ 茶 树 愈 伤 组 织 继 代 培 养 情 况 Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｅａ ｃａｌｌｕｓ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ
培养基
愈伤组织生长情况
① Ｎ６＋２，４ Ｄ（２．５） ②Ｎ６＋２，４ Ｄ（２．０） ③ ＭＳ＋６ ＢＡ（２．０）＋ＫＴ（２．０）＋ＮＡＡ（０．２）＋ＩＡＡ（０．２） ④１／２ＭＳ
ａｎｄ ｓｈｏｒｔ ｓｔｅｍｓ ｆｏｒ Ｃａｍｅｌｌｉａ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｃｖ．Ｆｕｄｉｎｇｄａｂａｉ ｗｅｒｅ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｍａｔｅｒｉａｌ ａｎｄ ｍｅａｎｓ ｆｏｒ
ｐｒｅｓｅｒｖｉｎｇ ｔｅａ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ（ａ）ｔｈｅ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｐｌａｎｔ ｆｏｒ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｃａｌｌｉ ｕｓｉｎｇ Ｎ６ ＋２，４ Ｄａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ２．０ｍｇ·Ｌ－１ ａｓ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ；（ｂ）ａｇｒｅａｔ ｄｅａｌ ｏｆ ｃａｌｌｉ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ
愈 伤 组 织 生 长 由 慢 到 快 ，４０ｄ 后 体 积 变 大 ３、４ 倍 。 愈 伤 组 织 生 长 由 慢 到 快 ，４０ｄ 后 体 积 变 大 ３、４ 倍 。 愈 伤 组 织 颜 色 转 绿 ，生 长 由 慢 到 快 ，４０ｄ 后 体 积 变 大 ３、４ 倍 。 愈 伤 组 织 颜 色 转 绿 ，生 长 由 慢 到 快 ，４０ｄ 后 体 积 变 大 ３、４ 倍 。
ＣＨＥＮ Ｚｈｉ－ｈｕｉ
（Ｔｅａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｆｕｊｉａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｆｕ’ａｎ，Ｆｕｊｉａｎ ３５５０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅａ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｓｅｅｄｓ，ｃｏｔｙｌｅｄｏｎｓ，ｌｅａｖｅｓ，ｒｏｏｔｓ
１ 材料与方法
１．１ 材 料 １．１．１ 供试材料 茶 树 品 种 福 鼎 大 白 茶 自 然 结 实 成 熟 种 子 约 ２０～３０ 粒 。
１．１．２ 培养基 以 Ｎ６ 或 ＭＳ 为 基 本 培 养 基 外 加 各种植物激 素， 各 种 培 养 基 配 方 详 见 表 １～４， 所 有培养基灭菌后备用。 １．２ 方 法 １．２．１ 茶 树 外 植 体 的 获 得 取 约 １０ 粒 种 子 ， 去 除 外壳及种皮， 在 无 菌 超 净 工 作 台 上 用 ７０％ 酒 精 消 毒１ｍｉｎ，接着放在 ０．１５％ 的 升 汞 中 消 毒 １５ ｍｉｎ， 再用灭菌 水 漂 洗 ４～５ 次， 接 种 于 １／２ＭＳ 培 养 基 中，放置 于 光 照 培 养 室，２６℃， 每 天 光 照 １４ ｈ， 等 长 到 １ 芽 ３、４ 叶 后 ， 切 取 不 同 器 官 作 为 外 植 体 。 １．２．２ 愈伤组织诱 导 培 养 切 取 的 每 一 种 外 植 体 的 数 量 都 是 １０ 个 ， 另 取 １０ 粒 成 熟 种 子 作 为 外 植 体 （种 子 消 毒 方 法 同 上 ）。 在 无 菌 超 净 工 作 台 上 把 不 同 外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，放置于光照 培养室，２６℃，每 天 光 照 １４ｈ， 并 观 察 愈 伤 组 织 诱导培养情况。 １．２．３ 愈伤组织继 代 培 养 把 诱 导 培 养 所 得 少 量 愈伤组织在无菌超净工作台上继代培养于不同的继 代 培 养 基 中 ， 放 置 于 光 照 培 养 室 ，２６℃ ， 每 天 光 照
叶片
Ｎ６＋２，４ Ｄ（２．５）
叶 片 切 口 处 长 出 颗 粒 状 乳 黄 色 愈 伤 组 织 ，并 逐 渐 沿 着 切 口 边 缘 越 长 越 多 。
根
１．Ｎ６＋２，４ Ｄ（２．５）
沿着伤口长出乳黄色愈伤组织。
２．ＭＳ＋６ ＢＡ（２．０）＋ ＫＴ（２．０）＋ ＮＡＡ （０．２）＋ＩＡＡ（０．２）
收 稿 日 期 ：２０１０－０９－０２ 初 稿 ；２０１０－１１－２９ 修 改 稿 作者简介：陈志辉 （１９７５－），男，助理研究员，从事茶树种质资源与遗传育种研究 基金项目：福建省属公益类科研院所基本科研专项 （２０１０Ｒ１０１４－４）
第６期
陈志辉：茶树不同外植体组外植体诱导培养获得的愈伤组织数量较 少，需要通过继代培养扩大繁殖才能得到足够的愈 伤组织。愈伤组织在４种继代培养基上的生长情况 如表２所示。
表 １ 不 同 茶 树 外 植 体 愈 伤 组 织 诱 导 培 养 情 况 Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｅａ ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅａ ｅｘｐｌａｎｔｓ
从表２可以看出愈伤组织在４种培养基上生长 状况均良好，通过继代培养后可得到足够多的愈伤 组织。若试验需要更多愈伤组织，只需把大块愈伤 组织分成小块愈伤组织，多次继代培养即可。
２．３ 愈 伤 组 织 分 化 培 养 茶树再生体系建立的最后一步也是最关键一步
是愈伤组织分化培养出完整的植株，这也是茶树转 基因的一个必经 途 径。 本 试 验 配 置 了 ２０ 种 分 化 培