牛乳中_乳白蛋白和_乳球蛋白含量的变化特性

蛋白 , 它所特有的 4 个天冬氨酸残基的肽循 环位置均能 结合 钙离子 , 有利 于 - 乳白蛋白的工业分离纯化。 - 乳 球蛋白 ( lacto globulin) 是 另 一 种 重 要 的 牛 乳 清 蛋 白 , 占 总 蛋 白 质 12% 左右 , 占 乳清蛋白 50% 左右 , 等电 点 pH 5. 2, 相对 分子 量为 18 000 D, 由 162 个氨基酸组成 , 牛乳中含量为 2. 0~ 4. 0 mg/ mL。 - 乳 球蛋白的 水解物质或 分子修饰物 , 具有 降胆 固醇与抗氧化等生 理活 性。 - 乳 球蛋 白 是婴 儿牛 乳 过敏 症 的主 要致 敏原 , 降 低 - 乳球 蛋白 的含 量有 助于 改善 婴儿 过 敏 [ 1- 3] 。据报道 [ 4- 7] 正常牛 乳中 - 乳 白蛋 白、 - 乳球 蛋白 含 量随饲养方式、 泌乳期 及季节 等因 素而发 生一 定的 变化 , 但 两种蛋白比例会在 一定 范围 内恒定 不变。此 特性 可对 相关 产品的生产与研发提供一定参考理 论依据一些龙 头乳品企业 奶源 重点逐渐依托于大小型牧场 , 但由于中国牧 场仍处于起 步阶 段 , 因此相关牧场原料 乳成分 变化 基础研 究报 道较 少 , 故研 究 - 乳白蛋白和 - 乳球蛋 白随季 节变化规 律意义 重大 , 如 - 乳白蛋白含量高可 考虑加 工附 加值高 乳制 品 , - 乳球 蛋白 含量低可考虑加工抗腹泻奶粉 , 利用 - 乳白 蛋白和 - 乳 球蛋 白特性可判定牛乳质量等。 本试验利用毛细 管电泳 法主 要研究 牧场 牛乳中 - 乳白 蛋白和 - 乳球蛋白随季节变化的规律 , 旨为 调整生产加 工参 数及改进质量控制提供理论依据。
Abstract: In order t o st udy t he variati on of -l actalbu min and -lact oglobul in bovine milk in dif f erent seas on , detect ed t he cont ent ion of samples by capillary elect rophoresis f rom J anu ary t o Decem ber. A s t he result s , t he cont ent ion of -lact albumi n reached t o t he maxim um val ue in January, as 1. 34mg/ mL, and t he m inimum value in J uly, as 0. 68mg/ mL. Th e cont ent ion of -lact oglobul reach ed to t he maxi mum val ue in Febru ary, as 3. 46 mg/ mL, and t he min imum value in A ugus t, as 2. 15 m g/ mL. It w as sh owed t hat t h e cont ent of -lact al bumin and - lact oglobul had a negat ive correl at ion w it h t h e season. Keywords: b ovin e mil k; - Lactalbum in; - Lact oglobu l; s eason; capil lary elect rophoresis
S UN Guo -q ing
康小红
K A N G X i ao - hong
生庆海
SH EN G Qi ng-hai
刘卫星
L I U W ei-x i ng
011500)
( 内蒙古蒙牛乳业 ( 集团 ) 股份有限公司研发中心 , 内蒙古 呼和浩特
( I nner M ongo lia M eng N iu D air y I ndustr y ( Gr oup ) Co. . L td R& D Center , H uhhot, I nner M ongolia 011500, China) 摘要 : 为研究牧场牛乳中 - 乳白蛋白和 - 乳球蛋白随 季节变 化规律 , 利用毛细管电泳法分别检测 1~ 12 月份牛乳 样品中 - 乳白蛋白和 - 乳球蛋白 含量 。 结 果表 明 , - 乳白 蛋白 含量 1 月份最高 ( 1. 34 mg / mL ) , 7 月份含量 最低 ( 0. 68 mg / mL ) ; - 乳球蛋白含 量 2 月 份最 高 ( 3. 46 mg/ mL ) , 8 月 份 最低 位 ( 2. 15 mg / mL ) 。 说明牛乳中 - 乳白蛋白和 - 乳球蛋 白含量 与季节气候温度负相关 。 关键词 : 牛乳 ; - 乳白蛋白 ; - 乳球蛋白 ; 季节 ; 毛细管电泳法
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材料与方法
从呼和 浩特 养殖地 区选 择 3- 5 年 龄泌
1. 1 材料 1. 1. 1 样品采集 乳期荷斯 坦奶牛 200 头以 上的牧 场 , 选择 50 头均 日产 奶量 为 30 kg 左右、 无严重病史的 荷斯坦 奶牛 , 每月从 以上 50 头 奶牛中随机采集 5 个牛乳样品 , 连续收集 12 个月。
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2. 1
结果与讨论
- 乳白蛋白和 - 乳球蛋白检测结果 - 乳白蛋白和 - 乳球蛋白检测结果见表 1 。
式 , 压力 选择为 1. 379 kPa, 进样时间为 5 s, 进样容量 控制在
2. 2 牛乳中 - 乳白蛋白随季节变化规律 由表 1 可知 , 1~ 12 月 份 - 乳 白蛋白 含量组 间差异 显著 ( 10. 01< P< 0. 05) , 1 月份到 7 月 份 - 乳 白蛋白 含量有 逐渐 降低现象 , 而 8 月份 到 12 月份 有主 见升高 现象。该 结果 与 Dellamo inica 等 [ 4] 研究结果一致。 1 月份乳中 - 乳 白蛋 白达 最高为 1. 34 mg / mL ; 7 月份达最低为 0. 68 mg / mL 。这可能 由不同季节奶牛日饮水量差异导致。 2. 3 牛乳中 - 乳球蛋白随季节变化规律 由表 1 可知 , 1~ 12 月份 - 乳 白蛋白含 量组间差异 显著 ( 10. 01< P< 0. 05) , 从 1 月份到 8 月份 - 乳 球蛋白含量 有逐 渐降低现象 , 而 9 月份 到 12 月份有明 显升高现象 , 该结 果与 N gkw aihang 等 [ 8] 研究结果一 致。 2 月 份乳 中 - 乳 球蛋 白含 量达最高 , 为 3. 46 mg/ mL。 8 月份最低为 2. 15 mg / mL 。 2. 4 牛乳中 - 乳白蛋白和 - 乳球蛋白相关 性分析 由表 2 可知 , - 乳白蛋白和 - 乳球蛋 白比值 6、 7 月 份比 值最高为 3. 4, 1 月份比值最低为 2. 5 。原因可 能是虽然 - 乳 白蛋白和 - 乳球蛋白 含量 会随牛 乳的 组分会 因季 节因 素的 影响而发生一定的变化 , 但牛乳体系中两种 蛋白随季节 变化
T ris 、 乙 二胺四乙酸、 - 巯基 乙醇、 3 - 吗 啉代丙烷 磺酸、 尿 素、 柠檬酸、 柠檬酸三钠、 氢氧化钠 : 均为市售分析纯 ; - 乳白 蛋白和 - 乳球蛋白乳 铁蛋白标准 品 : 美 国 sig ma aldr ich 试剂公司 ; 超纯水机 : M IL LI - Q, 美国 M illipore 公司 ; 高压 毛细 管电 泳仪 : P/ A CE M D Q, 美 国贝 克曼 库尔 特 公司 ; 超声波清洗机 : 1875D, 美国 Cr est 公司 ; 旋涡 混合器 : V O RT EXG EM IE2, 美国 Scient ific Instr u ments 公司 ; 台式高速冷冻离心机 : Z - 36H K, 德国 H ermle 公司。 1. 2 方 法 1. 2. 1 40 电泳条件 检 测 参 数: 毛 细 管 柱 子 温 度 控 制 在 , 使 用直径为 75 m 、 长 度为 600 mm 的未 涂层石 英毛
作者简介 : 孙国庆 ( 1981- ) , 男 , 硕士。 E -mail: sgqvict or@ 163. com 通信作者 : 生庆海 收稿日期 : 2010- 02- 15
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营养与功能
1. 1. 2 试验药品 与设备
2010 年第 3 期
利用 - 乳球蛋 白标 准 品配 制浓 度 分别 为 0. 125, 0. 25, 0. 5, 1、 2 mg / mL 的标准 溶液。摇匀 后使用 高压毛 细管 电泳 分析 , 积分 后的 平均 峰 面积 分别 为 14 112, 33 124, 72 110, 152 088, 378 089, 利用软件得出标准 曲线 , 其线 性回归 方程 为y = 5 10- 6 x + 0 . 110 8 , R 2 = 0. 991 8, 线 性 范 围 0. 125~ 2 mg/ mL ( 图 2) 。
牛乳中蛋白会 随饲养 方式、 品种 、 泌 乳期 及气温 等因 素 而发生一定的变化 , 其中泌乳期和气候 的影响较大。 牛乳中 蛋白含量变化特性对加工性能、 产品特性和 质量控制 起决定 性作用。 - 乳白蛋白 ( - lacta lbumin) 是乳 清蛋白 主要成 分之 一 , 占总蛋白 3. 5% , 占乳清蛋白 20% 左右 , 等电 点 pH 4. 8, 相对分子质量约为 14 000 D, 由 123 个 氨基酸 组成 , 牛 乳中 含量为 0. 5~ 2 mg / mL 。 - 乳白蛋白是惟 一能结 合钙的 乳清
细管柱 , 紫外光检测器 , 波长 214 nm, 工作电压为 23 kV 。 1. 2. 2 样品前处理 把 5 个样品分 别装入 15 mL 的离心管 中 , 在 3 500 r/ min 离 心 条 件 下 离 心 10 min, 离 心 温 度 为 4 , 弃上层脂肪。准确提取 100 L 样品置入 0. 2 mL 离心 管 , 再提 取 400 L 样品缓冲液加入离 心管内 , 摇匀之 后提取 40 L 样品稀释液加入样品管中 , 使用超声 波清洗 3 min, 静 置备用。 1. 2. 3 进样 容量 100 L 以内。 1. 2. 4 操作步骤 备 用样品 放置 于仪 器样品 槽中 , 设 置电 泳条件后开始通电 进行 样品 分离 , 经 过 30 min 后阻 断电 源 停止样品分离 , 每个样品重复 3 次 , 取出样品弃掉。 1. 2. 5 标准曲线 的制作 利用 - 乳白蛋白 标准品配 制浓度 分别为 0. 125, 0. 25, 0. 50, 1. 00, 2. 00 mg/ mL 的 标准 溶液 。 摇匀后使用高压毛细管电泳分析 , 积分后的 平均峰面 积分别 为 32 114, 76 142, 151 022, 312 457, 605 687, 利用 软件 得出 标准曲 线 , 其 线 性回 归方 程 为 y = 3 10- 6 x + 0 . 004 1 , 检测 标 准品 和 样品 时采 用 压力 进样 方