_蛋鸭血清和卵黄中禽流感抗体相关性试验研究

表１
试验研究
后 ３０ｄ 内没有必要进行免疫抗体监测。 强 免 ３０ｄ 后 ， 血 清 与 卵 黄 直 接 稀 释 、血 清 与 萃 取 检 测 结
果的均值差都在 ０．８ 以下， Ｔ 检验结果都是差异不显著， 由此 表明， 在这个时期可以用卵黄代替血清进行免疫抗体监测。 结果见表 １。
由表 １ 还能看出， 强免 ３０ｄ 后卵黄直接稀释与萃取两种 由表 １ 还能看出， 强免 ３０ｄ 后卵黄直接稀释与萃取两种方法 检 测 结 果 的 均 值 差 都 在 ０．３５ 以 下 ， Ｔ 检 验 结 果 差 异 不 显 著 。 由此可知， 卵黄萃取与卵黄直接稀释所得结果基本一致， 因 此， 可以用卵黄直接稀释代替血清进行抗体监测。 ２．２．２ 个 值 分 析 固 定 组 和 扩 大 试 验 组 强 免 差 １ 个 效 价 以 内 的 有 ２４９ 份 占 ８９．２４％。 由 此 表明， 强免 ３０ｄ 以后， 血清、卵黄直接检测和萃取三种方法所 得结果比较一致， 尤其是卵黄直接检测和萃取结果更为吻 合。见表 ３。
３结论 试验结果表明， 蛋鸭在禽流感免疫抗体监测中在一定时
以后至整个免疫期结束， 血清抗体与卵黄抗体具有良好的一 致性和相关性， 用卵黄可以代替血清进行 ＨＩ 试验。
固定组和扩大试验组强免 ３０ｄ 以后 ２７ 次检测血清和卵 黄 ２７９ 组份， 血清－ 卵黄直接测得抗体效价等于和相差 １ 个 滴度以内的有 ２１０ 份占 ７５．２７％， 血清－ 萃 取 抗 体 效 价 等 于 和 相差 １ 个效价以 内 的 有 ２１６ 份 占 ７７．４２％； 卵 黄 直 接 测 得 和
近日 ＷＨＯ 指出鸭子是禽流感病毒的主要携带者。中美 两国研究人员还通过试验发现， 不断变异的禽流感病毒在鸭 子身上突变之后， 大大提高了对老鼠等哺乳动物的致命性， 而人类也面临着同样的危险。因此， 做好高致病性禽流感的 防控工作， 尤其是控制好鸭子这一传播途径， 已成为有关部 门及广大兽医工作者和养禽场、户的当务之急。但是， 常规的 检测方法是采集鸭的静脉血， 检测血清中免疫抗体。这种方 法在采血时对鸭造成惊吓而引起产蛋率降低甚至死亡， 使养 殖户受到很大的经济损失。因此， 养鸭户对抗体监测有很大 的 抵 触 情 绪 。本 研 究 的 目 的 就 是 对 免 疫 鸭 群 血 清 和 卵 黄 中 的 Ｈ５ 亚型高致病性禽 流 感 抗 体 进 行 监 测 ， 比 较 血 清 和 卵 黄 ＨＩ 效价的差异， 并找出其相关性， 。从而在今后的 Ｈ５ 亚型高致 病 性 禽 流 感 抗 体 监 测 中 用 鸭 蛋 代 替 血 清 。这 不 仅 保 证 了 养 鸭 户的经济利益， 消除养鸭户对抗体监测的抵触情绪， 也减少 因采血而需要的财政支出。 １ 试验材料与方法 １．１ 试 验 材 料 重 组 禽 流 感 病 毒 灭 活 疫 苗 （ Ｎ５Ｈ１ 亚 型 ， Ｒｅ－ １ 株 ， 禽 用 ） ， 批 号 为 ： ２００６０４２８， 哈 兽 研 出 品 ； 禽 流 感 Ｈ５ 亚型抗原和血清， 哈兽研出品。 １．２ 试验动物 健 康 产 蛋 麻 鸭 ７００ 只 ， 同 品 种 成 公 鸭 ６ 只 。 鸭只个体差异不显著， 未曾免过禽流感疫苗。 １．３ 试验鸭处理 １．３．１ 检测 试验前母鸭采血 ２０ 份， 公鸭 ６ 份， 检测禽流感 抗体效价均在 ３Ｌｏｇ２ 以下。 １．３．２ 分 组 随 机 将 母 鸭 分 成 ３ 组 ， Ａ 组 ８０ 只 为 随 机 采 样 组 ； Ｂ 组 ２０ 只 为 固 定 组 ； Ｃ 组 ６００ 只 为 扩 大 试 验 组 。Ａ、Ｂ 两 组鸭群在本所饲养场饲养。Ｃ 组在保定市焦庄乡夏某的鸭场 饲养。以上 ３ 组鸭群试验期间采用相同的饲料和饲养管理措 施。 １．３．３ 免疫 按常规免疫剂量（ １ｍＬ／ 只） ， 对试验鸭群进行 免 疫 接 种（ 公 鸭 除 外 ） ， 并 于 首 免 后 ２４ｄ 使 用 同 样 剂 量 进 行 加强免疫。 １．４ 免疫监测 １．４．１ 采样 于加强免疫 后 ， 每 １０～２０ｄ 各 组 分 别 采 血 １０～ ２０ 份。在采血的同时收集各组相对应的鸭蛋 １０～２０ 枚。 １．４．２ 测 定 血 清 样 品 按 照 《ＧＢ／Ｔ １８９３６～２００３ 高 致 病 性 禽 流 感 诊 断 技 术 》规 定 的 方 法 检 测 。卵 黄 采 取 直 接 稀 释 和 萃 取两种方法进行 ＨＩ 效价测定。萃取方法为： 取卵黄 １ 份， 加 ＰＢＳ 液 １ 份 做 １：１ 稀 释 ， 然 后 再 加 氯 仿 ２ 份 ， 充 分 振 荡 均 匀 ，
室 温 静 置 ３０ｍｉｎ， ３０００ 转 ／ｍｉｎ 离 心 ５～１０ｍｉｎ， 取 上 清 液 用 于 检测， 其测定方法同血清。 ２ 结果与分析 ２．１ 宏观分析 由图 １～图 ３ 可 以 看 出 ， 首 免 后 ５４ｄ（ 图 中 D 标志） 内（ 即 强 免 后 ３０ｄ 内 ） ， 血 清 抗 体 上 升 快 ， 卵 黄 抗 体 的 上升要滞后于血清抗体的上升。因此， 图中三条曲线比较分 散； 而强免 ３０ｄ 后， 三种试验方法所得试验数据基本一致， 图 中三条曲线也比较吻合。
图 １ （ 注： ５４* 即强免后 ３０ｄ）
图 ２ （ 注： ５４* 即强免后 ３０ｄ）
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２．２ 数据分析 ２．２．１ 平均值分析 对随机组、固定组和扩大试验组 ４５ 次 近 ７００ 个样品组份检测 的 结 果 均 值 进 行 Ｔ 检 验 ， 强 免 后 ３０ｄ 内 ， 血 清 与 卵 黄 直 接 稀 释 、血 清 与 萃 取 检 测 结 果 的 均 值 差 都 在 １．９ 以上， Ｔ 检验结果都是差异极显著， 说明在这个时期不 能用卵黄代替血清进行免疫抗体监测； 而在生产实践中免疫
试验研究
蛋鸭血清和卵黄 中禽流感抗体相关性试验研究
白玉坤 １， 孟 艳 ２， 杨秀女 ２， 冯雪岭 ３， 武秋双 ２， 郑丽丽 １， 景建江 ４
（ １． 河北省疫病防控中心， 保定 ０７１０００； ２． 河北省畜牧兽医研究所， 保定 ０７１０００；
３． 河北省畜牧兽医局， 石家庄 ０５００３１； ４． 河北省邢台县农业局， 邢台 ０５４００１）
由于卵黄萃取和卵黄直接稀释所得检测结果基本一致， 而用卵黄直接稀释进行监测， 操作简便， 成本低廉， 因此， 仅 使用卵黄直接稀释就可以代替血清进行监测， 而没必要用卵 黄萃取法。
畜牧兽医科技信息 ２００７．０８ ３５
检测血清和卵黄 ４６ 组份， 血清 ＨＩ 抗体高于卵黄直接测得抗 体效价 ２ 个效价以上的有 ３７ 份占 ８０％， 血清 ＨＩ 抗体高于卵 黄萃取抗体效价 ２ 个效价以上的有 ４０ 份占 ８７％， 由此可以 看出， 在免疫抗体上升阶段卵黄抗体的上升滞后于血清抗体 的上升， 同时还表明， 在免疫抗体上升阶段血清抗体效价与 卵黄抗体效价相差较大。见表 ２。