葛根总黄酮提取工艺的研究

8、 = 次加入 M 倍量的醇溶液，每次 2 S ，合并滤液，定容至 8<9 ;!。
渗滤法 （= 份 ） ， 加 入 =9R 的 乙 醇 适 量 取 葛 根 粗 粉 各 89 L 润湿， 装渗滤筒， 加入 =9R的乙醇浸渍 8J S ， 渗滤， 收集渗滤液直 至无色， 浓缩至 8<9 ;!。 可以看出， 加热回流提取的葛根素及总黄酮含 结 果 见 图 2， 量明显高于超声和渗滤提取。
素及葛根总黄酮的影响。 乙醇， 浸泡 =9 ;E6 ， 加热回流提取 = 次。 第 2 次加入 22 倍量的醇 溶液， 第 8、 每 次 2 S， 合并滤液， 定容 = 次加入 M 倍量的醇溶液， 至 8<9 ;!。 超声法 取葛根粗粉各 89 L （= 份 ） ， 分 别 加 入 =9R 的 乙 醇 ， 浸泡 =9 ;E6 ，超声提取 = 次。第 2 次加入 22 倍量的醇溶液， 第
生
物
技
术
通
讯
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:N#3-4 cN3- f<*31 /77;
720
文章编号 !-77C6777/G/77;H7-67720670
研究报告
葛根总黄酮提取工艺的研究
刘火安 !"#， 王伯初 !， 贾云 #， 戴传云 !， 王宾豪 #
重庆 277722 ； /3 重庆科技学院 化学与生物工程学院， 重庆 277757 -3 重庆大学 生物工程学院， ［摘要］ 目的： 筛选提取葛根总黄酮的最佳工艺条件。 方法： 采用单因素和正交试验对提取葛根总黄酮的工艺条件进行优 化； 利用紫外可见分光光度计测量葛根 总 黄 酮 的 含 量 ； 利用高效液相色谱仪测量葛根素的含量； 分别以葛根素和葛根总黄 结果： 最佳工艺条件是以 C 倍量的 07I乙醇提取 0 次， 每次 - & 。 结论： 该提取工艺简 酮的含量为指标进行最优工艺的评价。 单， 成本低， 适合于生产应用。 ［关键词］ 葛根； 总黄酮； 葛根素 J 提取工艺； 优化 ［中图分类号］ K570J KC2C345-37
-3/3/
样品的测定
［收稿日期］ /77567;6/2 ［基金项目］ 重庆市自然科学基金项目 （MZUM3/772((5-// ） ［作者简介］ 刘火安 （-C;06 ） ， 男， 副教授， 博士研究生， （_6?<"# ） #"Y&YN<*‘-;03TN?
9JJ
精密吸取各试验项下的贮备液 89 ;! 于 蒸 发 皿 中 ， 水 浴 蒸 作为供试液， 测 定 !8<96; 值 ， 干， 残 渣 加 甲 醇 超 声 溶 解 成 <9 ;!， 根 4 ， $B73CCC C
葛 根 素 总 黄 酮 浓 度 为 7377/ C4/ -E737-2 8;7 ?@ F ?A 时 呈 良好的线性关系。
。
本文报道的对葛根总黄酮提取 工 艺 进 行 的 研 究 ， 继 承 了 回 流法生产周期短、成本低的优点，并 改 善 了 其 提 取 杂 质 多 的 缺 点， 筛选出了最佳的提取工艺条件，工艺简单可行， 成本低， 适 合于生产应用。
正交试验优化提取工艺 根据葛根总黄酮和葛根素的理 化 性 质 ， 考 察 了 影 响 乙 醇 回
每个因素选 流提取的加醇量、 提取时间和提取次数等 = 个 因 素 ，
J 进行 ! （ 设计安排试验， 见表 8 。 择 = 个水平， N = ）
2 8 =
N9 NJ MN
=9919 8M919 =9<19
用 91J< !; 的 微 孔 滤 膜 过 滤 ， 取 续 滤 液 做 +Q!* ， 测定峰面 ;!， 积， 根据回归方程计算葛根素的含量。
8
812
结果
提取工艺的筛选 吸醇率 取葛 根 粗 粉 89 L ， 加 2<9 ;! 的 =9R 的 乙 醇 浸
图8 乙醇浓度对葛根素及总黄酮含量的影响
81212
,文献标识码 . L
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流速为 2 ;! I ;E6 ， 检测波长为 8<9 6; ， 柱温为 J9K 。 3< ，
21=12
制作标准曲线 精 精密称取葛根素对照品 31J= ;L ，加甲醇溶解成 8< ;!；
密吸取 8 ;! 于 29 ;! 量瓶中， 加甲醇定容至刻度。分别精密吸 取此稀释液 8 、 J、 M、 28 、 89 、 8< !! 注入高效液相色谱仪，按拟定 的色谱条件测定， 将峰面积与进样量进行 线 性 回 归 ， 计算得回归 方程为：
-3/ -3/3-
葛根总黄酮的含量测定 制作标准曲线 精密称取葛根素对照品 4320 ?@ ， 加甲 醇
溶解成 /5 ?A； 再精密吸取 /35 ?A， 加甲醇稀释至 /5 ?A。分别 精 密 吸 取 上 述 稀 释 液 -37 、 /37 、 /35 、 037 、 237 、 537 ?A 于 -7 ?A 的 量瓶中， 加甲醇至刻度， 测定 //57*? 值。 将 //57*? 值 和 总 黄 酮 浓 度 进行线性回归， 计算得到回归方程为：
,012.
-3-
材料与方法
材料 葛根购自成都市五块石药材市 场 ， 经 成 都 中 医 药 大 学 贾 敏
如教授鉴定为豆科植物野葛的根。葛 根 素 对 照 品 来 自 中 国 药 品 。甲醇为色谱纯； 其余试剂 生物制品检定所 （批号： 45/6/77-78 ） 均为分析纯。9:6-;7- 型紫外可见分光光度计 （日本岛津公司） ； （美国 !<+)=> 公司） 。 !<+)=> 液相色谱仪
图2 提取方法对葛根素及总黄酮含量的影响
"H2 =3M NN<19<N#O8< 9N:1923 3M ， $H91NNN NN
葛根素为 9122M MMP21JM: 9 !L 时呈良好的线性关系。
21=18
样品的测定 精 密 吸 取 各 试 验 项 下 的 供 试 液 2 ;!， 用 流 动 相 稀 释 成 29
［9:-"+1,"］ ;:<),"26)= UN NV+"?"W) +&) )X+=<T+"*@ V=NT)>> ON= +N+<# O#<QN*N"$> O=N? =<$"X SY)=<="<)3 >)"(&$-= Z"*@#) O<T[
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