激光解吸电离飞行时间质谱

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基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪

基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪

基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱仪
基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)是一种高分辨率、高灵敏度的质谱仪设备,用于分析生物大分子和有机化合物。

该技术利用基质辅助激光解吸(MALDI)方法,将样品与基质混合施加于样品板上,在激光的作用下分子产生共振激发,然后通过电离和加速器分析,最终实现质谱分析的目的。

这种质谱仪广泛应用于各个领域,如蛋白质组学、药物发现和制造、食品科学、环境检测等。

它具有快速、高灵敏度、高分辨率、低检测限、高通量等优点,可以分析极微量的生物分子,如蛋白质、肽、核酸、糖类等,甚至可以分析非挥发性和热不稳定的分子。

MALDI-TOF-MS质谱仪的主要部件包括激光系统、样品载体、离子源、加速器、飞行时间质量分析器和数据采集系统等。

它可以通过不同的模式实现离子的分析,如正离子模式、负离子模式、反向相模式、碎片模式等。

此外,MALDI-TOF-MS 还可以通过结合其他分析技术,如气相色谱、液相色谱等,来增强其分析能力。

总之,MALDI-TOF-MS技术已经成为一种不可替代的分析手段,为生物、医药、食品、环境等领域的研究和应用带来了很大的便利。

激光解吸电离飞行时间质谱计的谱峰定标

激光解吸电离飞行时间质谱计的谱峰定标
分 。 图 1给 出 主 要 部 分 的 示 意 图 。 在 传 统 的 E I B—
工 作模 式下得 到 的真空 系统 残余气 体质 谱 图 。从谱
图中可 以看 到 H。 峰是 最 高 的 ( 量 数 1 ) 次 高 O 质 8,
峰 是 Ho, , , / O( 量 数 1 , , ,8 , 外 H H2N2c 质 7 1 22 )此
2பைடு நூலகம்真 空 系统 的残 余 气 体 质 谱 图
上述 设 计 思路 在 原 理上 虽 然 容易 理 解 , 但是 在 实 际中 , 子 引出脉 冲前 沿 的陡度 和稳 定性 、 子引 离 离 出脉 冲 的开启 时 间 、 子 抑 制 和加 速 电压 等对 质 谱 离 图都 有影 响 。最 终还 需要 通过实 验不 断调 整工作 参 数 , 到较好 的 E IT 得 B — OF质谱 图 , 来实 现 L I D- TOF
分 析 中 , 峰定 标 仍然 是一 个 没有很 好 解决 的 问题 , 谱
只 是 针 对 一 些 具 体 物 质 的 分 析 积 累 了 相 当 的 共
识 [ 。 在 小 质 量 数 范 围 ( 量 数 < 1 0 , 准 物 质 的 4 ] 质 5 )标
选 择更 加 有 限 , 且表 面 吸附 物 的效 应 非 常明 显 , 而 给
m e a a i s on m e a lc t r e . t lh lde t li a g t
K e r s: La e s pton i nia i y wo d s r de or i o z ton,T i e offi a s s c r m l ghtm s pe t om e e t r,Ca i a i n o as e ks lbr to fm sp a

基质辅助激光解吸电离_飞行时间质谱在糖类化合物研究中的应用_陈海霞

基质辅助激光解吸电离_飞行时间质谱在糖类化合物研究中的应用_陈海霞

收稿日期:2004-11-28;修回日期:2004-12-23作者简介:陈海霞(1974~),女(汉族),山东利津人,副教授,工学博士,从事天然产物化学研究。

E-mail:chennhxx @第26卷第2期2005年5月质谱学报Journal of Chinese M ass Spectr om etry SocietyV ol.26 N o.2M ay 2005基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱在糖类化合物研究中的应用陈海霞,高文远(天津大学药物科学与技术学院,天津 300072)[作者简介]:陈海霞,2002年7月获华中农业大学食品科技学院工学博士学位,研究方向为天然产物化学;2002年7月—2004年7月在中国海洋大学药物与食品研究所从事博士后研究工作,研究方向为糖生物学和糖化学。

参与国家基础研究重大项目(973)及国家自然科学基金项目等多项研究工作,在国内外发表论文18余篇,其中以第一作者发表S CI 论文3篇。

摘要:综述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(M A L DI -T O F -M S)的发展、在糖类化合物结构研究时常选用的基质,以及在不同类型糖化合物分析中的应用。

M AL DI -T O F -M S 在糖类分析中通常采用的是N 2激光源,基质多为有机小分子如2,5-二羟基苯甲酸、2,4,5-三羟基苯乙酮、1-羟基异喹啉或2-羟基-5-甲氧基苯甲酸、 -氰基-4-羟基-苯丙烯酸等,基质类型的选择则要取决于糖类的存在形式。

糖类化合物如中性糖、酸性糖、硫酸化糖、糖蛋白、蛋白聚糖及糖脂等均可利用适合的基质而进行M AL DI -T O F -M S 分析。

关键词:基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱;基质;糖类化合物中图分类号:O657.63;O 629.1 文献标识码:A 文章编号:1004-2997(2005)02-108-07Application of Matrix -assisted Laser Desorption -IonizationTime of Flight Mass Spectrometry in Study onCarbohydrates and GlycoconjugatesCHEN Hai-x ia,GAO Wen-yuan(Colleg e of Phar maceuticals &Biotechnology ,T ianj in U niv er sity ,T ianj in 300072,China )Abstract :T he dev elo pment and application of matrix-assisted laser desorption-ionization time of flight mass spectrom etry (M ALDI-TOF-M S)to the analysis of carbohydrates andtheir conjug ates w ere review ed .T he MALDI -T OF -M S instrumentation ,sample pr epara-tio n,M ALDI matrices and application of MA LDI-T OF-M S to various carbohydrate str uc-tural types w ere discussed.The nitrogen lasers that emit at 337nm (U V r ang e)w ere al-most universally em ploy ed for M ALDI-TOF-M S analysis o f carbohydrates and their conju-gates.Som e o rgan sm all molecular compounds w ere the comm only used M ALDI matrices such as2,5-DHB(dihy dro xy benzoic acid),T HAP(2,4,6-trihy drox yacetophenone),1-HIQ(1-hy dro xy isoquino line),2-hy drox y-5-methox ybenzo ic acid and4-HCCA( -cy ano-4-hydr oxy cinnam ic acid)et al.The selectio n o f M ALDI matrices depended on the type o f car-bo hy drates.Carbohy drates and g lycoco njugates including neutral car bohydrates,acidic car-bo hy drates,sulfated carbohydrates,g lycopr oteins,pr oteo glycans,glycolipid could be ana-lyzed by the application of matrix-assisted laser deso rption-ionization time of flight m ass spectrom etry w ith the appro priate matrices.Key words:matrix-assisted laser desorptio n-ionization tim e-o f-flight m ass(M ALDI-TOF-M S);m atr ix;carbohydrates;g lycoco njugates 越来越多的研究表明,糖类除了作为能量与结构物质外还具有多种生物学功能,因此糖类化合物成为继蛋白质、核酸之后生命科学领域中的又一研究热点。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是,先通过PCR扩增目标序列,然后加入snp序列特异延伸引物,在SNP 位点上,延伸1个碱基。

将制备的样品分析物与芯片基质共结晶,将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发,由于基质分子经辐射所吸收的能量,导致能量蓄积并迅速产热,从而使基质晶体升华,核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子,产生的离子多为单电荷离子,这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能,进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离,在真空小管中飞行到达检测器。

MALDI产生的离子常用飞行时间(Time-of-Flight,TOF)检测器来检测,离子质量越小,就越快到达。

理论上讲,只要飞行管的长度足够,TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。

MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。

主要用途: 1.对生物大分子物质分子量的测定; 2.对蛋白质进行高通量的鉴定; 3.对有机小分子化合物分子量的测定; 4.对寡核苷酸的分析; 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别:0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息: 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上; 2.检测灵敏度范围:10-15~10-18摩尔; 3.质量准确度可达5ppm; 4.分辨率右达2万。

附件信息:配有源后衰变装置,可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介:基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ):具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点,特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定,其测定质量数范围最高可达40万Da以上,灵敏度可达10-15~10-18摩尔,质量准确度5ppm。

配有源后衰变(post-sourc e decay, PSD)装置,计算机自动联机检索系统。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【摘要】目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)在常规临床微生物鉴定中的性能验证方法,指导临床实验室规范微生物鉴定程序.方法选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共115株,包含革兰阳/阴性球菌30株、革兰阳/阴性杆菌31株、真菌30株,厌氧菌、苛养菌各12株,所有菌株均经Vitek Compact鉴定和/或细菌16S rDNA、真菌ITS DNA测序分析验证.任意选择3种MALDI-TOF MS微生物鉴定系统厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱,采用检测系统推荐方法进行菌株鉴定,进行准确度验证试验.精密度验证:选取标准菌株和临床菌株10株,1位操作者使用3个检测系统对10株菌株分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d;3位操作者使用3个检测系统对10株菌株每d分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d,从而验证鉴定结果的重复性.结果厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱对标准/质控菌株(除外厌氧菌)的鉴定符合率为100%;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100%;对革兰阴/阳性杆菌的种水平鉴定符合率分别为100%、100%、96.77%;对革兰阳性球菌的种水平鉴定符合率分别为96.67%、96.67%、100%;对真菌的种水平鉴定符合率均为90%一致;对苛养菌的种水平鉴定符合率均为100%;对厌氧菌鉴定符合率为91.67%种水平一致.精密度验证试验结果重复性100%.结论 3种MALDI-TOF MS系统在革兰阳/阴性球菌、革兰阳/阴性杆菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度符合要求,验证通过.本文建立的微生物鉴定质谱仪性能验证方案可满足综合性医院临床微生物实验室常规鉴定基本要求.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2018(036)010【总页数】5页(P783-787)【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;性能验证;微生物鉴定【作者】徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【作者单位】上海市临床检验中心临床微生物室,上海200126;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123【正文语种】中文【中图分类】R446.520世纪90年代末,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)成功应用于微生物菌种鉴定并得到迅猛发展。

高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱分离鉴定牛乳铁蛋白素

高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱分离鉴定牛乳铁蛋白素

S p rto n t Uo o ielcoe rcnb ih e aaina ie e t fb vn t frii yhg d f a dni i O a
pr r ac qi c m t h-a i- s t ef m ne i d  ̄ a o lu o y tx s s d m r a ie

时 间
摘 要 : 立 了高 效 液 相 色 谱 一 质 辅 助 激 光解 吸 电离 串联 飞 行 时 间 质 谱 ( L I OF T F MS 分 离 鉴 定 牛 乳 铁 蛋 建 基 MA D — T /O )
白素 ( o i e lcoe r i L c B) b vn tf r c a i n, fi 的方 法 。采 用 胃蛋 白酶 酶 解 牛 乳 铁 蛋 白 , 解 液 离 心 后 取 上 清 液 , 过 离 子 交 n 酶 经
f r i w a dr l z d b ps n a d he s pa a ed b o xc ng hr m a og a y a e e rn s hy o y e y pe i n t n e r t y i n e ha e c o t r ph nd r —
换 色 谱 、 相 液 相 色 谱 、 析 等 技 术 分 离 , 分 离 得 到 的 目标 产 物 进 行 抗 菌 活 性 分 析 、 白 含 量 测 定 和 MA D — 反 透 对 蛋 LI T /O OF T FMS鉴 定 。分 离 得 到 高 活性 的 Lcn 其 相 对 分 子 质 量 为 314 8 , 白含 量 为 1 .0p / 。 本 方 法 fiB, 2 .9 蛋 8 2  ̄ mL g 具 有 精度 高 、 析 速 度快 和分 辨能 力 强 等 优 点 , 其 他 传 统 的分 析 鉴 定 Lcn 分 是 fiB方 法 所 无 法 比拟 的 , 进 一 步 研 究 为

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS

基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱)是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。

质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。

因此,质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦,有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图,由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以,所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。

但是,不管是哪种类型的质谱仪,其基本组成是相同的。

都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。

以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解,然后按质荷⽐(m/z)⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离,检测它们的强度,并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱,这种分析研究的⽅法叫做质谱图,质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量(质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量),并可以确定化合物的分⼦式(可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。

这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了,如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚,然后将碎⽚拼构起来,就可以使花瓶复原。

花瓶好⽐有机物的分⼦,打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。

收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。

⽽将碎⽚重拼花瓶的过程,相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。

由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图,⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律,这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础)。

飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。

这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。

由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管,并以恒定速度飞向离⼦接收器。

离⼦质量越⼤,到达接收器所⽤时间越长,离⼦质量越⼩,到达接收器所⽤时间越短,根据这⼀原理,可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。

MALDI-TOF MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)培训预习提纲

MALDI-TOF MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)培训预习提纲

【MALDI-TOF MS】(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)培训预习提纲一仪器概况仪器名称:基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass SpectrometerMALDI-TOF公司:美国应用生物系统Applied Biosystem型号:Voyager DE-STR特点:DE Delayed Extraction 延迟引出PSD:Post Source Decay 源后裂解技术指标:Mass AccuracyLinear Mode, External Calibration:≤±0.05% for angiotensin[1,296.6853] and myoglobin [16,952.5].∙Reflector Mode, External Calibration:≤±0.008% for ACTH 18-39 [m/z 2,565.1989].≤±0.005% for E.coli thioredoxin [m/z 1,1674.4] ±0.005% for ACTH 18-39Mass Resolution:∙Reflector Resolution:≥20,000 for insulin (m/z 5,734).≥12,000 for ACTH clips.∙Linear Resolution:≥3,000 angiotensin.≥3,500 for ACTH 18-39 [m/z2,465.1989].≥1,000 for myoglobin (m/z 16,952).≥100 for BSA (m/z 66,431).Sensitivity:∙Routine detection of 5 fmol of neurotensin with a signal to noise ration (S/N) >80:1.Post-Source Decay Mass Accuracy:∙≤0.2 with default calibration.应用:MALDI-TOF仪器作为一种可以确定大分子精确分子量的工具,可以对纳米材料、生物材料,高分子聚合物等的分子量及聚合度进行测定及碎片结构定性,有机合成反应的质量评价,蛋白质、多肽、核酸、寡糖等生物分子的分子质量测定, 蛋白质、多肽酶解产物肽图谱测定, 蛋白质、多肽的氨基酸顺序分析。

纳米材料辅助负离子激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子研究进展

纳米材料辅助负离子激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子研究进展

纳米材料辅助负离子激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子研究进展张晓娜;牛家华;卢明华;蔡宗苇【摘要】基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种软电离质谱技术,目前已被广泛用于蛋白质、多肽、核酸、聚合物等大分子分析.由于传统有机化合物基质在低相对分子质量(小于700 Da)区域的干扰,该技术在小分子物质分析方面受到很大限制.为克服传统有机化合物基质在低相对分子质量区域的干扰,近年来以纳米材料为代表的无机基质材料备受关注.相对传统有机化合物基质或纳米材料正离子模式,基于纳米材料的负离子激光解吸电离(LDI)有效避免了正离子模式下一种化合物会产生多种加合物的问题,具有图谱简单易于解析、灵敏度高、重现性好等优点.该文综述了近5年来纳米材料负离子LDI-TOF MS技术在小分子分析方面的研究进展,以期拓展该技术在小分子分析方面的应用.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2016(034)011【总页数】5页(P1017-1021)【关键词】纳米材料;激光解吸电离;飞行时间质谱;小分子;综述【作者】张晓娜;牛家华;卢明华;蔡宗苇【作者单位】河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;环境与生物分析国家重点实验室,香港浸会大学化学系,香港999077【正文语种】中文【中图分类】O658基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种软电离质谱技术,目前已被广泛用于蛋白质、多肽、核酸、聚合物等大分子分析。

由于具有分析速度快、灵敏度高、样品需求量少、样品制备简单和对样品纯度要求不高等优点,该技术已成为现代分析特别是生物分析领域不可或缺的研究工具。

传统MALDI-TOF MS中常用的基质是有机小分子化合物(例如2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、芥子酸(SA)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)等),基质与被分析物形成共结晶,通过在分析过程中吸收激光能量再传递给被分析物的形式激发被分析物。

应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定临床常见厌氧菌

应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定临床常见厌氧菌
Байду номын сангаас
法 收 集 从 临床 标 本 培 养 分 离 的厌 氧 菌 5 6株 , 运 用 MAL DI — T 0F MS技 术 对 其 进 行 鉴 定 , 同 时运 用 Vi t k e 3 2 AN I 鉴 定卡及 】 6 S r R NA 基 因序 列 法 分 别 进 行 鉴 定 , 将 三 者 的 结 果进 行 比 较 。结 果 5 6株 厌 氧 菌 中有 4 1 株采 用 MA I D I — T OF MS技 术 鉴 定 至 种 的
水平( 分值 大 于 或 等 于 2 . 0 ) , 1 1 株鉴 定至属的水平( 分值 为 1 . 7 ~2 . O ) , 4株 无 可 靠 结 果 ( 分值 小于 1 . 7 ) 。M A L D I - T OF MS和 1 6 S
r RNA基 因序 列 法 鉴 定 结 果 一 致 的 占 9 4 . 6 ( 5 3 / 5 6 ) , 不一 致的 占 5 . 6 ( 3 / 5 6 ) 。MAL D I — T OF MS与 Vi t k e 3 2 AN I 鉴 定 卡 的 鉴 定结果一致 的占 8 O . 4 ( 4 5 / 5 6 ) , 不一致 的 占 1 9 . 6 ( 1 1 / 5 6 ) 。结 论 MAL D I — T OF MS与 1 6 S r R NA 基 因序 列 法 鉴 定 的 符 合 率
国际检验 医学杂 志 2 0 1 4年 2 月第3 5 卷第 3 期 I n t J L a b Me d , F e b r u a r y 2 0 1 4 , Vo 1 . 3 5 , No . 3
・ 32 7 ・

检验 技 术与方 法 ・
应 用 基质 辅 助激 光解 吸 电离 飞行 时 间质 谱 技 术 鉴定 临床 常见 厌 氧 菌

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在器官移植领域中的应用

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在器官移植领域中的应用
3 0 2 , u a ,C i ) 5 0 5 Fj n hn i a
[ bt c ] Src— hne sr e ri /i i tn ie f i t aspco ey(E D—O — S , n e o A s at r uae nacd a s po o zi m —- g — s se r t SL I FM ) oe fh s f e l ed o tn n ao t of h m tm r l T ot m t
tm t ef l o g nt npa t i ,sc ser ig oi o c t r e t n da n s f rnpa t i — l e i a e , e p d i t e f ra a s l a o e nh i d o r n t n u h a al dan s f ue e ci , i oi o a s l a o r a d d e ss y s a j o g s t n tn e t s
移植 相 关 疾 病 的诊 断 、 病 相 关 蛋 白 的鉴 定 , 讨 疾 病 的发 生 机 制 , 现 了 该技 术在 器官 移 植 中 的广 阔应 吸电离飞行时间质谱 ; 断 ; 诊 器官移植 [ 中图分类 号】 R 1 67 [ 文献标 志码】 A [ 文章编号】 10 — 9(000- 4 - 08 19 21)5 57 4 8 0 0
(P 4 C ne o a o tr dc e uh u G nrlH si lo af g Mit y C m a d ,F zo L et f L br oy Mei n ,F z o ee o t N n n la o m n ,P r a i a pa f i ir uh u
d s a e ft e n r o ss se ,at o g o e p l d t r u i e ci ia a o ao ig o i.Re e t hs tc nq e h s b e t i s s o h e v u y tm e l u h n t ta p i o o t l c llb r tr da n ss h y e n n y c nl t i e h iu a e n a— y

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱原理

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱原理

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)原理1. MALDI-TOF简介MALDI-TOF是一种常用的生物质谱分析技术,它基于基质辅助激光解吸电离和飞行时间质谱原理。

该技术在生物医学和生物化学领域发挥着重要作用,可以用于蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的质谱分析。

2. 基质辅助激光解吸电离原理在MALDI-TOF中,生物样品与一种能吸收激光能量并具有辅助离子化作用的基质混合,形成固体混合物。

当激光照射到这种混合物上时,基质吸收能量并传递给生物分子,导致其脱去一个或多个电子,从而产生带电离子。

这些离子在激光作用下被释放,并进入飞行时间质谱仪进行分离和检测。

3. 飞行时间质谱原理飞行时间质谱是一种通过粒子在电场中飞行时间与其质荷比的关系来确定粒子质量的质谱技术。

在MALDI-TOF中,产生的离子被加速进入飞行管道,然后在电场作用下以不同速度飞行。

由于质荷比不同,离子到达检测器的时间也不同,通过测量飞行时间即可推断质子的质量。

4. 深入理解基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对于MALDI-TOF技术,我们可以从基质选择、激光参数、离子飞行管道设计等方面进行深入探讨。

合适的基质选择对于样品的离子化是至关重要的,不同基质对分子的吸收能力、离子化效果及质谱信号有重要影响。

激光参数的选择直接关系到激光对基质和样品的作用效果,需要根据样品的特性进行合理选择。

离子飞行管道的设计也对分辨率和质谱信噪比有直接影响,合理设计和优化飞行管道可以提高质谱的灵敏度和分辨率。

5. 个人观点和总结从我个人来看,MALDI-TOF技术作为一种重要的生物质谱分析技术,对于分子生物学、生物医学及临床诊断等领域都具有重要意义。

通过深入理解基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱原理,我们可以更好地应用该技术进行生物大分子的质谱分析,为科学研究和医学诊断提供更准确、快速的手段。

在本文中,我们对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的原理和应用进行了深入解析,从基本原理到实际应用进行了全面探讨,希望对读者有所启发和帮助。

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法

基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容:基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)是一种重要的分析技术,广泛应用于生物大分子的定性和定量分析。

该技术的核心原理是利用基质分子将待测样品转化为易于电离的形式,然后通过激光瞬间加热样品,使其产生脱附电离。

接着,离子将通过飞行时间质谱仪进行质量分析,最终得到样品中分子的质谱图谱。

基质辅助激光解吸电离方法具有许多优势。

首先,它可以高效地电离生物大分子,包括蛋白质、核酸和糖类等。

其次,该方法能够在非破坏性条件下进行样品分析,使得样品的原始化学特性能够得到保留。

此外,MALDI-TOF MS还具备高灵敏度、高分辨率和高通量等特点,使其成为生命科学研究和临床诊断领域的重要工具。

然而,基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法也存在一定的局限性。

首先,基质的选择对分析结果有重要影响,不同的基质适用于不同类型的待测分子。

其次,样品含有的杂质可能干扰质谱图谱的分析,因此需要进行样品前处理。

此外,对于高分子量的生物大分子,其离子化效率相对较低,因此需要使用较高能量的激光。

本文将着重介绍基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的原理、应用领域、优势和局限性,以及实验方法和步骤。

通过对该技术的深入了解,可以更好地理解和应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法在生命科学和医学领域的潜力,为该领域的进一步研究和应用提供参考依据。

1.2文章结构文章结构部分的内容可以按照如下方式编写:文章结构:本文将按照以下结构来展开对基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的研究和应用进行探讨:首先,在引言部分概述了基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法的背景和研究意义,以及文章将要讲述的内容。

接着,正文部分将从两个方面对基质辅助激光解吸电离进行探讨,即原理和应用领域。

在原理部分,将介绍基质辅助激光解吸电离的工作原理和相关理论基础;而在应用领域部分,将探讨基质辅助激光解吸电离在不同领域中的具体应用情况和研究进展。

基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪(maldi-tof)测试样品要求

基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪(maldi-tof)测试样品要求

基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪(maldi-tof)测试样品要求基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)由基质辅助激光解析离子化源和飞行时间质量检测器组成。

MALDI-TOF-MS采用基于基质的软电离技术,将待检测的样品变成气态离子而不发生碎裂或分解,分辨率高,检测范围宽,特别适合蛋白质、核酸、脂质和糖类等生物大分子的分子量检测。

制备MALDI-TOF检测的样品需要注意样品状态、样品量、浓度和缓冲液等方面,以蛋白质为例,具体要求如下:1、样品状态:蛋白/多肽粉末或溶液均可;2、样品量:粉末样品5-10mg,溶液至少2ml(浓度不低于1mg/ml);3、样品浓度:蛋白/多肽样品溶液的浓度应不低于50pmol/ul;4、缓冲液:一般应注意缓冲液的含盐量,建议使用Tris或碳酸氢铵作为缓冲液,避免使用含有十二烷基硫酸钠等离子型去垢剂或甘油等低挥发溶剂的缓冲液;5、其他注意事项:如果样品为电泳后的胶条胶点等,银染过程中应注意不要使用戊二醛等与后续质谱不兼容的试剂。

百泰派克生物科技采用Bruker公司的ultrafleXtreme™ MALDI TOF/TOF质谱系统,提供基于MALDI TOF的蛋白质质谱分析。

服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的细胞寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括细胞培养、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析,欢迎免费咨询。

相关服务:蛋白质质谱鉴定。

MALDI TOF分子量分析。

高分辨质谱分子量鉴定。

蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定。

肽质量指纹图谱分析服务。

Pull-down靶蛋白质谱鉴定。

蛋白质相互作用质谱分析。

翻译后修饰蛋白组分析。

蛋白测序。

蛋白质N/C端测序。

激光解吸电离飞行时间质谱

激光解吸电离飞行时间质谱

激光解吸电离飞行时间质谱是一种先进的质谱技术,它结合了激光解吸电离和飞行时间质谱的优点,能够在不破坏分子结构的情况下,对样品进行快速、准确地检测和分析。

在激光解吸电离飞行时间质谱中,激光被用来将样品分子从基态激发到高能态,使其获得足够的能量以克服库伦斥力,从而实现电离。

电离后的分子在电场的作用下被加速,沿着飞行管飞向质量分析器。

在质量分析器中,不同质荷比的离子被分离,并按照它们到达检测器的时间进行排序。

最终,通过测量离子质荷比和飞行时间,可以确定分子的质量和结构。

相比于传统的质谱技术,激光解吸电离飞行时间质谱具有更高的灵敏度和分辨率。

它可以对小分子、大分子、有机物、无机物等多种类型的样品进行检测,因此在化学、生物、环境、医学等领域得到了广泛应用。

在化学领域,激光解吸电离飞行时间质谱被用于研究分子的结构和性质,以及化学反应的动力学和机理。

在生物学领域,它被用来检测生物分子的结构和功能,以及对蛋白质、核酸等生物大分子的分析。

在环境科学领域,它可以用来检测空气、水体和土壤中的污染物,以及研究环境污染物的来源和迁移转化规律。

在医学领域,它被用于药物研发、临床诊断和生物标志物的检测。

总之,激光解吸电离飞行时间质谱是一种非常重要的分析工具,它为科学研究和技术创新提供了强有力的支持。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)是一种常用的质谱技术,它通过激光解吸离子化样品,然后利用飞行时间质谱仪测量离子的质荷比,从而确定样品的分子量和组成。

在MALDI-TOF MS中,样品被均匀地涂在金属靶上,然后使用激光束照射样品,使其产生离子。

这些离子在电场的作用下加速飞行,通过飞行管道到达检测器。

离子的飞行时间与质荷比成正比,因此可以通过测量飞行时间来确定离子的质荷比,从而确定样品的分子量和组成。

MALDI-TOF MS具有高灵敏度、高精度和高通量等优点,被广泛应用于蛋白质组学、代谢组学、生物医药等领域。

它可以用于检测蛋白质、多肽、核酸等生物分子的分子量和组成,还可以用于检测药物和代谢产物的分子量和组成。

总的来说,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术是一种重要的生物分析工具,可以帮助科学家们更好地了解生物分子和药物的作用机制和作用效果。

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程一. 开机 1. 开主机总电源至ON。

2. 开主机正面有钥匙的开关至ON顺时针。

3. 开计算机及显示器启动FlexControl软件。

4. 等待源高真空达到3×10-6mbar如达不到该数值检查是否有漏气发生。

5. 进入日常操作。

二. 关机1将靶退出。

2在FlexControl界面的Spectrometer关掉高压按“OFF”。

3关闭所使用的软件关闭计算机。

4关主机正面有钥匙的开关至OFF逆时针。

5关主机总电源至OFF。

三日常操作1 打开FlexControl 进入仪器控制界面。

2 确认真空度为10-7mbar或稍低。

3 通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关将样品靶放入仪器等待约2分钟调整好靶位。

在此过程中不应操作软件或硬件以确保仪器通讯畅通。

4 根据测量目的选择测量方法⑴分子量测定根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。

2 肽质量指纹谱测量根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。

⑶根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。

⑷如果进行串联质谱分析则选择LIFT方法。

5 选择适当的仪器参数6 测量⑴手动测量a 选择好待测样品的靶位及相应参数后按Start开始测量。

b 根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。

c 按Save As保存图谱。

注在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。

⑵自动测量a 按菜单AutoXecute再按Select选择一个Sequence文件名。

b 按Edit编辑待测样品用Sample position 的Sample依次选定靶位?蟀碅dd添加到Edit AutoXecute Sequence中。

c 按AutoXecute Method选择Calibration 或样品测量方法。

d 按Edit设定激光能量、靶位移动、累加方法等参数并保存该参数。

Maldi-TOF-MS简介

Maldi-TOF-MS简介

Maldi-TOF-MS简介
Maldi-TOF-MS简介
中文名:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
英文名:Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF-MS)
特点:
测分子量时不依赖于标准样品
测得的是绝对分子量,而不是相对分子量,且精度高于光散射和膜渗透等方法能得到分子量分布,而不仅仅是一个平均值
能同时提供末端基信息
样品用量少,耗时少
用途:
●能用于共聚物和接枝聚合物等高分子的精准分子量测定
●聚醚多元醇、异氰酸酯类聚合物多聚体等的检测
●聚合物重复链段的检测判断以及末端基结构推断
●助剂等微量物质的检测。

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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱编辑
主要用途: 1.对生物大分子物质分子量的测定; 2.对蛋白质进行高通量的鉴定; 3.对有机小分子化合物分子量的测定;4.对寡核苷酸的分析;5.对基因的单核苷酸多态性的分析
仪器类别:0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪
指标信息:1.质量数测定范围最高可达40万Da以上;2.检测灵敏度范围:10-15~10-18摩尔;3.质量准确度可达5ppm;4.分辨率右达2万。

附件信息:配有源后衰变装置,可对多肽、蛋白质的序列进行分析
机组简介:基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ):具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点,特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定,其测定质量数范围最高可达40万Da以上,灵敏度可达10-15~10-18摩尔,质量准确度5ppm。

配有源后衰变(post-source decay, PSD)装置,计算机自动联机检索系统。

该仪器每天可测定样品达数百个,特别适合于蛋白等生物大分子的高通量筛选,还可以寡核苷酸、基因的单核苷酸多态性进行分析;对天然与合成高分子的分子量和分子量分布进行分析。

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