岛津LC-20AD高效液相色谱仪操作规程

1 目的：为了规范LC-20AD高效液相色谱仪的使用，确保测量结果的准确性，特制定此规程。

2 范围：本规程适用于LC-20AD高效液相色谱仪的使用。

3 责任者：化验员

4 程序：

4.1 准备

4.1.1 准备所需的流动相，用合适的0.22μm滤膜过滤，超声脱气20min。

4.1.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。

4.1.3 配置标准溶液和样品，用合适的0.22μm滤膜过滤。

4.2 开机

4.2.1 接通电源，打开计算机。

4.2.2 按一次电源按键就是打开“ON”（再按一次即为关闭“OFF”）, 待泵和检测器自检结束，如果没有错误，屏幕显示正确，即进入初始屏幕：在显示初始屏幕的状态下，不能仅按数字键来设定检测波长，按CE键，确认已进入初始屏幕，按一下func键，屏幕显示“LAMBDA 1”（设定检测波长），波长参数输入区闪烁，提示操作者输入波长值：输入所需波长，再按Enter键，设定即告完成。

4.3 排空操作

4.3.1 将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开排液阀。检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，再按Purge键进行排空。检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡即再按Purge 键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。

4.4最大和最小保护压力设定：

4.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。

4.4.2 最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：

a) 当流路中发生了漏液；

b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。

如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。

4.4.3流速设定及泵启动和停止：

按CE键返回到初始屏幕，按一次func键后，设定所需流速。例如，设定1mL/min，就按1键，然后按Enter键确认，然后按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。

4.5 N2000色谱工作站的操作

4.5.1进入N2000色谱工作站，选择进入“在线色谱工作站”。

4.5.2打开通道1或2，对实验信息、方法进行编辑。

4.5.3输入实验信息，包括实验标题、实验人及实验单位。

4.5.4编辑方法：①采样控制：输入采样结束时间、文件前缀、文件保存方式、保存路径以及选择采样结束后自动积分或自动打印报告；②积分：选择积分参数、积分方法，并且根据实验所需对分析参数进行修改；③谱图显示：输入时间、电压显示范围，并选择色谱图注释内容；④报告内容编辑：根据实验所需对谱图尺寸、实验信息、报告内容及谱图显示等进行修改；⑤仪器条件：在“液相色谱”下输入仪器型号、标温、柱类型，在“检测器”下输入检测波长，“梯度方式”下选择梯度类型、输入流量。

4.5.5数据采集：①查看基线：如果冲洗至基线漂移＜0.01mV/min，可认为系统已达到平衡状态，可以进样；②零点校正：进样前按软件中“零点校正”按钮，校正基线零点。

4.5.6待检测器稳定后，开始进样。在“数据采集”状态下，单击“采集数据”，采集完毕后，单击“停止采集”，如不要此数据，则单击“放弃采集”。

4.5.7在“在线色谱工作站”状态时，打开“离线色谱工作站”。

4.5.8在“offline”下，打开文件，查阅数据，并对所得结果进行计算、打印。

4.5.9分析完成后，退出N2000色谱工作站及其它窗口，关闭计算机。

4.6 关机

4.6.1做完检品分析后，用合适的流动相冲洗色谱柱，关闭氘灯，以节省氘灯的能量。

4.6.2 冲洗完色谱柱，关闭仪器，并做好仪器使用日志。