岛津LC-20AT操作规程
岛津LC-20AT操作规程
岛津LC-20AT型高效液相色谱系统标准操作规程一、目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
二、范围本规程适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
三、职责质检室仪器分析员负责岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的日常使用和维护。
四、操作规程1、流动相的处理1.1 过滤溶剂溶剂在使用定要用0.45μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片本实验室有水溶性和脂溶性两过滤膜供选择（反光面朝上），缓冲盐先用水膜过滤，和有机相混合后再用有机滤膜过滤，滤前先滤少量纯化水清洗滤器。
1.2 保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
过滤器应先用水超声，再用甲醇超声处理。
这种情况下，流动相需要重新过滤。
1.4.3 流动相和储液器被污染由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。
污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出余的峰。
用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一大的伪峰。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程岛津LC-20AT型液相色谱仪操作规程1．目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养，保证测量数据的准确可靠。
2．范围适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养操作。
3．职责岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作人员执行本规程；质量部管理人员监督实施。
4．规程4.1 系统组成：LC-20AT型高压双泵、SIL-20A自动进样阀、SPD-20AT紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。
4.2 准备4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机4.3.1 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵4.3.2 待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。
4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。
4.4 参数设定4.4.1 设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）4.4.2 选择File >Save Method File As ，输入方法名称后保存。
4.4.3 点击“Download”键，将保存好的方法下载4.5 更换流动相并排气泡4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B 泵的[purge]键4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽4.6 平衡系统4.6.1 更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数4.6.2 等度洗脱方式4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪使用,维护操作规程
间，以免仪器内部件受潮。
4.4.8 为保证检验数据的可靠，每年应由计量部门负责校验
一次。
5. 术语:
无
6. 相关文件和记录 6.1 依据《岛津LC-20AT高效液相色谱仪使用说明书》 6.2 记录 7. 附录 7.1 变更表
文件编号
生效日期
变更理由（以及可能的技术变 更）
高效液相色谱仪标准操作规
文件名称
程
文件编号
编制人
审核人
批准人
编制日期
审核日期
批准日期
颁发部门 质量部
生效日期Biblioteka 发送部门 质量部1. 目的 建立岛津LC-20AT高效液相色谱仪的使用，维护操作规程，保证实验 人员正确操作。
2. 范围 适用于岛津LC-20AT高效液相色谱仪的操作。
3. 职责 QC使用人员对本标准的实施负责，QC主任对本标准的实施监督。
键，出现登录窗口，单击确认，进入工作画面，此时 可听到“滴”的2声，表明系统与工作站已经连接。 4.2.2 打开“文件”项下“新建方法文件”，然后从仪器参数试 图中设置指定的参数，设定完成后，从“文件”项下选
择“另存方法文件为”保存在指定的文件夹内，单击“下 载”。参数设置完成后点击
键，输入文件编号、文件名称、方法名称点击确认进 入准备进样状态。 4.2.3 进样阀手柄在“INJECT”位置时插入注射器，然后将进 样阀手柄置“LOAD”位置，推入供试品，再将进样阀 手柄转到“INJECT”位置，分析的同时工作站自动采集 数据。 4.2.4 待分析结束后点击
4. 程序 4.1 仪器组成及电源： 4.1.1 仪器组成：本仪器由1台LC-20AT泵、SPD-20A紫外检 测器、DGU-20A脱气机和CTO-10ASVP柱温箱组成。 4.1.2 电源：各部件均为220伏稳压电源。 4.2 操作： 4.2.1 依次打开泵、检测器、柱温箱电源开关。双击桌面上 快捷图标，点击【Operation】单击
岛津LC-20AT液相色谱操作步骤
岛津LC-20AT高效液相色谱操作步骤1、流动相的处理◆共有5个流动相储液瓶。
一般RP-HPLC中，A（无机相）、B（有机相）为分析流动相；C（水）、D（甲醇）用于柱子后处理清洗；50%甲醇-水用于清洗自动进样针◆流动相体积V A、B=100+总流速×比例系数×分析时间（mL）；V c≥300mL；V D≈350mL；V50%甲醇≈300mL◆所有流动相须用0.22um孔径滤膜过滤（根据有机相和无机相选用相应滤膜），清洗储液瓶，不能在清洗过程中留下污迹，并超声30min，超声完成后禁止剧烈摇晃2、开机◆开启插座电源电脑开机◆打开仪器电源（LC—20AT最后打开，等待数秒后“control”指示灯亮）◆打开软件（Labsolution 仪器LC—20A），若连接正常则软件显示LC就绪3、自动排气◆将各流动相过滤头缓慢放入流动相中◆在简单设置界面设置总流速为0.2mL/min；在自动排气界面设置自动排气参数（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ各流动相≥5min，自动进样器≥25min），不勾选“排气结束后运行控制器”◆“下载”“执行自动排气”◆等待排气结束4、样品处理◆稀释后的样品（浓度约1mg/mL，不宜过高）用注射器经0.22um过滤器注入样品瓶◆样品应≥2/3样品瓶体积（1.5mL样品瓶）◆按序号依次将样品瓶放入自动进样器的样品架上◆切记：将样品架推到底！5、系统平衡及设置分析条件◆自动排气完成后，设置柱温、检测波长等参数(建议柱温高于环境10℃)，用梯度洗脱初始流动相平衡柱子（流动相比例与梯度洗脱初始比例一致）◆“下载”“激活/取消激活仪器”，此时系统显示：等待柱温稳定◆缓慢增加总流速至样品分析所需流速，V max=1ml/min（每隔1分钟增大0.2mL/min，注意每次增大都点击“下载”）◆在时间程序界面设置梯度洗脱条件◆若要保存方法文件：文件方法文件另存◆等待基线平稳（留意泵压力是否稳定），待系统显示：LC就绪，右击，进行基线测试斜率（一般＜3000即可）◆开始测样6.“单次分析开始”或“批处理”6.1单次分析开始◆依次输入样品名（样品ID可有可无）、样品瓶、瓶架（1）、进样体积等◆注意数据文件所在文件夹，输入数据文件名打开◆确定6.2批处理◆“向导”◆“新建”，样品组号（1），选择“未知样品”，依次输入文件名及其他◆注意批处理文件所在文件夹，勾选“数据文件名自动递增”、不勾选“自动创建文件名”◆完成◆选中全部序列◆开始批处理7.柱子后处理：先用易溶解样品的流动相清洗（一般用高比例有机相洗15min），10%甲醇洗30min，再用90%甲醇洗30min；长期不使用保存于纯甲醇中方法一：◆在简单设置界面设置：流动相C-90%；流动相D-10% 下载◆切换柱温箱off◆30min后设置：流动相C-10%；流动相D-90% 下载方法二（推荐）：◆设置洗柱程序◆“下载”◆“单次分析开始”样品瓶输入“-1”文件名“洗柱”◆系统提示“禁用采集”确定8.数据处理（打开Labsolution 再解析）8.1标准曲线◆数据处理打开文件“向导”◆勾选特征峰、外标法◆依次输入最大级别数（标曲的点数）、单位、化合物名、浓度等完成◆应用到方法方法另存为◆主项目批处理打开批处理文件◆填写表格：首行（标准、初始化标准点），（标准样数与前面的最大级别数相对应，剩下的为未知）、（文件方法为先前保存的方法，向下填充）、（标准样品级别号分别1.2.3.4.5未知样品0）◆批处理再解析开始批处理文件另存◆主项目校准曲线（可找到已做成的标曲）8.2生成报告◆打开要生成报告的数据文件◆视图手动积分栏，处理数据文件◆生成报告◆右击“属性”进行调整，预览、打印8.3检测限、定量限的确定、扣除背景（略）9.实验结束后，“切换泵ON/OFF ”确认泵泵压力降为零关软件10.电脑关机关闭插座电源。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A 紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。
二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。
2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。
3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。
严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。
4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。
3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。
2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。
岛津 LC-20AT标准操作规程
1开机：确保仪器连接电源，依次按下泵、柱温箱、自动进样器、检测器电源键。
检查管路有无气泡，流动相是否足够。
2 旋转泵排液阀按钮90-180°，按purge泵运行。
大约2min后完成，关闭排液阀。
3 打开电脑，打开Labsolution软件，当听到“滴”的声音表示，仪器与电脑连接成功。
4 在Labsolution软件界面下，打开方法文件，若检测样本流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗管路10-20min，然后用流动相冲洗管路40min以平衡色谱柱，如检测样本流动相为有机溶剂，可直接使用流动相平衡。
5 平衡色谱柱期间，可处理待测样本。
样品处理完成后，放入自动进样器，若待测样本较少，可在样品管内加内衬管。
6 Labsolution软件界面下，设置基线参数，按下基线检查按钮，约15min后基线归零。
编辑批处理文件，仪器按照程序自动进样检测。
7 数据处理：待测样本检测完成后，加载相应处理方法，记录数据，并打印报告。
8 样品检测完成后，若其流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗10—20分钟，后用甲醇冲洗10—20分钟，如其流动相为有机溶剂，可直接用甲醇冲洗20—30分钟。
9 若当天待测样品品种较多，需使用不同的流动相和色谱柱，宜对每根色谱柱进行相应的冲洗。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程第 1 页共 4 页1 仪器组成和开机1.1 仪器组成本系统由LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、DGU-20A5真空脱气机、CTO-10ASvp柱温箱、SIL-20AC自动进样器、LCsolution色谱工作站（1.21SP1版本）和打印机组成。
1.2 开机将电源插头分别插入插座，打开泵、真空脱气机、紫外检测器、柱温箱和自动进样器的电源开关；打开计算机，鼠标双击桌面上的【LCsolution】图标打开一个窗口。
如需进行在线操作，点击图标，输入用户名和密码，点击【OK】即进入工作站的在线操作页面；如要进行离线分析方法的建立和修改则点击下方的图标；点击【Postrun】图标则进入数据分析和处理界面。
进入在线操作页面后，可看到如下几部分组成：--最上方为命令栏，依次为File、Edit、View、Method等；--命令栏下方为常用命令的快捷操作图标，分别用于样品序列分析、单个样品分析、管路排空、仪器开关等；--左侧为辅助栏，显示几个分析作业流程的操作图标，如系统设置，数据采集，序列表，离线分析等；--中部为数据信号显示栏；--下部为仪器工作参数栏：包括泵、检测器、柱温等；1.3 开机清洗打开泵的排液阀，点击上方快捷命令按钮【Auto Purge】，可对仪器管路进行冲洗。
清洗的管路和清洗时间可在仪器工作参数设置界面中的【Auto Purge】窗口进行选择和设置，可对A、B、C、D四个流动相管路和自动进样器进行清洗。
2 分析方法的建立、保存和调用2.1 分析方法的建立在仪器运行参数设置界面，点击【Normal】出现主要运行参数，点击【Advanced】出现全部运行参数。
2.1.1 采样时间设置在【Data Acquisition】窗口中，左侧【LC Stop Time】框中输入样品运行时间；右侧【Acquisition Time】打勾同时输入检测起始时间和检测结束时间。
2.1.2 输液泵参数设置在【Pump】窗口中，选择【Low pressure gradient】模式，输入总流速和流动相比例。
岛津LC-20AT操作规程及其注意事项
岛津LC-20AT型HPLC操作规程在线操作一、系统组成工作站，D、W检测器，二元泵（A泵、B泵），色谱柱，流动相。
二、准备1、准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
2、根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向）和定量环。
3、配制样品和标准溶液，用合适的0.45μm滤膜过滤。
（注意腐蚀性与有机系的的溶剂）4、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三、开机接通电源，依次开启不间断电源、泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。
四、参数设定1、波长设定：点击视图，选择[显示设置]设置波长。
2、流速设定：简单设置下设置。
五、更换流动相并排气泡1、将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2、逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀；3、按泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的高流速冲洗，3min（可设定）后自动停止，一般视管路无气泡即可。
4、将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5、如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6、如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。
六、平衡系统1查看基线：1.1打开“在线色谱工作站”软件，1.2输入实验信息并设定各项方法参数后，1.3按下“调零”按钮。
七、进样1、进样前按软件中[零点校正]按钮校正基线零点。
2、单击[单次运行]，填好名称，选择测定方法，保存途径，点击确定，弹出开始对话框。
2、用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量即可以进样了，开始对话框自动开始。
3、含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少进样2次。
八、谱图的判断及结果计算系统适用性实验：三个重要指标①分离度（加强）：一般应≥1.5。
岛津高效液相色谱LC-20AT操作流程
岛津高效液相色谱LC-20AT操作流程1.开机依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器和控制台（最后打开控制台），再打开电脑，开启LCsolution软件，点击“仪器1”按钮，出现设置界面。
2.装载方法文件打开液相操作方法文件（如有更改，更改完后先保存），点击软件中“仪器开关”和“泵开关”按钮（若设置柱温，点击“柱温箱”的按钮）。
开启仪器和电脑的连接；点击“下载”按钮，装载操作方法。
3.进样将样品加入进样瓶中，放在样品架上，记下放置的位置编号。
3.1 单次进样点击“单次运行”按钮，出现单次运行的对话框。
核实方法文件的出处和名称，核实数据文件的出处和名称。
输入样品瓶和进样体积。
（样品架输入“1”；如果是空针，样品瓶输入“-1”）。
完成后，点击“确定”，开始检测。
3.2自动进样点击“批处理”按钮，出现批处理表。
依次输入“样品瓶”（样品瓶编号）、“样品架名称”（输入1）、方法文件、数据文件、进样体积。
输完后，保存批处理文件，然后点击“批处理开始”按钮。
4.关机点击“仪器开关”和“泵开关”按钮（包括柱温箱），将其从凹陷状态，变成凸出状态。
关闭软件，关掉电脑。
依次关掉控制台、检测器、柱温箱、自动进样器、泵。
5.脱气5.1 泵的脱气更换流动相，或者其他操作，只要吸滤头与空气接触，都需进行在线脱气。
将泵的脱气阀逆时针转动45~90度，点击仪器上“purge”按钮，进行脱气。
脱气自动结束，再将脱气阀顺时针拧紧。
5.2 自动进样器的脱气在方法文件中设置脱气的条件，装载方法文件后，点击“进样器脱气”按钮。
6.方法设置打开软件后，在页面下方设置方法文件。
一般需设置的条件有，洗脱“模式”（一般设置为低压梯度）、“泵A总流速”、“压力限制（泵A）”（最大值一般设为20.0MPa，最小设置为0.0MPa）、“L C时间程序”、“采集时间”（开始和结束时间）、“通道波长”、“柱温箱温度”、自动进样器和自动排气相关设置以及L C时间程序。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪之马矢奏春创作的图文操纵手册备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。
2、用途：本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样；二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应；荧光检测器可以检测发生荧光的物质，对如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；蒸发光散射检测器对碳氢化合物、概况活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
三、操纵步调：1、色谱柱的装置本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL 荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a、首先打开UPS，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。
（HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角）b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。
c、双击Lc solution图标。
输入用户名Admin，点击OK。
单击系统配置的图标，出现系统配置的对话框。
单击自动配置，仪器自动将能找到的仪器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。
需要注意的是，仪器优先选择自动进样器，如果需要手动进样，需将自动进样器去掉。
单击仪器（通讯设置），选择正确的仪器类型，然后单击自动获取IP地址。
单击系统控制器，出现系统控制器的对话框，继电器的四个选项需要设置为start。
d、单击仪器开关按钮，将软件与仪器连接e、仪器参数视图里面，简单设置里面，模式选择二元高压梯度，设置总流速，泵B浓度，时间，柱温箱温度，时间程序。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪操作规程
1 目的：为了规范LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养，确保测量结果的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 接通电源，开启泵、柱温箱、检测器等辅助设备。
4.1.2 开启计算机，双击打开LC solution窗口，单击分析，进入工作站。
4.1.3 计算机与仪器连接后，把配制好的流动相放入贮液瓶中，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开冲洗阀，再按Purge键进行排空，检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，即再按Purge键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。
4.1.4 最大和最小保护压力设定4.1.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。
如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。
在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。
4.1.4.2最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：a) 当流路中发生了漏液；b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。
如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。
4.1.5泵启动和停止：按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。
泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。
需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。
4.2 方法的建立与调用4.2.1 新建方法点击文件菜单下“新建方法文件”，建立一个空白方法仪器参数视图中的高级选项中设置，数据采集：设置分析时间→LC程序时间：按需要设置时间程序→泵：设置泵的流速，流动相通道、压力上限→检测器：设置氘灯开启、池温度、检测波长→柱温箱：设置柱温。
_岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程
南京丰融化学技术有限公司Nanjing Frochem Tech Co.,Ltd.岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程1 目的：规范岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养，保证测量数据的准确可靠。
2 范围：适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱仪使用维护保养操作。
3 职责：岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作人员执行本规程；质量部管理人员监督实施。
4 内容：4.1 使用：4.1.1 仪器组成:LC-20AT型高压双泵; SPD-20AT紫外检测器;CTO-10AS柱温箱;进样器;混合器;色谱数据处理系统(LC solution软件);计算机;打印机。
4.1.2 电源:将电源插头分别插入插座后,接通外电源及稳压器电源,,依次打开泵,检测器,柱温箱，色谱数据处理系统,计算机的电源开关。
4.1.3 更换流动相:配制好的流动相经超声脱气后,将过滤头插入液体底部。
若使用的流动相为缓冲盐溶液，应先用低浓度的甲醇-水混合液(常用5:95)冲洗20-30分钟，再更换为含盐流动相。
4.1.4 LC-20AT泵的操作:4.1.4.1 打开泵的电源后,显示屏显示：4.1.4.2 排气泡：将泵上部中间的黑色旋钮逆旋转90~180度，按【Purge】,进入流动相被吸入过滤器至泵的排气冲洗操作, ,自动脱气完毕后(液体停止从废液管流出时),关闭排液阀即可。
4.1.4.3 。
4.1.5 SPD-20A型紫外检测器参数设定: 待检测器自检完毕且正常后,可进行参数的设定。
显示屏显示:。
4.1.6 色谱数据处理系统设定:4.1.6.1 在计算机上打开“LC solution”界面。
4.1.6.2 点击“通道1”“通道2”图标,选定通道。
输入实验信息，4.1.6.3 编辑方法：①采样控制：输入采样结束时间、文件前缀、文件保存方式、保存路径以及选择采样结束后自动积分或自动打印报告；②积分：选择积分参数、积分方法，并且根据实验所需对分析参数进行修改；③谱图显示：输入时间、电压显示范围，并选择色谱图注释内容；④报告内容编辑：根据实验所需对谱图尺寸、实验信息、报告内容及谱图显示等进行修改；4.1.6.4 点击【数据采集】：①点击【查看基线】；②点击【零点校正】。
岛津LC-20AT操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程1. 开机前准备①储液瓶中装有足够的已经充分脱气的流动相，并且吸滤器已经放入储液瓶中。
②排液管的另一端已经放入废液瓶中.2. 开机①更换流动相,把排液阀旋钮反时针方向旋180℃,打开排液阀，打开泵电源开关ON, 按purge键，泵开始运行，冲洗1分钟以后，自动停止，或按pump键或 purge键停止冲洗操作。
②设定流速，方法：func+ 流速+Enter+pump 。
观察屏幕显示压力，用流动相冲洗流路，直到色谱柱平衡。
③开检测器电源开关ON, 设定波长，方法：func+ 波长+Enter+CE④打开电脑，点击色谱工作站中文版，进入高效液相色谱工作站，设定相关参数。
3. 进样及数据采集①待色谱柱平衡后，可进样。
用微量注射器吸取待检测的溶液，反复润洗多次后，吸取需要体积溶液。
注意排除气泡。
②进样方法：在手动进样器处于“Inject”位置下，插针，再使处于"Load" 位置，推针进样，流动相将样品带入色谱柱，同时按下同步记录钮，稍后拔针。
③待一个样品数据采集完毕，按下记录钮，使停止记录，自动计算并给出结果，存储，用溶剂或甲醇冲洗进样阀。
继续反复操作，分析第二个样品，……。
④数据处理及打印报告。
退出工作站。
4. 关机①数据采集完毕后即可关闭检测器。
②待流路充分冲洗后，按pump键，pump指示灯灭，关泵电源。
③如果使用缓冲溶液作流动相，应先后使用足够的水和甲醇分别冲洗进样阀、泵头、色谱柱流路。
④使用完毕，必须在《仪器使用记录本》上填写有关内容，责任老师检查仪器完好性后方可离去。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪：岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪二、功能和用途：1、功能：本仪器采用高压梯度通过高压输液泵分别独立精确控制流量、调整溶剂浓度比例，实现高效率、高精度混合；即配备了可提供全波长三维信息的二极管阵列检测器，全新的光路设计与有效的梯形狭缝池设计保证了高分辨率和高灵敏度；也配备了灵敏度更高、选择性更好的荧光检测器；还配备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。
2、用途：本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样；二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应；荧光检测器可以检测产生荧光的物质，对如多环芳烃、维生素B 、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；蒸发光散射检测器对碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
三、操作步骤：1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A 二极管阵列检测器、RF-10AXL 荧光检测器和Varian380-LC 蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a 、首先打开UPS ，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT 溶液传输单元（泵）、CBM-20A 系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A ，CTO-20A 柱温箱电源打开。
（HPLC 组件的电源开关大都在仪器的右下角）b 、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge 键进行贮液瓶DGU-20A 3真空脱气机LC-20AT 溶液传输单元CBM-20A系统控制器SPD-M20A 二极管阵列检测器SIL-20A 自动进样器RF-10AXL 荧光检测器CTO-20A 柱温箱手动进样器Varian380-LC 蒸发光检测器自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪：三、操作步骤：1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a、首先打开UPS，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。
（HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角）b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。
c、双击Lc solution图标。
输入用户名Admin，点击OK。
单击系统配置的图标，出现系统配置的对话框。
单击自动配置，仪器自动将能找到的仪器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。
需要注意的是，仪器优先选择自动进样器，如果需要手动进样，需将自动进样器去掉。
单击仪器（通讯设置），选择正确的仪器类型，然后单击自动获取IP地址。
单击系统控制器，出现系统控制器的对话框，继电器的四个选项需要设置为start。
d、单击仪器开关按钮，将软件与仪器连接e、仪器参数视图里面，简单设置里面，模式选择二元高压梯度，设置总流速，泵B浓度，时间，柱温箱温度，时间程序。
然后选择下载，跑基线。
单击绘图，可以看查看基线。
3、方法编辑a、下图中看到仪器参数视图，选择高级，然后依次改变其中的参数。
如果仪器为PDA检测器时，则按以下进行设置。
数据采集：LC停止时间为。
采集时间打勾，结束时间为分析样品的时间。
LC时间程序：如果等度洗脱，则设置如图中 controller stop。
进行梯度洗脱时需要如图所示进行设置。
岛津20AT操作规程
LC-20AT 高效液相色谱仪操作规程仪器组成LC-20AT泵，SPD-20A紫外检测器，llheodyne7752i手动进样器，柱温箱，LCsolution色谱工作站。
仪器使用2.1准备好流动相，按色谱柱上标示的流动相流经方向连接色谱柱，依次打开电脑电源，泵，检测器，柱温箱。
2.2 打开旁通阀（逆时针旋转90-180度），按【purge】键进行吸入过滤器至泵的冲洗操作。
2.3关闭旁通阀（顺时针旋转90-180度），按【pump】键。
2.4双击进入LCsolution工作站，选择“操作”标签，进入系统主界面，听到连续两次滴滴声，确认连接正确。
2.5在LCsolution工作站中，选择“实时分析”—“数据采集”，在仪器参数视图面板中，设定采集时间，检测波长，流速，柱温。
设定完成后点击“文件”下的“方法另存为”保存方法，并按“下载”，使参数下传至仪器各部分。
2.6按“单次分析”按钮，依次填写样品名，样品ID,选择上述保存的方法文件，并在数据存储路径中填写文件名，点击确定。
2.7桌面出现提示框，扳动进样伐手柄至“inject”位置，插入微量注射器，扳动进样伐手柄至“load”位置，注入供试液，扳动进样伐手柄至“inject”位置, 进样完成，分析开始。
2.8分析结束后，进入“再解析”中的LC数据分析，打开被分析文件。
2.9选择“向导”，设置合适的积分参数，半峰宽，斜率值对目标峰进行自动积分。
2.10在“批处理”中，可设置生成校准曲线。
2.11得到结果后，点击“报告模板”，编辑报告方式，编辑完成后保存文件。
将处理好的数据以编辑好的模板输出报告。
2.12关闭检测器，冲洗色谱柱，先将流速降到0之后，再依次关闭泵，柱温箱等设备。
关闭软件所有窗口，退出软件，再依次关闭电脑主机，显示器，打印机。
2.13断开电源并填写使用登记。
岛津LC-20AT液相色谱操作步骤
岛津LC-20AT高效液相色谱操作步骤1、流动相的处理♦共有5个流动相储液瓶。
一般RP-HPLC中，A （无机相）、B （有机相）为分析流动相；C （水）、D （甲醇）用于柱子后处理清洗；50%甲醇-水用于清洗自动进样针♦流动相体积V A、B=100+总流速x比例系数x分析时间（mL）；V c＞300mL：VD^350mL； V50%甲曲3 OOniL♦所有流动相须用0.22um孔径滤膜过滤（根据有机相和无机相选用相应滤膜）, 清洗储液瓶，不能在清洗过程中留下污迹，并超声30min,超声完成后禁止剧烈摇晃2、开机♦开启插座电源一►电脑开机♦打开仪器电源（LC—20AT最后打开，等待数秒后“control”指示灯亮）♦打开软件（Labsolution -------- ►仪器---- ► LC一20A）,若连接正常则软件显示LC就绪3、自动排气♦将各流动相过滤头缓慢放入流动相中♦在简单设置界面设置总流速为0.2mL/min：在自动排气界面设置自动排气参数（A、B、C、D各流动相＞5min,自动进样器＞25min）,不勾选"排气结束后运行控制器”♦“下载” 一►“执行自动排气”♦等待排气结束♦稀释后的样品（浓度约lmg/mL,不宜过高）用注射器经0.22um过滤器注入样品瓶♦样品h'Z＞2/3样品瓶体积（1・5mL样品瓶）♦按序号依次将样品瓶放入自动进样器的样品架上♦切记：将样品架推到底！5、系统平衡及设置分析条件♦自动排气完成后，设置柱温、检测波长等参数（建议柱温高于环境10°C）, 用梯度洗脱初始流动相平衡柱子（流动相比例与梯度洗脱初始比例一致）♦“下载” 一►“激活/取消激活仪器S此时系统显示：等待柱温稳定♦缓慢增加总流速至样品分析所需流速,V max=lml/min （每隔1分钟增大0.2mL/min,注意每次增大都点击“下载”）♦在时间程序界面设置梯度洗脱条件♦若要保存方法文件：文件一►方法文件另存♦等待基线平稳（留意泵压力是否稳定），待系统显示：LC就绪，右击，进行基线测试斜率（一般＜3000即可）♦开始测样6•“单次分析开始”或“批处理”6.1单次分析开始♦依次输入样品名（样品ID可有可无）、样品瓶、瓶架（1）、进样体积等♦注意数据文件所在文件夹，输入数据文件名一►打开♦确定6.2批处理♦“向导”♦“新建匕样品组号（1）,选择“未知样品匕依次输入文件名及其他♦注意批处理文件所在文件夹，勾选“数据文件名自动递增”、不勾选“自动创建文件名”♦完成♦选中全部序列♦开始批处理7•柱子后处理：先用易溶解样品的流动相清洗（一般用高比例有机相洗15min）, 10%甲醇洗30min,再用90%甲醇洗30min；长期不使用保存于纯甲醇中方法一：♦在简单设置界面设置：流动相C-90%：流动相D-10% ― 下载♦切换柱温箱off♦30min后设置：流动相G10%；流动相D-90% ―►下载方法二（推荐）：♦设置洗柱程序♦“下载”♦“单次分析开始” 一►样品瓶输入文件名“洗柱”♦系统提示“禁用釆集” 一►确定8•数据处理（打开Labsolution —►再解析）8.1标准曲线♦数据处理一打开文件一“向导”♦勾选特征峰、外标法♦依次输入最大级别数（标曲的点数）、单位、化合物名、浓度等一完成♦应用到方法一►方法另存为♦主项目一批处理一打开批处理文件♦填写表格：首行（标准、初始化标准点），（标准样数与前面的最大级别数相对应，剩下的为未知）、（文件方法为先前保存的方法，向下填充）、（标准样品级别号分别1.23.4.5未知样品0）♦批处理再解析开始一►批处理文件另存♦主项U ― 校准曲线（可找到已做成的标曲）8.2生成报告♦打开要生成报告的数据文件♦视图一►手动积分栏，处理数据文件♦生成报告♦右击“属性”进行调整，预览、打印8.3检测限、定量限的确定、扣除背景（略）9•实验结束后，“切换泵ON/OFF ”确认泵泵压力降为零—＞关软件一再关仪器10•电脑关机—＞关闭插座电源。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪操作规程
1 目的：为了规范LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养，确保测量结果的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 接通电源，开启泵、柱温箱、检测器等辅助设备。
4.1.2 开启计算机，双击打开LC solution窗口，单击分析，进入工作站。
4.1.3 计算机与仪器连接后，把配制好的流动相放入贮液瓶中，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开冲洗阀，再按Purge键进行排空，检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，即再按Purge键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。
4.1.4 最大和最小保护压力设定4.1.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。
如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。
在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。
4.1.4.2最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：a) 当流路中发生了漏液；b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。
如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。
4.1.5泵启动和停止：按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。
泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。
需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。
4.2 方法的建立与调用4.2.1 新建方法点击文件菜单下“新建方法文件”，建立一个空白方法仪器参数视图中的高级选项中设置，数据采集：设置分析时间→LC程序时间：按需要设置时间程序→泵：设置泵的流速，流动相通道、压力上限→检测器：设置氘灯开启、池温度、检测波长→柱温箱：设置柱温。
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岛津LC-20AT型高效液相色谱系统标准操作规程
一、目的
规范岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
二、范围
本规程适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
三、职责
质检室仪器分析员负责岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的日常使用和维护。
四、操作规程
1、流动相的处理
1.1 过滤溶剂
溶剂在使用定要用0.45μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片本实验室
有水溶性和脂溶性两过滤膜供选择（反光面朝上），缓冲盐先用水膜过滤，和有机相混合后再用有机滤膜过滤，滤前先滤少量纯化水清洗滤器。
1.2 保持储液瓶的清洁
用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3保证溶剂的质量
一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法
1.4.1 流动相脱气不充分
流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，
增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅
流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
过滤器应先用水超声，再用甲醇超声处理。
这种情况下，流动相需要重新过滤。
1.4.3 流动相和储液器被污染
由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。
污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，
而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出余的峰。
用梯度洗脱时弱流动相可以使
污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一大的伪峰。
有时基线噪音突然增大或突然提高，都是因为反复加进新的流动相或系统用得太久（通宵）所造成的。
新加进的流动相有污染物或者流动相长霉，繁殖了细菌。
脏的储液器会污染清洁的流动相。
每种流动相备有专用的储液器，或者定期报废储液器。
已经污染的流动相一定要废弃掉。
2、仪器组成及电源
本系统可进行二元溶剂的梯度洗脱操作
2.1 仪器组成
本系统由LC-20AT型高压双泵（内含混合器）；SPD-M20A型二极管阵列检测器；7725i 进样器；CO-Ⅳ柱温箱；色谱数据处理系统（LC-solution软件）；计算机；打印机。
2.2 电源
接通外电源及稳压器电源，依次打开泵、检测器、柱温箱，色谱数据处理系统，计算机的电源开关。
3、准备
使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜），超声脱气10min以上待用。
根据待检样品的需要选用合适的色谱柱（柱进出口方向应与流动相流向一致）和定量环。
配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
注意：真空抽滤装置和超声波装置为液相色谱实验室必须的辅助设备。
4、LC-20AT型高压输液泵的操作
4.1开机和平衡系统
先把吸滤头放入甲醇-水（10：90）或流动相瓶中，如果使用的流动相为缓冲盐溶液，应先用纯水冲洗10分钟左右再使用流动相，以免盐析出损坏系统。
打开排液阀（将泵上部的黑色旋钮逆旋转90～180度），按purge键排液2～3分钟，purge完毕后关闭排液阀，按pump键，泵启动，指示灯亮，按func键调流速（流速由低到高慢慢升至1.0ml/min），
如有柱温条件可同时开启柱温箱，平衡系统，此时可以同时进行手动进样器的清洗，手动进样器清洗液一般使用与流动相比例接近的不含缓冲盐的试剂也可以用甲醇：水＝50：50代替，观察检测器基线平稳后即可做样。
注意：如系统为正相和反相交换使用，应先将所有管路用异丙醇清洗后再更换新流动相使用。
4.2清洗系统和关机
4.2.1手动进样器清洗：用注射器吸20ml超纯水后套上冲洗头，将清洗头轻轻顶在进样口上(不宜用力太大，否则容易损坏进样口)，使进样阀保持在Inject位置，慢慢将水推入，水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈，由样品溢出管排出。
尤其使用完缓冲盐流动相时，清洗时使用下面工具，先用注射器吸入20毫升蒸馏水，套上针头，插入泵头清洗管任意一端，推入蒸馏水，另一端流入废液杯，重复2～3次即可！
4.2.2色谱柱清洗：继续以分析中使用流动相冲洗10分钟以上，待基线平稳后关闭检测器，冲洗色谱柱。
如流动相不含缓冲盐，可以用甲醇：水＝70：30（或用纯甲醇）直接冲洗30分钟以上后把流速设为零，然后关闭所有仪器设备，顺序为：先退出工作站软件，再依次关闭系统控制器、检测器、柱温箱、泵；如流动相含缓冲盐可先用纯水冲洗10分钟，再用甲醇：水＝10：90冲洗20～30分钟后，再用甲醇：水＝70：30（或用纯甲醇）冲洗30分钟，观察泵压是否稳定，稳定后流速降为零后再关闭仪器各部分电源，然后关闭总电源离开实验室。