FAM羧基荧光素修饰引物检测VNTR基因座遗传多态性
分子生物学名词解释
1、3’-、5’- 1、viroid2、A C T G 2、PSTV3、Melting Temperature 3、prion PrP c PrP sc3、Spontaneous Mutation4、scrapie4、Transition Transversion5、allele5、Hotspot6、Modified bases7、Denaturation renaturation（annealing）1、DMD 1、shot-gun approach2、DHFR 2、linker3、Translocation 3、TdT4、5’UTR 3’UTR 4、Saccharomyces cerevisiae5、Globin 5、C.elegans6、Rubisco 6、gene amplification7、transformation1、plasmid λ-phage cosmid 1、PLoS2、GATA 2、redundancy3、Genome 3、biochip4、Genetic map（linkage map） 4、SAGE5、Genetic polymorphism 5、DD法6、SNP 6、EST7、Genetic markers 7、HDA8、SSR PAPD AFLP 8、RACE9、Genomics TRanscriptomisc Proteomics 9、mtRNA1、gene family 1、cistronMet2、Alu family 2、tRNAf3、VNTR（STR） 3、PABP4、globin 4、RRF5、cryptic satellite 5、RF6、buoyant density7、DNA fingerprinting1、U D I A 1、trans-acting factor2、Suppressor 2、cis-acting elegent3、Chaperones 3、structural genes4、Self-assembly 4、CRP5、Protein translocation 5、ReIA6、SRP 6、idling reaction7、Translocon 7、ppGpp pppGpp8、TRAM 8、alarmone9、TOM TIM TOC TIC SecYEG Sec61 9、stringent response10、Pores NPC 10、attenuation attenuator11、Proteasome 11、microRNAs12、E1、E2、E3 12、RNAi RNA silencing13、Coding strand 35 hexamer 13、siRNA RISC10 hexamer intrinsic terminator 14、lytic infectionLysis prophage lysogeny integration episome plasmidInduction of prophage immunity of phageOR、PRM、clear plaque、PR/OR、PL/ OL、tR1、tL1、cI、cro、N、PR15、Crown gall disease，Ti plasmid ，OpineNopaline plasmids，Agrobacteria，octopine plasmids，agropine plasmids Ri plasmids，Chimeric，teratoma1、3′—end and 5′—end：DNA或RNA单链带有游离3’-羟基或其磷酸酯的一段叫做3’端；DNA或RNA单链带有游离5’-羟基或其磷酸酯的一段叫做5’端。
布鲁氏菌病实验室诊断研究进展
布鲁氏菌病实验室诊断研究进展高明华樊庆德徐春光杨晓刚（呼伦贝尔学院生命科学与化学学院内蒙古呼伦贝尔021008）布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的一种重要人兽共患病。
根据致病性和宿主特异性，将布鲁氏菌分为6个种19个生物型，即羊种布鲁氏菌(B.meltensis)、牛种布鲁氏菌(B. abortus)、猪种布鲁氏菌(B. suis)、绵羊附睾种布鲁氏菌(B.ovis)、犬种布鲁氏菌(B. canis)和沙林鼠种布鲁氏菌(B. neotomae)。
另外，从海洋动物中分离到在致病性和分子特征上有别于前6种的布鲁氏菌，定为海洋种布鲁氏菌(B. maris)。
据CDC报告，我国人布鲁氏菌病发生严重，2005~2007年全国布鲁氏菌病新发病人分别为18 416、19 013、21 901例，2008年1~10月新发病数已达27 264例，形势十分严峻。
流行病学调查表明，感染来源主要是患布鲁氏菌病的羊，其次是牛及其他动物。
并且具有疫区范围扩大、爆发点增多、典型病例增多、人群分布以农民和牧民为主等特点。
为有效预防和控制人和动物布鲁氏菌病，加强对动物布鲁氏菌病的检疫监测力度十分重要。
为此本文就布鲁氏菌病实验室诊断方法研究进展作以综述。
1 免疫学诊断技术1.1 血清凝集性试验布鲁氏菌病传统检测方法有血清凝集试验、全乳环状试验(MRT)和抗人免疫球蛋白试验(Coomb’s)等。
经典血清凝集试验包括标准试管凝集试验(SAT)和平板凝集试验(PAT)等在发达国家已基本上停止使用，取代方法是缓冲布鲁氏菌抗原试验，如虎红平板凝集试验(RBT)等。
在国际贸易中，缓冲布鲁氏菌抗原试验是牛、羊、猪种布鲁氏菌病的指定试验。
乳牛MRT依然是乳牛布鲁氏菌病监测的主要方法。
由于凝集性试验是基于检测针对布鲁氏菌多糖O-链的抗体，因此会与有类似多糖O-链的细菌如耶尔森氏菌O:9等出现交叉反应。
1.2 补体结合试验（CFT）CFT至今仍是布鲁氏菌病诊断的重要方法，是牛、羊及绵羊附睾种布鲁氏菌病国际贸易指定试验，并作为确诊用。
基因多态性的检测方法
基因多态性的检测方法一、直接方法1.目标基因测序：通过对目标基因进行测序，可以直接得到其等位基因的序列信息。
目前，高通量测序技术的发展使得测序成为一种常用的基因多态性检测方法。
2.杂交技术：杂交技术可以用于检测单核苷酸多态性（SNP）和小片段插入/缺失等变异。
常用的方法包括限制性片段长度多态性（RFLP）和串联重复片段多态性（VNTR）等。
3.聚合酶链反应（PCR）：PCR可以通过扩增目标片段的方法，检测基因多态性。
例如，引物在目标序列上的配对使得PCR扩增产物的长度与目标基因的等位基因有关。
通过测定扩增产物的长度变化，可以确定基因多态性。
4.克隆测序：克隆测序是一种将目标基因克隆到载体中，并对克隆的DNA进行测序的方法。
这种技术可以用于检测较大的插入/缺失变异以及基因拷贝数变异等。
二、间接方法1.单核苷酸多态性（SNP）芯片：SNP芯片是一种高通量并行检测SNP 的技术。
它通过固定在芯片上的特异性探针与待测样品中的SNP位点进行杂交，然后使用荧光信号检测方法来确定不同等位基因的存在情况。
2.DNA芯片：DNA芯片可以广泛用于基因多态性的检测。
它可以同时测定数百甚至数千个基因，快速、准确地检测多个等位基因的存在情况。
3.高分辨率融解曲线分析：高分辨率融解曲线分析可以用来区分等位基因之间的序列差异。
该方法通过双链DNA在升温过程中解旋变性的温度差异，来分析目标序列中的等位基因。
4. 二代测序技术：二代测序技术（如Illumina和Ion Torrent）基于多组重叠的小片段测序，可以用于高通量的基因多态性检测。
它可以同时测定数百万个SNP位点，识别多个等位基因的存在情况。
综上所述，基因多态性的检测方法涵盖了直接方法和间接方法。
这些方法可以用于检测单核苷酸多态性、插入/缺失变异、基因拷贝数变异等不同类型的基因多态性。
随着技术的不断发展，基因多态性的检测方法将变得更加高效、准确和经济。
如何用PCR法检测基因的多态性
如何用PCR法检测基因的多态性PCR法（聚合酶链反应法）是一种广泛应用于分子生物学领域的基因检测技术。
它能够在短时间内扩增特定序列的DNA片段，从而实现对基因多态性的检测。
以下是使用PCR法检测基因多态性的步骤：1.设计引物首先，需要根据目标基因的序列设计引物（寡核苷酸序列）。
引物一般包括一对前、后引物，它们各自与目标序列的两侧互补配对。
引物的设计应考虑到目标基因区域的多态性，以确保引物与所有可能的变体都能配对。
2.提取DNA从目标生物体的组织样本（如血液或组织）中提取DNA。
DNA提取方法可以选择物理法或化学法，如离心法和盐析法等。
3.PCR反应将提取到的DNA作为PCR反应的模板，加入引物、四个核苷酸和聚合酶等反应物，进行PCR反应。
PCR反应由多个循环组成，每个循环包括DNA的变性、引物的结合和DNA的扩增。
4.凝胶电泳分析将PCR反应产生的扩增产物进行凝胶电泳分析。
凝胶电泳是一种将DNA分子根据大小分离的方法。
将PCR产物加载到琼脂糖凝胶槽中，然后通过电场进行电泳。
根据其大小，DNA片段将在凝胶中移动到不同的位置。
通过与大小已知的DNA分子比较，可以确定PCR产物的大小。
5.基因型分析通过比较PCR产物的大小，可以检测到基因的多态性。
在不同基因型的个体中，PCR产物的大小可能会有所不同。
可以将PCR产物分成不同的等级，以进行基因型分析。
6.数据分析最后，对PCR结果进行数据分析和解释。
根据PCR产物的大小和基因型等信息，可以确定个体的基因型。
如果一些基因型与一种特定的表型相关联，那么可以推测该基因是多态的，并且可能与该表型相关。
除了上述步骤，还可以通过引入序列特异性的限制酶切位点、单特异性引物扩增等方法，进一步确定基因多态性。
此外，PCR法还可以与其他技术如测序、SNP分析等相结合，以获得更详细的多态性信息。
总之，PCR法是一种快速、敏感且广泛应用的检测基因多态性的方法。
通过合理的引物设计、PCR反应、凝胶电泳和数据分析等步骤，可以确定基因的多态性及其与表型相关性，为遗传研究和疾病诊断等领域提供重要信息。
分子生物学考试名词解释与考点(精要)
一，名词解释1.（Northern blot）Northern印迹杂交。
这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。
Northern 印迹杂交的RNA吸印与Southern印迹杂交的DNA吸印方法类似，RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交。
（Southern blot）Southern印迹杂交是一种常用的DNA定量的分子生物学方法。
一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
2.（cis-acting element）顺式作用元件。
存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，它们的作用是参与基因表达的调控，本身不编码任何蛋白质, 仅仅提供一个作用位点, 要与反式作用因子相互作用而起作用。
(trans-acting factor)反式作用因子。
是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。
3. (VNTR )可变数目串联重复多态性。
可变数目串联重复序列是重复单位为9~24bp，重复次数变化大，呈高度多态性的DNA序列，又称小卫星DNA，拷贝数10~1000不等。
（STR）短串联重复序列。
又称微卫星DNA，是一类简单的寡核苷酸串联重复序列，其重复单位为2~6bp，重复次数10~60次左右，其长度通常小于150bp，分布在所有染色体中。
4.（viral oncogene）病毒癌基因。
病毒（大多是逆转录病毒）具有的一种可以使宿主细胞发生癌变的基因。
源自细胞中的正常基因。
(cell-oncogene)细胞癌基因。
存在于正常的细胞基因组中，与病毒癌基因有同源序列，具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。
在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因，当其受到某些条件激活时，结构和表达发生异常，能使细胞发生恶性转化。
基因定位常用的方法
定位克隆鉴定的第一批基因利用了特定基因座的染色体畸变，Duchenne肌营养不良(DMD)基因的克隆是一个重要的例子。
假肥大型肌营养不良症(DMD/BMD)
由于抗肌萎缩蛋白(dystrophin)遗传性缺陷所致的进行性肌萎缩的致死性神经肌肉性遗传病,发病率为1/3500，XR遗传。 主要症状:通常3---5岁发病,开始走路不稳,鸭型步态,上楼梯困难,Gower征阳性.进行性肌萎缩伴有腓肠肌假性肥大,10多岁下肢瘫,一般在20多岁之前死于心衰或呼吸衰竭.
3）原位杂交的特点： 杂交在载玻片上的中期染色体上进行，而不是在溶液和膜上进行。所谓原位是指在标本上DNA原位变性，再与放射性或非放射性物质（通常用3H）标记的已知核酸探针杂交，通过放射自显影来检测染色体上特异DNA或RNA顺序，用放射性颗粒在某条染色体的区带出现的最高频率或荧光的强度来确定探针的位置，从而准确地进行基因定位。
因此在HAT培养基上
人细胞： ①由于A的存在，正常的DNA 合成通路受阻 。 ②同时由于HGPRT的缺乏，无法利用次黄嘌呤通过旁路合成DNA（ 嘌呤合成障碍）
鼠细胞：由于A的存在正常的DNA合成通道受阻，有HGPRT可以利用次黄嘌呤合成腺嘌呤，鸟嘌呤，但由于无TK，无法合成胸腺嘧啶。（嘧啶合成障碍 ） 杂种细胞：有HGPRT旁路合成腺嘌呤,鸟嘌呤；并可以利用TK合成胸腺嘧啶（嘌呤和嘧啶都可以正常合成）
将筛选出来的杂种细胞转移到正常培养基继续培养，由于人和鼠都有各自不同的生化和免疫学特性，Miller等运用体细胞杂交并结合杂种细胞的特征，证明杂种细胞的存活需要胸苷激酶（TK）。凡是含有人17号染色体的杂种细胞都因有TK活性而存活，反之则死亡，从而推断TK基因定位于17号染色体上，这是首例应用体细胞杂交法进行的基因定位。
华南农业大学农学院《生物技术》复习题(附答案)
华南农业大学农学院《生物技术》复习题（附答案）一、有关名词遗传标记指可稳定遗传的、易于识别的特殊的遗传多态性形式。
遗传多态性现代遗传学中是指基因组中任何座位上的相对差异或DNA序列的差异。
形态标记简单性状的遗传（普通遗传学）细胞学标记染色体变异与细胞学特征（细胞遗传学）生化标记同工酶与电泳技术（生化遗传学）同工酶是指具有功能相同而结构及组成有差异的一类酶分子标记DNA标记，以染色体DNA上特定的核苷酸序列作为标记。
PCR 聚合酶链式反应。
是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。
RFLP 限制性片段长度多态性。
不同样品DNA经限制性酶酶解所产生片段大小的差异。
RAPD 随机扩增多态DNA。
是以一个寡聚脱氧核苷酸单链作随机引物(primer) ，通过PCR扩增基因组DNA，获得长度不同的多态性DNA片段，然后用凝胶电泳分离扩增片段，经染色来显示扩增片段的多态性。
SSR 简单序列重复。
是一类由几个核苷酸组成的基序（motif）为重复单元串联组成的DNA序列，广泛分布于基因组的不同位置。
AFLP 扩增片段长度多态性。
是一种通过限制性内切酶酶切DNA产生不同长度DNA片段，再结合PCR 技术来检测DNA多态性的分子标记技术。
FM遗传图谱又称遗传连锁图谱。
指反映基因组内基因(遗传标记)在染色体上线性排列顺序及其相对位置的图谱。
分子遗传图谱不同分子标记在染色体上的相对位置或排列情况。
作图群体是指用于遗传作图的符合孟德尔定律的分离群体。
RIL群体即重组近交系群体，是由重组近交系组成的分离群体，由F2经多代自交一粒传使后代基因组相对纯合的群体。
DH群体是由通过对F1进行花药离体培养或通过特殊技术获得单倍体植株再经染色体加倍而获得的加倍单倍体群体。
主效基因又称主基因，是一类控制质量性状的基因，其性状表现为不连续的变异。
微效基因是一类控制数量性状的基因，因此通常称为数量性状座位QTL，其性状表现为连续的变异。
人类DNA分析：第四章 小卫星VNTR
第四章 小卫星VNTR
9、DXS52基因座
➢ 定位于人类染色体Xq28，与A型血友病基因 （hemophilia A）紧密连锁
➢ 1985年 Oberle等人发现 ➢ Y染色体上无DXS52基因座，只有一个基因 ➢ 女性有两个DXS52基因 ➢ 女性：H = 0.77 Dp = 0.93 ➢ 男性：Dp = 0.89
第四章 小卫星VNTR
三、小卫星VNTR基因座分型基本技术
1、试剂 ➢ DNA提取 ➢ 引物 ➢ 缓冲液 ➢酶 ➢ 检测用试剂等等
第四章 小卫星VNTR
2、PCR扩增
第四章 小卫星VNTR
3、电泳分离与检测
➢ 琼脂糖凝胶电泳与EB染色法 ➢ 垂直非变性连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离法
第四章 小卫星VNTR
第四章 小卫星VNTR
第四章 小卫星VNTR
五、应用中的注意事项
1、污染问题
2、模板DNA
➢ 量少? 量多? ➢ 一般为1～100ng为宜 ➢ 抑制剂
第四章 小卫星VNTR
3、较小等位基因优先扩增
➢ 二个等位基因扩增产量差异明显，易将杂合子误 判为纯合子，尤其是D17S30、ApoB基因座
➢ 模板DNA用量越少，越容易出现等位基因丢失
第四章 小卫星VNTR
第四章 小卫星VNTR
4、D17S30基因座（pYNZ22）
➢ 1988年 Wolff报道 ➢ 定位于17p 重复单位数70bp ➢ H = 0.82 Dp ＞ 0.94 ➢ 易发生较小等位基因优先扩增，尤其是当模板DNA量低
时，易造成等位基因丢失
第四章 小卫星VNTR
第四章 小卫星VNTR
第四章 小卫星VNTR
7、IL-6基因座
FAM羧基荧光素修饰引物检测VNTR基因座遗传多态性
作者： 顾明波 李晓平 王剑 黄玉立 杜庆新
作者机构： 黑龙江省公安厅刑事技术处遗传室,哈尔滨,150008 黑龙江省公安厅刑事技术处遗传室,哈尔滨,150008 黑龙江省公安厅刑事技术处遗传室,哈尔滨,150008 黑龙江省公安厅刑事技术处遗传室,哈尔滨,150008 黑龙江省公安厅刑事技术处遗传室,哈尔滨,150008出版物刊名： 刑事技术
页码： 60-61页
主题词： FAM羧基荧光素 引物修饰 D1S80基因座 遗传多态性
摘要： FAM羧基荧光素(Carboxyfluorescein),是荧光素衍生物的一种,5FAM较6FAM 更经常使用.Carboxyfluorescein5succimidyl ester,即5FAM(NHS)广泛存在于荧光标记试剂盒.FAM与氨基反应快速,产物也更稳定.FAM适用于Argon-ion Laser的488nm光谱
线,Abs/Em=492/518nm(pH=9.0),具有荧光素衍生物的普遍特性,在水中稳定.5FAM主要应用于片段长度分析中引物修饰和DNA自动测序中标记其中的d/ddCTP(ABI公司),也经常用于PCR 产物定量,核酸探针等.……。
四引物法arms-pcr检测技术原理
四引物法(ARMS-PCR)检测技术原理1. 引言在当前的医学与生命科学研究领域中，四引物法(ARMS-PCR)检测技术作为一种高效、准确的分子生物学技术，广泛应用于基因突变、多态性等研究领域。
本文将就四引物法(ARMS-PCR)检测技术的原理和应用进行深入探讨，帮助读者更全面地了解该技术。
2. 四引物法(ARMS-PCR)检测技术原理四引物法(ARMS-PCR)检测技术是一种用于检测核酸序列变异的高效方法。
其原理主要基于引物的设计和PCR扩增技术。
在该方法中，通过合理设计特定引物，实现对目标基因的突变或多态性位点进行检测。
对于要检测的位点，设计两对引物，其中一对引物是特异性引物(allele-specific primers)，另一对引物是控制引物(external control primers)。
特异性引物用于特异扩增突变或多态性位点的目标基因片段，而控制引物则用于扩增相邻的正常基因片段。
在PCR扩增反应中，特异性引物能够选择性地结合目标基因的突变或多态性位点，从而实现对其扩增；而控制引物则能够扩增相邻的正常基因片段。
通过两对引物的配合作用，可以在同一PCR反应中同时检测靶基因的突变和正常等位基因，从而实现对目标基因的位点检测。
3. 四引物法(ARMS-PCR)检测技术的应用四引物法(ARMS-PCR)检测技术在遗传疾病、肿瘤学、药物代谢等领域具有广泛的应用价值。
在遗传疾病领域，该技术可用于检测单核苷酸多态性(SNP)、突变引起的遗传病等。
在肿瘤学领域，四引物法(ARMS-PCR)检测技术可用于鉴定肿瘤特异性突变，指导个体化治疗。
在药物代谢领域，该技术可用于检测与药物代谢相关的基因突变，从而指导临床用药。
4. 个人观点与理解四引物法(ARMS-PCR)检测技术是一种高效、灵敏的分子生物学技术，对于基因突变、多态性等研究具有重要意义。
通过合理设计特异性引物和控制引物，该技术能够实现对目标基因位点的准确检测，为医学研究和临床应用提供了强有力的工具。
[医学]遗传多态性与基因突变
![[医学]遗传多态性与基因突变](https://img.taocdn.com/s3/m/9fcceb04d5bbfd0a795673d4.png)
物理因素
✓ 紫外线
紫外线的照射可使DNA顺序中相邻 的嘧啶类碱基结合成嘧啶二聚体，最常 见的为胸腺嘧啶二聚体（TT）。在复制 或转录进行时，该处碱基配对发生错误， 从而引起新合成的DNA或RNA链的碱基 改变。
紫 外 线 诱 发 的 胸 腺 嘧 啶 二 聚 体
物理因素
续
。
✓ 电离辐射
射线直接击中DNA链，DNA分子吸 收能量后引起DNA链和染色体的断裂， 片断发生重排，引起染色体结构畸变.
✓ VNTR 区域
VNTR 示意图
VNTR的特点 ：
➢ 按孟德尔方式遗传 ➢ 复等位基因, 多态信息含量高 ➢ 用于个体鉴别、遗传分析和基因定位等
DNA指纹
用适当的限制性内切酶消化基因组DNA， 从各位点可获得一系列长度不等的小卫星片 断，如用适当的探针做印记杂交, 获得的具 有高度个体特异性的带谱。 用途：个体识别、亲子鉴定
✓ 环境因子易感基因的检出 ✓ 指导用药和药物设计
肝酯酶基因启动子区的一个多态与他汀类降血脂的效果 有高度的相关性
（Zambon A, et al Circulation, 2001, 103(6) :792-798）
参考文献
➢ 张思仲.人类基因组的单核苷酸多态性及其医学应用, 《中华医学遗传学杂志》1999,16(2):119-121.
➢ 张思仲. 基因多态性研究与遗传性疾病,《中华
医学遗传学杂志》2000,80(9):654-656.
基因突变的概念
基因突变(gene mutation)是 指基因组DNA分子某些碱基或其 顺序发身改变.
基因突变
生物进化的基础 产生新的基因 遗传病产生的原因
基因突变的分子机制
一般分为两大类－静态突变和动态 突变。
法医物证学
法医物证学：是以法医物证为研究对象，以提供科学证据为目的，研究应用生命科学技术解决案件中与人体有关的生物检材鉴定的一门科学。
法医物证鉴定：鉴定是指在诉讼过程中，司法机关指派或聘请具有专门知识的人就案件中的专门性问题做出判断性结论的科学活动。
遗传多态性：指控制遗传标记的基因座上存在有两个或两个以上等位基因，并且等位基因的频率大于0.01。
序列多态性（sequence polymorphism）：指某基因座碱基排列方式的个体差异。
PCR-ASO技术（等位基因特异性寡核苷酸探针杂交分析法）：根据碱基互补的原则，制备识别特定寡核苷酸序列的单链DNA探针，并标记示踪物，在高强度条件下与变性DNA样品杂交，检测示踪物，阳性者为检出相应的等位基因。
DNA分子杂交：是指来源于不同DNA分子的两条非同源DNA单链，因部分碱基互补，在退火条件下，局部碱基配对结合形成一条双链核苷酸的过程。
DNA探针（DNA probe）：是指经示踪物标记的，能与互补的寡核苷酸序列实现退火杂交的已知核苷酸片段。
小卫星重复单位变异分型（MVR）:是指VNTR基因座的重复序列同时存在内部的碱基序列的变异，根据碱基差异设计了上游5，端为共同的引物，下游3，端有两种引物，两组引物的PCR产物在相邻的2条泳道上电泳，比较相对应位置上有无谱带，进行数字编码分型。
等位基因特异性PCR（ASPCR）：是指在确定某一碱基是该等位基因所特有的基础上，设计一对引物，两引物3，端的第一碱基均与等位基因特有碱基相对应，待扩增的位点上有多少等位基因便有多少引物。
在反应体系中，只有完全碱基对应的引物才得以扩增，不对应的引物则得不到扩增或扩增效率较低。
由于各等位基因引物长度不同，通过分析扩增引物长度，确定等位基因。
规则抗体：ABO血型抗体恒定存在于正常人的血清中，可以预测其存在。
又称为天然抗体。
孟买型：红细胞上及唾液中全无A、B、H抗原，血清中含有抗A、抗B、抗H抗体的变异型。
vntr基因型
vntr基因型VNTR基因型是一种遗传标记，指的是可变数目的复发序列。
VNTR代表的是"variable number tandem repeats"，也被称为SSR（简单序列重复）或microsatellites （微卫星）。
这种遗传标记常用于研究人类和其他物种的遗传多样性、亲子鉴定以及犯罪调查等领域。
在人类基因组中，VNTR通常是由重复单元序列组成的。
重复单元由2-6个碱基对组成，这一序列在基因组中存在多个重复，形成连续的重复片段。
因为重复单元的数目在个体之间可能存在差异，所以可以用来识别不同个体之间的遗传差异。
VNTR基因型的分析常通过PCR扩增、基因分型与碱基序列比对等方法进行。
首先，需要选择适当的VNTR位点，并设计引物来扩增这些位点。
然后，使用PCR技术扩增DNA样本中的特定VNTR位点。
扩增产物经电泳分离并进行PCR产物分析，可以得到每个个体的特定VNTR基因型。
VNTR基因型在亲子鉴定中起着重要的作用。
由于VNTR在个体之间的差异较大，可以通过比对父母和子女的VNTR基因型来确定亲子关系。
如果父母与子女之间的VNTR基因型一致，那么可以确认其亲子关系。
因此，VNTR基因型在法医学中也常用于犯罪调查和人身份识别。
除了在人类遗传学中的应用，VNTR基因型也用于研究其他物种的亲缘关系和遗传多样性。
通过比对不同个体的VNTR基因型，可以了解物种内部的亲缘关系以及不同物种之间的演化历史。
此外，VNTR基因型也被用来研究物种的遗传多样性和种群遗传结构，以便更好地保护濒危物种和进行种群管理。
总而言之，VNTR基因型是一种重要的遗传标记，用于研究个体之间的遗传差异、确定亲子关系以及研究物种的亲缘关系和遗传多样性。
通过PCR扩增和基因分型技术，可以准确地分析和鉴定不同个体的VNTR基因型。
这种遗传标记的应用在人类学和医学领域有着重要的意义，并对生物学研究具有广泛的应用前景。
fam荧光结构
Fam荧光结构引言Fam荧光结构是一种荧光染料的名称，该染料被广泛应用于分子生物学领域，用于DNA分析、PCR扩增和基因测序等实验。
本文将对Fam荧光结构进行全面、详细、完整且深入的探讨。
Fam荧光染料的基本特性Fam荧光染料，全称为6-羰基-4-甲基-二硫（4，5）咪唑[2，1-a]嘧啶-3-乙酸（5-（和 6-（2-[乙基(甲基)化氨甲基]乙基氨基））烷基）酰氯，是一种化学合成的染料。
其主要特性如下：1.荧光性质：Fam荧光染料在吸收紫外光后，能够发出绿色的荧光信号，可被常见的荧光分析仪器检测。
2.化学稳定性：Fam荧光染料具有良好的化学稳定性，能够在酸碱环境下保持较好的荧光性能。
3.生物相容性：Fam荧光染料对生物体无毒害，不会对实验样品造成影响。
Fam荧光染料的应用领域DNA分析Fam荧光结构在DNA分析中起到至关重要的作用。
DNA分析是对DNA序列和结构进行研究的技术手段，广泛应用于亲子鉴定、疾病诊断和基因变异研究等领域。
Fam 荧光染料可以标记DNA分子，使得在实验过程中能够方便地检测和分析DNA样本。
PCR扩增PCR（聚合酶链反应）是一种重要的分子生物学技术，用于快速扩增DNA片段。
Fam 荧光染料可以与PCR扩增反应中的引物结合，通过测量荧光信号的强弱来检测扩增产物的数量和质量。
基因测序基因测序是研究基因组的重要手段，可以获取基因序列信息。
Fam荧光染料在基因测序中被用作标记器，通过检测不同颜色的荧光信号来识别DNA链的碱基序列。
Fam荧光染料的合成方法一步法合成一步法合成是合成Fam荧光染料的一种常用方法。
它通过将对应的化合物与其他试剂在特定条件下反应，形成Fam荧光染料。
该方法操作简单，适用于一般的实验室合成。
多步法合成多步法合成是合成Fam荧光染料的另一种方法，也是一种较复杂的合成策略。
该方法需要经过一系列的反应步骤，每一步都需要进行严格的条件控制。
多步法合成能够合成更高纯度和更高产率的Fam荧光染料，适用于大规模合成。
6-羧基荧光素吸收光谱
6-羧基荧光素吸收光谱
6-羧基荧光素（FAM）是一种常用的荧光染料，广泛应用于生物分子的标记和检测。
其吸收光谱是指在不同波长的光照射下，6-羧基荧光素能够吸收光能并转化为激发态电子的能量。
6-羧基荧光素的吸收光谱范围较窄，主要在紫外光区域。
根据实验数据，6-羧基荧光素的最大吸收波长约为490 nm。
在这个波长下，6-羧基荧光素能够吸收最多的光能，从而产生最强的荧光信号。
需要注意的是，6-羧基荧光素的吸收光谱可能会受到溶液中的其他物质、pH值等因素的影响。
因此，在进行实验时，需要根据实际情况调整实验条件，以获得最佳的荧光信号。
6-羧基荧光素的发射光谱也是非常重要的。
在最大吸收波长处，6-羧基荧光素的发射波长约为518 nm。
这意味着当6-羧基荧光素被激发后，它会发出波长为518 nm的荧光信号。
这种荧光信号可以被荧光显微镜或流式细胞仪等设备检测到，从而实现对生物分子的定量分析。
6-羧基荧光素作为一种重要的荧光染料，其吸收光谱和发射光谱对于生物分子的标记和检测具有重要的意义。
通过研究和应用这些光谱信息，可以更好地理解6-羧基荧光素的性质和应用，为生物医学研究和临床诊断提供有力的支持。
动物遗传学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年
动物遗传学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.tRNA反密码子()能够识别模板链DNA三联体碱基3’TAC5’所对应的mRNA密码子答案:3’UAC5’2.在翻译过程中，生长的多肽链首先结合到tRNA上，这发生在核糖体的哪个位点()答案:P位点3.下列哪项能区分真核生物ＤＮＡ复制与原核生物ＤＮＡ复制()答案:多复制起点4.下面哪项可以在原核生物中发现（）答案:甲酰基甲硫氨酸5.哺乳动物端粒DNA的一条链由（）重复单位构成。
答案:3’-TAGGG-5’6.与启动子区域TATA框结合的蛋白质可以是（）。
答案:转录因子7.聚合酶链式反应通过耐热的DNA聚合酶催化进行DNA复制周期的不断重复。
在此类反应中，获得理想结果的步骤顺序是（）。
答案:变性、退火、复制8.下列（）位点距启动子数千个碱基对，可能在上游亦可能在下游，并调节转录。
答案:增强子增强子9.在细菌中，下列（）不是操纵子的诱导物。
答案:色氨酸10.导致一个嘌呤与另一个嘌呤替换的互变异构转换被称为（）。
答案:转换11.下列哪些是真核生物()答案:酵母菌12.染色质的基本结构单位是（）答案:核小体13.家兔的黑毛对褐毛是显性，要判断一只黑毛兔是否纯合子，测交时选用与它交配的兔最好是：（）答案:褐毛兔14.家猪的染色体数（2n）是（）答案:3815.一个O型血的女同志和一个AB型血的男同志结婚，其小孩的血型可能是（）。
答案:A型或B型16.三点测试结果有8种类型，一般观察数最少的是（）答案:双交换型17.可以使基因从一个连锁群转移到另一个连锁群的机制是（）答案:易位18.当AaBb× aabb产生的后代比例为Aabb（0.4） aaBb（0.4） AaBb（0.1）aabb（0.1），说明交换率是（）答案:20%19.马的体细胞的染色体数是（）答案:6420.以下哪一结果可能由遗传漂移所导致？()答案:种群中遗传变异的减少21.根据哈迪－魏伯格定律，当一个种群达到平衡时，杂合子的基因频率是()答案:2pq22.一群杂交繁殖的个体，它们拥有一套共同的基因，这种群体被称作()答案:孟德尔群体23.对于某一特定的基因A，遗传学家研究了甲壳虫一个种群的A基因，基因型数目结果如下：AA基因型 45只；Aa基因型347只；aa基因型8只。
DNA遗传标记PPT
第二部分
DNA的制备
核心与关键 脑>肺>肌肉>肾 6pg/细胞 一、 理想DNA样品的要求 1. 纯度-RNA、蛋白质、多糖、脂类。 2. 完整性-DNA大分子。 3. DNA量。Μg/指纹图；ng/PCR；pg/PCR 二、 经典DNA提取法 1. 在弱碱和螯合剂的条件下行组织匀浆， 溶解胞、核膜。 2. 去垢剂与蛋白酶消化蛋白，分离DNA。 3. 有机溶剂去除蛋白，萃取DNA。 4. 乙醇与盐类沉淀DNA。
二、PCR反应的体系 标准体系为50-100μl，常用20μl。 DNA模板/DNA聚合酶/一对引物/4种脱 氧核苷酸/缓冲液。 反应条件：95℃4-5min,94℃30s,55℃62℃30s,72℃30-60s,30循环后72℃510min。
三、试剂的要求：
1.引物：人工合成的单链DNA。 A：长度15-30bp。Ln=2×(G+C)+(A+T)<38,延伸温度大。 B：内部的互补序列。 C：引物间的互补序列。 D：序列的随机。 E：识别序列的单拷贝。引物决定特异性。 F：浓度：02-1μmol/L。 G：应纯化低温保存。 2. DNA模板 A：量10ng左右。 B：纯，无污染。 3.DNA聚合酶 A：根据具体实验要求选择。 B：注意外切酶活性，5-3或3-5。 C：活性最适温度70-75℃，半衰期一般95℃40 min 92℃130 min D：镁离子依赖。
第三部分 聚合酶链式反应技术
聚合酶链式反应 （polymerase chain reaction， PCR）在模板DNA和4种脱氧核苷酸 存在的条件下，由一对特异性引物限 定的靶DNA片段，经DNA聚合酶催 化的体外合成过程。
一、
PCR的基本过程 1.变性（denaturation）:在加热的条件下 （94℃左右），模板DNA配对碱基间氢键断裂， DNA双链变成单链。 2.退火（annealing）：在降温的条件下 （55℃-62℃），引物与其互补的模板DNA结合 形成杂交双链。 3.延伸（extension）：在合适的温度下 （68℃-72℃），经DNA聚合酶催化4种脱氧核 苷酸，由引物的3ˊ端为起始点，从5ˊ向3ˊ端 延伸，合成新的与模板DNA 互补的DNA链。 每反应一个循环，靶DNA片段数量增加一倍， 并以指数的量堆积，经30余次循环，产物量可 达到2×105-7个拷贝。几个循环后扩增产物作为 模板。
某理工大学《遗传学》考试试卷(432)
某理工大学《遗传学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（55分，每题5分）1. 转座元两端通常都存在同向重复序列和倒转重复序列，研究表明这些序列对于转座元的转座作用非常重要。
（）答案：正确解析：转座元是DNA上可自主复制和位移的基本单元，转座元两端通常都存在同向重复序列和倒转重复序列，这对转座元携带转座过程所需要的基因并在染色体上移动具有重要意义。
2. 动物细胞和植物细胞都具有全能性。
（）[中山大学2019研]答案：错误解析：高度分化的植物细胞具有全能性，高度分化的动物体细胞的全能性受限制。
3. 在一个种群中若基因型为AA的个体占30，则群体中A基因的频率一定是0.3。
（）答案：错误解析：在群体中可能存在基因型为Aa的个体，因此群体中A基因的频率还应考虑Aa个体部分。
4. DNA是遗传物质，而RNA不是遗传物质。
（）答案：错误解析：遗传物质即亲代与子代之间传递遗传信息的物质。
除一部分病毒的遗传物质是RNA外，其余的病毒以及全部具典型细胞结构的生物的遗传物质都是DNA。
5. 真核细胞中的RNA聚合酶仅在细胞核中有活性。
（）答案：错误解析：真核生物除了有3种细胞核聚合酶外，线粒体也有自己的RNA 聚合酶，催化合成线粒体mRNA、tRNA、rRNA。
线粒体RNA聚合酶在功能和性质上与原核细胞RNA聚合酶类似，其活性也可被利福平或利福霉素抑制。
6. 结构基因发生点突变，就一定会产生可检出的突变基因产物。
（）答案：错误解析：7. 两个色盲的双亲不可能生出正常的女儿，而两个表型正常的双亲则有可能生育出色盲的儿子。
（）答案：正确解析：色盲是伴随X染色体隐性遗传病，假设控制色盲的基因为B和b，则色盲双亲的基因型分别为XbY和XbXb，生出的女儿基因型必定为XbXb，肯定是色盲；而两个表型正常的双亲有可能生育出色盲的儿子，例如正常双亲基因型分别为XBY和XBXb，儿子可能是色盲（XbY）。
arms法 荧光定量
arms法荧光定量荧光定量是一种常用的实验方法，用于测量样品中的荧光强度，以获取相关的定量信息。
这种方法基于荧光现象，利用物质在激发光照射下发出的荧光信号来定量分析样品中的物质含量或反应程度。
本文将介绍一种常用的荧光定量方法——Arms法，并探讨其原理和应用。
Arms法（Amplification Refractory Mutation System）是一种荧光定量PCR技术，用于检测和定量分析DNA中的特定序列。
该方法结合了PCR技术和荧光探针技术，通过引入特定的荧光探针和引物，实现对目标DNA序列的扩增和定量。
Arms法的原理基于PCR技术，PCR是一种体外合成DNA的技术，可以在短时间内扩增特定的DNA片段。
在Arms法中，引物是设计用于扩增目标DNA序列的短链DNA片段，荧光探针则是用于检测目标DNA序列的特定荧光标记的DNA探针。
Arms法的步骤如下：1. 设计引物和荧光探针：根据目标DNA序列的特点，设计适当的引物和荧光探针。
引物通常包括一对外部引物和一对内部引物，外部引物用于扩增目标DNA序列，内部引物用于扩增特定的突变位点。
2. PCR扩增：将待测样品的DNA与引物和荧光探针一起加入PCR反应体系，进行PCR扩增。
PCR反应通过多次循环变性、退火和延伸步骤，使目标DNA序列得以扩增。
3. 荧光信号检测：PCR反应过程中，荧光探针与目标DNA序列特异结合，产生荧光信号。
荧光信号的强度与目标DNA序列的含量成正比。
4. 荧光定量分析：通过荧光信号的强度，可以定量分析目标DNA序列的含量。
通常可以使用荧光定量仪或PCR仪器进行荧光信号的检测和数据分析。
Arms法的应用非常广泛，特别适用于基因突变检测、单核苷酸多态性（SNP）分析等领域。
通过引入特定的内部引物和荧光探针，Arms 法可以实现对突变位点或SNP的高度特异性检测和定量分析。
该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，因此在医学诊断、病理学研究和药物研发等领域得到了广泛的应用。
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9 * : 主要应用于片段长度分析中引物修饰和 1 2 * 自动测序中标记其中的I ／ （* ， 也经常 I I > O ! + ,公司） 用于 ! 核酸探针等。 > P 产物定量， 基因座位于人类第 1 . ; 8 / . 号染色体 ! 3 位置，
［ ］ ， 核心 序列 Q 重复单 位为 . 3 ? # 2 2 Q , Q Q Q. 。2 ) R ) L
刑事技术, , 4年增刊
别率 （! ） 及非父排除率 （" ） 。 " # ! 结 果 应用$ % & ’ 修饰引物， " ( ) 扩增， * + , , 型全自 动化遗传分析仪成功检测黑龙江汉族 + 份样本扩 . 增产物的片段长度。黑龙江汉族无关个体 ! + / 0 ,基 因座基因频率 （见表+ ） ， 发现有+ 个等位基因， $ 1个 基因型。基因 频率在 , 最常见 2 , , * .! , 2 + 1 1 3 之 间， 的基因为、 、 ， 频率为, 、 、 。 $ 3 2 + 1 1 3 , 2 + 3 . , 2 + , 4 3 利用群体数据计算了 ! + / 0 , 基因座的法医学理论应 用价值， 杂合 度为 , ， 个人识别机率为 , ， 2 . , . 3 2 . 1 . + 非父排除概 率为 , ， 多态 性信息 总量 （" 为 2 0 + + * 5 (） 。基因型观察值与期望值之间经 6 检验无显 , 2 0 . 0 0 著差异 （! ! ） ， 符合7 , 2 , $ 8 9 : < = > ? @ A > 9 ; B 平衡定律， 显示了 ! + / 0 ,基因座在黑龙江汉族人群中有高度多 态性。本次研 究还调查了 已确定亲 权关系的 家系， ! + / 0 ,基因座分型均符合孟德尔遗传规律。表明该 基因座在个体识别及亲权鉴定等方面有很高的实用 价值。
& D $ ). 首先应用 ! > P 技术检测了 1 . ; 8 / 基因长度多 态性， + $ $ D ’发表了 > ) D F ) E G )人种的 1 . ; 8 / 基因频率
［ ］ 4 分布 。本文首次 应用 9 * : 羧基 荧光素修饰引物
［ ］
检测黑龙江汉族 1 . ; 8 / 基因座遗传多态性。 材料与方法 ( 样品为. 4 < 份无关个体血样来自本实验室办案 积累样本； 7 个 家系样 本取自 已确立 亲权关 系的家 系。 模板 1 2 * 制备按 1 2 *, S 试剂盒说明书的方法 提取 1 ， 提取 1 ／ 。 2 * 2 * 浓度为. H ( C ! ! > P 引物 序 列 为 7 T 9 * : Q * ** > OQ Q > 和7 > O >> * ** > *> O Q> > >Q > >Q T T Q O > ； O O QO O QQ * Q* 9 Q> * >Q O Q> > >> O OQ > T 测序引物序列为 7 T Q * ** > OQ Q >> O >> * ** > * 和 > O Q> > >Q > >Q T 7 T Q O >O O QO O QQ * Q （引物合成与修饰 * 9 Q> * >Q O Q> > >> O OQ > T 均委托上海生工完成） 。 ， 其中含4 ! > P 扩增 体 系 7 / D C / H 2 *， (模板 1 ／ ／ ， ／ / 6 4 7 & % C M 引 物， 4 / / & & % C MI 2 O ! . / / && % C M ! （# ， ／ ， ／ O $ G E K > M K 8 6 -） 7 / & & % C MU > M . 6 7 && % C M ， : F C 6 / . V 明胶， 4 D1 2 * 聚合酶。 ! > P 反应条件 ( 4 / 为： ， ， ， < 7 W. 7 E 3 3 W. 7 E 0 4 W5 / E 4 个循环后， 0 4 W 延伸0 。 & G H 片段长度检测， 扩增产物 . 、 甲酰胺 4 C C和内 ! ! 标P X Y. / / /. C混和变性后应用 . / / 全自动遗传 ! 分析仪进行自动检测。选择 ! % Z ’ $! C ’ @ . 3试剂盒的 : ) J $ G @ 校正光谱。 序列分析根据 1 G ( 1 A ’O ’ $ & G H G ) J % $ ; ’ [ D ’ H F G H (试 剂盒 （* ） 提供试剂及条件， 选择扩增 C G ’ I+ G % E E J ’ & E # # A 引物为测序引 物， 采用 ! 对部分 样品的 > P 测 序法， ! > P 产物进行测序。 数据统计分析根据测序确定的重复单位次数 （H ） 与测序仪检测的片段长度 （M ） 建立二者的关系： 重复 单位数 H （M . ） ／ 。基因频率按直接计数法 N 7 < ? # . 3 测定， 用Y 4 检验比较基因型分布资料的观察值及理 论值。 判 定 是 否 符 合 K 按文 ) $ I A L \ ’ G H ? ’ $ ( 平 衡， ［. ］ 献 法计算杂合度， 多态性信息总量 （! 个体识 , >）
参 考文献： ［ ］ M " 8 N 8 ?M， K 8 U 8 D V 9 8W， = X ? J >) Y & D Q G ? F ? Z 8 J ? E @E FS K T ) （" ） G E Z V N " ’ ( T + + 0A ; J X >Q E G ; D > 9 8 N > Z X 8 ? @9 > 8 Z J ? E @ ( ) ［ ］ ， ， 8 @ : ? J N 8 G ? Z 8 J ? E @ J E F E 9 > @ N ? Z N Z ? > @ Z > [ Y [ % E 9 > @ N ? Z + . . , Q Q ： * $ + + . 1 ［ ］ 李伯龄， 叶健， 郑秀芬， 等Y ! Q ’ ( T + + 0基因座扩增长 度多 态性及其应用Y中国法医学杂志Y ， （ ） ： + . . + 1 * + * Y ［ ］ / ， ， # 8 8 @ J ? G 8& ] V : E H G >] / J 9 E D ’， > G 8 G Y " ( )8 D G ? F ? Z 8 J ? E @ E F \ Q ： 8 G G > G > N 8 J J X >! + / 0 ,L E V Z V N ( E D 8 9 ? N E @E F8% ? @ ? N X8 @ :8 Q ， K E 9 J X& D > 9 ? Z 8 @( 8 V Z 8 N ? 8 @Q E Q V G 8 J ? E @N 8 D Q G > 8 @ :F E 9 > @ N ? Z ［ ］ ， ， ： Z 8 N > H E 9 U > > ^ 8 G V J ? E @[ Y & D[7 V D_ > @ > J+ . . -$ ,0 + 1 Y ［ ］ 刘超， 李 越， 朱少建， 等Y壮 族人 群Q $ ’ ( T + + 0基 因座 基 因频率分布 ［ ］ 中国法医学杂志Y ， （ ） ： [ Y + . . . + 4 * + 1 + Y ［ ］ 谢小东， 王勋陵 ， 孙红兵， 等Y甘肃 汉族人群 ! % + / 0 , 基因 座多态性分析 ［ ］ 中国法医学杂志 ， （ ） [Y Y , , ,+ $- ： . * Y ［ ］ 阙庭志， 林源， 李莉， 等Y上 海地区 ! & + / 0 ,基 因座基 因频 率分布及 其 在 亲 子 鉴 定 中 的 应 用 ［ ］ [ Y法 医 学 杂 志， ， （ ） ： + . . 0 + 4 4 + . * Y
刑事技 术4 / / 5年增刊
现阶段国内法医使用的商业化荧光标记试剂盒 （ ， 均在 * ! " 公司、 # $ % & ’ ( )公司生产） + ,公司制造的 、 、 型基因分析仪上进行分型检测。 . /0 0. / / . / / 型是 1 2 * 数据库建设的主要仪器之一。该仪器的灵 敏度高， 检测通量大 （一次性检测 . ， 结果稳 3 个样本） 性较强等优点， 但在实际工作中也出现一些问题， 如 电泳 谱 带 偏 移、 荧 光 染 料 牵 涉 峰 等。本 研 究 对 * + , . / /型基因分析仪可毛细管老化问题进行对比 研究， 结果显示， 使用 4 / 次毛细管的电泳结果清晰， 灵敏度高， 等位基因峰值平均是使用 5 / /次毛细管的 使用 5 4 6 3 -倍， / / 次 的毛细管等位基因峰 值明显降 低， 以至无法分型。样本- 有多达 5 个基因座无法判 型， 这对公安机关实际工作中存在的大量微量检材有 重要影响。 由于多次电泳后毛细管壁粘附电泳胶和毛细管 的材料老化， 导致荧光检测信号的衰减和延迟， 以往 毛细管 * + ,公司在 . / / 型基因分析仪产品介绍 中， 老化谱图为等位基因峰值， 由小片段到大片段逐渐降 低， 基底峰范围逐渐增大， 而我们的结果显示， 老化毛 细管谱图除峰值明显降低外并不存在上述现象， 说明 为增大对微 * + ,公司对其它产品性能阐述尚不完全， 量样本的检出率和减少对结果的误判， 提高检测效率 和准确性， 对该产品性能进行进一步的了解是很有必 要的。