实验4-小球藻
小球藻的培养方法
小球藻的培养方法
小球藻的培养方法如下：
1.准备培养基：小球藻可以在液体培养基或固体培养基中生长，其中常用的液体培养基有BG11、BG11_0、BG11_1等。
固体培养基可采用琼脂或agar等凝胶。
2.接种：将小球藻接种到培养基中，一般采用无菌技术进行，可以选择胶体主要培养的种类，浓度建议经实验考察后选择。
3.光照和温度控制：小球藻是一种光合作用的蓝藻，需要光照进行生长。
一般采用连续或间歇白天亮度4000~5000 lx，晚上黑暗或亮度不超过200 lx，温度一般控制在20~25。
4.培养后期处理：小球藻的生长过程中要保持培养基中的营养物质适宜，可以选择定期更换培养基。
另外，为避免细菌，真菌等细胞污染，必须采取严格的无菌操作。
5.采集：小球藻的生长周期较短，一般在2-3周内就可以采集得到。
采集时要注意无菌操作，对于液态的小球藻培养基，可以采用离心等处理方式将小球藻和培养基分离，加工自己需要的样品。
小球藻的基因工程改造研究进展_读后感_概述说明
小球藻的基因工程改造研究进展读后感概述说明1. 引言1.1 概述小球藻（Chlorella）是一种单细胞绿藻，具有高速生长和丰富的营养价值的特点。
在过去的几十年中，小球藻已经成为了人们关注的焦点之一，尤其是在基因工程改造领域。
通过对小球藻进行基因工程改造，可以有效地提高其产物合成能力和生理特性，为未来的生物技术应用提供了巨大的潜力。
1.2 文章结构本文将从以下几个方面对小球藻基因工程改造研究进行概述和分析。
首先，在第二部分中，我们将介绍小球藻基因工程改造的背景，并探讨目前已有的相关研究进展。
第三部分将详细介绍小球藻基因工程改造的研究方法和实验设计，包括细胞培养和转染技术、基因编辑技术以及转录组学和代谢组学分析方法的应用。
接着，在第四部分中，我们将阐述小球藻基因工程改造对其生长、生理特性以及产物合成与产量的影响，并探讨在基因工程改造中可能出现的问题和挑战。
最后，在第五部分中，我们将总结主要研究结论、展望未来小球藻基因工程改造研究的发展方向，以及利用小球藻进行生物技术应用的前景。
1.3 目的本文旨在全面概述小球藻基因工程改造的研究进展，并对其进行深入分析和讨论。
通过对已有研究成果的整理和归纳，我们旨在揭示小球藻基因工程改造的潜力和应用价值，为该领域的进一步研究提供参考和指导。
同时，我们也希望能够引起更多科学家对小球藻基因工程改造领域的关注，并促进该领域在未来生物技术应用中发挥更大作用。
2. 小球藻基因工程改造的研究进展:2.1 小球藻基因工程的背景小球藻是一种单细胞绿色植物，具有高度的生物多样性和广泛的应用前景。
利用基因工程技术对小球藻进行改造，可以为其赋予新的功能和特性，拓展其在生物技术领域的应用。
过去几十年间，小球藻基因工程改造领域取得了重大突破。
2.2 基因工程技术在小球藻上的应用在小球藻中, 多种基因编辑技术被广泛使用。
例如，CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因编辑方法之一。
通过引入Cas9酶和相应的RNA片段，研究人员可以针对目标基因进行定点编辑或敲除，并实现精确控制基因组修饰。
淡水小球藻的应用效果评估
淡水小球藻的应用效果评估作为天然水体重要组成生物，微藻对水体的物质能量循环影响巨大，它不仅能利用水体营养物质通过光合作用合成有机物释放氧气，还是鱼、虾、贝育苗的开口饵料，直接影响苗种的存活率。
目前，微藻的开发与利用已由特种养殖品种转向了常规养殖品种，并逐渐成为水产领域的研发热点。
本文以一株淡水小球藻为实验对象，对其生态效应进行了评估，结果显示小球藻能够快速吸收水体中的氨氮，并对重金属铜离子具有较强的耐受能力，这不仅证明了小球藻在水生态修复方面有重要的作用，也为解决水质恶化问题提供了新思路。
一、实验材料小球藻：由水产科技公司生物质能室自主选育的一株淡水小球藻藻株。
培藻营养素：由水产科技公司生物质能室自主研发产品。
二、实验方法1、小球藻降低水体氨氮的效果实验采用养殖池水，外部添加NH4+-N以提高实验体系中的氨氮浓度，在体系中引入不同浓度的小球藻藻源，小球藻浓度分别为：15107个/L(实验组1)、45107个/L(实验组2)、120237个/L(实验组3)，每天上午10点监测水体中的氨氮指标。
2、小球藻对铜离子的耐受性能评价鉴于实际养殖过程中控制微囊藻所使用的硫酸铜浓度在0.5-0.7mg/L的范围，实验设置硫酸铜浓度为0、0.5、1、1.5mg/L的4个实验梯度，每个实验设3个重复。
将处在对数生长期小球藻和微囊藻分别接种到添加不同浓度硫酸铜的100mL培养体系内。
每隔1天取样进行叶绿素的测定。
3、小球藻在养殖水体应用在水产科技公司1.5亩的土质池开展，使用水产科技公司藻种室的小球藻藻种和自主研发的培藻营养素配合使用来进行初期培藻实验，检测水体中的氨氮和优势藻数量变化。
三、实验结果1、小球藻降低水体氨氮效果从图1可以看出，接入小球藻后，各组水体中的氨氮均呈下降趋势。
由于养殖池水本身含有少量微藻，因此试验期间对照组中氨氮浓度也呈现下降趋势，但引入小球藻的实验组中氨氮下降更明显。
在第3天时，实验组2和实验组3中氨氮浓度均从2.5mg/L降到了1.0mg/L以下，小球藻对氨氮的去除率能达到70%以上。
小球藻
分析小球藻的运用研究现状小球藻)是一种普生性单细胞绿藻,属于绿藻门绿藻纲卵囊藻科,是第一种被人工培养的微藻。
目前世界上已知的小球藻有十几种,变种多达数百个。
小球藻富含多种有效成分,不仅是生物学研究中优良的实验材料,也是很有应用价值的开发对象。
l小球藻细胞中有价值的化合物生长在良好环境中的小球藻藻粉蛋白质含量可达63.60%,18种氨基酸总量为55.95%,其中8种必需氨基酸含量为23.35%,接近优质鱼粉、啤酒酵母,高于绝大多数植物性蛋白,是优良的单细胞蛋白源川。
小球藻碳水化合物含量为5.7%一38%,一般不少于20%,脂类含量为4.5%一86%,不饱和脂肪酸含量明显高于许多植物,且含有二十二碳六烯酸(DHA)。
小球藻的叶绿素含量为4吸一6%,是自然界中最高的,高于已商业化的脱水紫首楷叶绿素含量(0.2%)[2〕。
采用优化的KMI培养基诱导培养小球藻,小球藻的虾青素含量可高达2.24mg?g 一1,具有用来大规模生产虾青素的潜力,是继雨生红球藻、红发夫酵母之后又一备受关注的天然虾青素资源藻类口〕。
小球藻富含绿藻特有的活性物质—绿藻生长因子(CGF),被称为“类荷尔蒙”。
小球藻细胞还含有丰富的维生素A、B、K(vA、vB、vK)和叶酸,各自的含量与培养时间及环境因子密切相关。
2小球藻在农业上的应用小球藻提取物稀释500一10(X)倍,喷施于蔬菜、果树叶面,具有增强植物光合作用和促进根部生长、提高根部养分吸收能力和抗菌力的效果。
用不同浓度小球藻提取物处理大白莱、芥菜和萝卜的种子可提高发芽率、发芽势和发芽指数,还可促进种子萌发过程中胚根生长,缩短种子萌发的周期。
小球藻的提取物没有毒性〔4J,因此在农业及相关领域方面具有应用价值。
3小球藻在工业上的应用3.1食品与饲料生产20世纪60年代,小球藻主要作为单细胞蛋白资源而加以开发利用,以后又在此基础上转向开发生产价值更高的保健品、美容食品和食品添加剂。
我国台湾地区和日本成功地建立了小球藻产业,培养获得的藻细胞制成的小球藻片、小球藻提取物和保健品,被联合国粮食及农业组织(FAO)列为21世纪人类的绿色营养源健康食品。
卡尔文小球藻实验思路
卡尔文小球藻实验思路
实验思路：
1、准备材料：准备好卡尔文小球藻和实验室用品，如观察管，移液器，离心漏斗等。
2、收集样品：从水库附近的水域中收集卡尔文小球藻样品，用收集
管轻轻搅动水面，观察并收集水中的卡尔文小球藻。
3、准备培养基：在实验室中准备一种适宜的培养基，如生化碳源、
胺基酸、维生素、矿质元素等，其配比依照卡尔文小球藻所需的营养成分
为准。
4、培养方法：将收集到的卡尔文小球藻样品用移液器等实验室用品
轻轻移入培养管中，将培养基加入培养管中，充分混合，调节培养基pH
值后，隔水在35℃左右的培养箱中孵化培养卡尔文小球藻。
5、观察记录：每天观察培养管中的卡尔文小球藻，记录其变化情况；培养一段时间后，将离心漏斗将卡尔文小球藻分离出来，用观察管进行观察、测量和记录它们的形态特征，如形状、大小、颜色等。
实验4-小球藻
实验四、环境生物小球藻、轮藻的镜检、生物学特性及其应用一、实验目的：通过显微镜玻片观察与绘图，结合课堂讲解和资料查询，对小球藻等藻类的形态结构特征、分类、生物学习性、在环境科学中的应用等进行深入的了解。
指导老师：王旭、邝春兰二、三、实验时间：20 周四、实验地点：环境生物学实验室五、实验人员：六、实验内容（）概述一绿藻门，卵孢藻科。
藻体单细胞，球形或椭圆形，直径仅数微米。
无鞭毛，浮游生活。
叶绿体杯形，或为弯的板片状。
造粉核有或无，因种而异。
繁殖时，原生质体分裂数次，生成2、4、8 或16 个不动孢子；因孢子的形态与母细胞相似，故称“似亲孢子” 。
种类较多。
多生长于淡水中，少数生于海洋中；另有一些生活在动物细胞内或水螅等低等动物的内腔内。
性喜温暖，繁殖迅速，可大量培养。
富含脂肪、蛋白质、碳水化合物、矿物盐类和各种维生素，可作高蛋白质食物，是宇航中的理想食粮。
又可利用小球藻光合作用时释放氧、吸收二氧化碳，解决宇航中氧的供应。
因它繁殖快，又易于控制，为良好的研究材料。
（二）分类地位小球藻在分类上属于绿藻门，绿藻纲，绿球藻目，卵孢藻科，小球藻属。
常见的有蛋白核小球藻，其他有眼点小球藻，卵形小球藻，盐生小球藻和海生小球藻等。
（三）形态结构小球藻细胞球形或广椭圆形。
细胞内具有杯状（蛋白核小球藻）或呈边缘生板状（卵形小球藻）的色素体。
蛋白核小球藻的杯状色素体中含有一个球形的蛋白核。
细胞中央有一个细胞核。
细胞的大小依种类而有所不同，蛋白核小球藻直径一般为3—5微米，在人工培养的情况下，条件优良，小球藻会变小一点。
（五）繁殖方式以似亲抱子的方式行无性生殖，首先在细胞内部进行原生质分裂，把原生质分裂为2、4、8,,个抱子，然后这些抱子破母细胞而出，每个抱子长成一个新个体。
（六）生态条件1.盐度：不同种类的小球藻可以生活在自然的海水和淡水中，淡水种类较多，海水种对盐度的适应性很强，在河口，港湾，半咸水中都可以生存，也能移植到淡水中。
小球藻培养方法
小球藻培养方法小球藻是一种单细胞藻类，广泛存在于淡水和海水中。
它们具有较高的光合作用效率和快速生长速度，因此被广泛应用于生物燃料生产、生态环境修复等领域。
下面将介绍小球藻的培养方法。
1. 培养基的配制小球藻的培养基可以根据需要进行配制，一般包含以下主要成分：无机盐、有机碳源、氮源、磷源、微量元素和维生素。
其中，无机盐包括硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐等；有机碳源可以选择葡萄糖、乳糖等；氮源可以选择硝酸盐、铵盐等；磷源可以选择磷酸盐等；微量元素可以选择铁、锰、锌、铜等；维生素可以选择硫胺素、核黄素等。
根据不同的实验要求，可以对培养基的成分进行调整。
2. 培养条件的控制小球藻的培养需要一定的环境条件。
温度通常控制在20-30摄氏度之间，光照强度通常控制在4000-6000勒克斯。
此外，pH值也是一个重要的因素，一般控制在7.5-9.5之间。
为了保持培养液的通气性，可以通过搅拌或通气装置来提供氧气。
3. 培养容器的选择小球藻的培养可以选择不同的容器，如培养瓶、培养槽等。
培养瓶通常用于小规模培养，而培养槽适用于大规模培养。
无论选择何种容器，都需要保证容器的密封性和光透性。
4. 培养种源的选择小球藻的种源可以选择已经纯化的培养物或者采集自自然环境中的藻细胞。
如果选择采集自自然环境的藻细胞，需要进行预处理，如过滤、清洗等，以去除杂质。
纯化的培养物可以通过分离培养和筛选获得。
5. 培养过程的操作将培养基倒入培养容器中，加入合适浓度的培养物，然后在适宜的环境条件下进行培养。
在培养过程中，需要定期检测培养液中的生长状况，如细胞密度、生长速率等。
可以通过显微镜观察细胞形态和数量，并根据需要进行采样和分析。
6. 培养物的保持和传代为了保持小球藻的纯度和活力，需要定期进行传代。
传代时，可以选择将培养物移植到新的培养基中，或者分离出单个细胞进行单细胞培养。
传代后的培养物需要进行适当的保存，可以冷冻保存或制备培养物冻干粉。
小球藻的培养方法是一项复杂而细致的工作，需要严格控制培养条件和操作步骤。
小球藻培育的简单方法
小球藻培育的简单方法小球藻是一种单细胞绿藻，广泛应用于生物学研究和教学实验中。
它具有高生长速度、易于培育和操作的特点，因此被广泛用于培养实验。
下面将介绍一种简单的方法来培养小球藻。
材料准备：1. 小球藻培养液：小球藻培养液是一种富含营养物质的培养基，可以购买或自制。
2. 培养容器：可以使用玻璃烧杯、培养皿或培养瓶等透明容器，容器的大小取决于培养的规模。
步骤：1. 准备培养容器：将培养容器清洗干净，并用70%乙醇消毒，然后用蒸馏水冲洗干净。
2. 加入培养液：将培养液倒入培养容器中，约占容器的1/3至1/2。
3. 转接小球藻：从已培养好的小球藻培养液中取出适量的小球藻，倒入培养容器中。
注意避免将杂质一同转接进去。
4. 光照条件：将培养容器放置在光照充足的地方，如实验室植物培养箱或阳光充足的窗台。
小球藻对光照要求较高，光照不足会影响其生长。
5. 培养温度：小球藻的适宜生长温度为20-25摄氏度，因此要保持培养环境的温度稳定。
6. 培养液的更替：每隔一段时间（通常为1-2周）需更换培养液，以保持培养液中的营养物质充足。
更替时，可以将培养液倒出一部分，再加入新的培养液。
7. 观察和记录：定期观察培养容器中的小球藻生长情况，如颜色、密度等，并记录下来。
这些记录有助于了解小球藻的生长特性和培养条件的调整。
小球藻的培养过程需要一定的耐心和细心，但整体来说是比较简单的。
通过掌握培养的基本方法和技巧，可以轻松地进行小球藻的培养实验。
需要注意的是，为了保证实验结果的准确性，培养过程中要避免污染。
在操作过程中，要注意个人卫生，使用消毒好的器具，并避免与外界空气接触时间过长。
小球藻的培养液的配方也是影响培养效果的重要因素之一。
不同的研究目的可能需要不同的培养液配方，可以根据具体实验的要求进行调整。
通过以上简单的方法，我们可以成功地培养小球藻，为后续的研究工作提供可靠的实验材料。
希望本文对于小球藻的培养方法有所帮助。
显微镜观察小球藻实验报告
显微镜观察小球藻实验报告一、引言显微镜是一种重要的科学工具，可以帮助科学家观察微小的生物体或细胞结构。
在本次实验中，我们使用显微镜观察了小球藻的微观结构和特征。
二、实验目的1. 观察小球藻的形态特征。
2. 理解小球藻的生物学结构。
3. 学习正确使用显微镜的方法。
三、实验材料和方法1. 实验材料：- 小球藻样本- 显微镜- 盖玻片- 移片夹- 显微镜载物玻片- 干净的毛刷或棉签- 脱脂棉纸2. 实验方法：a) 准备工作：- 将小球藻样本放在玻璃皿中，加入适量的培养液。
- 用毛刷或棉签将小球藻样本均匀涂抹在盖玻片上。
- 将盖玻片反面轻轻压在载玻片上，以固定小球藻样本。
b) 使用显微镜观察：- 将载玻片放入显微镜的载物台上。
- 调节显微镜的光源和放大倍数，使样本清晰可见。
- 通过调节聚焦手轮，使样本的不同部分能够清晰地观察到。
- 用目镜和物镜逐渐调整焦距，直到获得最清晰的图像。
- 观察并记录小球藻的形态特征。
四、实验结果通过显微镜观察，我们可以清楚地看到小球藻的细胞结构和形态特征。
小球藻是一种单细胞的绿藻，其细胞通常呈球状或卵圆形。
在观察中，我们发现小球藻细胞的直径大约在10-20微米之间。
小球藻细胞内部包含细胞核、叶绿体和细胞质等结构。
细胞核位于细胞的中央，呈圆形或椭圆形，颜色较深。
叶绿体是小球藻进行光合作用的关键器官，呈片状或囊状分布在细胞质中。
通过显微镜观察，我们可以看到叶绿体呈现出绿色或淡绿色，具有一定的运动性。
五、实验讨论通过本次实验，我们成功地观察到了小球藻的微观结构和形态特征。
小球藻是一种单细胞的绿藻，其细胞大小适中，具有较为明显的细胞核和叶绿体。
这些结构的存在表明小球藻具有典型的植物细胞特征，并能够进行光合作用。
在实验过程中，正确使用显微镜是非常重要的。
首先，我们需要调节显微镜的光源和放大倍数，以获得清晰的图像。
其次，通过调节聚焦手轮和目镜、物镜的焦距，可以使样本的不同部分都能够清晰可见。
小球藻_精品文档
小球藻介绍小球藻（Coccolithophores）是一类微型浮游植物，属于硅藻门中的一员。
这种微小的植物以其特殊的外壳结构而闻名，外壳上分布着大量的微小钙质盘状结构，因此也被称为球藻。
外貌和结构小球藻的形态较为简单，体型非常微小，通常只有几微米到几十微米的大小。
它们通常呈椭圆或圆形，具有非常薄的壳体结构。
壳体上分布着大量的钙质盘状结构，这些结构被称为球藻（coccolith），给小球藻带来了很高的抗压能力。
生态环境小球藻广泛分布于全球各大洋的温带和亚热带海域。
它们主要生活在海洋表层，依赖阳光进行光合作用。
由于其微小的体型和大量分布在海洋中，它们被认为是海洋生态系统中最为重要的原生生物之一。
功能和意义小球藻具有重要的生态功能和意义。
首先，它们是海洋食物链的基础环节，被各种浮游动物和底栖生物作为食物。
其次，小球藻通过光合作用吸收二氧化碳，并释放氧气，对调整大气中的气体比例具有重要作用，对地球的气候变化具有一定的影响。
此外，小球藻能够通过盘状结构反射和散射光线，影响海洋水域的光学性质和水色，对海洋环境的物理化学过程也发挥着一定的调节作用。
研究进展小球藻的研究始于19世纪末，随着现代科技的发展，尤其是电子显微镜和分子生物学技术的应用，对小球藻的研究进展迅速。
目前，研究者已经对小球藻的生理、生态、遗传和演化等方面进行了深入的探究。
例如，他们通过对小球藻的遗传物质进行研究，发现了许多关键的基因，揭示了小球藻生长适应性和适应策略。
此外，还有一些研究者通过实验室培养和观察，模拟小球藻在不同环境条件下的生物学过程，使我们更好地理解了这些微小植物的生态行为。
对人类的影响小球藻在全球的生态系统中发挥着重要的作用，但也对人类产生了一定的影响。
首先，小球藻能够导致海水中的浮游藻华，形成大面积的漂浮物，给渔业、航运等海洋产业造成不利影响。
其次，小球藻在一些狭窄海峡和河口湾等地方容易形成堆积，造成水域富营养化，引发藻类大爆发，导致水质污染和生态破坏。
小球藻
小球藻小球藻小球藻（Chlorella）为绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻，是一种球形单细胞淡水藻类，直径3～8微米，是地球上最早的生命之一，出现在20多亿年前，基因始终没有变化，是一种高效的光合植物，以光合自养生长繁殖，分布极广。
目录小球藻细胞内含有丰富的叶绿素，属于单细胞绿藻，是真核生物。
小球藻(5张)也能发现。
在自然条件下水体中的个体不多，但在人工培养条件下能大量生长繁殖，产量很高，蛋白质含量为干重的50%左右，还富含其他成分。
小球藻是被最早开发的藻类蛋白，早在20世纪60年代初，日本就开始工厂化生产。
中国记载的小球藻有椭圆小球藻、小球藻和蛋白核小球藻3种，它们都可以进行人工培养。
与螺旋藻类似，小球藻不仅蛋白质含量高，氨基酸组成合理，还含有许多丰富的生物活性物质，对不少疾病具有辅助治疗作用。
小球藻对身体的强健作用比螺旋藻要强好几倍。
小球藻对心、肝、肾肺、肠胃、皮肤、感冒发烧等病都有很好的效果，最少要连续吃一个月。
小球藻抗病毒的能力极为强悍，吸毒排毒的能力也极强。
小球藻为世界上公认的健康食品，全世界微藻产业中产量最多的品种，在日本保健品中连续十年销量第一，全世界年产量2000吨，主要生产地为东南亚地区。
地球最早的神奇生物小球藻（俗称为绿藻），是五亿四千年前就已经在地球上繁衍的生物。
它是一种单细胞的绿色微藻类，不管绿藻是生态环境的巨变，还是自然灾害的侵袭，都没能毁灭它，其稳定的基因始终没有改变。
这种生物直到一百多年前人类发明了显微镜以后，生物学家拜尔尼克（M.W.Beyernick）博士才发现了它；把希腊文Chlor（绿色）和拉丁文表示细小物质Ella组合，将其命名为Chlorella。
因为它的直径只有3～8微米，必须用600倍以上的显微镜才能看见，且形状呈圆球形，所以被称为小球藻（绿藻）。
被赞誉为罐装的太阳小球藻生息在淡水中，它借助阳光、水和二氧化碳，以每隔20小时分裂出4个细胞的旺盛繁殖能力，不停地将太阳能量转化生成蕴涵多种营养成分的藻体，并在增值中释放出大量的氧气；而它的光合能力高于其他植物10倍以上。
小球藻培养的初步研究
耿晓玲：小球藻培养的初步研究
·３５·
小球藻培养的初步研究
耿晓玲
（江阴职业技术学院 化学纺织工程系，江苏 江阴 ２１４４３３）
摘要：小球藻 Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｚｏｆｉｎｇｅｎｓｉｓ为绿藻门小球藻属单细胞绿藻，生态分布广，易于培养，生长速度快，应用价值高。小球藻的生长受 到很多因素的影响，本实验主要通过研究光强，培养基的组分来了解对小球藻生长的影响。实验结果表明：氮浓度对小球藻的生长速率 有着显著的影响；Ｆｅ３＋和磷浓度的变化对其生长没有显著影响；盐度为 ０．４ｍｏｌ／Ｌ时，小球藻的生长速率达到最高。在光照对比实验中 发现全光照有利于小球藻的生长，小球藻在全光照条件 ３０００～５０００ｌｕｘ之间生长情况良好，光照强度过低或更高不利于小球藻的生长。 关键词：培养基；生长速率；光照强度 中图分类号：Ｑ９４９．２１７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０１８）０２－００３５－０３
剂原料，在污水处 理，水 产 养 殖 饵 料 以 及 畜 牧 饲 料 添 加 剂 的 生 产等方面也被广泛应用 。 ［４－５］ 小球藻的培养方式主要有开放 式培养和封闭式培养。开放式培养由于受到自然条件如阳光、 温度等的影响和限制，产量不稳定，易受到他种生物的污染甚 至取食，引 起 培 养 藻 液 的 退 化。 封 闭 式 培 养 相 对 而 言 便 于 控 制、能抗污染、可提高产率，整个系统稳定性好［６］。本文研究了
设备名称
型号或容积
功率 ／Ｗ
备注
电热恒温鼓风干燥箱
１０１－３－５
４０００
上海跃进医疗器械厂
紫外分光光度计
Ｔｕ－１８１０
１５０
北京普析通用仪器有限责任公司
低速台式大容量离心机
１
小球藻的培养
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物，种类较多，多数生活在淡水中，少数生活在海洋里。
按植物学分类，小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物，其体型小，直径一般为3～5μm，在显微镜下，需要放大400～600倍才能看到，我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高，其蛋白质含量达到50%～60%（相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍），含脂肪10%～30%，还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高，这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此，小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻，可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水，在显微镜下鉴定，然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等，大规模的培养可用水泥池。
首先，要对所使用的容器进行消毒，一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡，再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制：①天平称量5g2%漂白粉澄清液；②定量转移至容量瓶中；③加水至1L；④混匀。
2％漂白粉上清液的配制法：取漂白粉2克，加少量水搅匀，再加水至100毫升，充分调匀后，待澄清后取上清液使用。
）2 培养液的准备（1）BG11液体培养基配方：Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL（2）购买2000元/套，九种原液各200ml（稀释1000倍），10瓶。
小球藻
产品信息
用途
产品
小球藻培养基1）营养添加剂--提供高含量的蛋白质、叶绿素、维生素、矿物质、核酸。 2）功能：A：增强人体免疫功能 B：抗病毒感染和增殖 C：抑制癌细胞增殖 D：迅速修复机体损伤 E： 排除体内毒素 F：抑制血压血糖上升 G：降低血清胆固醇含量 3）作为食用色素提取物 4）饲料-鱼虾开口饵料 5）化妆品原料
据研究小球藻还具有抗辐射、防治胃溃疡和溃疡性大肠炎等各种炎症、缓解心理压力和纤维肌痛等生理活性。
药用信息
原形态 生境分布
栽培 化学成份
⒈蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）球形单细胞有机体。胞体圆形，直径3-5μm。胞壁透明。胞内 的原生质体中具有1枚细胞核，和具有1个造粉核的杯形叶绿体或称色素体。繁殖时，由细胞内的物质分成数小块， 小块变成圆形，直径0.3-0.7μm，母体胞壁破裂后，幼体散出。
结果：1．大鼠食用缺铁食饵，即出现贫血，血红蛋白及红细胞减少。
2．贫血鼠食用一定铁量的3、4、5组食饵迅即恢复，食用第2组含铁量少的食饵，则恢复延迟。
3．体重增长发现，1、2组较第5组明显迟缓（P<0.01=，第3组同样受制。1、2组较第5组红细胞数量为少 （P<0.01=。
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目前世界上已知的小球藻约 10种，加上其变种可达数百种之多。小球藻广泛分布于自然界，以淡水水域种 类最多；易于培养，不仅能利用光能自养，还能在异养条件下利用有机碳源进行生长、繁殖；并且生长繁殖速度 快，是地球上动植物中唯一能在 20h增长 4倍的生物，所以其应用价值很高。我国常见的种类有蛋白核小球藻、 椭圆小球藻、普通小球藻等，其中蛋白核小球藻蛋白质含量高，营养价值最高。
养殖技术在初春设置500-1000L的浅水槽，用最小目的过滤海水3份、淡水1份放满水槽，每1000kg水加入硫 铵300g，过磷酸钙50g，配成培养液，放入小球藻藻种，1个月后小球藻即可繁殖生长。
小球藻培养简介
2 小球藻的营养成分--CGF
• 小球藻生长因子(chlorella growth
factor，CGF)，也叫小球藻精，是细胞活 性物质。经实验分析表明，小球藻生长因子 主要含氨基酸、核苷酸、多糖、蛋白质、维 生素等功能性成分。 • 动物实验证明CGF可以提高巨噬细胞吞噬 功能，活化细胞等免疫调节功能，并经毒理 实验证明 CGF 是无毒物质，因此其作为保 健品和功能食品的添加剂具有广阔的前景。
的媒介。流行病学证明多食不饱和脂肪酸有利于身体健康。 • 小球藻含有的多不饱和脂肪酸十分丰富，以二十碳五烯酸 (EPA)和二十二碳六烯酸（DHA）为代表的高度不饱和脂肪 酸（PUFA）具有降脂、降压、降血糖功能，预防和改善动 脉粥状硬化、防治高血压等重要的药理活性。 • 华农的胡月薇于09年对异养蛋白核小球藻进行营养成分分析 ，结果表明异养蛋白核小球藻粉中不饱和脂肪酸的比例高达 77.24%，其中必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸含量分别为 47.17%和13.03%，这在其他食品中是很少见的。 • 此外值得一提的是，与蛋白质含量相比，小球藻的脂肪含量 可以说是比较低的，可作为高蛋白低脂食品 。
2 小球藻的营养成分--多糖
• 多糖是一种广泛存在于动物细胞膜、植物及微生物
细胞壁的生物大分子物质，是生命组成的 4 大基 本物质之一。 • 自养的小球藻的多糖含量为10%~25% ，小球 藻多糖属于植物多糖，动物实验证明其具有调节机 体免疫、抗肿瘤、抗病毒和抗辐射等多种生物学活 性，小球藻这一营养成分的特殊功能使其在医疗保 健领域得到应用。
2 小球藻的营养成分--微量元素
• 小球藻还含有丰富的维生素、矿物质。 • 还可以通过微量元素富集强化能 将无机硒转变成有机硒。
=
20 g 1 Kg
小球藻实验文字分析
从上表可以看出，在20°C下的K值要大于30°C条件下的K值，也就是说，20C下的单位体积对小球藻的容纳量要大于30°C条件下的容纳量。
快速增长时间段，并分析温度的影响：从曲线可以清楚地看出，快速增长的时间段在20℃和30°C有所不同，20°C时速度增长在测量范围内没有出现峰值，呈现不明显的指数增长模式，而30°C则在第3~4天出现了峰值，呈现“S"型曲线，可能原因是20摄氏度下的环境容纳量较大，在七天的测量时间过短，无法完全体现出逻辑斯谛增长的性质。
七、讨论、心得(1)在20°C条件下，第1天到第2天都是调整期，第3到第7天为对数期，种群数量增长曲线基本呈现指数型，在开始时，各环境因素对于种群数量增长的影响较小可以忽略，由于种群个体数较小，所以密度增长缓慢，随着时间延长，由于环境阻力的影响，小球藻的增长速率开始加快，证明其在适宜生长的环境之中。
由于本次实验的观测次数仅有7次，所以停留在了指数增长时期。
(2)在30°C条件下，第1~2天为调整期，第3~4天为指数增长期，而随后增长速度有所放缓，基本呈现逻辑斯蒂增长曲线。
小球藻在不同温度下的增长速度有所差异，除了温度之外，培养瓶当中有可能存在其它因素对小球藻的生长产生影响。
(3) 在最开始的三天当中，从图表中可以看出，在30摄氏度条件下比20摄氏度小球藻增长速度快。
在第三天，30摄氏度条件下的小球藻的OD值基本是20摄氏度条件下的2倍,基本可以认为此时30摄氏度条件下小球藻的密度是20摄氏度条件下的2倍，说明在30摄氏度时更适合于小球藻的增长繁殖。
第三天以后，20摄氏度条件仍然保持之前的速度呈现一次函数线性增长，保持原有的速率稳定增长。
30摄氏度条件下总体数量仍然增加，却呈现了明显的速率下降趋势。
我们认为是因为30摄氏度时种群数量增加快，种群数量大，资源消耗快，导致的环境阻力对小球藻的繁殖造成的不利条件。
小球藻功效与作用
小球藻功效与作用小球藻（Microcystis aeruginosa）是一种常见的蓝藻，也是一种淡水胞藻，属于原生生物。
小球藻生长在水中，并且广泛分布在全球的湖泊和水域中。
这种藻类具有很高的生物活性化合物含量，因此在许多领域中拥有广泛的用途。
小球藻的主要功效和作用如下：1. 高蛋白质含量：小球藻富含蛋白质，约占其干重的50%以上。
这使得小球藻成为一种重要的食物来源，尤其适用于素食主义者和对蛋白质需求较高的人群。
小球藻蛋白质含有大量的氨基酸，包括必需的氨基酸，如赖氨酸、苏氨酸和缬氨酸等。
这些氨基酸对于人体健康至关重要，能够提供能量和支持身体组织的修复和生长。
2. 营养丰富：小球藻含有多种维生素和矿物质，包括维生素B、维生素C、维生素E、钙、铁、锌和镁等。
这些营养物质对于维持人体的正常功能和免疫系统的健康至关重要。
其中，维生素B具有促进能量产生和神经系统功效，维生素C则有利于免疫系统的功能和身体中自由基的清除。
此外，小球藻富含胡萝卜素，是维生素A的前体，对视力和皮肤健康有益。
3. 抗氧化剂：小球藻中含有丰富的抗氧化物质，如β-胡萝卜素、类胡萝卜素和维生素E等。
这些化合物能够帮助人体抵抗自由基的损害，从而保护细胞免受氧化应激的伤害。
氧化应激与许多疾病的发展密切相关，包括心血管疾病、糖尿病、癌症和老年痴呆症等。
因此，摄入富含抗氧化剂的小球藻有助于预防这些疾病的发生。
4. 抗炎作用：小球藻中的一些生物活性化合物具有抗炎作用。
实验研究表明，小球藻提取物能够抑制炎症反应和炎症介质的产生，从而减轻炎症引起的疼痛和不适。
这对于关节炎、哮喘和炎症性肠病等疾病的患者来说尤为重要。
5. 降血脂作用：小球藻可以降低血液中的胆固醇和甘油三酯水平。
这可能是由于小球藻中的一些生物活性化合物具有调节血脂代谢的作用。
高胆固醇和高甘油三酯水平与心血管疾病的发生风险增加密切相关。
因此，适量摄入小球藻有助于预防心血管疾病的发生。
6. 抗肿瘤作用：小球藻中的某些成分具有抑制肿瘤生长的潜力。
小球藻的相关絮凝方法
G a o x i a o n o n g y e我们都知道，能源微藻作为一种重要的可再生能源物质，利用其来生产微藻生物柴油这一研究项目具有非常重要和深远的意义。
所以，高效、安全地收集小球藻是非常重要的一项实验技术。
小球藻的个体比较微小，用一般的方法来收集不太现实。
而通过对藻培养产物进行离心的方法显得过于昂贵和浪费能量，特别是对大规模培养的能源微藻。
寻找可替代的技术用于将藻培养环境中大量水分去除，从而降低能耗，增大微藻生产和培养的规模，是解决微藻生物质收集的出路。
经过一系列研究得知，用絮凝法收集小球藻，可以有效降低成本，并且可以有效避免资源的不必要浪费。
根据不同的絮凝机制手段，絮凝法主要包括化学絮凝，自沉降，物理絮凝和生物絮凝以及等等其他一些方法。
化学絮凝法所采用的絮凝技术手段主要是通过金属离子、明矾、氯化铁，以及聚丙烯酰胺聚合物、壳聚糖和阳离子淀粉。
化学絮凝法的优点主要是其已非常成熟的应用与各种污水处理，并且这项技术已经相当成熟，同时这种方法也比较安全，高效。
但这项方法的缺点是其容易污染微藻生物质，容易受酸碱性影响，其中技术手段所用的丙烯酰氨有剧毒，更重要的是，这项技术的成本比较高。
自沉降方法的絮凝技术手段是通过无机沉降物和钙!磷沉降物来进行。
其优点是在进行操作的时候可以不用添加一些外源物质，并且这项技术还可以中和藻细胞的负电荷。
但这项技术也有缺点，容易受到矿物质的污染，并且这项技术的效果不是特别稳定，其中所用的磷酸盐会污染藻生物质。
物理法絮凝的絮凝技术手段主要是通过超声波絮凝、电凝法絮凝和磁性纳米颗粒。
这种方法的优点是可以通过电极释放金属离子来中和其中的负电荷，能够有效的预防其中的早生物质被污染，同时这种方法可以将絮凝和分离一步完成。
这种方法的缺点主要是目前还不能够大规模应用，其中所用到的金属离子容易污染藻生物质，特别是这种方法成本比较高技术，目前技术要求还达不到。
生物絮凝法主要絮凝技术手段是通过易于絮凝的藻、植物提取物和微生物絮凝。
藻类细胞实验报告
一、实验目的1. 了解藻类细胞的基本结构和功能；2. 掌握藻类细胞实验的操作方法；3. 通过实验观察藻类细胞的结构和功能，加深对藻类细胞生物学知识的理解。
二、实验原理藻类是一类低等植物，广泛分布于地球上各种水体中。
藻类细胞具有独特的细胞结构，如细胞壁、叶绿体等，能够进行光合作用，是地球上重要的初级生产者。
本实验通过观察藻类细胞的结构和功能，了解藻类细胞的基本特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：小球藻（Chlorella pyrenoidosa）、盖玻片、载玻片、吸管、滴管、酒精灯、显微镜、盐酸、蒸馏水等。
2. 仪器：显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸管、滴管、显微镜专用光源等。
四、实验步骤1. 藻类细胞制片（1）将小球藻从培养液中取出，用吸管吸取适量藻液，滴在载玻片中央；（2）用另一载玻片轻轻按压，使藻液均匀分布；（3）用盖玻片覆盖，确保藻液充满盖玻片与载玻片之间的空隙；（4）用酒精灯对盖玻片进行轻微加热，使藻细胞紧贴盖玻片。
2. 藻类细胞观察（1）将制片放在显微镜下，先用低倍镜观察藻类细胞的整体结构；（2）选择一个细胞，将其移至视野中央，转换为高倍镜；（3）观察藻类细胞的形态、大小、细胞壁、细胞核、叶绿体等结构；（4）观察藻类细胞的光合作用，记录细胞内气泡产生的情况。
3. 藻类细胞功能实验（1）将制片放在显微镜下，观察藻类细胞的光合作用；（2）用吸管吸取适量盐酸，滴在盖玻片的一侧；（3）观察藻类细胞在盐酸作用下的反应，记录细胞内气泡产生和消失的情况；（4）用吸管吸取适量蒸馏水，滴在盖玻片的一侧；（5）观察藻类细胞在蒸馏水作用下的反应，记录细胞内气泡产生和消失的情况。
五、实验结果与分析1. 藻类细胞结构观察在显微镜下观察到小球藻细胞呈球形，直径约为2-5微米。
细胞壁较厚，细胞核明显，位于细胞中央。
叶绿体呈绿色，分布均匀。
2. 藻类细胞光合作用观察在显微镜下观察到小球藻细胞在进行光合作用时，细胞内产生大量气泡，气泡逐渐上升并破裂。
一种小球藻保藏方法
一种小球藻保藏方法
小球藻是一种常见的微型藻类，适合用于生物学研究和实验室培养。
以下是一种小球藻的保藏方法：
1. 收获小球藻：将小球藻集中收获到离心管或烧杯中。
2. 洗涤小球藻：用自来水或培养基洗涤小球藻，去除杂质和残留的培养基。
3. 离心小球藻：将小球藻离心，去除上层液体，留下小球藻沉淀。
4. 添加保存缓冲液：向小球藻沉淀中加入保存缓冲液，如20%甘油或10%乙二醇溶液，保护小球藻细胞。
5. 转移小球藻：将小球藻和保存缓冲液混合均匀后，转移到冷冻管或口袋中。
6. 冷冻小球藻：将小球藻冷冻在-80C的冷冻箱中，保存至少数月。
7. 恢复小球藻：需要使用时，将小球藻从-80C冷冻箱中取出，解冻并转移到培养基中，进行恢复培养。
注意事项：
1. 保存小球藻时，需要注意避光，以免影响小球藻的生长和存活。
2. 小球藻保存时间不宜过长，以免影响其活力和生长。
3. 小球藻解冻后应立即转移到培养基中进行恢复，避免细胞损伤。
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实验四、环境生物小球藻、轮藻的镜检、生物学特性及其应用
一、实验目的：
通过显微镜玻片观察与绘图，结合课堂讲解和资料查询，对小球藻等藻类的形态结构特征、分类、生物学习性、在环境科学中的应用等进行深入的了解。
二、指导老师：王旭、邝春兰
三、实验时间：20周
四、实验地点：环境生物学实验室
五、实验人员：
六、实验内容
（一）概述
绿藻门，卵孢藻科。
藻体单细胞，球形或椭圆形，直径仅数微米。
无鞭毛，浮游生活。
叶绿体杯形，或为弯的板片状。
造粉核有或无，因种而异。
繁殖时，原生质体分裂数次，生成2、4、8或16个不动孢子；因孢子的形态与母细胞相似，故称“似亲孢子”。
种类较多。
多生长于淡水中，少数生于海洋中；另有一些生活在动物细胞内或水螅等低等动物的内腔内。
性喜温暖，繁殖迅速，可大量培养。
富含脂肪、蛋白质、碳水化合物、矿物盐类和各种维生素，可作高蛋白质食物，是宇航中的理想食粮。
又可利用小球藻光合作用时释放氧、吸收二氧化碳，解决宇航中氧的供应。
因它繁殖快，又易于控制，为良好的研究材料。
（二）分类地位
小球藻在分类上属于绿藻门，绿藻纲，绿球藻目，卵孢藻科，小球藻属。
常见的有蛋白核小球藻，其他有眼点小球藻，卵形小球藻，盐生小球藻和海生小球藻等。
（三）形态结构
小球藻细胞球形或广椭圆形。
细胞内具有杯状（蛋白核小球藻）或呈边缘生板状（卵形小球藻）的色素体。
蛋白核小球藻的杯状色素体中含有一个球形的蛋白核。
细胞中央有一个细胞核。
细胞的大小依种类而有所不同，蛋白核小球藻直
径一般为3—5微米，在人工培养的情况下，条件优良，小球藻会变小一点。
（五）繁殖方式
以似亲孢子的方式行无性生殖，首先在细胞内部进行原生质分裂，把原生质分裂为2、4、8……个孢子，然后这些孢子破母细胞而出，每个孢子长成一个新个体。
（六）生态条件
1. 盐度：不同种类的小球藻可以生活在自然的海水和淡水中，淡水种类较多，海水种对盐度的适应性很强，在河口，港湾，半咸水中都可以生存，也能移植到淡水中。
2. 温度：一般的小球藻在10—36度温度范围内都能比较迅速地繁殖生长，最适宜的温度在25度左右。
3. 光照：在适温下生长的最适应的光照强度在10000勒克斯左右。
4. 酸碱度：适宜的酸碱度为PH6—8左右。
宜春高新技术专利产品开发中心编著。
（七）在环境生物学中的应用
（一）小球藻在含有有机质（特别是氮肥多）的水体中生长很繁茂。
（二）小球藻中含有一种最重要的成分：小球藻促进生产因子（CGF），它具有诱发干扰素，激发人体防御、免疫组织中的巨噬细胞、T细胞和B细胞的作用，又能促进对以二恶英为代表污染环境的有害物质的解毒、排泄作用。
早在1962年，小球藻就被列入了中国药典，日前获准列入中华预防医学会健康金桥重点工程计划。
七、作业
（一）通过显微镜观测，绘制小球藻和轮藻的显微结构图，说明其形态结构特征。
（二）说明小球藻的生物学特性。
（三）说明小球藻在环境生物学中的应用。
附录：轮藻
图 2-6 轮藻
属藻类植物的一门。
藻体构造比较复杂,有类似根、茎、叶的分化,长约10～15 cm,外形很像金鱼藻。
“茎的顶端有大型顶细胞,经分裂分化为藻体的各个部分。
“茎的下面有分叉的假根,借此固着水底泥沙土中“茎节上轮生侧“枝,“枝上具单细胞的“叶和两性生殖器官。
有性生殖是卵式生殖。
卵囊生于“叶腋中,通常呈卵形,
外有5个螺旋状缠绕的管细胞,在顶端形成5个冠细胞初为绿色,成熟时深褐色。
精子囊生于卵囊下面,呈球形,外有8个盾形细胞,初为绿色,成熟时橘红色。
合子萌发经过原丝体时期。
除卵配生殖外,还可营营养繁殖,但是不产生无性孢子。
分布在水流缓慢含钙质的池沼等水域中,常茂密成丛。
过去列为轮藻纲,现已独立为一门。
常见属是轮藻(Chara)。
由于古轮藻化石在地层中的演替较清楚,因此在石油勘探中,对含油地层的划分和对比有一定作用。