微观技术课程4 Microsoft PowerPoint 演示文稿
科普版小学五年级上册第四课 Microsoft PowerPoint 演示文稿
Sam playing football
Dose Sam like playing football? Dose Jim like swimming? Yes,he dose. Yes,he dose. No,he doesn`t No,he doesn`t.
Jack Riding a horse
Answer the questions. 回答问题。 1.Does Jim like playing cards? Yes, he does. 2.Does Jim like fishing? Yes, he does. 3.What does Jim do on Sundays? He often goes fishing on Sundays. 4.Dose he like computer games? No,he doesn`t 5.Does Jim like football? No, he doesn’t.
Choose the correct answer. 选择正确的答案
( B ) 1. Jim plays _____ with Jill. A. football B. chess C. cards ( A ) 2. Jim also likes _____ on Sunday. A. fishing B. fish C. fishhing ( C ) 3. _____ about ball games? A. What B. Who C. When ( A ) 4.He likes _____ on his computer. A. reading B.read C. reads
Ann skating
Lesson 4 Dose Jim swimming?
Read Jim`s hobbies 吉姆的爱好 爱好
新建 Microsoft PowerPoint 演示文稿
6、段落格式
(1)段落对齐 (2)设置行距 (3)段落缩进
7、保存演示文稿
四、在演示稿中插入图片等资料
打开演示文稿
图形的绘制与修饰
插入艺术字、图片、 剪贴画、文本框
插入影音资料等
五、幻灯片的编辑与修改
1、调整幻灯片的位置
2、复制幻灯片 3、删除幻灯片
六、幻灯片的格式
1、幻灯片配色方案
单击“格式”菜单,选择“幻灯片设计”命令操作即可。
3、幻灯片之间的切换
切换方式是指当前幻灯片到下一幻灯片之间的换页方式。单击“幻灯片放映” 菜单,选择“幻灯片切换”命令设置即可。
八、幻灯片的放映
1、设置幻灯片放映方式
(1)演讲者放映
在“设置放映方式”对话框中,选择“演讲者放映(全屏幕)”即可。
(2)观众自行浏览(窗口)
在“设置放映方式”对话框中,选择“观众自行浏览(窗口)”单选按 钮,单击“确定”按钮即可。
七、制作动画效果
1、设置动画方案
(1)选定幻灯片,单击“幻灯片放映”菜单中的“动画方案”命令;
(2)屏幕右边显示出多种动画方案,单击一种动画方案,可看到幻灯片按照 选择的动画方案依次出现。
2、自定义动画
(1)单击“幻灯片放映”菜单,选择“自定义动画”命令; (2)选择某个对象,单击“添加效果”按钮,在出现的菜单中选择即可。
3、为确保演示文稿放映效果,最好将课件复制到多 媒体控制台的电脑中操作。
钱塘江大潮
(3)在展台浏览(全屏幕)
在“设置放映方式”对话框中,选择“在展台浏览(全屏幕)”即可。
2、放映幻灯片(三种方式)
(1)选择“视图”菜单中的“幻灯片放映”命令。 (2)选择“幻灯片放映”菜单中的“观看放映”命令。 (3)单击窗口左下角的“幻灯片放映”按钮。
2024年PowerPoint教案
PowerPoint教案一、教学目标知识与技能1.了解PowerPoint的基本概念和功能。
2.学会使用PowerPoint进行演示文稿的制作、编辑和展示。
3.掌握PowerPoint中的常用操作,如插入文本、图片、图表等。
4.学会使用PowerPoint中的动画和过渡效果,提高演示文稿的吸引力。
过程与方法1.通过实际操作,掌握PowerPoint的基本使用方法。
2.通过小组合作,培养学生的团队协作能力。
3.通过完成演示文稿的制作,提高学生的信息处理和表达能力。
情感态度与价值观1.培养学生对信息技术的兴趣和爱好。
2.培养学生的创新意识和实践能力。
3.培养学生认真细致的工作态度和良好的审美观念。
二、教学内容1.PowerPoint概述介绍PowerPoint的基本概念、功能和用途。
2.PowerPoint界面及基本操作1.PowerPoint界面介绍:功能区、幻灯片缩略图、备注栏等。
2.新建演示文稿:选择模板、编辑幻灯片和内容。
3.幻灯片的基本操作:选择、移动、复制、删除幻灯片。
4.文本框的使用:插入文本框、编辑文本、设置文本格式。
5.图片的插入与编辑:插入本地图片、在线图片、编辑图片大小和位置。
6.图表的插入与编辑:插入图表、编辑图表数据、设置图表样式。
7.动画和过渡效果的设置:添加动画效果、设置动画顺序和持续时间,添加过渡效果。
3.PowerPoint高级应用1.母版的使用:编辑母版、设置幻灯片和文本样式。
2.幻灯片切换效果:设置幻灯片切换方式、速度和声音效果。
3.动作按钮的添加:插入动作按钮、设置动作按钮的和动画效果。
4.超的添加:插入超、设置超的目标和提示文字。
5.幻灯片放映:设置放映方式、排练计时、自定义放映。
4.PowerPoint实战演练1.小组合作,完成一个演示文稿的制作。
2.演示文稿的主题自选,要求包含文本、图片、图表等元素。
3.设置动画和过渡效果,提高演示文稿的吸引力。
4.进行演示文稿的展示和评价。
课件MicrosoftPowerPoint演示文稿
? 什么叫做习惯?
习惯就是在长期的ห้องสมุดไป่ตู้活和学习中逐渐 养成的、不容易改变的行为、社会风尚和 心理倾向。
? 积习难改
习惯一旦养成就难 以改变。 不好的行为 习惯会危害我们的一 生。
? 认真观察下面的图片,想一想,哪些是对
我们的学习有帮助的好习惯?
? 并分清是哪种习惯(传统的、创造的、合
作学习的习惯)?
? 有什么作用?
认真听课
趴在桌上做作业
课后和同学讨论
认真查资料
妈妈教我洗菜
玩了再去做作业
议一议: 为什么良好的学习习惯让人终生 受益?
心灵氧吧
? 如何养成良好的学习习惯呢?
1、说到做到,坚定不移。制定了计划, 就要落实在行动中,并持之以恒。(说 话算数)
2、不断重复,固定行为。同样的行为坚 持一段时间就可以固定下来(坚持不懈)
3、约束自己,及时调整。在习惯养成的 过程中可能出现反复,要及时做出调整 (有错就改)。
心海起航
? 学习习惯小自测 ? 课堂小结:坏习惯害人一生,好习惯终生
受益!为21天而奋斗. 作业:
? 为什么要为21天而奋斗? ? 复习11课内容,预习12课知识点
Powerpoint与课堂演示文稿的制作(全)
在幻灯片视 图中,选中 要动态显示 的对象
单击“动 画效果” 按钮 单击此按钮, 产生驶入效果 单击此按钮, 单击此按钮,产 产生飞入效果 单击此按钮,产 生激光文字效果 单击此按钮,产 生打字机效果 单击此按钮,产 生照相机效果 生闪烁一次效果 单击此按钮, 产生空投效果
(2)动画效果的整体设置
3、在浏览模式下浏览和编辑幻灯片 选择幻灯片:如果是单张,就单击鼠标;如果是 多张,则Shift+单击; 幻灯片删除:选定幻灯片,按Del键; 幻灯片移动:鼠标拖曳或用剪贴板的剪切和粘贴; 复制幻灯片:Ctrl+拖曳。 4、幻灯片浏览 视图/幻灯片浏览;或单击“幻灯片浏览”按纽, 此时,在工作窗口,将出现幻灯片多页并列显 示。 5、幻灯片放映:单击“幻灯片放映”按纽。
在幻灯片视图中显示要添加动作按钮的幻灯片
在此单击鼠标
同时出现下图所示的“动作设置”对话框
2、创建超级链接 可以为演示文稿中的任何文本或 对象创建超级链接,激活方式是单击 或鼠标移过;设置好超级链接后,代 表超级链接的文本会添加下划线,并 显示为配色方案的颜色,从超级链接 跳转到其他位置后,颜色就会改变。 因此,可以通过颜色分辨访问过的超 级链接。
§2 格式化和美化演示文稿
一、幻灯片格式化
可以重新设置幻灯片文字和段落的格式。
微生物检验实验室操作技术要求Microsoft PowerPoint 演示文稿
• 离室前工作人员用肥皂将双手洗净。
二.有毒有菌污染物处理要求
• 微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处 理,一律不得带出实验室。
• 1.培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或 铁丝筐内,并集中存放在指定地点,统一进行高 压灭菌。
擦净。 • 接种所用吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌。 • 从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部分.且
包装一旦打开,不能放置后使用。
• 无菌操作须在酒精灯前进行.吸管尖部或接种 环和针需在火焰下消毒后使用。
• 吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮胶头,不 能用口吸。
• 工作后用2%---3%甲酚皂溶液(来苏水)消毒, 擦拭工作台面,并将试剂、用具等放置原处。
• 2.经微生物污染的培养物,必须经121℃、 30min高压灭菌。
• 3.染菌后的吸管,使用后放入5%甲酚皂溶液 (来苏水)或5%石炭酸液中,最少浸泡24h(消 毒液体不得低于浸泡物的高度),再经121℃、 30min高压灭菌。
• 4.涂片染色冲洗片的液体,一般可直接冲入下水 道,烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中,经121℃、 30min高压灭菌后方可到入下水道,染色的玻片 放入5%甲酚皂溶液(来苏水)中浸泡24h后,煮 沸洗涤。做凝集试验用的玻片或平皿,必须高压 灭菌后再洗涤。
微生物检验实验室 操作技术要求
一.无菌操作要求
• 无菌间应保持清洁,不得存放与实验室无关的物品。 • 无菌操作前无菌间应打开紫外灯消毒,照明时间不少于
30 min。 • 进入无菌间必须更换工作服,戴工作帽,换拖鞋。工作
服、帽及拖鞋应放在无菌室缓冲间,经紫外消毒后使用。 • 无菌操作前应先用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球将手
powerpoint演示文稿
5. 2. 3
PowerPoint 视图
5.2.3 PowerPoint视图
在Word中曾经接触过视图的概念,在PowerPoint中, 也仍然有视图的概念。PowerPoint中有5种不同的视图,通过 这些不同种类的视图,可以方便的创建、组织和查看演示文 稿。与Word相同,PowerPoint中也是通过单击窗口左下角的
5. 2. 2 创建和打开演示文稿
1、新建演示文稿
新建演示文稿的方式有很多种。如果使用内容 提示向导,直接生成包含建议内容和外观设计的演 示文稿。另一种创建演示文稿的方式是选择设计模 板,这些模板决定了演示文稿的外观设计,但不含 内容。另外,也可从word文档导入大纲来创建演 示文稿,或者以不含内容和外观设计的空白幻灯片 为基础从头制作演示文稿。
单击图5-2中的“确定”按钮,PowerPoint将激活内 容提示向导,弹出“内容提示向导”对话框,如图5-3所 图 示。
5
3 “ 内 框容 提 示 向 导 ” 对 话
—
1、新建演示文稿
在内容提示向导中,PowerPoint从演示文稿类型、 演示文稿样式、演示文稿选项三方面为演示文稿提供 了建议的内容和外观设计,并提供了默认选项,如果 直接单击“完成”按钮,就以默认选项建立一个演示 文稿。一般情况都是通过“下一步”命令按钮依次对 演示文稿的三个方面进行设臵。 图5-4是选择了“企业”的“财务状况总览”后, 在“下一步”选择“屏幕演示文稿”,并在“演示文 稿选项”中添加标题“2001年财务计划”之后创建完 成的演示文稿。
中的操作和Word大纲视图操作相同,不再介绍。
4、大纲视图
图 5 9 大 纲 视 图
—
4、大纲视图
使用大纲窗格,可以组织和开发演示文 稿中的内容。例如,可以键入演示文稿的文 本内容,重新排列其中的项目符号、段落和 幻灯片的次序等。
第4章_PowerPoint演示文稿制作
第三部分 演示文稿制作
4.3.1 演示文稿的基本操作
1 建立演示文稿 建立演示文稿有4种方式: 新建空演示文稿、设计模板、样本模板、现有演示文稿
2 演示文稿的视图 有4种视图:普通、幻灯片浏览、备注页、阅读视图 切换方法:备注条上的按钮或视图选项卡
3 编辑演示文稿 插入幻灯片 复制、删除、移动幻灯片
4.3.2 在幻灯片上添加对象
1 插入表格、图片、图表、形状、艺术字等 2 插入声音和动画文件 3 插入超级链接
1)以下划线表示的超级链接 2)以动作按钮表示的超级链接插入超级链接源自4.3.3 设置幻灯片外观
1 母版 母版 一种特殊的幻灯片,在其中可定义整个演示 文稿幻灯片格式。
2 设计模板
演示软件提供了大 量已设计好的模板
演讲者放映(全屏幕):以全屏幕形式显示 观众自行浏览(窗口):以窗口形式显示 在展台放映(全屏):以全屏形式在展台上做演示用
同一演示文档可以有不同的设计 模板,只要先选中幻灯片,再选 择所需的模板就可
3 设计模板颜色
配色方案对幻灯片需要强调的部 分进行重新配色
预设的配色 方案
4.3.4 设置幻灯片放映
提供了动画、超链接和多媒体技术 1 动画
1)动画方案 2)自定义动画
2 设置幻灯片间切换效果
执行“切换”选项卡
3 设置放映方式
图例 Microsoft PowerPoint 演示文稿
设备和
设备抽入集油槽进行回收。
4.看其他介质流程线,了解各种介质与主物料如何接触与分离。
白土与润滑油混合后,吸附了润滑油原料中的机械杂质、胶质、沥青质等,再通过
设备进行分离。
5.看动力系统流程,了解蒸汽、水、电用途。
塔底吹入
介质,有利携带轻质馏分到塔顶,然后进入冷凝器
。循环冷却水来自
分为
路,其中一路去
1. 首先阅读标题栏和图例说明,从中了解图样名称、各种图形符号、代号的含义。
2. 看图中的设备,了解设备的名称、位号及数量,大致了解设备的用途。
该流程图中自左而右排列有
(V0101)、
(V0102)、
(C0101A,B)二台、
(E0101A,B)二台、
(E0102)、
(E0103)、
(E0104)、
层。一层厂房标高为
,二层标高为
, 三层标高为
。
3.看平面图和剖面图
按不同标高,用三个平面图表示设备在不同平面上的布置情况。
在EL100.000平面上,安装有
在EL104.000平面上,安装有
、
、
、
、
、及两台
。
。在EL108.000平面上,安装有
三台。
图中注出了各设备的
尺寸,来确定设备在厂房内的位置。在B-B剖面图上,可看出设备在
蒸馏釜通过夹套加热,蒸汽来自LS1101-76。经过CW110157向釜中加水,通过SC1101-32排水,釜顶部接放空管。冷凝器上 水来自CW1102-32,回水管为HW1101-32。两个真空受槽,由 VE1101-32所连真空泵施加负压,顶部都装有接管放空。
为控制压力,在二真空受槽上部装有真空压力表。在蒸馏 釜上部装有测温指示仪表以控制温度。由于本系统为间断性操作, 每段管路上都装有截止阀,不同的操作阶段就是通过对有关阀门的 操作而实现的。
五年级信息技术第4课《“地球掠影”初长成》教学设计
(2)制作封面
幻灯片编辑区中的两个虚线框叫做“占位符”,我们按照提示“单击此处添加标题”,用鼠标单击并输入文字,制作简单的封面。
(3)添加幻灯片
封面完成了,我们想添加一张新幻灯片,把收集到的“地球资料”放进去。
添加”;
(1)初识PowerPoint
打开方式:双击桌面上Microsoft PowerPoint图标;
点击开始按钮在所有程序中找到Microsoft office文件夹,选择Microsoft PowerPoint;
在桌面空白处单击鼠标右键,先选“新建”,再选“Microsoft PowerPoint演示文稿”。
为了方便下次使用,我们可以把它保存起来。记得为它起一个名字,并记住存放的位子哦!
三、归纳总结
我们这节课利用PowerPoint制作了介绍地球的名片,那你能够告诉我们都用了哪些PowerPoint的功能?
我们在下节课将学习如何美化自己制作的幻灯片。
板书设计
课后记
4、“地球掠影”初长成
初识PowerPoint
制作封面
添加幻灯片
设置版式
演示“地球掠影”
学生能启动PowerPoint,简单的文字输入学生可以做到。但对文件的保存还不熟练。
在“幻灯片/大纲窗格”空白处单击鼠标右键,选“新建幻灯片”。
我们将找到的“地球资料”直接添加到幻灯片的占位符中。
(4)设置版式
接下来,将详细介绍地球上的陆地和海洋,为了和前面的内容区分开来我们可以在“开始”选项卡“幻灯片”组中打开“板式”看看。
3、演示“地球掠影”
我们将收集到的“地球资料”全部放入幻灯片中,“地球掠影”初稿就完成了。单击“幻灯片放映”选项卡中的“从头开始”,欣赏一下自己的作品吧!
大学课程演示文稿教案
课程名称:现代教育技术授课班级:XX级XX专业授课教师:XXX教学目标:1. 让学生掌握演示文稿的基本制作方法和技巧。
2. 培养学生运用演示文稿进行教学、学术交流和日常工作的能力。
3. 提高学生的审美观和创新能力。
教学内容:1. 演示文稿的基本概念及作用2. 演示文稿制作软件的选择与使用3. 演示文稿的排版与设计4. 演示文稿中的图文混排与动画效果5. 演示文稿的演讲技巧与演示教学过程:一、导入1. 教师简要介绍演示文稿在现代教育、学术交流和日常工作中的重要性。
2. 提问:同学们对演示文稿的制作有哪些了解?二、基本概念及作用1. 介绍演示文稿的基本概念、类型和作用。
2. 展示一些优秀的演示文稿案例,让学生了解演示文稿的实用价值。
三、演示文稿制作软件的选择与使用1. 介绍几种常用的演示文稿制作软件,如Microsoft PowerPoint、WPS演示等。
2. 教师现场演示演示文稿制作的基本步骤,包括创建幻灯片、添加内容、设计幻灯片等。
四、演示文稿的排版与设计1. 讲解演示文稿的排版原则,如字体、字号、颜色、间距等。
2. 介绍演示文稿的设计元素,如背景、模板、图表、图片等。
3. 教师现场演示如何使用设计元素美化演示文稿。
五、演示文稿中的图文混排与动画效果1. 讲解图文混排的方法和技巧,如文字环绕、图片剪裁等。
2. 介绍演示文稿的动画效果,如淡入淡出、放大缩小等。
3. 教师现场演示如何添加和设置动画效果。
六、演示文稿的演讲技巧与演示1. 讲解演示文稿的演讲技巧,如语速、语调、肢体语言等。
2. 教师现场模拟演示,让学生了解如何进行有效的演讲。
3. 学生分组进行练习,教师点评并提出改进建议。
七、总结与作业1. 总结本节课所学内容,强调演示文稿制作与演示的重要性。
2. 布置作业:学生根据所学知识,制作一份主题为“我的家乡”的演示文稿,并准备进行课堂展示。
教学评价:1. 学生对演示文稿制作的基本方法和技巧的掌握程度。
高中技术课程(含信息技术和通用技术)
高中技术课程(含信息技术和通用技术) 考试大纲第一局部信息技术根底一、信息技术根底(一)信息与信息技术1. 信息的概念和特征。
2. 信息技术的开展。
要求:理解和掌握信息与信息技术的有关概念。
(二)信息的来源与获取1. 信息来源的多样性。
2. 信息获取方法的多样性。
3. 万维网、搜索引擎的使用。
要求:理解和掌握信息获取的根本方法。
(三)信息的加工1. Microsoft Word 文字处理软件。
2. Microsoft Excel 电子表格处理软件。
3. Microsoft PowerPoint 演示文稿制作软件。
4. 分辨率、位图、矢量图、颜色、图形、图像的概念。
5. BMP、TIFF、GIF、JPG 等文件格式的特点。
要求:在熟练运用 Windows XP 系统的根底上,能熟练运用常用办公软件加工处理信息。
(四)信息技术与社会1. 数字化生活的各种表达方式。
2. 信息技术与经济社会开展的关系。
3. 信息平安,病毒防治。
4. 网络文化,信息免疫。
要求:理解信息技术与日常生活、经济开展的关系。
二、信息技术能力(一)信息的表达与交流1. 信息表达的各种常用方式。
2. 电子邮件的收发、地址构成和特点。
3. 能用 QQ、MSN 等信息交流工具表达和交流信息。
要求:了解信息表达的各种常用方式,能运用电子邮件、QQ、博客、微博等工具表达和交流信息。
(二)多媒体技术根底1. 理解多媒体计算机的关键技术和多媒体的根本概念。
2. 掌握常用媒体的根本特性、数据格式、使用方法和应用特点。
3. 掌握多媒体计算机硬件及软件的安装和使用。
4. 掌握对声音、图像、动画及视频的加工和处理。
要求:熟悉常用软硬件的安装与使用,能运用相关软件对声音、图像、视频等信息进行加工处理。
(三)网络技术根底1. 网络根本概念,网络的组成与分类,网络协议和功能。
2. 计算机网络通信原理,数据通信技术,网络体系结构,网络拓扑结构,信息交换技术。
3. 理解 Internet、TCP / IP 协议、IP 地址和域名,了解 ISO / OSI 参考模型。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
二、暗视野显微镜 基本原理 暗视野显微镜是以丁达尔(Tyndall)效应为基础而设计的, 它由特殊的聚光器装置而成。暗视野聚光器主要有两种类 型:一种为抛物面型聚光器;另一种为心型聚光器(图1— 13)。抛物面型聚光器是种具有抛物面型反射镜、中间有黑 档板的聚光器,它的特点是当平行光线入射后,都反射到 一个交点上,调节这个交点在标本上,当暗视野聚光器的 数值孔径大于物镜的数值孔径时,照明光线不能进人物镜, 只有标本的散射光线进入物镜并成像。抛物面型聚光器具 有较长的工作距离,数值孔径较小,所以只能匹配数值孔 径低的物镜。
由于每种物质有着自己特定能级结构,因此,经光能 激发后产生特定波长的荧光,细胞内部的许多成分经 短光波照射后,可以发出荧光,这种荧光称为自发性 荧光。但细胞内自发性荧光一般都很微弱。细胞内有 些成分可与荧光色素结合而呈现一定颜色的荧光,这 种荧光称为继发性荧光,利用某些成分的继发性荧光, 可对细胞进行细胞化学和免疫学的研究。 荧光显微镜是根据光致荧光的原理,利用一定波长的 光激发显微镜下标本内的荧光物质,使之发射荧光, 呈现荧光图像。荧光显微镜的主要特点是它的光源能 供给大量特定波长范围的激发光,随检标本内的荧光 物质获得必要强度的激发光,为了只让某一特定波长 的激发光照射在样品上,必须在激发光源与显微镜之 间的光路中安装激发滤光片,让激发光源的特定波长 的光通过,作为激发光。
双折射体是晶体的基本特征。因此,偏光显微镜已被广 泛应用于岩石学、矿物学和化学等领域。在生物学中也 有很多结构具有双折射性需要利用偏光显微镜来观察和 鉴定、例如在植物学方面,可利用偏光显微镜来鉴别纤 维、染色体、纺锤体、淀粉粒、细胞壁与细胞质以及组 织中是否有晶体等。又如在人体及动物学方面可利用偏 光显微镜来鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤 细胞、横纹肌和毛发等的特殊结构。
C1、C2为光波在两种不同媒质的速度,Co为光在真空的速度; n1、n2为两种不同媒质的折射率,no为真空的折射率,等于1。
2.折射率与光的波长λ的关系 因为从光的色散等实验可知,单色光经过不同 媒质的频率f不变,即长。 将此式代人上式得:
在同一时间t内,单色光在不同媒质中所走的路程r:
任何一种荧光物质都有其特有的激发光谱和发射光谱, 荧光发射光谱波长比激发光谱的波长更偏于长波方向, 但两者有部分重叠。因此荧光显微镜的光路设计必须分 离开激发光和荧光,使观察者能够看到纯的荧光。根据 光的常识,用一定波长的光(如紫外光)照射某些物质, 一定量的光能被物质的分子或原子所吸收,物质吸收光 能后,激发出一种高能量电子(称为跃迁电子),进入激 发态。随后,由于其与其他分子碰撞,引起能量衰减, 并进人激发态的最低振动能级。当物质从激发态恢复到 它原来的基态时,可以电磁辐射的形式放出所吸收的光 能,然而放出的光波比原来激发光的光波长(如可见光)。 如果这种光仅在激发的瞬间或在激发后的一个很短时间 内放出,称为荧光(图1-16);如将激发光切断仍持续发 光(或残光,即光源停止后的续发光),且所发的光比荧 光的光波长更长,则称为磷光。
样品吸收这一激发光后,便会产生和发射荧光。为了要 得到专一的荧光,还需要在物镜和目镜之间光路中安装 一个吸收(阻断)滤光片,它能将样品吸收后剩余的激发 光吸收掉,并且它能有选择地让某一特定波长的荧光通 过,而把其他非专一性的可见光挡住不让通过。荧光显 微镜的装置(透射式及落射式)可达到理想的荧光图像 图 1-17 A 透 射 式 原 理
正像镜检又称无畸变镜检,其特点是使用低倍物镜而不用伯氏透 镜(Bertrand lens),另外为使照明数值孔径变小,可以推开聚 光镜的上透镜。通常生物体的双折射性比结晶体微弱,因而较难 判断。在正像镜检下,可利用石膏补偿片或云母补偿片来进行镜 检。使用石膏补偿片,在正交检偏下视场呈紫红色,当旋转载物 台时,具各向同性的部分仍为紫红色,而具双折射的部分则呈现 青色和黄色。因此,尽管双折射性很弱,但容易加以鉴别。利用 云母补偿片,干涉色呈灰色,但与双折射体重合时,则变成黑暗 或黄色。 锥光镜检又称干涉像镜检,其特点是使用高倍物镜,利用被检物 体所产生的干涉,以伯氏透镜将在后侧焦点上形成的干涉像 (interferance figure)在表面上成像,并将此像再次放大而加 以观察。同时,为将照明数值孔径增大,旋人聚光镜的上透镜。 如果图像是以黑十字串通的同心圆,则此物质为单轴体;如果干 涉轮有两个中心,稍加旋转,围绕中心的圆轮交替变位,则为双 轴体。生物体的组织虽然不是晶体,但也具单、双轴体,不过生 物组织多为单轴体性质,而植物的细胞壁则多为双轴体性质。
偏光显微镜中最与众不同的就是偏光装置,即起偏器和检 偏器。过去二者均为尼科尔(Nicol)棱镜(天然方解石)组 成,现多采用硫酸碘喹啉(harapathite)晶体制作的人造 偏振镜来代替。普通光通过偏振镜之后就能获得只在一直 线上振动的直线偏振光。如前所述,偏光显微镜的偏振镜 由起偏镜和检偏镜所组成。前者置于光源与标本之间,后 者置于物镜和目镜之间,并有手柄伸于镜筒或中间附件外 方以便操作,其上有旋转角的刻度。从光源发出的光线通 过起偏镜所形成的直线偏振光,如果其振动方向与检偏镜 的振动方向平行(即处于“平行检偏位”),则完全通过; 如果偏斜,则只能透过一部分;如果垂直(即处于“正交 检偏位”),则完全不能通过(图1—19)。因此,在进行偏 光显微术镜检时,原则上要使起偏镜和检偏镜处于正交检 偏位的状态下进行。
自然光在垂直于光波传导轴上具有许多振动面,各平面 上振动的振幅、频率也相同,如果自然光经反射、折射、 双折射及吸收等作用后成为只在一个方向上振动的光波, 则被称为偏振光或偏光(polarized light)。例如图1-18 所示,当光线通过某一双折射体时,成为A、B两种直线 平面偏振光,两者的振动方向相互垂直,但其速度、折 射率和波长等均有所不同。
显微技术
马玉堃 生命科学学院
2007年3月
第六节 各种实用研究显微镜 一、相差显微镜 基本原理: 普通光学显微镜可以很好地观察到经固定染色的细胞显 微结构,但很难观察到活的细胞显微结构。这是因为人的 眼睛只在光的波长(颜色)和振幅(亮度)变化时才能观察到 被检的物体,而活细胞或未经染色标本多为无色透明,当 光波被通过时,其波长和振幅并没发生什么变化,所以无 法辨认。为了观察活细胞的显微结构,就需要使用相差显 微镜。 相差显微镜与普通显微镜主要不同之处在于用环状光 栏(annular diaphragm)代替可变光栏(changeable diaphragm),用带相板(phase plate)的物镜(通常用“ph” 标志)代替普通物镜,并带有一个合轴调中望远镜 (telescope)及滤色片。
如前所述,在正交检偏下视场是黑暗的。如果被检物体为 单折射体,起偏镜所形成的直线偏振光的振动方向不发生 变化,仍然与检偏镜的振动方向相互垂直,所以无论怎样 旋转载物台,视场仍为黑暗。如果被检物体具双折射性或 其中含有双折射性物质,由于通过起偏镜形成的直线偏振 光进入双折射体后,产生振动方向相互垂直的两种直线偏 振光,这两种光通过检偏镜时由于相互垂直或多或少可以 透过检偏镜,就能看到明亮的图像。光线通过双折射体时 所形成的两种偏振光的振动方向可根据被检物体的种类而 不同。 在正交检偏下观察双折射体时,旋转载物台时就出现明暗 反复的变化,每隔90度变暗—次,该位置是双折射体的两 个振动方向和两个偏振镜的振动方向相一致的位置,故称 消光位置(extingction position)。在此位置继续旋转45 度,被检物体变为最亮,这是因为偏振光到达该物体时分 解出的部分光线可以通过检偏镜使之明亮,故此位置称为 对角位置(diagonal position)。如图1-20所示,
在旋转360度中共有4次的消光位置和对角位置。正是根 据上述基本原理,偏光显微镜可被广泛应用于岩石、矿 物、晶体、陶瓷、金属、药物、细胞、生物组织和植物 纤维等各种具有双折射性物质的观察、研究和鉴别。
偏光镜检术的基本方式可分为正像镜检(orthscope)和锥光镜 检(conoscope)两种。正像镜检和锥光镜检的光路图如图1-21
在光密质中,因为n2大,所以光波走的路程r2小,即 光波传播的相位在后(图1-9B)。
其两者的光程差(δ)就是同一光波经过折射率不同的媒 质发生的相位差简称为相差,即:
3,衍射与干涉 相位差并不为人们肉眼所识别,所以,必须利用光的衍 射和干涉的现象,把相差变成振幅(明暗)之差,从而使人 的肉眼能感觉出来,如果把直射光光波推迟1/4波长,使 之与衍射光保持同一相位,合成波等于直射光与衍射光振 幅之和,振幅增大,亮度提高,使物像亮度大于背影亮度, 则称为明反差(bright contrast)或负反差(negative contrast);如果推迟衍射光波1/4波长,使直射光与衍射 光的相位差1/2波长,合成波振幅为两者振幅之差,物像 亮度比背景暗,称为暗反差(dark contrast)或正反差 (positive contrast)(图1—10,图1—11)。
这些特殊的聚光器能使照明光线改变途径,不直接进入物镜, 而是倾斜地照射在标本上,由标本表面的绕射光线入射到物 镜内,产生被检物的衍射图像(图1-14,图1-15)。这样黑暗 的背景中可以观察到细胞的结构形态。暗视野显微镜能观察 到一般明视野显微镜下观察不到的0.02-0.004pm之间的微粒 子的存在和运动,但不能辨清物体的细微结构。
将此式代入最初的上式得
r1、r2和ro分别为光在两种不同媒质和真空所走 的路程。式中路程(r)与折射率(n)的乘积 n1r1、 n2r2、n0r0称为光程(optical path)。
由此可见,在同一时间t内,单色光在不同媒质中所走 的路程虽然不同,但其光程却是一样的,等于光波在真 空中的路程,但它们出现早晚却不一样,也就是说,其 相位发生变化。在光疏质中,因为n1小,所以光波走的 路程r1大,即光波传播的相位在前(图1-9A)。
这些特殊装置能使活细胞或未经染色的标本中各部分的折射 率或厚度的微小差异,产生相位差,然后利用光的衍射和干 涉的原理,把相差变成振幅(明暗)之差,使人的肉眼能够辨 认出来。 活细胞或未染色标本虽无色透明,但其各部分的折射率和厚 度还是会有微小的差异,当光波通过时,光波在各部分的滞 留时间会有不同,即光程会有微小差异,因而光波的相位会 发生微小的变化,其光程与相位的关系如下: 1.光速与折射率关系 我们知道,单色光在不同媒质中的光速C与媒质的折射率 n成反比,即: