3种丙肝病毒检测方法在丙型肝炎诊断和疗效监测中的临床价值_邓兆享

3种丙肝病毒检测方法在丙型肝炎诊断和疗效监测中的临床价值邓兆享(武警广东省边防总队医院，广东深圳518029)［摘要］目的探讨HCV－cAg、HCV－Ab和HCVＲNA在丙型肝炎诊疗中的临床价值，并分析HCV－cAg和HCVＲNA的相关性。

方法采用ELISA法和ＲT－PCＲ法检测221例疑似丙肝患者血清HCV－cAg、HCV－Ab和HCVＲNA含量。

结果单个方法检测时其阳性率分别为HCVＲNA47．5%、HCV－cAg48．4%、HCV－Ab84．1%，联合检测时其阳性率分别为HCV－Ab+HCV－cAg98．2%、HCV－Ab+HCVＲNA97．7%;HCV－cAg检测的敏感性为91．4%，特异性为90．5%，且与HCVＲNA的相关系数r=0．997;当HCV－cAg的S/CO≥3时，与HCVＲNA阳性的符合率为98．8%。

结论HCV－Ab联合HCV－cAg或者HCVＲNA检测比单项检测阳性率更高(P均＜0．05)，可防止窗口期丙肝患者漏诊;HCV－cAg出现早且和HCVＲNA的相关性高，可用于窗口期丙肝患者的筛查和疗效监测，但是不可以作为停药治疗的指标，当其S/CO≥3时可作为判断丙肝感染较可靠的指标。

［关键词］丙型肝炎;丙型肝炎病毒;HCV－cAg;HCV－Ab;HCVＲNAdoi:10．3969/j．issn．1008－8849．2014．34．036［中图分类号］Ｒ446．6［文献标识码］B［文章编号］1008－8849（2014）34－3854－03丙型肝炎病毒（HCV）是严重威胁人类健康的传染病之一，全球约有1亿人感染，我国的感染率约为3．2%。

丙肝患者大部分是通过血液和血制品感染，因此实验室对丙肝的早期筛查显得尤为重要。

目前实验室诊断丙肝的主要方法为检测丙肝病毒抗体（HCV－Ab）和丙肝病毒核酸（HCVＲNA）。

近些年来丙肝病毒核心抗原（HCV－cAg）的检测越来越引起人们的重视［1－3］。

本研究将用HCV－cAg、HCV－Ab和HCV ＲNA3种方法对221例临床疑似丙肝患者血清进行检测，评价3种方法在丙型肝炎的诊断和疗效监测中的临床价值以及探索提高丙肝诊断效率的方法，并对HCV－cAg和HCVＲNA 的相关性进行分析。

现将结果报道如下。

1临床资料1.1一般资料收集2011年5月—2013年11月我院门诊和住院患者中疑似丙肝的患者血清221份，并将血清置于－20ħ冰冻保存。

其中男127例，女94例；年龄16 78（45．2ʃ23.1）岁。

1.2主要仪器HCVＲNA检测仪器为ABI7500荧光定量分析仪（ＲT－PCＲ），HCV－Ab和HCV－cAg的检测仪器为尤瑞纳斯150全自动酶免分析仪。

1.3试剂HCV－Ab试剂来源于英科新创，HCV－cAg试剂来源于湖南康润，HCVＲNA核酸扩增PCＲ荧光检测试剂盒来源于湖南圣湘，质控品来源于卫生部临检中心，所有试剂和质控品均在有效期内。

1.4方法HCV－Ab和HCV－cAg检测用ELISA法，采用尤瑞纳斯150全自动酶免分析仪进行检测，所得到的结果为吸光度值与临界值之比，用S/CO表示，所有阳性结果均需二次复查；HCVＲNA用ＲT－PCＲ分析仪检测，严格进行操作，所得结果单位用IU/mL表示。

1.5结果判定HCV－Ab和HCV－cAg的S/CO≥1为阳性，S/CO＜1为阴性；HCVＲNA≥500IU/mL为阳性，櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵HCV［2］周建中．反应性浆细胞增多症患者骨髓浆细胞百分比改变［J］．免疫学杂志，2012，28（1）：89－92［3］Sophie S，Pascal B，Hanna D，et al．Immunoglobulin deposition dis-ease with a membranous pattern and a circulating monoclonal Immu-noglobulin G with charge-dependent aggregation properties［J］．A-merican Journal of Kidney Diseases，2010，56（1）：117－121［4］MatthewＲE，Cherise C，Alvaro MA，et al．Plasma cell dyscrasia causing light chain tubulopathy without fanconi syndrome［J］．A-merican Journal of Kidney Diseases，2010，55（6）：1136－1141［5］Pranav D，Ｒashmi T，SangitaＲ．Ｒole of flow cytometric immuno-phenotyping in plasma cell dyscrasias［J］．Apollo Medicine，2010，7（3）：176－180［6］Anne SＲ，Ｒita MJ，AlexandraＲ，et al．Oral glutamine and probiot-ics on enteral morbidity following autologous stem cell transplanta-tion for plasma cell dyscrasias［J］．Biology of Blood and MarrowTransplantation，2013，19（2Suppl）：S269－S270［7］李岩，张永宏，陈佳宁，等．血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）伴骨髓淋巴浆细胞异常增生的组织细胞学分析［J］．中国实验诊断学，2012，16（11）：2084－2086［8］林阳，万岁桂．流式细胞术免疫表型分析在多发性骨髓瘤及其他浆细胞疾病诊断中的应用［J］．标记免疫分析与临床，2013，20（1）：60－62［9］李雪华，张曦，常春康，等．205例多发性骨髓瘤患者骨髓涂片与活检切片内浆细胞浸润的比较研究［J］．诊断学理论与实践，2010，9（1）：63－65［10］苏芝军，陈凤．浆细胞病骨髓细胞形态学特征及其临床意义［J］．中国医学创新，2013，10（9）：8－10［11］李景岗．多发性骨髓瘤与反应性浆细胞增多症临床表现及细胞形态学鉴别［J］．吉林医学，2012，33（6）：1172－1173［收稿日期］2013－11－28ＲNA＜500IU/mL为阴性。

1.6统计学方法用SPSS18．0统计学软件对数据进行分析，相关系数用r表示，P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果2.13种方法检测丙肝的结果比较用3种方法单独检测时的阳性率分别是HCVＲNA47．5%，HCV－cAg48．4%，HCV－Ab84．1%。

若将HCV－Ab、HCV－cAg和HCV－Ab、HCVＲNA2种方法联合检测，则得到的阳性率分别为98．2%（217/221）和97．7%（216/221）。

107例HCV－cAg阳性结果中HCVＲNA的阳性符合率为89．7%。

47例HCV－Ab结果为弱阳性和35例HCV－Ab为阴性标本中HCVＲNA的阳性率分为46．8%和85．7%。

见表1。

表13种方法检测丙肝的结果比较例HCV－Ab nHCV－cAg（+）HCVＲNA（+）HCVＲNA（－）HCV－cAg（－）HCVＲNA（+）HCVＲNA（－）S/CO≥21395132831≤S/CO＜247193322S/CO＜13526540合计221961191052.2HCV－cAg和HCV－ＲNA检测结果的相关性分析有11例标本HCV－cAg检测结果为阳性而HCVＲNA结果呈阴性，有9例标本HCV cAg结果为阴性而HCVＲNA结果呈阳性，当以HCVＲNA诊断的结果为标准时，HCV－cAg检测的敏感性为91．4%，特异性为90．5%，与HCVＲNA的符合率为91%。

当HCVＲNA的浓度值（IU/mL）在500 103，103 104，104 106和＞106时，HCV－cAg的阳性率分别为70.6%，85．7%，94．4%和100%，随着HCVＲNA浓度的升高，HCV－cAg的阳性率也在增加。

经相关性分析，2种检测方法的相关系数r=0．997，说明2种检测方法显著相关。

当HCV－cAg的S/CO值为≥3，2 3和1 2时与HCVＲNA阳性的符合率分别为98．8%，80%和52．9%。

见表2。

表2HCVＲNA在不同浓度的情况下与HCV－cAg吸光度值的关系例HCVＲNA/（IU/mL）n S/CO≥32≤S/CO＜31≤S/CO＜2S/CO＜1＞1064947200104 1061814211103 1042113143500 103175345＜500116128105合计2218010171143讨论目前HCV－Ab检测多采用第三代技术，具有了更高的特异性，但是由于各厂家所包被的抗原质量和抗原片段比例不同导致HCV－Ab检测结果不一致［4］。

本研究HCV－Ab 结果为弱阳性和阴性标本中HCVＲNA的阳性率分别为46.8%和85．7%，这是因为人体感染丙肝病毒约70d后才能在血清中检测到HCV－Ab［5］，所以窗口期的患者无法检测到HCV－Ab，还有些免疫缺陷患者则要12个月才能检测到抗体，部分免疫缺陷和免疫功能紊乱的患者感染HCV后也无法检测到HCV－Ab，且大部分经过治疗后处于静止期的丙肝患者其检测结果也为阳性。

所以仅检测HCV－Ab容易漏诊窗口期患者，且不能反映丙肝病毒的活动情况。

HCVＲNA阳性是病毒感染和复制的直接标志，是诊断HCV感染的金标准［6］，可在患者感染HCV后1 2周内检测出［7］。

HCV－cAg的出现时间比HCV－Ab要早5 7周，且比HCVＲNA晚1 2d［8］，所适合于感染丙肝病毒后的14 80d进行检测。

本组研究显示当以HCVＲNA检测为标准时，HCV－cAg检测的敏感性为91．4%，特异性为90．5%。

这与文献［9］结果相似。

本研究中HCV－cAg阳性样品中HCV ＲNA阳性率为89．7%，这比Ergunay等［10］报道的81．3%稍高。

若将HCV－Ab与HCV－cAg或HCVＲNA两种方法联合检测时其阳性率分别为98．2%和97．7%，与单独检测HCV－Ab的阳性率性84．1%比较差异有统计学意义，这与李育芬等［11］研究相似。

本研究还显示，随着HCVＲNA浓度的增加，HCV－cAg 的阳性率也在增加，两者的相关系数r=0．997，表明2种方法显著相关，这与Vermehren等［3］的报道相似。

当HCVＲNA的浓度值＞106IU/mL时，HCV－cAg检测的灵敏度为100%，这与Veillon等［12］的报道的结果相同；HCVＲNA的浓度值在500 103IU/mL时HCV－cAg的阳性率为70．6%，此外还有11例HCV－cAg结果呈阳性而HCVＲNA结果呈阴性，说明HCV－cAg的灵敏度和特异性还有待提高；当HCV－cAg的S/CO值≥3时与HCVＲNA阳性的符合率为98．8%，所以在实验过程中可以将HCV－cAg的S/CO值为3作为判断HCV 感染较可靠的指标，这比杨杰等［13］将S/CO值为2时作为有判断点要高。