食用菌菌种各级制种技术含视频
食用菌菌种分离的方法和操作步骤以及注意事项
食用菌菌种分离的方法和操作步骤以及注意事项食用菌菌种分离的方法和操作步骤菌种分离即是进行食用菌菌丝纯化的过程，它是制种工作的重要环节，通俗地讲就是把食用菌菌丝从自然中单独分离出来进行纯培养，从而获得纯食用菌菌丝的过程。
菌种分离是一项重要而又细致的工作，每个环节都必须严格按照无菌操作规程进行。
食用菌的分离方法很多，常用的有组织分离法、孢子分离法和基内菌丝分离法三种。
1.组织分离法组织分离法是将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法。
其特点：一是属于无性繁殖，能够保持原有菌种的优良特性，是生产中获得纯菌种的常用方法，且简单易行，取材广泛，菌丝萌发快。
二是组织分离操作简便，又不易带入杂菌，容易获得纯菌种。
但对银耳、黑木耳等胶质菌因其子实体种菌丝极少，如用组织分离培养，则往往不易成功。
1.1子实体分离种菇要选择朵大盖厚、柄短、八九分成熟的优良品种。
切去菇体基部，在超净工作台用75%的酒精棉球进行擦拭菌盖与菌柄两次，进行表面消毒。
接种时，只要将种菇撕开，用消毒后的小刀在菌柄与菌盖的交界处切取一小块组织，再用接种针将组织块放入PDA培养基的试管斜面中间。
置于24℃温度下培养3-5天就可以看到组织块上产生白色绒毛状菌丝，转管扩大即得到菌种。
如香菇、平菇等可以使用此方法。
1.2菌核组织分离茯苓、猪苓、雷丸等食用菌的子实体不易采集。
而常见的是它储藏营养的菌核。
用菌核分离，同样可以获得菌种。
方法是将菌核表面洗净，用酒精消毒，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA培养基斜面上，在24℃下培养，产生菌丝后进行分离纯化。
应注意的是，菌核是储藏器官，大部分是多糖类杂质，只有少量的菌丝，因此挑选的组织块要大一些，如果组织块过小，则不易分离出菌种。
1.3菌索分离法菌索分离常用于蜜环菌分离。
方法是选新鲜的活菌索，用75%酒精棉球将菌索表面消毒后，去掉菌鞘，把白色菌髓部分用无菌剪刀切成小段，接入PDA斜面培养基上，在24℃下培养，有白色菌丝长出且无污染，即表明分离成功。
食用菌简易制种技术
食用菌简易制种技术食用菌作为高蛋白、低脂肪、低卡路里、高营养、健康美味的食品，越来越受到人们的喜爱。
而自己在家制作食用菌，不仅可以保证食材的新鲜和质量，还可以减少购买成本。
本文将介绍几种常见的食用菌制种技术，帮助大家轻松培育出美味的食用菌。
1. 直接播种法直接播种法是一种最简单的食用菌培养方法，适用于种类较少的食用菌，如黑木耳、金针菇等。
具体操作步骤如下：1.将培养土填满培养箱，压紧。
2.在表面撒上食用菌的孢子或生物质体，注意要均匀撒播。
3.用保鲜膜覆盖箱子，确保通风良好。
4.放置在通风、遮光、适温的环境中，每天喷水保持湿度。
5.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
2. 木屑法木屑法是一种比较常见的制种方法，适用于杏鲍菇、香菇、平菇等食用菌的制种。
具体操作步骤如下：1.准备干净的木屑，并用清水浸泡6-8个小时以上。
2.滤干积水，将木屑放入锅中煮沸至消毒，然后捞起沥干。
3.将木屑放进袋子中，用水泡润。
4.取出泡好水的木屑，充分挤干。
5.把泡好水的木屑放入培养箱中，压实。
6.在木屑上撒上种菌剂。
7.用保鲜膜覆盖培养箱，通风，每天喷水保湿。
8.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
3. 液体培养法液体培养法是一种较为复杂的制种方法，可以用来培养多种食用菌，例如秀珍菇、灵芝等。
具体操作步骤如下：1.准备好菌种发酵用的液体，可以用食用菌专用的液体培养基或配制自己的发酵液。
2.在菌种液中加入适量的种菌剂，留出足够的空间。
3.用氧气泵将液体中的微生物通入空气，促使其繁殖生长。
4.液态培养箱通电加热，控制好温度。
5.待液体内部产生大量菌株后，将液体转移到菌棒或糠包装置中进行培养。
6.填充培养基。
7.将菌棒或糠包装置放在培养箱内，通风并喷水保湿。
8.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
4. 多菌固体培养法多菌固体培养法是一种在凝胶体内培养多菌的方法，适用于食用菌组合培养和新品种的研究。
具体操作步骤如下：1.准备好菌种发酵用的培养基凝胶体。
食用菌母种制作-实验一讲解
实验一食用菌母种制作一、目的要求：1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理；2、掌握母种培养基的制备方法；3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。
4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤；5、熟练分离出栽培用菌种。
二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管（18x180mm）、手术刀、镊子、75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。
三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升.2. 母种培养基的配制(1)熬制。
马铃薯洗净，挖芽去皮。
称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。
量筒量取1000毫升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。
四层纱布过滤于量杯中。
滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。
补足水量至1000毫升。
(2)分装试管。
将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。
培养基高度为试管长度的1/5左右，注意避免培养基沾于试管口外。
分装完成后，盖紧硅胶塞。
（3）捆把。
7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。
贴上标签，准备灭菌。
（4）灭菌。
注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。
（5）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。
斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。
①菌种分离与培养（1）种菇选择。
选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀，适应性强的子实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜子实体。
子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。
（2）母种分离（组织分离法）。
在分离前用75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒，在超净工作台内将子实体撕开，用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块（绿豆大小）移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上硅胶塞。
将分离的试管放在室内避光培养7-8天，检查菌丝生长情况。
菌种繁育—制种设备(食用菌生产技术课件)
贮藏室
远离污染源 低温（4~8℃） 干燥、通风、遮光 用前要严格消毒杀虫 地面常撒石灰粉
接 种 箱
接种帐
2. 接种室
要求
使用
高2.2~2.5m 缓冲间：
面积7~9m2 2~3m2
6个面平滑 接种间： 两门错开、平拉5~式6m2 顶装紫外灯
清洁→物品放缓冲间→消毒 →移物至接种间→ 喷消毒液 → 10min 后接种→消毒液清洁
3. 超净工作台 使一定工作区达到相对无菌、无尘状态的设备。
颈
种
圈
袋
菌 种 瓶
三、灭菌设备
高 压 锅
外锅：装水 内锅：装物（有壁管）
锅盖
安全阀 排气阀 压力表
常压
四、接种设备
（一）接种环境及器具 接种环境的要求：密闭性好。
1. 接种箱
特点
简易、利移动 对人体低害 效果好、工效低
用法 清洁、放物品 → 消毒
喷雾 熏蒸 紫外灯
紫外灯 操作孔 观察窗
菌种制作设备
目录
一、 原料处理、配制设备 二、 培养基分装设备 三、 灭菌设备 四、 接种设备 五、 菌种培养设备 六、 菌种保藏设备
食用菌制种工艺流程图
一、原料处理、配制设备
切片粉碎两用机 粉碎机
铡草机
拌料机
二、培养基分装设备及器材
装袋机
装瓶机
挖瓶机
聚丙烯、聚乙烯筒膜
菌
双
单
人
人
4. 接种工具 要求:前端为导热性好的金属材料。
环刀针匙来自接种 耙钩镊
铲
液
固
体
体
菌
菌
种
种
接
接
种
种
不同类型平菇菌种制作方法
不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异，为提高种植户的经济效益，相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法，供广大种植朋友们参考。
1.麦粒种制备
配方：麦粒99%，石膏1%，麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心，然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶)，126°C灭菌120min，冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种)，接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。
2.棉籽壳种制备
配方：棉籽壳85%，麸皮13%，石灰1%，石膏1%，原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋，每袋装湿料0.9kg)，料含水量为62%，料装袋后于126°C灭菌120min，两头接种，每个平板菌种接2袋。
接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。
3.枝条种制备
杨木枝条（规格12cmx0.4cmx0.7cm）扎捆后放入桶内，再加1%石灰水浸泡24h以上，捞出沥水撒麸皮，使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。
枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。
装袋后126°C灭菌120min，冷却后一头接种（袋接种量为四分之一平板母种）。
接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。
4.液体种制备
培养基配方：葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。
准确称量原料后煮沸定容，分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒，121℃灭菌30min，冷却后接种，每瓶接打孔母种块10块，接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。
食用菌原种的制作流程
食用菌原种的制作流程
食用菌原种的制作流程如下：
第一步：挑选优质的食用菌菌种
首先需要挑选健康、强壮、无病虫害的食用菌菌株作为原种。
一般来说，新鲜、干燥的菌株最为适宜。
第二步：制备基质
选择适合菌种生长的基质，制备成固态或液态培养基。
基质要求无污染、质地均匀、pH值适宜，以保证菌株能良好地生长。
第三步：接种
将挑选好的食用菌菌株接种到基质中，并在适宜温度下保存，等待发酵。
第四步：培养
在适宜的温度、湿度和光照条件下，进行长时间的培养。
对于不同的食用菌，其培养条件有所不同，需要根据具体情况进行调整。
第五步：分离纯化
在培养过程中，为了避免不同菌株的杂交，需要定期进行分离纯化。
分离纯化的过程需要高度注意无菌操作，以保证菌株的纯度。
第六步：保藏
将分离纯化后的菌株进行冷冻保存或石膏板保存等方式进行保藏，以备下一次使用。
通过以上步骤，可以制备出高纯度、高质量的食用菌原种。
制备出的食用菌原种可以用于育种、生产或科研等领域的应用。
食用菌原种的制作方法
食用菌原种的制作方法食用菌原种是培育高品质食用菌的开始，其制作方法关系到菌种的品质和生长效果。
下面将介绍10种关于食用菌原种的制作方法，并详细讲解每种方法的具体操作步骤、注意事项和优缺点。
1. 伏击法制种法伏击法制种法是一种常见的食用菌原种制作方法，其操作简单，适用于多种食用菌的原种制作。
具体方法如下：步骤一：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，尽量选用种粒外形完整、表面干净、无病害的菌盖和菌蒂。
步骤二：将菌盖和菌蒂归并，放到70%酒精中清洗30秒，然后取出沥干。
步骤三：将菌盖和菌蒂放到滤纸上，擦干表面水分，放到蒸汽锅中蒸10分钟，杀灭病菌和杂菌。
步骤四：将蒸好的菌盖和菌蒂拿出来，再次擦干表面水分，放到培养基上。
步骤五：放到恒温摇床上培养，震荡180rpm，28℃，恒温培养7-14天，即可获得食用菌原种。
优点：操作简单，适用范围广，菌株易保存。
缺点：成活率较低，制作时间较长。
2. 含砂蒸法制种法含砂蒸法制种法是应用含石英砂的菌种培养基来制作食用菌原种，能提高种粒触蒸面积，提高出菌率和菌株的品质。
具体方法如下：步骤一：准备含砂菌种培养基。
将玉米粉、蔗糖、石英砂和蒸馏水按一定比例混合，制作含砂菌种培养基。
步骤二：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，按照比例加入含砂菌种培养基中。
步骤三：将含菌培养基放在琼脂板上，在30℃下反复震动震荡搅拌。
步骤四：将培养好的固体菌种放在75%-80%的相对湿度内，保持湿润并置于通风且恒温保持在22℃下。
步骤五：待菌体生长到一定大小时，再将其移植到适宜的菌床中。
优点：出菌率高，菌株品质好。
缺点：制备过程中需掌握好配方和稠度。
3. 傅里叶红外辐射制种法傅里叶红外辐射制种法是利用电极辐射灯产生的热量来使制种容器内的培养液升降温，低温使菌体沉积在液表面，高温则使其下沉到液底，实现制种的目的。
具体方法如下：步骤一：将食用菌种子与蔓茎切片、米糠混合后，加入到恒温恒湿的发酵箱内。
菌种制作方法 教程,附食用菌种植技术
菌种制作方法教程，附食用菌种植技术首先将用来制作菌种的枝条剪成小段，放在消毒池内，压盖好加入清水没过枝条。
泡透后再加入少量的生石灰，直到pH值呈现偏碱性为止。
制作时一定不要使用培养基已干缩或老化的一级种，以免影响菌种的成活率或导致生产性状退化。
启用保藏的一级种时，应认真检查是否有污染现象。
一、菌种制作方法教程1、首先要将用来制作菌种的枝条剪成一小段，然后将其放在消毒池内压盖好加入清水，清水一定要没过枝条。
将枝条泡透后加入少量生石灰，直到pH值呈偏碱性为止。
然后将枝条沥干水分装入聚丙烯菌种袋，袋子一定要放在高压锅内蒸煮3-10个小时进行灭菌，放凉后就可接种。
2、接种时要注意，不要使用培养基已干缩或老化的一级种，这样可以避免影响菌种成活率或导致生产性状退化。
长期保藏的菌种，在使用前必须放在恒温箱中活化培养，提高培养温度，活化培养时间一般是1-3天左右。
3、如果要使用保藏的一级种，必须要检查是否有污染现象。
比如试管斜面上呈现黑色、绿色、黄色等菌落，就说明菌种已遭受霉菌污染。
将试管迎亮光观察，如果在气生菌丝下面有黄褐色圆点或不规则斑块，也表明菌种被细菌污染了。
二、食用菌种植技术1、首先调配好合适的基质，食用菌和植物不同，它适宜生长在木质纤维的基质中。
因此可以使用玉米芯、棉籽壳、木屑等进行压制消毒杀菌，然后将其作为栽培食用菌的基质使用。
2、食用菌包括了很多种菌类，大部分的菌类都有一个相同的特点就是不耐高温。
菌类在温度过高、气候炎热的天气里面会生长缓慢或停滞生长，因此植株的温度必须控制在24-27°C之间。
3、食用菌一般对阳光没有需求，它和植物不一样，菌类不需要进行光合作用。
因此一定要为栽培食用菌的容器做遮光处理，不能有太明亮的光线进入其中，如果没有做好遮光处理，食用菌也可能会死亡。
4、大部分食用菌喜欢生活在潮湿的环境中，所以它们不需要人工浇水，只靠吸收空气中的水分和基质中的水分生存。
种植者必须保证栽培食用菌的容器周围有一定空气湿度，这样可以为食用菌提供充足的水分。
食用菌菌种分级和生产的基本工艺流程
食用菌菌种分级和生产的基本工艺流程一、菌种分级食用菌的菌种分为三级，即母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)。
1、母种(一级种) 通过孢子或组织分离培养获得，并经鉴定为种性优良，遗传和生理性状相对稳定的在试管斜面上生长和保存的纯菌丝体。
也有人称之为试管种。
2、原种(二级种) 由母种转接到天然基质(培养基)上经培养而成的菌种。
这是菌丝体和天然基质的混合体。
3、栽培种(三级种) 由原种转接在天然基质(培养基)上扩大繁殖而成的菌种。
栽培种也是菌丝体和天然基质的混合体。
栽培种常作为栽培用菌种，或直接出菇。
也有人称之为生产种。
二、菌种生产的基本工艺流程作为栽培用的菌种，国内外均采用固体培养，使用固体菌种。
其大致工艺流程为：母种→母种扩繁(培养基制备→接种→培养检查→成品)↓↓←原种成品←(培养检查←冷却接种←灭菌←配料分装)原种制作栽培种制作(配料分装→灭菌→冷却接种→培养检查) →栽培种成品三、母种(一级种)制作母种制作的基本工艺流程为母种(由科研单位、大专院校、菌种保藏专门机构引进)一培养基制备一接种一培养检查一成品。
(一)、常用培养基及配方培养基是食用菌菌种生长所需营养的基质。
培养基要具备四个条件，第一，要含有所培养的菌株生长所需要的各种营养物质，如糖类、有机氮、矿物质等。
第二，所含养分浓度和状态要利于食用菌的吸收和利用。
如食用菌母种培养基使用葡萄糖的浓度多在2％左右，过高和过低都不利于菌丝的生长；食用菌对氮素的吸收优先吸收有机氮，因此，原种和栽培种的培养基中应添加有机氮源，如麦麸、米糠等。
第三，要有适宜的酸碱度(pH)，食用菌多数喜偏酸性，pH5.0～6.5。
第四，经过严格灭菌，保持无菌状态。
这最后一点是要通过灭菌才能达到的，然而，灭菌的高温能破坏培养基中的许多化学成分，并能降低pH。
这一点必须在配制时就考虑到。
这就要求从使用的营养型药品试剂上，要尽量选用热稳定性好的种类，配制时，灭菌前的pH要略高于使用时所需的适宜酸碱度。
食用菌菌种制作工艺流程及各工序生产规程
食用菌菌种制作工艺流程及各工序生产规程The document was prepared on January 2, 2021勋业食用菌菌种制作工艺流程及各工序生产规程一：生产工艺流程培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养检查→成品二：生产规程0：母种使用玻璃试管和棉塞,试管18mm×180mm．1或20mm×200mm,棉主要使用梳棉,不应使用脱脂棉.0：原种使用650mL-750ml,耐126℃高温的五色或近五色的玻璃茵种瓶,或850 ml耐126℃高温白色半透明符合食品包装用聚乙稀成型品卫生标准规定的塑料菌种瓶,或15cm×28cm耐126℃高温符合食品包装用聚乙烯成型品卫生标准规定的聚丙烯塑料袋．各类容器部应使用棉塞,棉塞应符合规定；也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞.0：栽培种使用符合原种规定的容器,也可使用≤17 cm×35 cm耐126℃高温符合食品包装用聚乙烯成型品卫生标准规定的聚丙烯塑料袋.各类容器都应使用棉塞或无棉塑料盖,并符合原种规定.0：母种常用培养甚及其配方培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯200g用浸出汁,葡萄糖20g,琼脂20g,水1000mL,PH值自然.培养基综台马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯200g用浸出汁,葡萄糖20g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁,琼脂20g,水1000mL,pH值自然.0：生物制剂和天然材料类生物制剂如酵母粉和蛋白胨,天然材料如木屑、棉籽壳、麦麸等,要求新鲜、无虫、无螨、无霉、洁净；干燥.0：净化工作台的消毒处理方法先用75％酒精或新洁尔灭溶液进行表面擦拭消毒,然后预净20min．0：培养期的检查各级菌种培养期间应定期检查,及时拣出不合格菌种．0:培养条件要求不同种类或不同品种应分区培养.根据培养物的不同生长要求,给予其适宜的培养温度多在室温20℃～24℃,保持空气相对湿度在75%以下,通风,避光.0:灭菌效果的检查方法培养基配制后应在4h内进锅灭菌.母种培养基灭菌～,30min.木屑培养基和草料培养基灭菌,或～,1h；谷粒培养基、粪草培养基和种木培养基灭菌～,.装容量较大时,灭菌时间要适当延长.灭菌完毕后,应自然降压,不应强制降压.常压灭菌时,在3h之内使灭菌室温度达到100℃,保持100℃10h～l2h.母种培养基、原种培养基、谷粒培养基、粪草培养基和种木培养基,应高压灭菌,不应常压灭菌.灭菌时应防止棉塞被冷凝水打湿.灭菌效果的检查母种培养基随机抽取3%～5％的试管,直接置于28℃恒温培养；原种和栽培种培养基按每次灭菌的数量随机抽取1%作为样品,挑取其中的基质颗粒经无菌操作接种于规定的PDA培养基中,于28℃恒温培养；48h后检查,无微生物长出的为灭菌合格.0：适用于黑木耳、毛木耳、金针菇、滑菇、真姬菇、杨树菇、鸡腿菇、侧耳属等多数木腐菌类：棉籽壳99%,石膏l％,含水量60％土2%.棉籽壳84％一89%,麦麸l0一15%,石膏1%,含水量60士2%.棉籽壳54一69%,玉米芯20％一30％,麦麸lO—15%,石膏1％,含水量60土2%.棉籽壳54％一69%,阔叶树木屑20--30%,麦麸10—15%,石膏1%,含水量60％士2%.0：适用于双孢蘑菇、大肥菇、姬松茸等蘑菇属的种类.：腐熟麦秸或稻草干77%,腐熟牛粪粉干20%,石膏粉1%,碳酸钙2%,含水量62土1%,.腐熟棉籽壳干97%,石膏粉1%,碳酸钙2%,含水量55土1%,.0：。
食用菌简易制种技术
食用菌简易制种技术常规制种，其设备昂员，条件要求严格，技术也复杂，菌种成本高。
建一个菌种厂，设备投资少则上千元，多则几万元。
简易制种技术，就是不需要专门设备，利用家里现有条件就可制种。
（一）蒸汽接种法准备：先把接种操作室打扫干净，保持潮湿清洁。
准备水壶或铝锅1只，煤球炉或电炉1只，接种台1张，接种针或大镊子一把。
蒸料灭菌桶：用铁皮做成比铝锅口径小一点的圆桶，桶底放铁筛架，桶内装菌袋、瓶。
上边口用塑料纸或木盖封口。
操作：将煤球炉或电炉放在操作台旁，再将水壶或铝锅放在炉子上面，锅内装适量的水，接种工具先放在锅内煮沸消毒。
接种时，关好门窗，洗净双手，戴上口罩。
将菌种块直接通过蒸汽放入栽培种的培养料上。
在蒸汽上接种，既舒服又方便，且接种质量可靠。
因为蒸汽在上冒的过程中产生一股冲力，把水壶或锅上的空气排开，蒸汽不断产生，就形成锅上一片无菌区。
由于菌种得到蒸汽的湿润，比在酒精灯上接的种恢复得更快，污染也少。
另外蒸汽接种不使用化学药品，可避免在接种时药品对入体的毒害。
（二）代替琼脂培养基1.绿豆粉培养基：将新鲜、干燥、不霉变的豆粉队放入锅内煮沸调团状，装入试管或三角瓶内，塞好棉塞，用牛皮纸或报纸包扎好试管上部，成捆放于高压锅内，用12公斤／厘米2压力灭菌半小时，然后慢慢放汽，取出试管凝固成斜面即成。
2.麦粒种：将小麦粒用温水浸泡2小时，捞出放入竹筛内，4个小时烧一次清水，约24小时左右，麦粒就萌发小芽约1厘米。
这时再放火锅内煮沸半小时，取出用凉水冷却后，加入石膏、干马粪使之成散粒，然后分装试管、三角瓶、蘑菇瓶、杂酒瓶，装量按常规。
塞好棉塞进行灭菌，15磅压力灭菌1小时。
然后接种。
采用此法可节约大量琼脂。
化学药品。
（三）于实体组织分离简易方法在无菌环境中，直接切取菇体未形成孢子组织块，进行培养即称简易分离技术。
方法：在第一批菇中，选取具有该品种特性的、发育正常、菌盖肥厚、朵大、无病虫害的子实体作种菇。
在蒸汽上用手把子实体一分为二，用消毒过的小刀在萌盖和菌柄交界处切取一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。
食用菌制种技术
食用菌制种技术菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。
其中母种的分离选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制作则相对比较简单。
下面介绍各级菌种的制作技术。
一、母种的分离选育母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。
作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。
1.采集种源从野生或人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源。
①种菇选择时间。
一般在11月上中旬，在第1批和第2批菇中挑选。
因为这段时间蘑菇生长正是旺盛时期，菌丝生活力强，子实体健壮，质量好，加之气温适宜，蘑菇能正常成熟。
②种菇的标准是：八成熟，朵形圆正，肉质肥厚，颜色洁白，无病虫害。
采集一二朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。
从栽培室采集的应标有原菌株代号。
2.培养基配制琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200克、琼脂16克～18克、葡萄糖20克、水1000毫升。
先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸15分钟～30分钟至薯块酥而不烂为止。
煮后用6层～8层事先浸湿拧干的纱布过滤，过滤后加入琼脂16克～18克（气温低时加16克，气温高时加18克）再煮，并不断搅拌，使固体琼脂完全溶化，再用4层～6层纱布过滤。
将滤液加水至1000毫升加入20克葡萄糖，搅拌溶化趁热分装试管。
装入量为试管高度的1/4～1/5，注意培养基不要粘着试管口，管口用棉塞塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，每瓶装量为20毫升。
然后置于高压锅内，在压力达108千帕，锅内温度为121℃灭菌30分钟左右。
灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。
食用菌制种—接种(食用菌生产课件)
1、温度控制 温度控制是菌种培养中最重要的措施。各种食
用菌的每一品种对温度要求不同。在菌种培养中最 关键的是冬季的升温保温和夏季的降温控制。 1）升温 （1）常用升温方法
目前在菌种培养室常用电炉开温、蒸汽管（暖 气片）升温和空调升温。
（ห้องสมุดไป่ตู้）温度控制 培养室升温时应注意：
随着培养室内菌丝生长量的增加，菌丝发热程 受将逐步加强，升温温度应随菌丝量的增加而降 低，通常以最适培养温度为基准，每5天降I℃。菌 瓶（袋）内菌丝在菌瓶（袋）内小气候中生长， 其温度一般比外部空间高2～3℃，因此，室内控 温时应当掌握在最适温度之下2～3℃为宜。
图1-5 母种移接法
2）原种和栽培种（瓶装或袋装）的接种 此项接种要求和操作基本与母种接种相同。
注意培养基灭菌取出，待冷却后才能接种，移入 接种箱前必须把瓶的外壁擦干净，按无菌操作将 母种用接种针移接入瓶内，一支母种可接4～6瓶 原种（图1-6）。
图1-6 用母种繁殖原种的方法
栽培种的接种是把原种转接到相同的木屑培 养基上进行扩大培养。接种时，原种表面的老菌 丝或菌膜要去除后再使用。
3、空气控制 目前栽培的食用菌都是好气性真菌，在培养条
件控制时应该注意通风透气。在菌种排列密集的 培养室内，要有适当窗户通风，特别要注意空气 的对流。可在培养室上下各设一定窗口，便于冷 热空气对流通风。但窗口大小依菌种量多少、房 间的大小而定。
4、光线控制 各种食用菌在菌丝培养阶段均不需要光线或
图1-7 用原种繁殖栽培种的方法
3）菌袋的接种 大面积栽培时，由于菌袋数量多，多在接种
室内接种。长袋培养基多数采用在灭菌之前先打 穴，香菇袋按一面等距离打3个穴，对应的一面打 2个穴，打好穴之后，每个穴都用事先准备好的边 长3.4cm方形胶布封口。
食用菌原种的制作流程
食用菌原种的制作流程
食用菌原种的制作流程如下：
1. 原材料准备：选择适合生产的菌丝基质，如木屑、麦秸、稻草等，并进行消毒处理，以去除杂菌和杂质。
2. 菌种接种：将已培养好的食用菌菌种加入到消毒处理后的基质中，进行均匀混合，并确保菌种充分分散。
3. 培养箱装填：将接种好的菌丝基质装填到培养箱中，注意保持适宜的湿度和通风条件。
4. 培养温度控制：根据不同食用菌的要求，控制培养箱内的温度，使之保持在适宜的范围内。
5. 培养时间：根据菌种的生长速度和特性，控制培养的时间，通常需要数天至数周。
6. 观察生长情况：定期观察培养箱内的生长情况，包括菌丝的扩展和子实体的形成。
7. 收获：当食用菌子实体成熟时，进行收获，注意避免对菌体造成伤害。
8. 后续处理：对收获的食用菌进行加工和贮存，以保持其新鲜度和品质。
需要注意的是，不同种类的食用菌可能具有不同的生长环境和培养要求。
因此，在制作食用菌原种时，需根据具体的菌种特性和培养技术进行操作。
此外，为了确保菌种的纯度和质量，还需要进行严格的卫生控制和消毒操作。
这里提供的是一般的制作流程，具体的步骤和条件可能会因不同的食用菌种类而有所差异。
在实际操作中，建议参考相应的专业文献、培养手册或请教专业人士，以获得更准确的指导和方法。
食用菌母种生产技术
食用菌母种生产技术食用菌母种生产技术母种生产主要包括培养基制备、纯种分离或转管扩大、培养等环节。
一、母种培养基制备1.母种培养基常用配方（1）PDA培养基：马铃薯(去皮，下同)200克，葡萄糖20克，琼脂18-20克，水l000毫升。
（2）加富PDA培养基①综合PDA培养基：马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁1.5克，维生素B110毫克，琼脂18-20克，水1000毫升。
②蛋白胨－综合PDA培养基：在加富PDA培养基①中添加5克蛋白胨。
③麦麸－PDA培养基：在培养基（1）中添加100克麦麸。
④麦芽汁－PDA培养基：在培养基（1）中添加50克大麦芽。
（3）鲜蘑菇浸出液培养基：鲜蘑菇200-250克，葡萄糖20克，琼脂18-20克，水1000毫升。
将蘑菇切碎，煮30分钟，取其液汁。
（4）粪汁培养基：干马粪或牛粪150克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升。
将马粪或牛粪打碎，煮沸30分钟，取其溶液。
（5）完全培养基（CM）培养基：蛋白胨2克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾0.46克，硫酸镁0.5克，磷酸氢二钾1克，琼脂18-20克，水1000毫升。
2.母种培养基制作方法不同配方培养其制作方法基本相同，现以综合PDA培养基为例介绍其制作方法。
（1）培养基制作。
将土豆洗净、去皮、挖去芽眼及变青绿部分，称取200克，切成约长宽各2厘米厚3毫米左右的薄片，在1200毫升水煮沸10－15分钟，然后用4－6层纱布过滤，倒掉残渣并洗净铝锅。
将滤液倒入锅内，加清水补足 1000毫升，同时放入琼脂并重新开始加热，最好小火加热，不断搅拌至琼脂完全溶化，再用纱布过滤一次，补水至1000毫升。
最后依次将称好的葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和维生素加入，继续加热并搅拌至全部溶化，停止加热。
如果要加入蛋白胨需将蛋白胨用冷水溶化后加入，可以避免蛋白胨因结块而分散不均。
图3－11 试管分装（2）分装试管。
左手持3-4支试管，管口朝上，令下端整齐，上移试管至漏斗软管，插入试管内约3厘米。
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食用菌菌种制作技术
一、母种制作
生产上用的母种，不管是从外地引进的，还是自己分离的菌种，对母种的转接一般应控制在三代以内，且菌龄要适宜。
优质母种的特征：菌丝洁白、浓密、粗壮、生长整齐，不产生色素，气生菌丝少，有菇香味。
1、母种培养基常规配方：
马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂2O克，磷酸二氢钾1
克，硫酸镁0．50克，水1000毫升PH值5．50～6．50。
2、培养基的制备
选择未发芽、无病害、不发青的新鲜马铃薯洗净去皮，称
取200克，切成薄片，装入铝锅中，倒入清水1500毫升，加热煮沸维持20～30分钟，至马铃薯稍烂为度，加热过程
中稍加搅拌，然后用3层纱布过滤，取其滤液1000毫升，不足补水至1000毫升，在马铃薯汁液中加入琼脂（琼脂要
事先剪短后，有温水浸泡），继续加热搅拌至琼脂完全溶
化，最后加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁，用"PH"试纸
测定并调节"PH"值。
在正常操作的情况下"PH"值常在要求
范围内，常可忽略测定。
分装在试管中，高度为试管高度
的1／8～1／5，加棉塞，将塞好棉塞的试管每七支一把用
牛皮纸包扎，防止棉塞受潮。
然后放在高压锅内灭菌，打
开放气阀，当放气阀放出的气体成直线后，就关闭放气阀，这叫排放冷空气，再升压到0.10 5 M pA维持3 0分钟，自
然降温到指针为0时出锅，摆成斜面。
3 接种培养
首先将待要接种的母种、接种工具、酒精灯、消毒好的斜面试管、消毒用的75%的酒精棉球、消毒烟熏剂、打火机一同放入接箱内。
然后点燃烟熏消毒剂，等烟熏剂点燃冒烟后，迅速关闭接种箱门，等药在接种箱内消毒半小时后，人才能进入接种箱内操作，接种：首先将要接的母种用接种针将母种斜面用针划成如绿豆大小的小块，左手握母种试管和一支待接空试管，右手拿接种针，用接种针勾一小块母种接入空试管的中央，有菌丝体的这面朝上，把试管塞用火消毒一下塞好管口，如此反复。
接好种后将母种放入培养室内，温度23～25℃，空气相对湿度65％左右培养7～14天，菌丝长满培养基斜面，即可用来接原种。
二、原种的制作
制种原料的选择和配制对菌种生产的质量和使用效果有着
直接的关系，常用的原料有小麦、玉米、棉籽壳、木屑等。
1 原种配方
⑴小麦（玉米）97%、石膏粉2%，红糖1%、pH值5．50～7。
⑵棉籽壳82%、麸皮15%、蔗糖1％、石膏粉1％，石灰1%、加水120％～130％。
⑶木屑78%、麸皮20%、蔗糖1％、石膏粉1％
2 培养基的制备
⑴小麦（玉米）培养基的制备：将小麦（玉米）筛检干净，称量，置清水中浸泡2-4小时，将糖、小麦放入开水中边煮边搅动，随时检查煮的程度，特别是煮到15分钟后更要勤检查，待麦粒（玉米）无白心，熟而不烂（不能开花）时立即捞出，放在尼龙布或干净的水泥地上晾晒。
见麦粒（玉米）表面没有多余的水分时，加入石膏粉、等，搅拌均匀，装瓶（用500克的罐头瓶或酒瓶或500毫升葡萄糖瓶，罐头瓶加两层报纸，上覆1张耐高温的塑料，用橡皮圈（自行车废内胎剪成）扎好，灭菌时要求压力在0．10 5 M pA，维持2小时，灭菌时应注意排冷空气的时间，注意不要超压，灭菌时间一定要精确。
用手提高压锅消毒时注意水被烧干，灭菌1小时后停下来，待压力下降为0后加水，进行第二轮灭菌1小时。
⑵棉籽壳、木屑培养基的制备：先称取原料，将糖、石膏粉、石灰等先溶化，制成母液，按大约所需水稀释，然后将棉籽壳木屑拌湿，搅拌加麸皮，拌匀，用手紧捏培养料，以指缝中有水外渗而不往下滴为适宜。
用14*28的聚丙烯高温菌种袋装装。
装袋要压实，套上套盖，进入灭菌消毒，时间同上。
3 接种培养：将灭好菌的培养基出锅冷却至室温时进行接种，每只试管可接5～6瓶原种。
培养条件同母种，一般经20～25天即可长满瓶子。
若要发菌时间缩短，一瓶原种可上下接二点母种，注意：小麦原种培养到10～12天需摇瓶，然后再培养。
优质原种的特征是菌丝洁白、整齐，瓶壁及表面布满菌丝，有菇香味。
3、栽培种的制作
⑴培养基制备及配方同制原种。
⑵接种培养首先用75％酒精或3％来苏儿擦手及原种瓶
外消毒，然后用消毒的接种铲（锄＊翻松原种，在接种箱内（超净工作台上）的酒精灯火焰上方倒少许原种于灭菌的瓶料中，每瓶原种接20～25瓶，培养条件同原种。
一般20～25天即可长满，长满后应立即播种。
若暂时不用，可在10～14摄氏度下干燥保存，时间不超过10天；2～4 摄氏度时保存不超过2 0天。
经低温保存的栽培种，在使用前将菌种放在常温下恢复1～2天。
食用菌母种制作技术视频
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