NP9基因抑制鼻咽癌细胞成瘤的实验研究_刘启才
miRAN—9对肿瘤调控机制的研究进展
miRAN—9对肿瘤调控机制的研究进展作者：韦秋业邹崇祺来源：《右江医学》2016年第04期【关键词】miRNA9；肿瘤；细胞增殖；侵袭中图分类号：R730.43文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.04.028微小RNA（miRNA）是近年发现的一种小分子量、高度保守的非编码RNA，通常包含20～25个核苷酸，能够通过互补结合目的mRNA的3’UTRs参与基因表达的转录后的调控，导致转录抑制或mRNA沉默[1]。
miRNA与多种疾病的发生、发展及预后密切相关，miRNA375是作为致病因素参与高血压颈动脉斑块阳性疾病的发生和发展，其过高表达对高血压颈动脉斑块阳性患者可能有促进作用[2]。
miRNA作用的机制主要有：①通过与靶向RNA完全或者近似完全配对，发挥与干扰RNA类似的作用，降解靶mRNA，抑制其翻译；②通过与mRNA的3’UTRs不完全互补结合，主要抑制靶RNA翻译时启动和延长阶段而达到基因沉默作用。
miRNA与多种细胞的增殖、凋亡、异化、侵袭、迁移和免疫应答等生物进程有关[1]。
miRNA可以作为心血管疾病进展的标志，参与心肌凋亡的调控；miRNA也可以通过靶向抑制Th2炎症反应降低激素抵抗型气道高反应疾病的临床症状；miRNA其异常表达也是肿瘤初始与进展阶段的关键。
在人类，一些miRNA高表达，其功能类似于致癌基因，一些miRNA低表达，功能类似于肿瘤抑制基因（TSGs）。
尽管miRNA可以显示促进或抑制肿瘤发生，但其主要的功能是像TSGs一样通过负性调控编码蛋白质的致癌基因调控细胞增殖和凋亡[3～9]。
现就miRAN9对肿瘤的调控机制综述如下。
1miRNA9在肿瘤中的异常表达及机制miRNA9是miRNA家族成员中的重要一员。
在人类，成熟的miRNA9被三个独立的基因编码，分别为miRNA91、miRNA92、miRNA93，其定位于染色体1、5和15[10]。
2003年发表论文目录
id名论文名称第一作者科室第二作者第三作者第四作者第五作者第六作者2004Evidence for 方嬿1669肺癌患者治疗张丽媛B超室邓小琴1707肺癌患者治疗张丽媛B超室邓小琴1726鼻咽癌颈部转王悦B超室郑剑霄陈孝岳曾辉邹如海熊永红周建华B超室操隆辉陈孝岳曾辉王悦熊永红1781超声与CT诊断恶性肿瘤致阻塞性黄疸的价值1785囊性肾癌的影熊永红B超室陈孝岳王悦林僖B超室曾辉王悦1882原发膀胱非何1例的超声表现1883胆囊恶性肿瘤王悦B超室陈肖选廖蝶飞1884经直肠腔内超王悦B超室林僖陈孝岳1922超声对绝经后裴小青B超室1923先天性肝胆管曾辉B超室1957先天性肝胆管曾辉B超室黄勇陈孝岳1958超声对绝经后裴小青B超室曾辉王悦1370氯胺酮对嗜中赵擎宇ICU贾清颜赵擎宇ICU1862对SPRS病毒所致非典型肺炎疫情的回顾与再认识1968脓毒症病人临赵擎宇ICU贾清颜苏全冠1840微量RNA定性技术及高科技过筛应用熊涛保健科曹素梅鼻咽科闵华庆高劲松洪明晃肖锡宾张昌卿1570血浆EB病毒游离DNA检测对监测鼻咽癌患者预后的意义1787儿童鼻咽癌预曹卡加鼻咽科练小荷李宁炜黄腾波1788术后放射治疗曹卡加鼻咽科黄惠英练小荷崔念基1889A functional r麦海强鼻咽科1948放射性口腔黏罗东华鼻咽科洪明晃1964氟尿嘧啶脱氧邱枋鼻咽科向燕群邓满泉洪明晃钱朝南鼻咽科1967Effect of silde1865医学论文来稿甘可建编辑部刘玮钟均行甘可建编辑部裴小青洪明晃19653种肿瘤学期刊2000—2003年刊登的治疗类文献分析1555Dynamic exp曾敬病理科徐栋梁张惠忠丘钜世张萌梁惠珍1556成骨细胞移植曾敬病理科徐栋梁张惠忠丘钜世张萌梁惠珍1662IGF-1、VEGF动态表达的骨质疏松性骨折愈合过程的意义曾敬病理科徐栋梁张惠忠丘钜世张萌梁惠珍1684成骨细胞移植曾敬病理科徐栋梁张惠忠丘钜世张萌梁惠珍曾敬病理科徐栋梁张惠忠丘钜世张萌梁惠珍1685Y染色体追踪成骨细胞移植促进骨质疏松骨析愈合及VEGF动态表达的实验研究1708鼻咽原发性腺EB病毒感染的关系何洁华病理科宗永生张敏钟碧玲梁英杰梁小曼何洁华病理科宗永生张敏罗容珍梁英杰1709鼻咽原发性乳EB病毒感染1773鼻咽原发性腺何洁华病理科宗永生罗容珍梁小曼吴秋良梁英杰1796酶联免疫吸附EB病毒VCA-IgA和EA-IgG诊断鼻咽癌张玉病理科张昌卿宗永生吴秋良孙韵郜红艺林素暇病理科宗永生吴秋良韩安家梁英杰1820鼻咽癌中EB病毒LMP1基因N端XhoI酶切位点的丢失林素暇病理科宗永生吴秋良韩安家梁英杰1833广州地区鼻咽EB病毒LMP1基因N端XhoI酶切位点的丢失何洁华病理科宗永生林汉良梁小曼吴秋良185244例肾上腺皮质外检病例的临床病理特征林素暇病理科宗永生林汉良钟碧玲李智梁英杰1855EB病毒LMP1对鼻咽癌中瘤细胞分化的影响1890Nucleophosm云径平病理科宋兰英第一军医大闫文生张进华赵彤2005黏附分子CD54、CD44V6在肺癌转移中的作用王宏梅法医教研室伍新尧夏云飞钱剑扬1763ATM蛋白在不同放射敏感性鼻咽癌细胞株中的表达1672适形调强放疗苏建新放疗科黄峻黄绍敏刘青林刘文肖达宜卢泰祥放疗科赵充韩非黄莹邓小武卢丽霞167549例复发鼻咽癌的调强适形放射治疗1719面罩对不同射陈立新放疗科张黎钱剑扬黄晓延卢杰黄劭敏1722鼻腔腺样囊性胡伟汉放疗科谢方云赖越元伍勇李群陈德珠1740第二届全国鼻崔念基放疗科卢泰祥邓小武陈明何少琴徐国镇1741电子线治疗下貌友兄放疗科练兴招林承光李扬成苏勇放疗科夏云飞杨惠玲何洁华吴秋良郑芹1766鼻咽癌放疗前SOD和MT的动态变化及其意义初探1804鼻咽癌病人放张应钗放疗科张国娇刘少鹏马骏放疗科Andrew J.D Nalinin Pa崔念基1819上皮生长因子1）贺玉香放疗科夏云飞1832“慧星”分析法在放射生物学中的应用183823例原发性筛窦恶性肿瘤临床分析胡伟汉放疗科谢方云傅晓莹陈德珠伍勇苏建新放疗科黄峻刘青蔡维洵林茂盛林承光1859CT模拟定位机在临床应用中应注意的问题1864Primus直线加速器“Mode24（HW）”故障分析张春光放疗科曾达夫1892鼻咽癌咽旁侵朱兰才放疗科卢泰祥张恩罴1898放疗前中后鼻苏勇放疗科夏云飞郑芹侯景辉何洁华吴秋良1907甘氨双唑钠对刘孟忠放疗科卢泰祥胡永红汪惠云黄慧英陈明1942快中子放射治张玉晶放疗科刘新帆冯勤付唐锦华常葳克殷蔚伯1943现代放射治疗卢泰祥放疗科陈立新放疗科李文杰黄晓延卢杰钱剑扬1944治疗计划系统CT值及图像质量保证的若干问题讨论1945金属食管支架邓小武放疗科傅剑华陈立新黄劭敏黄晓延戎铁华1946两种放射方法李群放疗科梁培炎蔡惜开张少书谢方云胡伟汉1947Impairment o胡伟汉放疗科梁立治妇科何云庄志雄何春华刘汝青彭小萍1651多重PCR-SSCP法检测妇科肿瘤患者hMSH2基因突变1654子宫颈癌患者刘继红妇科黄欣李孟达1733前哨淋巴结在袁颂华妇科梁立治1728中国和澳大利刘继红妇科黄欣廖革望李俊东李艳芳李孟达1821提高复发性卵李艳芳妇科李孟达刘富元刘继红李俊东1822上皮性卵巢癌刘穗妇科刘继红黄鹤彭小萍王园美梁立治妇科颜笑健熊樱李经略张昌卿袁颂华1845卵巢上皮性癌WAF1基因的表达1950妇女宫颈涂片刘继红妇科廖革望黄欣李艳芳1951草酸铂治疗上李艳芳妇科李孟达刘富元刘继红李俊东黄永文1952阴道癌前病变彭小萍妇科刘继红1953术前化疗在晚刘富元妇科邹劲林李艳芳王孝忠李玉洁冯艳玲冯艳玲妇科刘富元李艳芳高克非李玉洁1954卵巢内胚窦瘤54例的治疗1955卵巢恶性生殖冯艳玲妇科刘富元王孝忠李玉洁冯艳玲妇科刘富元李艳芳王孝忠李玉洁1956宫颈粘液腺癌25例临床分析1315氟尿嘧啶加甲徐立腹科詹友庆李威孙哓卫1537直肠癌Miles术后局部复发的诊治周志伟腹科万德森李元方阮超美陈映波陈功1676广州市越秀区万德森腹科戎铁华何友兼潘志忠柳青李源1738促进我国造口万德森腹科1739永久性乙状结万德森腹科陈功郑美春丁惠芳周志伟潘志忠1861胃肠道间质瘤万德森腹科伍小军梁小曼罗容珍潘志忠陈功1975直肠癌辅助放万德森腹科1976直肠癌围手术万德森腹科王冬梅1977提高对胃肠道万德森腹科1978提高对结直肠万德森腹科1979胰十二指肠切陈映波腹科关远祥詹友庆1980联合腹腔化疗陈映波腹科詹友庆周志伟1981进展期胃上部李威腹科詹友庆孙晓卫徐立仲坚徐大志2405胃肠道间质瘤万德森腹科伍小军梁小曼罗容珍潘志忠陈功2406提高对胃肠道万德森腹科陈少华广东省人民医邱前辉邵建永1795EBV潜伏膜蛋白质-1表达与鼻咽癌增殖和凋亡关系的研究1771NP9基因的克隆及对细胞周期素D1转录活性的影响刘启才广州医学院方嬿李晓艳梁卫江曾益新1306影响腮腺核素张伟光核医学科樊卫梁培炎王国慧杨小春戴军进1811Sentinel lymp王国慧核医学科樊卫张伟光彭汉伟王国慧核医学科樊卫张伟光戴军进杨小春彭汉伟1912核素显像-染色法探测舌癌前哨淋巴结王国慧核医学科樊卫张伟光1913SPECT与X线联合诊断鼻咽癌骨转移的临床价值1070药盒系统植入古静芬护理部吴剑辉黄秋萍龙腾1296沙培林治疗肺李媚姬护理部辛明珠樊爱群梁玉婵林穗卿1301舒普深与富络何丹丹护理部李振炎蔡丽容1302晚期鼻咽癌患范育英护理部李化平梁祖兰吴燕萍胡雯温泳珊1311鼻咽癌放射治练小荷护理部曹卡加何志梅陈招梅覃惠英冼慕慈1336美罗华治疗B淋巴细胞非何杰金氏淋巴瘤的护理吴少芳护理部黎燕芳何湘子1415头颈肿瘤病人陈秀杰护理部宋凤娇黎锦燕梁记清黎宝月陈金莲护理部梁少萍王琰龚素茹刘彩媚1534CT导向下经皮肺穿刺活检急性气胸抢救与护理1603癌症患者门诊“紫杉醇”化疗的护理朱洁梅护理部1653胆道支架植入郑静怡护理部陈英梅李小霞1658护理程序在重辛明珠护理部陈伙娣护理部何凤英蔡燕君1663131I治疗甲状腺癌的护理1664多瑞吉透皮贴陈伙娣护理部文朝阳梁卫萍1666偏瘫患者的院马惠贤护理部刘玉琴陈少芸1673胸膜外镇痛术王耀兰护理部郑凌陈艳娟何诗妍1674妇科恶性肿瘤李振炎护理部黎丽婵江秋英陈松玲王丽春1677宫颈癌根治术黎丽婵护理部李振炎周菊梅袁秀红蔡丽容1678甲状腺瘤患者何诗妍护理部王耀兰区爱武秦金英梁晓敏1679鼻咽专科敷料陈金莲护理部何曙云1686胸管内置静脉钟就娣护理部辛明珠张小萍邹秀梅1687胸部肿瘤手术辛明珠护理部邹秀梅张小萍1688大剂量甲氨蝶苏卫红护理部招月好简观英沈奇志刘玉珊1689肿瘤病人抑郁简观英护理部招月好刘玉珊1692超声引导经皮陈秀云护理部文朝阳梁卫萍何凤英王雪珍蔡汝妹1693乳腺癌患者心吴燕容护理部李媚姬樊爱群陈燕茹1695一例鼻咽癌放何丹丹护理部李振炎梁满琴1696肿瘤病人行正赵菊琴护理部陈伙娣罗洁已蔡燕君1697肝切除术静脉卢云媚护理部梁靖何诗妍黄丽华1698紧急气管切开卢云媚护理部梁靖肖丽颜何诗妍黄丽华1699碘伏在临床上林蕾护理部张秀莲王耀兰林燕珍1701小儿全麻恢复李惠兰护理部陈颖黄荣杏1702静电除菌型空余红梅护理部李丽容陈爱群黎立娇1703胸腔镜下内乳吴枚禅护理部梁晓敏梁靖区爱武邓丽珍秦金英黎燕芳护理部黄丽源吴慧瑜17101例基因靶向治疗晚期乳腺癌患者的护理1712恶性肿瘤门诊陈爱群护理部郑丹苗余红梅1713坠入性胸内甲王耀兰护理部郑凌汤惠珍林蕾1714食管癌术后病辛明珠护理部邹秀梅张小萍1715对门诊化疗肿高瑞珍护理部黎立娇许然刘婉清1716监护麻醉护理汤惠珍护理部秦金英李伟1717自我照顾对肿吴燕萍护理部梁祖兰范育英胡雯冯宪基宋凤娇护理部陈秀杰梁记清黎锦燕1721头颈部中晚期DBF联合化疗的临床观察及护理1723浅谈研究护士许然护理部1734原发性气管肿邹秀梅护理部辛明珠周菊梅孔秋焕1728超声介导微波何凤英护理部陈伙娣陈秀云文朝阳1742口灵液含漱防梁满琴护理部吴剑辉邓颜好陈招梅1742晚期鼻咽癌患邓颜好护理部陈招好梁满琴吴燕萍1746探讨如何开展黄细霞护理部曾芝凤林蕾王耀兰1747鼻内窥镜辅助黄细霞护理部何诗妍王耀兰刘艳玲1749癌性疲乏病人刘秀桃护理部1753开普拓化疗患苏仲玲护理部司徒启娇吴剑辉陈要敏1754介入法气胸引禤肖勤护理部温彩琼姚永欢何敏仪1755门诊分诊护士陈爱群护理部余红梅1756防治肝癌介入陈颖护理部陈燕茹郑静怡1758Nursing Care吴剑辉护理部黄慧嫦郭秀泉1780以人为本的手何诗妍护理部汤惠珍梁容1783氦氖激光联合马琴娟护理部罗国仪孙振权李茵梁祖兰马琴娟护理部罗国仪孙振权李景茹池小鸿1784氦氖激光加骨58例何敏仪护理部陈爱群方素琴1790“人本原理”与护理管理1791门诊癌症病人方素琴护理部郑丹苗余红梅陈爱群黄丽娟1792护患关系与护陈爱群护理部方素琴邓颜好1793合同护士培训冯惠霞护理部林燕珍陈伊娜张杏兰高宗娥1797改良开胸手术郑凌护理部王耀兰骆小青1798微创切口施行郑凌护理部王耀兰骆小青1800恶性肿瘤门诊陈爱群护理部黄丽娟李雪芳方素琴余红梅1805手术后病人穿梁靖护理部卢云媚邓丽珍1810家庭护理对病覃惠英护理部尤黎明万丽红1829乳腺癌根治术冯桂荣护理部辛明珠樊爱群周菊梅1831两种方法检测邝妙欢护理部林翠杏刘万里欧阳文婷姚少羽邱瑞芬1834恒康正清用于欧燕妮护理部袁秀红陈雪琳1835护理人员洗手梁玉婵护理部李明林穗卿1839临床专科护士覃惠英护理部温咏珊郑美春冯惠霞辛明珠1841肺癌介入术后陈英梅护理部李小霞伍丽虹郑敏红吴杏尧1844力尔凡配合外胡莲英护理部冯惠霞王利娟林燕珍张杏兰1849甲状腺肿瘤切黎锦燕护理部曾宪玲胡创英梁记清1850两例造口旁伤张惠芹护理部袁秀红李惠兰吴海燕1851影响核素肺通蔡燕君护理部赵菊琴罗洁已余红梅护理部黎立娇方素琴陈爱群张大美1856门诊持续48h输液泵化疗应用静脉留置针的护理1860门诊输液患者李雪芳护理部邝凤齐陈爱群胡雯护理部范育英李化平18671例艾迪注射液过敏性休克的急救护理龚素茹护理部王琰彭惠云刘彩媚姚永欢肖勤1870CT导向下肺穿刺活检病人的术中配合与护理1871门诊化疗患者刘玉琴护理部马惠贤朱洁梅郑丹苗何丹丹汤惠珍护理部吴枚禅梁容何诗妍1895复发性肺癌术1例报告1896一例企图自杀冯惠霞护理部张甫银陈伊娜张杏兰1897老年人食管癌陈燕茹护理部陈颖陆爱英吴燕容1899全自动清洗消刘宇英护理部何曙云朱洁梅黄丽源1900碘造影剂静脉陆美庆护理部龚素茹刘彩媚姚永欢梁少萍蔡少珠1901离子型碘造影陆美庆护理部黄春梨梁少萍王琰姚永欢蔡少珠1902离子型造影剂陆美庆护理部黄春梨梁少萍苏炎城姚永欢刘彩媚1906空腹静脉注射陆美庆护理部苏炎城梁少萍姚永欢刘彩媚蔡少珠1909足部保健对妇刘莉护理部区爱武林蕾曾芝凤1910蝶鞍区术后水郑敏红护理部陈英梅莫雪芬1911持续灌注法在郑敏红护理部莫雪芬谭平国1924足部保健对妇刘莉护理部区爱武林蕾曾芝凤1925背景音乐对肿刘莉护理部区爱武曾芝凤1926碘伏在临床上林蕾护理部张秀莲王耀兰林燕珍1927洁净手术室的区爱武护理部卢云媚肖丽颜梁晓敏1928肺癌病人在微徐雪辉护理部辛明珠樊爱群周菊梅1929多媒体技术在梁容护理部刘艳玲区爱武梁靖苏仲玲护理部郭秀泉阮仲珠1930阴茎癌切除加—腹腹股沟淋巴结清扫术的护理1931介入放射治疗温彩琼护理部何诗妍彭惠云龚素茹褟肖勤1933食管癌根治术邹秀梅护理部1934子宫肉瘤病人李振炎护理部黎丽婵江秋英陈松玲王丽春1935高强度聚焦超刘秀桃护理部徐国良罗琼李传行黎建军1936肠造口患者的吴海燕护理部袁秀红1937严重过敏性皮王玲燕护理部1938分析永久肠造张惠芹护理部1939造口皮肤刺激郑美春护理部1940开胸术后胸膜张小萍护理部辛明珠周菊梅1941我院后勤清洁冼慕慈护理部覃惠英谭悦1932胆道金属内支彭惠云护理疗褟肖勤温彩琼黄春梨龚素茹邝妙欢检验科邱瑞芬黄忠1655德国宝灵曼ELECSYS2010全自动免疫分析仪性能评价谭肖鹂检验科何丽容陈巧伦雷穗妮1665239株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析吴兴平检验科1680DNX-9620电脑洗板机的应用及维护邝妙欢检验科梁伊仁李幼娟1727美国NOVA-CRT16急诊生化仪的评价1752住院病人与门徐新华检验科邱瑞芬池沛冬梁伊仁陈巧伦检验科梁伊仁张江江邱瑞芬林静怡吴兴平1762TAgNORs、TSGF及SCC检测在头颈肿瘤诊断中的应用吴兴平检验科李惠清1803GB2006型血浆融化水浴箱常见故障原因与排除谭肖鹂检验科何丽容雷穗妮1807BACTEC9050全自动血液培养仪与BACTEC460半自动血培养仪的比较及临床应用特点1830肿瘤患者与梅何丽容检验科谭肖鹏陈巧伦梁伊仁雷穗妮廖蝶飞何丽容检验科李艳芳陈巧伦谭肖鹂雷穗妮池沛冬1872流式细胞术检DNA倍体、细胞周期及Ki67表达1881肿瘤患者血细何丽容检验科谭肖鹂陈巧伦雷穗妮邱瑞芬检验科邝妙欢林翠杏谢衡玲钟义富1908血清肿瘤糖类72-4（CA72-4）在胃癌诊断中的意义邝妙欢检验科林翠杏刘万里欧阳文婷姚少羽邱瑞芬1914两种方法检测AFP）的比较1915流式细胞仪的严苏丽检验科何丽容陈巧伦谭肖鹂检验科何丽容陈巧伦雷穗妮1916239例株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析1917肿瘤患者与梅何丽容检验科谭肖鹂陈巧伦梁伊仁雷穗妮廖蝶飞邱瑞芬检验科邝妙欢林翠杏谢衡玲钟义富1918血清肿瘤糖类72-4（CA72-4）在胃癌诊断中的意义2154血栓、止血试何丽容检验科池沛冬雷穗妮谭肖鹂1748不同剂量可乐谭红鹰麻醉科陈秉学孙来保曾维安黄文起黑子清李伟麻醉科汤惠珍蒋艳波许梅曦1767不同剂量芬太T淋巴细胞亚群、NK细胞的影响李伟麻醉科王剑蒋艳波许梅曦1815乌司他丁对术-8的影响1893乌司他丁对术李伟麻醉科王剑陆霄云许梅曦1894硬膜外咪唑安李伟麻醉科王剑蒋艳波陆霄云许梅曦1559膀胱全切后改周芳坚泌尿外科秦自科熊永红韩辉刘卓炜梅骅1724大鼠心脏移植韩辉泌尿外科钟红兴高晓燕1750大鼠器官移植韩辉泌尿外科钟红兴高晓燕吴志刚泌尿外科周芳坚秦自科谢晋良王桂林1760嗜铬细胞瘤的11例报告1809保留肾脏的肾熊永红泌尿外科周芳坚1814保留部分前列周芳坚泌尿外科秦自科韩辉刘卓炜吴志刚1877非泌尿系肿瘤刘卓炜泌尿外科周芳坚秦自科韩辉周芳坚泌尿外科秦自科刘卓炜韩辉吴志刚1905腹腔镜下全膀4例初步报道）1305高强度聚焦超李传行内镜室徐国良黎建军罗广裕1735高强度聚焦超李传行内镜室徐国良黎建军罗广裕张蓉单宏波2372高强度聚焦超李传行内镜室徐国良黎建军罗广裕张蓉单宏波袁中玉内科张力李苏钱晓洲管忠震1571E1B缺失腺病毒瘤内注射治疗恶性肿瘤的安全性研究黄慧强内科姜文奇王巍周中梅夏忠军林旭滨1575EPOCH方案治疗复发和耐药中高度恶性非霍奇金淋巴瘤1576CHO和CHOP方案治疗中度恶性非霍奇金淋巴瘤的疗效比较袁中玉内科徐瑞华何友兼管忠震李宇红内科姜文奇黄慧强徐瑞华林桐榆夏忠军157775例鼻咽非霍奇金淋巴瘤临床分析1578顺铂联合吉西滕小玉内科周宁宁苏义顺周中梅刘冬耕何友兼陈丽昆内科徐光川刘国贞梁颖刘俊玲周羡梅1579COAPC方案联合脑部放射治疗非小细胞肺癌脑转移孙晓非内科管忠震姜文奇何友兼黄慧强周中梅1580改良CODOX-M/IVAC方案治疗弥漫性小无裂细胞和大细胞淋巴瘤初探1728盐酸格拉司琼滕小玉内科管忠震刘茂珍刘冬耕刘魁凤喻庆薇1729富米汀（盐酸滕小玉内科管忠震何友兼刘冬耕王巍内科戎铁华张力姜文奇徐光川黄慧强1765423例非小细胞肺癌患者生存的多因素分析李宇红内科邵建永赵美卿郜红艺李丽容管忠震1768EBV DNA定量分析在监测鼻咽癌转移和复发中的临床意义周宁宁内科周中梅刘茂珍李宇红徐瑞华滕小玉1776紫杉醇和5-氟尿嘧啶/醛氢叶酸双周疗法治疗晚期胃癌的初步报告张东生内科姜文奇李苏张晓实毛华陈晓勤1777血清90K/Mac-2BP对预测非霍奇金淋巴瘤化疗疗效的意义徐瑞华内科管忠震冯奉仪何小慧刘淑俊邸立军1778奥沙利铂单药II期临床试验1823多参数流式细孙晓非内科何丽容冯海林严苏丽夏忠军陈晓勤徐瑞华内科袁中玉管忠震曹烨王华庆胡晓桦1824瘤内注射E1B缺失腺病毒（H101）与化疗联合治疗恶性肿瘤的II期临床试验1825羟基喜树碱冻黄慧强内科姜文奇胡晓桦林旭滨刘魁凤李宇红182630例儿童神经母细胞瘤的综合治疗疗效观察孙晓非内科刘冬耕苏义顺林桐榆陈晓勤何友兼1869紫杉醇联合卡吴海鹰内科翟艳辉李莹杨朝英董瑜刘旭辉林桐榆内科1887Enhancing ad1888Combination 林桐榆内科1982开普拓治疗大张力内科1548脑胶质瘤患者牟永告神经外科陈明振陈忠平神经外科1549ERCC2诱导表达在人脑胶质瘤细胞对BCNU耐药中的作用周旺宁神经外科陈忠平毛伯镛1652TNF在脊髓损伤中的研究进展1690循征医学在神陈忠平神经外科周旺宁赛克1691胶质瘤放射敏陈忠平神经外科张韬潘力雄周军民夏云飞李永强1732非小细胞肺癌赛克神经外科陈忠平1801脑恶性胶质瘤牟永告神经外科陈忠平周旺宁神经外科陈忠平1806胶质瘤的循证—个体化综合治疗张湘衡神经外科周旺宁牟永告陈忠平1857颅内重复癌肿2例报告1858神经外科医生陈忠平神经外科赛克1873重视胶质瘤的陈忠平神经外科1874细胞因子诱导林丽神经外科陈忠平陈忠平神经外科张俊英1876Enhancing alk1919MGMT基因表达与人脑胶质瘤化疗耐药关系研究张俊英神经外科陈忠平1920恶性脑肿瘤体张俊英神经外科梁永钜李永强陈忠平1921细胞移植修复周旺宁神经外科1337岛状胸锁乳突伍国号头颈科陈福进曾宗渊李浩宋明张诠1560舌鳞癌隐匿性李秋梨头颈科陈福进曾宗渊杨安奎吴秋良张惠忠1561微波固化治疗郭朱明头颈科曾宗渊夏良平张诠许光普陈福进赵华头颈科曾宗渊陈福进许光普伍国号郭朱明1566cNO舌鳞癌患者预后的多因素分析华辉头颈科曾宗渊许光普1567临床I、II期舌体鳞癌患者预后的多因素分析1568舌体鳞癌颈淋郭朱明头颈科张诠曾宗渊陈福进魏茂文彭汉伟彭汉伟头颈科曾宗渊陈福进郭朱明张诠许光普1569cNO舌癌前哨淋巴结定位方法研究陈文宽头颈科曾宗渊魏茂文1572下咽环后区癌39例临床分析赵华头颈科曾宗渊陈福进许光普郭朱明张诠1668T1、T2、No舌活动部鳞癌隐匿性颈淋巴结转移的规律及治疗1730放射诱发的第伍国号头颈科陈福进曾宗渊李浩林国武宋明1761舌鳞癌隐匿性杨安奎头颈科陈福进李秋梨魏茂文宋明陈伟超头颈科许光普张惠忠1769喉恶性纤维组1例报告1774不明原发灶颈彭汉伟头颈科曾宗渊郭朱明1817硬腭小涎腺癌刘学奎头颈科曾宗渊陈福进郭朱明许光普杨安奎陈艳峰头颈科陈福进1904uPA系统在恶性肿瘤中的表达与研究进展1959喉鳞癌组织中陈艳峰头颈科叶辉关中李海刚沈溪明1295肿瘤专科医院张秀莲信息科马国胜曹卡加1535试论国内外数欧穗东信息科1661恶性肿瘤患者赵雁梨信息科姚鸣红马国胜1681关于利用医学欧穗东信息科1682医院图书馆采李燕英信息科1683数据仓库技术何彩升信息科邹赛德1731图书馆书刊资刘新民信息科1743十大英文搜索欧穗东信息科1744谈医院图书馆欧穗东信息科邝国庭信息科1745构建基于WEB的医院图书馆综合信息服务系统1786图书情报从业刘新民信息科1808网络信息时代李燕英信息科罗小瑜行政1659HP78352C床旁监护仪黑屏的故障判断1700也谈医院经营余伟平行政张咏波行政1789把握历史机遇PACS1891贝朗容积输液罗小瑜行政2417浅析网络经济伊翠萍行政余辉胸科吴一龙戎铁华李锦添王思愚区伟1309P53 c-erbB-2蛋白表达对非小细胞肺癌辅助化疗的临床预测傅剑华胸科戎铁华李小东马国伟胡喆闵华庆1563支架置入术后Cox回归分析谢泽明胸科杨名添侯景辉1573腋窝淋巴结阴VEGF、c-erbB-2检测的临床意义苏晓东胸科黄植蕃戎铁华杨名添1818综合外科手术51例临床分析1827裸鼠肾包膜下温浙盛胸科张铁坚戎铁华1866食管癌手术适马国伟胸科戎铁华吴秋良龙浩傅剑华林鹏简少文研究部梅承恩梁永能李端陈巧伦罗慧玲1558富硒米提取液EB病毒转化脐血B淋巴细胞及EBV早期抗原表达的影响1564鼻咽癌血清学肖锡宾研究部张昌卿张峰李经略冯凯涛孙韵15653p21.3区域鼻咽癌相关基因—BLU的抑癌功能刘晓琼研究部潘志刚李满枝姜桔红付捷龙綮新1574羟基喜树碱和梁永钜研究部符立梧丁岩熊慧瑜陈黎明杨小平1676恶性脑肿瘤体张俊英研究部梁永钜李永强陈忠平1694Analysis of B肖锡宾研究部张昌卿1725茶多酚对人癌谢冰芬研究部冯公侃朱孝峰李志铭刘宗潮1737酪氨激酶小分张菊研究部朱孝峰刘宗潮1751阿诺宁乳化剂谢冰芬研究部冯公侃王鸿鹤朱孝峰刘宗潮杨仁洲。
鼻咽癌的干细胞治疗进展
鼻咽癌的干细胞治疗进展鼻咽癌，又称鼻咽黏膜上皮癌，是一种常见的头颈部恶性肿瘤。
当前，常规的治疗手段包括手术切除、放射治疗和化疗等，但效果往往不尽如人意，并且易发生复发和转移。
为了寻求更有效的治疗方法，干细胞治疗近年来备受关注。
干细胞是一类具有自我更新和多向分化能力的细胞。
在鼻咽癌的治疗中，干细胞被认为具有巨大的潜力，可以修复受损组织、增强免疫力，并具备抗肿瘤的潜在能力。
因此，通过干细胞的应用，可以实现针对个体的个体化治疗，为患者带来更好的预后。
目前，鼻咽癌的干细胞治疗主要有两种方法，一是使用自体干细胞，即采集患者自身的干细胞进行治疗；二是使用同种干细胞，即从其他健康个体中获取干细胞进行治疗。
自体干细胞治疗是目前应用最广泛的一种方法。
该方法的优势在于可以避免免疫排斥反应，因为使用的干细胞来自患者自身。
通常，医生会从患者的骨髓或脂肪组织中采集干细胞，然后经过处理和培养扩增后，再注射到患者体内。
通过自体干细胞治疗，可以促进鼻咽部组织的修复和再生，减轻患者的症状，提高生存质量。
同种干细胞治疗是另一种可行的治疗方法。
近年来，科学家们已经成功地从胎盘、脐带血、羊膜等多种来源中分离和培养出多能干细胞，这些干细胞具有较强的分化潜能和免疫调节功能。
同种干细胞治疗通过使用这些干细胞，可以针对鼻咽癌患者的特定需求进行治疗。
尽管同种干细胞治疗仍处于研究阶段，但已经显示出很大的治疗潜力，并取得了一些初步的成功。
除了自体干细胞治疗和同种干细胞治疗外，还有其他一些干细胞相关的治疗方法正在被研究和探索。
例如，干细胞移植后联合化疗的疗效正在进行临床试验，并取得了一些积极的结果。
此外，干细胞基因治疗也是一种有潜力的治疗方向。
通过将特定基因导入干细胞，可以增强干细胞的抗肿瘤能力，并使其更好地应对鼻咽癌的治疗。
尽管鼻咽癌的干细胞治疗在理论和实践中都取得了一些突破，但仍面临一些挑战和问题。
首先，干细胞治疗仍然属于新兴的治疗方法，需要进一步的研究和验证。
2013肿瘤分子生物学 9-26
患有遗传性视网膜母细胞瘤的患者亦有 很高的几率患其他类型的肿瘤,例如: 软 组织肉瘤。
RB等位基因的突变通常也会出现在遗 传获得两个正常RB 等位基因的散发性 乳腺癌、前列腺癌及肺癌患者。
肿瘤分子生物学基础
实验医学研究中心：刘启才
概
述
从分子水平上讲，肿瘤是一类遗传性疾病。
由于肿瘤都发现有特定基因的改变;
正是这些基因的改变，导致癌细胞增殖的失控， 而且能够侵袭周围正常的组织，有的转移到远 处的组织和器官。
Fig.1. The invasion of normal tissue by a growing tumor
inherited syndrome
Familial adenomatous polyposis Familial breast cancer HNPCC * Familial gastric cancer Neurofibromatosis Type1 Neurofibromatosis Type2 Familial melanoma Li-Fraumeni syndrome Cowden disease Retinoblastoma
histone )
激活这些基因的转录因子是E2F家族成员， 这些家族 成员是pRb蛋白的靶分子。
pRb 调节细胞周期进展功能的证据
1.在细胞的G1期，注射过量的非磷酸化pRb 蛋白就会阻断细胞进入到S的进程。
2.一些DNA肿瘤病毒(ADV,HPV， SV40) 编 码的蛋白能够与pRb 蛋白结合,并阻断 pRb 与E2F 结合的能力。
化学致癌物：
HMGB1在浸润性喉鳞状细胞癌发生和发展中的作用及临床意义
J Clin Pathol Res2024, 44(1) 临床与病理杂志HMGB1在浸润性喉鳞状细胞癌发生和发展中的作用及临床意义苏才丽1，滕孝静1，王苗1，岳冰1，陈光勇1，刘红刚2(1. 首都医科大学附属北京友谊医院病理科，北京 100050；2. 首都医科大学附属北京同仁医院病理科/头颈部分子病理诊断北京市重点实验室，北京 100730)[摘要] 目的：浸润性喉鳞状细胞癌(invasive laryngeal squamous cell carcinoma ，I-LSCC)早期诊断、早期干预治疗是降低其发病率和病死率的关键。
本研究旨在探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1，HMGB1)在 I-LSCC 发生和发展中的作用及临床意义。
方法：收集2009年11月至2011年6月北京同仁医院病理科的石蜡包埋标本281例，包括I-LSCC 123例、喉黏膜异型增生(laryngeal precursor lesions ，LPLs)103例(其中低级别异型增生31例、高级别异型增生49例、原位癌23例)及声带息肉(vocal polyp ，VP)55例。
应用免疫组织化学染色检测标本中HMGB1及Ki-67的表达，其中HMGB1阳性强度和阳性率得分相加总分为0~7(0~4分为低表达，5~7分为高表达)；Ki-67阳性率≥50%为高表达，<50%为低表达。
结果：HMGB1在I-LSCC 中的表达(4.35±1.33)高于在LPLs(3.12±0.95)及VP(2.11±0.71)中(均P <0.001)。
HMGB1表达在喉黏膜低级别异型增生、高级别异型增生及原位癌之间无明显差异(P >0.05)。
36.59%的I-LSCC 同时具有HMGB1高表达及Ki-67高表达，且HMGB1高表达组和低表达组的Ki-67阳性率差异有统计学意义(P =0.01)；33.33%的I-LSCC 同时具有HMGB1高表达及淋巴结转移，且HMGB1高表达组和低表达组的淋巴结转移率差异有统计学意义(P <0.001)；47.15%的I-LSCC 同时具有HMGB1高表达及高临床分期(III 期及IV 期)，且HMGB1高表达组和低表达组的临床分期差异有统计学意义(P <0.001)。
各类鼻咽癌细胞株特性及来源
各类鼻咽癌细胞株特性及来源People need independence to be free. October 2, 2022各类鼻咽癌细胞株特性及来源CNE1为鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系;CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系;5一8F为鼻咽低分化鳞状细胞癌,细胞系SUNE一1亚株,具有高转移、高成瘤能力;6- 10B为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系SUNE-1亚株,具有高成瘤潜能,不转移特性;C666-1为长期携带EB病毒基因的低分化鼻咽癌细胞株;HK-1为携带EB病毒基因的高分化鼻咽癌细胞株.NP69为永生化鼻咽上皮细胞系,于1XKsFMkeratinoeyte serum-free medium,KSFM培养基、饱和湿度条件下培养,呈现鳞状上皮样、贴壁生长,具有正常鼻咽上皮的中,37℃、5%CO2特性;CNE11癌组织来源病人王某某,女, 58 岁,, 籍贯吉林省,,中国医学科学院日坛医院住院号：年8月13日患者因头痛耳鸣、鼻衄等症状来院就诊;临床检查鼻咽部有菜花样肿物, 肿瘤已侵犯颅底和颅神经Ⅲ, Ⅳ , ⅨⅫ , 双颈淋巴结转移, 诊断为鼻咽癌;X 光诊断为鼻咽后壁软组织肿物符合鼻咽癌, 颅底象见左侧翼状突外板可疑骨质破坏,鼻咽部肿物作活检, 病理诊断为高分化鳞癌;培养过程在第12代时培养后的6个月,在上皮样细胞培养中发现有少量梭形细胞;在有的培养瓶中, 梭形细胞逐渐增加;在接种少量细胞的培养瓶中,有的全为上皮样细胞, 有的全为梭形细胞;选择全为上皮样的细胞传代, 称CNE细胞株；全为梭形的细胞传代, 称CNF细胞株;CNE细胞株容易形成空泡,不传代的老细胞, 在显微镜下可见到有些细胞的胞浆突出,然后脱落成死细胞, 还有多核巨细胞;在这二株细胞,特别是CNF细胞的单层或多层细胞上有很多圆形细胞, 核大,浆少;在培养液中也有大量圆的脱落细胞;将培养液中的悬浮细胞接种于培养瓶,细胞仍能贴瓶, 生长出原来的上皮样细胞或梭形细胞;将CNE , CNF细胞和这二株细胞的脱落细胞培养成单层后, 不传代, 每周换液二次, 继续培养7 个月,未能得到类淋巴母细胞株,在培养过程中未见到肿瘤组织培养中常见到的成纤维细胞生长;特性CNE-22组织来源和培养方法组织取自鼻咽癌Ⅳ期患者, 林XX,63岁, 男性, 广东籍, 活检组织病理检查为慢性鼻咽炎,但同时负压吸引的鼻咽脱落细胞为低分化鳞状细胞癌图1.病人血清的E B 病毒抗体和鼻咽脱落细胞的EBNA检测,病人血清的各种抗EB病毒抗体的滴度分别为: VCA/IgG 1: 320 , EA IgG 1: 160, VCA/IgA 1: 40, EA/IgA<1 : 5 , 抗EBNA抗体为1:160;鼻咽脱落细胞中发现成团的癌细胞呈EBNA阳性细胞株的EB病毒抗原用抗补体免疫荧光试验检查CNE- 2细胞中各种EB病毒抗原;体外培养第3代细胞可见EB NA阳性, 胞核呈颗粒状明亮的荧光,细胞传至第11代后进行多次检查, EBNA均呈阴性;经IudR 或巴豆油、丁酸激活的细胞, 检查EA 、VCA 也呈阴性;将细胞与类淋巴母细胞株HK-1共同培养, 观察EB 病毒对上皮细胞的再感染,6天后上皮细胞的EBNA 仍呈阴性;HNE1、HNE2,HNE3和HONE13组织细胞培养及建株肿瘤组织取自4倒男性鼻咽癌初诊患者,分别命名为HNE1、HNE2,HNE3和HONE1,其中HNE1和HONE1为EBV 阳性,HNE2和HNE3为EBV 阴性;病理诊断均为低分化鳞癌;EBV 抗原及EBV 基因组分析EBNA 检测结果发现．HNE 1和HONE 1细胞30代以前均为EBNA 阳性,HNE 2和HNE 3则为阴性;晚代HNE1和HONE1细胞的EBNA 也逐渐转为阴性,而从HONE1第5代细胞中克隆出来的CL40亚株的EBNA 则非常稳定,传至52代其EBNA 阳性率仍高达85—90%,VCA 结果示HNE1、HNE2、HNE3,均为EA ／VCA 朗性．HONE 细胞中只有%为阳性;1 人体鼻咽癌上皮样细胞株和梭形细胞株的建立[J]. 中国科学,1978,01:113-118+121-124.2 谷淑燕,赵文平,曾毅,唐慰平,赵明伦,邓惠华,李昆. 从低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮细胞株[J]. 癌症,1983,02:70-72+129-130.3 祝和成,姚开泰,李桂源等,4株鼻咽癌上皮细胞株建立及其生物学特性.湖南医科大学学报.1992,06,17(2),103-107.。
液基细胞学检查在肿瘤细胞学诊断中的应用
ｄ ｉ ａ ｏｄｎｒ ｓ ｅｒ ｔｏ ａ ３６ ， ｅ ａ ｉ ｉｃ ｔ ｆ ｒｎｅ ｅ ｅｎｔｅｗ ｅ ｏ ｓＰ； ．０ ） Ｔ ｅｆｓ —ｎｇｔｅｒｔ ｉｏ ｌ ｒｉａｙ ｍ ａ ｈｄｗ ｓ ． ％ ｔ ｒ Ｗ ｓ ｎｆａ ｅｅｃ ｔ ｅ ｏｍ ｔ ｄ （ ０ ００ ， ｈ ｌ ｔｎ ｍｅ ４ ｈｅ ｓ ｇ ｉ ｄ ｎ ｉ ｂｗ ｈ ｔ ｈ ａ ｅ ｅａｖ ｅ ｉ ａ
吉林 医 学 ２ １ ００年 １ 第 ３ 卷 第 ３ ２月 １ ４期
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６９ １ห้องสมุดไป่ตู้１・
我们 也深入分 析了 Ｓ ｒｉｎ蛋 白表达与鼻 咽癌患者 ５年 ｕｖ ｉ ｖ
４ 参考文献
总生存率 之间的关 系。Ｓｒｖ ｕ ｉｎ蛋 白阴性表达 比阳性表 达有 ｖｉ
较高的 ５年生存率 ， 分别为 ６ ． ％和 ６ ． ％ ， ８２ ２ ３ 但差异无统计学 意义。这些结果提示 Ｓｒｉ ｎ蛋 白表达在 鼻咽癌 的发展过 程 ｕｖ ｉ ｖ
ｃｔｅ ｔ ｈ ｈ ｓ —ａ ｄ ｍｅ ａ ｉ ｆ１ ２ｐ ｔ ｎｓｗｉ ｆ ｓｏ ａ ａｙｅ ｎ ｏ ａｅ ｅｐ ｓｔ ｅｒｔ ｆｔ ｄｔ ｎ ｌｏｄｎ ｒ ｍｅｔ ａｈ ｒｉ ｏｔｅｃ ｅｔ ｂ ｏ ｎｃ ｖｔ ｏ ４ ａｉ ｔ ｔ ｅ ｕ ｉｎ，ｎ ｌｚ ａ ｄ ｃ ｍｐ ｒｄ ｔ ｏｉｖ ａｅｏ ａ ｉｏ ａ ｒｉａｙ ８ ａ ｎ ｙ ｅ ｈ ｄ ｈ ｉ ｒ ｉ
综上研究 ，ｕ ｉｎ蛋 白在 鼻咽 癌组 织 中的有 较高 的表 Ｓｒｖ ｖｉ 达， 其表达强度对与鼻咽癌患者临床特 征无 显著相关性 ， 对生
［ ］ 何跃平 ， ３ 郑家法 ， 荣 ， ．ｕ ｉｎ在鼻 咽癌 中的表 申海 等 Ｓｒｖ ｖｉ 达及 意义 ［ ］ 南华 大学 学报 ・ Ｊ． 医学 版 ，０５ ３ （ ） ３７— ２０ ，３ ３ ：５
负向调控miR-9抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭
负向调控miR-9抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭郑朝攀;韩灵;侯伟坚;文译辉;傅然;卫平【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2014(000)004【摘要】目的：探讨负向调控miR-9对人鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭作用。
方法：用脂质体Lipofectami-neTM 2000转染合成抑制剂的方法抑制鼻咽癌细胞miR-9表达，转染抑制对照剂作为对照组。
CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期变化；Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力；免疫印迹实验检测蛋白变化。
结果：抑制鼻咽癌细胞miR-9表达后，肿瘤增殖能力降低（P＜0.05），G0/G1期细胞增多[CNE2：（57.96±1.39）％vs（47.93±1.76）％，P＜0.05；CNE1：（51.24±0.88）％vs（48.29±0.39）％，P＜0.05]，迁移距离明显缩短[CNE2：（186.50±7.94）μm vs （247.56±15.56）μm，P＜0.05；CNE1：（139.06±16.73）μm vs（230.66±14.27）μm， P＜0.01]，CNE2细胞中侵袭细胞数明显减少（43.00±3.17 vs 65.80±5.20，P＜0.01），β-连环蛋白（β-catenin）表达被抑制。
结论：在鼻咽癌细胞中，负向调控miR-9可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移。
【总页数】5页(P640-644)【作者】郑朝攀;韩灵;侯伟坚;文译辉;傅然;卫平【作者单位】中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080;中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080;中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080;中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080;中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080;中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.miR-193b通过负向调控MCT7基因的表达抑制人胶质瘤U251细胞的迁移与侵袭 [J], 谭国伟;高鑫;李张昱;郭剑峰;陈四方;朱宏伟;王占祥2.miR-9调控GOLPH3抑制食管癌EC109细胞的增殖和迁移 [J], 聂正超; 施岚; 邱广阔3.miR-409-3p靶向调控RRM2抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭 [J], 谢辰;姚梦纤;曹忠胜;田野4.MiR-671-5p通过负向调控SMAD抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭 [J], 胡雅琼;梁答;陈新璐;陈琳;白俊;李洪利;尹崇高;钟伟5.lncRNA PROX1-AS1负调控miR-206对鼻咽癌细胞SUNE1增殖、迁移侵袭的影响 [J], 袁小卫;王彦君;熊健;何学祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鼻咽癌细胞凋亡研究进展
鼻咽癌细胞凋亡研究进展
李杰恩;陈显新
【期刊名称】《中国医学文摘：肿瘤学》
【年(卷),期】2000(014)003
【总页数】2页(P256-257)
【作者】李杰恩;陈显新
【作者单位】广西医科大学第一附院，南宁530021;广西医科大学第一附院，南宁530021
【正文语种】中文
【中图分类】R739.63
【相关文献】
1.中药诱导鼻咽癌细胞凋亡的研究进展 [J], 刘成军（综述）
2.氯通道在鼻咽癌细胞凋亡性细胞容积减小和细胞凋亡中的作用 [J], 潘廷才;杨林杰;刘善文;李华荣;朱林燕;叶文才;王立伟;陈丽新
3.α-茄碱通过ROS/线粒体途径促进鼻咽癌细胞凋亡的分子机制 [J], 吴贤敏;张杰;杨子飞;叶凡;张悦;陈晓云
4.安多霖胶囊对老年鼻咽癌放疗病人炎症因子及外周血单核细胞凋亡的影响 [J], 夏宏娟;袁芳;美丽姑;邹蕴
5.ARA55过表达激活内源性线粒体凋亡通路诱导CNE2鼻咽癌细胞凋亡 [J], 崔兆磊;辛小琴;陈燕
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人NP9基因蛋白重组腺病毒的制备
人NP9基因蛋白重组腺病毒的制备刘启才;李晓艳;彭燕;李冰【期刊名称】《广州医学院学报》【年(卷),期】2005(33)2【摘要】目的:制备表达人NP9蛋白的复制缺陷型重组腺病毒.方法:酶切pMD18T-NP9质粒获得NP9基因编码区序列并克隆至穿梭载体构建重组pAdTrack-CMV-NP9载体,线性化后与pAdEasy-1共转化BJ5183,通过同源重组得到重组的pAD-NP9病毒载体.将重组腺病毒载体转染HEK293包装细胞制备重组腺病毒.结果:酶切鉴定得到阳性pAD-NP9重组腺病毒载体,该载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装,转染3d后可以观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达并逐渐增多、增强.结论:成功构建了NP9基因的重组腺病毒载体并制备重组腺病毒颗粒,为进一步研究NP9基因的功能及应用NP9进行基因治疗奠定基础.【总页数】3页(P13-15)【作者】刘启才;李晓艳;彭燕;李冰【作者单位】广州医学院实验医学研究中心,广东,广州,510182;中山大学附属第一医院肾脏病研究所,广东,广州,510060;广州医学院实验医学研究中心,广东,广州,510182;广州医学院实验医学研究中心,广东,广州,510182【正文语种】中文【中图分类】Q782【相关文献】1.细菌内同源重组高效制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒载体 [J], 罗燕;唐仕波;李湘;刘双信2.携带凋亡素VP3基因重组腺病毒的制备及其在人结肠癌SW480细胞中的表达[J], 邓守恒;胡茵;曹风军;蔡晓军;李林均;陈萍3.细菌内同源重组高效制备人突变p27基因重组腺病毒 [J], 陈珺;徐少勇;邓长生;王家宁;黄永章4.细菌内同源重组法制备FMDV聚蛋白编码基因重组腺病毒 [J], 张兴旺;王勤;柳纪省;殷相平;李志勇5.细菌内同源重组法高效制备携带增强型绿色荧光蛋白与人内皮型一氧化氮合酶cDNA的重组腺病毒载体 [J], 谭艳;王家宁;郭凌郧;孔霞;唐俊明;张少峰;黄永章;罗超因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Survivin基因沉默鼻咽癌G666-1细胞的生物学特性
Survivin基因沉默鼻咽癌G666-1细胞的生物学特性王慧【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(000)028【摘要】背景：Survivin 基因是迄今发现的最强效的凋亡抑制因子，能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移能力，成为近年有关肿瘤研究的热点之一。
<br> 目的：探讨Survivin基因沉默对鼻咽癌G666-1细胞生物学特性的影响。
<br> 方法：设计及合成Survivin的siRNA序列，LipofectamineTM 2000转染G666-1细胞，利用RT-PCR、Western blot检测Survivin基因沉默后的G666-1细胞Survivin mRNA及蛋白的表达，流式细胞仪检测G666-1细胞中肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达变化。
另外还采用CCK-8增殖实验、划痕愈合实验、细胞侵袭实验评价Survivin基因沉默对鼻咽癌G666-1细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。
<br> 结果与结论：与对照组、空白组比较，实验组Survivin 基因沉默后的鼻咽癌G666-1细胞Survivin mRNA及蛋白表达显著降低，差异有显著性意义(P<0.05)；与对照组、空白组比较，实验组Survivin 基因沉默后的鼻咽癌G666-1细胞的生长速度明显减慢，增殖能力受到抑制，迁移能力和侵袭能力显著下降，差异有显著性意义(P <0.05)；肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达比例显著降低(P <0.05)。
结果表明特异性干扰Survivin基因表达可抑制鼻咽癌G666-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力，使具有CD44+CD133+肿瘤干细胞特性的细胞比例降低，因此，Survivin基因沉默可能成为有效治疗鼻咽癌的新靶点。
%BACKGROUND:Survivin gene is the most potent anti-apoptosis factor, which can inhibit tumor cel proliferation and migration. It hasbecome a hot topic related to cancer research in recent years. <br> OBJECTIVE:To explore the effect of Survivin gene silencing on the biological characteristics of G666-1 nasopharyngeal carcinoma cel s. <br> METHODS:siRNA sequence of Survivin was designed and synthesized and then transfected into G666-1 cel s using LipofectamineTM 2000. After Survivin gene silencing, Survivin mRNA and protein expressions were detected by RT-PCR and western blot assay, respectively. Expression of CD44+CD133+cel s was detected by flow cytometry. In addition, the effects of Survivin gene silencing on the proliferation, migration and invasion of G666-1 cel s were evaluated through cel counting kit-8 test, scratch healing assay and cel invasion assay. <br> RESULTS AND CONCLUSION:After Survivin gene silencing, the expressions of Survivin mRNA and protein were significantly reduced (P<0.05);the growth ofG666-1 cel s was slowed dramatical y, indicating the proliferation ability was inhibited, and the migration and invasion abilities were both decreased significantly (P<0.05);the expression ratio of CD44+CD133+cel s was significantly lowered (P<0.05). These findings indicate that the proliferation, migration and invasion of G666-1 nasopharyngeal cancer stem cel s can be suppressed after Survivin gene silencing, and the proportion of CD44+CD133+cel s is reduced, thus indicating Survivin gene silencing may be a new effective target for treatment of nasopharyngeal carcinoma.【总页数】6页(P4508-4513)【作者】王慧【作者单位】天津市天津医院耳鼻咽喉科，天津市 300210【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.靶向沉默HIF-1α和Survivin基因对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响 [J], 向少龙;刘娟娟;赵艳;赵厚育;2.沉默Survivin基因对鼻咽癌CNE1细胞增殖和凋亡的研究 [J], 王玉明;马小兰3.慢病毒表达系统介导的RNAi技术靶向沉默Bi-1基因对鼻咽癌细胞生物学特性的影响 [J], 皮文;于长华;刘志标4.Survivin基因沉默对鼻咽癌CNE-2细胞株恶性表型的影响 [J], 张帅;肖健云;谢常宁;刘勇;王承龙;田勇泉5.Survivin基因沉默鼻咽癌G666-1细胞的生物学特性 [J], 王慧;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜观察
人鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜观察霍霞;林哲睿;孙烁磊;黄文献;邱坤良;许险峰;徐锡金【期刊名称】《激光生物学报》【年(卷),期】2003(012)001【摘要】为探讨高分化和低分化鼻咽癌细胞纤维肌动蛋白 (F-actin) 的空间结构,采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽(FITC-phalloidin)标记F-actin、碘化吡啶 (PI) 标记核酸的荧光探针双重标记技术,对鼻咽癌细胞F-actin进行光学切片、三维重组及形态学观察.实验结果可见高分化鼻咽癌细胞F-actin呈芒刺状分布于细胞表面,而在细胞突起末端细胞间连接处呈束状、放射状密集分布;低分化鼻咽癌细胞F-actin明显少于高分化鼻咽癌细胞,仅沿细胞膜表面呈弯曲细小绒毛状分布.结果表明F-actin在细胞内的空间分布与鼻咽癌的分化类型有关,肿瘤或恶性转化细胞的F-actin在形态和结构方面有异常改变;共聚焦激光扫描显微镜光学切片结合荧光双重标记技术是研究细胞骨架结构的理想方法.【总页数】6页(P43-48)【作者】霍霞;林哲睿;孙烁磊;黄文献;邱坤良;许险峰;徐锡金【作者单位】汕头大学医学院,中心实验室,中国广东,汕头,515031;汕头大学医学院,2000实验二班科研小组,中国广东,汕头,515031;汕头大学医学院,2000实验二班科研小组,中国广东,汕头,515031;汕头大学医学院,2000实验二班科研小组,中国广东,汕头,515031;汕头大学医学院,2000实验二班科研小组,中国广东,汕头,515031;汕头大学医学院,中心实验室,中国广东,汕头,515031;汕头大学医学院,中心实验室,中国广东,汕头,515031【正文语种】中文【中图分类】R739.63;R318.51【相关文献】1.激光原子力显微镜观察肌动蛋白体外自组织纤维结构多态性的初步研究 [J], 张军;王远亮;CHEN Xin-yong;何创龙;程超2.人膀胱癌细胞纤维肌动蛋白共聚焦激光扫描显微镜观察 [J], 许险峰;霍霞;杨海伟;陈耀文;林珏龙3.从结缔组织生长因子、α-平滑肌肌动蛋白表达观察益肾解毒汤对肾组织纤维化的影响 [J], 费秀丽;刘琨;于昊新;何立群4.肝癌细胞纤维肌动蛋白的共聚焦激光扫描显微镜光学切片观察 [J], 霍霞;徐锡金;陈耀文;林珏龙;许险峰5.不同张应力对体外培养的人牙周膜成纤维细胞形态和纤维型肌动蛋白改变的影响[J], 彭庭莉;杨军;周继祥;杨彦春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人鼻咽癌不同部位组织相关基因表达谱的研究
人鼻咽癌不同部位组织相关基因表达谱的研究韩慧霞;姚连生;王爽;韩为农;姚开泰【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2004(024)010【摘要】目的筛选鼻咽癌癌变发生过程中的重要基因.方法应用显微切割和荧光标记探针基因芯片杂交技术,检测鼻咽癌、癌周组织、癌旁组织及鼻咽炎症组织的基因差异表达,扫描仪扫描荧光芯片,图象处理软件分析结果.结果在检测的3组标本中,存在大量差异表达基因,涉及基因包括信号与蛋白传递、癌基因与原癌基因、免疫相关基因、凋亡基因,以及DNA结合转录和转录因子等范围.结论鼻咽癌癌变过程中有多个多种类基因参与,说明鼻咽癌癌变过程是一个复杂、多通路的过程.【总页数】4页(P1126-1129)【作者】韩慧霞;姚连生;王爽;韩为农;姚开泰【作者单位】南方医科大学病理教研室,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科,广东,广州,510515;南方医科大学病理教研室,广东,广州,510515;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078;南方医科大学病理教研室,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R392.3;R739.6【相关文献】1.鼻咽癌组织基因表达谱的研究 [J], 许亮国;谢鹭;王磊;何志巍;杨玉文;姚开泰2.螺旋藻复方有效部位配方对慢性运动性疲劳大鼠脑组织基因表达谱的影响 [J], 朱梅菊;谢振良3.人大肠癌癌旁不同部位组织生长活性与组织微环境相关细胞组分差异分析 [J], 刘红;文彬;吴丽云;刘金元4.基因表达谱芯片筛选鼻咽癌相关基因 [J], 陈甲信;郭懿;张政;司勇锋;冯国生;陈可和;韦海明;程金健;邓卓霞;李瑶5.顺铂诱导人鼻咽癌CNE2细胞衰老及其相关基因表达谱的研究 [J], 杨飞城;黄岚珍;阳晶;黄希仕;蒋晓山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鼻咽癌组织中EB病毒感染与P^（53）基因蛋白表达的关系
鼻咽癌组织中EB病毒感染与P^（53）基因蛋白表达的关系李西启;邹积才;孙国德;计磊;董家宝;刘厚才;高玲;姜元庆
【期刊名称】《实用医药杂志》
【年(卷),期】1996(0)4
【摘要】应用原位杂交和免疫组化技术，对４１例鼻咽癌和２４例癌旁组织进行检测。
结果４１例鼻咽癌中３７例ＥＢ病毒潜在膜蛋白阳性，２４例癌旁组织中有２１例ＥＢ病毒潜在膜蛋白阳性，有２２例ＥＢ病毒潜在膜蛋白阳性的鼻咽癌Ｐ５３基因蛋白均过度表达，而癌旁组织中未见Ｐ５３基因蛋白表达。
结果提示，在鼻咽癌的发生发展过程中ＥＢ病毒感染在先，Ｐ５３基因突变在后，二者有协同致癌作用。
【总页数】2页(P228-229)
【关键词】鼻咽癌;EB病毒;P￣(53)基因蛋白;原位杂交;免疫组化
【作者】李西启;邹积才;孙国德;计磊;董家宝;刘厚才;高玲;姜元庆
【作者单位】山东莱阳145医院,莱阳卫校
【正文语种】中文
【中图分类】R737.63
【相关文献】
1.鼻咽癌组织中EB病毒感染与癌基因表达的关系 [J], 林满华;姚运红
2.鼻咽癌组织中热休克蛋白70表达与EB病毒感染的关系 [J], 张玲;孙妍琳;李西启
3.鼻咽癌中EB病毒感染与癌基因、抑癌基因表达的关系研究 [J], 陈莉;王桂兰;鄂群;曹晓蕾
4.胃癌组织mdm2、p53及p21蛋白表达与EB病毒感染的关系 [J], 孙迎娟;李慧;罗兵;王云;孙坚萍;黄葆华
5.鼻咽癌p53蛋白与生物学行为及p53基因突变和EB病毒感染的相关研究 [J], 赵晓明;熊国军;窦晓晖;李小敏;郭杰峰;熊彬彬
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鼻咽癌实验报告
一、实验目的1. 了解鼻咽癌的病理学特征。
2. 掌握鼻咽癌细胞培养和检测方法。
3. 分析鼻咽癌细胞的生物学特性，为临床诊断和治疗提供依据。
二、实验材料1. 实验动物：Balb/c小鼠。
2. 鼻咽癌细胞系：HNE1细胞。
3. 培养基：DMEM培养基。
4. 细胞培养试剂：胎牛血清、青霉素、链霉素、胰蛋白酶。
5. 实验仪器：倒置显微镜、细胞培养箱、离心机、酶标仪等。
三、实验方法1. 鼻咽癌细胞培养（1）将HNE1细胞复苏后，接种于培养瓶中，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
（2）待细胞生长至80%左右，用胰蛋白酶消化，制成细胞悬液，接种于新的培养瓶中。
（3）重复上述步骤，直至获得足够数量的细胞。
2. 细胞形态观察（1）将细胞接种于盖玻片上，置于培养箱中培养。
（2）待细胞生长至一定时期，用倒置显微镜观察细胞形态。
3. 细胞增殖实验（1）将细胞接种于96孔板中，每孔加入100μl细胞悬液。
（2）置于培养箱中培养，每隔24小时更换新鲜培养基。
（3）用酶标仪检测细胞吸光度（OD值），计算细胞增殖情况。
4. 细胞凋亡检测（1）将细胞接种于6孔板中，加入药物处理或未处理细胞。
（2）收集细胞，加入Annexin V-FITC和PI染色，流式细胞术检测细胞凋亡率。
5. 细胞迁移实验（1）将细胞接种于Transwell小室上室，下室加入含有细胞因子的培养基。
（2）置于培养箱中培养，收集迁移至下室的细胞。
（3）用细胞计数试剂盒检测细胞数量。
四、实验结果1. 鼻咽癌细胞形态：细胞呈多边形，大小不一，核质比高，可见核仁。
2. 细胞增殖：细胞呈指数增长，OD值随时间逐渐升高。
3. 细胞凋亡：药物处理组细胞凋亡率显著高于未处理组。
4. 细胞迁移：细胞迁移数量显著增加。
五、讨论本实验成功培养了鼻咽癌细胞，并对其形态、增殖、凋亡和迁移等生物学特性进行了观察。
结果表明，鼻咽癌细胞具有明显的恶性特征，如核质比高、细胞增殖能力强、凋亡率低、迁移能力强等。
用原代细胞培养和人全基因表达谱芯片筛选鼻咽癌差异表达基因
用原代细胞培养和人全基因表达谱芯片筛选鼻咽癌差异表达基因李瑞平;邵建永;邓玲;曾木圣;宋立兵;李满枝;吴秋良【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2007(027)008【摘要】目的利用细胞的原代培养技术及人全基因表达谱芯片技术初步筛选出鼻咽癌差异表达基因,以发现与鼻咽癌发生、发展相关的新的候选基因.方法分别用1例鼻咽癌细胞株C666及5例鼻咽癌培养出的原代细胞和3例鼻咽正常上皮的原代细胞,进行基因表达谱分析,并以荧光定量PCR及免疫组织化学验证芯片结果.结果原代培养的鼻咽癌细胞和鼻咽正常上皮细胞通过细胞角蛋白的免疫细胞化学染色、EBER1原位杂交和EBV-DNA荧光定量PCR证实;鼻咽癌原代细胞和鼻咽正常上皮原代细胞的基因表达谱有显著差异;4例以上共同表达的差异基因有493个,包括上调基因264个,下调基因229个.荧光定量PCR及免疫组织化学结果和芯片结果一致.结论用原代培养细胞及人类全基因组基因芯片构建基因表达谱能够准确、高效地筛选出鼻咽癌相关的差异表达基因,该基因表达谱的建立为研究鼻咽癌分子生物学机制、鼻咽癌的分子分型和分子诊断提供了重要的分子依据.【总页数】5页(P1156-1160)【作者】李瑞平;邵建永;邓玲;曾木圣;宋立兵;李满枝;吴秋良【作者单位】华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心病理科,广东,广州,510060;华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心病理科,广东,广州,510060;华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心病理科,广东,广州,510060;华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心实验研究部,广东,广州,510060;华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心实验研究部,广东,广州,510060;华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心实验研究部,广东,广州,510060;华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学肿瘤防治中心病理科,广东,广州,510060【正文语种】中文【中图分类】R739.6【相关文献】1.基因表达谱芯片筛选宫颈癌放疗抵抗差异表达基因 [J], 王凤玫;傅志超;程惠华2.应用基因表达谱芯片技术筛选乙型肝炎病毒HBsAg基因转染细胞差异表达基因[J], 纪冬;成军;董菁;刘妍;王建军;郭江3.应用基因表达谱芯片技术筛选XTP6基因转染细胞差异表达基因 [J], 纪冬;成军;郭江;杨瑗;董菁;王建军;刘妍4.基因表达谱芯片技术筛选XTP1基因转染细胞差异表达基因 [J], 刘妍;成军;王春花;王建军;杨倩;纪冬5.基因表达谱芯片技术筛选XTP4基因转染细胞差异表达基因 [J], 刘妍;成军;王春花;杨倩;王建军;纪冬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
DNA高甲基化介导FOXO1转录表达下调促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力
DNA高甲基化介导FOXO1转录表达下调促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力于鹏;金金欣;冀火金;黄兰川;刘进;蔡永林【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2024(41)3【摘要】目的:探索叉头盒O1(FOXO1)在鼻咽癌(NPC)中异常表达的分子机制,及其对NPC细胞恶性生物学行为的影响。
方法:采用GEO数据集分析NPC中FOXO1表达水平,采用R4.2.1软件进行基因集富集分析。
构建FOXO1过表达的NPC细胞系5-8F、HONE1(FOXO1-5-8F、Ctrl-5-8F、FOXO1-HONE1、Ctrl-HONE1)。
分别通过CCK-8法、划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,流式细胞术分析细胞周期。
通过重亚硫酸氢盐基因测序技术进行DNA甲基化测序。
结果:FOXO1 mRNA在NPC细胞和组织中表达下调。
FOXO1过表达组的细胞增殖能力和细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05),相同时间内,空白对照组的细胞侵袭数量高于FOXO1过表达组(P<0.05),FOXO1过表达抑制细胞周期(P<0.05)。
在NPC组织中,FOXO1 DNA启动子区域存在甲基化位点,其甲基化水平明显高于非癌组织(P<0.05)。
结论:NPC中FOXO1基因DNA高甲基化导致其转录下调,由此促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。
FOXO1可能是NPC的肿瘤抑制基因。
【总页数】9页(P364-372)【作者】于鹏;金金欣;冀火金;黄兰川;刘进;蔡永林【作者单位】桂林医学院临床医学院;梧州市红十字会医院医学检验科;右江民族医学院公共卫生与管理学院;广西卫生健康委员会鼻咽癌分子流行病学重点实验室〔梧州市红十字会医院〕【正文语种】中文【中图分类】R739.6【相关文献】1.SATB1高表达通过促进上皮-间充质转化而介导鼻咽癌细胞侵袭和转移2.miR-27a下调肾癌细胞FOXO1表达并促进其细胞增殖3.慢病毒介导shRNA靶向下调Cx26表达对人高侵袭性肝癌细胞上皮间质转化及侵袭的影响4.下调HOX转录反义RNA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、周期及侵袭能力的影响5.miR-493-5p下调METTL3表达影响鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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基金项目:“十五”国家重大科技专项课题(2002BA711A03);广东省科技计划重点项目(A1080202)作者单位:510182广州医学院实验医学研究中心(刘启才);中山大学附属第一医院肾内科(李晓艳);广州市第十二人民医院病理科(韦拔雄);中山大学肿瘤防治中心(曾益新)通讯作者:曾益新,E-m ail:yxz eng@gzs um 基础研究NP9基因抑制鼻咽癌细胞成瘤的实验研究刘启才 李晓艳 韦拔雄 曾益新【摘要】 目的 确定N P9基因的表达对鼻咽癌细胞裸鼠成瘤的影响,并探讨其机制。
方法 构建N P9基因的真核表达载体,转染重组p R c/C MV2-NP9质粒于鼻咽癌细胞系CNE1和S UNE1,筛选并获得稳定表达NP9基因的细胞克隆CEN1/NP9和SUNE1/N P9。
以裸鼠致瘤实验确定NP9基因对鼻咽癌细胞成瘤特性的影响;通过免疫组化检测移植瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期素D1 (cy cli n D1)的表达。
结果 大部分转基因的G418抗性克隆能够检测到NP9基因的表达。
CNE1/ N P9细胞接种裸鼠后的成瘤率为43.8%,明显低于CNE1细胞(66.7%)和CNE1/空载体组(75.0%, P均<0.05)。
SUN E1/NP9细胞接种裸鼠后移植瘤的生长速度减慢,第30天时肿瘤体积为(3.88±0.81)c m3,与S UNE1细胞和SUN E1/空载体组差异均有统计学意义(P均<0.05)。
CNE1/NP9细胞的移植瘤显示出相对较低的PCNA和cyc lin D1表达水平。
结论 NP9基因通过下调PCNA和cyc li n D1的表达,抑制鼻咽癌细胞的裸鼠成瘤或移植瘤的生长。
【主题词】 NP9基因; 鼻咽肿瘤; 致瘤性; 增殖细胞核抗原; 细胞周期素D1NP9gene i nh i b its tumor i gen icity of nasopharyn geal carci n o m a L I U Qi-ca i*,L I X i ao-yan,WEI Ba-xiong,ZENG Y i-xin.*Experi m ent Med ical R esearch Cen ter,Guangzhou M edical College,Guangz hou 510182,Ch i naCorres ponding author:ZENG Y i-xi n,E-ma il:y xzeng@gzsu m 【Ab stract】 O b jec ti ve T o st udy the e ffec t of NP9on t he gro w t h o f trans p lanted nasopharyngeal ca rc i no m a(NPC)i n nude m ice and explore the m echanis m s i nvo lved.M ethod s R eco m bi nant pR c/ C MV2-NP9p l as m id w as construc ted and transfec t ed into t he NPC ce ll lines by lipo fecta m i ne2000.Ce ll clones st ably expressing N P9w ere obtained by detec ti ng t he mRNA expressi on of N P9in G418-resist ant clones w it h RT-PCR.The tu m origenicit y and size of transplan t ed t umo rs w ere assessed a fter inocula tion of N PC ce lls and the ir transgene c l ones into Ba l b/C m ice.The expre ssi on o f PCNA and cyc lin D1i n transp l anted t u m o rs wa s de t ec t ed by i m munohistoche m istry.R esu lts The expression of NP9was detected i n so m e o fN P9gene-transf e cted G418-resisitant c l ones of CNE1and SUN E1.In v i vo experi m ents showed t hat the t umo ri g enic ity o f CNE19clone w as decreased si gnifican tly compared to t ha t of CNE1and its vec t o r contro l,and t he transplan t ed tu m ors gre w m o re slo w l y from SUNE1/NP9t han from SUN E1and SUNE1/ vec t o pared w it h t he vector con tro l,t he expression of cyc li n D1and PCNA i n CN E1/N P9transplants w as decreased.Conc l u si on NP9inh i bits tu m origenicit y and g row th of NPC transplan t ed t umo r by down-regula ti ng t he expression o f cyc li n D1and PCNA.【Sub jec t w ord s】 N P9gene; N asopharyngeal carcino m a; T u mo ri genicit y; PCNA; Cyc lin D1 NP9基因为新克隆的鼻咽癌表达下调基因[1],通过抑制转录因子NF-κB的转录活性下调细胞周期素D1(cyclin D1)的表达,对鼻咽癌细胞周期的进展有抑制作用[2]。
为明确NP9基因在鼻咽癌发生中的作用,我们克隆了该基因的编码区序列,并建立了稳定表达NP9基因的鼻咽癌细胞系CNE1和SUNE1的细胞克隆,拟通过鼻咽癌细胞及其转基因克隆接种裸鼠,来观察NP9基因对鼻咽癌细胞裸鼠成瘤及移植瘤生长的影响,并通过检测与细胞增殖及细胞周期进展密切相关的增殖细胞核抗原(PCNA)和cyclin D1的表达,进一步探讨NP9基因影响鼻咽癌细胞裸鼠成瘤的作用机制。
材料与方法 1.细胞培养:人支气管上皮细胞株16-H BE为广州医学院实验医学研究中心保存和复苏。
鼻咽癌细胞系CNE1和SUNE1为中山大学肿瘤防治中心提供。
细胞分别培养在含10%小牛血清的DME M-F12及RP M I 1640培养基中。
培养条件:37℃,5%CO 2,饱和湿度。
2.载体及分子生物学试剂:真核表达载体pRc /C MV2、TRIzo l 、Ther m oScript RT -PCR sy ste m 、Lipo fecta m i n e 2000及细胞培养试剂购自美国I nv itrogen 公司;H o t S tar Taq DNA Poly m erase kit 为美国Q iagen 公司产品;p MD 18-T 载体购自日本Ta KaRa 公司。
3.免疫组化试剂:第二代免疫组化E liv ision pl u s 广谱试剂盒和DAB 检测试剂盒,购自福建迈新公司。
单克隆鼠抗人cyc lin D1抗体(clone DSC -6)和单克隆鼠抗人PCNA 抗体(clone PC10,即用型)为DAKO 公司产品。
4.重组质粒构建:参照文献[2]的方法进行。
根据NP9的同源c DNA 序列(G enbank 登录号为13569871),应用设计的特异引物(上游引物为5′-CCCGTGTC ATCCTCACTC G -3′,下游引物为5′-CAGAT GCTGGCTGGTAT GACC -3′)进行RT -PCR 。
RT 反应参照The r m oScript RT -PCR sy ste m 说明书进行,PCR 反应体系参照H ot S tar Taq DNA Poly m erase kit 说明书。
通过RT -PCR 反应,从人支气管上皮细胞16-H BE 的总RNA 中(TRIzo l 试剂提取)获得NP9基因的编码区序列,先与p MD 18-T 载体连接,然后亚克隆到pRc /C MV2的多克隆位点H i n d Ⅲ和Xba Ⅰ之间,得到pRc /C MV2-NP9重组质粒。
5.细胞转染及稳定克隆的建立、鉴定:参照Lipo fecta m i n e 2000说明书进行。
当细胞融合度达90%时,将重组真核表达质粒pRc /C MV2-NP9转染到鼻咽癌细胞株C NE1和SUNE1中,以G 418(300μg /m l 和500μg /m l )筛选抗性克隆,挑选一定数目单一抗性克隆扩增培养,提取部分细胞的总RNA ,用NP9基因引物进行RT -PCR 扩增,筛选出能够稳定、高效表达NP9基因的细胞克隆。
同时以转染pRc /C MV2载体的细胞作为对照。
RT 反应参照Ther m oScrip tRT -PCR syste m 说明书进行,PCR 反应体系参照H otStar Taq DNA Po l y m e r ase kit 说明书。
6.裸鼠致瘤实验:参照文献[3]的方法进行。
Ba l b /C 裸小鼠,雌雄兼用,鼠龄4～5周,购自中山大学肿瘤防治中心动物室。
裸鼠饲养于无菌室层流架无特定病原体(SPF )环境中,灭菌水和饲料自由食用。
细胞接种:收集对数生长期的CNE1、SUNE1及其转基因细胞,以1×106个细胞(悬浮于100μl D -H ank ′s 液中)分别接种到裸鼠双侧腋部皮下,每组接种10只,重复实验1次。
出现瘤结节后,每隔6d(CNE1克隆)或5d (SUNE1克隆)用游标卡尺测量肿瘤的长径和短径,计算并比较肿瘤体积。
肿瘤体积=π[(长径+短径)/2]3/6。
测量30d 后处死小鼠,取瘤称重,统计成瘤率。
肿瘤组织经4%甲醛固定,石蜡包埋后切片,行H E 染色或进行免疫组化检测。
7.PCNA 和cyclin D1的免疫组化检测:参照E liv ision pl u s 试剂盒说明书进行。