肾穿组织综合病理技术方法
移植肾穿刺活检60例的病理学研究
Ｇ ｒ Ｂ 、 Ｃ ４ ｄ的表达 。所用抗体均购 自北京中杉金桥公 司； 免疫荧光检查 ： 冰冻切片后 ， 常规进行免疫球蛋
白Ｉ ｇ Ｇ、 Ｉ ｇ Ａ、 Ｉ ｇ Ｍ 和补体 Ｃ ３、 Ｃ ｌ ｑ以及 纤 维 蛋 白
如何对各种合并症做出正确诊断并给予及时有效的 治疗 ， 延长 移植 肾 的生 存 期仍 然是 人 们 需 要 解 决 的
重要课 题 。移植 。 肾穿刺活 组织 检查 是应 用病 理学 的 方法 直接 观 察 移 植 肾 的病 理 变 化 ， 根据 Ｂ ａ ｎ ｆ移 植 肾活 检病 理 诊 断 体 系对 各 种 合 并 症 做 出诊 断 与 分 类 ， 进而 指导 临床 的治疗 。笔 者 回顾性 分析 ６ ０例
作者单位 ： 西安交通大学 医学 院第一附属医院 病 理科 、 肾移植科 ，
西安 ７ １ ０ ０ ６ １
作者简介 ： 隋燕 霞 ， 女， 硕 士， 助理 研 究 员 ， 责 任作 者 ， Ｅ ， ｍ ａ ｉ ｌ ： ｓ ｕ ｉ ｙ —
ａ ｎ ｘ ｊ ０ ２ ９＠ １ ６ ３ ｃ ｏ ｎ ｒ
２ 结果
移植肾穿刺活检患者临床资料 ， 通过对病理诊断结
果 的分析 ， 了解 移 植 肾 常 出现 的 合 并症 的种 类 及 其 原因， 为 临床 治疗 提供依 据 。
２ ０ １ ２— ０ ８—０ ６接 收
２ ． １ 临床 结果
６ ０例移植 肾穿 刺 活检 标 本 中急性
排斥 反 应 １ ７例 （ ２ ８ ． ３ ％） 、 慢性排斥反应 ２ １例
（ Ｆ Ｒ Ａ ） 的检测。所有病例均参照 Ｂ ａ ｎ ｆ２ ０ ０ ５和 Ｂ ａ ｎ —
ｆ １ ９ ９ ７移 植 肾活 检 病 理 学 诊 断 与 分 类 方 案 进行 分
肾穿
腰痛及腰部不适：多数病人有轻微的同侧腰痛或腰部 不适，一般持续1周左右。多数病人服用一般止痛药可减 轻疼痛，但合并有肾周围血肿的病人腰痛剧烈，可给予麻 醉性止痛药止痛。 腹痛、腹胀：个别病人肾活检后出现腹痛，持续1～7 日，少数病人可有压痛及反跳痛。由于生活习惯的改变加 之腹带的压迫，使病人大量饮水或可出现腹胀，一般无需 特殊处理，对腹胀、腹痛明显者可给予乳酶生及解痉药等 以缓解症状。 发热：伴有肾周围血肿的病人，由于血肿的吸收，可 有中等度发热，应按发热病人护理，并给予适当的药物处 理。
并发症的护理
血尿：约有60～80%的病人出现不同程度的 镜下血尿，部分患者可出现肉眼血尿，为了 使少量出血尽快从肾脏排出，除绝对卧床外， 应嘱病人大量饮水，应观察每次尿颜色的变 化以判断血尿是逐渐加重还是减轻。血尿明 显者，应延长卧床时间，并及时静脉输入止 血药，必要时输血。
肾周围血肿：肾活检后24小时内应绝对卧 床，若病人不能耐受，应及时向病人讲解清 楚绝对卧床的重要性及剧烈活动可能出现的 并发症。以求得病人的配合。 在无肉眼血尿且卧床24小时后，开始逐渐 活动，切不可突然增加活动量，以避免没有 完全愈合的伤口再出血。此时应限制病人的 活动，生活上给予适当的照顾。术后B超检 查发现肾周围血肿的病人应延长卧床时间。
• 感染 • 死亡
感染发生率低，多因无菌措施不严，肾周已存在感染或伴有肾盂肾炎所致， 如出现发热、剧烈腰痛、白细胞增高需用抗生素治疗。 发生率为0－0.1%，因严重大出血、感染、脏器损害或出现其他系统并发症死 亡。
术后护理
病人肾活检后，局部伤口按压数分钟后，平车推入病房。 俯卧位1小时，24小时绝对卧床，心电监测24小时。 每半小时测血压，若病人血压波动大或偏低应测至平稳，并给 予对症处理。 若病情平稳、无肉眼血尿，24小时候，可下地活动。若病人出 现肉眼血尿，应延长卧床时间至肉眼血尿消失或明显减轻。必 要时给静脉输入止血药或输血。 术后嘱病人多饮水，以尽快排出少量凝血块。同时留取尿标本 3次常规送检。 卧床期间，嘱病人安静休息，减少躯体的移动，避免引起伤口 出血，同时应仔细观察病人伤口有无渗血并加强生活护理。 应密切观察病人生命体征的变化，询问有无不适主诉，发现异 常及时处理
肾脏穿刺病理标本染色方法探讨
Ｔ ｅｄ ｈ ｉ ￣
文献标 识码 ： Ａ
Ｏ ｂｕ ｉｏ ａ ｏ ｇｃｌｓ ｉｎ ｔｏｓｏ ｉｎｙ ｂ ｐｙｓｅｉ ｎ ＨＮ Ｓｕ ｕ Ｚ Ｏ ｒ ｇ ， Ａ Ｇ ｌ ａｏ ｔｈ ｔ ｔ ｌ ｉ ｔ ｎ ｇｍｅ ｄ ｆｋｄ ｅ ｉ ｓ ｐ ｃ ｌ ｓｐ ｈ ｏ ａ ａ ｉ ｈ ｏ ｍｅ ｈ－ ｎ ， Ｈ Ｕ Ｕ－ ｎ Ｗ Ｎ ｊ ｉ
Ｌ ｔｙｕ ，ｔｉ （ ｅ ｒ ｅｔｆＮｐ ｒｏ ，ｈ ｃｎ ｏ ｉｌＪ ｉ Ｕ ｉ ｒｔ Ｓｈｏ ｏ ｅｉｎ ， ｈｎ ｃｕ ３０ １ Ｃ／ａ ｉｔ ｏ ｅｏ． Ｄｐ ｔ ｎ ｏ ｅｈｏ ￣ Ｔｅ ｅ ｄＨ ｓ ｔ ，ｄｎ ｎ ｅ ｉ ｃｏｌｆＭ ｄｃ ｅ Ｃａｇｈｎ１０４ ， ｈｎ ） ｄ－ ａｍ ｌ ｓｏ ｐａ ｖ ｓｙ ｉ
，Ｏ７ １ ：２２ ２Ｏ ，１ １ ） ４
使 含有 乙二醇的化合 物氧 化形成 醛基 ； 蒸馏水 洗去过 碘酸 ； Ｓｔｆ氏试 剂反应 １ ｉ， ｅ Ｅ ５ｍｎ 使醛基与 Ｓｈ 氏试剂结合 ， 成紫 ｅｉ ｆ 形 红 色产 物 ； ．％亚硫 酸氢钠处理 ３ ， Ｏ５ 次 每次 １ｍｎ 流水 冲洗 ｉ； ５ ０ｒｎ 用 苏木素染 液复染 细胞核 ； ％盐酸酒 精分化 ， —１ ｉ； ｎ １ 自 来水洗 ， 弱氨水返 兰， 自来 水洗 ； 系列 酒精脱水 ， 甲苯透 明， 二
１４ 。 Ｍａｓｎ染 色 ｓ ｏ
医用 电子仪器厂 制造 的 Ｂ ． Ｍ Ｖ型 自动 组织包埋 机 ， 阳纵 横 沈 高技 术公 司制 造 的 Ｚ － 石蜡 切 片用 冷 台 ， 国 Ｔ ｅ ｏ Ｈ ３型 英 ｈｒ ｍ Ｓａｄｎ公司 的半 自动 石蜡 切片机 ， 海产 Ｐ ３ ｈｎｏ 上 Ｗ－０型电热恒 温烤 箱 ， 京 产 Ｄ － Ｗ－ 北 ＲＨ １型 电 热 恒 温 水 浴 箱。 日本 产
肾穿病理报告的流程
制片流程
以上四种染色可穿插同步进行，以标本数10 例为例，染色总时间约为 200 min,超出10例 标本,切片时间递增,染色时间倍增.
制片流程
至下午五点左右制片过程全部结束，出片。 周二穿刺，周三下午五点左右出片； 周四穿刺，周五下午五点左右出片；
免疫标记流程
周二穿刺标本在周四上午进行免疫荧光染色。 周四穿刺标本在周五上午进行免疫荧光染色。 周五下午所有标本荧光拍照。
荡2h； （10）纯包埋剂渗透组织，并震荡2 h； （11）纯包埋剂包埋：纯包埋剂包埋组织并置于聚合器中聚合
37°Ｃ烘箱，24 h；
电镜检查
周五：继续聚合，调烘箱温度至45°Ｃ， 24 h；
周六：继续聚合，调烘箱温度至60°Ｃ， 48h至周日；
免疫标记流程
1、免疫荧光：
1.1直接免疫荧光：冰冻切片室温放置20min，一抗室温孵 育1h，洗片5min×3，晾干甘油封片，总计时间约2 h。
1.2间接免疫荧光：冰冻切片室温放置20min，一抗室温孵 育1h，洗片5min×3，二抗室温孵育1 h，总计时间为2.5 h
免疫标记流程
2、免疫组化：
制片流程
PAS染色步骤
1. 切片脱蜡入水 30min 2. 1%高碘酸染 12min. 流水冲洗 2min 3. shiff液染到组织转淡红. 10-15min 4. 流水冲洗直至组织转枚红(镜下观察). 5min 5. 苏木素染核 3min. 水洗1min 6. 0.5%-1%盐酸分化.(浸一下即可) 7. 水洗蓝化(镜下观察). 5min 8. 从低浓度到高浓度酒精脱水. 20min 9. 二甲苯透明 20min 10. 树胶封片. 标记 10min 总时间 约 120 min
5 烤片30min 6 蜡块封存 总计约200min，至中午结束切片
三种脱水程序在肾穿刺活检标本制片中的应用比较
三种脱水程序在肾穿刺活检标本制片中的应用比较韩福兰;汪家文;刘靖;刘应时;刘芳【摘要】目的：探讨肾穿刺组织最合适的脱水程序。
方法随机选取新鲜肾穿刺标本80例，每例取材3份，固定后按不同脱水程序分为3组：A组为新型超声结合水浴加温组、B组为常规大体标本脱水组、C组为小标本单独脱水组。
3组所做的切片均进行HE染色和特殊染色。
结果小标本单独脱水组，HE染色切片厚薄均匀平整，细胞染色鲜艳，无皱缩现象，对比度清晰，各项特殊染色着色鲜艳、定位准确，优于其余两组。
结论应用小标本快速脱水组制作的切片质量优良，完全满足肾组织临床病理诊断的需要，既缩短了制片时间，又提高了制片质量。
%To investigate the most suitable dehydration procedure of renal biosy tissues.Methods 80 renal biopsy specimens had been selected. Three small pickling tissues were cut from each case and were divided into three groups:Group A for fast ultrasonic processing technology, which combined with the water bath method. Group B for routine dehydration of large samples. Group C for dehydration program of small specimen. The three groups of sections were observed by HE staining and specialstaining.Results Rapid dehydration program of small specimen was better than the other two groups. In this group, all the HE and special staining slices were uniform and smooth, with bright staining, clear contrast and accurate positioning.Conclusion Rapid dehydration program of small specimens was the most suitable dehydration procedure of renal biosy tissues, which not only shortened the production time, but also improved the sample quality.【期刊名称】《佛山科学技术学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】5页(P9-13)【关键词】肾穿刺活检;HE染色;特殊染色;脱水【作者】韩福兰;汪家文;刘靖;刘应时;刘芳【作者单位】佛山市中医院病理科，广东佛山528000;佛山科学技术学院基础医学部，广东佛山528000;佛山科学技术学院基础医学部，广东佛山528000;佛山科学技术学院基础医学部，广东佛山528000;佛山科学技术学院基础医学部，广东佛山528000【正文语种】中文【中图分类】R361.2肾小球肾炎是临床常见病，肾穿刺活检有利其病理分型，以及确定其病变程度，被认为是该病诊断的金标准。
重视肾穿刺活检标本处理技术
１． ０ 丁樱 ， 张红敏 ． 雷公藤多苷对 肾小球系膜 细胞细胞 因子生成
的影响 ． 中华 肾脏 病杂志 ，０ ２ １ （ ） １９ ２ ０ ，８２ ：３ ． １． １ 万毅 刚 ， 孙伟 ， 甄彦 君 ， ． 等 雷公藤 多苷对实验性 系膜增殖 性
蛋白尿及系膜 损伤 的影 响 ． 国中西 医结 合 杂志 ，０ ５ ２ 中 ２ ０ ，５
９ 周太 光 ， ． 王峥 ， 夏彦 ， 雷 公藤 多苷对 肾病 综合 征患儿糖 皮 等． 质激素受体 的影 响及 其 临床 意义 ． 临床 儿科 杂 志 ，０ ３ ２ ２０ ，１
（ ０ ：１ —６ ４ １ ）６ ２ １ ．
减少 、 肝损害 、 消化道反应 、 月经紊乱等 ， 并予相应 治疗及防范。
Ｃ ＩｗＮ， ｒｈ２ ０ ， ｏ．０ Ｎ ． Ｊ１ Ｍａｃ ０ ９
糖皮质激 素是 治疗 肾病 综合 征的主要药物 ， 它通 过与细胞 激活而发挥免疫抑制效应 ，ｒⅣ ｒ、Ｐ也 可抑 制 Ｎ Ｆ—Ｉ ， 而抑制 ｃ 进 Ｂ Ｔ细胞 的增殖 、 诱导 Ｔ细胞凋亡＿ ； ６ 雷公藤 可通过兴奋下丘脑 一 垂体 一肾上腺轴而增加 糖皮质 激素 的合 成 Ｊ而且 １ ｖ ， 、 Ｐ本身 质激素在免疫抑制方面具有协 同作用 。本 组观察结果 也显示 ，
单用泼尼松 。
志 ， ９ ４ １ （ ） １ —１ ． １９ ， １１ ：３ ５
糖皮质激素受 体 （ Ｃ 结合 、 制细 胞核 因子 一Ｋ （ Ｇ Ｒ） 抑 Ｂ ＮＦ—ｘ ３ 黎磊石 ， Ｂ） ． 张训 ， 陈惠 萍 ， ． 等 雷公 藤治疗 肾小球 肾炎 的临床研
究． 中华 内科 杂 志 ，９ １２ （ ）２ ６ １ ． １ ８ ，０ ４ ：１ —２ ８
肾穿刺活检技术
前言肾活检组织学检查（简称肾活检）的创立及其临床应用为肾脏病学成为独立学科和发展作出了重要贡献。
肾活检对各类肾脏疾病的病理诊断、指导治疗和判断预后有重要意义。
操作方法包括经皮肾活检、开放式肾活检、经腹腔镜下肾活检及经血管内肾活检等，其中经皮肾穿刺活检是目前最主要的肾活检方法。
近20年来，肾活检技术更加成熟，穿刺成功率接近100%，取材合格率大大提高，且并发症的发生率大大减少[1~4]。
一、经皮肾活检发展史1923年，Gwyn[5]进行了首例开放式肾活检。
1934年，Ball[6]采用穿刺针经皮穿刺肾组织成功诊断肾肿瘤，此后陆续有人用此方法进行肾肿瘤的诊断。
直到1952年，瑞典医师Alwall[7]，丹麦医师Iversen和Brun[8,9]借鉴肝穿刺活检技术，使用静脉肾盂造影定位，采用坐位方式，首次以经皮肾穿刺的方法获取到足够用于诊断肾脏病的肾组织。
但采用该方法仅有40%的成功率。
随后，Kark和Muchrake[10]对穿刺方法作了改进：采用Franklin-Vim-Silverman型穿刺针，患者俯卧位接受手术，并在腹部垫硬枕固定肾脏，穿刺成功率达到96%，并且无严重并发症发生，随后这一方法逐渐成为肾穿刺活检的主要方法。
早期的肾活检主要根据肾脏所对映体表解剖位置进行盲穿或静脉肾盂造影进行定位。
至1985年，B超肾脏实时定位[11]（real time scanning）问世后，肾活检定位及引导更加准确。
自动穿刺枪的问世肾活检技术更易于掌握，肾活检相关并发症明显下降，威胁生命的并发症发生率降至<0.1%，肾活检穿刺成功率达到95%以上[1, 2, 12, 13]。
国内，赵魁丹等[14]于1958年最先开展经皮肾穿刺活检并取得成功。
20世纪60至70年代，已有少数医院尝试了肾活检，直至80年代后肾活检才广泛应用于临床[15]。
在1983年召开的“肾小球疾病肾活检诊断”专题座谈会上，全国已有多家单位进行病例报告，但肾活检例数仅1011例（南京军区南京总医院解放军肾脏病研究所281例）[16]。
肾穿 病理流程
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肾活检病理标本制作技术---PPT精品课件
常规染色
HE、PAS、PASM-Masson染色
将组织切片用 二甲苯脱蜡5min x3次 100%、95%和75%乙醇中依次脱水5min 自来水洗5min 进入以下染色步骤
HE染色（苏木素Βιβλιοθήκη 红染色） 切片浸入Carazzis苏木素液20-30min 水洗 1%盐酸水溶液分化数秒 自来水洗15min 0.5%伊红乙醇溶液染色10-20s 梯度乙醇脱水，吹干，中性树胶封片
免疫组化染色技术
采用免疫荧光染色法显示肾组织中免疫沉积物
组织切片二甲苯脱蜡5min x3次，100%、95%和75%乙醇脱水各5min，自来 水流洗5min
高压高温抗原修复：不锈钢高压锅内加入0.01mol/L pH6.0枸橼酸盐缓冲 液煮沸，切片置于耐高温塑料切片架上，浸入已沸腾的缓冲液中，盖上高 压锅盖及压力阀，加热至喷气1-2min后，压力锅离开热源，自然冷却23min，水冲冷却至室温，打开锅盖，取出切片，水洗2min，PBS（磷酸盐 缓冲液）洗2min x3次
组织切片
将组织蜡块置于冰块上冷冻，使蜡块变硬以便切片
HE、PAS、PASM-Masson染色片厚度1-2µm，免疫组化染色片厚度3µm 免疫组化片要用预涂10%多聚赖氨酸的玻片
切下来的蜡片先在常温30%乙醇中初步摊片后，在转入37℃左右温水中摊片，待 切片完全舒展开后移至玻片上
切片在58-60℃的烤箱中过夜，待次日染色
待锇酸固定完毕后，用pH7.3 0.2mol/L PBS液冲洗10-15min 在4℃环境中，浸入50%乙醇中，10-15min 在4℃环境中，浸入70%乙醇中，10-15min 在4℃环境中，浸入90%乙醇中，10-15min 在4℃环境中，浸入90%乙醇：90%丙酮=1：1混合液中，10-15min 在4℃环境中，浸入90%丙酮中，10-15min 脱水完毕后，在室温或37℃环境下快速将标本置于用纯丙酮与纯包埋剂按1：1比例配
慢性肾脏病肾穿刺活检病理的应用与结果分析
慢性肾脏病肾穿刺活检病理的应用与结果分析慢性肾脏病是一种临床较为常见的疾病，其严重程度往往会直接影响患者的生活质量以及长期生存率。
对于慢性肾脏病的治疗和管理，肾脏组织的病理学检测与分析是非常必要的一项方法。
而肾穿刺活检是一种比较常见的检查方式，关于其应用与结果分析，以下为详细讨论。
肾穿刺活检是一种通过体表穿刺手段，获取肾脏组织活检标本的方法。
它可以通过直接观察肾脏组织形态和结构，判断肾小球滤过膜和肾小管的损伤程度，进而确定患者的疾病类型和严重程度。
现如今，肾穿刺活检已经成为了慢性肾脏病诊疗过程中非常重要的一部分，其应用范围主要包括以下情况：1、对于慢性肾脏病的诊断：肾穿刺活检可以通过病理学检测，确定患者的肾脏病变类型，如IgA肾病、膜性肾病、系膜增生性肾炎等类型。
3、对于慢性肾脏病的治疗评估：肾穿刺活检可以通过监测患者肾脏组织变化，评估治疗效果，调整治疗方案。
肾穿刺活检是一种安全有效的检查手段，但其也存在一定的风险，如穿刺位置不当、出血等并发症，因此在应用过程中，需要严格把握适应证和禁忌证的范围，确保检查的安全。
肾穿刺活检的结果分析需要结合临床症状和检验结果进行综合判断。
具体分析如下：1、病理学检测：病理学检测结果是肾穿刺活检结果分析的重要依据之一。
根据病理学检测结果，可以确定患者的肾脏病变类型、病变程度和活动程度，以及伴随的肾小管间质病变等情况，进而确定患者的治疗方案。
2、临床症状：慢性肾脏病的症状多样化，如尿量减少、水肿、高血压等。
临床医生需要通过详细询问病史、体格检查等方式，对患者的病情进行全面评估。
3、检验指标：检验指标包括尿常规、肾功能、电解质等检测结果，这些指标的异常情况可以反映患者的肾脏损伤程度和病情进展情况。
在综合分析肾穿刺活检结果之前，需要对这些指标进行充分评估。
总之，慢性肾脏病肾穿刺活检的应用与结果分析是临床医生必须掌握的重要技能。
通过结合临床症状、检验结果和病理学检测结果，我们可以准确判断患者的病情，制定合理的治疗方案，提高患者的治疗效果和生活质量。
肾活检病理标本的制作方法
肾活检病理标本的制作方法肾活检病理标本的制作方法一光镜标本的制作与染色肾活检组织光镜标本的制作包括固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和染色等步骤，各部依次进行，前一步是后一步的基础。
（一）固定将供光镜检查的肾穿刺组织尽快浸入固定液内，迅速凝固，防止自溶和腐败，使其尽可能地保持与生活状态相似的结构，有利于切片和观察，这是组织固定的目的。
常用固定液有甲醛和乙醇。
1.甲醛应配制成中性甲醛为好，具有穿透力强、固定均匀、被固定组织不收缩而且柔韧的特点，常用10%的溶液。
2.乙醇具有固定和脱水的双重作用。
可以保存组织内的糖类物质和尿酸结晶，但易使组织收缩且不能保存脂类物质，常用其95%的溶液。
3.有时为保存两者的优点，可用FAA混合固定液，其中包括10%甲醛10ml、冰醋酸5ml和95%乙醇85ml，其中冰醋酸具有渗透性强和使组织膨胀的特点，借以抵消乙醇的缺点。
固定液内的组织可置于室温或4℃的环境中保存，绝不可冷冻结冰。
（二）脱水脱水的目的是将经过固定的组织内的水分去除，以便使切片时的支撑物（石蜡）充分进入组织。
最常用的脱水剂是乙醇，为避免脱水过程中组织收缩，必须用逐级升高浓度的乙醇依次浸泡脱水：70%乙醇-80%乙醇-90%乙醇-95%乙醇-无水乙醇。
（三）透明透明的目的是将能与石蜡结合的媒介剂浸入组织，并将不能与石蜡结合的脱水剂（乙醇）置换出来，并使组织透明，为包埋做准备。
1.常用的透明剂是二甲苯。
组织在二甲苯中的时间不宜过长，否则可使组织松脆收缩。
2.氯仿也可用作透明剂，其透明性能较弱，但不会致使组织松脆。
（四）浸蜡浸蜡的目的是是组织内有一定的支撑物，使之具备一定的硬度和韧度，便于切出满意的切片。
常用石蜡的熔点是60-62%，有时为保存组织内的抗原，可用48-50%的低熔点石蜡。
（五）包埋将浸蜡彻底的组织用石蜡包埋成规整的长方形块状物体，便于在切片机上切片。
（六）切片将石蜡包埋块置于切片机切片，厚度以2-3um为宜。
肾穿刺活检技术
明确诊断、评估病情、制定治疗 方案和监测疾病进展。
发展历程与现状
发展历程
肾穿刺活检技术自20世纪初开始探 索，经过不断改进和完善，现已成为 肾脏病诊断和治疗的重要手段。
现状
随着医学技术的进步，肾穿刺活检技 术不断优化，安全性、准确性和可靠 性得到显著提高，为肾脏病患者带来 了更好的诊疗效果。
适用范围与限制
肾周血肿
肾周血肿是由于肾穿刺活检时损伤肾 脏周围血管所致，可能导致腰部胀痛 、血尿等症状。
大多数肾周血肿可自行吸收，但严重 血肿需及时就医治疗。
其他并发症
疼痛
肾穿刺后可能出现腰部疼痛，通 常可自行缓解，但疼痛持续或加
重需就医。
邻近器官损伤
肾穿刺过程中可能损伤邻近器官， 如肝脏、脾脏等，需及时处理。
临床应用前景
早期诊断
有助于发现早期肾脏疾病，提高 治疗效果和预后。
个体化治疗
根据活检结果制定个体化治疗方 案，提高治疗效果。
药物研发
用于评估新药对肾脏的影响，为 药物研发提供依据。
研究方向与挑战
疼痛管理
研究更有效的疼痛缓解方法，提高患者舒适度。
并发症预防与处理
降低出血、感染等并发症的风险。
伦理与法律问题
准备肾穿刺活检所需的手术器械、药 品和材料，确保手术顺利进行。
签署知情同意书
向患者和家属详细解释肾穿刺活检的 必要性、操作过程和可能的风险，并 签署知情同意书。
手术过程
定位
通过超声或X线检查确定 肾脏的位置和形态，选 择合适的穿刺点和路径
。
消毒与麻醉
对手术区域进行消毒， 并注射麻醉药以减轻患
者疼痛。
穿刺
按照预定的路径，使用 肾穿刺针刺入肾脏，取
肾穿刺组织活检40例临床病理分析
期治疗 。 一旦发生 了出血 ， 且在药物治疗效果不佳 的情况下， 可
机制 障碍 ， 从而诱发 了原 十二 指肠球部溃疡 的再次 出现 ， 加速 引发 出血 ，急诊 胃镜检 查也证实 了十二指肠球部有 活动性 出 血。因此 ， 对于这类患者 ， 可考虑早期行 胃镜检查 ， 早期诊断， 早
注法莫替丁等治疗 。休克期平稳度过 ， 休克期后继续 口服法莫
替 丁 ２ ｇ 每 日２次 ， ０ｍ ， 连续 ３ ． 以后创面 隔 Ｅ换药 ， ｄ ｌ 伤后 １ 创 ８ ｄ 面基本愈合 。伤后 １ ９ｄ出现黑便 １ ， 次 成形 ， 隐血试验 （ ）血 ＋，
的 ， 该项检查对 肾脏病 的诊 断 、 导治疗及判 断预后有非常 且 指
基层医学论坛 ２ １ 年第 ｌ 卷 ７ ００ ４ 月上旬刊
一 晗 园
检查 。 急诊 胃镜示 ： 胃底和 胃体黏膜出现散在浅表糜烂 ， 黏膜水 肿 、 白； 苍 十二指肠球部见一 ７ｍ ｍｍ大小 的椭 圆形溃疡 ， ｍｘ５ 其 中有 ３ｍ ｍ大小活动性出血点 ， 周围黏膜充血水肿 ， 即在 胃镜 下局部喷洒凝血酶和去 甲肾上腺素 。 止血成功后 ， 继续抑酸、 止
（４ ８ ， 发 性 肾小球 疾病 中 以狼 疮 性 肾 炎 为主 ４例 （ ０ ， ３ ． ％）继 ４ ４ ％）
且以女性为多。乙型肝 炎病毒相关 肾炎 ３例 （Ｏ 。结论 肾 ３ ％）
活检 术对 肾脏疾病的诊断、 指导治疗及判 断预后均有非 常重要
肾穿——精选推荐
取出活组织标本条，长约10～15mm，放入盐水纱布条小瓶内。
送光镜检查的标本用10%缓冲甲醛液固定12h，然后脱水，二甲苯透明、石蜡包埋，连续切片，片厚3μm，常规行HE染色。
根据需要加做Masson和PASM染色;免疫荧光作IgA、IgG、IgM、C1q、C3、Fib六种染色。
肾穿刺检查时，患者应在充分了解自己的病情并与医生全面交流的基础上，积极配合并接受这一检查，以尽早明确诊断，指导治疗。
肾穿刺是肾脏病病理诊断的唯一方法。
一般说来，肾穿刺就是采用特别的细小穿刺针经皮肤刺入肾脏中取出一小条组织，通过光学显微镜、电子显微镜、免疫学和分子生物学等一系列现代化科学方法仔细研究，根据肾小球、肾小管、肾间质及肾内小血管的病变特征加以分析，鉴别它是属于哪一类性质的肾脏病。
[肾穿刺的目的]首先应用肾穿刺活检可以明确诊断。
各种肾脏病的临床表现不外乎浮肿、蛋白尿、血尿等，但不能据此明确是何种肾脏疾病，还是全身性疾病累及肾脏。
肾脏病的轻重与蛋白尿、血尿等表现的轻重并不平行，肾病患者的主观症状又往往十分不可靠。
因此，只有通过病理检查才能正确判定病变的种类、性质和程度。
其次，通过肾活检病理检查，可以对病变的可能转归及发展速度做出较为正确的猜测。
最后，通过肾穿刺活检明确诊断可为临床制定治疗方案、修正治疗方案提供重要的依据。
如患者是否需要使用激素？是否需要加用免疫抑制剂？多大剂量？疗程如何？这些问题都需要根据不同的病理类型来决定，凭临床症状和医师的经验会有很大的误差。
因此，肾穿刺是目前肾脏病明确诊断、指导治疗、判定预后最有价值的检查手段。
[肾穿刺的适应症]一般来说，凡是肾脏有弥漫性病变，其病因、治疗和预后等问题尚未解决或不甚明确，又无禁忌证者，均需作肾穿刺。
如：肾病综合征、急性肾炎综合征、无症状性蛋白尿、原因不明的血尿已排除肾外因素者、病因不明的急性肾功能衰竭等。
当患者有明显的出血倾向且难以纠正时，此种情况为肾穿刺的绝对禁忌症；而当患者出现下列情况时，医生对肾穿刺会非常谨慎：如慢性肾功能衰竭且双肾已明显萎缩，孤立肾或对侧肾已切除，肾结核、肾脓肿和活动性肾盂肾炎，肾血管瘤和肾积水，难以控制的高血压，心功能不全或全身情况很差者，妊娠晚期，明显肥胖及患者不合作等。
(医学课件)肾穿刺活检术的准备和操作方法全文
方法简介
➢ 开放肾活检（Open renal biopsy） ➢ 经皮肾活检（percutaneous renal biopsy） ➢ 经静脉肾活检（Transvenous renal biopsy） ➢ 腹腔镜下肾活检（Laparoscopic renal biopsy）
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肾活检病理检查的意义
➢ ⑶急性肾功能衰竭：临床及实验室检查无法确定其病因 时应及时穿刺（包括慢性肾脏病人肾功能急剧坏转）。
➢ ⑷移植肾：①肾功能明显减退原因不清时，②严重排异 反应决定是否切除移植肾；③怀疑原有肾脏病在移植肾中 复发。
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禁忌证
肾穿刺是一种创伤性检查，选择穿刺病例时不但需掌握好 适应征，还要认真排除禁忌征。 ⑴绝对禁忌证：①明显出血倾向，②重度高血压，③精神 病或不配合操作者，④孤立肾，⑤小肾。 ⑵相对禁忌证：①活动性肾盂肾炎、肾结核、肾盂积水或 积脓，肾脓肿或肾周围脓肿。②肾肿瘤或肾动脉瘤。③多 囊肾或肾脏大囊肿。④肾脏位置过高（深吸气肾下极也不 达十二肋下）或游走肾。⑤慢性肾功能衰竭。⑥过度肥胖 。⑦重度腹水。⑧心功能衰竭、严重贫血、低血容量、妊 娠或年迈者。
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操作步骤
3. 局麻后, 尖刀切开穿刺点皮肤,在超声引导下进针, 当针尖抵肾被 膜致凹陷时, 嘱患者吸气后憋气, 发射活检枪迅速拔针。
4. 常规取2～3针, 固定标本。分别送光镜、电镜和免疫荧光检查。 5. 术后穿刺点加压沙袋20 min, 嘱患者平卧24h, 多饮水, 密切观察
尿常规及血压变化, 必要时超声复查。以检出肾小球作为取材成 功, 获得10个以上肾小球为满意标本。
1.明确肾疾病的病理变化和病理类型 2.根据病理变化、病理类型和严重程度ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ定临床治疗方案 3.根据病理变化、病理类型和严重程度判断预后 4.通过重复肾活检，探索其发展规律，修正治疗方案 5.丰富临床病理资料，发现新的肾疾病 6.有助于科研，推动肾脏病学发展
肾穿刺活检病理远程诊断的实施标准探讨
肾穿刺活检病理远程诊断的实施标准探讨【摘要】本文针对肾穿刺活检病理远程诊断的实施标准进行探讨。
在介绍了肾穿刺活检的重要性和研究目的。
在正文中，分别阐述了肾穿刺活检的临床意义、病理远程诊断的发展现状以及肾穿刺活检病理远程诊断的优势。
重点讨论了实施标准并进行了技术和风险评估。
在展望了肾穿刺活检病理远程诊断的未来发展方向，并总结了本文的观点。
本文旨在加强对肾穿刺活检病理远程诊断的认识，为临床实践提供指导，促进其在医学领域的应用和推广。
【关键词】肾穿刺活检、病理远程诊断、实施标准、肾病、诊断技术、风险评估、发展方向、临床意义1. 引言1.1 背景介绍肾穿刺活检是一种常见的临床检查方法，主要用于肾脏疾病的诊断和治疗。
通过肾穿刺活检可以获取肾脏组织标本，进行病理学检查，帮助医生准确诊断各种肾脏疾病，包括肾小球肾炎、肾间质病变等。
随着病理学诊断技术的不断进步，病理远程诊断逐渐成为一种新的诊断模式。
病理远程诊断利用互联网和数字化技术，将病理组织切片数字化，实现远程诊断。
这种诊断方式可以弥补地域资源不均衡的问题，提高病理诊断的准确性和效率。
肾穿刺活检病理远程诊断作为肾脏疾病诊断中的新技术，正在逐渐得到应用。
但是在实际操作中，仍然存在一些问题和挑战，包括技术标准不统一、隐私保护、风险评估等。
探讨肾穿刺活检病理远程诊断的实施标准，对于规范该技术的应用，保障患者的权益，具有重要意义。
本文将从肾穿刺活检临床意义、病理远程诊断发展现状等方面探讨肾穿刺活检病理远程诊断的实施标准，以期为临床实践提供参考。
1.2 研究目的研究目的是为了探讨肾穿刺活检病理远程诊断的实施标准，以提高医疗诊断效率和准确性。
通过对肾穿刺活检的临床意义、病理远程诊断的发展现状、以及肾穿刺活检病理远程诊断的优势进行分析和研究，我们旨在建立一个科学、标准化的实施标准，为医生提供更准确、可靠的病理诊断结果，为患者提供更及时、有效的治疗方案。
我们还将对技术和风险评估进行探讨，以确保肾穿刺活检病理远程诊断的安全性和可靠性。
肾穿活检组织标本
对于临床表现相似的肾脏疾病，通过肾穿活检组 织标本可以鉴别诊断，有助于制定针对性的治疗 方案。
发现早期病变
肾穿活检组织标本可以发现早期肾脏病变，如肾 小球硬化、肾间质纤维化等，有助于及时干预和 治疗。
疾病治疗
指导治疗
01
肾穿活检组织标本的病理类型和病变程度可以指导医生选择合
适的治疗方案，如药物治疗、免疫治疗等。
在包装上清晰地标明组织标本的相关信息，如患 者姓名、标本类型、送检医院等。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ快速运输
尽量选择快速可靠的运输方式，以确保组织标本 在运输过程中的新鲜度和完整性。
保存与运输注意事项
遵循法律法规
在保存和运输肾穿活检组织标本时，应遵循相关的法律法规和伦 理规范，确保患者的隐私和权益得到保护。
避免污染和交叉感染
干燥保存
在保持一定湿度的条件下，将组织标本进行干燥处理，如使用干 燥剂或晾干，以延长保存时间。
化学防腐保存
使用化学防腐剂对组织标本进行处理，以抑制微生物生长和组织 自溶。常用的化学防腐剂包括甲醛、乙醇等。
运输要求
密封包装
确保组织标本在运输过程中不会受到外界污染或 损坏，应使用密封的容器进行包装。
标识清晰
手术切除肾脏标本
对于某些特定疾病或病变，可能需要手术切除整个肾脏或部分肾脏 组织进行活检。
细针穿刺抽吸活检
使用细针通过皮肤刺入肾脏，抽取少量组织液进行活检。
采集注意事项
01
02
03
04
适应症选择
根据患者的病情和诊断需要， 选择合适的活检方法。
操作前准备
进行必要的实验室检查和影像 学检查，了解肾脏病变的位置
和大小。
操作中监测
肾脏穿刺病理标本处理与检查方法
肾检查的必要性
1. 明确肾疾病的病理变化和病理类型
2. 根据病理变化、病理类型和严重程度制定临床 治疗方案
3. 根据病理变化、病理类型和严重程度判断预后
肾脏穿刺病理检查的必要性
4. 通过重复肾活检，探索肾脏疾病发展规律，修 正治疗方案
5. 丰富临床病理资料，发现新的肾疾病
肾脏穿刺HE染色
肾脏穿刺荧光染色
肾脏穿刺六铵银染色
肾脏穿刺PAS染色
肾脏穿刺Masson染色
谢谢！
穿刺出的标本需立即分别处理
常规光镜标本 放入足够的10%福尔马林固定液中。 注意固定液的浓度、时间以及环境温度。
穿刺出的标本需立即分别处理
荧光标本 不用固定，放置于事先准备的放有湿 盐水的纱布夹层（将纱布浸泡于生理盐水 中，然后挤去多余的水分，使纱布保持湿 润而又不滴水为宜）将标本放入冰箱冷藏 室待穿刺结束迅速送病理进行冰冻切片。
穿刺出的标本需立即分别处理
有条件进行电镜检测的可将标本放入 2.5%戊二醛固定液中，4摄氏度冰箱保存。
开展检查项目
常规光镜检查 免疫组织化学检查 CD68、HBsAg、LCA 荧光标记 IgG、IgM、IgA、 补体C1q、 补体C3c、补体C4c、纤维蛋白原 特殊染色 PAS染色、PASM染色、 Masson染色
如临床诊断为肾病综合征，病理改变不同，其 治疗和预后截然不同。
临床送检标本应注意
1、进行肾穿送检需提前一天提交病理检查 预约单，预约单内各项内容务请详细认真 填写，作为诊断时参考；送检单及标本容 器上均需写清病人的姓名、ID号、临床诊 断等，以便查对。 2、送检肾穿组织不宜过小，以皮质为主， 最好能同时穿刺三条组织送检，组织长度 应超过0.8cm。
XX医院肾组织标本处理临床技术操作规范
XX医院肾组织标本处理临床技术操作规范一、肾活检标本的初步处理为了保证迅速、及时、合适的分切组织，技术员必须到肾活检现场，并做好充分的准备工作。
【准备工作】1．取一块纱布用生理盐水浸透，以拧不出水而又潮湿为宜。
纱布内放一块编好号的胶布(因胶布潮湿后不易写字)，置人培养器皿内备用，每个肾穿刺患者，需分别准备一块这样的纱布。
纱布不能太湿，否则肾组织浸在水中容易造成组织自溶；也不能太干，以免组织干涸，影响抗原性。
两者均会影响染色效果。
2．用一个清洁的5ml标本瓶，加入光镜固定液3ml(FAA固定液：甲醛溶液10ml，冰醋酸5ml，95％乙醇85 ml混匀)，盖塞紧后备用(以防乙醇挥发)。
3．用一个清洁的5ml标本瓶，加入冷电镜固定液3ml[2．5％戊二醛10ml，双蒸馏水40 ml，混匀后再加pH为7．4的磷酸缓冲液(PBS)50ml，冰箱内保存]，置冰箱内备用。
4．解剖显微镜一架，冰瓶一个。
眼科手术平镊一把，直尺一把，双面刀片一把，蜡板一块。
5．上述光镜固定液小瓶、电镜固定液小瓶及培养皿均应在肾穿刺术数小时前准备完毕，并将其置于冰箱内备用。
【取材判断】经皮肾活检术所获取的肾组织一般包括以下几种成分：皮质组织、皮髓交界组织以及皮质一髓质一皮质组织。
穿刺取得肾组织后，立即用生理盐水冲洗数次以除血迹。
1．迅速判断所取组织是否为肾组织，还是其他类型的组织，如肌肉组织、结缔组织、脂肪组织等。
2．当确定为肾组织后，立即将组织置于蜡板上，迅速测量其长度(mm)，并记录。
3．用解剖显微镜或放大镜进行观察，以区别皮质和髓质，并仔细观察标本是否有肾小球。
在解剖显微镜下，肾皮质色较淡，皮质区可见一些分布不规则，朦胧的红色小点，此即肾小球。
使用解剖显微镜可大大帮助区别组织，作出正确的判断。
但随着经验的积累，也可用肉眼判定。
4．要使肾活检诊断的可靠，所取标本的量是至关重要的。
如无肾小球或皮质部分少于1 ml，要考虑再次穿刺，取得的组织要迅速分切后固定。
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肾穿组织综合病理技术方法探讨【中图分类号】r657.4【文献标识码】b【文章编号】1008-6455（2011）08-0439-01
近年来随着肾穿技术的广泛开展，肾活检组织病理检查已成为肾脏疾病诊断和研究不可缺少的重要内容［1］，我科自1996年～2009年对2149例肾活检标本应用综合病理技术，及时全面地保证了肾活检病理诊断，现介绍如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料：收集1996年～2009年本院及外院送检肾穿刺活检标本共2149例，其中：男性1046例，女性1103例，男女之比1:1.05；年龄范围1岁～75岁，平均年龄为33.54岁，分别做光镜和电镜检查。
应用规范的专项肾穿刺病理申请单和报告单模式，保证临床信息全面可靠。
1.2 方法：应用快速制样技术完成光镜和电镜的制备［2］，全过程在1.5d内完成。
肾穿组织以faa液（10%甲醛10ml、冰醋酸5ml、95%酒精85ml）固定2h，微波快速脱水、透明、浸蜡2h后包埋，2μm连续切片，分别作he、masson（马松三色）、pas（过碘酸雪夫）、pasm（六胺银）染色，部分病例进行刚果红染色。
免疫组化s-p法染色：选用抗体iga、igg、igm、c3、coⅳ，部分病例增加乙型肝炎病毒抗原（hbsag和hbcag）检查（试剂均购自福州迈新公司）。
电镜组织切成1mm3组织块2～4粒，立即投入4%戊二
醛缓冲液固定2h，1%四氧化锇后固定30min，快速制样；lkb-v型超薄切片机半薄切片观察并定位，超薄切片70nm，醋酸铀及柠檬酸铅染色，日本jeol-1010透射电镜观察。
病例诊断参考who1995年肾脏疾病分类标准，由学习过肾穿病例诊断的主治医师、主任医师，应用逐级阅片（he切片、特染、免疫组化、半薄切片和超薄切片）方法，结合临床实验室结果，进行综合病例诊断。
2 结果
2149例肾活检中光镜标本肾小球少于5个且无电镜资料的归入未明确诊断80例（5.9%）；完整光镜和电镜样品2069例中256例（13.83%）电镜未找到肾小球，综合病例诊断1594例，占全部资料的74.17%。
3 讨论
肾穿刺活检组织新鲜，具有适合病理光镜和电镜检查的特点，为及时全面地提供高质量的各项技术切片，保证肾活检病理诊断的及时性和准确性，我们在工作中结合肾活检组织固定、he切片、特染染色、免疫组织化学染色和电镜技术的特点，将各项方法相互结合形成综合技术，为肾活检综合病理诊断创造了较好的条件。
3.1 及时选择适宜固定液：对一次性穿刺的肾组织经分离取材后，选用faa固定液固定光镜肾组织，选用4%戊二醛缓冲液做为电镜组织固定液，组织固定时间均为2h，较好地保证肾活检组织结构完好性。
3.2 同步光镜、电镜组织快速制样：光镜组织采用微波快速制样，全过程30min左右，缩短制样时间，浸蜡及包埋采用石蜡松香，以加强切片的延展性。
电镜组织采用快速制样技术，全过程1.5d
完成，与光镜he、特染、免疫切片同时提交，为医生综合诊断提供条件。
3.3 光镜组织集中制片：he、特染、免疫组化切片一次性完成，即省时，切片质量好，减少肾小球丢失率。
切片时选用精度达到1μm性能良好的切片机，切片厚度为2μm；蜡块修切平整后力争一次性制片20余张；选用防脱载玻片，分别捞到10张玻片上，每张保证2张切片；因切片菲薄，为避免皱折选用由20℃～45℃水温二次展片法捞片；以备he、特染及免疫组化染色。
3.4 同步式he、特染染色：he染色及三种特染同时展开，每一染色法使用固定专用配套的染色缸防止交叉影响。
其中pam染色采用二次染液法，即：工作液染色过程中，待切片出现淡黄色时立即更换新配制工作液继续染至出现黑色沉淀，避免过染的问题。
3.5 石蜡切片免疫组织化学染色法：肾穿组织免疫方法可采用荧光法和免疫组化法，我们体会冰冻荧光免疫法虽方法相对简单，单需增加冰冻切片等工作程序，切片不能长期保存，若肾穿标本量少则难于保证需要。
免疫组织化学法不但能将形态学改变与免疫特征结合起来，易于保存并便于观察；从技术工作角度可在石蜡切片过程中一次性完成制片，克服冰冻荧光免疫分次制片和肾标本量少
的问题；我们采用s-p即用法，各抗体在肾组织中均能较好的显示免疫特征。
3.6 专项技术专人负责是质量保证：工作中定技术岗，利用专项业务提高综合技术水平；同时参加医师读片，增加辨认肾组织结构及各项染色特征的能力，及时把握各项技术条件指标，增加工作的主动性，保证肾穿综合技术水平稳定有序发展。
参考文献
［1］王泊云，李玉松等主编. 病理学技术［m］. 人民卫生出版社，2001:948-953
［2］唐新萍，邹赛英，邱敬芝，等. 肾穿组织快速电镜制样技术探讨［j］. 西北国防医学杂志，2004:25（4）：318。