最新实验四 胶体金试纸条检测技术
胶体金快速检测技术试验(传染病实验课)
实验四胶体金快速检测技术试验一、胶体金试纸条诊断技术的原理：以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。
二、层析法免疫胶体金检测方法的优点：• 1.方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。
• 2.短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。
• 3.不同环境下的稳定性好，不需冷藏。
• 4.相比而言，其生产成本和检测成本均较低。
• 5.检测标本种类多：可用于查血、尿液或粪便。
•三、应用•猪伪狂犬病抗体快速金标检测卡•原理：猪伪狂犬抗体检测试剂盒（胶体金法），系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本（全血、血清、血浆）中抗猪伪狂犬抗体的方法。
整个试验只需20分钟，操作简便、快速、准确，灵敏度高、结果直观、容易判定。
• 1.操作方法：•①在检测卡的加样孔内加入100μl待检血清或血液样品。
•②将检测卡平放于桌面上，在室温下静置5-20分钟内判定结果。
超过20分钟的结果只能作为参考。
• 2.结果判定：•♦阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线。
猪伪狂犬抗体滴度越高，检测线（T）颜色越深。
•♦弱阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线，但检测线区（T）出现的颜色很浅。
•♦阴性：在观察孔内，只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
•♦失效：在观察孔内，对照线区（C）和检测线区（T）都不出现色线；或仅检测线区（T）出现色线。
•猪瘟病毒抗体、猪蓝耳病抗体快速金标检测卡原理、操作方法、结果判定与猪伪狂犬病抗体快速金标检测卡的基本相同••••。
实验四___胶体金试纸条检测技术剖析
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling
technique）是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜 的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢 慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利 用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/ 抗体。
实验四
胶体金试纸条诊断技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激 素（ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
病毒性疾病பைடு நூலகம்传染性法氏囊病、禽流感、
胶体金试纸条检测技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素 （ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
technique）是以胶体金作为示踪记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细 血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端 渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜 色（红色）反应，检测抗原/抗体。有三种反应模 式：夹心法，间接法，竞争抑制法。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术（Immunogold labeling
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行，
胶体金试纸条检测技术42017
吸收垫
背衬 （底板）
检测线 硝酸纤维素膜
测定
测定时将试纸条下端浸 入液体标本中，下端吸 水材料即吸取液体向上 端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物 复溶，并带动其向膜条 渗移。
测定
若标本中有待测特异抗 原，即可与免疫金复合 物中的抗体结合，此抗 原抗体复合物流至测试 区即被固相抗体捕获， 在膜上显出红色反应线 条（T）。
➢胶体金的质量判 ✓定质标量准好的胶体金：溶液呈红色，胶
体金颗粒为球形，大小均一，无棱 角。
✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大 小不一，形状各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱 性条件下带负电荷，与蛋白质分 子的正电荷基团藉静电吸引而形 成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示 踪标记物应用于抗原抗体反应的
二、胶体金试纸条诊断技术 的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微 孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一 端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗 原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色 （红色）反应，检测抗原/抗体。有 三种反应模式：夹心法，间接法，竞 争抑制法。
胶体金试纸条示意 图
样品垫
连接垫
（胶体金垫） 质检线
阴性对 照
H5ＡIV 细胞毒 阳性结 果 阴性对 照
快乐工作，快乐生活！ 感谢您的聆听！ ！
欢迎批评指导！！
2019
ppt资料
18
➢基础金核 ➢双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位 z排 体et斥 间a电， 的位以 溶可液维以中持外使胶层胶体离金体子的金层稳颗定粒H状+之分态间散。相在互胶
胶体金颗粒对蛋白质有
很强的吸附功能，而不被坏其 生物活性，可以与蛋白质等 （葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋 白）等非共价结合，形成胶体 金标记物。
胶体金试纸条检测技术
（ HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
基础金核
双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位
外层离子层
H+分散在胶体间的溶液中
zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥，以维持 胶体金的稳定状态。
胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功 能，而不被坏其生物活性，可以与蛋白质 等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白）等非 共价结合，形成胶体金标记物。
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行，
至参照区与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG），而显出红色质 控线条（R）。
测
定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就会出结
果，而其它方法如 ELISA 需要 1-2h ， PCR 需要时间 更长。
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果
阴性对照
结果易于判定：阴、阳性呈色很明源自，肉眼很容易判断。特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标记，这
决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、
犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙
虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
technique）是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛 细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一 端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现 颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。有三种反应 模式：夹心法，间接法，竞争抑制法。
实验四 胶体金试纸条检测技术ppt
测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合（免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG）， 而 显 出 红 色质控线条（R）。
-
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
-
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 ： 操 作 简 单 ， 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的 毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用 胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗 体。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原 -
胶体金试纸条示意图
样品垫
连ห้องสมุดไป่ตู้垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼 很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标 记，这决定了它具有很好的特异性。
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胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
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实验四 胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素 （ HCG） 的 测 定 和 乙 型 肝 炎 病 毒 表 面 抗 原 （HBsAg）等检测。
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胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸 （HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的 作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于
胶体金试纸条检测技术实用PPT资料
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细 血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端 渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜 色（红色）反应，检测抗原/抗体。有三种反应模 式：夹心法，间接法，竞争抑制法。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标记，这决定了它具有很好的特异性。
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG） 的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。 外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
谢谢观看!
快乐工作，快乐生活！ 感谢您的聆听！ ！
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18
作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于 的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。 胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。 双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼很容易判断。
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。 胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。 结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉
胶体金试纸条检测新冠原理
胶体金试纸条检测新冠原理胶体金试纸条检测新冠原理新冠肺炎是一种高传染性疾病，对全球人民的健康和生命安全造成了极大的威胁。
目前，新冠病毒的检测成为预防和控制疫情的重要手段。
胶体金试纸条检测技术是一种快速、简便、易操作的检测方法，被广泛应用于新冠病毒的检测领域。
本文将从胶体金试纸条的基本原理、新冠病毒检测的流程、胶体金试纸条检测方法的优点和市场应用等方面进行阐述。
一、胶体金试纸条的基本原理胶体金试纸条是一种基于胶体金技术的测定方法。
胶体金是一种物理性质稳定、化学性质活性的微型金颗粒，其表面特性对生物分子具有极强的亲和力。
在胶体金试纸条上，通过将对新冠病毒的抗体固定在纸条上，并与胶体金颗粒标记的抗体结合，打造出了一种快速、敏感、选择性的检测方法。
二、新冠病毒检测的流程新冠病毒检测通常包含样本采集、核酸提取、核酸扩增和检测结果读取四个步骤。
采样过程中，通常使用咽拭子或鼻咽拭子，利用提取试剂将提取到的病毒核酸分离并提取出来。
然后，通过核酸扩增技术，将样本中的新冠病毒的核酸扩增出来，并在PCR仪器中进行实时荧光检测。
最后，通过查看胶体金试纸条检测结果，比较检测线和质控线的颜色变化，以判断样本是否为新冠病毒阳性。
三、胶体金试纸条检测方法的优点胶体金试纸条检测方法具有许多优点。
首先，其检测速度快，通常只需要几十分钟，与传统的PCR检测技术相比，大大缩短了检测的周期。
其次，操作简单，无需特殊技术和专业设备，使检测可以向社区和家庭延伸，提高了社区和家庭的诊断能力。
此外，胶体金试纸条检测方法高度敏感，可以检测到少量的新冠病毒核酸，并且具有选择性，不会对其他病毒进行误判。
四、市场应用前景目前，胶体金试纸条检测技术已被广泛应用于新冠病毒的检测领域，并在全球范围内建立了大量的检测实验室和工厂。
随着社区、家庭和学校等场所新冠病毒检测需求的不断增加，胶体金试纸条检测技术有着广阔的应用前景。
此外，在未来的研究和发展过程中，未来确定可以进一步扩展其检测范围，包括其他病毒或疾病标志物的检测，为精确医学健康提供新的技术支持。
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H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合（免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG）， 而 显 出 红 色质控线条（R）。
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 ： 操 作 简 单 ， 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
测定
测定时将试纸条下端浸入液体 标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测定
若 标 本 中 有 待 测 特 异 抗 原 ， 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的 毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用 胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗 体。
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的 作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于
静电作用成为一种稳定的胶体状态。
➢胶体金的质量判定标准
✓质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。
✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
实验四 胶体金试纸条检 测技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素 （ HCG） 的 测 定 和 乙 型 肝 炎 病 毒 表 面 抗 原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼 很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标 记，这决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果