胶体金试纸条检测技术42017
便潜血(FOB)检测试纸(胶体金法)产品技术要求lanshizi
便潜血(FOB)检测试纸(胶体金法)适用范围:该产品可定性检测粪便中的人血红蛋白Hb。
1.1 条型:1人份/袋;16人份/筒,25人份/筒1.2 板型:1人份/袋,10人份/袋1.3 托型:1人份/袋,10人份/袋,14人份/袋,16人份/袋,20人份/袋,24人份/袋;16人份/筒,20人份/筒,25人份/筒1.4 主要组成成分抗-人血红蛋白Hb单抗和抗鼠IgG多克隆抗体分别固相于硝酸纤维膜,胶体金标记的抗-人Hb单抗(固相)。
2.1 物理性能2.1.1 外观:检测试纸条整洁完整、无毛刺、无破损、无污染,标签应清晰。
2.1.2 条宽:试纸宽度应≥2.5 mm。
2.1.3 液体移行速度:液体移行速度应≥10 mm/min。
2.2 最低检测限:100 ng/ml。
2.3 特异性2.3.1 检测浓度为500 µg/ml的羊、鸡、牛、猪、兔、狗Hb,结果均应为阴性。
2.3.2 检测浓度为2000 µg/ml的辣根过氧化物酶,结果应为阴性。
2.3.3 检测纯化水及正常大便稀释液,结果应为阴性。
2.4 重复性用100 ng/ml的FOB重复性参考品平行检测10人份,要求反应结果均为阳性,且显色度均一。
2.5 稳定性4℃~30℃条件下放置24个月后两个月内的产品的物理性能、最低检测限、特异性和重复性的检测结果,应符合2.1项、2.2项、2.3项、2.4项的要求。
2.6 HOOK效应检测浓度为4000 µg/ml的人Hb,结果应不出现阴性。
2.7 批间差取3个批号的试纸,对重复性进行检测,要求反应结果均为阳性,且显色度均一。
实验四___胶体金试纸条检测技术剖析
负电荷,与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 ( Immunogold labeling
technique)是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜 的毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢 慢向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利 用胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/ 抗体。
实验四
胶体金试纸条诊断技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成,该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激 素( HCG)的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)等检测。
胶 体 金 ( Colloidal gold) 是 氯 金 酸
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 (胶体金垫) 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 (底板)
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中,下端吸水材料即吸取 液体向上端移动,流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶, 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原,即
(HAuCl4)的水溶胶,氯金酸在还原剂的作 用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金:溶液呈红色,胶体金颗粒为球 形,大小均一,无棱角。 质量差的胶体金:溶液呈紫色,大小不一,形状 各异。
胶体金标记的原理:胶体金在碱性条件下带
病毒性疾病பைடு நூலகம்传染性法氏囊病、禽流感、
最新实验四 胶体金试纸条检测技术
H5AIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
测定
过剩的免疫金复合物继续前行, 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合(免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG), 而 显 出 红 色质控线条(R)。
测定
阴性标本则无反应线条,而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 : 操 作 简 单 , 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果,而其它方法如ELISA需要1-2h, PCR 需要时间更长。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 (胶体金垫)
质检线
吸收垫
背衬 (底板)
检测线
硝酸纤维素膜
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
测定
测定时将试纸条下端浸入液体 标本中,下端吸水材料即吸取 液体向上端移动,流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶, 并带动其向膜条渗移。
测定
若 标 本 中 有 待 测 特 异 抗 原 , 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合,此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获,在膜 上显出红色反应线条(T)。
胶体金标记技术(Immunogold labeling technique)是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的 毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用 胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗 体。
(HAuCl4)的水溶胶,氯金酸在还原剂的 作用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于
静电作用成为一种稳定的胶体状态。
➢胶体金的质量判定标准
超敏C反应蛋白测定试纸(胶体金免疫层析法)产品技术要求泰杰伟业
超敏C反应蛋白测定试纸(胶体金免疫层析法)适用范围:用于体外定量测定人全血/血清/血浆样本中C反应蛋白(CRP)含量。
1.1包装规格卡型1人份、10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。
1.2主要组成成分每盒含10、20或50人份测定试纸和1张校准信息卡。
每人份测定试纸包括1人份hs-CRP测定试纸条、1包干燥剂和1支滴管。
hs-CRP测定试纸由玻璃纤维素膜(样品垫)、NC膜(T线包被鼠抗人CRP单克隆抗体;C线包被羊抗鼠IgG 多克隆抗体)、聚酯纤维素膜(包被胶体金标记的鼠抗人CRP单克隆抗体)、滤血膜、吸水纸、PVC胶板组成。
2.1物理性状2.1.1 外观测定试纸应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染;材料附着牢固;标签字迹清晰,无破损。
2.1.2 膜条宽度测定试纸的膜条宽度不小于2.5mm。
2.1.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。
2.2 空白限空白限应不高于0.5μg/mL。
2.3 精密度2.3.1重复性CV 应不高于10.0%。
2.3.2 批间差CV 应不高于15.0%。
2.4剂量-反应曲线的线性2.4.1线性相关系数在[0.5,64] μg/mL的范围内,用线性拟合公式拟合,剂量-反应曲线相关系数r应不低于0.99。
2.4.2线性相对偏差在(3,64]μg/mL的范围内,线性相对偏差应在±15%范围内。
2.4.3线性绝对偏差在[0.5,3] μg/mL的范围内,线性绝对偏差应不大于±0.45μg/mL。
2.5 准确度检测CRP抗原,样本回收率应在85%~115%范围内。
2.6特异性用浓度为100mg/L血清蛋白P溶液检测超敏C反应蛋白测定试纸,检测结果应小于0.5μg/mL。
2.7稳定性将测定试纸在4℃~30℃的环境中放置18个月后,取样分别检测2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6项,结果应符合各项目的要求。
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条是一种常用的快速检测方法,它的原理是基于胶体金颗粒的表面等离子体共振(SPR)现象。
胶体金试纸条通常由两部分组成:胶体金颗粒和检测区域。
胶体金颗粒具有特殊的物理性质,当受到特定物质的作用时,其表面等离子体共振会发生变化。
这种变化会导致颗粒的形状、颜色或聚集状态发生改变。
在使用胶体金试纸条进行检测时,样品溶液会被加到试纸条的检测区域上。
如果样品中含有需要检测的物质,这些物质会与胶体金颗粒产生特定的相互作用。
这种作用可以是物质与金颗粒表面的化学反应,也可以是物质与金颗粒之间的物理吸附。
当作用发生时,胶体金颗粒的表面等离子体共振发生改变,导致颗粒的形状、颜色或聚集状态发生变化。
这种变化可以通过肉眼观察或色谱仪等设备进行检测。
根据试纸条上颗粒的变化程度,可以判断样品中目标物质的浓度或存在与否。
需要注意的是,不同的胶体金试纸条适用于不同的检测目标物质。
因此,在选择试纸条时,需要根据具体的检测要求选择合适的试纸条。
此外,在进行胶体金试纸条检测时,正确的操作步骤和仪器校准也是保证检测准确性的重要因素。
胶体金层析法
胶体金层析法
胶体金层析法(Colloidal Gold Lateral Flow Assay)是一种常见的免疫层析检测技术,也被称为“快速测试纸条”或“快速诊断试纸条”。
这种技术被广泛用于医学诊断、食品安全检测、环境监测等领域。
下面是胶体金层析法的基本原理和步骤:
原理:
1.抗原-抗体反应:根据抗原和抗体之间的特异性结合原理,将被检测的分
子(如蛋白质、病毒抗原等)与特异性抗体结合。
2.胶体金标记:抗体或抗原被标记上胶体金颗粒,使其呈现颜色。
3.层析效应:在试纸条上形成的吸附带将试剂中的标记复合物隔离出来,
通过毛细管作用,使其沿着试纸条上的纵向扩散。
步骤:
1.取得待检样本(如血液、尿液、食品提取物等)。
2.将待检样本加入试剂盒中,与试剂中的抗体或抗原相结合。
3.混合物通过毛细管效应在试纸条上扩散。
4.当待检样本中存在目标分子时,会与试纸条上的抗体或抗原结合,形成可
见的标记复合物。
5.标记复合物在试纸条上的特定区域显示出色带,从而进行目标物的定性或
半定量检测。
这种技术具有简单、快速、便携、成本低等优点,在诊断和快速检测中应用广泛。
例如,它被用于临床诊断、药物滥用检测、感染病原体检测(如流感、艾滋病毒等)以及食品安全检测等领域。
胶体金试纸条检测技术ppt
测定
过剩的免疫金复合物继续前行, 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合(免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG), 而 显出红 色质控线条(R)。
-
测定
阴性标本则无反应线条,而仅显示质控线条。
-
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速:操作简单,一般只要5-10min 就会出 结果,而其它方法如ELISA需要1-2h,PCR 需要 时间更长。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5AIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
-
谢谢观看!
-
快乐工作,快乐生活! 感谢您的聆听! !
欢迎批评指导!!
2019
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➢基础金核 ➢双离子 内层负离子(AuC12-) zeta电位
外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中 zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥,以维持 胶体金的稳定状态。
-
胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功 能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白质 等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非 共价结合,形成胶体金标记物。
-
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛细 血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端 渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现颜 色(红色)反应,检测抗原/抗体。有三种反应模 式:夹心法,间接法,竞争抑制法。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
-
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 (胶体金垫)
结果易于判定:阴、阳性呈色很明显,肉眼很容易 判断。
特异性好:因为该技术大多用单克隆抗体标记,这 决定了它具有很好的特异性。
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胶体金试纸条检测技术
( HAuCl4)的水溶胶,氯金酸在还原剂的作 用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
基础金核
双离子 内层负离子(AuC12-) zeta电位
外层离子层
H+分散在胶体间的溶液中
zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥,以维持 胶体金的稳定状态。
胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功 能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白质 等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非 共价结合,形成胶体金标记物。
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行,
至参照区与固相抗小鼠IgG结合 (免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG),而显出红色质 控线条(R)。
测
定
阴性标本则无反应线条,而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速:操作简单,一般只要5-10min 就会出结
果,而其它方法如 ELISA 需要 1-2h , PCR 需要时间 更长。
阴性对照
H5AIV细胞 毒阳性结果
阴性对照
结果易于判定:阴、阳性呈色很明源自,肉眼很容易判断。特异性好:因为该技术大多用单克隆抗体标记,这
决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病:传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、
犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病:血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙
虫病。
细菌性疾病:霍乱弧菌、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
technique)是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛 细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一 端渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现 颜色(红色)反应,检测抗原/抗体。有三种反应 模式:夹心法,间接法,竞争抑制法。
实验四 胶体金试纸条检测技术ppt
测定
过剩的免疫金复合物继续前行, 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合(免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG), 而 显 出 红 色质控线条(R)。
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测定
阴性标本则无反应线条,而仅显示质控线条。
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胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 : 操 作 简 单 , 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果,而其它方法如ELISA需要1-2h, PCR 需要时间更长。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的 毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用 胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗 体。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原 -
胶体金试纸条示意图
样品垫
连ห้องสมุดไป่ตู้垫 (胶体金垫)
质检线
吸收垫
背衬 (底板)
结果易于判定:阴、阳性呈色很明显,肉眼 很容易判断。
特异性好:因为该技术大多用单克隆抗体标 记,这决定了它具有很好的特异性。
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胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病:传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病:血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病:霍乱弧菌、类鼻疽。
-
实验四 胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成,该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激素 ( HCG) 的 测 定 和 乙 型 肝 炎 病 毒 表 面 抗 原 (HBsAg)等检测。
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胶 体 金 ( Colloidal gold) 是 氯 金 酸 (HAuCl4)的水溶胶,氯金酸在还原剂的 作用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于
简述胶体金快速试纸检测诊断法的操作步骤和结果判定标准。
胶体金快速试纸检测法是一种常用的生物化学检测方法,用于检测特定物质的存在与否。
下面是胶体金快速试纸检测法的一般操作步骤和结果判定标准:操作步骤:
准备样品:收集或提取待检测的样品,如血液、尿液、唾液等。
将待检测样品滴加到试纸上:将样品滴加到试纸的指定位置,通常是一个小孔或条纹区域。
等待反应:让样品与试纸上的试剂发生反应,通常需要一定的时间(如几分钟)。
观察颜色变化:观察试纸上的颜色变化。
胶体金试纸上的试剂会与待检测物质发生相互作用,导致颜色的变化。
比对结果:将试纸上的颜色变化与参考标准进行比对,以确定样品中待检测物质的存在与否。
结果判定标准:胶体金快速试纸检测法的结果判定通常基于颜色变化的程度或出现的条纹数目。
具体的判定标准会因不同的试纸和被检测物质而有所不同。
通常,试纸上会标有参考图示,用来指导结果的判定。
一般情况下,判定结果为阳性或阴性,阳性代表样品中目标物质存在,阴性代表不存在。
对于某些试纸,可能还有不同的颜色变化对应不同的浓度范围,需要参考相关说明进行判定。
需要注意的是,胶体金快速试纸检测法是一种快速检测方法,结果仅供参考。
如果需要更准确和确切的结果,建议使用其他更精确的检测方法进行确认。
同时,不同试纸和目标物质的检测方法会有所差异,具体的操作步骤和结果判定应根据实际使用的试纸和检测物质进行参考和遵循。
胶体金快速免疫诊断技术
免疫层析法检测原理分类介绍
胶体金免疫层析法检测流脑抗体(间接法)
胶体金标记的兔抗人IgG,样品中的流脑抗体与胶体金标记的抗人 IgG结合,沿硝酸纤维素膜移动,在包被有流脑抗原结合,出现红 色反应线。
免疫层析法检测原理分类介绍 (双抗体夹心)
(以HCG检测为例)
HCG-β亚基抗体Y2,羊抗鼠二抗固定于硝酸纤维素膜上,金标HCG-α 亚基单抗Y1固定于玻璃纤维素膜上。
蛋白质最适用量测定:
将待标记的蛋白质(鼠抗人IgG)储存液作系列稀释后, 分别取0.1ml加到 1ml胶体金溶液中,另设一管不加蛋白质 的对照管,5分钟后加入0.1ml 10%NaCl溶液,混匀后静置 2小时。
12 34567
胶体金(ml) 1 1
11111
蛋白质(ug) 0 10 15 20 25 30 35
食品安全检测中心,各监管 农兽药残留(磺胺类、瘦肉精等),大肠杆菌,黄曲霉素 部门
样品垫
试纸条组成结构
胶体金垫
控制线(C线)
吸水滤纸
PVC底板
层析方向
NC膜(硝酸纤维素膜) 测试线 (T线)
有4个组分:⑴、吸水纸(样品垫)。⑵、玻璃纤维膜(胶体金垫)。膜上吸附 着干燥的金标抗体(流动带)。⑶、硝酸纤维素膜,膜上包被着抗原或抗体条带 和能与标记物直接起反应的质控物条带(检测带)。⑷、吸水纸。以上各组份首 尾互相衔接。
质量评价
灵 敏 度=A/A+C×100% 特 异 度=D/B+D×100% 假阳性率=B /B+D×100% 假阴性率=C /A+C×100%
试验 阳性 阴性 总数
真阳性 A C
A+C
真阴性 B D
B+D
胶体金试纸条检测技术(课堂PPT)
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5AIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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谢谢观看!
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快乐工作,快乐生活! 感谢您的聆听! !
欢迎批评指导!!
2019
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➢基础金核 ➢双离子 内层负离子(AuC12-) zeta电位
外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中 zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥,以维持 胶体金的稳定状态。
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胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功 能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白质 等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非 共价结合,形成胶体金标记物。
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➢胶体金的质量判定标准 ✓质量好的胶体金:溶液呈红色,胶体金颗粒为球
形,大小均一,无棱角。 ✓质量差的胶体金:溶液呈紫色,大小不一,形状
各异。
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胶体金标记的原理:胶体金在碱性条件下带 负电荷,与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术(Immunogold labeling technique)是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
结果易于判定:阴、阳性呈色很明显,肉眼很容易 判断。
特异性好:因为该技术大多用单克隆抗体标记,这 决定了它具有很好的特异性。
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胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病:传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、 犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病:血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙 虫病。
细菌性疾病:霍乱弧菌、类鼻疽。
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二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛细 血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端 渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现颜 色(红色)反应,检测抗原/抗体。有三种反应模 式:夹心法,间接法,竞争抑制法。
胶体金检测技术
培训资料
4.1978年Geoghegan等应用免疫金技术检测B淋巴 细胞表面抗原。 5.1981年Danscher建立了银显影液增强光镜下金颗 粒的免疫金银染色方法
(Immunogold-silver staining,IGSS)。 6.1986年Fritz(美,生物)等人在IGSS法基础上成 功地进行了彩色IGSS的染色法,使得检测结果更加鲜 艳夺目—这是免疫金检测技术诞生的一次历程碑!
图1 金颗粒示意图
在溶液中金颗粒呈 圆形,表面带有负电 荷,由于静电的排斥 力,使其在水中保稳 定状态,形成稳定 的胶体状态。
培训资料 3. 胶体金试纸条的构造
样品垫
胶体金垫 控制线(C线) 吸水滤纸
层析方向
PVC底板
测试线 (T线)NC膜(硝酸纤维素膜)
培训资料
4.免疫层析法检测原理(双抗体夹心)
如果加样量太大或太小,将会影响实验结果。如样品非常 粘稠,有可能导致样品爬不上去,此时可适当多滴1~2滴。 7.以T线的条带为观测点,C线为质量控质线
由于动物个体的差异使尿样样本中的成分组成不同,检测 时,有的检测线可能偏淡或颜色偏灰,但只要条带出现,就 可判定为阴性结果。
培训资料
8. 如果尿样出现沉淀或浑浊物,请离心后或静置后再检测; 9.试纸条应常温保存,防止温度过高或过低
万孚胶体金法抗原检测方法
万孚胶体金法抗原检测方法万孚胶体金法抗原检测方法:快来看看它是怎么回事!你有没有遇到过这种情况,突然觉得自己身体不太对劲,喉咙痒、头晕目眩,甚至发烧流感,心里默默地开始担心:“这是不是得了什么可怕的病?”别担心,这时候你只需要通过一种简单又高效的检测方法——万孚胶体金法抗原检测。
听着是不是感觉有点“高大上”?其实它就是我们平时做抗原检测的那个小小试纸,方便、快捷,操作简单,不管你是在家里、办公室还是旅行途中,都能轻松上阵。
万孚胶体金法抗原检测到底是什么呢?它的原理是什么?今天咱就一起聊聊这个话题,保证让你一听就懂,一看就会!一、万孚胶体金法的原理——神奇的“金”大法你知道吗,万孚胶体金法之所以这么好用,背后可有一套“金光闪闪”的原理!简单来说,它是通过“金颗粒”这一神奇小东西来帮助我们检测抗原的。
说白了,金颗粒就像是探路的小侦察兵,它们会和我们体内的抗原发生反应,然后通过颜色的变化,告诉我们结果。
你可能会问:“这些金颗粒咋那么牛?它们能行吗?”别急,咱一块儿看看。
万孚胶体金法的试纸上有两条“神秘”的区域:一条是检测区,另一条是对照区。
你拿到试纸后,先把样本(比如鼻咽拭子或者唾液)滴在试纸上,样本中的抗原会和金颗粒结合。
这时候,抗原如果在你体内存在,就会把这些金颗粒吸引过去,跟它们“亲密接触”。
然后,金颗粒就会让试纸上出现一条红线,告诉你有抗原。
如果你不幸没感染到抗原,试纸上就啥都不会出现。
神奇吧!万孚胶体金法抗原检测,基本上就是通过金颗粒帮你看清体内的“隐秘敌人”——是不是有病原入侵。
二、操作步骤——简简单单就能搞定听完了原理,大家是不是有点迫不及待,想知道这个检测到底该怎么做?其实操作起来真不难。
咱们一步一步来,不用担心,别害怕,照着下面的步骤,你就能顺利完成!1.准备工作。
你得准备好万孚胶体金试剂盒,别忘了还有你自己的样本。
咳咳,别想歪了,咱说的样本就是体液(鼻咽拭子、唾液这些都可以),拿到这些东西后,准备好清洁的环境,最好洗个手,消消毒,给自己一个干净的空间。
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- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
吸收垫
背衬 (底板)
检测线 硝酸纤维素膜
测定
测定时将试纸条下端浸 入液体标本中,下端吸 水材料即吸取液体向上 端移动,流经C处时使 干片上的免疫金复合物 复溶,并带动其向膜条 渗移。
测定
若标本中有待测特异抗 原,即可与免疫金复合 物中的抗体结合,此抗 原抗体复合物流至测试 区即被固相抗体捕获, 在膜上显出红色反应线 条(T)。
➢胶体金的质量判 ✓定质标量准好的胶体金:溶液呈红色,胶
体金颗粒为球形,大小均一,无棱 角。
✓质量差的胶体金:溶液呈紫色,大 小不一,形状各异。
胶体金标记的原理:胶体金在碱 性条件下带负电荷,与蛋白质分 子的正电荷基团藉静电吸引而形 成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 ( Immunogold labeling technique)是以胶体金作为示 踪标记物应用于抗原抗体反应的
二、胶体金试纸条诊断技术 的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微 孔膜的毛细血管作用,滴加在膜条一 端的液体慢慢向另一端渗移,通过抗 原抗体结合,并利用胶体金呈现颜色 (红色)反应,检测抗原/抗体。有 三种反应模式:夹心法,间接法,竞 争抑制法。
胶体金试纸条示意 图
样品垫
连接垫
(胶体金垫) 质检线
阴性对 照
H5AIV 细胞毒 阳性结 果 阴性对 照
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2019
ppt资料
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➢基础金核 ➢双离子 内层负离子(AuC12-) zeta电位 z排 体et斥 间a电, 的位以 溶可液维以中持外使胶层胶体离金体子的金层稳颗定粒H状+之分态间散。相在互胶
胶体金颗粒对蛋白质有
很强的吸附功能,而不被坏其 生物活性,可以与蛋白质等 (葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋 白)等非共价结合,形成胶体 金标记物。
胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体 金免疫层析技术研制而成,该技 术是90年代初在免疫渗滤技术 的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术,最先用于人绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 ( HCG) 的 测 定和乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)等检测。
胶体金(Colloidal gold)是氯 金酸(HAuCl4)的水溶胶,氯 金酸在还原剂的作用下,聚合成 特定大小的金颗粒,并由于静电 作用成为一种稳定的胶体状态。
测定
过 剩 的 免 疫 金 复 合 物 继续前行,至参照区 与固相抗小鼠IgG结合 (免疫金复合物中的 单克隆抗体为小鼠 IgG),而显出红色质 控线条(R)。
测定
阴性标本则无反应线条,而仅显 示质控线条。
胶体金快速诊断技术的 特点
简捷快速:操作简单,一般只要 5-10min 就会出结果,而其它 方 法 如 ELISA 需 要 1 -2h , PCR 需要时间更长。
结果易于判定:阴、阳性呈色用单 克隆抗体标记,这决定了它具有
胶体金快速诊断技术的 应用
病毒性疾病:传染性法氏囊病 、禽流感、新城疫、犬细小病 毒、猪瘟等。
寄生虫疾病:血吸虫病、旋毛 虫病、囊虫病、恙虫病。
细菌性疾病:霍乱弧菌、类鼻 疽。
H5 亚 型 AIV 尿 囊 液阳性结 果