侧脑室穿刺

各位老师，学长好

我是麻醉学的学生，导师给我的课题是，侧脑室以预处理的方式，给吗啡，观察其对心肌缺血再灌注的影响

现在我遇到的问题是：侧脑室置管模型和心肌缺血再灌注模型的联合建立，对大鼠的影响很大，动辄就死了，心肌Ｉ／Ｒ模型在我已经基本能掌握其精髓，但侧脑室置管模型，依然存在隐患，我给大家说下我的操作步骤，恳请各位老师，学长能我提出宝贵的意见，谢谢

麻醉后的大鼠（Ｓ－Ｄ，２５０～３５０克）固定于立体定位仪（振华，蓝星Ｂ）上，暴露前囟，坐标是向后１.０毫米，旁开１.５毫米，自硬脑膜面向下３.５毫米．材料是我们麻醉科用于硬膜外麻醉置管的ＰＥ管，内芯插有细软铁丝，在定位仪的指导下穿刺，５０２胶和牙托粉固定，术后青霉素３０万单位抗感染．单笼饲养三天，再做心脏模型．还有想请教一下各位老师，关于侧脑室给吗啡（剂量？容积？）的问题及其阻断剂CTOP，NTD，nor-BNI,的剂量怎么给? 我查了文献大多数文献报道，脑室注射的剂量是有限的1-5ul

药物或抑制剂只能是0.1--0.6ug，是腹腔注射或静脉注射的1/100--1/1000

但是遗憾的是术后大鼠死亡率很高即模型的成功率很低要多练习，

很浪费钱和动物的，初学这一定要用心掌握侧脑室注射的定位和模型的成功率！要熟悉术前术中常规及应对措施，由于术后创伤至脑室压力太高易出现脑疝，导致窒息死亡，再者术后一定要注射大剂量的抗生素防止大鼠感染脑膜炎致死，要求术后大鼠要温度保持在37°C左右这一点很重要，再者术后要注射一定剂量的胰岛素来抵抗术后血糖的升高【高糖导致大鼠昏迷】

请在侧脑室注射方面有战绩的战友来支持一下！你的定位没有问题，关键的是导管太粗了，硬膜外导管直径过大，你可以使用4号或是6号头皮针作为外套管，用胰岛素针（29G）作为内针，这样损伤会小多了，成功率自然就提高了。置管后让动物休息一周再做其他手术比较好，因为颅脑损伤恢复期也要一周的。

手术注意无菌，保温，术后注意营养就可以了。

ICV剂量一般不要超过5－10ul，速度要慢，注药后要停留5－10min。

多做就好了，还有动物买来不能立即手术，需要在你的实验室饲养一周左右，适应一下会更好些的。国外的文献用的是ALZET，“brain infusion kit”，一头象大头针，长5mm，提供4枚厚0.5mm垫片，提供调节深度，另一头是一“L"型管，可接长15mm管，还可再接渗透泵给药，渗透泵比较贵，我们没有买，一套管约100多人民币，我最近也准备做，不知单用502胶能固定在头颅骨上吗，还是要同时用牙托粉呢。附上两张图。接上图我做过一段时间的微透淅和侧脑室、核团给药，现将步骤说一说，如有不对，请大家多多指教。

1，安定+氯胺酮麻醉后将大鼠固定于立体定位仪上；备注：将大鼠头部固定于脑立体定位仪上，门齿杆-3.3mm，三个标准检测是否固定成功(鼻对正中，头部不动，提尾不掉。)

2，暴露前囟，以此为0点寻找进针点，其坐标为：AP:１.０mm，L:１.５mm，H:3.8mm，墨汁标记；

3，用牙科钻将标记点钻开至硬脑膜，用针尖刺破硬脑膜；

4，在标记点周围用牙科钻浅钻3个小坑（不钻透颅骨），分别旋入眼科螺丝（不透颅骨）；

5，将导管（透淅管）用定位仪穿刺到定位点，用95%的酒精涂搽,用502胶固定；6，用牙托粉将3颗螺丝和导管包裹固定在一起；

7，术毕，单笼饲养，青霉素8万单位肌肉注射连续3天。

说明及注意事项：

1，在定位仪上观察数值的时候一定要正视，不能有斜视；

2，暴露前囟后一定要将骨面刮干净并保持干燥，否则牙托粉固定不住；

3，钻3个小坑并放入螺丝的目的也是在于能更好的固定导管；

4，术前适应3天和术后恢复3天也是很重要的；

5，关于导管和进样针的问题，大家说法不一，可以根据具体条件而定。我的感觉是，不论做脑室内给药还是核团内给药，器械在碰组织前要消一下毒，最好用洁尔灭，用酒精可能会损伤神经元，如果消毒不好，很可能会有颅内感染的情况发生，那样老鼠即使不死也会出现不自主的歪斜、转圈的情况，浪费试剂和老鼠不说，会影响实验结果。

术后抗生素很有必要，但代替不了术中的器械消毒。谢谢，各位老师对学生的指点，如果用6号头皮针作导管，那我就不好再做心脏模型了，因为那样的话，老鼠要仰卧位，不好给药了，只有用塑料导管，如果我把硬膜外导管拉细拉长，但又找不到适合的内芯，希望各位老师能提供点意见

对抗感染的事，我也觉得很重要，虽然我的老鼠术后，存活率很高，但总感觉精神状态，运动功能也有缺陷，谢谢老师的建议！如题，请问大家，谁知道在哪能买到内径大约0.2~0.4的PE管，我想用于SD大鼠侧脑室置管，本来是用的麻醉科硬膜外导管，但有人说，太粗了，实验结果证明，确实是有问题，因此，想请大家能帮帮我！

我做的是杏仁核内埋管，用八号针头做导管。大鼠抗感染的能力很强，我在练手的时候器械就用酒精消了毒，也没打抗生素，都活着呢。

502胶只能先粘一下，然后就得上牙托水泥。

我们的立体定位仪很先进，机器上带的钻头，比牙科钻好用。关于我的课题，我想问一下各位老师，可不可以不做置管的模型，就是直接从侧脑室给药，随后就用骨水泥把钻孔封闭，紧接着在10分钟内完成气管插管，颈动脉穿刺，冠脉节扎-大致意思就是直接给药，不养大鼠。

我试验了一只大鼠，但老鼠在再灌注的第一个小时后，就出现了严重的心律失常，不久后就死亡了，我想可能是实验室内周围环境温度较低，大鼠三处手术，急性应激，机体出现失代偿所造成的

同时，这样做，侧脑室穿刺后的神经功能损伤，可能就看不到了置管的目的主要是需要多次给药或者是尽量避免手术带来的应激，如果可能的手术应激会影响药物的作用或实验的效果，就要置管让动物恢复一段时间再给药，如果觉得手术应激无所谓，直接脑室给药然后把皮肤缝合就好了，不感染的话一周以后就长好了