普通油茶泛素结合酶UBE2-J2的cDNA序列及蛋白质结构分析
油茶FAD2基因全长cDNA的克隆和序列分析
( e a oa r o o- od F r t r ut t eF r t d iirt n C n a Suh U i r t o oe r K yL b r oy fN n W o oe o c o Sa oe r A m nsai e t l o t nv s yf F r t t sP d f t sy t o r e i s y
谭 晓风 陈鸿 鹏 张党 权 曾艳 玲 李 魏 蒋 瑶 谢 禄 山 胡 孝 义 胡 芳 名
( 中南 林 业科 技 大学 经 济林 育 种 与栽 培 国 家林 业 局 重 点 实 验 室 长沙 400 ) 104
摘
要: FD A 2基 因 控 制 油 酸 转 化 为 亚 油 酸 , 油 茶 油 脂 合 成 代 谢 的 关 键 酶 基 因 。在 构 建 的 油 茶. S 是 E T文 库 基 础
C o igo Il e ghc N f A 2 G n o C me i oe ea l n f l— n t D A o D e ef m a la lfr n F lL F r l i
Ta a fn Ch n Ho g e g Z a g Da g u n Z n nig L e Ja gYa n Xioe g e n p n h n n q a e gYa l iW i in o n
oecai ed fC.oeea.Coig fh A 2gn o l claeU eelh ii ytei rl i ed fC. li cdi seso n lir f lnn eF D eew udf itt S orv a tel dsnh s e nse so ot a i t p su D i r n a ei p r n i p c o h oya d a pia o .F llnt D A co eo AD e e w sfrte fs t f aa d hv m ot t m at n ter n p l t n ul e g c N ln fF 2 gn a o h rt i e a ci — h i me o t n db s gme o so R E a doelpetninP R b sdo u o s utdE T l rr fC.oeea.I w s ba e yui t d f AC n vr xe s C ae no rcnt ce S i a o i n h 5 a o r b y lfr t a i
蛋白质泛素化修饰的技术路线PPT课件
针对感染性疾病的治疗,一些研究关注利用泛素化系统来抑制病毒或细菌的复制。通过 调节泛素化修饰相关信号通路,可以抑制感染进程并改善疾病预后。
04
泛素化修饰的干预手段
药物干预
01
02
03
靶向药物
针对特定蛋白质的泛素化 修饰,开发靶向药物,以 调节蛋白质的稳定性、定 位或功能。
开发泛素化修饰相关药物
基于对泛素化修饰机制的理解,开发能够调节泛素化修饰的药物,用于治疗相关疾病。
THANK YOU
抑制酶活性
通过抑制泛素化修饰相关 酶的活性,调控蛋白质的 泛素化水平,进而影响其 生物学功能。
激活酶活性
激活泛素化修饰相关酶的 活性,增加特定蛋白质的 泛素化修饰,以调节其生 物学行为。
基因治疗
基因敲除
通过基因敲除技术,消除 与泛素化修饰相关的基因, 从而调控蛋白质的泛素化 状态。
基因过表达
过表达与泛素化修饰相关 的基因,增加特定蛋白质 的泛素化修饰,以调节其 生物学功能。
泛素化修饰在神经退行性疾病中的作用
泛素化修饰可以调控神经元的生长、突起和凋亡等过程。在神经退行性疾病中,异常的泛 素化修饰可能导致神经元功能障碍和死亡。
神经退行性疾病治疗中的泛素化修饰研究
针对神经退行性疾病的治疗,一些研究关注调节泛素化修饰相关信号通路。通过抑制某些 泛素化酶的活性或调节相关信号通路,可以延缓神经元死亡和疾病进展。
蛋白质泛素化修饰的技术路线ppt 课件
目录
• 泛素化修饰概述 • 泛素化修饰的检测技术 • 泛素化修饰相关疾病研究 • 泛素化修饰的干预手段 • 展望与未来研究方向
01
泛素化修饰概述
泛素化修饰的定义
油茶FBPase基因的全长cDNA克隆及序列分析
C m lao ir B aee cddpo i osnt oti dsld . h stegn scF P s a e O— a l lf aF P s n o e rt n de o cna i f e tu e ei —B aen m dC e i ee e n u i h
Absr c F t a t: BPa e i neo h e n y sc n r li g Cav n Cy l s s o ft e k y e z me o toln l i ce,W h c epst mprv a i i- ih h l o i o e Clv n cr c lto o a c l r t h ts nhei f ce c fp a t .Th u ll n t DNA fF u ai n t c ee a e p oo y t tc e i n y o ln s i e f l e gh c o BPa e g n ss p r t d s e e wa e a ae
油茶 F P s 基 因 的 B ae 全长 c N D A克 隆及 序列 分析
谭 晓风 , 曹彦妮 , 郭静怡 , 凯 刘
( 中南林业科技大学 经济林育种与栽培 国家林业局重点实验室 , 湖南 长沙 4 0 0 ) 104
摘要 :B ae是调控 Cai循 环的关键 酶之 一 , F Ps l n v 加速 Cai lv n循环有利 于提 高植物 的光合效率 。在油茶 e N D A文
l n e t f ulo d c s e un erva a te o prblyo C m lao i r n o uu tcoa— i m n o n c t eai q e c ee l t th m aa it f a e i l e adpp l i cr g ei ds sh c i l e a f srh
12_泛素蛋白酶体途径及其对植物生长发育的调控xiedx
植物学通报 2006, 23 (5): 564 ̄577 Chinese Bulletin of Botany综述 . 茉莉酸泛素蛋白酶体途径及其对植物生长发育的调控宋素胜,谢道昕 *清华大学生物科学与技术系, 北京 100084摘要泛素蛋白酶体途径主要由泛素活化酶、泛素结合酶、泛素蛋白连接酶和26S蛋白酶体组成。
泛素活化酶首先激活泛素分子, 然后把泛素转移到泛素结合酶上。
泛素结合酶结合泛素蛋白连接酶并把泛 素转移到底物蛋白上使底物泛素化, 或把泛素转移到泛素蛋白连接酶再使底物泛素化。
泛素化的蛋白通 常通过26S蛋白酶体进行降解。
初步的研究结果表明, 植物生长发育的很多方面受泛素蛋白酶体介导的 蛋白降解途径的调控。
关键词 26S蛋白酶体, 泛素, 拟南芥The Ubiquitin-Proteosome Pathway and Plant DevelopmentSusheng Song, Daoxin Xie*Department of Biological Sciences and Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, ChinaAbstractThe ubiquitin/26S proteosome pathway mainly consists of ubiquitin activating enzyme (E1),ubiquitin conjugating enzyme (E2), ubiquitin protein ligase (E3), and 26S proteasome. In the initial reaction, E1 activates the Ub by coupling ATP hydrolysis, the activated Ub is then transferred to an E2. The E2 either transfers ubiquitin directly to the E3 in the case of HECT E3s or binds the E3 and transfers the ubiquitin to the substrate. Polyubiquinated proteins are eventually degraded by the 26S proteasome. In plants, regulated protein degradation by the ubiquitin/26S proteosome contributes significantly to development by affecting a wide range of processes, including hormone signaling, photomorphogenesis, and flower development. Key words 26S proteosome, ubiquitin, Arabidopsis蛋白质是一种非常重要的生命大分子。
泛素_蛋白酶体通路
①泛素2蛋白酶体通路肖炳 综述 李桂源3 审校(中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南长沙410078)[摘要] 泛素2蛋白酶体通路介导的细胞蛋白降解是一个复杂、缜密的调控过程,同时在细胞周期、基因转录及表达、抗原提呈和炎症演进等方面发挥调控作用,尤其是通过降解细胞各通路的抑制因子或/和激活因子发挥上调或下调作用;而且泛素2蛋白酶体通路的异常与诸多疾病如恶性肿瘤、神经变性疾病、遗传性疾病、炎症、心肌病的致病机制有关。
对于细胞应用该通路降解靶蛋白机制的阐明,将有助于研发这些疾患的治疗方法。
[关键词] 泛素2蛋白酶体通路; 蛋白质类,代谢; 发病机制[中图分类号] R364 [文献标识码] [文章编号] 167227347(2004)022******* 20世纪60~80年代,生物学研究主要集中在核酸及蛋白质的翻译上,蛋白质的降解则被人们忽视,误认为是一个非特异的终端过程。
近年来,随着对泛素2蛋白酶体通路(ubiquitin 2proteasome pathway )的深入研究,发现该通路介导的细胞蛋白降解是一个复杂、缜密的调控过程,是细胞调控的重要机制。
这些蛋白包括细胞周期素、细胞周期素依赖性激酶抑制因子,p53,c 2J un ,c 2Fos 等,因此泛素2蛋白酶体通路介导的蛋白降解在细胞周期、基因转录及表达、抗原提呈和炎症演进等方面发挥调控作用,尤其是通过降解细胞各通路的抑制因子或/和激活因子发挥着上调或下调作用。
泛素2蛋白酶体通路的异常与诸多疾病如恶性肿瘤、神经变性疾病、遗传性疾病、炎症、心肌病[1]有关。
阐明泛素2蛋白酶体通路将有助于制定治疗这些疾病的新策略[2~4]。
1 泛素2蛋白酶体通路在真核生物细胞,泛素2蛋白酶体通路是蛋白质选择性降解的主要方式,它能催化泛素(ubiquitin ,Ub )共价地结合在靶蛋白上,随后靶蛋白被依赖A TP 的26S 蛋白酶体(proteasome )选择性降解成短肽。
cdna-aflp原理
cdna-aflp原理
cDNA-AFLP(cDNA-Amplified Fragment Length Polymorphism)是一种用于研究基因表达的分子生物学技术。
它结合了cDNA(互补DNA)合成和AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)
技术,用于研究不同组织或条件下基因表达的差异。
cDNA-AFLP的原理涉及以下几个步骤:
1. cDNA合成,首先,从不同组织或条件下的RNA中合成cDNA。
这通常涉及使用逆转录酶(reverse transcriptase)将RNA转录成cDNA。
这样可以获取基因表达的信息,因为cDNA是由RNA转录而来的,反映了细胞中的基因表达情况。
2. cDNA片段的选择性扩增,接下来,利用AFLP技术中的限制
性内切酶对cDNA进行限制性酶切。
然后使用适配器引物(adapter primers)对酶切后的cDNA片段进行扩增。
这一步能够产生大量的cDNA片段,这些片段的长度和序列会反映出基因表达的差异。
3. 片段分析,扩增后的cDNA片段通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进
行分离和检测。
这样可以得到cDNA片段的长度和数量信息。
通过对不同样本中cDNA片段的长度和数量进行比较分析,可以发现在不同条件下基因的表达差异。
这种技术可以用于寻找与特定生物学过程或环境条件相关的基因表达差异,从而揭示基因调控的机制和生物学功能。
总的来说,cDNA-AFLP技术结合了cDNA合成和AFLP技术,能够全面地分析基因表达的差异,对于研究基因调控和生物学功能具有重要意义。
植物所揭示E2泛素结合酶参与番茄果实成熟调控
[ 1 】 王铭堂, 张 涛, 肖长坤 . 北京农 民 田间学校 实践与探讨 【 J 】 . 北京农业 职业学 院学报 , 2 0 1 1 , 2 5 ( 3 ) : 5 3 . 5 9 .
辅导员 的角色是多方位的 ,在不断提高农 民 学 员综 合素 质 的 同时 ,也应 该更 加 注重 自身综 合素质 的提升 。相关部 门应给予辅导员继续 学习
和提 升 的机 会 ,以适 应 农 业 发 展 和 新 时代 农 民 的
需求。
训, 2 0 1 1 ( 7 ) : 1 2 — 1 4 . 固
一
36 .
核蛋 白质的表达谱,研究组发现多个蛋 白质的表达量在r i n 突变体 中发生了变化。其 中 2 个蛋 白 S 1 U B C 3 2 和
P s MD 2 与泛素介导的蛋 白质降解途径有关。染色质免疫共沉淀和凝胶阻滞实验表 明,转录因子R I N能够 直接 与S I UB C 3 2 和P S MB 2 A的启动子 区结合 ,调控 它们 的表达。进一步的分析显示, R I N能够影响果实中 多种细胞核蛋 白的泛素化水平。 蛋 白质泛素化参与多个生物学过程的调控,但在果实成熟过程中的作用还未见报道。S I U B C 3 2 编码 一 种E 2 泛素结合酶 ,全基因组分析显示番茄 中共有5 2 个E 2 基 因。研究发现,其中5 个E 2 基 因直接受R I N 调控。 病毒介导的基因沉默 ( V I G S ) 实验证实2 个E 2 基因 ( 8 l U B C 3 2 和S I U B C 4 1 ) 参与了 果实的成熟调控。团
泛素结合酶UbcH1 0与肿瘤(文献综述)
泛素结合酶UbcH1 0与肿瘤(文献综述)陈世敏罗南萍 (综述) 刘贤锡 (审校)泛素结合酶UbcH10(Ubiquitin—conjugating enzymes,UbcH10)又称周期蛋白选择性泛素载体蛋白E2.C,属于泛素结合酶E2家族的成员⋯,是肿瘤相关的泛素结合酶口j。
在泛素介导的蛋白质降解途径中,E2蛋白的作用将来自El活化酶的泛素转至具有E3连接酶活性的特异的底物蛋白的赖氨酸残基,泛素化的靶蛋白被26s蛋白酶体识别而降解 .该泛素蛋白酶体系统(ubiquitin—proteasome system,UP—S)对调控蛋白质的动态平衡起关键作用而且对调控细胞进展(不论正常细胞还是肿瘤细胞)起决定性作用。
特异性干涉UP—S的某一环节已被认为是一种很有前途的创新性抗肿瘤治疗方法。
1 UbcH10的结构与功泛素结合酶UbeH10又称周期蛋白选择性泛素载体蛋白E2.C,UbcH10基因位于染色体20q12.13,核苷酸长度783bp,其编码蛋白氨基酸组成179个,分子量19.6KD,属于泛素结合酶磁家族的成员,是第十个被识别的泛素结合酶。
行使功能时通过1 14位活性位点的半胱氨酸形成硫酯键与泛素链接。
活性位点的半胱氨酸替换为胱氨酸形成的突变体在接受泛素时仍具有活性但不如野生型效率高。
晶体结构检测显示,UbcH10的氨基末端外延紊乱而且在活性位点附近的赖氨酸残基上有一个保守的3(10)一螺旋。
相关突变体的分析证明氨基末端外延的存在与缺失对泛素复合物的形成几乎没有影响,而活性位点附近的赖氨酸残基却起着重要作用。
泛素依赖的蛋白质水解破坏有丝分裂周期蛋白是细胞完成有丝分裂进入下一细胞周期有丝分裂问期所必需的。
该过程是在周期蛋白选择性泛素载体蛋白E2一C和有丝分裂后期促进复合物/循环体(APC/C)的催化下完成的。
APC/C是一个包含周期蛋白选择性泛素连接酶活性的20s粒子,作为E3连接酶催化泛素向特异性底物蛋白转移,有序地促进关键的细胞周期调控因子的降解,进而驱动细胞周期的进程。
《泛素结合酶UBE2N对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的调控作用机制研究》
《泛素结合酶UBE2N对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的调控作用机制研究》一、引言随着生命科学的发展,骨骼肌的生长发育和再生机制已成为研究热点。
泛素结合酶UBE2N在骨骼肌细胞中发挥着重要的调控作用,对于促进骨骼肌卫星细胞的增殖与成肌分化具有关键意义。
本文旨在探讨泛素结合酶UBE2N对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的调控作用机制,为骨骼肌再生医学提供理论依据。
二、材料与方法1. 材料本实验采用牛骨骼肌卫星细胞作为研究对象,并收集了泛素结合酶UBE2N的相关资料。
实验所需试剂、仪器等均符合实验要求。
2. 方法(1)细胞培养:采用适宜的培养基对牛骨骼肌卫星细胞进行培养,并观察其生长情况。
(2)构建模型:通过基因敲除、过表达等方法构建UBE2N 基因表达异常的牛骨骼肌卫星细胞模型。
(3)实验设计:采用实时荧光定量PCR、Western Blot等技术手段,检测UBE2N基因表达水平及其对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响。
三、结果与分析1. 泛素结合酶UBE2N的表达水平对牛骨骼肌卫星细胞的影响通过实时荧光定量PCR和Western Blot实验,我们发现泛素结合酶UBE2N在牛骨骼肌卫星细胞中表达水平较高,且其表达水平与细胞增殖和成肌分化密切相关。
当UBE2N基因表达受到抑制时,牛骨骼肌卫星细胞的增殖与成肌分化受到明显抑制;而当UBE2N基因过表达时,则能显著促进细胞的增殖与成肌分化。
2. 泛素结合酶UBE2N对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的作用机制(1)泛素化调控:泛素结合酶UBE2N参与了蛋白质的泛素化过程,通过调控相关蛋白的泛素化水平,影响蛋白质的稳定性和功能,从而影响牛骨骼肌卫星细胞的增殖与成肌分化。
(2)信号通路调控:泛素结合酶UBE2N参与了多种信号通路的调控,如Wnt、Notch等信号通路。
这些信号通路在牛骨骼肌卫星细胞的增殖与成肌分化过程中发挥着重要作用。
UBE2N通过调控这些信号通路的活性,进一步影响细胞的增殖与分化。
泛素结合酶UFC1基因的荧光表达载体构建
泛素结合酶UFC1基因的荧光表达载体构建摘要利用pEGFP-C3作为载体,构建与绿色荧光蛋白基因相连的泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)序列的真核表达质粒,观察其在真核细胞中的表达和定位,为进一步研究UFC1基因功能打下了基础。
采用RT-PCR方法从宫颈癌Hela细胞中扩增UFC1基因全长cDNA,双酶切后克隆到真核表达载体pEGFP-C3中,构建并鉴定pEGFP-C3-UFC1质粒。
经脂质体介导转染Hela细胞后,在荧光显微镜下观察目的蛋白在真核细胞内的表达情况。
双酶切鉴定和测序分析均证实,已成功构建pEGFP-C3-UFC1重组载体。
重组载体转染Hela细胞,观察到绿色荧光蛋白表达,还可见绿色荧光呈点状分布于细胞质中;而对照pEGFP-C3质粒转染Hela细胞,绿色荧光蛋白则呈弥散状分布。
成功克隆了UFC1基因,构建了pEGFP-C3-UFC1重组质粒。
AbstractTo construct eukaryotic expression plasmid of ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme(UFC1)gene linked with GFP gene with pEGFP-C3 vector and observe its expression and location in eukaryotic cells,thus it can provide a powerful tool to further studythe function of UFC1 gene.The full-length cDNA of UFC1 gene was amplified from human cervical carcinoma Hela cell by RT-PCR;UFC1 gene was cloned into eukaryotic expression vector pEGFP-C3 after double-digestion;To construct and identify the recombinant plasmid pEGFP-C3-UFC1. Then the plasmid was transfected into Hela cells by liposome,and its expression was detected by observing the expression of enhanced green fluorescent protein(EGFP)through fluorescent microscope. Recombinant pEGFP-C3-UFC1 vector was confirmed by double-digestion and sequencing. The green fluorescence was observed in transfected Hela cells. It was mostly located in the cytoplasm and distributed unequally with pEGFP-C3-UFC1 vector transfected;but it was located in cell whole and distributed equally with control vector pEGFP-C3 transfected. UFC1 gene was successfully cloned and recombinant pEGFP-C3-UFC1 vector was successfully constructed.Key wordsUFC1 gene;clone;eukaryotic expression vectorUFC1的全名为“ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1”,是一个新鉴定的类似泛素结合酶E2[1-2]功能的基因。
泛素结合酶UBE2T基因在布鲁氏菌感染过程中的作用
Vol. 49 No. 4Apr. 2021第49卷第4期2021年4月西北农林科技大学学报(自然科学版)Journal of Northwest A&F University(Nat. Sci. Ed.)网络出版时间:2020-11-04 11:25 DOI :10. )3207/j. cnki. jnwafu. 2021 04 003网络出版地址:https ://Ins . cnki. net/kcms/detai//61. 1390. S. 20201103. 0943. 003. html泛素结合酶UBE2T 基因在布鲁氏菌感染过程中的作用印双红1a ,张俊波lb!c ,易萌",蔡春连",张红",王丽蓉",陆安法2,陈创夫3 (1铜仁学院a 大健康学院,b 贵州省梵8山地区生物多样性保护与利用重点实验室(农林工程与规划学院,贵州铜仁554300;2铜仁市动物疫病预防控制中心,贵州铜仁554300;石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000)[摘要]【目的】探讨泛素结合酶E2TCUBE2T )在布鲁氏菌感染过程中的功能。
【方法】构建UBE 2T 基因过表达载体 吐V X-puro-UBE2T ,对其进行PCR 和E c o R I /Ba+H I 双酶切验证,并将其转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR )检测UBE 2T 基因过表达效果)设计并合成3条UBE 2T 基因沉默表达的 siRNA (UBE 2T -379-siRNA,UBE 2T -599-siRNA 和 UBE 2T -661-siRNA ),将其转染小鼠巨噬细胞RAW264.7, 利用qRT-PCR 检测UBE 2T 基因沉默表达效果。
采用四甲基偶氮哩盐(MTT )试验,检测UBE 2T 沉默或过表达对RAW264. 7细胞活性的影响)利用qRT-PCR ,检测M5-90感染对RAW264. 7细胞UBE 2T 基因相对表达量的影响,以及对过表达或沉默表达UBE 2T 基因的RAW264. 7细胞中含pyrin 结构域NOD 样受体家族3CNLRP3)和半胱氨 酸天冬氨酸蛋白水解酶KCaspase-1)基因相对表达量的影响。
去泛素化酶otub2 分子量
一、otub2的基本概述去泛素化酶otub2是一种与泛素化-去泛素化通路相关的蛋白质,其分子量是指其分子的质量。
otub2在细胞内起着重要的调节作用,参与调控细胞的生理功能和信号转导。
作为一种重要的调控蛋白质,otub2的分子量对于揭示其结构和功能具有重要的意义。
二、otub2的分子量的测定方法1. 质谱法质谱法是一种常用的测定蛋白质分子量的方法,其原理是将待测蛋白质进行质谱分析,根据其质荷比确定其分子质量。
利用质谱法可以准确地测定otub2的分子量,为研究其结构和功能提供重要的数据支持。
2. 凝胶电泳法凝胶电泳法也是测定蛋白质分子量的常用方法,其原理是根据蛋白质的大小和电荷特性,在电场中进行迁移分离。
利用凝胶电泳法可以粗略地确定otub2的分子量,为初步研究提供实验基础。
3. 生化方法生化方法是通过分析蛋白质分子的生化性质来测定其分子量,如通过其反应速率、亲和性等性质来推测其分子量范围。
生化方法对otub2的分子量测定提供一定的参考信息。
三、otub2分子量的研究进展1. 目前关于otub2分子量的研究进展较为有限,大部分研究集中在其生物学功能和调控机制上。
虽然其确切的分子量尚未确定,但通过多种方法的综合分析和实验验证,可以初步确定其分子量范围。
2. 一些研究表明,otub2的分子量可能与其在细胞内的功能调控密切相关,不同的分子量形式可能对其生物学活性产生影响。
准确测定otub2的分子量对于深入研究其生物学功能和作用机制具有重要意义。
四、otub2分子量的意义和应用1. otub2作为一种重要的蛋白质,在细胞信号传导和免疫调节中发挥着重要的作用。
准确测定其分子量可以为研究其生物学功能提供重要的数据支持,有助于揭示其在疾病发生发展中的作用机制。
2. otub2的分子量信息还可以为药物研发和靶向治疗提供重要的参考依据,有助于设计和筛选针对其的靶向药物,为相关疾病的治疗提供新思路和策略。
五、结论otub2作为一种与泛素化-去泛素化通路相关的重要蛋白质,其分子量对于揭示其结构和功能具有重要意义。
泛素结合酶UBE2G2基因调控胞内布鲁氏菌存活的作用
泛素结合酶UBE2G2基因调控胞内布鲁氏菌存活的作用印双红;张俊波;张孟琴;易萌;易彩霞;蔡春连;毛宏;易继海;李志强;陈创夫【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2022(50)16【摘要】为了探讨泛素结合酶UBE2G2在胞内布鲁氏菌繁殖中的作用,通过分别构建过表达载体和设计合成小干扰RNA(siRNA)对UBE2G2基因进行过表达和沉默;利用MTT比色法检测UBE2G2基因沉默或过表达对细胞活性的影响;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测布鲁氏菌M5-90感染对UBE2G2基因表达的影响;用布鲁氏菌M5-90感染过表达和沉默UBE2G2基因的细胞,利用qRT-PCR检测细胞中CHOP基因表达的变化,利用菌落计数法检测胞内细菌数量的变化,利用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、白介素18(IL-18)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化。
结果显示,获得UBE2G2基因的过表达作用的载体pLVX-puro-UBE2G2;筛选出UBE2G2基因的干扰效果最佳片段为UBE2G2-83-siRNA;UBE2G2基因沉默或过表达对细胞活性没有影响;M5-90感染可提高细胞中UBE2G2基因的表达;M5-90感染过表达UBE2G2基因的细胞,可提高细胞中LDH水平和胞内细菌数量并可抑制CHOP的表达、IL-18和IFN-γ的水平;M5-90感染沉默UBE2G2基因的细胞,可提高细胞CHOP的表达、IL-18和IFN-γ的水平并可抑制LDH水平和胞内细菌数量。
结果表明,泛素结合酶UBE2G2可调控胞内布鲁氏菌存活。
【总页数】7页(P180-186)【作者】印双红;张俊波;张孟琴;易萌;易彩霞;蔡春连;毛宏;易继海;李志强;陈创夫【作者单位】铜仁学院大健康学院;铜仁学院农林工程与规划学院;贵州省梵净山地区生物多样性保护与利用重点实验室;铜仁学院材料与化学工程学院;石河子大学动物科技学院;商丘师范学院生物与食品学院【正文语种】中文【中图分类】S182;S852.6【相关文献】1.PI3K/Akt信号通路在胞内布鲁氏菌存活中的作用2.NF-κB信号通路调控布鲁氏菌胞内存活分子机制的初步研究3.二元调控系统中的TcfSR在布鲁菌胞内存活过程中的作用及其调控基因的转录分析4.泛素相关修饰蛋白SUMO-2对RAW264.7细胞内布鲁氏菌16M存活的影响5.泛素结合酶UBE2T基因在布鲁氏菌感染过程中的作用因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
ube2s分子量
ube2s分子量
ube2s是一种酶,它在细胞中扮演着重要的角色。
它的分子量约为17千道尔顿,是由大约150个氨基酸残基组成的。
作为一个酶,ube2s在细胞中参与了泛素化过程,这是一种调控蛋白质降解的关键机制。
泛素化是一种将小泛素蛋白连接到目标蛋白上的修饰过程,从而标记目标蛋白进行降解或改变其功能。
ube2s 作为一个泛素连接酶,它能够与泛素结合并将其转移给目标蛋白。
ube2s的结构使其能够与其他蛋白质相互作用,形成复合物。
这些复合物的形成是通过氢键、离子键和范德华力等相互作用力来实现的。
这些复合物的形成对于泛素化过程的调控至关重要。
除了参与泛素化过程外,ube2s还在细胞中发挥着其他重要的功能。
它参与了DNA修复、细胞周期调控以及信号转导等关键过程。
这些功能的实现依赖于ube2s与其他蛋白质的相互作用,从而形成复杂的信号网络。
尽管ube2s在细胞中起着重要的作用,但关于它的研究还有很多待发掘的领域。
科学家们正在努力研究ube2s的结构和功能,以更好地理解其在细胞中的作用机制。
这些研究有助于揭示细胞内的调控网络,并为开发新的药物治疗方案提供理论基础。
ube2s是一种分子量约为17千道尔顿的酶,它在细胞中扮演着重要的角色。
通过参与泛素化过程和其他关键的细胞过程,它调控着蛋
白质的降解和功能改变。
尽管我们对ube2s的了解还有限,但科学家们正在努力研究它的结构和功能,以揭示细胞内的调控机制。
这些研究的进展将有助于我们更好地理解细胞的运作方式,并为药物研发提供新的思路。
植物泛素结合酶E2功能研究进展
植物泛素结合酶E2功能研究进展
王金利;史胜青;贾利强;江泽平
【期刊名称】《生物技术通报》
【年(卷),期】2010(000)004
【摘要】泛素-26S蛋白酶体途径是细胞内蛋白质选择性降解的重要途径,广泛参与植物生长发育相关过程.该途径中关键酶主要包括泛素活化酶(E1)、泛素结合酶(E2)和泛素连接酶(E3),对靶蛋白泛素化起重要作用.在简单概述泛素化过程的基础上,主要对近年来植物E2蛋白在DNA修复、光周期和维管分化调控,缺素及抗逆胁迫响应中的功能进行综述,为今后该蛋白功能的深入研究及木本植物中该功能基因的发掘奠定基础.
【总页数】4页(P7-10)
【作者】王金利;史胜青;贾利强;江泽平
【作者单位】北京市林业保护站,北京,100029;中国林科院林业研究所,北
京,100091;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101;中国林科院林业研究所,北京,100091
【正文语种】中文
【相关文献】
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F o r e s t R e s e a r c h
2 0 1 3 , 2 6 ( 6 ) : 7 4 4~ 7 5 1
文章编号 : 1 0 0 1 — 1 4 9 8 ( 2 0 1 3 ) 0 6 - 0 7 4- 0 8
普通油茶泛素结合酶 U B E 2 . J 2的 c D N A序 列 及 蛋 白质 结 构 分 析
i d e n t i f y t h e t a r g e t p r o t e i n , i n t e r a c t i o n w i t h u b i q u i t i n — p r o t e i n l i g a t i n g e n z y m e s( E 3 ) , a n d S O o n .A f u l l l e n g t h c D N A
林 萍 ,姚 小华 ,曹永庆 ,龙 伟 ,王开 良 ,滕建 华
( 1 .中国林业科 学研究 院亚热带林业研究所 , 浙江 富阳 3 1 1 4 0 0; 2 .浙江省金华市东方红林场 , 浙江 金华 3 2 1 0 2 5)
摘要 : 泛素结合酶 ( E 2 ) 是泛素/ 2 6 S蛋 白酶体途径 中 3个关 键酶 之一 , 在靶 蛋 白识别 、 与泛素 连接酶 ( E 3 ) 互作 等蛋 白的泛素依赖性水解和 N 一 末端规则依赖性水解途径 的关键环节 中起 重要 作用 。采用 S o l e x a 测序技术获得 了 1 条普 通油茶 E 2的全长 c D N A序列 , 命名为 U B E 2 一 J 2, 该基因编码 2 3 9 A A, 与其它物种 的 E 2具有较 高的一致性 和相似性 ; 同源建模 的结果表 明 : 普通油茶 U B E 2 一 J 2蛋 白具有泛素结合酶 催化位 点 ( U B C c ) , 第 8~ 1 2 2位氨 基酸碱 基为其 泛 素结合酶基 因家族 的保守 区域 , 第7 5~ 1 2 2位氨基酸残基 区域 中有 1 7个 可与泛 素形成硫酯键 中间产物 的残基 , 其
Ab s t r a c t : U b i q u i t i n — c o n j u g a t i n g e n z y m e( E 2)i s o n e o f t h r e e k e y e n z y m e s i n t h e u b i q u i t i n — p r o t e a s o m e p a t h w a y
中, 8 7位的半胱氨酸残基是该酶活性 中心位点 , 另有 5个残 基是与 E 3酶相互作 用的位点 。U B E 2 - J 2具有 C端延伸 结构 , 故普 通油茶 U B E 2 一 J 2蛋 白属 于 I I 类E 2 基 因家族 成员 。
关键词 : 普通 油茶 ; 泛素结合酶 ; S o l e x a 测序 ; 生物信息学
s e q u e n c e o f E 2 wa s c l o n e d b y S o l e x a s e q u e n c i n g t e c h n o l o g y a n d n a me d U B E 2 一 J 2 .T h i s c DNA c o d e s 2 3 9 a mi n o
a c i d s ,a n d h a s s i g n i f i c a n t a mi n o a c i d s e q u e n c e i d e n t i t y a n d s i mi l a r i t y w i t h E 2 s f r o m o t h e r o r g a n i s m.T h e U BE 2 一 J 2
( U P P ) .A n d i t ’ S v e r y i mp o r t a n t i n t h e p r o t e i n d e g r a d a t i o n p a t h w a y s d e p e n d o n u b i q u i t i n o r N — e n d r u l e , i n c l u d i n g
L I N Pi n g , Y AO Xi a o — h u a ,C AO Y o n g— q i n g ,L ONG We i ‘ A NG K a i — l i a n g ,T E NG J i a n . h u a ,W ( 1 . R e s e a r c h I n s t i t u t e o f S u b t r o p i c a l F o r e s t r y ,C h i n e s e A c a d e my o f F o r e s t y,F r u y a n g 3 1 1 4 0 0, Z h  ̄i a n g ,C h i n a ;
中图分类 号 : s 7 1 8 . 4 6 文献标识码 : A
Ch a r a c t e r i z a t i o n o f a No v e l Ub i q u i t i n ・ c o n j u g a t i n g E n z y me
f r o m C a me l l i a D o n g f a n g h o n g F o r e s t F a r m o f J i n h u a C i t y , Z h e j i a n g P r o v i n c e ,J i n h u a 3 2 1 0 2 5 ,Z h e j i a n g , C h i n a )