天然抗氧化剂的开发研究进展

郑州工程学院学报 第 :) 卷 -*4 " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " "
［)*］ 等法也可用于抗氧化酚性成 !"#$"%&#’"#(%& 分的分离和制备 +
热甲醇沉淀脱脂 后 过 葡 聚 糖 凝 胶 （ *BVTLAB’ O7" ） 柱色谱， 用甲醇洗脱， 再进行硅胶薄层层析， 用 1, 苯"A.%’L/B"乙酸展开， 将 含 ’L/\T%TK-%& 的 部 分 蒸 干， 在甲醇"水或丙酮"水中结晶 !
［1W］ 从芸苔属植物获取高抗 PB.\T， I! 6$.GB 等 氧化活性的黄酮醇： 用沸水抽提， 冻干， 再用 0,?
［’)］ 硫氰酸铁法
再用同样混合液配以乙酸乙酯、 水置换分层， 并将 脂层与水层分别取出旋转蒸发浓缩， 过无水硫酸 钠柱去水， 而后酚性物质用二维纸色谱 （ 6C） 分离 或结晶， 磷脂用薄层色谱 （ #OC） 分离等 !
［>=］ 从绿茶中获取非多 P.Q%NL 7.RLST.";NL. 等 酚性抗菌素氧化物： 采用丙酮提取沏茶后的粉碎
郑州工程学院学报 第 !) 卷第 ) 期 ABC * !)， DB * ) !""! 年 ’ 月 EBFG?6C BH =I>?JKIBF L?MNONFN> BH ,>PI?BCBJQ ->R * !""! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! 文章编号： （!""!） %(+% # %(!’ ") # "%"$ # "(
［%)］ 绿素 6 和脱镁叶绿素 7； 蛋白质， 肽及氨基酸 ， ［%$］ 维生素 8、 维生素 9、 类胡萝卜素 ； 糖与氨基酸 ［+， %&］ 褐变产物， 某些醌类化合物等 *
)
评价天然抗氧化剂活性的方法 （抗氧化能力的测定模型）
［"$］ 铁还原抗氯化能力 （ :;/<）
#*"
将 抽 提 物 与 铁—!， $， (0三 吡 啶 基 均 三 嗪 （,<,=） 试剂混合， 用 :>-"$ 作标准在 &’) ?@ 处测
［’$］
等!
@
天然抗氧化剂的提取分离
一般先将原料干制 （如冻干） 、 粉碎过筛， 根据
所提抗氧化剂的化学性质， 根据相似相溶的原则 依次分别用脂溶性较强溶剂 （如石油醚、 己烷、 氯 仿等） ， 脂溶性较弱的溶剂 （如乙醇、 丙酮） ， 水溶性 溶剂 （如醇水溶液、 水等） 萃取； 然后再蒸发浓缩， 用纸色谱、 薄层色谱或柱色谱层析分离和制备等 ! 不过， 不同的原料有所差异 !
将抽提物与亚油酸乙醇液、 磷酸盐缓冲液混 合、 密封， 暗室内 @,8 下保持 9 A ! 然后同乙醇水 液混合， 加硫氰酸铵， 再加 :BC&+ 的盐酸液， + -./ 后混合液颜色形成， 在 =,, /- 下测吸光度 ! ［"*］ ! ! # 细胞色素 C 还原法 此法为一种免疫学方法， 它是通过被培养的 以 #6( 诱导产生超氧 )(C) D C 老鼠的巨噬细胞， 阴离子， 用铁细胞色素 C 还原， 在 ==, /- 处测定 铁细胞色素 C 还原物， 看抗氧化物能否抑制超氧 阴离子的产生 ! 它以含有或不含超氧化物歧化酶 （ *;E） 为对照 ! !!& 脱氧核糖法测定抗氧化剂对羟基清除作 用
第+期 霍光华等： 天然抗氧化剂的开发研究进展 >,= ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! 吸光度 ! 用抗坏血酸氧化酶分解水提取液， 可测定 酚性组分的抗氧化能力， 氯仿提取层可用测亲脂 性组分的抗氧化能力， 未被抗坏血酸氧化酶作用 的水层测定总的水溶性成分抗氧化能力， 总的抗 氧化能力减去酚性组分抗氧化能力得抗坏血酸的 抗氧化能力 ! （ #$%&%’） ! ! " ""羧基""， #， $， %"四甲基"&"羟基"色满 对等价抗氧化能力测定 （ ()#* 阳离子基清 除法）
将抽提物加到含有脱氧核糖的磷酸盐缓冲液 中， 加入含有 FE#( 的硫酸铁铵液， +08 下水浴， 加 4G 和 71 ;1 ， 然后加三氯乙酸， 再加硫酸巴比妥 酸煮沸， 冷却， 在 =+1/- 下测吸光度 ! 其它还有铁氰酸钾法测还原力 除自由基反映抗氧化活性
［1+］ ［11］
甲醇溶解， 离心过滤， 真空浓缩， 用己烷脱脂后上 多氨柱， 依次用甲醇、 甲醇"氨水洗脱， 甲醇组分用 高压液相色谱 （76OC） （ C>W *.&.GL 柱） 分离， 用 ,]>? 三氟乙酸"水和乙腈洗脱， 收集 10, /- 吸收部分 的组分 !
收稿日期： !""! # "$ # %& 作者简介： 霍光华 （%’() # ） ， 男， 安徽当涂人， 在读博士， 副教授， 主要 从事仪器分析和食物资源的功能性成分开发利用 * 万方数据
［!］
［%"］ 薇果中获取的羟基肉桂酸、 儿茶素 ； 从蔬菜中
获取的黄酮类化合物槲皮素、 山柰酚、 杨梅素、 木
［%］ 氧化剂成为该领域的发展方向 *
!
!*"
抗氧化剂类型
酚性物质类 （包括黄酮类化合物） 酚性物质类有： 从橄榄油中分离出的羟基酪
［&］ ［(］ 醇、 酪醇 、 松脂醇、 乙酰松脂醇 ； 从芒果种仁中 ［+］ 分离出的鞣花酸、 棓酸 ； 木质素或阿拉伯木聚糖 ［4］ 与酚性物质的结合产物 ； 从茶叶中获取的表儿 ［’］ 茶素、 表棓儿茶素、 咖啡碱、 表儿茶素棓酸 ； 从蔷
［1J］ 另外， 聚酰胺柱色谱 ， 均衡反相高压液相
， 对 1， 1"二
［1@］
联苯">" （1， 苯基偕腙肼 （ E667） 基清 @， 9"三硝基） ， 氧消耗反应法， HC 分析加抗氧化剂前后的脂肪酸组成法 ! 电子自 ［J］ 万方数据 旋共 振 谱 （ 测对超氧阴离子的淬灭作用 F*I）
色谱 （I6"76OC） ， 梯度洗脱 I6"76OC 和脱线耦联
% 天然抗氧化剂的原料来源和实际 应用
天然抗氧化剂普遍取自天然可以食用的物质 中， 诸如： 蔬菜、 水果、 调味料、 中药材、 海草等， 农 业和食品工业下脚料 等* 天然抗氧化剂目前多用于油脂的抗氧化， 以 增加其稳定性； 也用于食品贮藏和加工 * 如茶叶甲 醇提取物用于深度 （%4"5 ） 油炸土豆片， 虾壳提取 物用来提高不同种类海底石鱼的颜色稳定性和控 制胡萝卜素因抑制自氧化或脂氧化酶活性引起的 降解， 对饮料和肉等进行护色和保鲜 * 另外， 因氧 化与人类的某些退化病如不同类型的癌、 心血管 病、 神经学方面的病、 白内障及氧化协迫的其它机 能障碍等密切相关， 天然抗氧化剂还被普遍用于
［:,］ 发现黄芩黄素 （ EFP/FQRPO） 能强 NF#%DO 3D 等 烈抑制膜脂氧化， 而其衍生物黄芩苷 （ EFP/FQPO） 、 木
［%%］ 犀草素、 芹菜素等 *
!*!
磷酸脂类 磷酸脂类有： 磷脂酰丝氨酸、 溶血磷脂酰胆
， 某些微生物发酵产品
［)］
碱、 磷脂酰肌醇、 （神经） 鞘磷脂、 磷脂酰胆碱、 磷脂
［+， %!］ 酰乙醇胺、 磷脂酸、 甘油磷脂等 ， 还有不饱和
脂肪酸类 * !*# 其他类 其他有： 与叶绿素有关的抗氧化物如脱镁叶
天然抗氧化剂的开发研究进展
霍光华， 高荫榆， 陈才水
（南昌大学 生物科学和食品工程学院， 江西 南昌 ))""!’） 摘要：概述了近 !" 年来天然抗氧化剂在原料来源、 抗氧化剂类型、 评价模型、 提取分离方法、 结构鉴定和构效关系等方面所取得的主要成就， 并对存在的和有待深入研究的一些问题进行 了讨论 * 关键词： 天然抗氧化剂；类黄酮； 开发 中图分类号： ,-!"!.) 文献标识码： /
［"’］
用氯仿和乙酸乙酯去杂后总类黄酮上 X%B&- 多 氨柱， 用氯仿和氯仿"甲醇梯度洗脱， 再跑 *.&KY%& 用 :5">1 纸色谱展开取对照品相同比 Z4"1=@ 板， 移植的部分 !
［10］ 从蛇麻草中提取多功能活 [L/ :! *\BMB/S 等 性类黄酮 （ V$B/QY&LM%/%.AS） ： 用丙酮或氯仿提取， 用