云芝糖肽水提醇沉提取工艺
云芝多糖的提取
云芝多糖的提取分离第一章文献综述云芝是担子菌纲云芝属的一种杂色菌，腐木生，是珍贵的药用真菌，其子实体具有清热消炎之功效，临床上用于治疗慢性气管炎，慢性肝炎等疾病[1]。
这只要是和云芝多糖密切相关，云芝多糖（PSK）是从担子菌纲云芝（Coriolus versicolor in basidiomycete）中提取的一种蛋白质多糖，它具有免疫调节功能，已用于肿瘤和炎症的辅助性治疗[2]。
它能激活免疫细胞，提高机体免疫功能而对正常细胞没有毒副作用[3]。
根据张翼伸等的报道[4]，用水醇提取法从天然云芝子实体中分离提取，获得了糖和蛋白含量较恒定的蛋白结合多糖，通过对其生物学效应的研究，发现小鼠腹腔注射PSK有提高其腹腔巨噬细胞硒谷胱甘肽过氧化物酶（SeGSHPx）的活性和基因表达水平，保护巨噬细胞免受tbOOH和氧化修饰LDL（Ox-LDL）引起的脂质过氧化物损伤[5-9]。
现在除了用水醇提取法以外，还有的人采用盐提法，酸提法甚至超声波法等等。
1.1水提法不同因素的比较1.1.1真菌多糖提取条件影响真菌多糖提取率的因素很多，有培养方法，提取原材料的状态，温度、介质、介质浓度、提取时间、浸提次数、原料的预处理等等，做真菌多糖的提取时要充分考虑到这些因素，因为一个因素的不同就会对提取量造成很大的影响。
1.1.2原材料对多糖提取的影响真菌原材料的不同对多糖的提取会产生一定的影响，有研究指出姬松茸菌丝体的多糖提取率高于子实体[10]。
而香菇现在则多从子实体中提取多糖，当存在着周期长，成本高等问题。
而且就算同是从云芝中提取多糖，还有野生和栽培之分，根据田光辉等人的研究，发现栽培的云芝用水提法提取出的多糖含量要高于野生菌株。
1.1.3提取方法的比较水提法中还包括了不同的提取方法，有干提法，湿提法等等。
参考国内外已有的研究资料，基本可以归类为三类：A.将湿菌丝体不做任何处理，直接加水提取；B.将菌丝体烘干，粉碎，加水提取；C.将菌丝体用组织捣碎机捣碎后，加水提取。
液体发酵法生产云芝胞内糖肽
液体发酵法生产云芝胞内糖肽
余晓斌;胡卫珍;濮文林
【期刊名称】《食品与生物技术学报》
【年(卷),期】2006(025)001
【摘要】通过筛选比较6株云芝菌种,获得液体发酵生产云芝糖肽的较佳菌株CV-S,经优化摇瓶发酵,放大至30 L罐发酵,28 ℃发酵4 d,菌丝体干重达24.9 g/L,菌丝体破碎后,经超滤浓缩,醇沉干燥后,云芝胞内糖肽产率达2.23 g/L,糖肽总糖为55.58%,肽33.53%,经HPLC检测其相对分子质量高于10 000的有2个组分,分别为783 600和27 700,所提取产品的出峰时间与标准品基本一致.
【总页数】5页(P65-69)
【作者】余晓斌;胡卫珍;濮文林
【作者单位】江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214036;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;江南大学,生物工程学院,江苏,无锡,214036;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;南京老山药业股份有限公司,江苏,南京,211811
【正文语种】中文
【中图分类】Q93
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云芝糖肽发酵液提取工艺的优化
ห้องสมุดไป่ตู้
・
工 艺制备 ・
云芝糖肽发酵 液提取工艺的优化
丁亚波 黄建民 张华峰 曹云锋 冯陈娟 田学 国（ 江 苏 省 江山 制 药 郁艮 公 司 泰 州 ２ １ ４ ５ ０ ０ ）
摘要 ： 目的 ： 对云芝糖肽发 酵液提取 的方法进行优化 ， 提 高成品的质量和收率。方法： 以质量和收率为指标 ， 通过 对云芝糖肽发 酵液进行 纳滤处理 ， 并进行醇沉工艺的优化 ， 得到 了符合质量要 求的云芝糖肽成品。结论 ： 通过对云芝糖肽发 酵液进行纳滤处 理和二次醇沉 ， 可以大幅降低 成品 的酸不溶性灰分 ， 避免 了返工的损 失， 使 云芝糖肽成品的质量和收率得到大幅的提 高。 关键词 ： 云芝糖 肽 发酵液 纳滤 醇沉 酸不溶性灰 分 中图分 类号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． ２ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号： １ ６ ７ ２ — ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ０ ４ ４ — ０ ２ 云芝糖肽是从云芝 中提取 出的多糖 ，也可以从生物发酵 水进行套洗 ， 然后浓缩 至 ２升体积 ， 醇沉后离心烘 干（ 实 验结 的菌丝体中提取 ， 能抑制 胃癌 、 肺癌 、 淋 巴癌 、 白血病等多种癌 果见表 ２ ） 。 细胞的增生 ， 是一种新型 的抗肿瘤免疫调节剂。传统的云芝糖 表２ 肽发酵液采用热水浸 提醇沉法 ， 采取氯仿一 正 丁醇萃取去除游 纯水套洗体积（ Ｌ ） ０ ２ ０ ６ —— —— 离蛋 白等方法 ， 所得产品含有大量鞣质 、 蛋 白质 、 脂肪 等 ， 特别 成 品得 率 （ ％） ７ ２ ． ２ ６ ８ ． ５ ６ ５ ． ２ ６ ３ ． ８ ５ ４ ． ７ ５ ０ ． ３ 是酸不溶物经常超标 ， 不能达到成 品质量要求 。本文在实验 的 总灰分（ ％） ２ ５ ． ９ ２ ４ ． ６ ２ １ ． ９ ２ ０ ． ４ １ ９ ． ８ １ ８ ． ５ 基础上 ， 结合纳滤膜 的使用 ， 进一步对醇沉工艺进行 了优化探 酸不溶物灰分（ ％） １ ． ８ １ ． ２ ０ ． ６ ０ ． ４ ０ ． ４ ０ ． ３ 讨， 取得 了积极 的进展 ， 可以运用于生产实践。 ｌ 材 料 和 方 法 实验结果表 明 ，成 品灰分和酸不溶物含量随套水的体积 但收率也随之降低 。 １ ． １ 材料 ： 云芝糖肽发酵液 ， 取 自江苏华信制药有限公司 。 纳滤 加大而降低 ， 膜， 三达膜（ 厦 门） 科技有限公司提供 。乙醇 ： 药用级 ， 南京化学 ２ ． ２ 醇沉的影响 ： 传统 的醇沉采 用一次醇沉 ， 料液浓缩 至规定 体积后 ， 用 乙醇直接醇沉至乙醇度 ７ ０ ％后离心并烘干。 生产 中 试剂有限公 司； 纯水 ： 公 司 自制 。 １ ． ２ 试验方法 ： 云芝糖肽发酵液一菌丝体一热水浸提一过滤一 发现析 出物极易成团 ， 且成品质量极不稳定 ， 云芝糖肽含量波 纳 滤一 浓 缩 一 一 次 醇 沉一 二 次 醇 沉一 离心 过 滤 一 烘 干 。 动很大， 有时合格 ， 有时低于规定范围。实验采用二次醇沉法进 １ ． ３ 测 定 方 法 行分步醇沉， 取得了很好的效果。称取 １ 升浓缩液每次 ， 分别用 １ ． ３ ． １ 多糖含量 ： 苯酚一 硫 酸法 ， 按 国家药 品标准 ＷＳ — Ｘ Ｇ 一 ０ ２ １ — 直接醇沉法和二步醇沉法进行醇沉 比较实验（ 结果见表 ３ ） 。 表３ ２ ０ ０ ２提供的方法 ； １ ． ３ ． ２分子量与分子量分布 ： 高效液相色谱 ， 凝 胶色谱柱为 ｕ ｌ — ｔ ｒ ａ ｈ ｕ ｄ ｒ ｇ ｅ ｌ Ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ７ ． ８ ｍ ｍｘ ３ ０ ０ ｍ ｍ；流动相为 ０ ． ０ ２ ｍｏ ｌ ／ Ｌ醋酸钠 溶液 ；流速为每分钟 ０ ． ５ ｍ ｌ ； Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ １ １ ０ ０高效液相 色谱仪 ， 采 用示 差折光 检测器 。标 准品为 已知分子 量 （ 重 均分子 量为 １ ０ ０ ０ ０ — ４ ０ ０ ０ ０ ０ ） 的系列右旋糖酐 ； １ ． ３ ＿ ３ 蛋 白质含量 ： 分光光度法 ： １ ． ３ ． ４水分 ： 减压干燥法 ； １ ． ３ ． ５炽灼残渣 ： 炽灼残渣检查法 ； １ ． ３ ． ６酸不溶物含量 ： 重量法 。 ２ ． ３ 平行 ｆ 生 实验 ： 每次取 ２ ０ 公斤菌丝体 ， 热水浸提后取清液纳滤 ， ２结 果与 讨 论 并套水 ６ ０ 升， 然后浓缩至 １ 升， 并进行二次醇沉至乙醇度 ７ ２ ％， ２ ． １ 纳滤 的影响 最后离心并烘干 ， 粉碎后得到褐色粉末（ 实验结果见表 ４ ） 。 表４ ２ ． １ ． １ 纳滤膜的影 响： 纳滤是一种新 型膜技术 ， 纳滤膜可去除直 径为 １ 个纳米左右的溶 质粒子 ，截 留分 子量为 １ ０ ０ ～ １ ０ ０ ０ Ｄ ａ ｌ — 批 号 ２ ０ １ ２ ０ ６ １ ８ ２ ０ １ ２ ０ ６ ２ ３ ２ ０ １ ２ ０ ７ １ １ ２ ０ １ ２ ０ ７ ２ ９ ２ ０ １ ２ ０ ８ ２ ２ ｔ ｏ ｎ ， 能截 留多糖类物质 ， 有效 去除溶液 中的 ｃ ａ ２ ＋ 、 Ｍ ｇ ２ ＋低分子 有机物 、 硝酸盐 、 硫酸盐 、 氟、 硼、 砷 等有害物质。 实验发现 ， 纳滤膜的选择 ， 特别是纳滤膜 的孔径大小对成 品的收率和酸不溶物含量有直接 的影响 。分别取 １ ０ ０升浸提 清液用不同孔径规格的纳滤膜进行纳滤 ，纳滤至体积为 ５升 后浓缩至 １ 升体积 ， 醇沉后离心烘 干（ 实验结果见表 １ ｏ
一种生产云芝糖肽的方法[发明专利]
![一种生产云芝糖肽的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/52b1a46084868762cbaed5b4.png)
专利名称：一种生产云芝糖肽的方法专利类型：发明专利
发明人：杜千有,关秀清
申请号：CN03136995.2
申请日：20030526
公开号：CN1552732A
公开日：
20041208
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种生产云芝糖肽的方法，其目的是提供一种简便、低成本的生产云芝糖肽的方法。
本发明所提供的方法基本上包括以下步骤：(1)粉碎野生云芝子实体，加5－15倍体积的水后，再用氨水、调节pH至10－14；(2)加热保持微沸1－3小时，然后经100目一140目过滤，收集滤液即提取液；(3)将步骤(2)中得到的残渣再重复步骤(1)和(2)一次或两次；(4)合并步骤(2)和(3)中的提取液，得到云芝糖肽粗提物；(5)精制粗提物，得到云芝糖肽产品。
本发明利用野生资源，采用pH法提取云芝糖肽，生产成本低，所生产的云芝糖肽，多糖蛋白有效成分含量高，活性不易被破坏，减少了在发酵过程的副产物或化学污染，且抗癌效果显著。
申请人：中国科学院植物研究所
地址：100093 北京市海淀区香山南辛村20号中科院植物所
国籍：CN
代理机构：北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人：关畅
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云芝多糖的生产工艺
云芝多糖的生产工艺云芝多糖（Polysaccharides of Yunzhi）是一种由云芝（Trametes versicolor）中提取的多糖类化合物。
多糖是由许多糖分子组成的大分子化合物，具有多种生物活性和药理作用。
云芝多糖具有极大的医药价值，已经成为目前广泛应用于医学和保健品行业的重要原料之一。
云芝多糖的生产工艺通常包括以下几个步骤：1. 原料选择：选择高品质的云芝作为原料，通常采用新鲜的云芝菌丝体或者其它云芝的培养物作为发酵源。
云芝菌丝体的产量和含量会直接影响到后续工艺中多糖的产量和纯度。
2. 发酵培养：将培养物移入发酵容器中，提供适宜的环境条件，包括温度、湿度、光照等。
通常采用液体发酵的方式，通过搅拌等手段均匀分散培养物，以促进细胞的生长和代谢。
云芝在适宜的温度和湿度下进行培养，一般需要较长的时间，通常在10-15天左右。
3. 提取和纯化：经过一段时间的培养后，云芝多糖会积累在菌丝体或者发酵液中。
为了得到高纯度的多糖，通常需要对培养物进行提取和纯化操作。
一般的方法是采用醇沉淀、离心、滤过等步骤进行多糖的分离和浓缩。
然后通过进一步的纯化步骤，如超滤、丙酮沉淀等，去除杂质，提高多糖的纯度。
4. 冷冻干燥：多糖溶液通过低温冷冻和真空干燥技术，使其转化成干燥的粉末状。
冷冻干燥可以有效地保留多糖的活性和稳定性，延长其保存时间。
以上是云芝多糖的主要生产工艺步骤。
但是需要注意的是，不同厂家和生产工艺会有一定的差异，因此具体的生产工艺可能会有所不同。
此外，云芝多糖的质量和活性也受到许多因素的影响，包括原料的选择、培养条件、提取和纯化方法等。
因此，在生产过程中需要严格控制各项参数，以确保产品的质量和稳定性。
总的来说，云芝多糖的生产工艺涉及到原料选择、发酵培养、提取和纯化、冷冻干燥等多个步骤。
通过科学合理地控制这些步骤，可以得到高质量、高纯度的云芝多糖，为医药和保健品行业提供良好的原料基础。
微滤-超滤提取云芝胞内糖肽工艺的研究
微滤-超滤提取云芝胞内糖肽工艺的研究
纪乐军;陈士翠;张丽;田智斌
【期刊名称】《食品与发酵科技》
【年(卷),期】2014(000)002
【摘要】云芝胞内糖肽是由杂色云芝[Polystictus versicolor（L.）Fr.]经深层液体发酵培养，经提取获得的糖肽类物质。
云芝发酵液适合微滤-超滤提取，超滤膜通量易恢复，微滤超滤工艺得到的云芝胞内糖肽总糖54.7%、单糖7.1%，对单糖的去除和对多糖的截留效果优于传统的水提-醇沉法。
【总页数】4页(P27-30)
【作者】纪乐军;陈士翠;张丽;田智斌
【作者单位】江苏神华药业有限公司，江苏金湖 211600;金湖县食品药品监督管理局，江苏金湖 211600;山东临沂天元医院，山东临沂 276000;江苏神华药业有限公司，江苏金湖 211600
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.1
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云芝多糖提取方法
云芝多糖提取方法云芝（Hericium erinaceus）是一种有着丰富药用价值的真菌，其主要有效成分为多糖，具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，提取云芝多糖成为研究云芝药用价值的重要环节。
目前，有多种方法可以提取云芝多糖，包括水提法、酶解法、超声波法、蒸发浓缩法、冷冻干燥法等。
下面将分别介绍几种常用的提取方法。
1.水提法水提法是最常用的云芝多糖提取方法之一、其基本操作步骤为：将云芝菌体研磨成粉末，加入适量的水，进行浸泡提取，然后进行过滤、浓缩、沉淀、冷冻干燥等步骤，得到多糖提取物。
2.酶解法酶解法是利用酶对云芝菌体进行酶解，使多糖从细胞内部释放出来。
常用的酶有纤维素酶、蛋白酶等。
具体操作步骤为：将云芝菌体研磨成粉末，加入适量的酶液，进行酶解反应，然后进行过滤、浓缩、沉淀、冷冻干燥等步骤，得到多糖提取物。
3.超声波法超声波法是利用超声波的机械振动作用，破坏云芝细胞壁，加快多糖的释放和提取。
具体操作步骤为：将云芝菌体研磨成粉末，加入适量的溶剂，使用超声波提取装置进行超声波处理，然后进行过滤、浓缩、沉淀、冷冻干燥等步骤，得到多糖提取物。
4.蒸发浓缩法蒸发浓缩法是利用蒸发器将溶液中的水分蒸发掉，从而得到浓缩的多糖提取物。
具体操作步骤为：将云芝菌体研磨成粉末，加入适量的溶剂，进行浸泡提取，然后使用蒸发器将溶液中的水分蒸发掉，得到浓缩的多糖提取物。
5.冷冻干燥法冷冻干燥法是利用低温和真空条件下，将溶液中的水分冻结成固态，然后通过升华的方式脱除水分，从而得到干燥的多糖提取物。
具体操作步骤为：将云芝菌体研磨成粉末，加入适量的溶剂，进行浸泡提取，然后进行冷冻干燥处理，得到干燥的多糖提取物。
总的来说，提取云芝多糖的方法繁多，科学家们可以根据实际需要选择合适的方法。
这些方法各有优缺点，可以互相补充，提高多糖的提取效率。
值得注意的是，提取过程中要注意实验条件的控制，确保多糖的活性和稳定性。
此外，提取云芝多糖的方法还可以结合分离纯化和结构表征等技术手段，进一步深入研究云芝多糖的分子结构和生物活性。
正交试验法优选云芝多糖醇沉工艺的研究
正交试验法优选云芝多糖醇沉工艺的研究
林德祥;邱巨香;陈叶明
【期刊名称】《南京中医药大学学报》
【年(卷),期】2005(21)5
【摘要】目的确定云芝多糖的醇沉工艺.方法以云芝多糖含量为指标,采用正交试验法优选云芝多糖的醇沉工艺.结果药液浓缩至比重1.25,加4倍95%乙醇,醇沉温度25℃,醇沉24 h,可使云芝多糖含量达35%.结论正交试验结果可为云芝多糖醇沉工艺的确定提供实验依据;工艺经生产实践检验,切实可行.
【总页数】3页(P328-330)
【作者】林德祥;邱巨香;陈叶明
【作者单位】南京老山药业股份有限公司,江苏,南京,211811;南京老山药业股份有限公司,江苏,南京,211811;南京老山药业股份有限公司,江苏,南京,211811
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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水提醇沉操作要点
水提醇沉操纵要点之樊仲川亿创作在中药生产过程中,乙醇沉淀法是经常使用于中药水提取液的纯化精制办法.该法的原理是,药材先经水煎提取,其中生物碱、有机酸盐、氨基酸类等水溶性有效成分被提取出来,同时也浸提出很多水溶性杂质.醇沉法就是利用有效成分能溶于乙醇而杂质不溶于乙醇的特性,在加入乙醇后,有效成分转溶于乙醇中而杂质则被沉淀出来.醇沉的目的是为了除去杂质保存药物有效成分,因而醇沉单元操纵工艺及其设备的适用性将密切关系着中药产品的平安性、稳定性和有效性,与产品的剂型和质量是不成联系的有机整体.1、影响醇沉工艺的因素①初膏浓度及温度为了包管醇沉时尽量除去杂质,同时减少有效成分损失和乙醇耗量,一般要将药材水煎液浓缩到一定浓度的初膏.初膏浓度过高,则药液黏稠度较大,乙醇与药液难以充分接触,所产生的沉淀易包裹药液,造成有效成分损失；初膏浓度过低则药液量较大,需耗费大量乙醇.因此,选择适宜的初膏浓度对水提醇沉工艺很是重要.孙月霞等对板蓝根水提取液进行实验研究,得出了最佳初膏浓度为1∶1～1∶2之间.实验研究和文献数据阐发标明,初膏浓度并不是决定醇沉工艺别离纯化的关头性因素,但它决定最少的乙醇用量.②乙醇用量及乙醇浓度通常当含醇量为50 ～60 时可除去淀粉等杂质；含醇量达60时,无机盐开始沉淀；含醇量达75 以上时,可除去蛋白质等杂质,当含醇量达80 时,几乎可除去全部淀粉、多糖、蛋白质、无机盐类杂质,但是鞣质、水溶性色素、树脂等不容易除去.醇沉液中含醇量的凹凸与药物有效成分的溶解有着密切的关系,随着醇沉液含醇量的加沉淀加快 ,通常醇沉液的含醇量在60 ～75 之间.醇沉的含醇量如在70 ～75 之间,一般宜用90 左右的乙醇,此时所耗乙醇体积较少,与用95 浓度的乙醇相比,回收蒸馏要容易得多,乙醇单耗和能源消耗亦低；若醇沉液含醇量低,则所用乙醇浓度亦可相应低些.肖琼等专门研究了乙醇浓度和乙醇总量对中药醇沉工艺的影响.结果标明,醇沉精制过程中当乙醇总量低于某一临界乙醇总量时,醇溶物的量随乙醇用量增加而增加；高于临界乙醇总量时,增加趋势减缓直至不再增加.③醇沉温度与时间醇沉时间与罐内液温有直接的关系.醇沉温度低,沉淀物析出与沉降的速度加快,所需的静置时间短,反之则长.加醇时药液温度不克不及过高,主要以避免乙醇挥发损耗.一般等含醇药液慢慢降至室温时,再移至冷库中,于5～10℃下静置24～48 h,若含醇药液降温太快,微粒碰撞机会减少,沉淀颗粒较细,难于过滤.可见,静置时间过长是导致操纵周期过长的主要原因.④加醇方法在中药生产过程的醇沉工艺中,主要是将乙醇导入常温或低温浸膏中,进行沉析,醇沉初始就加入大量高浓度乙醇,倘若搅拌不匀未能将乙醇分离,造成局部区域含醇量过高,淀粉、蛋白质类迅速沉析并包裹浓缩液.随着乙醇的增加包裹层质地越来越致密而难以分离,势必影响醇沉效果.分次醇沉或以梯度递增方法逐步提高乙醇浓度,有利于除去杂质,以减少有效成分的损失.但此时醇沉操纵较为麻烦,乙醇用量也大.有时,为了减少乙醇耗量,降低生产成本,将水煎提取液浓缩至规定比重后先放置沉淀桶内沉淀24 h,弃去沉淀物,再加入乙醇进行沉淀.⑤搅拌速度搅拌在醇沉过程中的作用与在其他工艺过程中的作用相似,有利于提高药液与乙醇的相际接触面积,提高药液与乙醇的均一性.一般情况下,随着醇含量的增加,沉析速度加快,沉析完全,当醇含量达到80 时,几乎可除去全部蛋白质、多糖和无机盐类杂质.但是随着醇沉浓度的升高,有效成分易被沉淀物包裹而造成损失.因此,醇沉时应提高搅拌速度,缓缓加入乙醇,以避免药液中局部乙醇浓度过高造成有效成分被沉淀物包裹所造成的损失.因此,在醇沉工艺中,搅拌速度应有一适宜的规模.搅拌速度过快则能耗增大,噪音增强,且对设备材质的要求有所提高.此外,过快的搅拌速度会使生成的沉淀颗粒过小,难于过滤；搅拌速度过慢,药液中局部乙醇浓度过高,造成沉析物包裹有效成分,造成有效成分的损失,同时也会造成沉淀物黏连,难以过滤别离.因此,在醇沉时应按照物系的特征,选择适宜的搅拌速度以及乙醇的加入速度.⑥原药材的影响原药材的性状及初步处理过程影响到所用乙醇的浓度及醇沉效果.屠家启通过对板蓝根冲剂醇沉工艺的研究发明,如果所用原药材为新货（即当年采收的药材） ,药材中的糖分及黏液质较多,浓缩后的浸膏黏性大,制粒比较困难,此时选用的醇沉浓度应高于88 .原药材如为历年采收的陈货,或者库存时间已超出一年以上,则粉性较强,醇沉使用的乙醇浓度以88 为宜.叶荣科等为改良小叶榕黄酮提取工艺,降低生产成本,对不合比例醇沉结果进行比较,得出结论：自然枯燥叶总黄酮比烘箱枯燥叶提取率要高,其沉淀效果与文献报导一致.2.目前醇沉工艺存在的缺乏（1）醇沉过程操纵周期长.目前影响醇沉操纵周期的因素主要有两个：一是,水提液一般要冷至室温或更低温度才干加入乙醇；二是,醇沉后一般都要静置24～48 h才干抽取上清液.有的药材品种一次醇沉杂质沉淀不完全,特别是容易产生包裹浓缩液现象的品种,需要进行多次醇沉操纵.醇沉次数的增加,乙醇的用量、单耗、耗能相应增多.丁水平等研究了醇沉次数、醇沉浓度对醇沉除杂效果的影响.（2）排渣困难.醇沉后大量沉淀物因静置后聚集于罐底,造成沉析罐排渣困难.抽取上清液后,沉淀物往往需要再次加入热水使沉淀物融化才干排出,并且有些沉淀物是黏稠的糊状物须经挤压处理后才干排出,样使处理沉淀物过程费时费工.有的厂家针对排渣问题对沉析罐加了后续固液别离装置,将沉淀物用机械办法破碎再行排出.（3）上清液抽取过程困难.通常沉析罐都装有手动摇杆,以控制罐内抽取清液管道水平面的凹凸,但在实际操纵中,要看清罐内液面情况是十分困难的.此外,沉淀物堆积于罐底不会呈理想的水平面,所以抽取上清液往往会不完全,从而导致乙醇的损耗和有效成分的损失.（4）乙醇耗量大.醇沉次数的增加,沉淀物的聚集以及上清液抽取不完全等都会造成乙醇用量的增加.李尧等从数学推理的角度,对中药生产中的水提醇沉法的含醇量问题进行了探讨,得出了用醇量的经验公式.（5）有效成分损失严重 .由于醇沉时大量沉淀物的出现,可吸附、包埋部分有效成分而造成损失.韩桂茹等研究了水提醇沉对中药各类有效成分的影响.结果标明,醇沉后有效成分的损失在10 到50 .（6）成品稳定性差.一方面,醇沉时有效成分的损失,使药品质量难以稳定；另一方面,醇处理的液体制剂在保管过程中易产生沉淀和黏壁现象.3. 醇沉设备目前国内中药生产厂家使用的醇沉设备为带有夹套的筒体、椭圆封头、锥形底的圆筒体及特殊的微调旋转出液管组成.锥形底锥角为60～90 ℃,醇沉后杂质沉淀于锥底,清液通过管道吸出.罐底装置球阀（浆状或悬浮状沉淀物排渣）或气动出渣口（渣状沉淀物排渣）.。
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云 芝糖 肽 系从 云芝 或培 养 的菌 丝 的 生物 效应 调节 剂 ，对 迁 延性肝 炎 、 慢性 肝 炎有 良好 的疗效 ，能 抑制癌 细 胞的增生 ， 属 于国家 Ｉ Ｉ 类新药。目前 ，
２ 结果与讨论
的 影 响
糖 肽提 取率 随着提 取 时间 的增 加 而增 约为 ４ ８ ． ３ ｍ ｇ ／ ｇ ；当继 续增大时 ，云芝
的增加 而增大 ；当料水 比为 １ ：６ 时 ，提
１ 试 验部分
１ ＿ ］ 仪器 与试 剂
洁 净 工 作 台 、 分 析 天 平 、 电热 恒 阶段 云芝 糖 肽 水提 醇 沉 提 取 方式 。
温培 养 箱、分 光光 度计 和高速 冷 冻离 ２ ． ２ 提取 温 度 对 云 芝 糖 肽 提 取 率的 取率最高，为 ４ ｛ ３ ． ６ ｍ ｃ ｙ ｇ ；当料水比继续增 心 机。 经优 选 Ｌ Ｎ — Ｃ Ｖ ０ ７ ０ ７云 芝 菌株 液 影 响 体 发酵菌丝体 …。 牛血清白蛋白、 福林 一 酚试剂 、无水 乙醇均为分析纯 。 １ ． ２ 云芝糖肽水提醇沉提取 准确 称取 １ ｇ（ 精度至 ０ ． １ ｍ ｇ） 大时，云芝糖肽提取率却呈逐渐 下降趋
ｍ Ｌ ，按 一 定 温 度 、 时 间 、 料 水 比 ，置 提取 率仅约为 Ｂ Ｏ。 ｃ 的一半 ；当温 度升 的影响。试验结果表 明：当提取 次数为
ｍ ｉ ｎ离 心 ２ ０ ｍ ｉ ｎ ，上清 液 转入 旋 转蒸 而且趋于平缓。考 虑温度过高可引起变 提取次数为 ２次时，提取率约 占总量 的 约 占总 量的 ９ ８ ． ６ ％ 。继续增加提 取次数
时 ，会 消耗 能 源 和成 本 ，并 增 加 后续 工 艺 难度 ，故 选择 提 取 次 数为 ２次 。
提取 率 （ ％）＝云芝 糖肽 质量 ／ 菌 粉 质
量 ×１ ０ ０ ％ 。
３ 结 论
本 文 建 立 了 水 提 醇 沉 提 取 纯 化 云
ｑ ｕ ｕ Ｄ ｕ ，ｕ ｕ ｕ ｌ ｕｕ
２ ． ５ 提取 次 数 对 云 芝 糖肽 提 取 率 的
考 察 了提取 次 数 对 云 芝 糖肽 提 取 率 １次 时 ，提 取 率 约 占总 量 的 ８ ６ ． Ｏ ％ ： 当 ９ ６ ． ７ ％ ： 当提 取 次 数 为 ３ 次 时 ，提 取 率
随着提取温度的升高 ，云芝糖肽提取率 影 响
１ ． ３ 云芝糖肽中肽含量的测定
液 ０ 、０ ． ２ 、０ ． ４ 、０ ． ６ 、０ ． ８ ｍ Ｌ和 １ ． ０ ｍ Ｌ
提 取温 度 （℃ ）
芝糖 肽 的方法 ，研 究发现 ：高 压 均 质 好 ；水 提醇 沉提 取工 艺最佳 条 件为 ：
时间 ２ ｈ ，提 取次 数 ２ 次。
中提 取 纯化 的结合 蛋 白多糖 ，是 良好 ２ － １ 不 同破 碎方 式对 云芝糖 肽提 取率 大 ， 当提取时 间为 ２ ｈ 时， 提 取率最大 ，
考 察 了高 压 均 质 和 匀 浆 机 匀 浆 两 糖肽提取率却呈逐渐下降趋势 ；当提取
种 破碎 方式 对菌 丝体 内云芝 糖 肽提取 时间为 ５ ｈ 时， 提取 率呈逐渐稳定趋势。
考察了 ５ Ｏ 、６ Ｏ 、７ Ｏ 、８ ０ 、９ ０ ｃ Ｃ 和 势。为 了获得较 高的提取率 ，并且降低 １ Ｏ ０ ｃ ｃ 等 不 同 提 取 温 度 对 云 芝 糖 肽 提 浓缩工艺 ， 本研究选择料水比为 １， ：６ 。 取率 的影响 （ 图 １） 。从 图 ｌ中 可 知 ，
冻 干 的 菌 丝 体 粉 末 ，加 入 蒸 馏 水 ５ Ｏ 逐渐升高 ；当温度为 ４ ０ ｏ ｃ 时 ，云芝糖肽 恒 温 水 浴 锅 中提 取 ２次 ，然 后 ９ ０ ０ ０ ｒ ／ 至８ ０ ｏ Ｃ 以上 时， 云芝糖肽提取率下降 ， 发 仪 中浓 缩定 容 至 ２ ｍ Ｌ ，加 入 ６ ｍ Ｌ 性等 可 能性 ， 采 用提 取 温度 ８ ０ ｃ Ｃ 为宜 。 无 水 乙 醇 ，混 匀 后 ４ ｃ ｃ 过 夜 醇沉 后 ９ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ 离心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ， 得 到 的 沉 淀 真 空 干 燥 ， 即 得 云 芝 糖 肽 。 云 芝 糖 肽
云 芝 糖 肽 大 多 是 采 用 水 提 醇 沉 的 方 式 率 的 影响。试 验 结果 表 明 ：高压 均 质 为 了获 得 较 高 的提 取 率 ，并 且提 高 提 取
提 取 ，但使 用到氯仿 和 正丁醇 等有 毒 法 破 碎提 取 的云 芝糖 肽 提 取 率 （ ６ ２ ． ３ 效 率，本研 究选择提取 时间为 ２ ｈ 。
有 机 溶 剂 。为 了解 决 这 个 缺 点 和 不 足 ，
ｍ ｇ ／ ｇ） 较 高 ，比 匀浆 机 匀浆 提取 率 高 ２ ． ４ 料水比对云芝糖肽提取率的影 响
（ ４ ８ ． ７ ｍ ｇ ／ ｇ） 。从 提取 率大 小考 虑 ，
本研究采用热水浸提 ， 无水 乙醇沉淀 ，
并优化该提取工艺。
考察 由于在 小试 阶 同料水 比对云芝糖肽提取效果的影响。 段 的 发酵液 较少 ，匀 浆机 匀浆 法成本 试验结果表 明：当料水比从 １ ：３ 递增 低 。 因此 ，选 择 匀浆机 匀浆 作 为小 试 至 １ ：６ 时，云芝糖肽提取率随着料水比
工 艺 技 术ｌ
云芝糖肽水提醇沉提取工艺
口 梁晓婷 广东岭南职业技术学院
摘
要 ：避 免 了有 毒 溶 剂 使 用 ， 本 文建 立 了水 提 醇沉 法提 取 纯 化 云 芝 糖 肽 的技 术 方 法 ， 以期 为 云 芝 糖 肽 无 公 害生 产 提
供参考。 关 键 词 ：云 芝 糖肽 ； 水提 醇 沉 ；提 取 工 艺