硫磺菌发酵液抗菌活性的初步研究
硫磺菌鉴定及人工驯化栽培研究
图2硫磺菌菌株系统发育树硫磺菌（）又名硫磺多孔菌[1-2]，具有基内菌丝和气生菌丝[3]，子实体在药用方面有较大作用[4]，内含齿孔酸，可合成甾体药物肾上腺皮质激素，在很多疾病上有很好治疗作用[5]，多糖[6]以其它成分含量也较丰富[7]，具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤作用[8]。
本研究对野生硫磺菌鉴定，活性成分测定，培养基优化，驯化栽培进行研究，旨在为药用真菌资源的驯化和利用提供理论和实验基础。
1材料与方法1.1菌株：菌株于2021年6月21日采自吉林省延边朝鲜族自治州延吉市园艺农场四队苹果梨园（东经129°27′33″，北纬42°54′56″，海拔218m ），其余试验材料（LH 、Li 、Dai ）均来自延边大学农学院食药用真菌研究所。
1.2方法1.2.1ITS 鉴定：菌丝体DNA 提取利用试剂盒，鉴定利用ITS 通用引物ITS1和ITS4对DNA 样本序列进行PCR 扩增，产物进行测序。
将获得的ITS 序列利用NCBI 进行比对，采用MEGA 11.0软件构建系统发育树。
1.2.2营养成分测定：分别对4个菌株进行多糖、黄酮、三萜、多酚的测定，进行超声提取后紫外分光光度计在相应波长下测定吸光值，并带入标准曲线计算含量。
1.2.3硫磺菌菌丝体培养基优化1.2.3.1单因素试验：基础培养基：葡萄糖20g ·L -1、蛋白胨2.0g ·L -1、硫酸镁0.5g ·L -1、琼脂20g ·L -1，水1L 。
碳源：添加等量葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖；氮源：添加蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、硝酸铵、黄豆粉；无机盐：添加硫酸镁、氯化钠、硫酸锌、硫酸锰、磷酸二氢钾，以基础培养基不加相应物质为对照；设置3个重复，置于25℃避光培养7~10d ，用十字交叉法测定菌落直径。
1.2.3.2正交试验：对碳源、氮源、无机盐三个单因素进行正交设计选出最优组合，以确定硫磺菌的最佳培养基配方。
硫磺菌的固体和液体培养研究
硫磺菌的固体和液体培养研究摘要：从野外采集、分离纯化得到硫磺菌（Laetiporus sulphureus ）菌株，并进行硫磺菌的固体和液体培养试验。
试验表明，硫磺菌在复合PDA培养基上生长良好，菌丝生长速度为3.2 mm/d；在代料栽培中以麦粒或栎木屑培养基培养硫磺菌菌种时菌丝生长速度快，菌丝浓密；从8种液体培养基配方中筛选出菌丝体产量较高的配方，配方为：葡萄糖30 g，豆粉20 g，玉米粉10 g，酵母提取物5 g，KH 2PO 4 1 g，CaCO 3 2 g，MgSO 4 0.5 g，水1000 mL，菌丝体产量为22 g/100 mL。
关键词：硫磺菌；固体培养；液体培养硫磺菌［Laetiporus sulphureus (Fr.) Murrill］别名硫磺多孔菌、硫色多孔菌、黄芝，属非褶菌目（Aphyllophorales），多孔菌科（Polyporaceae），硫磺菌属（Laetiporus），是一种食药兼用大型真菌。
硫磺菌多发生于夏季，生于栗、柳、云杉、栎、落叶松等活立木树干、树桩或枯立木上，生长部位可引起木材褐色块状腐朽；栽培香菇的段木上有时也有该菌生长，被视为“杂菌”。
野生硫磺菌分布范围广，在全国大部分地区均有分布。
卯晓岚（2000）在《中国大型真菌》中记载：“硫磺菌幼时可食用，味道好。
药用，性温、味甘，能调节机体、增进健康、抵抗疾病，对人体可起重要调节作用。
有抗癌作用，对小白鼠肉瘤180及艾氏癌抑制率分别为80％和90％”［1］。
专利产品[专利号为CN99110871.X]硫磺菌制剂[口服液、粉（散）、胶束、蜜丸剂型]，具有迅速缓解病情，可产生即时药效应；对“气胀”病、结肠炎等疾病治愈率可达90%以上。
可见，硫磺菌食用、药用价值高，有一定开发前景。
硫磺菌目前主要靠野生采集得到，液体培养或固体培养的研究均少有报道。
驯化培养研究方面，吴锡鹏（1993）报道以木屑作机质培养可以得到子实体［2］。
硫磺菌液体培养基及pH值条件的研究
Ｋｅ ｒ ｓ Ｌ ｅｐ ｒｓｓ ｌｈ ｒｕ ， ｉｕｄ ｃ ｌ ｒ ， ｃ ｌ ｍ ｉｍａ ｓ ｙ ｗｏ ｄ ： ａｔ ｏｕ ｕｐ ｕ ｅｓ Ｌｑ ｉ ｕｔ ｅ Ｍｙ ｅｉ ｂｏ ｓ ｉ ｕ ｕ
关键词 ： 硫磺 茵； 液体培 养； 茵丝生物量
中图分类号 ：６ ６２ ￥ ４ ． 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ：０ ３— ５ ８ ２ １ ） １ ０ ８— ４ １０ ５ ０ （００ ０ —０５ ０
Ａ ｔ ｄ ｆＦｅ ｍ ｅ ｔ ｔｏ ｅ ｉ ｍ ｎ Ｈ ｎ ｉｉｎ ｏ Ｓ ｕ ｙ ｏ ｒ ｎ ａ ｉ ｎ Ｍ ｄ ｕ ａ ｄ ｐ Ｃｏ ｄ ｔｏ ｆ Ｌａ ￣ ｒ ｓｓ ｌ ｒ ｕ ｅ ｐｏ ｕ ｕｐｈｕ ｅ ｓ
真菌。经常食用可增进身体健康 ， 其子实体含齿孑 Ｌ
酸（ｎｒ ｏ ｃ ） 可合 成甾体药物 肾上腺皮质激 ｅｕｉ ｉ ａｉ ， ｃｃ ｄ 素， 是预防和治疗多种疾病的重要药物 。前人 曾 Ｊ
报道硫磺菌发酵培养液可产 生有机酸， 可广泛用于
果表 明， 用液体菌种 ， 操作方便 ， 接种成活率高， 且出 菇早 ， 产量高 。作者在利用木腐菌处理松材线虫 Ｊ
ｄｃｔ ａ ｔｅｂｓ ｍ ｄｕ ｒｓｒ ｔｎｃｎｉｅ ｆ ｏ ｐｗ ｅ ３ ） ｐｐｏ １５ ） ＭｇＯ ｉ ｅ ｔ ｔ ｅｔ ｅｉｍ ｐｅｃｉ ｉ ｏｓｔ ｏ ｍ ｏ ｄｒ（ ％ ，ｅｔｎ（ ． ％ ， Ｓ ４・ ａ ｄｈ ｈ ｐｏ ｓｄ ｃ ７ ２ （．５ ）ａｄＫ ２０ （． ％ ） ｈ ｉｂｅｉｉａ Ｈｃｎｉｏ ａ ． ．ｈ ｑｉ ｄａ ｉ Ｈ Ｏ ００ ％ ｎ Ｈ Ｐ ４０２ ．Ｔ ｅｓ ｔ ｌ ｎｔｌ ｏｄｔｎｗ ｓ ０Ｔ ｅｉｕｄｍｅｉｗｔ ｕａ ｉ ｐ ｉ ５ ｌ ｈ
硫磺菌的固体和液体培养研究
食 用 菌 学 报 ＠ ２ ０ ． ４ ４ ：５ ～ ５ ０７１（） ５ ８
文 章 编 号 ：０ ５ ９ ７ （ ０ ７ ０ —０ ５ —０ １０ — ８３ ２０ ）４ ０５ ４
硫 磺 菌 的 固体 和 液 体 培 养 研 究
闫梅霞 ，胡 清秀
得到 子实体 ｌ 。王 娟 等 （ ０ ６ 报 道 硫 磺 菌 发 酵 ＿ ２ ］ ２０）
液 中具有 抗 菌 活 性 物 质 ， 细 菌 、 菌 和 植 物 病 对 霉
收 稿 日期 ：０ ７ １ — ２原 稿 ； ０ ７ １ － ２修 改 稿 ２ ０ — ００ ２０ — １ ０
麦粒 培养基 （ ） 麦粒 ｉ ０ ， Ａ１ ： ０ ０ｇ 石膏 １ ， ２ｇ 碳
１ １ １ 供 试 菌 株 ．．
硫 磺 菌 菌 株 为 本 实 验 室 自南 京 瓦 屋 山 野 外
采集 ， 离 、 化而来 。 分 纯
１ １２ 复合 Ｐ ．． ＤＡ 培 养 基
专 利产 品［ 专利 号 为 Ｃ ９ １ ８ １ Ｘ 硫 磺菌 制 剂 Ｎ９ １ ０ ７ ． ］ ［ 口服 液 、 （ ） 胶 束 、 丸剂 型 ］ 具 有迅 速 缓 粉 散 、 蜜 ，
（ 国农 业 科 学 院农 业 资 源 与农 业 区 划研 究 所 ， 京 １０ ８ ） 中 北 ０ ０ １
摘
要 ：从 野 外采 集 、 离 纯 化 得 到 硫 磺 菌 （ ａ ｔ ｏ ｕ ｕｐ ｕ ｅ ｓ） 分 Ｌ ｅｉ ｒ ｓ ｌ ｈ ｒ ｕ 菌株 ， 进 行 硫 磺 菌 的 固体 和液 体 培 养 试 ｐ ｓ 并
验 。试 验 表 明 ， 磺 菌 在 复 合 Ｐ Ａ 培 养 基 上 生 长 良好 ， 丝 生 长 速 度 为 ３ ２ ｍｍ／ ； 代 料 栽 培 中 以 麦 粒 或 栎 硫 Ｄ 菌 ． ｄ在 木 屑 培养 基 培 养 硫 磺 菌 菌 种 时 菌 丝 生 长 速 度 快 ， 丝 浓 密 ； ８种 液 体 培 养 基 配 方 中筛 选 出菌 丝 体 产 量 较 高 菌 从 的 配方 ， 方 为 ： 萄 糖 ３ ， 粉 ２ ， 米 粉 １ ， 配 葡 ０ｇ 豆 ０ｇ 玉 ０ｇ 酵母 提 取 物 ５ｇ ＫＨ２ Ｏ １ｇ Ｃ Ｃ ２ｇ Ｍｇ Ｏ ０ ５ｇ 水 ， ， ａ Ｏ。 ， Ｓ ． ， Ｐ １０ ０ ０ｍＬ， 丝 体 产 量 为 ２ ／ ０ 。 菌 ２ｇ １ ０ｍＬ
硫磺菌菌丝生长特性初探
硫磺菌菌丝生长特性初探在不同温度、碳源、氮源、碳氮比和pH值等条件下观测硫磺菌（Laetiporus sulphureus）的菌丝长势、菌落状况、色素产生和菌丝生长速度，结果表明，硫磺菌菌丝最适生长温度为30 ℃，最适碳源为果糖，最适氮源为蛋白胨，最适碳氮比为30∶1，最适pH值为5.3。
硫磺菌；最适温度；最适pH；碳源；氮源硫磺菌（Laetiporus sulphureus）别名硫磺多孔菌、硫色多孔菌、黄芝，属担子菌门（Basidio-mycota）、伞菌亚门（Agaricomycotina）、伞菌纲（Agaricomycetes）、多孔菌目（Polyporales）、拟层孔菌科（Fomitopsidaceae）［1］，是食药兼用大型木腐真菌，幼龄子实体可食用，味道鲜美。
硫磺菌具有较高的药用价值，性温、味甘，能增进健康，抵抗疾病，具有抗癌作用，对小白鼠肉瘤180及艾氏癌抑制率分别为80％和90％［2］。
硫磺菌子实体所产生的齿孔酸可用于合成甾体药物（类固醇化合物）［3］，具有广阔的开发前景。
目前菌种的主要来源靠野生采集，闫梅霞等［4］研究了硫磺菌的液体培养和固体培养，陈瑶等［5］对硫磺菌液体培养基及pH值条件做了研究，马根艳等［6］研究了锌对硫磺菌菌丝生理活性的影响。
也有学者对其驯化栽培及发酵液的活性成分进行了研究［7-12］。
笔者通过研究硫磺菌菌丝最适培养条件，为其开发利用奠定良好基础。
1 材料与方法1.1主要材料1.1.1菌株硫磺菌(L. sulphureus)菌株00144由河南农业大学应用真菌研究室保存，是从伏牛山区采集的野生子实体组织分离得到,经中国科学院沈阳应用生态研究所戴玉成教授鉴定。
1.1.2培养基PDA培养基（g/L）：200马铃薯，20葡萄糖，18琼脂粉，加蒸馏水至1 L；用于菌丝最适生长温度的筛选。
基础培养基（g/L）：20葡萄糖，2酵母粉，0.5 MgSO4，0.1 CaCl2，0.5KH2PO4，1 K2HPO4，18 琼脂粉，加蒸馏水至1 L［13］。
浅谈硫磺多孔菌的研究
Vol.5 No.6Dec. 2019生物化工Biological Chemical Engineering第 5 卷 第 6 期2019 年 12 月浅谈硫磺多孔菌的研究李金平1，何美静1，李梦雪1，王升厚2*（1.沈阳师范大学生命科学学院，辽宁沈阳 110034；2.沈阳师范大学实验教学中心，辽宁沈阳 110034）摘 要：通过对以往发表的有关硫磺菌的论文进行计量可视化分析，从1994开始至今已有很多关于硫磺菌的研究，其中大部分是关于硫磺菌子实体和培养条件方面的研究，但随着研究的深入，对硫磺菌化学成分的分析及功效的研究越来越受到重视。
本文对当前硫磺多孔菌的研究进展做了初步的探究，并在前人的研究基础上进行总结，以利于日后设计并进行实验。
关键词：硫磺多孔菌；研究进展；发展前景中图分类号：S646 文献标志码：ADiscussion on the Research Progress of Sulfur Porous BacteriaLi Jin-ping 1, He Mei-jing 1, Li Meng-xue 1, Wang Sheng-hou 2*(1.College of Life Science, Shenyang Normal University, Liaoning Shenyang 110034;2.Experimental Teaching Centere, Shenyang Normal University, Liaoning Shenyang 110034)Abstract:Through the quantitative analysis of the previously published papers on sulphur bacteria, there have been many studies on sulphur bacteria since 1994, most of which are related to sulphur bacteria fruiting bodies and culture conditions, but with the deepening of research, The analysis of the chemical constituents of sulphur bacteria and the study of their efficacy have received increasing attention.A preliminary study on the current research progress of sulphurous sulphur bacteria. Summarize on the basis of the predecessors, in order to facilitate the design and experimentation in the future.Key words : Laetiporus sulphureum; Research progress; Development prospects1 硫磺菌概述硫磺菌（Laetiporus sulphureum）又称硫色多孔菌，菌盖肉质，呈扇形至半圆形，有放射状起伏丝且多数重叠生长，直径达30～40 cm，单个菌盖5～30 cm， 厚1～2 cm，表面鲜朱红色或硫磺色；菌肉淡肉色或淡黄褐色，幼时肉质有弹性，干后变白且轻脆；管孔长约10 mm，管口圆形至多角形，是一种药食兼用的大型真菌。
硫磺菌_精品文档
硫磺菌硫磺菌是一类具有独特形态和生理特征的原生生物。
它们属于真菌界中的一个小分支，是一类能够在极端环境下存活和繁殖的微生物。
硫磺菌在科学研究和工业应用中具有广泛的应用前景，以下将从其分类、生活特征、生物学意义以及应用领域等方面进行介绍。
硫磺菌的分类可追溯到最早的地质时期，大约在4亿年前的始新世。
根据其生理特征和基因序列等方面的相似性，硫磺菌被分为十字花菌门（Sulfolobales）、细胞壁硫磺菌门（Thermoproteales）和硫杆菌门（Thermoplasmales）等几个目。
每个目下又包括了若干科、属和种。
硫磺菌的独特之处在于其生活环境对于大多数其他生物来说是极端的，如高温、强酸、高浓度硫磺等，这使得硫磺菌在其生态学和生理学上具有独特之处。
硫磺菌通常生活在硫磺矿床附近的酸性环境中，其主要来源是由地下热水所提供的能量。
在这样的环境下，硫磺菌能够利用化学能转化为生物能，并进行光合作用。
硫磺菌的光合作用可以通过细胞色素和其他辅助色素来完成，这种作用方式与其他真菌和植物截然不同。
硫磺菌的生命周期一般包括分裂繁殖和有性生殖两种方式，其中有性生殖主要通过配子体的形成和融合来实现。
硫磺菌在生物学研究中具有重要的意义。
首先，由于硫磺菌能够在极端环境下生存，研究硫磺菌可以帮助我们了解生命是如何适应和适应极端环境的。
其次，硫磺菌在化学物质的转化和环境修复等方面具有潜在应用价值。
硫磺菌能够利用硫磺和氨气等物质进行代谢，并产生一些有用的化合物，如硫酸、氨酸以及酶等。
此外，硫磺菌还可以通过降解有机物和吸附重金属等方式，对环境中的污染物进行清除和修复。
在工业应用领域，硫磺菌具有潜力。
由于硫磺菌能够生产出一些重要的化学物质，如酶和抗生素等，可以应用于食品工业、制药工业和农业等领域。
此外，硫磺菌的生物催化性质也使其成为一种重要的发酵工具，可以用于生产酒精、有机酸和生物质能等。
在环境工程领域，硫磺菌的能力可以被利用来清除污水中的有机物和重金属离子等污染物。
硫磺菌菌丝液体发酵适宜培养基配方研究
硫磺菌菌丝液体发酵适宜培养基配方研究包水明;李荣同;徐琼【期刊名称】《广东化工》【年(卷),期】2012(039)011【摘要】The experiment used Laetiporus sulphureus as material,where is in appropriate,external training conditions(culture temperature is 25 ℃,the volume of liquid 75 mL/250 mL,shake-flask culture 150 r/min cultivate 120 h),by selecting different nitrogen sources(including the yellowmilk,urea,beef extract,peptone,(NH4)2SO4),different carbonsources(glucose,sucrose,starch,lactose),pH control of some single factors and orthogonal experiment,using liquid fermentation technology cultivate mycelia to mycelium wet weight for the index to determine the Laetiporus sulphureus of the appropriate liquid culture medium.The results showed that: In the conditions of 17.5 g/L as nitrogen source of the yellow soybean milk,20 g/L glucose as carbon source,initial pH value of 5.5,the formula is more convenient access to high-yield and economic.%实验以硫磺菌为材料,在适宜的外部培养条件（培养温度为25℃、装液量75 mL/250 mL、摇瓶转速为150 r/min培养120 h）下,通过选取不同氮源（包括黄豆浆、尿素、牛肉膏、蛋白胨、（NH4）2SO4）、不同碳源（葡萄糖、蔗糖、淀粉、乳糖）、酸碱度几个单因素的控制以及正交实验,采用液体发酵技术培养菌丝体,以菌丝体湿重为指标,确定了硫磺菌的液体培养的适宜培养基配方。
发光杆菌诱变方法和发酵液抑菌活性的研究的开题报告
发光杆菌诱变方法和发酵液抑菌活性的研究的开题报告一、研究背景与意义发光杆菌是一种广泛存在于海洋中的生物，其胞内产生的荧光素可以发出强烈的蓝绿色光线，具有重要的生物技术应用价值。
目前，已经有很多应用基于发光杆菌的荧光素特性开发出来，例如生物传感器、生物标记物等。
近年来，发光杆菌的抗菌活性也受到了越来越多的关注。
因此，利用诱变技术改良发光杆菌荧光素的产生和提高发酵液的抑菌活性，具有很高的科研意义和应用价值。
二、研究内容与目的本研究将以发光杆菌为研究对象，采用诱变技术对其进行基因改良，提高发酵液抑菌活性，并探究产生蓝绿荧光素的影响因素。
具体步骤包括：（1）选择合适的诱变剂，如紫外线、化学药剂等，进行诱变处理。
（2）筛选出产生蓝绿荧光素的发光杆菌株，比较其光强度和产荧光素的产量。
（3）对获得的产生蓝绿荧光素的菌株进行进一步的发酵实验，测定其对细菌的抑菌活性和最佳发酵条件。
（4）探究影响荧光素产生的因素，包括温度、pH值、营养物质浓度等。
本研究旨在通过诱变技术改良发光杆菌，优化发酵条件，提高抑菌活性，以期达到更好的生物技术应用或开发具有较高应用价值的新产品。
三、研究方法（1）菌株的选取：选取常见的海洋源发光菌作为实验材料。
（2）发光杆菌的诱变处理：采用紫外线或化学药剂进行诱变处理，筛选产生蓝绿荧光素的菌株。
（3）产生蓝绿荧光素的发光杆菌的光强度和产量测定：利用比色法或荧光定量法测定产生蓝绿荧光素的菌株的光强度和荧光素的产量。
（4）发酵实验：对获得的产生蓝绿荧光素的菌株进行发酵实验，测定其对细菌的抑菌活性。
同时，比较不同发酵条件下的抑菌活性差异。
（5）影响荧光素产生的因素的研究：包括温度、pH值、营养物质浓度等，利用单因素试验和正交试验等方法探究其影响。
四、研究进展与问题目前，本研究已选取海洋源发光菌为实验菌株，正在进行紫外线诱变和化学药剂诱变实验，并初步筛选出了几株荧光强度较高的菌株。
下一步将进行荧光素产量的测定和发酵实验。
内生菌发酵液的抑菌活性分析
2011秋专业综合创新实验报告实验名称内生菌发酵液的抑菌活性分析指导教师专业生物工程姓名学号组号 1成绩2011年11 月15 日1.课题的来源本课题—植物内生菌对病原菌的拮抗作用的研究是综合创新实验的课题，由刘士平老师提供。
2.研究的目的及意义（1）研究目的：利用从金银花根及叶和疏花水泊枝叶中提取的内生菌对曲霉、根霉等真菌及白叶枯、大肠和枯草芽孢杆菌等细菌的拮抗作用的研究，了解各内生菌对病原菌抗性作用的大小，（2）研究意义：1）可在实验完成过程中掌握多项专业技能，为今后的学习深造和工作打下基础；2）在学习工作中。
掌握内生菌拮抗作用的基本原理和方法，在一定的程度上能满足工业生产技术岗位的需要，这是生物工程专业学生顺利走上工作岗位最有利的支撑和保障。
3）在实践的操作过程中，能熟悉相关文献的查阅，能学会一般科技写作的规范要求。
3.研究的现状及发展趋势与其他普通微生物（腐生菌，寄生菌）相比，内生菌的研究历史不长。
直到上世纪八十年代初期，内生菌的研究才被重现。
有关内生菌的研究大体分为三个阶段。
第一个阶段自19世纪末至二十世纪70年代。
1989年Guerin,Hanausek, Nestler和V oglel等人先后在几种黑素草中发现了内生菌，随后几十年，关于内生菌的研究几乎处于停滞状态，仅有一些零星的有关植物报道。
这一阶段，主要研究集中于发现和检测植物中的内生真菌、内生真菌的分类和分离培养的研究，并通过显微镜的观察建立起了植物和内生真菌之间的形态学上的联系。
在此期间也有人试图揭示内生真菌与动物中毒症状之间的关系，但没有成功。
虽然这期间对植物体内的细菌菌类微生物是否为内生菌还没有统一定论，但已经在不同健康植物的种子和胚珠、导管、根、茎、叶和果实中发现了内生细菌。
1964年Becking 确定了使欧洲赤肠根瘤具有固氮能力的内生微生物为放线菌，即Frankia菌，但由于该菌生长缓慢，几乎不能在固体培养基生长，因此，未能得到Frankia菌的纯培养物。
发酵浆水中抑菌活性的乳酸菌株提取与鉴定-微生物论文-生物学论文
发酵浆水中抑菌活性的乳酸菌株提取与鉴定-微生物论文-生物学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——摘要：以甘肃传统发酵浆水为材料，采用平板划线法分离纯化其中的乳酸菌，并对纯化后的菌株进行形态学观察及生物学特性分析，筛选出其中具有抑菌活性的菌株，分别研究它们的抑菌能力以及抑菌物质的成分。
结果表明：6株乳酸杆菌中，菌株SJ-1、SJ-2的发酵代谢产物对指示菌具有较高的抑菌活性。
排除酸抑制作用和过氧化氢抑制作用后代谢产物仍具抑菌活性，且显示出良好的热稳定性。
使用不同的蛋白酶对代谢产物进行处理后，其抑菌能力产生了程度不等的降低，表明抑菌物质具蛋白酶敏感性，因此判断抑菌物质中含有蛋白类抑菌成分。
经鉴定发现菌株SJ-1为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),SJ-2为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
关键词：浆水; 乳酸菌; 代谢产物; 抑菌活性; 细菌素;Abstract：A total of 6 strains were separated and purified from Jiangshui celery. Their morphological and biological characteristics wereobserved and analyzed. We screened strains with antibacterial activity from these 6 strains. Then the antibacterial ability and the characteristics of its antibacterial substances were studied. The results showed that the fermentation metabolites of strains SJ-1 and SJ-2 had high antibacterial activity against indicator bacterias. The metabolites still had antibacterial activity after excluding the interference of acid and hydrogen peroxide,and showed high thermal stability. After treated with different proteases,the bacteriostatic ability was reduced to varying degrees. Which indicated it is sensitive to proteases,so it was judged that there are protein bacteriocins in the antibacterial substances. The strains SJ-1 was identified as Lactobacillus fermentum and the SJ-2 was identified as Lactobacillus plantarum.Keyword：Jiangshui celery; lactic acid bacteria; metabolites; antibacterial activity; bacteriocin;浆水菜是我国陕西、甘肃、山西、河南等地的一种传统发酵蔬菜[1]。
10种真菌深层发酵液抑菌活性分析
10种真菌深层发酵液抑菌活性分析张秋胜;徐丙莲;刘林德;刘浩;程显好;张玉香【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2010(000)009【摘要】以灵芝等10种真菌液体发酵液为研究对象,采用管碟法对发酵液进行抑菌作用试验,以抗生素(氯霉素)为参比,结果表明不同真菌发酵液对细菌具有不同的抑菌效果,同种真菌发酵液对不同细菌具有不同的抑菌效果.金针菇、紫芝、雷丸等真菌发酵液对大肠杆菌等革兰氏阴性菌有较强抑菌效果;赤芝的抑菌效果较低.紫芝和茶树菇真菌发酵液对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌有较强抑菌效果;北虫草的抑菌效果不明显.【总页数】3页(P70-72)【作者】张秋胜;徐丙莲;刘林德;刘浩;程显好;张玉香【作者单位】鲁东大学,生命科学学院,山东,烟台,264025;鲁东大学,数学与信息学院,山东,烟台,264025;鲁东大学,生命科学学院,山东,烟台,264025;鲁东大学,生命科学学院,山东,烟台,264025;鲁东大学,生命科学学院,山东,烟台,264025;鲁东大学,生命科学学院,山东,烟台,264025【正文语种】中文【中图分类】TQ465.92【相关文献】1.陕西核桃内生真菌代谢产物抑菌活性分析 [J], 刘泽星;阿依佳玛丽·依玛尔;惠建超;李梦歌;毛光瑞;翟梅枝2.一种苦荞抗真菌肽的纯化及抑菌活性分析 [J], 白承之;王转花;李玉英3.牛心朴子内生真菌分离及其抑菌活性分析 [J], 毕江涛;潘润霞;李乐;何萍;黄盼盼;王静4.篦子三尖杉内生真菌的分离鉴定和抑菌活性分析 [J], 韩洁;桂艳玲;付强;邹颉;赵杰宏5.篦子三尖杉内生真菌的分离鉴定和抑菌活性分析 [J], 韩洁;桂艳玲;付强;邹颉;赵杰宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
几株放线菌发酵液抑菌活性成分的研究
几株放线菌发酵液抑菌活性成分的研究一、本文概述放线菌是一类具有独特生物活性的微生物，其在生物发酵领域具有广泛的应用前景。
本文旨在研究几株放线菌发酵液中的抑菌活性成分，探讨其抑菌机制，以期为新型生物农药和生物防腐剂的研发提供理论依据和实践指导。
本文首先对放线菌的分类、特性及其在发酵工程中的应用进行了简要介绍。
随后，通过筛选和鉴定几株具有抑菌活性的放线菌，采用发酵工艺优化技术，提高其发酵液中抑菌活性成分的产量。
在此基础上，运用现代分离纯化技术对抑菌活性成分进行提取和纯化，并运用多种现代仪器分析方法对其结构进行表征。
本文还将对抑菌活性成分的作用机制进行深入研究，包括其抗菌谱、最小抑菌浓度、抑菌动力学等方面。
还将探讨抑菌活性成分对植物病原菌的抑制效果，评估其在农业领域的应用潜力。
本文将对放线菌发酵液抑菌活性成分的研究进行总结，指出当前研究中存在的问题和不足之处，并展望未来的研究方向和应用前景。
通过本文的研究，有望为新型生物农药和生物防腐剂的研发提供新的思路和方法，促进放线菌在农业、食品工业等领域的应用和发展。
二、材料与方法1 放线菌菌株：本研究选用几株具有抑菌活性的放线菌，通过前期筛选和鉴定，确认其具有较强的发酵产物抑菌能力。
2 培养基：采用适合放线菌生长的培养基，包括营养丰富的液体培养基和固体培养基。
3 抑菌试验指示菌：选择常见的病原菌作为抑菌试验的指示菌，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
5 化学试剂：甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂，用于提取发酵液中的抑菌活性成分。
1 放线菌发酵：将放线菌接种于液体培养基中，在恒温摇床中进行发酵培养，定期取样监测发酵过程。
2 发酵液处理：将发酵液进行离心分离，取上清液用有机溶剂进行萃取，得到抑菌活性成分的粗提物。
3 抑菌活性测定：采用纸片扩散法或液体稀释法，测定粗提物对指示菌的抑菌活性。
4 成分分析：通过薄层色谱（TLC）、高效液相色谱（HPLC）等分析方法，对粗提物中的抑菌活性成分进行分离和鉴定。
一种硫磺菌提取物及用途[发明专利]
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专利名称：一种硫磺菌提取物及用途
专利类型：发明专利
发明人：汪鋆植,孙文军,杨进,武玲,罗华军,程凡,贺海波,李伟申请号：CN201410205411.4
申请日：20140515
公开号：CN103961379A
公开日：
20140806
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明还提供了一种硫磺菌提取物，所述的提取物中含有三氢化松苓酸B的重量百分含量为1-12％。
本发明还提供了该提取物及其中的化合物三氢化松苓酸B的用途。
硫磺菌是常见食用真菌，安全性好，可以进行大规模发酵制备。
制备得到的硫磺菌提取物质量稳定，可控性强；硫磺菌提取物以及分离得到的三氢化松苓酸B具有明显的抗炎活性，可用于治疗急慢性风湿性、类风湿性关节炎、急慢性肝炎、乳腺炎等炎性疾病，能够抑制COX2，减少PGE2等炎性介质释放，为临床提供了一种新的用药选择。
申请人：神农架天润生物科技有限责任公司,三峡大学
地址：442499 湖北省神农架林区松柏镇神农大道(材场院内)
国籍：CN
代理机构：成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)
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硫磺联用TMP抗菌作用的实验研究
硫磺联用TMP抗菌作用的实验研究涂可斌;余声文【摘要】@@ 硫磺性热味酸,有毒.外用可治疗疥癣、湿疹等皮肤病,常作为油膏或外洗剂、搽剂.三甲氧苄氨嘧啶(TMP)是一种广谱抗菌增效剂,临床上常与磺胺类药联用以增强磺胺类药的抗菌作用.为了探讨TMP对硫磺抗菌活性的影响,我们采用琼脂稀释法对比研究了硫磺、TMP及硫磺与TMP联用对6种不同细菌的体外抗菌作用.【期刊名称】《湖北科技学院学报（医学版）》【年(卷),期】2011(025)006【总页数】2页(P534-535)【作者】涂可斌;余声文【作者单位】咸宁市咸安区妇幼保健院,湖北,咸宁,437000;湖北省中医院【正文语种】中文【中图分类】R969.2硫磺性热味酸，有毒。
外用可治疗疥癣、湿疹等皮肤病，常作为油膏或外洗剂、搽剂。
三甲氧苄氨嘧啶(TMP)是一种广谱抗菌增效剂，临床上常与磺胺类药联用以增强磺胺类药的抗菌作用。
为了探讨TMP对硫磺抗菌活性的影响，我们采用琼脂稀释法对比研究了硫磺、TMP及硫磺与TMP联用对6种不同细菌的体外抗菌作用。
1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 药品硫磺取自湖北省中医院中药库。
TMP购自湖北民康制药厂，批号19980621。
1.1.2 供试液配制称取硫磺0.5g极细粉，加入无菌肉汤10ml，微热使溶，即得硫磺供试药液;称取50mgTMP于试管中，加入无菌肉汤10ml，摇匀即得TMP供试药液;在另一份硫磺供试药液中，再加入TMP50mg，微热使溶，即得硫磺与TMP复方供试药液。
1.1.3 菌种①大肠杆菌;②伤寒杆菌;③绿脓杆菌;④水弧菌;⑤金黄色葡萄球菌;⑥志贺氏痢疾杆菌(以上菌种购自武汉大学微生物典藏中心)。
1.2 方法采用试管内药液稀释法(二倍稀释法)试验［1］，取无菌20ml敞口试管3排，每排15管编号排列，每排的第1管分别为上述3种供试药液管。
除每排的第1、14管外，其余各管中均加入无菌肉汤5ml，然后从第1管供试药液中量取5ml加至第2管中，混匀，同法依次稀释至第8管，混匀后吸出5ml于第14管中。
硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中活性成分的初步研究的开题报告
硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中活性成分的初步研究的开题
报告
一、研究背景及目的
硫磺菌和灰盖鬼伞是极少数能够以硫代谢为生的真菌，具有独特的生物学特性。
此外，它们在发酵过程中可以产生多种有益成分，例如多糖、多酚类化合物、蛋白质等。
因此，研究硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物的活性成分，对于开发其在食品、医药、
保健品等领域的应用具有重要意义。
本研究旨在初步研究硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中的活性成分，为其进一步的开发利用提供理论基础和实验支持。
二、研究内容和方案
1. 硫磺菌和灰盖鬼伞的筛选和培养。
从自然环境中收集并筛选出具有较优硫代谢特性的硫磺菌和灰盖鬼伞。
通过优化培养条件，获得稳定可靠的菌株。
2. 发酵条件的优化。
通过单因素实验和正交试验等方法，优化硫磺菌和灰盖鬼伞的发酵条件，包括发酵时间、温度、pH值等因素。
3. 活性成分的初步鉴定。
采用高效液相色谱、气相色谱、荧光光谱等方法，对硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中的多糖、多酚类化合物、蛋白质等活性成分进行初步鉴定。
4. 活性成分的生物活性测定。
根据活性成分的性质，选择适当的生物活性测定方法，对硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中的活性成分进行生物活性测定，如抗氧化能力、
抗炎、抗肿瘤等。
三、研究意义
研究硫磺菌和灰盖鬼伞发酵产物中活性成分的初步鉴定和生物活性测定，对于发现其在食品、医药、保健品等领域的应用具有重要意义。
同时，该研究对于加深对硫
代谢真菌生物学特性的理解也有重要价值。
硫磺菌多糖的分离纯化及体外抗氧化、抗肿瘤活性初探
硫磺菌多糖的分离纯化及体外抗氧化、抗肿瘤活性初探胡亚平;王锦;郑丽;田新利;代玲;林玲辉;王立安【摘要】目的:将硫磺菌子实体粗多糖进行分离纯化,对纯化产物进行理化特性和抗氧化抗肿瘤活性的检测.方法:硫磺菌子实体干粉采用水提醇沉、Sevage法去蛋白制备得粗多糖,采用DEAE-52色谱柱分离纯化粗多糖,通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)和氢核磁共振谱(1 H-NMR)对纯化后的多糖进行检测,采用清除DPPH自由基和MTT法检测多糖活性.结果:硫磺菌子实体分离得到三种多糖组分(LSPS-Ⅰ、LSPS-Ⅱ、LSPS-Ⅲ).LSPS-Ⅰ和LSPS-Ⅱ多糖的含量分别为85.43％和80.12％;LSPS-Ⅰ呈现片状结构,LSPS-Ⅱ呈现不规则多面体结构;LSPS-Ⅰ和LSPS-Ⅱ均具有糖类物质的吸收峰且为α构型;LSPS-Ⅰ和LSPS-Ⅱ均表现出较强的清除DPPH自由基活性,EC50值分别为10.74、15.67 mg·mL-1.LSPS-Ⅱ对人胃癌细胞株BGC的增殖有较强的抑制作用,IC50值为848μg·mL-1.结论:硫磺菌子实体粗多糖的分离纯化产物LSPS-Ⅰ和LSPS-Ⅱ均有较强的抗氧化活性,LSPS-Ⅱ还有一定的抗胃癌细胞作用.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2018(020)009【总页数】6页(P1131-1136)【关键词】硫磺菌多糖;DPPH自由基;抗氧化;人胃癌细胞株BGC;抗肿瘤【作者】胡亚平;王锦;郑丽;田新利;代玲;林玲辉;王立安【作者单位】邢台医学高等专科学校,河北邢台 054000;邢台医学高等专科学校,河北邢台 054000;邢台医学高等专科学校,河北邢台 054000;邢台医学高等专科学校,河北邢台 054000;邢台医学高等专科学校,河北邢台 054000;邢台医学高等专科学校,河北邢台 054000;河北师范大学生命科学学院,河北石家庄 050024【正文语种】中文硫磺菌(Laetiporus sulphureus)又名黄芝、硫磺多孔菌、硫色多孔菌，独立或者呈簇生长于腐烂的落叶或针叶树种的原木、树桩和树干上，是一种有重要利用价值的食用兼药用真菌，广泛分布于欧洲、亚洲和北美洲的美国[1]。
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西北农业学报 2006,15(6):204～207A cta A g riculturaeB oreali2occi dentalis S inica硫磺菌发酵液抗菌活性的初步研究王 娟1,高锦明13,张鞍灵1,李晓明2(1.西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100;2.西北农林科技大学资源与环境学院,陕西杨凌 712100)摘 要:对硫磺菌摇瓶发酵的乙酸乙酯和正丁醇萃取物进行了抗菌试验。
结果表明,硫磺菌发酵液乙酸乙酯萃取物对7种细菌、1种霉菌和8种植物病原菌均有较为显著的抗菌活性,正丁醇萃取物对3种细菌、3种霉菌和5种植物病原菌也具有较好的抗菌效果,且总体上抗菌活性随浓度的增大而增强。
结果还显示同一浓度萃取物对不同菌种的抗菌作用亦不同。
硫磺菌发酵液中具有抗菌活性物质。
关键词:硫磺菌;发酵液;萃取物;抗菌活性中图分类号:S481+.9 文献标识码:A 文章编号:100421389(2006)0620204204Preliminary Study on the Anti2microbial Activities of FermentationB roth of L aeti por us sul p hureum(Fr).MurrillWAN G J uan1,GAO Jin2ming13,ZHAN G An2ling1and L I Xiao2ming2(1.College of Life Science,Nort hwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China;2.College of Resources andEnvironment,Nort hwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China)Abstract:The brot h of L aeti porus s ul p hureum(Fr).Murrill fermentation in an oscillating manner were ext racted wit h et hyl acetate and n2butyl alcohol and t he anti2microbial activity of t he extract s were tested.The result s indicated t hat t he ext ract by et hyl acetate presented a significant effect on7 species of bacteria、1species of molds and8species of plant pat hogens,while t he antibiotic activities of t he ext ract by n2butyl alcohol on3species of bacteria、3species of molds and5species of plant pat hogens were also obvious,and t he higher t he concent ratio n,t he larger t he inhibition was.The re2 sult s also showed t hat t he inhibition on t he different tested bacteria and f ungi were different wit h t he same concent ration.As a result,t he brot h of L aeti porus sul p hureum contained anti2microbial active substances.K ey w ords:L aeti porus s ul p hureum(Fr).Murrill;Fermentation brot h;Ext ract s;Anti2microbial ac2 tivity 从微生物代谢产物中寻找控制有害生物的生物农药是新农药研究的一个重要方向[1,2]。
近些年来的研究发现,大型真菌中含有许多结构骨架新颖的次生代谢产物,并已从高等真菌中发现了多糖、甾醇、生物碱、萜类等具有显著生理活性的物质,具有提高人体免疫力、抗肿瘤和抗菌等生物功效,有些表现出较好的抗菌活性[3～6]。
高等真菌不仅可以直接作为研究材料用,而且还可以较方便地通过菌丝体或孢子发酵培养,以提供大量原料。
尤其是所含的低分子类次生代谢产物,像一些小肽类的应用潜力更是引起人们的极大兴趣[7～9]。
硫磺菌(L aeti porus s ul p hureum(Fr).Mur2 rill)又称硫色干酪菌、硫磺多孔菌,为一种药食兼收稿日期:2006203216 修回日期:2006205211基金项目:国家自然科学基金(No.30370019);教育部科学技术研究重点项目;教育部优秀青年教师资助计划;陕西省自然科学基金(No.2003B18);中国博士后科学研究基金(No.2003034417)。
作者简介:王 娟(1981-),女,陕西富平人,在读硕士研究生,主要从事植物资源化学方面的研究。
3通讯作者。
用的大型真菌,经常食用可增进身体健康,其子实体含齿孔酸(enuricoic acid),可合成甾体药物肾上腺皮质激素,是预防和治疗多种疾病的重要药物[10]。
前人曾报道硫磺菌发酵培养液可产生有机酸,可广泛用于食品、印染等工业部门[11]。
但对细菌、真菌和植物病原菌的抑制活性方面的研究工作甚少,为了开发新型农用抗生素,本文选用硫磺菌作为研究对象,对其进行摇瓶发酵,然后依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取发酵液,对萃取物进行抗菌筛选研究,为今后在生产中的应用提供科学依据。
1 材料与方法1.1 试验材料供试细菌 金黄色葡萄球菌(S ta p hy loccus aureus)、大肠杆菌(Escherichi a coli.)、蜡状芽孢杆菌(B acill us cereus)、巨大芽孢杆菌(B acil2 l us megat heri um)、北京棒状杆菌(Cory nebacte2 ri um peki nense)、马铃薯芽孢杆菌(B acill us mes2 entericus)、枯草芽孢杆菌(B acill us s ubtilis)。
供试霉菌 产黄青霉(Penicilli um chryso2 gencum)、黑根霉(R hi z op us ni g ricans)、黑曲霉(A s per gill us ni ger)。
供试植物病原菌 小麦赤霉病菌(Gibberell a zeae)、辣椒疫霉病菌(Phy top hora ca psici)、黄瓜炭疽病菌(Colletot richum l a genari um)、小麦根腐病菌(B i pol aris soroki ni ana)、苹果腐烂病菌(Cy tos pora sp.)、甘薯黑斑病菌(Ceratocystis f i mbri at a)、烟草赤星病菌(A lternari a alterna2 t a)、苹果褐腐病菌(M onili a f ructi gena)、棉花黄萎病菌(V erticilli um dahli ae)、番茄早疫(A lter2 nari a sol ani)。
以上供试菌种均由西北农林科技大学资源与环境学院微生物实验室提供。
1.2 试验方法1.2.1 待测样品的制备 发酵培养条件:硫磺菌母种先后接种于斜面改良PDA培养基(土豆200.0g、葡萄糖20.0g、MgSO41.5g、KH2PO4 3.0g、vB110.0mg、琼脂20.0g、蒸馏水1000 mL,p H6.0～6.5)和平板改良PDA培养基上, 28℃培养6d,用打孔器将琼脂挖块接种于装有50mL种子培养液(不加琼脂的改良PDA)的250 mL三角烧瓶,静置2d,28℃、120r/min下旋转摇床上培养3d作为种子,以10%量接种于装有170mL发酵培养基(同种子培养液)的500mL 三角瓶中,同样条件下培养,待发酵液中充满白色的密集粘滑的菌丝球时终止发酵。
培养液的处理:将发酵菌液离心,得菌丝体和发酵液。
用乙酸乙酯和正丁醇对发酵液依次各萃取3次。
合并萃取液减压浓缩至浸膏状萃取物,然后将各部分分别用乙酸乙酯和无菌水配成50mg/mL、25mg/ mL、12.5mg/mL和0mg/mL4个浓度梯度备用,阴性对照分别用各自的溶媒。
1.2.2 菌悬液的制备 先将供试菌种用适宜的培养基活化2次,细菌菌悬液是按无菌操作各取2环,分别放入装有5mL无菌水的试管内,充分振荡混匀即可制成;霉菌和植物病原菌菌悬液的制作是将10mL无菌水,按无菌操作倒入已活化好的供试真菌试管内,用接种环或接种钩轻轻摩擦真菌表面,充分振荡摇匀,得菌悬液。
1.2.3 抑菌活性试验 采用滤纸片琼脂扩散法[12],将已灭菌的培养基(供试细菌培养用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,真菌用PDA培养基[13])冷却至45～50℃,在无菌条件下,将其倒入灭菌过的培养皿(d=90mm)中,每皿约倒15mL,冷却后用移液管加入0.2mL已经制备好的菌悬液,并用无菌刮铲涂抹均匀,然后用镊子取无菌滤纸片(d=6mm),分别浸蘸不同浓度的2种测试样品,约30s后取出,滤干药液后平贴于板上,每个皿各放3片(1个浓度放1片),各纸片之间等距,分别用乙酸乙酯和无菌水作为阴性空白对照,而以链霉素作为阳性对照,每一样品重复3次。
将细菌置28℃恒温培养箱中培养24h,真菌于28℃恒温培养72h,用十字交叉法测量抑菌圈(透明圈)直径,取其平均值作为试验结果。
1.2.4 数据的处理 本试验数据测定均重复3次,把所得数据输入SPSS数据处理系统进行统计,对硫磺菌发酵液两种萃取物不同浓度对不同供试菌种的抑菌圈大小进行方差分析。
2 结果与分析通过滤纸片琼脂扩散法,测定出了大型真菌硫磺菌的摇瓶发酵液乙酸乙酯和正丁醇萃取物分别对金黄色葡萄球菌等7种常见细菌、产黄青霉等3种霉菌和小麦赤霉病菌等10种植物病原菌的抗菌活性。
其中抗菌活性以抑菌圈的大小(mm)表示,一般认为抑菌圈直径d在6～8mm 为微弱抑菌,8～13mm为弱抑菌,13～18mm为・52・6期 王 娟等:硫磺菌发酵液抗菌活性的初步研究中等抑菌,d>18则为强抑菌[14]。
2.1 不同浓度的乙酸乙酯和正丁醇萃取物对7种细菌的抗菌活性对2种不同萃取物的不同浓度分别进行抗细菌活性试验,结果见表1。