动物细胞培养和核移植技术
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2.2.1动物细胞培养和核移植技术
动物细胞特点 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一 个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组 并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终 发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
9.回答下列有关动物细胞培养的问题： ⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目， 最好选用细胞分裂到 中 期的细胞用显微镜进行 观察。 ⑸在细胞培养过程中，通常在 冷冻 条件下保存 细胞，因为在这种条件下，细胞中 酶 的活性 降低，细胞的 新陈代谢 速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发 生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织 当作 抗原 进行攻击。
动物克隆过程的实际是细胞核移植
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。
２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
思考题
5、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找 出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高 产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞； 多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞， 而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体 细胞。 6、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明 理由？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、 活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功 将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像 供体动物，操作也方便
人教版选修三生物课件：2.2.1动物细胞培养和核移植
有机物：糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养
动物血清、血浆：P补46充旁培栏养题液及中小没有知完识全搞清
楚的补成充分合成培养基中所缺乏的营养物质及激素等。
36.5±0.5℃
细胞代谢
7.2~7.4
培养液的PH7
5.应用: 连线表示动物细胞培养的应用及实例
可根据变异细胞占细胞总数的比 例来判断毒性的大小。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动 物进行了100%的复制吗？为什么？
不是。克隆动物的DNA绝大部分来自供体细胞核，但还有少 量DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞的细胞质。此外， 生物的性状还受环境的影响。
17Biblioteka 思考题1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操 理由：______________________________ 作过程的不同点？ 胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性较容易。
5胚)体胎细细胞胞是核分移化使植程技度细术低得，胞到恢的复克从其隆全牛瓶能从性生壁较殖容胰方上易式。蛋上脱看白属落于酶下来，便于分装后继续培养。
2、克隆动物遗传物质的来源？
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。
归纳：克隆动物的基因型、性别、主要性状、染色体组成均与供核个体相同。
10~50 5)体细胞核移植技术得到的克隆牛从生殖方式上看属于
2.相关概念: (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__时, 细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的_初__次__培__养__。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_接__触__抑__制__后,需要重新用 _胰__蛋__白__酶__等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_继__续__增__殖__的培 养过程。
动物细胞培养和核移植技术
◆体细胞核移植方法生产 的克隆动物是对体◆胚细胎胞移供 体动物进行了100植%的至复代制孕
吗？为什么？受体内
妊娠、分娩 ◆遗传物质 基本相同
体细体胞细核胞移核植移的植原的理过：程动
物细胞核具有全能性 受精
供体细胞 （供核）
细胞
体细胞
卵
培养
注入
细胞 重组
卵巢卵母细 胞（MⅡ中期：
供质）
去
去核卵 融合 细胞
2.原理：动物细胞核具有全能性
胚胎细胞分化程 度低，恢复其全 能性相对容易
动物体细胞分化 程度高，恢复其 全能性十分困难
3.分类：胚胎细胞核移植、体细胞核移植
4.体细胞核移植的过程
供体：优质高产奶牛
◆为何取供体细 胞传代培养10代
以内的细胞？
10代以内的细胞 一般保持正常二 倍体的核型，未
发生突变。
治疗人类疾病，作为组织器官移植的供体
主要的优 点是？
不发生免疫 排斥反应
◆研究克隆动物和克隆细胞更了解 胚胎发育及细胞衰老过程；克隆动 物做疾病模型，更好追踪研究疾病
的发展过程和治疗疾病。
6.体细胞核移植技术存在的问题
（1）成功率仍然非常低，产下的活 克隆动物比率平均不到10%。
（2）绝大多数克隆动物还存在健康 问题，许多克隆动物表现出遗传和生 理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发
因为在这个时候去核的话对 卵细胞损伤最小，距离很近，
便于去核。
◆为什么不是取供体 细胞核进行核移植操 作，而是直接将供体 细胞整个注入去核卵
母细胞中？
保证供核不被破坏， 使所得个体的性状
更符合供体。
◆激活 方法：
◆激活 目的：
◆促融方法： 电刺激
吗？为什么？受体内
妊娠、分娩 ◆遗传物质 基本相同
体细体胞细核胞移核植移的植原的理过：程动
物细胞核具有全能性 受精
供体细胞 （供核）
细胞
体细胞
卵
培养
注入
细胞 重组
卵巢卵母细 胞（MⅡ中期：
供质）
去
去核卵 融合 细胞
2.原理：动物细胞核具有全能性
胚胎细胞分化程 度低，恢复其全 能性相对容易
动物体细胞分化 程度高，恢复其 全能性十分困难
3.分类：胚胎细胞核移植、体细胞核移植
4.体细胞核移植的过程
供体：优质高产奶牛
◆为何取供体细 胞传代培养10代
以内的细胞？
10代以内的细胞 一般保持正常二 倍体的核型，未
发生突变。
治疗人类疾病，作为组织器官移植的供体
主要的优 点是？
不发生免疫 排斥反应
◆研究克隆动物和克隆细胞更了解 胚胎发育及细胞衰老过程；克隆动 物做疾病模型，更好追踪研究疾病
的发展过程和治疗疾病。
6.体细胞核移植技术存在的问题
（1）成功率仍然非常低，产下的活 克隆动物比率平均不到10%。
（2）绝大多数克隆动物还存在健康 问题，许多克隆动物表现出遗传和生 理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发
因为在这个时候去核的话对 卵细胞损伤最小，距离很近，
便于去核。
◆为什么不是取供体 细胞核进行核移植操 作，而是直接将供体 细胞整个注入去核卵
母细胞中？
保证供核不被破坏， 使所得个体的性状
更符合供体。
◆激活 方法：
◆激活 目的：
◆促融方法： 电刺激
生物选修3动物细胞培养和核移植技术PPT课件
动物细胞培养技术是生物技术领域中的一项重要技术，广泛应用 于细胞生物学、生物医学、药物研发和生物工程等领域。
动物细胞培养的历史与发展
动物细胞培养技术最早可以追溯到20世纪初，但直 到20世纪50年代才开始有系统的研究。
1951年，卡森等人成功地进行了小鼠胚胎细胞的原 代培养，标志着动物细胞培养技术的诞生。
生物选修3动物细胞培养和核 移植技术ppt课件
目
CONTENCT
录
• 动物细胞培养技术概述 • 动物细胞培养技术的基本原理 • 核移植技术的基本原理 • 核移植技术的操作流程 • 核移植技术的优缺点与伦理问题 • 核移植技术的未来展望与研究方向
01
动物细胞培养技术概述
动物细胞培养的定义
动物细胞培养是指将动物组织或细胞从体内取出，在体外进行培 养，使其在人工条件下生长、繁殖和代谢的过程。
04
核移植技术的操作流程
供体细胞的选择与准备
供体细胞来源
选择健康、无病原体污染的动 物胚胎或生殖细胞作为供体细 胞来源。
细胞培养
将供体细胞进行体外培养，使 其分裂和增殖，以获得足够的 细胞数量。
遗传修饰
根据需要，对供体细胞进行遗 传修饰，如基因敲除、基因敲 入等。
受体细胞的准备
01
02
03
受体细胞来源
核移植技术的应用前景
核移植技术可以应用于濒危动 物的繁殖和保护，通过该技术 可以快速繁殖出大量濒危动物 个体，为物种保护提供有力支 持。
核移植技术还可以应用于动物 模型的建立，通过该技术可以 快速获得遗传背景相同的动物 模型，为疾病研究、药物研发 等方面提供有力支持。
随着技术的不断进步和应用范 围的扩大，核移植技术将会在 未来的生物医学领域发挥更加 重要的作用。
动物细胞培养和核移植技术(共36张PPT)
触抑制
代
转入培养瓶
培
细胞株：一般说
遗传物质未改变
传代10代以内，遗传物质不改变，保 分瓶传代培养 养
持正常二倍体核型。
传代10-50代左右，增长缓慢以至于 10代细胞
完全停止，部分细胞核型可能发生
传 代
变化（遗传物质可能改变）
40-50代细胞 培
继续传代培养少部分细胞获得不死性，
养
细胞突变，遗传物质已经改变，等同
-------------（ ） A
4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器官的移植
保证细胞顺利的生长增殖
保证细胞顺利的生长增殖
A．细胞系 体外培养的细胞需要什么样的环境条件？
检测有毒物质，判断某种物质的毒性
B．细胞株
C．原代细胞 D．传代细胞 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？
为___________. (4)为了把B瓶原代中培的养 细胞分装到C瓶中，用_____ 处理，然后配置成___________，再分装。 胰蛋白酶 (5)在C瓶中正常培养了一细段胞悬时浮间液后，发现细胞全部死亡。
1.体积大，易操 次分裂中期 作。2.含有促使 细胞（MⅡ
细胞核表达全能 中期）为什 性的物质和营养 么？
条件。
◆促融方法：
电刺激
妊娠、分娩
◆胚胎移植至代 孕受体内
有人说它三个母亲， 对吗？
细胞核核移植
卵母细胞采集、培养
MⅡ期卵母细胞 去核
去核卵母细胞
体细胞核移植过程 （体细胞克隆动物）
供体细胞注入 去核卵母细胞
生长和繁殖。
2、原理：细胞增殖
3、过程
增殖能力强，分裂旺盛，分化程 度低，容易培养
动物细胞培养和核移植技术课件
过程
脱分化、再分化
原代培养、传代培养
项目
植物组织培养
动物细胞培养
结果 获得新个体或细胞产物
大量产生细胞或细胞 产物
用途
①快速繁殖名贵花卉和果 树；②培养无病毒植株、 转基因植物；③大规模生 产细胞产物，如药物、食 品添加剂、香料、色素等
①生产蛋白质制品， 如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等；②检 测有毒物质；
(3)温度和
温度：哺乳动物多以 pHpH： 7.2～7.4
36.5±0.5℃
为宜
(4)气体环境COO2 ：2：细维胞持代培谢养所液必的需p的H
4．应用[连线]
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物核移植的概念和类型 (1)概念： ①供体：动物一个细胞的细胞核； ②受体：去掉细胞核的 卵母细胞 ； ③结果：形成重组胚胎，发育成 动物个体 。 (2)类型：哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细 胞核移植。
2.如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： (1)容器 A 中放置的是动物器官或组织，它一般 取自________________。 (2)容器 A 中的动物器官或组织首先要进行的处 理是________，然后用__________酶处理，这 是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 _________________________________________________。
胞质内的遗传物质来自受体卵母细胞，其次生物的性状还
受环境的影响，因此，克隆动物并不是对提供体细胞的动
物进行完全复制。
4.右图为哺乳动物(羊)的生殖过程，下列叙述
不．正确的是
(D )
A．个体 2 为克隆动物，c 为高度分化的
体细胞
B．个体 2 的遗传性状与提供 c 细胞的羊
动物细胞培养和核移植技术-刁金山
3.温度和 ：36.5+0.5度；PH为7.2-7.4 温度和pH：36.5+0.5度 PH为7.2温度和 4.气体环境： 气体环境： 气体环境
培养皿或松盖培养瓶，置于 空气和5% CO2 ） 培养皿或松盖培养瓶，置于O2和CO2（95%空气和 空气和
学案p2相关问题 学案 相关问题
1.3 动物细胞培养技术的应用
6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物 既然胰蛋白酶能将细胞消化掉， 胰蛋白酶能将细胞消化掉 组织分散成单个细胞要注意什么问题呢 注意什么问题呢？ 组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 注意时间的控制 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 不能，因为两者的最适PH不同， 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织 PH不同 细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH PH较接近 细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近
（三）、过程： ）、过程： 过程
1
2
3
4
（三）、体细胞的核移植过程 ）、体细胞的核移植过程
高产奶牛A 高产奶牛 供体细胞培养 供体细胞
？
卵母细胞培养 去核卵母细胞 供卵奶牛B 供卵奶牛
？
无性生殖
电刺激使两细胞融合 重组细胞
激活 重组胚胎
？
胚胎移植
代孕母牛C 代孕母牛 新个体
为什么用去核卵母细胞作为体细胞核的受体？ 为什么用去核卵母细胞作为体细胞核的受体？
通过核移植方法得到的动物叫克隆动物。 通过核移植方法得到的动物叫克隆动物。 克隆动物
（二）、分类： ）、分类： 分类
胚胎细胞核移植： 胚胎细胞核移植 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度低， 细胞分化程度高， 体细胞核移植： 体细胞核移植 细胞分化程度高，恢复全能性困难
动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术
核移植操作
显微操作
在显微镜下，将供体细胞核移植到受体细胞中。
融合与激活
通过电刺激或化学方法诱导受体细胞与供体细胞 融合，并激活新形成的细胞。
筛选与鉴定
对新形成的细胞进行筛选和鉴定，确保核移植成 功。
重组胚胎的培养与移植
胚胎培养 在适宜的培养条件下，对重组胚胎进行培养，促进其发育。
胚胎移植 将培养成熟的胚胎移植到代孕动物体内，以产生后代。
融合后的细胞开始分裂和发育，最终 形成与供体具有相同遗传物质的克隆 个体。
核移植技术流程
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供体细胞的选择与准备
选择适当的供体细胞
01
根据实验需求选择具有所需特性的供体细胞，如特定组织或器
官来源的细胞。
细胞培养准备
02
确保供体细胞处于适宜的培养环境中，包括适当的培养基、温
度、气体条件等。
细胞传代与扩增
03
对供体细胞进行传代和扩增，以获得足够的细胞数量用于核移
植。
受体细胞的选择与准备
选择适当的受体细胞
根据实验需求选择具有良好接受性的受体细胞，如去核的卵母细 胞。
去核处理
使用显微操作技术去除受体细胞的细胞核，为核移植做好准备。
受体细胞激活
通过化学或电刺激方法激活受体细胞，使其恢复分裂活性。
细胞分离
通过离心、过滤等方法将细胞从酶液
3
中分离出来。
培养环境控制
提供适宜的温度、湿度、气体环境，
5
保持培养基的营养成分和pH值。
组织消化
2
使用适当的酶液将组织分解成单个细
胞。
细胞接种
4
将分离出的细胞接种到培养容器中。
传代细胞培养
动物细胞培养和核移植技术 课件
(5)人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应组 织、器官后，可以用于组织器官的移植。
(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展 过程和治疗疾病。
4．存在问题。 (1)成功率低。 (2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。 (3)克隆动物食品的安全性存在争议。
要点一 动物细胞培养
1．动物细胞培养时需要将细胞分散开，其方法是什 么？
(4)继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证 明动物细胞的细胞核也具有_________________________
________________________。 解析：(1)由图示可知①为核移植过程。(2)卵母细胞
体积大、易操作，并且还含有能诱发细胞核全能性表达的
物质及丰富的营养物质，比较适于做核移植的受体细胞。
(3)在核移植时，一般不选择生殖细胞作为供核细胞， 因为生殖细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
(4)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同， 而不是完全相同，因为：①克隆动物的细胞质遗传物质来 自于受体卵母细胞。②生物的性状不仅与遗传物质有关， 还受环境的影响。③突变。
(5)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核 遗传物质与供核个体的相同，属于无性繁殖，不会改变生 物体的基因型。
2．过程。
3．条件。 (1)无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进 行无菌处理。 (2)营养：合成培养基中要有糖、氨基酸、促生长因 子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等。 (3)温度和 pH。 ①适宜温度：36.5±0.5 ℃。 ②适宜 pH：7.2～7.4。
(4)气体环境：主要是 O2 和 CO2，O2 是细胞代谢所必 需的，CO2 主要维持培养液的 pH。
(3)培养首先在 B 瓶中进行，瓶中的培养基成分有 ________________________等。在此瓶中培养一段时间 后，有许多细胞衰老死亡，这时的培养称为__________。
(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展 过程和治疗疾病。
4．存在问题。 (1)成功率低。 (2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。 (3)克隆动物食品的安全性存在争议。
要点一 动物细胞培养
1．动物细胞培养时需要将细胞分散开，其方法是什 么？
(4)继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证 明动物细胞的细胞核也具有_________________________
________________________。 解析：(1)由图示可知①为核移植过程。(2)卵母细胞
体积大、易操作，并且还含有能诱发细胞核全能性表达的
物质及丰富的营养物质，比较适于做核移植的受体细胞。
(3)在核移植时，一般不选择生殖细胞作为供核细胞， 因为生殖细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
(4)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同， 而不是完全相同，因为：①克隆动物的细胞质遗传物质来 自于受体卵母细胞。②生物的性状不仅与遗传物质有关， 还受环境的影响。③突变。
(5)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核 遗传物质与供核个体的相同，属于无性繁殖，不会改变生 物体的基因型。
2．过程。
3．条件。 (1)无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进 行无菌处理。 (2)营养：合成培养基中要有糖、氨基酸、促生长因 子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等。 (3)温度和 pH。 ①适宜温度：36.5±0.5 ℃。 ②适宜 pH：7.2～7.4。
(4)气体环境：主要是 O2 和 CO2，O2 是细胞代谢所必 需的，CO2 主要维持培养液的 pH。
(3)培养首先在 B 瓶中进行，瓶中的培养基成分有 ________________________等。在此瓶中培养一段时间 后，有许多细胞衰老死亡，这时的培养称为__________。
动物细胞培养和核移植技术概述
的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系， 核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不 会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供 体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是 核供体动物100%的复制。
知识结构
动物细 胞培养 和核移 植技术
动物细胞培养
动物体 细胞核 移植技 术和克 隆动物
如何界定原代培养和传代培养； 细胞株和细胞系？
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系 遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
多数组织细胞必须在固定
贴壁生长细胞分裂生长到 相互接触时就停止分裂增
的表面上生长和分裂。 殖的现象叫接触抑制
2.动物细胞培养条件：
⑴许多克隆动物表现出遗传和生 理缺陷，如体型过大，异常肥胖， 发育困难，免疫失调等。 ⑵成功率非常低及克隆动物食品 的安全性问题。
体细胞许核多移克植技隆术动存物在的表问现题 出遗传和 生理缺陷，如体型大，异常肥胖， 发育困难，脏器缺陷，免疫失调 等。
在研究方面，克隆动物基因 组重新编程的机制尚不清楚，克 隆技术效率低，克隆动物畸形率 高、死亡率高、易出现早衰等问 题。这些问题尚在研究中。在应 用上，生产克隆动物费用昂贵， 距大规模应用还有一定距离。
动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体
其中动物细胞培养技术是其他 动物细胞工程技术的基础
动物细胞培养概念：
动物细胞培养 就是从动物机 体中取出相关 的组织,将它分 散成单个细胞, 然后,放在适宜 的培养基中,让 这些细胞生长 和增殖。
知识结构
动物细 胞培养 和核移 植技术
动物细胞培养
动物体 细胞核 移植技 术和克 隆动物
如何界定原代培养和传代培养； 细胞株和细胞系？
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系 遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
多数组织细胞必须在固定
贴壁生长细胞分裂生长到 相互接触时就停止分裂增
的表面上生长和分裂。 殖的现象叫接触抑制
2.动物细胞培养条件：
⑴许多克隆动物表现出遗传和生 理缺陷，如体型过大，异常肥胖， 发育困难，免疫失调等。 ⑵成功率非常低及克隆动物食品 的安全性问题。
体细胞许核多移克植技隆术动存物在的表问现题 出遗传和 生理缺陷，如体型大，异常肥胖， 发育困难，脏器缺陷，免疫失调 等。
在研究方面，克隆动物基因 组重新编程的机制尚不清楚，克 隆技术效率低，克隆动物畸形率 高、死亡率高、易出现早衰等问 题。这些问题尚在研究中。在应 用上，生产克隆动物费用昂贵， 距大规模应用还有一定距离。
动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体
其中动物细胞培养技术是其他 动物细胞工程技术的基础
动物细胞培养概念：
动物细胞培养 就是从动物机 体中取出相关 的组织,将它分 散成单个细胞, 然后,放在适宜 的培养基中,让 这些细胞生长 和增殖。
动物细胞培养和核移植技术
2.2 动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术在治疗烧伤病人时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。
但对一个大面积烧伤的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源不足，而且会产生排异反应。
那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢?许多动物的细胞能够分泌蛋自质，如抗体等。
但是，单个细胞产生的蛋白质量是很少的，怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?细胞工程中的动物细胞培养技术为解决这些问题找到了出路（图2-15）。
动物细胞培养动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
那么，动物细胞培养的过程是怎样的?培养时又需要提供哪些必要的条件呢?动物细胞培养的过程成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖，因此，进行细胞培养时(图2-16)，首先将组织分散成许多单个细胞。
方法是从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞。
然后，用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养。
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖(图2-17)，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。
以后，细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。
这样的培养过程通常被称为传代培养。
传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。
动物细胞培养和核移植技术(上课用的)
是其他动物细胞工程技术的基础。
动 物 细 通常采用的 胞 技术手段 工 程
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合 单克隆抗体
一、动物细胞培养
1、概念： 动物细胞培养就是从动物机体 内取出相关的组织，将它分散成单 个细胞，然后，放在适宜的培养基 中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理： 细胞增殖
一、动物细胞培养
动物细 胞培养 和核移 植技术
动物细胞培养 动物体 细胞核 移植技 术和克 隆动物
核移植技术和克隆动物的概念 体细胞核移植技术的过程 体细胞核移植技术的应用前景 体细胞核移植技术存在的问题
科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的 奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育速度,可以对此转基 因奶牛进行克隆(如下图),结合图示回答下列相关问题：
科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的 奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育速度,可以对此转基 因奶牛进行克隆(如下图),结合图示回答下列相关问题：
(4)重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母 牛体内就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛,但也 不是100%的复制,其原因可能是___________. ①．生物性状受细胞核和细胞质共同控制； ②．生物性状还受环境因素的影响
2、分类
胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易 体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能性不容易
3、体细胞核移植的过程
1、受体细胞为什么选用 卵母细胞？
卵母细胞体积大，易操作， 而且含有促使细胞核表达全 能性所需的物质和营养条件。
2、为什么不是取供体细 胞核进行核移植操作， 而是直接将供体细胞整 个注入去核卵母细胞中？
保证供核不被破坏，使所得个体的性状更符合供体。
动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术原创
动物细胞工程：动物细胞培养和核移植技术原创介绍动物细胞工程是指将器官、组织或细胞培养繁殖，并利用它们的代谢能力、功能特异性、遗传变异性等特性进行实验或者生产活动。
动物细胞工程是现代化生物工程的基础和核心。
动物细胞培养技术是动物细胞工程的重要组成部分。
它是在体外将动物细胞培养并增殖的技术。
动物细胞培养技术应用广泛，可以用于生产药品、生物材料等。
比如，利用动物细胞培养技术生产抗癌药物、生物仿制药等。
核移植技术是指将某个细胞核植入其他细胞中的一种技术。
它可以用于繁殖优良的动物和植物，实现人工繁殖和育种的效果。
同时，核移植技术在基因工程领域也起到了重要作用。
动物细胞培养技术细胞培养的定义细胞培养是指将组织、器官或个体细胞从组织中或其它来源中获得的原始细胞，在细胞培养基上培养，进行细胞生长及增殖。
细胞培养技术的应用细胞培养技术可应用于医学、药学、农学、生物学等多种领域。
在生物制药领域，细胞培养技术被广泛应用于生产重要的生物药品（如免疫抑制剂、血液制品、疫苗等）。
在研究领域，细胞培养技术可用于开拓疾病治疗新思路、筛选药物、分析细胞信号传导等。
动物细胞培养技术的原理和步骤动物细胞培养技术是将动物组织分离、培养至单细胞状态后，定期更换细胞培养基，以提供适宜的营养物质和维生素，协助细胞生长及增殖。
动物细胞培养技术的主要步骤包括：1.细胞分离和培养基制备：将组织断成小块，利用胶原酶或胰蛋白酶等酶类，分离出单个细胞。
同时将细胞培养基在无菌条件下制成培养基，以支持细胞的生长和增殖。
2.细胞摆放：使用细胞培养器等培养设备，將获得的细胞放置在上面，然后静置数小时，以便细胞附着于培养器的表面。
3.细胞的适应性：将晶体管中的初始培养基更换为所需培养基，使细胞能够适应不同的环境。
4.细胞处理和维护：定期给细胞更换培养基，控制细胞的数量，并进行细胞质染色或形态学检查，观察细胞形态和生长情况。
改进细胞培养技术的策略现代细胞培养技术的进步，对于提高细胞生产能力、分化、培养、利用和存储等方面均具有重要的意义。
高中生物动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术原创
1、进行动物细胞培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间 的主要物质是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
主要：蛋白质。 不能。多数动物细胞培养的适宜PH为7.2-7.4，胃蛋白酶在此环境中会变性失活。
2、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有 何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
为使核移植的胚胎或动物的遗传物质来自有重 要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的 细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞核去 掉或将其破坏。
问题3
用于核移植的供体细胞一般都选用传 代10代以内的细胞，这是为什么？
培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时， 部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质 也可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保 持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中， 为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传 代10代以内的细胞。
二、动物细胞核移植技术和克隆动物
问题1
我们能否利用类似植物组织培养获得 完整植物体的方法培养动物细胞，使 其发育成一个完整的个体？
不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性，而 动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受 到限制，分化潜能逐渐变弱。
全能性高低：
植物细胞＞动物细胞
动物细胞特点？
• 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。
细胞融合 重组 细胞
归纳:
胚胎移植
构建重组胚胎
代孕母体
生出与供体奶牛遗传 基础相同的犊牛
1.两阶段：核移植和胚胎移植
2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状
3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状
高二生物选修(3)课件：2.2.1动物细胞培养和核移植技术
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因 是这样的组织细胞 （ D ） A.容易产生各种变异 B．具有更强的全能性 C.取材十分方便 D．分裂增殖的能力强
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A ） ------------------------------（ A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。
动物细胞工程常用的技术
细胞工程的基本技术
植物细胞工程
植物组织培养技术
动物细胞工程
动物细胞核移植技术
植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体技术 动物细胞培养技术(基础)
一、动物细胞培养 1、概念：
zxxk
是从动物机体中取出相关组织， 将它分散成单个细胞,放在适宜的培 养基中，让这些细胞生长和增殖
思
考
1、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因？ 2、为什么动物细胞培养过程需将组织分散成单个细胞？ 3、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ 4、如何理解原代培养和传代培养？ zxxk 5、传代培养的细胞能一直传代下去吗？为什么？ 6、动物细胞培养需满足哪些条件？ 7、动物细胞培养有哪些应用？
4、种类
体细胞核移植 （难度较高）
胚胎细胞核移植
5、体细胞核移植的过程（克隆高产奶牛）
高产奶牛 （供体）
MⅡ期 卵母细胞 (去核)
供体细胞培养
重组细胞
重组胚胎 胚胎移植
P49
6、应用
①器官移植
②加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育
动物细胞培养和核移植技术课件
(3)如何区分原代培养与传代培养？ 答案 ①原代培养：通常将动物组织消化后的初次培养称 为原代培养。 ②传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处 理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖，即为传代培养。
2．条件 (1)无菌、无毒的环境：培养液应进行_无__菌___处理。 (2)营养：合成培养基的成分为糖、__氨__基__酸___、促生长 因子、无机盐、微量元素、_血__清___、血浆等。 (3)温度和 pH：适宜的温度为__3_6_._5_±_0_.5__℃_____；pH 为 _7_._2_～__7_._4___。 (4)气体环境：_空__气___ 95%和 CO25%的混合气体。
【归纳提炼】 1．不同层次的克隆
(1)分子水平：如DNA复制。 (2)细胞水平：动物细胞培养。 (3)个体水平：“多利”羊的诞生。 2．动物细胞核移植的条件及结果 (1)核移植一般选择去核的卵母细胞，因为卵母细胞体 积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营 养条件。一般不选择生殖细胞作为供核细胞，因为生殖 细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
【归纳提炼】 动物细胞培养与动物组织培养的比较
【活学活用】
1．判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。
(1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性
()
(2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理 ( )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞
()
(4)恒温条件下，细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而
5．应用 (1)加速家畜_遗__传___改良进程，促进优良畜群繁育。 (2)增加濒危动物数量，保护_濒__危___物种。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为_异__种__移植的供体。 (5)用于组织器官的移植。
专题2 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
A.原理
B．培养基区别
C．结果
【尝试解答】 【解析】 A
D．培养目的
本题考查的是植物组织培养和动物细胞
培养相关知识的比较，动物细胞培养的目的是获得 更多细胞或细胞产物。而不是获得个体，其原理只
涉及细胞增殖(细胞分裂)。
【误区警示】
误认为动物细胞培养也是为了获
得一个完整的个体，而得出错误答案“D”，但却 忽略了动物细胞培养只是为了得到细胞或细胞产
此没有产奶量高的优良性状。
【探规寻律】 体细胞核移植的过程必须弄清的 几个问题： (1)动物细胞的全能性会随着动物体的发育而逐渐 受到限制，其主要原因是细胞的分化。 (2)克隆高产奶牛所用的受体细胞是去核的卵母细 胞，处于减数第二次分裂中期。因为卵母细胞中 含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。 (3)克隆高产奶牛过程所利用的生物技术有：细胞 核移植、动物细胞培养、胚胎移植。 (4)目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微 操作法。
制，细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞，A错；
克隆培养法中细胞都是由一个细胞经过有丝分裂而
得的，所以细胞的基因型相同，多数不会发生改变, B错；二倍体细胞传代培养至10代多数会死亡，只 有少数的细胞能够培养至50代以后成为细胞系，C 错；恶性细胞系的细胞具有癌变的特点，能够无限
增殖，可以进行传代培养，D正确。
解析：选A。对动物细胞培养和植物组织培养的知 识理解程度不够，造成了概念上的混淆，认为动物 细胞培养和植物组织培养具体过程相差不大，故误
选B或C或D。动植物细胞培养时培养基的成分差
别较大，动物培养基需加入血清，植物培养基需加
入激素和琼脂。
动物体细胞核移植 1．原理：细胞核的全能性。 2．供核细胞：一般选优良动物的传代培养10代以 内的细胞。 3．受体细胞：去核的MⅡ期卵母细胞。
人教版高中生物选择性必修第3册 动物细胞培养和核移植技术(1)
植物细胞 全能型
结果
培养基的 培养基的 状态 特有成分
产生新植株 细胞产物
固体 植物激素
动物细胞 培养
细胞增殖
产生细胞群 细胞产物
液体
动物血清 血浆
天津市战“疫”微型课
问题
我们能否利用类似植物组织培养获 得完整植物体的方法培养动物细胞， 使其发育成一个完整的个体？
天津市战“疫”微型课
问题
我们能否利用类似植物组织培养获 得完整植物体的方法培养动物细胞， 使其发育成一个完整的个体？
是取患者的健康皮肤进行自体移植。
但对一个大面积烧伤的病人来说，
自体健康皮肤非常有限，而使用他
人皮肤来源不足，而且可能产生排
斥反应，怎样才能获得大量自体健
康皮肤呢？
一、动物细胞培养
（一）、动物细胞培养概念、原理
1、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取 出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放 在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（二）、动物细胞培养的过程
4、传代培养： 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等 处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续 增殖。这样的培养过程就叫传代培养。
分瓶进行 进行传代 培养
出现接 触抑制 分瓶培养
取健康动物组织块
剪碎组织 胰蛋白酶处理
分散成单个细胞
制成细胞悬液 转入培养瓶内 进行原代培养
4、传代培养
取体细胞 供体细 胞培养
高产奶牛
（二）体细胞核移植的过程
选10代以内的细胞
取体细胞
供体细 胞培养
高产奶牛
（二）体细胞核移植的过程
选10代以内的细胞
取体细胞
供体细 胞培养
高产奶牛
从屠宰场卵巢中 采集卵母细胞
结果
培养基的 培养基的 状态 特有成分
产生新植株 细胞产物
固体 植物激素
动物细胞 培养
细胞增殖
产生细胞群 细胞产物
液体
动物血清 血浆
天津市战“疫”微型课
问题
我们能否利用类似植物组织培养获 得完整植物体的方法培养动物细胞， 使其发育成一个完整的个体？
天津市战“疫”微型课
问题
我们能否利用类似植物组织培养获 得完整植物体的方法培养动物细胞， 使其发育成一个完整的个体？
是取患者的健康皮肤进行自体移植。
但对一个大面积烧伤的病人来说，
自体健康皮肤非常有限，而使用他
人皮肤来源不足，而且可能产生排
斥反应，怎样才能获得大量自体健
康皮肤呢？
一、动物细胞培养
（一）、动物细胞培养概念、原理
1、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取 出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放 在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（二）、动物细胞培养的过程
4、传代培养： 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等 处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续 增殖。这样的培养过程就叫传代培养。
分瓶进行 进行传代 培养
出现接 触抑制 分瓶培养
取健康动物组织块
剪碎组织 胰蛋白酶处理
分散成单个细胞
制成细胞悬液 转入培养瓶内 进行原代培养
4、传代培养
取体细胞 供体细 胞培养
高产奶牛
（二）体细胞核移植的过程
选10代以内的细胞
取体细胞
供体细 胞培养
高产奶牛
（二）体细胞核移植的过程
选10代以内的细胞
取体细胞
供体细 胞培养
高产奶牛
从屠宰场卵巢中 采集卵母细胞
高二生物动物细胞工程——动物细胞培养和核移植技术苏教版知识精讲
高二生物动物细胞工程——动物细胞培养和核移植技术苏教版【本讲教育信息】一、教学内容动物细胞工程——动物细胞培养和核移植技术二、良好开端本节重点：1）动物细胞培养的原理、过程及条件2）原代培养和传代培养、细胞株和细胞系3）用动物体细胞核移植克隆动物的过程本节难点：1）动物细胞培养的原理和过程及其与植物组织培养的区别2）用动物体细胞核移植克隆动物的过程三、成功之旅【知识点1】动物细胞培养（一）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（二）动物细胞培养的条件一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件1、无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。
多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
4、气体环境：细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
（三）动物细胞培养的过程：1、贴壁生长现象及接触抑制①贴壁生长：动物细胞在液体培养基中悬浮生长一段时间之后，大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长。
也有一些细胞（如淋巴细胞）能够持续在悬浮状态下生长，这些能长期悬浮生长的细胞容易进行大规模细胞培养，生产大量的动物细胞及其产物。
②接触抑制：细胞有丝分裂，数目增加到表面相互接触时，停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。
2、原代培养：将组织取出来后，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，使组织分散成单个细胞。
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3、动物细胞培养液与植物组织培养基相比，有何独特之处？
动物细胞培养液的独特之处有：
1、液体培养基 2、成分中有动物血清等
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新 的动物个体
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 原理 培养基性质 植物组织培养 细胞的全能性 固体培养基 动物细胞培养 细胞增殖 液体培养基
50代以后细胞失去接触抑制
接触抑制
50代以后 失去接触抑制
原代培养：
人们通常将动物组 织消化后的初次培 养称为原代培养。
传代培养：
贴满瓶壁的细胞需 要重新用胰蛋白酶 等处理，然后分瓶 继续培养，让细胞 继续增殖。这样的 培养过程通常被称 为传代培养。
培养过程： 动物胚胎或幼龄动物 的细胞、组织或器官
及胰蛋白酶 处理的目的？
胰蛋白酶处理
单个细胞
细胞培养
制成细胞悬液
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
（四）动物细胞生长特性
1.细胞贴壁：细胞悬液 中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上，称为 细胞贴壁。
要求：培养瓶或培养 皿的内表面光滑 无毒、易于贴附。
2.接触抑制
接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触 （细胞为单层） 抑制。
P50
动物细胞培养要经过脱分化过程吗？ 为什么？
不经过。因为高度分化的动物细胞发育潜 能变窄，失去了发育成完整个体的能力。
1. 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一 个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2.原理：动物体细胞核的全能性。
核移植 细胞分化程度低，恢复 胚胎细胞核移植： 全能性容易 MⅡ期的卵母 体细胞核移植： 受体细胞： 细胞 （难度高）
① 动 物 细 胞 核 移 植
选用去核卵母细胞的原因： ①卵母细胞比较大，容易操 作；②细胞质多，营养丰富， 含有促进细胞核全能性表达 ②胚胎移植 的物质。 原理：动物细胞核具有全能性和细胞膜的流动性
取该患者的皮 肤进行细胞培 养,获得人造 皮肤后再移植。
一、动物细胞培养 （一）、概念
是指从动物机体内取出相 关的组织，将它分散成单个 细胞，然后放在适宜的培养 基中，让这些细胞生长和增 殖。
（二）、原理
细胞分裂增殖
(三)、动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动物器官
取动物组织块
剪碎组织
剪碎组织及胰蛋白酶处理的 因为这些组织或器官，分 目的：将组织分散成单个细 裂能力旺盛，易于培养。 胞，有利于细胞与培养液充 剪碎组织 分接触，便于培养。
动物细胞工程
动物细胞工程
动物细胞培养 动物细胞工程 常用的技术手段
动物细胞核移植
动物细胞融合
生产单克隆抗体
其中，动物细胞培养技术是其他 动物细胞工程技术的基础。
思考？
烧伤病人的治疗 通常是取烧伤病 人的健康皮肤进 行自体移植。
但对于大面积烧 伤病人来讲，健 康皮肤很有限， 请同学们想一想 如何来治疗该病 人？
3）.医药卫生领域
4）.作为异种移植供体 5）.应用于组织器官的移植
体细胞核移植技术存在的问题
1、成功率低 2、存在健康问题
（如异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等）
3、克隆动物食品的安全性也存在争议
3.你认为用上 述体细胞核移植方法生产的克隆 动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复 制吗？为什么？ 不是。 ①克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核， 少部分DNA来自于受体卵母细胞的线粒体。 ②还受动物生活环境的影响。
体细胞核移植技术的应用前景
1）.加速家畜遗传改良进程 2）.保护濒危动物
培养基特有成分 蔗糖 培养结果 培养目的
植物激素 葡萄糖 动物血清 植物体 细胞数目增多 获得细胞或细胞 分泌蛋白
快速繁殖、培育 无病毒植株
动物细胞培养技术的应用
生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单 克隆抗体等 健康细胞培养：如获得大量自身的皮肤细胞， 用于植皮。 用于检测有毒物质 用于生理、病理、药理等方面的研究，为治 疗和预防疾病提供理论依据
讨论：
P49
1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使遗传物质全部来自有重要利用价值的动物。
2.用于核移植 的供体细胞一般都选用传 代10代以内的细胞，想一想，这是为什 么？ 培养的动物细胞一般当传代至10～ 50代左右时，部分细胞核型可能会发生 变化，其细胞遗传物质可能会发生突变， 而 10代以内的细胞一般能保持正常的二 倍体核型。
剪碎 胰蛋白酶 加培养液
单个细胞 接触 抑制 细胞悬浮液
细胞贴壁
→原代培养
10代细胞
剥离 分瓶
动物细胞培养 最终不能培养 成动物体
50代细胞
无限传代
传代培养 部分细胞的细胞 核型发生变化
培养器皿
实验设备
倒置显微镜
超净工作台 细胞培养箱
（五）、动物细胞培养条件
1、无菌、无毒的环境 （①添加一定量的抗生素；②定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微 量元素等） （使用合成培养基时，需加入血清、血浆等） 3、温度和PH 补充合成培 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 养基中缺乏 4、气体环境 的物质，如 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）血清激素、 氨基酸等。 CO2有调节PH的作用。
思考与讨论
P44
1、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细 胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
主要是蛋白质。 不行，因为动物细胞培养适宜PH为7.2—7.4，而胃蛋白酶 适宜PH为2.0，胃蛋白酶会失去活性。
2、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
长时间会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用。所以应 控制好胰蛋白酶的消化时间。