人白细胞介素27IL-27酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

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人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H0149c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话技术部电话************电子邮箱(销售)********************电子邮箱(技术)**************************网址:具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。

Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中IL-1β浓度。

人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒-高灵敏度标准OD值!

人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒-高灵敏度标准OD值!

人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,高灵敏度+标准OD值!刚刚进入实验室的新手科研er一定会被ELISA试剂盒数以千计的种类、数以百家的品牌绕花眼,而实验老手们,可能也经常会被做实验时明明正常建模,标曲测定的数值和线性关系也正常,但就是结果出现各种问题所头疼,这个时候,大家就要思考一下,你所选择的ELISA试剂盒是不是最合适并且质量又可靠呢?人白介素1β(IL-1β)是大家做实验中比较常见的一种细胞因子,而它也与我们的常见的类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮性关节炎等息息相关,并且最近有研究表明,IL-1β的表达,还与口腔、胃支气管等多种病症相关,可研究价值巨大。

一般来说,OA患者滑液中IL-1β的含量平均为(90.51±5.03)pg/ml。

在实验过程中,我们通常采用ELISA法测定血清IL-1β的含量,这个时候,选择一款高灵敏度+完美标曲的ELISA试剂盒,就显得尤为重要。

我们推荐——Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,科研老手新手的“眼花头疼”问题统统解决!Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒原理采用双抗体夹心ELISA法。

用抗人IL-1β抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人IL-1β会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。

依次加入生物素化的抗人IL-1β抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。

抗人IL-1β抗体与结合在包被抗体上的人IL-1β结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。

用酶标仪在450nm波长处测OD 值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-1β的浓度。

标准情况下,Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒的灵敏度为4.69pg/ml,检测范围为7.81—500 pg/mL,可以说是非常标准的皮克级高敏试剂,且与其它相关蛋白无明显交叉反应,也基本不存在背景干扰,可以说是新老科研er们均适宜了。

人白细胞介素-10(IL-10)

人白细胞介素-10(IL-10)

人白细胞介素-10(IL-10)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。

本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素-10(IL-10),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。

用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-10(IL-10)的测定。

工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素-10(IL-10)的水平。

向预先包被了人白细胞介素-10(IL-10)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-10(IL-10),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素-10(IL-10)抗体。

再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅与样品中人白细胞介素-10(IL-10)的浓度呈正相关。

试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。

2.标准规格酶标仪。

3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。

酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.建议所有标准品、样本都做双份检测。

如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6.不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少注入孔内,浸泡1-2分钟。

根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书

人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒(Human VEGF ELISA KIT)产品货号:H6139S, H6139M, H6139L产品规格:24T, 48T, 96T产品内容:注:终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。

储存条件4℃避光保存,有效期见外包装。

开封后,保存温度详见说明书。

产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒,可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。

人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白,基因定位于第6号染色体长臂,由8个外显子和7个内含子交替构成,约14 kb。

由于mRNA剪接方式不同,产生了单链分别含121,145,165,183,189和206个氨基酸的不同变异体。

VEGF 121分子量约为34-46 kDa,是可溶性分泌型蛋白质,以游离状态存在,不能与肝素结合;VEGF 165分子量为45 kDa,30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质,其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。

VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。

VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。

骨骼肌,心肌,肝细胞,成骨细胞,中性粒细胞,巨噬细胞,角质形成细胞,血小板,褐色脂肪组织,CD34+细胞,星形细胞,神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。

血清和血浆样本均可检测到VEGF,由于血小板可释放VEGF,因此血清中VEGF含量较高。

VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。

碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书

碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。

本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。

多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。

IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。

IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。

正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。

IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。

人(Human)白蛋白(Albumin)ELISA试剂盒

人(Human)白蛋白(Albumin)ELISA试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)白蛋白(Albumin)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被白蛋白(Albumin)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白蛋白(Albumin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、15、30、60、120、240ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

联科生物技术 细胞因子 ELISA 试剂盒

联科生物技术 细胞因子 ELISA 试剂盒

联科生物技术有限公司 全国免费电话:800 8571 184第四章细胞因子ELISA 试剂盒简介:美国Peprotech公司作为知名的重组细胞因子生产商,开发出了50余种细胞因子的ELISA检测试剂盒,试剂盒的检测灵敏度高,检测范围宽,为您的科研提供了又一有力的工具。

试剂盒组分及重悬方法:包被抗体--100ug 经抗原亲和纯化的包被抗体,冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃,保存两个月;-20℃分装冻存可贮存6个月检测抗体--100ug 经抗原亲和纯化的生物素标记的检测抗体,冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃,保存两个月;-20℃分装冻存可贮存6个月标准品--准确计量的重组细胞因子冻干粉,具体含量见说明书重悬--按说明书1ml无菌蒸馏水重悬成适当浓度的贮存液保存--4-8℃,保存1周;-20℃分装冻存可贮存2个月亲合素偶联的过氧化物酶--60ul/瓶,液体分装--分装到10只小瓶中,每瓶6ul保存---20℃分装冻存可贮存2年实验所需的材料:ELISA酶标板:推荐Nunc maxisorp,产品编号:442404Tween-20:推荐Sigma,产品编号:P-7949BSA(牛血清白蛋白):推荐Sigma,产品编号:A-7030ABTS底物溶液:推荐Sigma,产品编号:A-3219Dulbecco's PBS(10X):推荐Gibco BRL,产品编号:14200-075相关溶液配制:PBS:用无菌蒸馏水将10X PBS稀释为1X PBS洗涤液:含0.05% Tween-20的PBS封闭液:含1% BSA的PBS,过滤除菌,4℃保存1周稀释液:含0.05% Tween-20和0.1% BSA的PBS,过滤除菌,4℃保存1周注:以上所有试剂在使用前必须复温至室温。

包板:1) 用PBS将包被抗体稀释成1ug/ml,立即加到酶标板中,每孔100ul;2) 密封酶标板,室温孵育过夜;3) 吸除孔中的液体,并用300ul洗涤液洗孔4次;4) 最后一次洗涤后,将酶标板倒置除去残留的液体,并倒扣在吸水纸吸干孔沿上的液体;5) 每孔加300ul封闭液,室温孵育至少1小时;6) 吸除孔中的液体,并洗孔4次。

人白细胞介素27 (IL-27)说明书

人白细胞介素27 (IL-27)说明书

人白细胞介素27 (IL-27)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中白细胞介素27 (IL-27)的含量。

实验原理:本试剂盒应用夹心法测定标本中白细胞介素27 (IL-27)水平。

用纯化的人白细胞介素27 (IL-27)抗体包被微孔板,往微孔中依次加入白细胞介素27 (IL-27),再与HRP标记的白细胞介素27 (IL-27)抗体结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素27 (IL-27)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中白细胞介素27 (IL-27)浓度。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

细胞因子九项检测科普

细胞因子九项检测科普

细胞因子九项检测科普什么是细胞因子细胞因子是一类介导细胞间相互作用的蛋白质,它们可以作为信号分子在细胞和细胞之间进行通讯。

细胞因子在机体的免疫反应、炎症反应以及许多其他生理过程中发挥重要的调节作用。

不同类型的细胞产生不同种类的细胞因子,比如肿瘤坏死因子、白细胞介素等。

为什么需要进行细胞因子九项检测细胞因子九项检测是通过检测某些关键细胞因子的水平,来评估机体的免疫状态和炎症程度的一种检测方法。

这些细胞因子的水平变化与很多疾病的发生和发展密切相关,包括慢性炎症性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤等。

进行细胞因子九项检测可以帮助临床医生更好地了解疾病的病理过程、判断疾病的严重程度以及制定更合理的治疗方案。

此外,对于某些疾病的预后判断和效果评价也具有一定的参考价值。

细胞因子九项检测包括哪些指标细胞因子九项检测通常包括以下几个重要的指标:1.白细胞介素-2(IL-2):它是一种重要的T细胞生长因子,对免疫系统的调节具有重要作用。

2.白细胞介素-4(IL-4):它是一种重要的T细胞细胞因子,能够促进B细胞的增殖和抗体产生。

3.白细胞介素-6(IL-6):它是一种重要的炎症介质,能够促进炎症反应的发生和发展。

4.白细胞介素-8(IL-8):它是一种重要的趋化因子,在炎症反应中发挥重要作用。

5.白细胞介素-10(IL-10):它是一种重要的免疫抑制因子,能够抑制炎症反应和免疫系统的活性。

6.肿瘤坏死因子-α(TNF-α):它是一种重要的炎症介质,参与许多炎症性疾病的发生和发展。

7.干扰素-γ(IFN-γ):它是一种重要的免疫调节因子,能够促进宿主免疫系统的抗病毒和抗肿瘤反应。

8.变态反应因子(IgE):它是一种抗体,参与机体的过敏反应。

9.血清白细胞介素-17(sIL-17):它是一种炎症介质,与自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。

细胞因子九项检测的应用领域细胞因子九项检测在许多疾病的诊断和治疗中具有重要的应用价值。

以下是一些常见领域:1. 免疫性疾病细胞因子九项检测可以帮助医生评估免疫性疾病的炎症程度和免疫状态,例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。

人白介素10(IL-10)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人白介素10(IL-10)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人白介素10(IL-10)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:12.5pg/ml-800pg/ml,最低检测限:3pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-10,且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-10含量。

说明?试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

?浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

?中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

?刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

概述:白细胞介素10(IL-10)是近几年新发现的细胞因子,又称细胞素合成抑制因子,为含178个氨基酸残基的单肽链糖蛋白(其中N端18个氨基酸信号肽序列)。

IL-10分子量35-40kDa,通常为二聚体,其基因为单拷贝基因。

人的IL-10基因定位于第1号染色体上,限制性内切图谱提示该基因至少含3个间隔序列,同其他已知细胞因子基因的核苷酸序列货对应的蛋白质序列比较,IL-10与这些细胞因子无明显的顺序同源性。

IL-10主要由Th2细胞产生,但Tho 细胞、Th细胞、CD8+T细胞、活化的B细胞、单核-巨噬细胞、kupffer细胞、肝细胞、角化细胞等也可产生。

IL-10是具有多向性生物学活性的强免疫抑制因子,能改变机体的免疫应答和MHCⅡ类抗原的表达,并介导Th1和Th2两类细胞之间的相互调节。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-10抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-10抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的IL-10呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

人促红细胞生成素(EPO)-酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

人促红细胞生成素(EPO)-酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

仅供科研使用,不得用于临床检验。

人促红细胞生成素(EPO )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称:人促红细胞生成素(EPO )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)英文名称:Human Erythropoietin(EPO )ELISA KIT【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人促红细胞生成素(EPO )的浓度。

【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。

在预包被抗人促红细胞生成素(EPO )抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入人促红细胞生成素(EPO )校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗人促红细胞生成素(EPO )抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。

加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人促红细胞生成素(EPO )的浓度正相关。

拟合校准品曲线,可以计算出样本中人促红细胞生成素(EPO )的浓度。

【主要组成成分】主要成分校准品检测范围:47-3000pg/ml。

校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。

2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

人白细胞介素35(IL-35)ELISA试剂盒说明书

人白细胞介素35(IL-35)ELISA试剂盒说明书

人白细胞介素-35(IL-35)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素35(IL-35)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素35(IL-35)水平。

用纯化的人白细胞介素35抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素35,再与HRP标记的IL-35抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的IL-35呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素35(IL-35)浓度。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

人Human白细胞介素2IL2ELISA检测试剂盒利用方式

人Human白细胞介素2IL2ELISA检测试剂盒利用方式

人(Human) 白细胞介素-2(IL-2)ELISA 检测试剂盒利用方式用途:人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各类体液中的IL-2 。

本试剂盒能够检测天然和重组的IL-2 。

本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。

实验原理:人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。

再通过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。

2.加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。

3.振荡器及磁力搅拌器等。

平安性1.此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可完全保证此血制品可不能传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据本地的平安条例处置本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。

2.幸免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

3.实验中不要吃喝、抽烟或利用化妆品。

4.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1.试剂应按标签说明书贮存,利用前恢复到室温。

稀稀事后的标准品应抛弃,不可保留。

2.实验中不用的板条应当即放回包装袋中,密封保留,以避免变质。

3.不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前利用。

4.利用一次性的吸头以避免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,幸免利用带金属部份的加样器。

5.利用干净的塑料容器配置洗涤液。

利用前充分混匀试剂盒里的各类成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反映孔中吸水。

7.底物A应挥发,幸免长时刻打开盖子。

底物B对光灵敏,幸免长时刻暴露于光下。

人白细胞介素1a(IL-1a)

人白细胞介素1a(IL-1a)

人白细胞介素1a(IL-1a)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。

本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素1a(IL-1a),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。

用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1a(IL-1a)的测定。

工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素1a (IL-1a)的水平。

向预先包被了人白细胞介素1a(IL-1a)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素1a(IL-1a),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素1a(IL-1a)抗体。

再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅与样品中人白细胞介素1a(IL-1a)的浓度呈正相关。

试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。

2.标准规格酶标仪。

3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。

酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.建议所有标准品、样本都做双份检测。

如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6.不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。

根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

人白细胞介素2(IL-2)说明书

人白细胞介素2(IL-2)说明书

人白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2(IL-2)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2(IL-2)水平。

用纯化的人白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2(IL-2)浓度。

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

人白细胞介素17(IL-17)说明书

人白细胞介素17(IL-17)说明书

人白细胞介素17(IL-17)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素17(IL-17)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-17(IL-17)水平。

用纯化的人白细胞介素-17(IL-17)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-17,再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞介素-17(IL-17)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-17(IL-17)含量。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

细胞因子与细胞黏附因子的测定

细胞因子与细胞黏附因子的测定

细胞因子与细胞黏附因子的测定细胞因子与细胞黏附因子的测定是一项引人入胜的研究。

咱们的身体里,细胞因子就像是小信使,传递信息、调节免疫反应。

细胞黏附因子则是细胞之间的粘合剂,帮助它们相互联系、交流。

你能想象吗?如果没有这些因子,咱们的身体就像一盘散沙,完全无法正常运作。

首先,咱们来看看细胞因子的种类。

它们有很多,像肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素(ILs),都是常见的。

每一种都有独特的功能。

就拿TNF来说,它可以激活免疫细胞,帮助抵御感染。

可是,过量的TNF又可能导致炎症,搞得人不舒服。

这就好比一把双刃剑,使用得当能保护身体,滥用则会造成伤害。

然后,再聊聊细胞黏附因子。

这些因子对细胞的“交际”至关重要。

比如,整合素和选择素,它们的存在就像社交网络,让细胞能够顺畅沟通。

整合素帮助白血球穿透血管壁,参与免疫反应。

没有它们,白细胞就没法到达感染部位,身体的防线就会被攻破。

接着,细胞因子和细胞黏附因子之间的关系更是紧密。

它们相互作用,形成了一套复杂的信号传递网络。

细胞因子可以促进黏附因子的表达,而黏附因子又能增强细胞对细胞因子的反应。

就像是一对舞伴,互相依赖,缺一不可。

在测定这些因子的过程中,咱们通常会使用酶联免疫吸附实验(ELISA)。

这个方法简单易行,结果准确。

实验步骤包括样本的收集、稀释,再通过抗体的特异性结合来检测目标因子。

成功的测定能让我们更好地理解疾病机制,为治疗提供依据。

再来说说一些实验结果。

很多研究发现,某些疾病如类风湿性关节炎、糖尿病等,细胞因子和细胞黏附因子的水平显著升高。

这些发现让咱们意识到,监测这些因子的变化可以帮助早期诊断疾病,甚至监测治疗效果。

不过,这里也有挑战。

不同个体之间的差异性会影响结果。

环境因素、遗传背景都会影响因子的表达。

就好像同样的食谱,不同的人做出来的味道不尽相同。

研究者们必须考虑这些变量,才能得到更可靠的结论。

在未来的研究中,咱们可以进一步探索细胞因子和细胞黏附因子在不同疾病中的具体角色。

TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10联合检测在儿童传染性单核细胞增多症中的诊断价值

TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10联合检测在儿童传染性单核细胞增多症中的诊断价值

1.476)、TNF-α(OR =15.991,95%CI:5.476~369.052)、IL-1β(OR =2.015,95%CI:1.095~3.706)、IL-6
(OR=2.853,95%CI:1.398~5.822)及IL-10(OR =1.221,95%CI:1.083~1.377)为IM 的 危 险 因 素 (P<
儿空腹静脉血清 TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10水平,并收 集 患 儿 一 般 资 料 及 实 验 室 检 查 资 料。通 过 Logistic回
归分析 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平与IM 的关系,而后建立基于 TNF-α、IL-1β、IL-6 及IL-10 水平的预测列
Key words:tumor necrosisfactor α; interleukin; infectious mononucleosis; children; diagnostic efficacy
传染性单核细胞 增 多 症 (IM)患 儿 的 免 疫 因 子 表 达可能发 生 异 常[1-2]。IM 作 为 以 发 热 起 病 的 感 染 性 疾病,免疫因 子 并 非 其 特 异 性 诊 断 因 素,容 易 与 其 他 感染性疾病混淆 。 [3] 肿瘤坏死因子 α(TNF-α)由 巨 噬 细胞释放,在 感 染 性 疾 病 中 TNF-α 水 平 可 能 出 现 异 常;白细胞介 素 (IL)由 白 细 胞 释 放,在 感 染 性 疾 病 发 病过程中起着传 递 抗 原 信 息 的 作 用 。 [4-6] 本 研 究 旨 在
良好。结论 TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10联合检测可以有效地提升IM 患儿的诊断效能,可以将之运用于基层
医院发热患儿IM 的早期诊断中。

血清学指标结合ESSDAI在原发性干燥综合征中的临床价值

血清学指标结合ESSDAI在原发性干燥综合征中的临床价值

血清学指标结合ESSDAI在原发性干燥综合征中的临床价值周丽芳;姜帆;王媛;吴广明;曾玮【摘要】目的探讨血清学指标结合干燥综合征疾病活动指数(ESSDAI)在原发性干燥综合征中的研究价值.方法选择2013年2月至2016年12月在该院诊治原发性干燥综合征患者68例作为干燥综合征组,选择同期在该院体检的健康者68例作为对照组,两组均进行ESSDAI评分与血清学指标检测[白细胞介素(IL)-27、IL-10、1,25(O H)2D],同时进行相关性分析.结果干燥综合征组的ESSDAI评分为(14.21 ± 1.03)分,明显高于对照组的(1.87 ± 0.45)分,差异有统计学意义(t=13.224,P<0.05).干燥综合征组的血清IL-10、IL-27、1,25(O H)2D值分别为(158.33 ±32.19)pg/mL、(84.33 ± 14.29)pg/mL和(8.42 ± 2.49)ng/mL,对照组分别为(37.44 ± 14.92)pg/mL、(23.11 ± 1.94)pg/mL 和(34.10 ± 3.41)ng/mL,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05).Spearman相关分析显示干燥综合征患者的ESSDAI评分与IL-10、IL-27呈正相关(P<0.05),与1,25(OH)2D呈负相关(P<0.05).多元Logistic回归分析结果显示IL-10、IL-27、1,25(OH)2D为影响ESSDAI评分的主要危险因素(P<0.05).结论 ESSDAI为评估干燥综合征患者病情的常见指标,干燥综合征患者存在血清IL-10、IL-27、1,25(OH)2D表达异常情况,三者联合检测对于干燥综合征的诊断有一定的应用价值.%Objective To investigate the clinical value of serum index combined with EULAR Sjogren syn-drome disease activity index(ESSDAI)in primary Sjogren syndrome(SS).Methods From February 2013 to December 2016,68 patients with SS in our hospital were selected as the SS group,and another 68 healthy peo-ple in our hospital physical examination were selected as the control group,two groups were tested with ESS-DAI score and serum index[IL-27,IL-10,1,25(OH)2D],and the correlation analysis was conducted.Results The ESSDAI score of SS group was 14.21 ± 1.03,which was significantly higher than that of the control group of 1.87 ± 0.45(t=13.224,P<0.05).The values of IL-10,IL-27,1,25(OH)2D in the sera of SS group were(158.33 ±32.19)pg/mL,(84.33 ± 14.29)pg/mL and(8.42 ± 2.49)ng/mL,in contrastto(37.44 ± 14.92)pg/mL,(23.11 ± 1.94)pg/mL and(34.10 ± 3.41)ng/mL in the control group,respectively.There was statistically significant difference compared between the two groups(P<0.05).Spearman correlation analysis showed that the ESSDAI score were positively correlated with IL-10 and IL-27(P<0.05),and showed signif-icant negatively correlated with1,25(OH)2D(P<0.05).Multivariate logistic regression analysis showed that IL-10,IL-27,1,25(OH)2D were the main risk factors that affected ESSDAI score(P<0.05).Conclusion ES-SDAI is a common index to evaluate the SS patients'condition.SS patients have obvious abnormal serum IL-10,IL-27 and 1,25(OH)2D levels which shows reciprocal interactions with ESSDAI score,which can be evalu-ated together for better applicable implications.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2018(015)005【总页数】4页(P577-579,582)【关键词】干燥综合征疾病活动指数;白细胞介素;干燥综合征【作者】周丽芳;姜帆;王媛;吴广明;曾玮【作者单位】首都医科大学附属北京潞河医院风湿免疫科 101149;首都医科大学附属北京潞河医院风湿免疫科 101149;首都医科大学附属北京潞河医院风湿免疫科 101149;首都医科大学附属北京潞河医院风湿免疫科 101149;首都医科大学附属北京潞河医院风湿免疫科 101149【正文语种】中文【中图分类】R593.2干燥综合征是一种相对稳定、进展缓慢的结缔组织病,也是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫疾病,随着时间的延长会出现病情的活动或脏器损伤[1-3]。

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仅供科研使用,不得用于临床检验。

人白细胞介素27(IL-27)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书
黄石市艾恩斯生物科技有限公司
【产品名称】
通用名称:人白细胞介素27(IL-27)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
英文名称:Human Interleukin-27(IL-27)ELISA KIT
【包装规格】
48人份/盒,96人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人白细胞介素27(IL-27)的浓度。

【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。

在预包被抗人白细胞介素27(IL-27)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入人白细胞介素27(IL-27)校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗人白细胞介素27(IL-27)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。

加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人白细胞介素27(IL-27)的浓度正相关。

拟合校准品曲线,可以计算出样本中人白细胞介素27(IL-27)的浓度。

【主要组成成分】
主要成分
校准品检测范围:0.156-10ng/ml。

校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
【储存条件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。

2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

3、开封后,按照建议的条件保存,校准品、包被微孔板和HRP标记抗体,有效期为14天,其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。

【适用仪器】
半自动的酶标仪,如Thermo MK3,或者国产酶标仪。

【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。

所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。

1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。

2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。

3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。

在4000rpm条件下,离心20分钟取上
清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。

样本在2-8℃条件下,可以储存72h,或者在- 20℃储存6个月。

样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。

【检验方法】
1、使用前,所有的组分都要至少复温30min,确保充分复温到室温。

2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。

浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。

3、底物:底物液A和B,在使用前,按1:1体积充分混合,混合后15分钟内使用。

1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。

2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。

3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。

4、设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,样本孔加待测样本50μL,空白孔不加。

5、除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。

6、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

7、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。

8、如此重复4次(共洗板5次)。

若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。

洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。

9、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。

用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15min。

10、所有孔加入终止液50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。

【检验结果的解释】
检测完成后,以标准品浓度做为纵坐标,对应的吸光度(OD值)作为横坐标,利用计算机软件,采用四参数Logistic曲线拟合(4-pl),创建标准曲线方程,通过样本的吸光度(OD 值),利用方程计算样品的浓度值。

如果样品被稀释,通过上述方法测的的浓度值,要乘以稀释倍数,才是样品的最终浓度。

【检验方法的局限性】
1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。

2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。

3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。

4、使用试剂盒配套的样品稀释液。

5、如果样本值高于最高标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。

6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。

7、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。

【产品性能指标】
1、物理性能
试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。

微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。

2、剂量反应曲线线性
校准品剂量反应曲线相关系数r值,大于等于0.9900。

3、精密度
批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。

批内变异系数CV%小于10%。

批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。

批间变异系数CV%小于15%。

4、灵敏度
最低检出剂量小于。

5、回收率
三组已知的高、中、低浓度样品,进行五次回收率评估,回收率在85%-115%之间。

6、特异性
本试剂盒识别天然和重组人白细胞介素27(IL-27),与结构类似物无交叉。

7、稳定性
2℃-8℃保存,有效期6个月。

【注意事项】
生物安全
1、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。

2、试剂盒的液体组分中,含有proclin-300防腐剂,可能引起皮肤过敏反应,避免吸入烟雾与皮肤接触。

3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入烟雾。

戴上防护手套,实验完成后彻底洗手。

技术提示
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。

2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。

3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。

4、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。

5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。

6、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

7、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。

废物处理
所有使用或未使用的试剂,所有污染性的一次性材料,应当遵循传染性或潜在传染性产品的处理程序,每个实验室都有责任根据其实验的类型和危险性级别,进行废物和污物的处理,同时要严格依照有关规定对待所有的废物和污物。

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