免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约18个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约55分钟4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN43092．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品：IF试剂抗体（1）商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5×1ml（3）PN4315七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳(ＨYＤRＡＧＥL IMMUＮＯFIXAＴION)二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现得异常条带主要存在于β—球蛋白与γ—球蛋白区域,通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带,可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳就是一种简单得技术,电泳后得蛋白质与相应抗体形成复合物与被固定在相应得位置上,通过下列四个步骤:1。
蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2。
电泳后已分离得蛋白质被固定并产生免疫沉淀:应用固定剂与抗血清加于凝胶表面得泳道上,并让固定剂与抗血清在凝胶内渗透扩散、３。
使用吸水纸与清洗将未沉淀得蛋白质去除,已被沉淀得蛋白质贮留在凝胶内。
4、将蛋白质染色,并将这些免疫沉淀区带得位置与蛋白质经电泳后观察到得异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带,样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后,ELP作为参考泳道以显示电泳后得蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它(们)与抗血清,γ(IｇG)、α(ＩｇA)、μ(IgM)重链与κ、λ轻链(游离与非游离)反应与否进行鉴别、该技术简单、快速、图象清晰,易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tｉｓｅlius发现了移界电泳(moviｎg bounｄａry ｅectrophoresis),而后,这种技术得各种局限性已逐渐被区带电泳(zoｎe eｌecrｒophoresiｓ)所克服,区带电泳得条件与支持介质得选择就是电泳成败得关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性就是鉴定某一蛋白成分最好得方法,免疫固定电泳技术就是目前应用最广泛得方法之一。
五．仪器（一）型号:ＳＥBIA HＹＤRASYＳ(PＮ12１0)（二）分析与计算参数:1．处理量:约18个样本/小时2．所需样本量:10ul3．检验时间:约55分钟4．重复性:有良好得批内与批间重复性5．电泳参数:电压0—30０V(可选至３０00V)电流0—500mＡ功率0-１00Ｗ六．试剂及配套品（一）试剂1．HＹDＲＡGEＬ1 IF试剂盒HＹDＲAＧＥL 2IF试剂盒HYDRＡGEL 4IF试剂盒HYＤＲAGＥL 9 ＩＦ试剂盒（1）商标:ＳＥBIA（2）包装规格:10测试/2０测试／40测试/90测试（3）货号:ＰN４301/ＰN４３0２／PN4３04/ＰN４３０９2．脱色液(1) 商标:SＥＢIA(2)包装规格:Ｐａcｋfｏr １０×100ml(3) 货号:PＮ4５40(４) 成分:柠檬酸3、洗涤液（1）商标:ＳEBＩA（2）包装规格:Paｃk foｒ10×80ｍl（3）货号:ＰＮ4541（4）成分:叠氮钠4.稀释剂（1）商标:SEＢIA（2）包装规格:Paｃｋfｏr1×５ml（3）货号:PN458７（二）配套品:ＩＦ试剂抗体(1) 商标:SEBIA(2 ) 包装规格:Pａcｋfor 5×1mｌ(３)PＮ4３15七．操作步骤㈠开机,启动电泳仪。
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程项目名称免疫固定电泳( HYDRAGEL IMMUNOFIXATION)检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳方法学原理血清蛋白电泳中岀现的异常条带主要存在于B -球蛋白和丫 -球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤： 1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它(们)与抗血清，丫(IgG)、a (IgA)、卩(IgM)重链和K、入轻链(游离和非游离)反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
方法学溯源自 1930 年由 Tiselius 发现了移界电泳( moving boundary eectrophoresis )，而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳( zone elecrrophoresis )所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
仪器型号： SEBIA HYDRASYS (PN1210)分析和计算参数：处理量：约 18 个样本 / 小时所需样本量： 10ul检验时间：约 55 分钟重复性：有良好的批内和批间重复性电泳参数：电压 0 — 300V (可选至 3000V)电流 0－ 500mA功率 0— 100W试剂及配套品试剂HYDRAGEL 1 IF式剂盒HYDRAGEL 2 IF式剂盒HYDRAGEL 4 IF式剂盒HYDRAGEL 9 IF式剂盒商标：SEBIA包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN4309脱色液(1)商标：SEBIA(2)包装规格：Pack for 10 x 100ml(3)货号：PN4540(4)成分：柠檬酸3 •洗涤液商标：SEBIA包装规格：Pack for 10 x 80ml货号：PN4541成分：叠氮钠4 .稀释剂商标：SEBIA包装规格：Pack for 1 x 5ml货号：PN4587配套品：IF试剂抗体(1) 商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5 x 1ml(3) PN4315操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
免疫固定电泳报告解读
免疫固定电泳报告解读免疫固定电泳是一种重要的实验技术，广泛应用于生物医学研究和临床诊断领域。
通过将待检测的抗原与抗体结合后进行电泳分离，可以对蛋白质分子进行定量和定性分析。
本文将针对免疫固定电泳的原理、方法和报告解读进行详细介绍。
**一、免疫固定电泳的原理**免疫固定电泳是结合了免疫学和电泳技术的一种生物化学方法。
其原理基于抗原与抗体结合的特异性，在电泳条件下可以将待检测的蛋白质分子进行分离和检测。
具体步骤如下：1. 样品制备：待检测的蛋白质样品首先与特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
2. 电泳分离：将样品加载到电泳凝胶中，施加电场进行电泳分离。
抗原-抗体复合物根据大小和电荷的差异在电场作用下发生迁移，完成分离。
3. 免疫检测：电泳结束后，将凝胶转移到膜上，并进行免疫检测。
通过特异性的抗体标记，可以定量和定性检测抗原的存在。
**二、免疫固定电泳的方法**免疫固定电泳的方法主要包括样品制备、电泳分离和免疫检测三个步骤。
具体操作如下：1. 样品制备：将待检测的蛋白质样品与特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。
通常采用预实验确定最佳的抗原-抗体比例，以保证实验的准确性。
2. 电泳分离：将样品加载到聚丙烯酰胺凝胶中，施加电场进行电泳分离。
根据抗原-抗体复合物的大小和电荷差异，进行分离。
通常采用双向电泳，以获得更好的分离效果。
3. 免疫检测：电泳结束后，将凝胶转移到膜上，进行免疫检测。
通常采用酶联免疫吸附试验（ELISA）或放射免疫沉淀分析（RIA）等方法，通过特异性抗体标记进行检测。
**三、免疫固定电泳报告解读**免疫固定电泳的报告通常包括电泳图谱和免疫检测结果，解读主要针对以下几个方面：1. 电泳图谱分析：通过电泳图谱可以观察到抗原-抗体复合物的分离情况，包括带电率、分子量等信息。
根据复合物的迁移位置和带电率，可以初步判断抗原的存在和性质。
2. 免疫检测结果：通过免疫检测可以定量和定性地检测抗原的存在。
免疫固定电泳(HYDRAGEL IMMUNOFIXATION)操作规程(1)
免疫固定电泳(HYDRAGEL IMMUNOFIXATION)操作规程（1）一、项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二、检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三、方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1、蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2、电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3、使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4、将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四、方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophore sis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecr rophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五、仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1、处理量：约18个样本/小时2、所需样本量：10ul3、检验时间：约55分钟4、重复性：有良好的批内和批间重复性5、电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W。
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约18个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约55分钟4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN43092．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品：IF试剂抗体（1）商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5×1ml（3）PN4315七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
Sebia血清免疫固定SOP
Sebia血清蛋白免疫固定标准操作流程一、实验前的准备耗材：小炮弹管或生化小杯子、加样枪2把（5-50ul和20-200ul）、蒸馏水或去离子水500ml、二、操作流程：1、打开机器，选择电泳程序“IF”，选择染色程序“”，检查1、血清稀释并混匀1、加样梳点样（以4人份为例）其中1、8、15泳道不加样。
3、10泳道加各自的LgG。
剩下其余各泳道加样10μL。
加完样的加样梳放置保湿盒内，最后一个样品加完后放至保湿盒内（齿朝上，扩散5分钟）。
2、海绵条放置将海绵条挂在电极丝两端的金属钉上，海绵较凸起部分面向操作人员。
4、胶片处理（免疫固定专用胶片、薄滤纸）电泳模块的温控板下方三分之一处用加样枪加200μL蒸馏水；从黑色底框边开始放置胶片，使水层与温控板充分贴合，没有气泡；用薄滤纸迅速吸取胶片上多余的水分；放下黑色的运送器，将加样梳插至第6齿上，合上机盖。
5、电泳，选择免疫固定电泳程序，开始。
6、加抗血清（抗血清、基准色卡、抗体杯架、推动安装架）扔掉使用过的加样梳和海绵条，移除运送器。
将不锈钢固定架置于温控板底端；将抗体杯架装在推动安装架上，再放到胶片和固定架上；照基准色卡对应的孔加相应的抗血清（10μL）。
均匀地将抗血清推到各通道上。
7、孵育（按开始键继续）8、用厚滤纸（光滑面朝下）充分吸去多余的凝胶后，扔掉厚滤纸，继续至自动烘干。
9、染色、褪色、清洗、烘干取出胶片，用胶片固定架将其固定后插入染色槽，选择免疫固定染色程序，开始。
10、胶片扫描将上一步骤处理完的胶片和固定架插入扫描槽，从电脑操作界面选择扫描操作。
免疫固定电泳操作规程精编WORD版
免疫固定电泳操作规程精编W O R D版IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约18个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约55分钟4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN43092．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品：IF试剂抗体（1）商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5×1ml（3） PN4315七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳（）二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ()、α()、μ()重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由发现了移界电泳（），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五．仪器（一）型号： (1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约18个样本/小时2．所需样本量：103．检验时间：约55分钟4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1． 1 试剂盒2 试剂盒4 试剂盒9 试剂盒（1）商标：（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：4301/ 4302/ 430443092．脱色液（1）商标：（2）包装规格： 10×100（3）货号：4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：（2）包装规格： 10×80（3）货号：4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：（2）包装规格： 1×5（3）货号：4587（二）配套品：试剂抗体（1）商标：(2 ) 包装规格： 5×1（3） 4315七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
SEBIA电泳仪操作规程
SEBIA电泳仪操作
一．开机
二．选择合适的电泳程序及其对应的
按“1”进入电泳程序选择表。
选择后，按右下方的黑色回车键血清蛋白电泳选择“3”、尿蛋白电泳选择“23”、免疫固定电泳选择“8”
按“3”进入染、脱色程序选择表
血清蛋白电泳选择“1”、尿蛋白电泳选择“8”、免疫固定电泳选择“2”三．常规工作
1.点样、保湿
2.挂缓冲条
3.放置胶片
4.放置样品条，盖上盖。
四．开始电泳
确认电泳程序是否正确，按左边绿色开始键
五．电泳完成后，取出胶片，放入染色舱
六．开始染、脱色
确认染、脱色程序是否正确，按左边绿色开始键
七．取出成品胶片，放入扫描仪。
八．扫描：开启电泳专用电脑
1.选择对应的扫描程序
2.学者“进入扫描”
3.选择胶片NO、及设定标本序号
4.开始扫描
九．编辑电泳图像或曲线，填写病人信息
十．打印
十一．关机
1.退出电脑
2.关闭各部位仪器开关
3.拔去电源
十二．填写保养记录。
免疫固定电泳操作规程资料
免疫固定电泳操作规程免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约18个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约55分钟4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN43092．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品：IF试剂抗体（1）商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5×1ml（3） PN4315七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
仪器型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)分析和计算参数：处理量：约18个样本/小时所需样本量：10ul检验时间：约55分钟重复性：有良好的批内和批间重复性电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W试剂及配套品试剂HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒商标：SEBIA包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN4309脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液商标：SEBIA包装规格：Pack for 10×80ml货号：PN4541成分：叠氮钠4．稀释剂商标：SEBIA包装规格：Pack for 1×5ml货号：PN4587配套品：IF试剂抗体（1）商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5×1ml（3）PN4315操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
SPIFE 3000固定免疫电泳操作规程
SPIFE 3000固定免疫电泳操作规程一、方法学原理电泳法二、试剂美国HELENA公司IFE产品三、操作1．电泳：仪器型号：SPIFE 30001.1开机：打开仪器右侧电源开关。
1.2待仪器自检后，打开仪器右侧盖板。
1.3按u键，使加样架右移，放入样本盘，样本盘上按所选用的电泳膜加样，每份标本加样20μl。
1.4按t键，使加样架左移，按需要放入新加样梳，在加样梳上加上骑码。
1.5在电极铜板上加电极液，将电泳膜放置在铜板上，小心勿出气泡。
1.6在胶桥上放置炭棒。
1.7用C型滤纸吸干电泳膜表面1.8按u键选取IFE，按t键2次，开始电泳，仪器自动操作。
1.9电泳毕，取出炭棒。
1.10 用小铲铲去胶桥。
1.11 擦干铜板，丢弃加样梳，洗净样本盘。
2抗原抗体反应SPIFE 30002.1 在胶膜上加抗体模板2.2在抗体模板槽孔中加抗体40μl，按u键，仪器自动孵育。
2.3 在抗体模板槽孔中插入滤纸梳，吸去多余抗体，按u键，仪器自动操作。
2.4 取下抗体模板，用D型滤纸吸干电泳膜表面，按u键，仪器自动操作。
2.5 取下D型滤纸，干燥胶膜表面，按u键，仪器自动操作。
3染色：仪器型号：SPIFE 30003.1吹干电泳膜剩余水分，将电泳膜夹到染色架上。
3.2将染色架放回染色槽。
3.3按test select选取SPE，按start 2次，开始染色，仪器自动操作。
3.4待染色结束后，取出胶膜。
4扫描：仪器型号：REP4.1扫描，打开下方仪器开关。
REP4.2待仪器自检后，点击扫描，进入扫描菜单4.3选取SPE，及所用电泳膜型号。
4.4按当日操作情况编制参数。
4.5仪器自动扫描4.6结果观察。
四、临床意义：M蛋白病患者在相应的单克隆增殖株处可见异常浓集区带。
五、标本要求血清，可4℃保存，一周内完成测定，避免反复冻融。
六、操作注意事项1．每次开机测试前采用HELENA公司质控品作为室内质控。
2．在电极铜板上加电极液，将电泳膜放置在铜板上，小心勿出气泡。
免疫固定电泳检查流程详解
免疫固定电泳检查流程详解下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1．蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2．电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3．使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4．将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约18个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约55分钟4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN43092．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品：IF试剂抗体（1）商标：SEBIA(2 ) 包装规格：Pack for 5×1ml（3） PN4315七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
免疫固定电泳技术
免疫固定电泳技术(IFE)
免疫固定电泳技术（ IFE ）是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。
检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其它体液。
免疫固定电泳技术（ IFE ）已在医学研究、法医学、基因诊断和临床实验室操作中得到了广泛的应用。
临床主要应用如下疾病的诊断和疗效观察：
1、单克隆免疫球蛋白增殖病：是以单一克隆的浆细胞过度增高为特征，常常导致某种免疫球蛋白或免疫球蛋白亚单位大量合成而其他正常免疫球蛋白水平下降。
免疫化学方法能够对异常蛋白定量，而电泳分析能够确定这些蛋白质的单克隆属性。
2、本周氏蛋白和游离轻链病：本周氏蛋白是没有与免疫球蛋白分子中重链结合的单克隆κ或λ轻链。
免疫固定电泳来确定本周氏蛋白的存在形式。
轻链病是指仅产生κ
或λ单克隆轻链，在尿中称为本周氏蛋白的疾病，轻链病包括10％－15％的单克隆免疫球蛋白病，它多出现在IgG骨髓瘤（60％）和IgA骨髓瘤（16％）病中。
3、重链病：是以免疫球蛋白重链部分存在的单克隆蛋白为特征。
4、多克隆免疫球蛋白病：主要为γ蛋白区宽的条带，多见于炎症或感染和胶原病。
5、肾脏病变的来源分析：尿免疫蛋白电泳可以很好地协助临床判断肾脏的主要损伤（肾小球和肾小管）及尿蛋白选择程度的估计，选择性和非选择性蛋白尿。
指导治疗和判断预后有价值。
084 免疫固定电泳技术---检验科作业指导书
检验科 作业指导书
免疫固定电泳技术
文件编号： 版本： 生效日期： 页码： 第 1 页共 3 页
1 实验原理
标本于琼脂糖凝胶介质上经电泳分离后，应用固定剂和各型免疫球蛋白及其轻链抗血清，通常选用 抗 IgG、A、M 和κ、λ轻链抗血清，加于凝胶表面的泳道上，参考泳道则加蛋白质固定剂，用于区带对 照。经孵育让固定剂和抗血清在凝胶内渗透并扩散后，若有对应的抗原存在，则在适当位置形成抗原抗 体复合物并沉淀下来。电泳凝胶在洗脱液中漂洗，以除去未结合的蛋白质，仅保留贮存在凝胶内的抗原 抗体复合物。经染色后蛋白质电泳参考泳道和抗原抗体沉淀区带被氨基黑着色，根据电泳移动距离分离 出单克隆组分，并可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。已列入临床实验室的常规检测工作。
3 用途
免疫固定电泳是一种包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。检测标本可以是血清、 尿、脑脊液或其它体液。已在医学研究、法医学、基因诊断和临床实验室操作中得到了广泛的应用。 3.1 血清 M 蛋白的分型与鉴定实验。 3.1.1 存在单克隆成份 通过抗 IgG、A、M 重链和抗κ、抗λ轻链抗血清检出单克隆条带。 3.1.2 存在两种以上的单克隆成份 通过免疫固定电泳检出两种或两种以上的单克隆条带。可能是双克 隆丙种球蛋白血症，或是寡克隆丙种球蛋白血症（图 6- 21）。现已列入临床实验室的常规检测工作。 3.2 尿液本周蛋白的分型与鉴定 本周氏蛋白是没有与免疫球蛋白分子中重链结合的轻链，分为κ或λ 型两种轻链。本周氏蛋白存在于下例两种类型中：①伴随存在于典型的单克隆丙种球蛋白血症；②游离 轻链病。IFE 可用于血清和尿液标本κ和λ轻链型的鉴别。特别是对具肾脏病理改变者，从良性的肾小 管性蛋白尿发展为急性肾衰或淀粉样变性，进行性的肾脏损害影响了分解代谢的重吸收，导致游离轻链 出现在尿液和血清中，必须予以检测和鉴别。IFE 中，游离轻链往往与其中一型的抗血清起反应，在 β-γ 区附近形成一条致密的弓形沉淀线。有时轻链还含有其他蛋白，要注意识别。如多克隆免疫球蛋白常同 时与 κ 和 λ 两型抗轻链血清形成沉淀线，而单克隆免疫球蛋白（M 蛋白）虽只与其中一型抗轻链血清 反应，但也与某一型重链抗血清产生一位置相同的沉淀线，通过观察分析可作出正确判断（图 6- 22）。
免疫固定电泳分型
免疫固定电泳分型免疫固定电泳分型是一种用于分析蛋白质的分离技术，它基于免疫学原理，通过电泳的方式对蛋白质进行分型。
在免疫固定电泳分型中，主要利用了抗体和特定抗原之间的特异性结合来实现蛋白质的分离和检测。
免疫固定电泳分型的步骤主要包括样品制备、凝胶电泳、固定和染色等。
首先，需要将待分析的样品经过处理和制备，使其适合进行电泳分离。
然后，将样品注入到凝胶中，并施加电场使蛋白质在凝胶中进行分离。
在分离过程中，蛋白质会根据其分子量和电荷等特性在凝胶中分离成不同的带状条带。
在固定步骤中，需要将蛋白质固定在凝胶上，以便下一步的染色和检测。
通常使用的固定剂有乙醛和二甲基亚硫酸钠等。
其中，乙醛固定可以使蛋白质与凝胶交联，而二甲基亚硫酸钠固定则是通过与蛋白质中的氨基酸残基发生反应来实现。
完成固定后，需要对凝胶进行染色以可视化蛋白质分离的结果。
染色方法可以根据需要选择，常见的染色方法有银染色、共染色和荧光染色等。
其中，银染色是一种常用的染色方法，它能够使蛋白质在凝胶上呈现出黑色或棕色的带状条带。
免疫固定电泳分型可以应用于多个领域，特别是在生物医学研究和临床诊断中具有重要意义。
例如，通过对人体血清中的蛋白质进行免疫固定电泳分型，可以帮助鉴定疾病相关的蛋白质异常。
此外，在研究蛋白质结构和功能等方面也可以应用免疫固定电泳分型技术。
免疫固定电泳分型是一种常用的蛋白质分离和检测技术。
它通过利用抗体和特定抗原之间的结合来实现对蛋白质的分型。
该技术在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景，为疾病的诊断和治疗提供了重要的帮助。
希望通过本文的介绍，读者能够对免疫固定电泳分型有更深入的理解。
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免疫固定电泳操作规程
一．项目名称
免疫固定电泳(ＨYDRAGEL ＩＭMＵNOＦＩXATＩＯN)
二．检验方法名称
琼脂糖凝胶免疫固定电泳
三．方法学原理
血清蛋白电泳中出现得异常条带主要存在于β-球蛋白与γ-球蛋白区域,通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带,可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳就是一种简单得技术,电泳后得蛋白质与相应抗体形成复合物与被固定在相应得位置上,通过下列四个步骤:
１。
蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2.电泳后已分离得蛋白质被固定并产生免疫沉淀:应用固定剂与抗血清加于凝胶表面得泳
道上,并让固定剂与抗血清在凝胶内渗透扩散。
3.使用吸水纸与清洗将未沉淀得蛋白质去除,已被沉淀得蛋白质贮留在凝胶内。
4、将蛋白质染色,并将这些免疫沉淀区带得位置与蛋白质经电泳后观察到得异常蛋白区带
进行比较。
为了精确识别单克隆区带,样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后,ＥLP作为参考泳道以显示电泳后得蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它(们)与抗血清,γ(IｇＧ)、α(IgＡ)、μ(IgM)重链与κ、λ轻链(游离与非游离)反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰,易于解释结果、
四．方法学溯源
自１930年由Ｔiseｌius发现了移界电泳(moｖing bｏundaｒy eｅｃtrｏpｈoresis),而后,这种技术得各种局限性已逐渐被区带电泳(zoｎe ｅlecｒrｏｐhoresis)所克服,区带电泳得条件与支持介质得选择就是电泳成败得关键、通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性就是鉴定某一蛋白成分最好得方法,免疫固定电泳技术就是目前应用最广泛得方法之一。
五．仪器
（一）型号:SEＢIA ＨYDＲASYＳ(ＰN1210)
（二）分析与计算参数:
1．处理量:约18个样本/小时
2．所需样本量:１０ul
3．检验时间:约55分钟
4．重复性:有良好得批内与批间重复性
5．电泳参数:电压0-30０V(可选至30０0V)
电流0－500mＡ
功率０－１00W
六．试剂及配套品
（一）试剂
1．HYDＲＡGＥL 1 IF试剂盒
ＨYＤＲAGEＬ２IF试剂盒
HYDRAGEL 4 IF试剂盒
HYDRAＧEL 9 IF试剂盒
（1）商标:SEBIA
（2）包装规格:1０测试／20测试/40测试/90测试
（3）货号:PN43０1/ PＮ43０2/ PN４３0４/PN43０9
2．脱色液
(1) 商标:SEBIA
(2) 包装规格:Paｃｋfｏr 10×10０ｍl
(3) 货号:PＮ454０
(4) 成分:柠檬酸
3。
洗涤液
（1）商标:SEBＩA
（2）包装规格:Paｃk for 10×80ｍｌ
（3）货号:PN4541
（4）成分:叠氮钠
4、稀释剂
（1）商标:SＥBＩA
（2）包装规格:Pａck foｒ1×5ml
（3）货号:PN4５87
（二）配套品:ＩＦ试剂抗体
(1) 商标:SEBIA
(2 ) 包装规格:Pack foｒ5×1ml
(3)PN４3１５
七．操作步骤
㈠开机,启动电泳仪、
㈡将1只(用于1,２IF),2只(用于4ＩF)或3只(用于9IＦ)点样梳置于整表面,有数字得一端向上,在2分钟内完成每块加样梳得加样,每孔加1０uｌ样品,然后齿梳向上把加样梳放于湿盒内5分钟。
㈢选择相应得“IF"电泳程序,
㈣从包装袋内取出缓冲条,将其固定在电极支架背侧得钉上,再取出凝胶,用薄滤纸快速轻轻地吸去凝胶表面多余得液体,在温控板表面下1/3处加20０ｕl蒸馏水或去离子水,将凝胶片底边紧靠框架底边,边缘对齐边线,略弯曲凝胶片慢慢放平,注意凝胶片下面勿出现气泡、
㈤自然放下支架,从湿盒中取出加样梳并去除齿梳下得保护支架,1、２ＩF得点样梳置于支架6号位,4IＦ得２只点样梳则分别置于3号与9号,9IＦ得3只点样梳则分别置于2,６号与１0号,注意点样梳上得数字必须面对操作者,关上电泳舱盖,按下键盘左侧得绿色箭头“ＳTARＴ"键,电泳开始,确保仪器右侧得空气通道不被堵塞、
㈥电泳仪自动发出蜂鸣声,提示电泳结束,进行免疫固定操作。
打开电泳盖,将加样梳与缓冲条丢弃,移走两支架,用湿纸巾擦拭电极丝,将抗体加样条装入抗体加样架上,按如下要求将动物血清抗体加入抗体加样条:
··Hydrａsys 1 IF用6孔抗体加样条:每孔加８μl抗体
··Hydraｓｙs 2/4IF用１5孔抗体加样条:2人份每孔加8μl抗体,4人份每孔加1２μl抗体
··Hｙｄｒaｓys 9 IF用18孔抗体加样条: 每孔加8μｌ抗体
固定好抗体加样架,将抗体加到凝胶片上。
然后关上电泳舱盖,按“Ｓtａrt”键开始免疫固定。
㈦10分钟后,电泳仪自动发出蜂鸣声,提示“ＰＡPＥR BＬOTＴＩNG" ,移走抗体加样架,
弃去抗体加样条,放一厚滤纸光面向下盖于于凝胶表面, 左手固定好滤纸,右手手指用力得摩擦滤纸表面,注意勿将滤纸移动,关闭电泳舱盖,按“Sｔart”键开始凝胶表面多余抗体得吸收。
㈧３分钟后,电泳仪自动发出蜂鸣声,打开电泳舱盖,移去滤纸,关闭舱盖,按“Stａｒt”键开始凝胶片得干燥、
㈨６分钟后,电泳仪自动发出蜂鸣声,打开电泳舱盖,取出凝胶片,用湿纸巾擦拭温控板,将胶片固定于凝胶支架上放入染色空间中,在检查洗液瓶中就是否有40０mｌ洗液,染色液瓶内就是否有300ｍl染色液,脱色液瓶内就是否有10０0mｌ脱色液以及就是否排空了废液瓶后,菜单上选择染色指令,按“Sｔarｔ”键开始染色。
㈩在染色、脱色以及干燥步骤完成后,电泳仪自动发出蜂鸣声,取出凝胶支架,将烘干得胶片取下。
八．临床意义
对多发性骨髓瘤、Waldｅｎstrom巨球蛋白血症、分泌型骨髓瘤、轻链病、重链病等研究有重大意义。
1、正常人体内有正常得免疫球蛋白分布,故免疫固定电泳图谱可见均匀分布得IgG/A/Ｍ
2、在IgG/Ａ／M及Ｋappar、lａmmda得泳道上发现浓集得条带即为病理性得。
九．标本要求
㈠取新鲜血清进行分析,根据临床实验室对各种试验所使用得操作程序进行血清样本得采集,样本置于冰箱内(2～８℃)可保存一周,若冰冻可延长保存时间至少一个月。
冰冻得血清样本加入0、０2g/dl得叠氮钠可以增加其存放稳定性。
㈡为避免抗原过剩引起得带现象,血清于加样前应先作如下稀释,并混匀、
㈢特殊Array情况
·当总免
疫球蛋
白得水
平〉20ｇ/L,稀释剂量加倍(除了ELP泳道)
·当总免疫球蛋白水平<5g/L,稀释剂量减半(除了ELP泳道)
·冷藏或冰冻后,某些样本(尤其就是含有冷球蛋白或冷凝胶)可能变得粘稠或混浊。
这种样本
可能由于扩散障碍而存在点样问题。
在这样情况下,加２５ul液化剂于7５mｌ血清中,混
匀1５秒。
然后按规定程序继续进行。
·某些单克隆蛋白质可能因多聚体而导致所有得免疫固定泳道上均出现单克隆片段、在这样情况下(i)准备1％β-巯基乙醇(这种还原剂可在室温于未封闭微管内保存１周)(iｉ)加２５ul 还原剂于75ul血清中(iii)混匀并令其反应至少15分钟(至多３小时)后按规定程序继续进行。
㈣避免使用血浆标本。
十。
操作注意事项
㈠为达到最佳检测效果,同一试剂盒内得所有组分必须一并使用。
㈡用薄滤纸吸去凝胶表面多余液体时,接触时间不能太长,应快速移去,以免凝胶脱水。
㈢注意先挂缓冲条再放凝胶片,缓冲条取出时应均匀挤捏使缓冲液能分布均匀。