甲砜霉素注射液的研制及稳定性实验

四川畜牧兽医学院学报　2000,14(4)Jo urnal o f Sichuan Institute of Animal Husbandry and V eterinary Medicin e甲砜霉素注射液的研制及稳定性实验吴俊伟1　曾忠良1　罗音久1　杨秀岑2(1　四川畜牧兽医学院动物药物研究所　重庆荣昌　402460)(2　华西医科大学药学院　四川成都　610041)摘　要　为了开发甲砜霉素注射液新剂型,设计出合理的处方及制备工艺。

用紫外分光光度法在265nm 处测定其含量变化,以经典恒温加速法测试该注射液的稳定性,并预测其有效期。

甲砜霉素注射液的热降解属一级动力学过程,在50℃、70℃、90℃、100℃的降解速度常数分别为5.37×10-5、6.88×10-4、1.80×10-3、1.03×10-2,根据Arrhenius 的指数定律k =Ae -E /RT推算出室温(25℃)条件下的速度常数k 25℃为2.878×10-6/h,室温贮存有效期为4.18年。

该处方及工艺是合理可行的,制备的制剂是稳定的。

关键词　甲砜霉素　注射液　处方　稳定性　有效期中图分类号　R943甲砜霉素系合成的广谱抗菌素,其抗菌谱、抗菌作用及作用机制与氯霉素相似,常用于呼吸道感染、伤寒,亦可用于肠道感染,且甲砜霉素的毒性比氯霉素低,即使引起了骨髓抑制也是可逆性的[1]。

目前市场上只有片剂和散剂两种剂型,因此开发该药的注射剂有重要意义。

本试验首先设计了甲砜霉素注射液处方,经条件优化制备了较稳定的注射液,建立了一套简洁高效的分析方法,然后考察了甲砜霉素注射液稳定性,按照稳定性试验中规定考察条件,对热加速处理后的样品进行了性状和含量的考察。

试验说明该注射液稳定,有关各项指标无明显变化。

现将试验步骤及结果分述如下。

1　仪器设备及试剂1.1　仪器Spectr onic 紫外分光光度计(美国),联想P Ⅱ300计算机作处理器并使用Excel 作数据处理,BS60电热三用水箱(北京市医疗设备厂),FA2004上皿电子天平(上海天平仪器设备厂)。

1.2　试药甲砜霉素标准品(0433-9501),购于成都市药品检验所(中国药品生物制品检定所制备);收稿日期——吴俊伟(6—)男,四川威远人,硕士研究生,副教授,主要从事药剂学的教学与科研工作。

:20000907197:甲砜霉素原料,浙江杭州民生制药厂;10%甲砜霉素注射液(四川畜牧兽医学院动物药物研究所研制)。

2　方法2.1　甲砜霉素注射液的处方设计及制备甲砜霉素在水中的溶解度为1%左右,要制备10%注射液必须加入助溶剂、增溶剂,或使用潜溶剂。

本试验采用由水、乙酰胺所组成的混合溶剂,经预试溶解性能较好。

其处方组成为甲砜霉素100g 、乙酰胺500ml ,加水至1000ml 。

取上述处方药物及试剂,溶解,过滤,灌封至5ml 西林瓶中,封口,121℃灭菌30min 即得。

2.2　分析方法的建立及标准曲线的制备2.2.1　分析方法的建立　取甲砜霉素标准品适量,加水溶解(约40℃)并稀释成每1ml 约含200μg 和10μg 的溶液,分别用分光光度计在200—400n m 波长范围内扫描得到吸收曲线及最大吸收峰值(见图1)。

取甲砜霉素原料及甲砜霉素注射液分别配制成每毫升约含200μg 的溶液,另取溶剂稀释至与注射液相同浓度,依法扫描得到吸收曲线如图2所示。

2.2.2　检测吸收峰的确定　从图2可以看出原料与标准品吸收曲线完全一致,溶液在265n m 和274n m 处有吸收峰,而溶剂无吸收,根据文献检索,甲砜霉素为一较稳定的药物,还未见有分解产物的报道,为此选定在波长265n m 处检测。

图1　高低浓度甲砜霉素溶液紫外吸收图谱A :200μg /ml B:10μg /ml图2　甲砜霉素注射液、原料及溶媒紫外吸收图谱A :原料B :注射液C :溶媒2.2.3　标准曲线的制备　取标准品,精密称定44.4mg ,置50ml 量瓶中,摇匀,分别精密吸取1.0ml 、2.0ml 、4.0ml 、6.0ml 、8.0ml 及9.0ml 置10ml 量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。

用蒸馏水作空白,在65波长处测定其吸收度,得标准曲线回归方程 =6+36,=(=6)。

2四川畜牧兽医学院学报 第14卷2nm :A 2.87C 0.0290r 0.9999n3　热稳定试验[2]3.1　方法将按同一方法配制的甲砜霉素注射液分装到5ml的西林瓶中,然后分成4组,每组各50只,分别置于50℃,70℃,90℃,100℃的三用水箱中,分别按表1中的时间取样观察并测定含量。

3.1.1　外观性状及p H变化　观察经各条件处理后样品外观色泽、状态的变化,并分别测定pH值。

结果是所有样品均无显著变化,p H值结果见表1。

表1　热稳定性试验结果温度(℃)t(h)C(g/ml)L og C pH5000.0990±0.003- 1.0045 6.52±0.02 240.0988±0.002- 1.0052 6.53±0.03 480.0987±0.002- 1.0059 6.32±0.02 720.0985±0.006- 1.0065 6.28±0.01 960.0984±0.005- 1.0069 6.54±0.06 1200.0983±0.001- 1.0074 6.50±0.057000.0971±0.004- 1.0130 6.45±0.06 120.0963±0.005- 1.0165 6.45±0.04 240.0955±0.002- 1.0201 6.35±0.02 360.0947±0.005- 1.0237 6.38±0.07 480.0940±0.006- 1.0271 6.60±0.06 600.0931±0.001- 1.0308 6.61±0.029000.0967±0.004- 1.0146 6.52±0.05 20.0966±0.002- 1.0148 6.32±0.06 40.0965±0.006- 1.0155 6.19±0.07 60.0960±0.005- 1.0180 6.43±0.04 80.0958±0.004- 1.0186 6.25±0.05 100.0946±0.002- 1.0239 6.12±0.0610000.0970±0.004- 1.0134 6.25±0.0510.0961±0.003- 1.0175 6.58±0.0820.0948±0.007- 1.0232 6.45±0.0930.0942±0.005- 1.0260 6.26±0.06±3366±55±35563±53第4期 吴俊伟等:甲砜霉素注射液的研制及稳定性实验40.09290.00- 1.020.20.00.09220.004- 1.0.20.03.1.2　含量测定　取样品5只,分别精密吸取1ml 于50ml 量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,再各吸取1ml 于10ml 量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,备测。

开启紫外分光光度计,并在计算机上运行该检测程序,选取Standard Curv e 功能,利用已测得的标准曲线,测定各样品的吸收度并换算出样品的浓度,将每次5个样的平均值求出,结果见表1。

3.1.3　数据处理　将各温度条件下甲砜霉素的剩余浓度量的对数值对时间作图,见图3,各温度条件下均得到一直线,说明甲砜霉素注射液的降解属一级反应。

然后分别求出各温度条件下浓度随时间的回归直线以及速度常数k ,结果见表2。

表2　各温度条件下速度常数k 值T 3233433633731/T ×1033.003 2.833 2.755 2.681K 5.368×10-56.877×10-41.804×10-31.034×10-2L og K-4.2702-3.1626- 2.7437- 1.9855根据Arrhenius 的指数定律k =Ae -E/RT可知,甲砜霉素在各温度条件下的降解速度常数k符合上式,以lo g K 对1/T 作图得一直线,回归求出该直线斜率-E /2.303R 可得活化能E ,根据截距lo g A 可得指前因子A ,从而推算出室温(25℃)条件下的速度常数k 25℃=2.878×10-6/h ,根据一级反应t 0.9=0.1054/k ,可求出该注射液的贮存期为4.18年。

图3　各温度条件下甲砜霉素注射液t -lo gC 变化图　小结　本文首先利用紫外分光光度计建立了甲砜霉素注射液的含量测定方法,该方法简便易4四川畜牧兽医学院学报 第14卷44.1行,准确度高,精密度好,为该制剂的实际生产提供了可靠的检验方法。

4.2　甲砜霉素虽然在70年代已研制成功,但其在临床上的应用在90年代时才被重视,除片剂和散剂外,注射剂未见报道,在临床上也无产品使用,因此,开发其注射剂剂型有极好的开发前景。

4.3　本试验着重考查了甲砜霉素注射液的热稳定性,通过在50℃、70℃、90℃、100℃四个温度条件的加速试验,用经典恒温法推算出其在常温条件下的有效期为4.18年,因此该剂型是稳定的,可进一步进行临床试验。

参考文献[1]　戴自英主编.适用抗菌药物学.上海:上海科学技术出版社,1992:212—213[2]　鲁纯素主编.物理化学.北京:人民卫生出版社,1991:229—244PREPARATIO N AND ST ABILITY TESTOF THIA MPHENICOL INJECTIONWu Ju nw ei Z en g Zh ong lian g L uo Y ing jiu et a l.A bstract T o w ork out ratio nal prescription and manufacturin g techn olog y fo r the preparation o f thi-amphenicol injectio n ,the co ntent chang e was measured with ultraviolet spectr oph oto metry at 265nm.Its stability was tested with classical co nstant temp erature acceleration metho d ,and its shelf -lif e w as pr edi-cated.The heat deg radatio n reactio n of thiamphenicol injectio n accords with first -ord er kinetics.D egra-dation velo city co nstant Ks wer e 5.37×10-5h -1,6.88×10-4h -1,1.80×10-3h -1,and 1.03×10-2h -1,respectiv ely ,at 50℃,70℃,90℃,and 100℃.Accord ing to the Arrhen ius equation k =Ae -E/RT,K 25℃w as calculated to be 2.878×10-6h -1,t 25℃,0.9w as 4.18y ears.The p H ,color ,andclarity of the injectio n had n o obv io us chan ges after sto rage at 50℃fo r 120hr or 100℃fo r 5hr.T his pr escriptio n and manu facturing technolo g y were ratio nal and f easible ,and th e injectio n was stable.Key words Thiamph enic ol injection ,Prescription ,Stability ,Time o f effectiv eness5第4期 吴俊伟等:甲砜霉素注射液的研制及稳定性实验。