三红蜜柚体细胞胚胎的诱导
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试验采用正交设计 N" # &* $ ) 研 究 基 本 培 养 基 # _<& d( & 改良 aL_$ 与 植 物 生 长 调 节 剂 ’) *>Q #$@(& !& !@( 5V1 Nj! $ & #>dD # $@!& $@(& !@$ 5V1Nj! $ 对 三 红 蜜 柚 胚 性 愈 伤 组 织 诱 导 率 的 影 响. 将茎段接 种 到 不 同 培 养 基 上) 每 处 理 接 种 &$ 瓶) 每瓶接 ! 个茎段) 重复 & 次. !@’@* K 胚 状 体 的 诱 导
KK摘K要# 为建立三红蜜柚体细胞胚胎途径的组培快繁技术体系) 采用带腋芽的无菌茎段为外植体) 利用正 交设计的方法) 研究不同的基本培养基与植物生长调节剂对体细胞胚胎的诱导& 分化& 增殖与生根等关键环节 的影响. 结果表明) 胚性愈伤组织诱导的最适宜 培 养 基 为 _< P’) *>Q! 5V1 Nj! P#>dD$@( 5V1 Nj! , 在 附 加 #>dD$@! 5V1 Nj! 的 _< 培 养 基 上 淡 黄 色 的 胚 性 愈 伤 组 织 块 可 诱 导 形 成 胚 状 体, 胚 状 体 试 管 苗 在 ! 9’ _< P=DD $@( 5V1Nj! 培养基上生根率可达 "$h) 移栽成活率达 %(h.
近年来) 关于果树体细胞胚胎再生体系的研究 越来越多) 并已在苹果& 核桃& 枇杷& 葡萄& 荔枝 等树种上成功获得 体 细 胞 胚 胎/’0 . 植物 体细胞胚 胎的发生& 发育与合子胚相似) 是离体培养形态发 生的有效途径之一/&0 . 胚状 体 的 培 养 材 料 可 采 用 植物的各种器官& 组织做为外植体进行培养) 甚至 在悬浮细胞培养和原生质体培养中都有可能形成体 细胞胚胎) 在取材方面比较方便多样, 同时) 胚状 体的培养能将植物的无性繁殖从田间移至室内) 缩 短植物繁殖时间) 使育苗工厂化) 从而避免传统繁 殖方式受生产季节及技术等瓶颈的影响. 因此) 运 用细胞工程中的体细胞胚胎培养技术进行植物组培
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KK’$!% 年第 (" 卷第 ’ 期
文献著录格式% 林亮亮2三红蜜柚体细胞胚胎的诱导 / C0 2浙江农业科学) ’$!% ) (" #’ $ % !"*>!"# ) !""2 QF;! !$@!#!)% 9,@Y\\-@$(’%>"$!)@’$!%$’!$
三红蜜柚体细胞胚胎的诱导
林亮亮
# 福建农业职业技术学院) 福建 福清K&($!!"$
收稿日期% ’$!)>!’>!! 基金项目% 福建省教育厅科技项目 # 闽教科 #’$!# $ *% 号 CDc!#$)() $ 作者简介% 林亮亮 #!"%$ -$ ) 福建福清人) 硕士) 从事植物生物技术研究工作) B>5RYU% &"&"#)((#1‘‘@345.
林亮亮% 三红蜜柚体细胞胚胎的诱导
!K材料与方法
)1) 2 材 料 试验材料来自福清市惠煌农业开发有限公司三
红蜜柚绿色生产基地) 并由福建农业职业技术学院 组培中心利用三红蜜柚种胚培育出的无菌苗) 经增 殖形成的丛生苗中选取. )1’ 2 方 法 !@’@! K 外 植 体 处 理
试验采用株高 * i( 35) 带 * i# 片 真 叶 的 三 红蜜柚无菌苗为材料) 因为材料本身无菌) 无需再 进行消毒处理) 直接在超净工作台上将其茎段截成 长 $@( i! 35 的 小 段) 每 段 带 ! i’ 个 茎 节) 作 为 诱导体细胞胚发生的外植体. !@’@’ K 培 养 条 件
关键词# 三红蜜柚, 组织培养, 正交设计, 体细胞胚胎 中图分类号# <###KKK文献标志码# DKKK文章编号# $(’%>"$!)#’$!%$$’>$!"*>$&
KK琯溪三红蜜柚系芸香科柑橘属柚类优良品种之 一) 是福建省平和县地方传统名果琯溪蜜柚的芽变 株中最新选 育 的 优 良 品 种) ’$!’ 年 获 得 福 建 省 品 种审定委员会认证推广. 三红蜜柚果肉红艳) 晶莹 透亮) 果皮海绵层呈粉色) 外果皮黄里透红) 深受 消费者喜爱) 其柚果果型倒卵圆形) 汁胞红色) 富 含番茄红素和 ">胡萝 卜 素) 果 汁 丰 实) 甜 酸 适 口) 品质极佳) 比普通品种琯溪蜜柚& 红肉蜜柚早熟 !$ i!( S) 且皮薄少籽) 柚果可食率高达 )$h) 有 良好的发展 前 景 与 市 场 竞 争 力/!0 . 目 前) 三 红 蜜 柚主要采用嫁接和实生苗等繁殖方法) 生产季节性 强) 对操作技术要求较高) 限制了优良新品种的迅 速推广.
快繁) 可在较短时间内获得基因型统一& 表现型优 良的一致性群体) 能够周年生产不受季节与地理位 置的限制) 在快速繁殖苗木& 制作人工种子及基因 工程研究等方面具有较大应用潜力.
本研究采用三红蜜柚无菌苗中的茎段为外植体 诱导胚性愈伤组织形成) 进一步分化形成体细胞胚 胎) 探讨不同培养基与植物生长调节剂对诱导三红 蜜柚胚性愈伤组织以及体细胞胚胎形成等关键环节 的影响) 逐步建立起三红蜜柚体细胞胚胎发生途径 的组培快繁技术体系.
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试验采用 _<& d( 和改良 aL_ 为基本培 养 基) 根据不同培养阶段添加不同浓度与配比的植物生长 调节剂 # ’) *>Q& #>dD和 =DD$ ) 所 有 培 养 基 添 加琼脂 ) V1 Nj! ) 调 节 86 值 (@#) 在 !’! k 条 件 下 灭 菌 ’$ 5Y-) 冷 却 凝 固 后 使 用) 培 养 温 度 为 #’( n’ $ k) 胚 性 愈 伤 组 织 诱 导 的 光 照 强 度 为 ($$ i! $$$ U0) 胚 状 体 萌 发 的 光 照 强 度 为 ! $$$ i ! ($$ U0) 壮苗 与 生 根 培 养 的 光 照 强 度 为 ! ($$ i ຫໍສະໝຸດ Baidu $$$ U0) 光照时间 !’ T1S j! . !@’@& K 胚 性 愈 伤 组 织 的 诱 导
KK摘K要# 为建立三红蜜柚体细胞胚胎途径的组培快繁技术体系) 采用带腋芽的无菌茎段为外植体) 利用正 交设计的方法) 研究不同的基本培养基与植物生长调节剂对体细胞胚胎的诱导& 分化& 增殖与生根等关键环节 的影响. 结果表明) 胚性愈伤组织诱导的最适宜 培 养 基 为 _< P’) *>Q! 5V1 Nj! P#>dD$@( 5V1 Nj! , 在 附 加 #>dD$@! 5V1 Nj! 的 _< 培 养 基 上 淡 黄 色 的 胚 性 愈 伤 组 织 块 可 诱 导 形 成 胚 状 体, 胚 状 体 试 管 苗 在 ! 9’ _< P=DD $@( 5V1Nj! 培养基上生根率可达 "$h) 移栽成活率达 %(h.
近年来) 关于果树体细胞胚胎再生体系的研究 越来越多) 并已在苹果& 核桃& 枇杷& 葡萄& 荔枝 等树种上成功获得 体 细 胞 胚 胎/’0 . 植物 体细胞胚 胎的发生& 发育与合子胚相似) 是离体培养形态发 生的有效途径之一/&0 . 胚状 体 的 培 养 材 料 可 采 用 植物的各种器官& 组织做为外植体进行培养) 甚至 在悬浮细胞培养和原生质体培养中都有可能形成体 细胞胚胎) 在取材方面比较方便多样, 同时) 胚状 体的培养能将植物的无性繁殖从田间移至室内) 缩 短植物繁殖时间) 使育苗工厂化) 从而避免传统繁 殖方式受生产季节及技术等瓶颈的影响. 因此) 运 用细胞工程中的体细胞胚胎培养技术进行植物组培
试验采用正交设计 N" # &* $ ) 研 究 基 本 培 养 基 # _<& d( & 改 良 aL_$ 与 植 物 生 长 调 节 剂 #>dD #$@!& $@(& !@$ 5V1 Nj! $ & =DD # $& $@!& $@( 5V1Nj! $ 对三红蜜柚胚 状 体 发 生 率 的 影 响. 从 诱 导培养的三红蜜柚胚性愈伤组织中选取出淡黄色& 颗粒状较明显的愈伤组织块) 接种到不同的体细胞 胚诱导培养基上) 每处理接种 !$ 瓶) 每瓶接 & 块) 重复 & 次. !@’@( K 芽 增 殖
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三红蜜柚体细胞胚胎的诱导
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# 福建农业职业技术学院) 福建 福清K&($!!"$
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!K材料与方法
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红蜜柚绿色生产基地) 并由福建农业职业技术学院 组培中心利用三红蜜柚种胚培育出的无菌苗) 经增 殖形成的丛生苗中选取. )1’ 2 方 法 !@’@! K 外 植 体 处 理
试验采用株高 * i( 35) 带 * i# 片 真 叶 的 三 红蜜柚无菌苗为材料) 因为材料本身无菌) 无需再 进行消毒处理) 直接在超净工作台上将其茎段截成 长 $@( i! 35 的 小 段) 每 段 带 ! i’ 个 茎 节) 作 为 诱导体细胞胚发生的外植体. !@’@’ K 培 养 条 件
关键词# 三红蜜柚, 组织培养, 正交设计, 体细胞胚胎 中图分类号# <###KKK文献标志码# DKKK文章编号# $(’%>"$!)#’$!%$$’>$!"*>$&
KK琯溪三红蜜柚系芸香科柑橘属柚类优良品种之 一) 是福建省平和县地方传统名果琯溪蜜柚的芽变 株中最新选 育 的 优 良 品 种) ’$!’ 年 获 得 福 建 省 品 种审定委员会认证推广. 三红蜜柚果肉红艳) 晶莹 透亮) 果皮海绵层呈粉色) 外果皮黄里透红) 深受 消费者喜爱) 其柚果果型倒卵圆形) 汁胞红色) 富 含番茄红素和 ">胡萝 卜 素) 果 汁 丰 实) 甜 酸 适 口) 品质极佳) 比普通品种琯溪蜜柚& 红肉蜜柚早熟 !$ i!( S) 且皮薄少籽) 柚果可食率高达 )$h) 有 良好的发展 前 景 与 市 场 竞 争 力/!0 . 目 前) 三 红 蜜 柚主要采用嫁接和实生苗等繁殖方法) 生产季节性 强) 对操作技术要求较高) 限制了优良新品种的迅 速推广.
快繁) 可在较短时间内获得基因型统一& 表现型优 良的一致性群体) 能够周年生产不受季节与地理位 置的限制) 在快速繁殖苗木& 制作人工种子及基因 工程研究等方面具有较大应用潜力.
本研究采用三红蜜柚无菌苗中的茎段为外植体 诱导胚性愈伤组织形成) 进一步分化形成体细胞胚 胎) 探讨不同培养基与植物生长调节剂对诱导三红 蜜柚胚性愈伤组织以及体细胞胚胎形成等关键环节 的影响) 逐步建立起三红蜜柚体细胞胚胎发生途径 的组培快繁技术体系.
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试验采用 _<& d( 和改良 aL_ 为基本培 养 基) 根据不同培养阶段添加不同浓度与配比的植物生长 调节剂 # ’) *>Q& #>dD和 =DD$ ) 所 有 培 养 基 添 加琼脂 ) V1 Nj! ) 调 节 86 值 (@#) 在 !’! k 条 件 下 灭 菌 ’$ 5Y-) 冷 却 凝 固 后 使 用) 培 养 温 度 为 #’( n’ $ k) 胚 性 愈 伤 组 织 诱 导 的 光 照 强 度 为 ($$ i! $$$ U0) 胚 状 体 萌 发 的 光 照 强 度 为 ! $$$ i ! ($$ U0) 壮苗 与 生 根 培 养 的 光 照 强 度 为 ! ($$ i ຫໍສະໝຸດ Baidu $$$ U0) 光照时间 !’ T1S j! . !@’@& K 胚 性 愈 伤 组 织 的 诱 导