重组鸡α干扰素对鸡免疫功能的影响
干扰素在肉鸡生产上的应用
由表2可以看出,18日龄,实验组A、B禽流感抗体均显著高于对照组,平均抗体滴相差达2个滴度以上,实验组A和B之间无显著差异。
说明人用和鸡用干扰素均可显著提高禽流感疫苗抗体水平。
3 讨论干扰素(IFN)目前是公认的抗病毒的有效药物,且无毒无害、无药物残留。
在治疗人和动物病毒性疾病方面得到了广泛的应用。
经典免疫学理论认为干扰素具有种属特异性,而没有病毒特异性。
但是近期研究表明,这种理论具有一定的局限性。
1995年Tateyama等研究发现猫的干扰素与犬的极为相似,可结合犬细胞表面干扰素受体,从而激活了抗病毒免疫,对犬肿瘤细胞系也有抑制作用[1]。
1997年日本批准重组猫IFN用于治疗犬细小病毒感染,1999年Minagawa的研究进一步确认了重组猫干扰素对犬细小病毒的治疗作用[2]。
2002年Martin V等用Toray公司生产的重组猫干扰素rFeIFN治疗CPV-2病毒感染的犬,治愈率达到66.7%[3]。
2006年,Pedrettia E等研究发现,低剂量的人IFN治疗猫免疫缺陷病,能明显提高试验感染AIDS猫的存活率[4]。
商品化的人干扰素曾经用于治疗狗的淋巴瘤,显示出明显疗效[5]。
徐良玉等1992年研制的牛血IFN对黄犊牛轮状病毒以及感染猪瘟的猪进行试验性治疗,效果良好,对牛总有效率为91.87﹪,猪为58.06﹪[6]。
本研究表明人和鸡的干扰素都可提高肉仔鸡的疫苗接种效果。
关于干扰素的使用剂量与治疗效果的关系,姚清侠等的研究表明,猪α、β、γ对猪口蹄疫病毒、伪狂犬病毒和蓝耳病病毒的抑制作用于干扰素浓度成正比[7]。
陈溥言等研究表明,鸡重组干扰素对新城疫病毒体外抑制率与干扰素的浓度成正比,最低有效量为100IU/ml[8]。
李志忠等在肉仔鸡接种新城疫疫苗前后分别使用100、500100IU/只干扰素调剂免疫反应,取得满意效果[9];吴静等证明口服过量干扰素可能会造成免疫抑制[10]。
本研究表明口服150IU/只干扰素即可发挥干扰素的免疫调节作用。
动物治疗中干扰素的使用及其副作用
动 物 治 疗 中 干 扰 素 的 使 用 及 其 副 作 用
杨 菲 ( 吉林省松原市宁江区 善友镇畜牧站 吉林松原 1 3 8 0 0 0 )
对 于干扰 素是在 1 9 5 7年 I s a a c s 和 L i n d e n ma n n 在 研 究流 感 病毒 干 扰 现象 时首 次 发现 的 , 至此 , 科 学
进 的仔 猪 或雏 鸡 当天 就 可 以先 用 一 次干 扰 素 ,随后 再做 相应 的免 疫用 药 。 伴 有 免疫 失 败 , 高 发病 区 的养 殖 场 , 更 需要 在 易 发病 季 节 和成 长 阶段 有针 对性 的预 防使 用 。配合 灭 活疫 苗使 用 , 预防 免疫空 白期野 毒 的感染 。 治疗 病 毒病 时 ,可 以配合 免 疫球 蛋 白或其 他 抗
性 ”发热 、 “ 可 逆性 ”骨髓 抑制 、 注 射局 部 迟发 型 过敏
反 应 和全 身 性反 应 , 更 有甚 者 , 在 某 些试 验 之 中更 有
致死的副作用 , 以及致畸胎 的副作用 。以上种种 , 我 们更加要重视干扰素的副作用。
1干扰素简介
由灭 活 的或 活 的病 毒作 用 于 易感 细 胞 后 ,由易 感 细胞 基 因组编 码 而产 生 的一 组 抗病 毒 物 质 。除病
毒 以外 , 细菌 、 真菌 、 原虫 、 立克次 氏体 、 植物血凝素
以及某 些 人 工合 成 的核 苷 酸多 聚 物 ( 如 聚肌 胞 ) 等
菌药 、 抗病毒药 , 达到标本 兼治 、 缩短病程 、 降低损
失。
都能刺激机体产生干扰素。凡能刺激机体产生干扰 素 的物质统称为干扰素诱生剂 。干扰素 的主要成分 是 糖蛋 白 , 按 其 抗原 性 不 同可 分 为 d、 p 和 三种
干扰素在鸡病防治中的应用体会
优 势。 2 . 2治疗传染性法氏囊病
某养 鸡场饲 养肉鸡有 1 0 6 5只, 在2 8日
疫苗造成干扰破坏。 ③在使用干扰素对鸡群 病毒性疾病进行治疗之后, 仍然需要进行疫 苗接 种, 确保 鸡群 有完好 的免疫保护。 ④采 用2 倍量 干扰素加 白细胞介素 一 2 进行注射, 并辅助 以抗病毒性药物综合使用, 对治疗低 致病性禽流感的效果明显, 对高致病性禽流 感有 一定 的预 防效 果 。 ⑤使 用 干扰素 治 疗鸡群 病毒性疾 病, 时间越早 则效果越 好。 ⑥重组干扰素为基因工程产品, 无任何药物
予 以治疗 , 无明 显疗 效, 死亡率 高达 1 3 % , 随
有 许多种 类的细胞 在感染 某些病 毒的 几个 小时之 内, 就会 产生干扰 素, 在几 天之
后会 达到高 浓度, 能够在初次 免疫之后 、 反
后改用注射 干扰 素, 至第 2 天死亡率骤降为 2 % , 至第 3 天则停止 死亡, 治愈率高 达 9 8 % 。
开 口药 . 有效预防马立克 氏病、 新城疫、 禽流 感、 传 染性法 氏囊病、 传染 性支气管 炎等病
毒 性疾病 。 ②在使 用疫 苗之前 或之后 的 9 6
小 时内尽量不要使用干扰素 , 以防干扰素对
获得 的生物活 性物 质, 将其应用于家禽类的
种 类与病毒 性疾病治疗当中, 能够快速缓解
作当中, 能获得更好的临床治疗效果。 1干扰素 的作 用与作 用机理
干扰素 是一种 纯粹有 基因工程 技术所
死 亡率 为 5 . 5 % :2 栋鸡 舍至 第 7 天死亡 停 止, 死亡率为 6 . 2 % ;3 栋鸡舍至第 8 天死亡
重组鸡α-干扰素对鸡传染性法氏囊炎的治疗试验
。
通 实验 动 物技术 有 限公 司 , 本 实验 室 自己孵 化 。
2试验 过 程
传统治疗通常采用病鸡群注射高免 血 清进 行治
疗 ,但 往 往 存 在 质 量 难 以 保 证 及 容 易 复 发 的 情
况, 而干 扰 素是一 种广 谱抗 病 毒 蛋 白 , 对 有囊 膜 的R N A病 毒尤 其 有效 , 能够 通过 阻断 病 毒 与宿 主 细胞 的 结合 而起 到 治疗 作用 ,为 了观察 重 组 鸡 仅一 干扰素对鸡传染性法 氏囊病 的治疗效果 , 我 本试验共采用 了三批 实验室制品, 每批制 品分 别 进行了治疗( 出现临床症状之后给药 ) 试验。 取2 1日龄 S P F鸡 2 7 0只 ,随机分为 1 8 组, 每
格为 l O O m L / 瓶, 批号为 1 1 0 5 1 2 。
1 . 3试 验 动物 2 1日龄 S P F雏 鸡 , S P F种 蛋 购 自北 京 梅 里 亚 维
汰率 增加 ,增 重 下 降 ,并 发 或继 发 多种 其 他 疾
病 。 由于 免 疫程 序 不 当或 其 他 原 因引起免疫失 败, 或者一些强毒 、 超强毒感染 , 造成 了本病的流行
染量为 1 0 4 B I D / 0 . 1 mL 。 1 . 2试验 药物
后每天观察各组鸡的临床症状 ,包括 精神状态 、 食
欲、 活动 、 粪便 、 发 病情况及死亡情况 , 如试验鸡 发
生死亡 时 , 及时对死亡鸡 只进 行剖检 观察 其病理
变化 。于试验结束 时对剩余鸡只称重 , 计算平均增
疾病诊疗
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 8 — 4 7 5 4 . 2 0 1 3 . 0 4 . 0 1 8
关于多肽、植物血凝素、干扰素、白介素、聚肌胞、转移因子等
关于多肽、植物血凝素、干扰素、白介素、聚肌胞、转移因子等_兽药配方的空间18:42作者按:现在好多人问我关于多肽、植物血凝素、干扰素、白介素、聚肌胞、转移因子等产品在畜牧兽药的应用事宜。
本人特整理了以下内容,供大家参考!干扰素 IFN什么是干扰素干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。
它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。
干扰素的分类根据干扰素蛋白质的氨基酸结构、抗原性和细胞来源,可将其分为:IFN-α、IFN-β、IFN-γ。
IFN-ω属于IFN-α家族,其结构和大小与其它IFN-α稍有差异,但抗原性有较大的不同。
现在公认IFN-β和IFN-γ只有一个亚型,而IFN-α有约二十余个亚型。
干扰素的临床应用1、疫苗免疫失败后的临床补救治疗。
当错误使用毒力较强的疫苗免疫,或免疫时未察觉鸡群有潜在性疾病感染等情况时,导致疫苗免疫后鸡群出现病症,此时可使用干扰素进行紧急补救治疗,减少损失。
2、家禽家畜各种病毒性疾病,如猪的口蹄疫、蓝耳病、鸡的新城疫、禽流感、传染性支气管炎等疾病的预防和治疗。
即当发生上述疾病时,在使用其他抗病毒的同时配合使用干扰素,可提高疗效,加速康复。
临床用药指导:一、猪1.在病毒性传染病流行期、易感日龄、引种后以及病毒性传染病发病初期使用效果极好。
2.对猪传染性胃肠炎,流行性腹泻,轮状病毒病的治疗:按以上用量肌肉注射本品,每日一次,连用3日;同时注射抗病毒水针,每日1次连用3-5天,电解多维饮水;痊愈后,建议饲料里添加益生素,以重建和维持肠道微生态平衡,提高增重速度,挽回或减少动物因生病期间消瘦带来的损失。
3.对于无名高热,混合感染,病情较重,死亡率较高的疾病如:蓝耳病,圆环病毒感染,非典型猪瘟,伪狂犬,细小病毒病等紧急治疗时,使用本品同时配合分点注射退烧药和抗生素。
猪恢复采食后,用敏感抗生素拌料,连用3-5天.注意事项1.本品应在有经验的临床兽医师指导下按规定剂量、疗程和投药途径使用。
重组鸡α干扰素对雏鸡试验性贝氏隐孢子虫病的治疗效果
重 组 鸡 O干 扰 素 对 雏 鸡 试 验 性 贝 氏 隐 孢 子 虫 病 t 的治 疗 效 果
岳 道 友 赵 金凤 李 家诚 齐 萌 黄 磊 张 龙现 索 勋 , , , , , ,
(. 1 中国农业 大学动物 医学院 , 京 10 9 ; . 南农 业 大学牧 医工程 学院 , 南 郑 州 4 0 0 ) 北 0 13 2 河 河 5 0 2
摘 要 : 探 讨 重组 鸡 d干扰 素(F 一 ) 为 IN 0 对雏 鸡 贝氏 隐袍 子 虫病 的 治 疗作 用 , 用 3 日龄 罗 曼公 雏 , 只 经 口 1次 【 选 毒 接种 1 0 ×1 个 贝氏 隐孢 子 虫 卵囊 , 同时 对 不 同组 别雏 鸡 分 别 肌 内注 射 50 l 0 , 0 , 0 U ・ 0 , 0 0 20 0 40 0I 只 的 重 组
c y t s r d o i n c i k n r p o p i i ss i h c e
YU a .o HAO J , n ,L i.h n E D oy u ,Z i f g ne IJac e g ,QIMe g ,HUANG L i,Z n e HANG L n .in ,S u ‘ o gxa UO X n ( . olg fVeeiayMe iie hn giu ua ies y,B in 0 1 3,C ia . olg f 1 C l eo tr r dcn ,C iaA r h rl v ri e n c Un t ej g1 0 9 i hn ;2 C l eo e A i l ce c n eeiay Me iie He a r utrlUnv ri ,Z e g h u4 0 0 ,C ia nma in e a d V tr r dcn , n n Agi l a S n c u ies y h n z o 5 0 2 hn ) t
鸡干扰素的作用及功能主治
鸡干扰素的作用及功能主治1. 简介鸡干扰素是一种重要的免疫调节因子,属于干扰素家族的一员。
它起到调节鸡体免疫系统的功能,并具有抗病毒、抗肿瘤等多种作用。
2. 鸡干扰素的作用•抗病毒作用:鸡干扰素通过激活宿主细胞中的抗病毒机制,抑制病毒的复制和传播。
它能够激活天然杀伤细胞的活性,通过产生一系列抗病毒蛋白,抵制病毒的入侵和复制,起到抗病毒的作用。
•抗肿瘤作用:鸡干扰素能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移,促进肿瘤细胞的凋亡。
它通过调节免疫系统,增强抗肿瘤免疫反应,抑制肿瘤细胞的生长和扩散,从而起到抗肿瘤的作用。
•抗炎作用:鸡干扰素能够调节炎症反应,减轻炎症症状。
它可以抑制炎症介质的产生,抑制炎症细胞的活化,从而减轻组织损伤和炎症反应,缓解炎症症状。
•免疫调节作用:鸡干扰素能够调节免疫系统的功能,增强机体的免疫力。
它可以增强免疫细胞的活性,促进受体细胞的分化和增殖,增强机体对病原体的抵抗力,提高免疫系统的效力。
3. 鸡干扰素的功能主治3.1 抗禽流感•鸡干扰素通过激活免疫系统,抑制禽流感病毒的复制和传播。
•它可以增强宿主细胞对禽流感病毒的抵抗能力,减轻病毒感染的严重程度。
•鸡干扰素还可以提高禽流感疫苗的效果,增强对疫苗的免疫应答。
3.2 抗鸡传染性喉气管炎•鸡干扰素能够抑制鸡传染性喉气管炎病毒的繁殖和扩散。
•它可以减轻鸡传染性喉气管炎的病情,缩短病程,减少死亡率。
•鸡干扰素还能够提高鸡传染性喉气管炎疫苗的效果,增强对疫苗的免疫应答。
3.3 其他感染性疾病•鸡干扰素对鸡传染性鼻炎、鸡传染性法氏囊病等感染性疾病也有一定的治疗作用。
•它可以抑制病原体的复制和传播,减轻病情,促进康复。
3.4 抗肿瘤•鸡干扰素对鸡的肿瘤具有一定的治疗作用。
•它可以抑制肿瘤细胞的生长和转移,促进肿瘤细胞的凋亡。
•鸡干扰素可以增强机体的抗肿瘤免疫反应,增强免疫细胞的活性,抑制肿瘤的发展。
4. 使用注意事项•鸡干扰素的使用应遵循兽医的指导,严格按照使用剂量和使用方法进行使用。
重组鸡γ-干扰素对H5亚型禽流感灭活苗的免疫增强作用
(. 1 东北农业 大学动物医学学院,哈尔滨 10 3 ;2 中国农业科学院哈尔滨兽医研 究所 ,哈尔滨 10 0 ) 500 . 5 0 1
摘
要 :为研 究重组鸡 ^ 干扰素( hc e t fr , hF 一 ) y 一 C i ni e eo k n r n C IN 对禽流感灭活疫 苗的免疫增强效果 ,使 用重
素 对 H5亚 型禽 流 感 灭 活 疫 苗具 有 免 疫 增 强作 用 。
关键词:鸡 一 干扰素 ;禽流感病毒 ;灭活苗 ;免疫增强
中图 分 类 号 :¥ 5 .1 88 3 文 献 标 志 码 :A 文 章 编号 : 10 — 3 9 2 1) 9 0 8 — 4 0 5 9 6 (0 0 0 —0 7 0
Ab t a t h td i d t v lae te a jv n f c frc e su y ame o e au t h du a te e to e o ia tc i n itr o k e
(hF — ) na i f e z i s (I)n citdv ci . pc cp t g nf e (P ) h k n ee C lNY o v ni u n av u AV i ti a c e S e i ah e -e S F c i e r a n l r a ve n i f o r c w
Tr l n f c c o AI H5 y e n c ia e v c ie n a c d y i o e f a y f a i t p ia t t d a cn e h n e b v r c mb n n h c e n e f r n y Z N a ’ E i f g C I a fn L i eo ia tc ik n it r o - / E GY n R NXa e ’ A H o ’ I Mn , e , o n , a , U g
夏秋季节鸡球虫病的预防和控制___
4讨论与结论鸡传染性法氏囊病是一种主要侵害鸡的体液免疫中枢器官法氏囊等淋巴组织的免疫抑制性疾病,该病的危害不仅表现在疫病本身,更重要的是引起鸡体的免疫功能障碍,影响各种疫苗的免疫应答,甚至导致免疫失败。
由于免疫抑制,容易引起继发感染和并发其他疾病,导致死亡率明显升高。
因此,鸡群在发生鸡传染性法氏囊病病毒感染时,如不能及时进行有效的治疗,将会引起鸡群的大批死亡,后期即使有部分鸡只能痊愈,但由于机体的免疫抑制及生产性能的大幅度的降低,导致严重的经济损失[3]。
本试验主要通过对SPF 鸡人工感染后,对不同感染、发病阶段的试验鸡进行治疗,同时以法氏囊卵黄抗体[4-5]为参照药物,来评价重组鸡α-干扰素对鸡传染性法氏囊炎的治疗效果。
由试验结果我们可以看出,重组鸡α-干扰素在法氏囊病感染初期(发病前期)、感染中期(发病初期和中期),能减轻其临床发病症状,与攻毒对照组相比较,能明显减轻病毒对法氏囊等组织器官的损伤,促进发病鸡只的恢复过程,缓解由于免疫器官损伤而引起的鸡只生长缓慢等问题,能够提高鸡只的增重,并具有高度的安全性和质量可控性,具有良好的应用价值与生产开发前景。
■GY 参考文献:[1]尹卓,周君.鸡传染性法氏囊病的流行特点[J].吉林畜牧兽医,2009,30(10):23-25.[2]鲁俊鹏,刘闯,曾凡桂.鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫效果评估[J].中国畜牧兽医,2012,29(4):221-1224.[3]李辉,赵宝龙.鸡传染性法氏囊病的流行特点及防制对策[J].现代农业科学,2012(2):324-327.[4]穆海菠,王洪新.抗鸡新城疫卵黄抗体的研制[J].中国家禽,2003,25(14):9-10.[5]那红,杨曜中,袁勤生.鸡卵黄免疫球蛋白的研究进展[J].中国生化药物杂,1997,18(3):151-155.鸡球虫病是鸡常见且危害十分严重的寄生虫病,我国每年因鸡球虫病造成的损失巨大。
尽管经过多年的努力,在球虫病的病原研究、疫苗预防、药物治疗等方面取得了很大的进展,但是鸡球虫病目前仍是普遍发生的疾病之一。
重组鸡α-干扰素对鸡新城疫感染的治疗及疫苗免疫的影响
01 攻毒 后 ,0 . ml 1 稀 释 度 的鸡 全 部 发 病死 亡 ,0 l~、
1 组分 别 死 亡 3只 和 2只 。0 1 一 组 则未 出现 0 1 、0 。
基金项 目: 山东省 自然科 学基金 支持 项 目, 编号 Y 0 1 0 20D 7
维普资讯
1 病毒 . 3
0. ml 1 。
新城疫病毒 分离株 Q株 ,I 1 / ED =0
6 日龄 S F 0 P
1 Q株 半 数 致 死量 ( D 的 测 定 . 4 L )
鸡 2 5只 , 随机 分成 5组 , 每组 5只 。Q株 病 毒液 以
l 0倍 比稀 释 , 1 - 0 。5个 稀 释 度 。 个 稀 释 取 06 1 每
1 对 新 城 疫 疫 苗免 疫 的 影 响 . 6 6 日龄 S F鸡 0 P
鸡 一 干扰 素 具 有抑 制 病毒 和 免疫 调 节 等 多种
生物学活性 ,我们利用毕赤酵母对鸡 一 干扰素进 行 了表 达 , 并且 证 实表 达产 物 在 细胞 上 具 有较 好 的
抗病 毒 效果 。 了检验 其 在鸡 体 内 的抗 病 毒能 力 和 为 免疫 调 节 能 力 ,我 们用 重 组鸡 一 扰 素进 行 了新 干 城疫 的人 工感染 的治疗 试 验 和对 弱毒 疫 苗 、 活疫 灭 苗 免疫 效果 的影响 试验 , 报 告如 下 。 现 l 材料 与方法
P utv S i l  ̄ o l cf ̄ r c 死亡 , 计算 L 卯 1 /. l D 为 0 s 1 。详见表 1 0m 。
表 1新城疫病毒 Q株 L 的测定 D
O O O 2
l 2
3
4
5
表 3 重组鸡 0 干扰素对新城疫抗体滴度的影响 【 一 O
重组鸡a-干扰素对鸡传染性法氏囊炎的预防试验
1 . 3试验 动物 2 1日龄 S P F雏 鸡 , S P F种 蛋 购 自北京 梅 里亚 维 通实 验动 物技术 有 限公 司 , 本实 验室 自己孵 化 。
2试 验方 法
亡, 后期 即使有部分鸡只能痊愈 , 但 由于机体 的免 疫抑制及生产性能 的大幅度的降低 , 导致严 重的经
进行预 防性给药, 给药2 4小时后 用法氏囊标准强毒 B C 6 / 8 5 对 易感 日 龄的 S P F 鸡进行攻毒 , 同时使 用
法氏囊卵黄抗体做 为对照药品 , 进行对比试验。 结果表 明, 卵黄抗体对发病早期病鸡的治疗优于干扰素 ,
在 发 病的 中晚期 , 则治愈 率 大为下 降。 关键 词 : 重 组鸡 仪一干扰 素 ; 传 染性 法 氏囊炎 ; 卵黄抗体
摘
要: 鸡传 染性法氏囊病( I B D ) 是 由鸡传 染性法氏囊病病毒( I B D V ) 引起的一种急性、 接触性 、 免疫抑制
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
性疾病。 该病发病 突然, 呈尖峰死亡, 可导致鸡群淘汰率增加 , 增重下降, 并发或继发 多种其他疾病。 在本 试验 中, 我们使用 1 0万单位、 1 万单位和 0 . 1 万单位三个剂量的重组鸡 O t 一干扰素对易感 日 龄的S P F 鸡
安全用药
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 8 - 4 7 5 4 . 2 0 1 3 . 0 2 . 0 1 0
重组鸡 O c 一千扰素 对鸡传染性法氏囊炎的预防试验
袁 明霞 , 闫妍 , 赵刚 。 , 李 艳飞 ’
( 1 . 东北农业大学动物医学院 黑龙江哈尔滨 1 5 0 0 3 0 ; 2 . 哈药集团生物疫苗有限公 司 黑龙江哈尔滨 1 5 0 0 6 9 )
鸡α干扰素(IFN-α)说明书
鸡α干扰素(IFN-α)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T1pg/ml-60pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中α干扰素(IFN-α)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡α干扰素(IFN-α)水平。
用纯化的鸡α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α),再与HRP标记的α干扰素(IFN-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α干扰素(IFN-α)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡α干扰素(IFN-α)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
重组鸡α-干扰素对鸡外周血T淋巴细胞亚类的影响
摘
耍 : 组 鸡 a 扰 素 ( hF 重 一干 lN—a 静脉 注射 4 6周 龄 S F鸡 ,4h后 采 血 分 离 淋 巴 细 胞 , 过 流式 ) ~ P 2 通
细胞术测定不 同时间外周血 中 C 4 D 和 C 8 D T淋巴细胞 的百分 率。结果显 示, hF l N—a可 以在 4 ~7 8 2h
外 周 血不 同亚类 T淋 巴细胞 的变 化 , 阐明其 免 为 疫 调节机 理提供 依据 。
Ke r s r y wo d ChI FN— CD4 T el CD8 T e l I munem o ul ton n; c is; c is;m d ai
干 扰素 最早在 鸡胚 细胞 中被发 现 [ , 9 4年 1 19 ] S k lc e el k等 [ 率先将 鸡 a i 2 一干扰 素基 因克 隆成功 , 加 速 了家禽 干扰 素的研 究进 程 。鸡干 扰 素具有 多
LIY uf n W U ig W ANG u -ig, IF n S —e g, Jn , Ch n l n L e g, ONG M i- u nx n
( o l yI f l o h n o gAcd m fAg iut l cecs ia 5 0 3 hn ) P ut ‘ fS a d n a e yo r l a ine ,Jn n20 2 。C ia r , t c r S
io a e n h e c n s o s l t d a d t e p r e t fCD4 T e l n c l a d CD8 s T e l r a u e y fo c t me r . e r — c l we e me s r d b l w y o t y Th e s s is s o d t a h e c n fCD4 T e l n r a e e r a l l n h e c n fC T e l u t h we h tt e p r e to c l i c e s d r ma k b e y a d t e p r e t D8 s o c ls d c e s d i 8 7 o r ,d mo s r t g t e p t n i l mm u e mo u a i n a t iy o Ch F ∞ e r a e n 4 ~ 2 h u s e n ta i h o e t n a i n d lto c i t fr i N一 v
重组鸡干扰素α生物学活性测定方法的研究及其验证
13重组鸡干扰素琢生物学活性测定方法的研究及其验证高应瑞,刘珂飞,孟铁健,徐鑫(天津生机集团股份有限公司300384)摘要:目的:建立重组鸡干扰素α效价的测定方法,采用不同检测系统测定重组鸡干扰素α(rrChIFN-α)生物学活性。
方法:采用水泡性口性炎病毒(VSV)、新城疫病毒(NDV)分别作为攻击病毒,以微量细胞病变抑制法对同批次不同浓度的6组rChIFN-α样品进行了效价的检测,对在鸡胚成纤维细胞株上所得结果进行比较。
结果:同批次rChIFN-α样品,用VSV 病毒和NDV 病毒作为攻击毒株,在鸡胚成纤维传代细胞上的抗病毒效价呈线性相关(P=0.993726,p 跃0.05),效价差异无显著性。
结论:水泡性口性炎病毒(VSV)、新城疫病毒(NDV)对于rChIFN-α抗病毒活性检测结果无显著性差异,但rChIFN-α的测定中CEF/VSV 系统测定结果的CV 值要低于CEF/NDV 系统,且用VSV 作为攻毒株作为病变毒株更符合干扰素测定标准,因此更适用于实验室对rChIFN-α的生物学活性检测。
关键词:重组鸡干扰素α;效价;细胞干扰素(IFN)是一类具有抗病毒,影响细胞生长、分化和调节免疫功能等活性的蛋白质。
根据干扰素的氨基酸结构、抗原性和细胞来源,可将其分为三类:IFN-a 、IFN-β和IFN-γ。
据资料报道,实验证明,重组的鸡α干扰素在抵抗水泡性口炎病毒、劳斯肉瘤病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、马立克病毒、禽流感病毒等,都有明显的效果,能显著抑制病毒的生长[1-4]。
2014年,程福亮等人在重组鸡α-干扰素的表达及其生物活性的初步研究中,应用在CEF/VSV 细胞系上测定了重组鸡α-干扰素的抗病毒效价为1.5×210U/mg 左右[5];2018年,赵泽在鸡、羊λ3-干扰素在家蚕中的表达及其抗病毒活性检测中,采用微量细胞病变抑制法在VSV-GFP 系统上检测所表达的重组干扰素抗病毒活性,根据Reed-Muench 法计算效价[6]。
干扰素及类似兽药的注意事项
2020年第02期干扰素及其类似兽用药品是治疗病毒性疫病的常用药品,在临床治疗中得到了广泛应用,具有良好的防治效果。
但是在应用这类药品的过程中,需要注意的内容比较多,否则,达不到治疗效果,本文重点介绍了干扰素及类似药品应用的注意事项,供参考。
1确定干扰素及其类似兽用药品的应用时机其作用机理是干扰动物体内病毒的复制,但没有清理病毒的作用,还需要动物自身进行抵抗,若动物的抵抗能力比较差,即使病毒不在特定的靶组织或靶器官发生病变,病毒增多也还会对动物身体产生影响。
通常,干扰素比较常用于体质强壮动物的发病早期,对病情进行控制,对病毒引起的器官病变还需要使用专门的治疗方法。
动物病症减轻后还需要进行针对性治疗,接种免疫疫苗,提高动物的自身免疫力和抵抗能力。
另外,对早期病例,使用干扰素治疗后也需要经过一段时间后才能完全治愈,无法立即恢复。
主要是直接作用于病毒,与病毒形成复合体,能够对病毒的浓度进行控制,从而缓解病情并逐渐治愈。
但是在实际应用之前需要对具体病症进行明确,针对性的选择抗体,否则容易出现变态反应,不利于疾病的治疗,还容易导致病情加重。
2药品的用量和使用方法干扰素产品类型比较多,每一种干扰素都有具体的含量、使用量、保存方法和使用期限,在实际应用干扰素的过程中,一定要结合动物的发病情况来确定具体的用量。
通常情况下,干扰素要在短时间内使用,保存时间越长,干扰素的效价越低。
在使用的过程中也需要根据保存时间的长短来对干扰素的用量进行调节,尽量现用现买,同时保证保存环境的稳定性,避免干扰素反复冻融影响其生物活性。
其次,干扰素冻干制剂与水剂相比,若出现溶解情况很容易被发现,便于购买者的保存。
再次,要对解冻的时间进行有效控制,因为干扰素解冻会后长时间放置会影响其活性。
在解冻的过程中需要保证温度的适宜性,在解冻之后待温度达到26~30℃后进行应用。
稀释干扰素需要专门的稀释液,因为干扰素对稀释液的渗透压,所以不能使用饮用水进行解冻和稀释,避免影响干扰素活性。
干扰素γ在鸡体内的消长规律
干扰素γ在鸡体内的消长规律王立红;王鸿英;张立新;邢克智;张军;李睿义【期刊名称】《天津农学院学报》【年(卷),期】2007(014)004【摘要】以不同剂量的重组cIFNγ对SPF鸡进行免疫注射,用ELISA法检测cIFNγ在体内的消长.研究结果表明:注射给药后2 h即可在多个器官中检测到cIFNγ;8~24 h,cIFNγ在体内的分布达到高峰;2~4 d后,cIFNγ在体内的分布显著下降;cIFNγ的注射剂量与血药浓度并不呈线性相关,但高剂量的cIFNγ具有显著诱导体内自身cIFNγ表达的能力,尤其是诱导脾脏和淋巴器官中cIFNγ的表达;在高剂量cIFNγ的作用下,鸡体内cIFNγ可维持30 d以上.在接种新城疫疫苗后的2~8 d,也可在鸡的各个组织和器官中检测到cIFNγ低剂量的表达.【总页数】5页(P13-17)【作者】王立红;王鸿英;张立新;邢克智;张军;李睿义【作者单位】天津农学院水产系,天津,300384;天津市禽病诊断培训中心,天津,300402;天津市禽病诊断培训中心,天津,300402;天津农学院水产系,天津,300384;天津动物检疫站,天津,300221;天津动物检疫站,天津,300221【正文语种】中文【中图分类】S852.52【相关文献】1.鸡痘病毒抗体在鹌鹑体内的消长规律 [J], 金明兰;侯继波;南文龙;鲁会军;马鸣潇;郑敏;金宁一2.口蹄疫重组鸡痘病毒在豚鼠体内的毒性、分布、抗体消长规律的研究 [J], 霍晓伟;兰晓葳;金明兰;金宁一;鲁会军;马鸣潇;郑敏;李旭;计越;刘慧娟3.口蹄疫重组鸡痘病毒在豚鼠体内的毒性、分布、抗体消长规律的研究 [J], 金明兰;金宁一;鲁会军;马鸣潇;郑敏;李旭;计越;刘慧娟;霍晓伟;兰晓葳4.基因工程鸡α-干扰素纯化制品在鸡体内的消长规律 [J], 赵风立;刘光晓;姜德仟;杨静;王俊超;于静静;林娜5.口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗在豚鼠、猪体内的毒性、分布及抗体消长规律[J], 金明兰;金宁一;鲁会军;马鸣潇;郑敏;霍小伟;刘慧娟;计越;李旭因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
干扰素在控制禽病毒性传染病上的应用
干扰素在控制禽病毒性传染病上的应用作者:许英民来源:《兽医导刊》 2015年第2期许英民 / 黑龙江省铁力市172 信箱自1957 年lsaacs 和lindenmann发现干扰素以来,干扰素已经显示出极强的抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节活性和应用前景。
因而,干扰素研究越来越受到人们的广泛关注。
目前,动物干扰素主要停留在基础研究和临床研究试验阶段,且大多数集中于鸡、猪、鱼等少数动物,但近年来也取得不小的进步,目前已有商品化的鸡、猪、犬等重组干扰素产品面市。
本品就近年来国内动物干扰素的应用和在家禽等方面的应用作以介绍。
一、概况1. 干扰素(IFN)是一类具有广泛生物学活性的蛋白质,具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体的防御系统的重要组成部分。
IFN 的抗病毒活性是通过宿主细胞而间接完成的,并具有严格的种属特异性和及选择性。
根据其来源和结构,IFN 可分为α、β、γ三种类型,近年来,还发现了ωτ等类型的干扰素。
IFN-α 主要由单细胞产生;IFN-β主要由纤维母细胞产生,血管内皮细胞也可产生;IFN-γ 由抗原及PHA 等有丝分裂原刺激T细胞后产生,此外,NK 细胞也可产生。
IFN-τ 是反刍动体物孕体附植养时滋养层细胞分泌特有的妊娠识别信号因子,在妊娠识别中发挥着重要的作用。
2. 干扰素IFN-α、IFN-β 尽管结构不同,但是许多相似之处,它们来自同一个祖先基因,和相同的细胞表面受体,并发挥相似生物学效应,因而把它们一起划归为Ⅰ型干扰素。
其中IFN-α 是20 个结构相关的分子量约为18kDa 的多肽家族,每个由独立的基因编码;IFN-β是个单基因产物,是分子量20kDa 糖蛋白。
IFN-γ 属Ⅱ型干扰素,由大约21 ~ 24kDa 的亚基组成的以同源双体型式存在的糖蛋白。
IFN-γ 对56℃、ph2 和0.1SDS 敏感。
二、干扰素生物学活性干扰素在1957 年被发现,抗病毒活性被认为是其唯一特性,但随后研究发现干扰素除具有抗病毒增殖作用外,还有一系列其它生物学活性,如抗肿瘤、免疫调节作用等。
干扰素在鸡病防治中的应用体会
干扰素在鸡病防治中的应用体会摘要大量实验表明,干扰素在治疗禽类肿瘤与病毒性疾病的临床应用中,有着效果好、见效快、无残留且持续时间久的特点,不管是针对于产蛋鸡、肉仔鸡或是种鸡,在鸡病防治中都可使用。
将针对干扰素在鸡病防治中的应用,探讨几点个人体会。
关键词干扰素;鸡病;防治干扰素(IFN)实际上是一种具有广泛生物活性的蛋白质,在调节机体免疫功能以及抗病毒、抗肿瘤方面有着良好的作用,是机体防御系统的重要组成。
干扰素是细胞在特定的诱导剂作用之下所产生的高生物活性的糖蛋白,将其作用于其他细胞时,会使得其他细胞即刻获得抗病毒、抗肿瘤方面的免疫能力[1]。
将干扰素应用在鸡病防治工作当中,能获得更好的临床治疗效果。
1干扰素的作用与作用机理干扰素是一种纯粹有基因工程所获得的生物活性物质,将其应用于家禽类的种类与病毒性疾病治疗当中,能够快速缓解各类病状,并且还能有效预防各类病毒性传染病的出现。
结合大量的临床应用效果来看,干扰素在抗病毒与免疫调节方面的效果有着明显的优势,在业内有着良好的口碑。
有许多种类的细胞在感染某些病毒的几个小时之内,就会产生干扰素,在几天之后会达到高浓度,能够在初次免疫之后、反应还未形成之前发挥良好的免疫作用。
干扰素主要由宿主细胞的基因编码产生,当细胞感染病毒之后,病毒的遗传物质与宿主细胞的核糖体产生作用,致使靶细胞编码干扰素的编码基因抑制,进而产生干扰素。
从细胞内释放出来的干扰素,在接触到其他细胞之后可保护其不受感染。
这种保护作用的主要机理是通过干扰素对未感染细胞的DNA去抑制作用而实现的,正因为去抑制作用的存在,未感染细胞会产生一种蛋白质物质,其能够阻挡病毒DNA侵入细胞的核糖体,进而有效抑制了病毒的复制,使其在机体内不再扩散[2]。
2干扰素在鸡病防治中的实际应用在实际的鸡病防治工作中,干扰素制剂已经有了广泛的应用,比如针对禽流感、鸡新城疫、传染性法氏囊病、马立克氏病、传染性支气管炎传染性喉气管炎、产蛋下降综合症、禽脑脊髓炎、鸡痘以及球虫病等,都有着良好的防治效果。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
0 2.211±0.177 2.133±0.319 2.318±0.283 2.258±0.169
表 4 鸡α-干扰素对鸡白介素-2 的影响
采样时间/天
7
14
21
2.407±0.285
2.886±0.566b
3.017±0.424b
2.426±0.221
4.132±1.021b
4.413±0.157b
5.428±0.323a
4.225±0.237ab
脾脏指数
0.892±0.0899
0.983±0.114
1.064±0.0373
1.048±0.0964
法氏囊指数
1.625±0.132
2.117±0.219
2.283±0.366
1.816±0.103
注:同行右上角标有不同小写字母表示差异显著(P<0.05),标有相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)。以下均是。
组别
第1组 第2组 第3组 第4组
0 33.264±2.621 34.463±3.931 32.183±3.238 34.258±3.691
表 5 鸡α-干扰素对鸡血清补体总活性的影响
采样时间/天
7
14
21
35.432±2.852
36.813±3.235b
40.751±3.245b
36.264±3.212
80 只 10 日龄健康肉仔鸡,试验期间自由饮水和采 食。
第一作者简介:常凯,男,1983 年出生,山东东阿人,在读研究生,研究方向:动物传染病防治。通信地址:266109 山东省青岛市城阳区长城路 700 号 青岛农业大学动物科技学院,E-mail:changguangkai_1@。 通讯作者:单虎,男,1967 年出生,山东威海人,教授,研究方向:动物传染病防治。通信地址:266109 山东省青岛市城阳区长城路 700 号 青岛农业 大学动物科技学院。E-mail:hush@。 收稿日期:2009-03-10,修回日期:2009-04-21。
2.4 鸡α-干扰素对鸡血清补体总活性的影响 结果显示,第 3 组鸡在注射鸡α-干扰素后第 14 天、
21 天 血 清 补 体 总 活 性 含 量 显 著 高 于 其 余 各 组 (P< 0.05)。见表 5。
万方数据
常 凯等:重组鸡α-干扰素对鸡免疫功能的影响
· 17 ·
组别
第1组 第2组 第3组 第4组
0 引言 近年来,病毒病一直困扰着中国养禽业,造成养禽
业巨大的经济损失,其流行特点是病毒变异快,非典 型,易暴发,因此需要干扰素类广谱抗病毒生物制剂来 治疗和加强疫苗的免疫效果[1-2]。
干扰素(Interferon,IFN)系统是脊椎动物细胞功能 自我稳定的重要系统,它在机体抵抗多种病原徽生物、 肿瘤以及特异性免疫应答中起重要作用。干扰素是人 和动物细胞受到适宜刺激条件下产生的一种微量的、 具有高度生物学活性的糖蛋白,同一生物体中存在着 多种类型的干扰素,其中α-干扰素主要生物学活性是 广谱抗病毒作用。20 世纪 80 年代,随着基因工程技术 的发展,人的干扰素(α,β和γ)已被成功的克隆和表达,
39.231±2.437b
44.353±3.237b
37.469±2.673
48.435±3.062a
60.619±3.421a
36.057±3.401
52.364±3.512a
64.438±3.352a
28 32.653±3.747 38.236±3.329 42.876±3.479 44.238±3.536
Abstract: 80 ten-day-old chickens being healthy and having even weight were randomly divided into 4 groups,20 for each group. The first group was control group injected physiological brine. Chickens from the second to fourth groups were respectively injected 1000 units,10000units and 100000 units α-interferon. Im⁃ mune organ index number, lymphocyte conversion ratio, interleukin-2 content, Serum complement activity were determined. The results showed that Immune organ index number, lymphocyte conversion ratio, interleu⁃ kin-2 content, Serum complement activity of the third group were higher than the others. Key words: recombination, α-interferon, chickens, immunity function
3.066±10.961±0.808a
2.705±0.140
4.214±1.251b
4.572±0.245b
28 2.536±0.715b 2.771±0.218b 6.687±0.329a 2.998±0.349b
35 0.955±0.472 1.472±0.362 2.173±0.330 1.536±0.258
制成 4 U/ml 溶血素。倍比稀释待检血清,按 CH50 法 测定上清 OD542值,与 50%溶血标准相近的最高稀释倍 数即为血清总补体效价,换算成补体单位。
2 结果与分析 2.1 鸡α-干扰素对鸡免疫器官指数的影响
结果显示,28 日龄第 3 组鸡的胸腺指数显著高于 对照组(P<0.05),脾脏指数,法氏囊指数各组差异不显 著(P>0.05);45 日龄各组鸡的胸腺指数、脾脏指数和法 氏囊指数差异不显著(P>0.05)。见表 1 和表 2。 2.2 鸡α-干扰素对鸡淋巴细胞转化率的影响
Effect of Chicken α- interferon on Immune Function of Chicken Chang Kai1, Ma Fenglong2, Shan Hu1
(1Qingdao Agricultural University Institute of Animal Science and Technology, Qingdao Shandong 266109; 2Qingdao Sinder Technology Company, Qingdao Shandong 266061)
中国农学通报 2009,25(14):15-17 Chinese Agricultural Science Bulletin
重组鸡α-干扰素对鸡免疫功能的影响
常 凯 1,马凤龙 2,单 虎 1
(1青岛农业大学动物科技学院,山东青岛 266109;2青岛信得科技股份公司,山东青岛 266061)
摘 要:选取 80 只 10 日龄的肉仔鸡,随机分成 4 组,每组 20 只。第 1 组为对照组,第 2~4 组为试验组,分 别肌注 0.1 倍剂量(1000 U)、1 倍剂量(1 万 U)和 10 倍剂量(10 万 U)的鸡α-干扰素。试验期间并对其免疫 器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2 含量、血清补体总活性进行测定。结果表明:1 倍剂量(1 万 U)组 鸡的免疫器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2 含量、血清补体总活性均高于其他三组。 关键词:重组;鸡α-干扰素;鸡;免疫功能 中图分类号:TS202 文献标识码:A
指标
表 2 鸡α-干扰素对 45 日龄鸡免疫器官指数的影响
第1组
第2组
第3组
第4组
胸腺指数
4.161±0.361
4.060±0.309
4.920±0.408
4.017±0.439
脾脏指数
1.205±0.0847
1.082±0.131
1.749±0.117
1.019±0.045
法氏囊指数
1.662±0.279
结果显示,第 3 组鸡在注射鸡α-干扰素后第 14 天、 21 天淋巴细胞转化率显著高于对照组(P<0.05),第 28 天显著高于其余各组(P<0.05)。见表 3。
指标
表 1 鸡α-干扰素对 28 日龄鸡免疫器官指数的影响
第1组
第2组
第3组
第4组
胸腺指数
4.489±0.115b
4.896±0.0912ab
并广泛应用于医学临床[3-5]。与哺乳动物相似,鸡的干 扰素也有α、β和γ三种类型。1994 年,sekellick 等首次 成功克隆和表达了鸡 IFN-α (ChIFN-α)基因,并进行了 结构分析[6]。Sick 等(1996)也对 ChIFN-α基因进行了克 隆和表达并对表达产物的抗病毒活性进行了研究,目 前 已 知 ChIFN-α 是 无 内 含 子 的 多 拷 贝 基 因 ,它 与 ChIFN-β 有 共 同 的 受 体 ,但 抗 病 毒 活 性 ChIFN-a 比 ChIFN-β强 20 倍[7-8]。此试验旨在通过鸡α-干扰素对鸡 的免疫功能的影响为临床应用提供理论支持。 1 材料与方法 1.1 试验动物
于注射前,注射后 7 天、14 天、21 天、28 天、35 天心脏采 血分离血清。试剂盒由 BPB Biomedicals Inc 提供,检 测方法按试剂盒要求进行,由标准品做标准曲线后求
出方程,把样品 OD450值代入方程求值[9]。 1.3.5 血清补体总活性的测定 每组随机取 4 只肉仔 鸡,分别于注射前,注射后 7 天、14 天、21 天、28 天、35 天心脏采血分离血清,自行制备鸡溶血素,标定效价,