卫生化学简答题

1. 简述准确度与精密度的区别和联系。

答：准确度指测定值与真值之间一致的程度，精密度指对同一均匀试样多次平行测定结果之间的分散程度，准确度是反映分析方法或测量系统存在的系统误差和随机误差的大小，决定分析结果的可靠程度；精密度反映了分析方法或测定系统随机误差的大小。

精密度是保证准确度的先决条件，高精密度的分析结果才有可能获得高准确度。

但两者之间没有必然联系。

灵敏度降低了。

2. 分子的紫外-可见吸收光谱为什么呈带状光谱？（重要）答：分子的紫外-可见吸收光谱为电子光谱，但在电子能级跃迁的同时，不可避免地伴随分子振动和转动能级的跃迁，使得分子光谱是带状光谱3、在原子吸收分光光度法中，有哪几种主要因素可以使谱线变宽？（1）自然变宽，取决于激发态原子的寿命，寿命越短，谱线越宽；（2）Doppler变宽，又称热变宽或者多普勒展宽，温度越高，展宽越严重；（3）碰撞变宽，包括洛伦兹展宽（又称压力展宽）和霍尔兹马克展宽（又称共振展宽）（4）由于电场作用导致谱线分裂的斯塔克展宽（5）由于磁场作用导致谱线分裂的塞曼展宽但无论何种因素引起的谱线展宽，都会导致原子吸收分析的灵敏度下降。

4、原子吸收法与紫外可见分光光度法在原理及仪器方面进行比较。

仪器方面UV-Vis 光源—单色器—吸收池—检测器—显示器AAS 光源—原子化系统—单色器—检测器—显示系统荧光分析仪器光源—激发单色器—样品池—发射单色器—检测器—显示系统5. 电位法测定F-离子时，常在溶液中加TISAB溶液。

简述TISAB溶液的组成及作用。

（重要）答：组成成分包括NaCl HAc-NaAc 枸橼酸钠它们的作用分别是：（1）NaCl 用来调节和控制溶液的离子强度；（2）缓冲溶液HAc-NaAc，用来调节和控制溶液的pH值；（3）掩蔽剂：柠檬酸钠，作用是与溶液中共存的Fe3+、Al3+等离子配合，掩蔽其干扰。

（4）离子强度调节剂还可使液接电位稳定，缩短电极响应时间。

6、用pH玻璃电极测量溶液的pH值时，为什么需要用标准缓冲液定位？答：用pH玻璃电极测量溶液的ph值时，待测电池的电动势与试液的ph值呈线性关系，即E=K+0.059pH。

若能求得E和K，即可计算试液的ph值。

E值可由仪器测得，但K值常随电极和溶液的组成不同而不同，甚至随电极使用时间的长短而发生微小变动，难以测量，因此，需要用已知ph值的标准缓冲溶液校正K值，然后再测定试液的ph值。

7、方法比较8. 在薄层色谱中，若分离极性组分，应如何选择吸附剂（活性）和洗脱剂。

（重要）从试样各组分极性、吸附剂活性和展开剂的极性三方面综合考虑，使其相互适宜。

分离极性的组分时，应选用活性级别较高（活性较弱）的吸附剂，极性较强的展开剂。

分离非极性或弱极性组分时，选用活性级别较低（活性较强）的吸附剂，极性较弱的展开剂。

9. Van Deemter方程用于HPLC时，B/u项是否可以忽略不计？为什么？（重点）B可以忽略不计。

由于流动相为液体，其粘度比气体大得多，分子在液相中的扩散系数比它在气相中的小4～5个数量级；为了加快分析速度，一般流动相的流速不是很小。

所以组分的纵向扩散程度很小，它对柱效的影响可以忽略不计。

10、理论塔板数n、相对保留值r21、分离度R这三项色谱参数在色谱分离过程中反映的概念有什么不同？在色谱图上体现在哪里？理论塔板数n 在色谱分离过程中反映色谱柱的柱效能；相对保留值r21反映色谱柱对组分的选择性；分离度R是评价色谱柱分离效果的综合指标。

当色谱柱长度一定时，理论塔板数n越大，塔板高度H越小，柱效能越高，色谱峰对称性越好，峰越窄。

当两相邻组分相对保留值r21≠1时，说明色谱柱对两组分选择性不同，两色谱峰顶部已分离。

分离度R越大，两相邻组分色谱峰分离程度越大，通常以R＝1.5作为相邻两组分色谱峰完全分离的标志。

11、在高效液相色谱中，提高柱效的途径有哪些？其中最有效的途径是什么？答：根据Van Deemter方程式为H=A+Cu，在高效液相色谱中，影响柱效的主要因素是：色谱柱的填充技术及传导阻力。

因此，提高柱效的途径主要有：柱效填充料装填的均匀性；改进固定相粒度（减小粒度，减小粒度范围）；选择浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体；选用低粘度的流动相；适当提高柱温。

其中，减小粒度是提高柱效的最有效途径。

12、试比较气相色谱仪和高效液相色谱仪的异同点。

答：气相色谱仪很高效色谱仪都是由五大部分组成，气相色谱仪由气路系统，进样系统，分离系统，检测系统和显示记录系统五个部分，高效液相色谱仪除高压输液系统代替气相色谱仪的气路系统外，其他的都相同。

13、正相色谱与反相色谱的区别8、双波长分光光度计特点：可测多组份试样、混浊试样、而且可作成导数光谱、不需参比液(消除了由于参比池的不同和制备空白溶液等产生的误差)、克服了电源不稳而产生的误差，灵敏度高。

9、双光束优点吸光度的大小不受入射光强度的影响，可以减少或消除因光源强度不稳定而引入的误差，这正是双光束分光光度计的优点所在。

10、选择测定波长，一般选择最大吸收波长作为测定波长，为什么？常，选λmax作为分析波长，灵敏度高（ε值最大），而且在λmax附近吸光度随波长变化小（ε变化小，近似为常数），测定误差也小。

11造成荧光熄灭的原因有多种：答：（1）激发态荧光分子和熄灭剂分子碰撞，将能量转移到熄灭剂而使荧光熄灭；（2）荧光分子与熄灭剂分子作用生成了本身不发光的配合物；（3）荧光物质分子中引入重原子后，易发生系间窜越而转变为三重态；（4）当荧光物质浓度较大时，激发态分子和基态分子发生碰撞，产生荧光自熄灭现象。

溶液浓度越高，自熄灭现象越严重；（5）溶液中溶解的氧分子能引起几乎所有的荧光物质产生不同程度的荧光熄灭。

12、为什么荧光分析仪器的光源与检测器垂直？答：由光源发射的光经激发单色器（第一单色器）得到所需的激发光波长，通过样品池后，一部分光能被荧光物质所吸收，荧光物质被激发后，发射荧光。

可以在溶液的各个方向观察到荧光，但由于激发光一部分可透过溶液，为了消除入射光和散射光的影响，荧光的测量通常在与激发光成直角的方向上进行。

13、作荧光强度测量时，标准荧光物质的作用是什么？如何进行测量的？答：作荧光强度测量时，标准荧光物质的作用是校正仪器，用标准荧光物质把仪器读数定位到某个值，以此为标准，测定空白溶液、标准溶液及样品溶液的（相对）荧光强度，使标准样和样品溶液有一较好的读数。

14、荧光光度法的灵敏度比紫外可见光度法高2～4个数量级的原因。

答：（1）增大光源强度，可提高荧光测定的灵敏度，而不能提高紫外-可见分光光度法的灵敏度；（2）荧光光度法直接测定发射荧光的强度，荧光强度大，信号强；而紫外可见光度法测定吸收光前后的强度变化（吸光度），信号弱。

为什么会产生锐线光源？低压－原子密度低，Lorentz Broadening小；小电流－温度低Doppler Broadening 小，故产生锐线光源！实验室内的质量评价主要包括哪些内容？答：空白试验与检出限；工作曲线的线性关系；分析工作的精密度和准确度；仪器误差和操作误差的检验。

第4章 1.紫外-可见光谱为什么是带状光谱？它的基本特征是什么？答：分子的电子能级差为1~20eV，主要位于紫外可见区。

分子发生电子能级跃迁时所产生的吸收光谱称电子光谱，常称为紫外-可见吸收光谱。

由于分子发生电子能级跃迁的同时总是伴随着振动能级和转动能级的跃迁，故紫外-可见吸收光谱包含了电子能级，振动能级和转动能级的跃迁，因此是带状光谱。

基本特征：紫外可见光谱是以波长λ为横坐标，以吸光度A（或透光率T）为纵坐标绘制的曲线，吸收光谱由吸收峰、谷、肩峰、末端吸收组成。

吸收峰的形状和最大吸收波长λmax，是物质定性分析的基本依据。

2.有机化合物的跃迁类型及各自的特点。

答：σ→σ*:波长100-200nm吸收峰位置远紫外区，物质饱和烃类。

n→σ*：波长150-250nm吸收峰位置真空紫外区，物质含有O、S、N、X等杂原子饱和烃衍生物。

π→π*：波长200nm左右，物质不饱和烃和芳烃，吸收峰位置近紫外区。

n→π*：吸收峰位置近紫外区和可见光区，物质含有n电子和π电子含有双键的化合物。

不同溶剂溶解样品最大吸收波长蓝移是n→π*，红移者是π→π*。

3、引起偏离朗伯-比尔定律的主要因素有哪些？答：主要有光学因素和化学因素。

光学因素有①非单色光引起偏离。

②一起光学元件的性能缺陷所产生的杂微光的影响；③非平行光或入射光被散射引起偏离。

4.分光光度计由哪些部分组成？各部分的功能如何？答：分光光度计通常由光源，单色器，吸收池，检测器和显示或记录仪组成。

光源的作用是在所需的光谱区域内发射连续光谱，且应具有足够的强度和良好的稳定性；单色器的作用是将来自光源的连续光谱按波长顺序色散，并选择出所需的单色光；吸收池用于装溶液；检测器的作用是将光信号转变成电信号；显示或记录仪是将检测器输出的信号经处理转换成透光度和吸光度显示出来。

第5章原子吸收分光光度法1、原子吸收分光光度法（AAS）与紫外-可见分光光度法（UVS）在测定原理和一仪器构造上有什么异同？答：AAS基本原理：光源发射的特征谱线通过被测物质的原子蒸气时，被待测元素的基态原子吸收，在一定条件下被吸收程度与基态原子浓度成正比，从而进行元素定量分析。

UVS：是基于物质分子对紫外-可见光区电磁辐射吸收特征和吸收程度建立起来的分析方法。

①原理：相同：都是基于物质对光的吸收进行分析的方法，定量依据是朗伯比尔定律A=KC. 不同：AAS吸收光的物质状态是基态原子蒸气，吸收的是其原子的共振辐射，发生原子外层电子技能的跃迁，为线状光谱。

UVS吸收光的物质状态是分子，分子吸收紫外可见光区电磁辐射，发生分子外层电子的能级跃迁，为带状光谱②仪器结构：相同：都由光源、吸收池（原子化系统）分光系统（单色器）和检测系统四部分组成。

不同：AAS光源用锐线光源，单色器通常位于原子化器之后，这样可分掉火焰的杂散光并防止光电管疲劳；UVS光源用连续光源，单色器通常位于光源与吸收池之间，把光源发出的连续色谱色散成单色光2.AAS的主要干扰及消除方法答：主要干扰有基体干扰，化学干扰，电离干扰，光谱干扰，背景干扰。

①基体干扰：又称物理干扰，消除方法：a配制与试样溶液有相似物理性质的标准溶液的方法b标准加入法c稀释溶液②化学干扰消除方法：a加入稀释剂b加入保护剂c加入缓冲剂d改变火焰温度或火焰的气氛e化学分离③电离干扰消除方法：a加入过量消电离剂，消电离剂是比待测元素更易电离的元素，它在火焰中首先电离，产生大量的自由离子，从而抑制了待测元素的电离。

④光谱干扰法消除方法：a另选分析线b减小狭缝宽度c预先分离试样中干扰元素⑤背景干扰消除法a氘灯校正法b仪器零点扣除c空白溶液校正d塞曼效应校正法e自吸效应校正法。