3种血液抗凝剂的抗凝效果及对RAPD反应影响的研究
比较不同抗凝剂对血小板检测结果的影响
湖北省天 门市 第一 人民医院
【 摘 要 】 目的 ：对 比不 同抗 凝 剂对血 Ｊ 、 板检 测 结果 的影 响 。方法 ：选取 乙二胺 四 乙酸 二钾 抗凝 全血标 本血 细 胞 分析 仪 计数血 小 板结 果 重度 减低 患 者 ５例 为研 究对 象 对 其 手指 末梢 血 、氟 化钠抗 凝 静脉 血标 本 、肝 素锂 、枸 橼 酸钠 、Ｅ Ｄ Ｔ Ａ Ｋ ２标 本 进行 采集 ，对 血 小板 分别 采 用手 工法 （ 显微镜 计 数 法） 与仪 器法 （ 血 细 胞 分析仪 ）进 行 计数 并且 在 同时期 对涂 片标 本进 行制 备 ，对其 进行 瑞 氏 姬姆 萨染液 染 色之后 ，再 进 行显微 镜检 验 。结 果 ：患 者 氟化钠 肝 素锂 ，枸橼 酸 、 乙二胺 四 乙酸 二钾抗 凝 静脉 血标 本仪 器法 与手 工 法 的血 小板 计数 显著低 于手指 末梢 血标 本 ，手 指末 梢血 标 本仪 器法 － ｂ手 工 法的血 小 板计 数均 正 常 ；氟化 钠 、肝 素锂 、枸 橼 酸 乙二胺 四 乙酸 二钾 抗 凝静 脉血 标 本血 涂 片标 本 染 色镜拴 结 果可 见血 小 板 大片 聚集 ，手指 末 梢血 标 本血 涂 片标 本染 色镜 可 见血 小板 分 布正 常 ，散 在 分布 ，没 有异 常 结 论 ；氰 化钠 抗凝 静 脉血 标 本、 盱素 锂 构 橼 酸 钠 、 Ｅ Ｄ Ｔ Ａ Ｋ ２等抗凝 剂 均可 能促 使血 小板 发生 聚 集 ，引 发血 小板假 性 减 少。在抗 凝 剂依 赖性血 小 板假 性 减少现 象出现 的情 况下 ，应 该 采用不 加抗 凝 剂的 手指 末梢 血标 本对 血 小板 进行 计 数 以此 来将结 果 准确性 提 高。 【 关键 词ｌ 不 同抗凝 削 ；血 ・ ｈ 板 检测 结 果 影 响
三大抗凝机制
三大抗凝机制
作为一种治疗药物，抗凝剂被广泛应用于心脑血管疾病等病症的治疗中。
其主要作用是防止血液凝固，从而避免血栓形成，减少心脑血管事件的发生率。
抗凝剂的作用机制主要包括以下三种。
1. 抑制凝血因子的合成和活化
抗凝剂通过抑制凝血因子的合成和活化，阻止血液中的凝血过程。
其中，华法林等维生素K拮抗剂可以抑制凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的合成，从而减少血液凝固。
利伐沙班等直接凝血酶抑制剂可以直接抑制凝血酶的活性，防止血栓形成。
2. 抑制血小板聚集
血小板聚集是血液凝固的关键步骤之一，抗凝剂可以通过抑制血小板聚集来减少血栓的形成。
阿司匹林等血小板抑制剂可以抑制血小板的活性，从而降低血栓的风险。
3. 促进纤溶
纤溶是一种自然的凝血平衡机制，抗凝剂可以促进纤溶作用，使体内的溶栓酶能够溶解血栓，从而防止血栓的形成。
肝素等间接抗凝剂可以通过促进纤溶作用来预防血栓的形成。
综上所述，抗凝剂的作用机制主要包括抑制凝血因子的合成和活化、抑制血小板聚集、促进纤溶等几种方式。
不同的抗凝剂可以选择不同的机制来达到预防血栓的效果。
但是，抗凝剂的使用需要根据具体疾病和药物特性进行合理选择和使用。
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抗凝剂对血小板及其参数检测结果的影响分析
表１ 三种抗凝剂对血小板及其参数结果影响的比较 （ｘ ± Ｓ） 项目 例 ＥＤＴＡ－Ｋ 枸橼酸钠 肝素锂
２
ＰＬＴ（× １０９／Ｌ） ７１ ２１２．９６ ± ３７．１４ １３６．８９ ± ３７．９２１） ９４．１６ ± ３２．０７１） ＭＰＶ０１） ７１ １０．２０ ± １．５６ ９．２６ ± １．１８１） ９．０２ ±１． ８０１） ＰＣＴ（ｍ１／Ｌ） ７１ １．９３ ± ０．３１ １．２２ 士 ０． ２７１） ０．８３ 士０． ２６１） ＰＤＷ（１０（ＧＳＤ）） ７１ １９．０５ ± ０．９５ １９．９８ ± １． １４１） ２１．１１ ±１． ７４１） 注：１）与 ＥＤＴＡ－Ｋ 抗凝血比较，Ｐ＜０．０１差异有极显著性意义。
抗凝类药物研究进展
抗凝类药物研究进展作者：黄爱容来源：《健康周刊》2018年第08期【摘要】随着人口老龄化程度和生活水平的提高，高血脂症、动脉粥样硬化及由之演变而来的心血管疾病的发病率和死亡率也呈上升趋势。
抗凝类药物主要是针对凝血级联反应中的凝血因子而发挥抗凝作用，阻止血液凝固的药物，主要用于血栓栓塞性疾病的预防与治疗。
目前，临床上抗凝血类药物较多，包括肝素、华法林、比伐芦定、水蛭素和利伐沙班等。
本文就臨床上常用的抗凝类药物进行总结分析，为临床用药提供参考。
【关键词】抗凝；血液凝固；FXa；凝血酶抗凝类药物主要是针对凝血级联反应中的凝血因子而发挥抗凝作用，阻止血液凝固的药物，主要用于血栓栓塞性疾病的预防与治疗。
血栓性疾病是一类严重危害人类生命健康的疾病，其发病率和致死率位于各类疾病之首。
随着人口老龄化程度和生活水平的提高，高血脂症、动脉粥样硬化及由之演变而来的心血管疾病的发病率和死亡率也呈上升趋势。
血栓性疾病的形成是由于血液流动过程中在血管或心脏内膜表面形成的血栓引发的血管腔狭窄、闭塞，从而造成体内主要脏器缺血和梗塞，而引发各种心血管疾病。
1 机体凝血过程血液凝固是血液由流动状态变为凝胶状态的过程。
凝血过程中血液内一系列凝血因子相继被酶解激活的过程，通常被称为“瀑布学说”[1]。
凝血过程包括三个部分：凝血酶原激活物形成、凝血酶形成和纤维蛋白形成。
根据凝血酶原激活物形成启动途径和参与因子的不同，可将凝血过程分为内源性凝血和外源性凝血两条途径。
这两条凝血途径在FⅩa处汇合，形成凝血共同通路[2]。
接下来在凝血酶原酶复合物的作用下，凝血酶原被催化生成凝血酶，此为凝血过程的第二步。
凝血酶进而使可溶性的纤维蛋白原转化为不溶性的纤维蛋白，纤维蛋白单体相互交织成网，将红细胞、血小板、血浆蛋白及白细胞等网络在内，最终形成血凝块。
2 临床常见的抗凝类药物传统的抗凝类药物主要有：普通肝素、低分子量肝素和维生素K阻滞剂等。
肝素于1916年发现，其作为体外抗凝剂得以广泛应用。
常用的化学抗凝剂及其抗凝原理
常用的化学抗凝剂及其抗凝原理化学抗凝剂，顾名思义，就是能够阻止血液凝固的药物。
你可能会问，为什么要阻止血液凝固呢？这其实是因为有些情况下，血液过于凝固会导致血栓，结果可不太妙。
想象一下，你正在开车，突然汽车刹车失灵了，血栓就像是那个失灵的刹车，可能让你一不小心就撞上大麻烦。
所以，化学抗凝剂就像是给血液加了一个“刹车系统”，避免它在不该“停”的时候停下来。
常用的化学抗凝剂可不少，其中最有名的要数华法林、肝素和低分子肝素了。
华法林，听这个名字你可能觉得很专业，但其实它的原理也挺简单的。
它通过影响血液中的维生素K，来减少凝血因子的合成。
简单点说，华法林就像是个“修理工”，负责拆掉那些过多的凝血因子，避免血液凝固。
只是呢，这玩意儿得定期去检查，血液的凝固程度要保持在一个适当的范围，否则小心“过度刹车”。
然后说到肝素，这可是一个“老牌”抗凝剂了。
你想啊，肝素就像是个“拦路虎”，它通过增强抗凝蛋白的作用，抑制血小板的聚集，让血液不那么容易凝固。
肝素的好处是见效快，尤其在急性情况中，可以快速让血液变得不那么粘稠。
但是呢，肝素有个小问题，它使用时得小心，容易引起出血，所以用它得量力而行。
说到低分子肝素，那简直是肝素的“升级版”。
它比肝素更高效，副作用也相对小一些。
低分子肝素的作用方式类似肝素，但它更加精准，效果也更持久。
简直就像是买了一辆性能更好的跑车，跑得快，又安全。
不过，低分子肝素并不是“百无禁忌”，用的时候还得小心。
像肝素一样，它也可能导致一些出血问题，所以大家在使用时一定要听从医生的指示。
除了这几种，还有一些其他的抗凝剂在特定情况下也会被使用。
比如，直接口服抗凝药（DOACs），它们近年来在医学界逐渐走红。
为什么这么受欢迎呢？因为它们不需要像华法林那样常常去检测血液，简直省心又方便。
这些药物通过直接抑制凝血因子，使得血液不容易凝结。
就好比是给血液装上了一个“自动刹车系统”，开起来轻松又流畅。
不过啊，不管是哪种抗凝剂，都得根据病人的情况来选择。
临床常用的抗凝剂的原理和应用
临床常用的抗凝剂的原理和应用1. 引言抗凝剂是一类在临床上常用的药物，用于预防和治疗血液凝固相关的疾病，如深静脉血栓栓塞症、心肌梗死和中风等。
本文将介绍常用的抗凝剂的原理和应用。
2. 抗凝剂的分类抗凝剂可以根据其作用机制分为以下几类：•直接抗凝剂•非诺酮类抗凝剂•抗血小板聚集剂2.1 直接抗凝剂直接抗凝剂是指可以直接抑制凝血酶活性的药物，常见的直接抗凝剂包括：•肝素•低分子肝素•甘露醇2.2 非诺酮类抗凝剂非诺酮类抗凝剂通过抑制凝血因子的合成或活性来达到抗凝的效果，主要包括：•华法林•氯酮酸•阿哌沙班2.3 抗血小板聚集剂抗血小板聚集剂主要通过抑制血小板中的血小板激活因子来减少血小板聚集，从而达到抗凝的效果。
常用的抗血小板聚集剂包括：•阿司匹林•氯吡格雷•替格瑞洛3. 抗凝剂的原理不同类型的抗凝剂通过不同的机制起到抗凝作用。
3.1 直接抗凝剂的原理直接抗凝剂主要通过抑制凝血酶的活性来减少血液凝固的发生。
它们可以与凝血酶结合，并阻断凝血酶活性中心的形成，从而阻止凝血因子的转化和血小板的聚集。
3.2 非诺酮类抗凝剂的原理非诺酮类抗凝剂主要通过抑制凝血因子的合成或活性来达到抗凝的效果。
它们可以抑制凝血因子的合成，或者干扰凝血因子的活性酶的形成，从而阻碍凝血过程的进行。
3.3 抗血小板聚集剂的原理抗血小板聚集剂主要通过抑制血小板中的血小板激活因子来减少血小板聚集，从而减少血栓的形成。
它们可以抑制血小板的活化和聚集，降低血小板释放的血小板聚集因子的含量，从而减轻血小板的聚集。
4. 抗凝剂的应用抗凝剂广泛应用于临床上预防和治疗与血液凝固相关的疾病。
下面将介绍几种常见疾病的抗凝剂应用。
4.1 深静脉血栓栓塞症深静脉血栓栓塞症是一种常见的血管疾病。
抗凝剂可以通过减少血液的凝结能力来预防和治疗深静脉血栓栓塞症。
常用的抗凝剂包括肝素和华法林。
4.2 心肌梗死心肌梗死是一种心血管疾病，抗凝剂可以通过减少血液的凝结能力来保护心肌，预防和治疗心肌梗死。
抗凝血药物研究进展
抗凝血药物研究进展随着现代医学的发展，对于血液凝固与抗凝机制的理解逐渐深入，抗凝药物的研究也取得了长足的进展。
抗凝药物广泛应用于临床，用于预防和治疗与血液凝固相关的疾病，如心脑血管疾病、血栓栓塞等。
本文将就抗凝药物的研究进展展开讨论，以期对读者有所启发。
一、抗凝药物的分类抗凝药物根据其作用方式与机制的不同，可以分为多个分类。
其中较为常见的包括：1. 肝素类药物：肝素是最早使用的抗凝药物之一，其通过增加抗凝血酶活性，抑制血小板聚集等方式发挥抗凝作用。
肝素药物包括普通肝素、低分子肝素等。
2. 阿司匹林：阿司匹林是一种抗血小板聚集药物，通过抑制血小板中的血小板聚集因子，减少血小板凝聚，从而起到抗凝作用。
3. 抗凝酶类药物：如华法林、达比加群、雷伪垯等，这些药物作用于凝血因子，抑制凝血因子的合成或活性，减少血栓形成的风险。
二、抗凝药物的研究进展近年来，随着科技的进步与研究技术的提高，抗凝药物的研究取得了一系列重要的进展。
1. 利用基因技术研发新型抗凝药物：基因技术的出现为新型抗凝药物的研发提供了新的思路与途径。
例如，通过基因工程技术研发的重组组织型纤维蛋白溶酶原激活剂（rtPA），被成功地应用于急性心肌梗死的治疗中，显著提高了溶栓治疗的效果。
2. 抗凝药物的个体化用药：个体化用药是近年来的研究热点之一。
由于每个患者的生理特点和病情不同，对抗凝药物的反应也不尽相同。
通过个体化用药的研究，可以更好地了解患者对药物的代谢情况，调整药物剂量，从而提高疗效，减少不良反应。
3. 抗凝药物的新途径与新靶点的发现：传统的抗凝药物主要作用于凝血系统中已知的靶点。
然而，最近的研究表明，除了已知的凝血因子外，还存在着一些未知的靶点可以调节抗凝机制。
针对这些新的靶点与途径，研究人员正在寻找新型抗凝药物的开发方向，为抗凝药物研究带来了新的突破。
三、抗凝药物的应用与安全性抗凝药物的应用范围广泛，临床上常用于预防和治疗心脑血管疾病以及深静脉血栓等疾病。
不同血液保存抗凝剂对采集红细胞影响的实验研究
不同血液保存抗凝剂对采集红细胞影响的实验研究目的设计添加谷氨酰胺的血液保存抗凝剂及探讨对红细胞的影响，总结其临床意义。
方法选取标本分实验组A和对照组B，每组均为相对应的1～10管，A组抗凝剂为标准枸橼酸钠溶液和丙氨酰谷氨酰胺注射液稀释液，B组抗凝剂为标准枸橼酸钠液，比较两组标本在采血后第3、6、9、12d的血K+检测结果，并予以统计分析。
结果两组标本第3、6、9、12d血K+均高于正常值，A与B组内比较均有显著性差异（P＜0.05）；A与B组间比较，第3d检测值有显著性差异（P＜0.05）。
结论标准枸橼酸钠溶液加入丙氨酰谷氨酰胺注射液制成新型血液保存抗凝剂，对红细胞抗凝及保护作用优于标准枸橼酸钠溶液。
标签：血液；抗凝剂；丙氨酰谷氨酰胺；谷氨酰胺；枸橼酸钠枸橼酸钠为常用的血液抗凝剂，枸橼酸钠、枸橼酸、无水葡萄糖可制成常用的ACD配方血液保存液。
血液抗凝剂是影响采集存储红细胞的主要因素[1-2]，为提高血液抗凝及红细胞保存效果，笔者选择添加谷氨酰胺（glutamine，Gln）方式制成新型血液保存抗凝剂，并通过采集存储血液中血K+指标研究不同抗凝剂对采集红细胞影响，现报道如下。
1 资料与方法1.1新型抗凝剂制备由于Gln较难溶于水，且丙氨酰谷氨酰胺在血液中可迅速分解为丙氨酸和Gln，故添加Gln方式选取丙氨酰谷氨酰胺注射液（四川科伦，50ml：10g），加入0.9%氯化钠注射液50ml稀释。
按丙氨酰谷氨酰胺使用时其在与载体溶液混合液中最大浓度不能超过 3.5%的要求，丙氨酰谷氨酰胺注射液稀释液按1：2比例加入标准枸橼酸钠溶液制成新型血液保存抗凝剂。
新型抗凝剂按其中标准枸橼酸钠溶液与全血1：9体积比进行采血，4℃～6℃条件下保存。
1.2新型抗凝剂评价1.2.1方法选择添加与未添加Gln的血液保存抗凝剂采集血液并进行对照比较。
选20只试管均分为A、B组。
A组为实验组，1～10管中分别加入3.8%枸橼酸钠溶液0.2ml和丙氨酰谷氨酰胺注射液稀释液0.1ml；B组为对照组，1～10管分别加入3.8%枸橼酸钠溶液0.2ml。
不同抗凝剂对ADP诱导血小板活化影响的比较
不同抗凝剂对ADP诱导血小板活化影响的比较税凤春;华晓东;徐琳;芮菁【摘要】目的:探讨EDTAK 2、肝素钠、枸橼酸钠三种不同抗凝剂对流式细胞术检测二磷酸腺苷(ADP)介导的血小板膜糖蛋白CD62p表达的影响.方法:使用不同抗凝剂,采用流式细胞术检测ADP诱导大鼠外周全血中CD62p表达率.结果:枸橼酸钠对ADP诱导CD62p表达影响较小,EDTAK 2明显抑制ADP介导的CD62p的表达,而肝素钠能明显促进CD62p的表达,同时使全血中CD62p自身表达偏高.结论:枸橼酸钠为流式细胞仪检测血小板活化的最佳抗凝剂,浓度3.2％(含2个结晶水的枸橼酸钠)和3.8％(含5个结晶水的枸橼酸钠)是其抗凝最佳方案.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2019(031)001【总页数】3页(P1-3)【关键词】血小板活化;血小板膜糖蛋白类;抗凝剂【作者】税凤春;华晓东;徐琳;芮菁【作者单位】天津市药品检验研究院,天津 300070;天津市药品检验研究院,天津300070;天津市药品检验研究院,天津 300070;天津市药品检验研究院,天津300070【正文语种】中文【中图分类】R965近年来，在血小板功能评价中，采用流式细胞术检测血小板活化生物标志物-膜糖蛋白的方法成为主流，与血小板聚集率检测等传统方法相比，该方法具有操作易规范化、过程简单、无需制备富血小板血浆、快速准确、更易量化等优点。
但由于血小板在体外非常活跃，影响因素较多，如采血环节、抗凝剂使用不当等易造成自发活化率升高，然而目前国内有关血小板活化生物标志物检测影响因素研究报道少见。
本文研究了不同抗凝剂对其影响作用，以期确定一个较好的标本抗凝方法。
1 材料与仪器1.1 受试物五水枸橼酸钠(Na3C6H5O7·5H2O)，天津市赢达稀贵化学试剂厂，临用前用纯化水配制成3.8%浓度的溶液备用。
EDTAK2采血管，批号 20160502，规格 0.5 ml，山东省成武县华博医疗器械有限公司；肝素钠采血管，批号20170112，规格 1 ml，苏州灵岩医疗器械有限公司；3.2%枸橼酸钠采血管(1∶9)，批号 20170324，规格 1 ml，苏州灵岩医疗器械有限公司。
抗凝剂与血液凝固相关基因的研究进展
抗凝剂与血液凝固相关基因的研究进展血液凝固是人体中的一种重要生理反应，它可以让我们快速止血，避免出血过多，但如果出现在错误的时间或者形式，就会引起严重的健康问题。
例如，在动脉或静脉中形成血栓，会导致心脑血管疾病甚至导致猝死。
因此，抗凝剂的研究对人类健康来说非常重要。
本文旨在介绍抗凝剂与血液凝固相关基因的研究进展。
一、抗凝剂的作用抗凝剂是一种药物，它通过调节凝血机制，阻止血液在血管中凝结，从而预防或治疗血栓性疾病。
常见的抗凝剂包括肝素、低分子肝素、华法林等。
它们的作用机制不同，但都与凝血机制有关。
肝素是一种天然季铵盐，它能与血液中的抗凝物质结合，从而达到抑制凝血作用的效果。
低分子肝素是肝素的一种衍生物，相对于肝素来说，它更容易使用，更方便。
华法林是一种维生素K拮抗剂，它能够阻断凝血因子II、VII、IX和X的合成，并减少血栓的形成。
二、血液凝固相关基因血液凝固是由凝血因子和抗凝物质共同发挥作用的生理过程。
凝血因子主要包括凝血因子I至XIII，它们能够在遇到凝血刺激时，依次激活并形成凝血酶，从而促进血栓的形成。
抗凝物质主要包括抗凝酶、蛋白C和蛋白S等，它们主要是通过抑制凝血因子，来保持血液的流动性。
近年来，越来越多的研究发现，基因与血液凝固的关系非常密切。
例如，人体中的一种重要基因F2能够编码凝血因子II，F5基因则编码凝血因子V，它们的突变会导致血栓性疾病的发生。
此外，F7、F8、F13等基因也与血液凝固有直接关系。
研究表明，不同的人在这些基因上的基因型不同，可能会影响血液凝固的过程。
三、抗凝剂与基因的相互作用目前，不同基因型的人在使用抗凝剂时，反应程度也不尽相同。
例如，CYP2C9和VKORC1基因的突变会影响华法林的代谢和吸收，从而导致药物的疗效不同。
此外，基因针对华法林的敏感性也不同，有些人需要更高的华法林剂量才能达到维持凝血水平的效果，而有些人只需要较小的剂量即可。
因此，在使用抗凝剂时，需要考虑个体基因特异性，个体化给药方案，以提高疗效，减少副作用的发生。
抗凝剂种类对部分凝血因子测定的影响
抗凝剂种类对部分凝血因子测定的影响第26卷第2期河北医科大学V o1.26No.22005年3月JOURNALOFHEBEIMEDICALUNIVERSITYMar.2005?137?技术方法?抗凝剂种类对部分凝血因子测定的影响刘永春,李彦会,张晋霞(河北医科大学第二医院检验科,河北石家庄050000)【主题词】抗凝药;血液凝固因子;诊断试验,常规【中图分类号】R446.112【文献标识码】B近年来血液凝固仪已被广泛应用,在提高了工作效率的同时,更应该注意到质量控制.血浆凝血酶原时间(prothrombintime,PT),活化部分凝血活酶时间(activatedpartialthromboplastintime,APTT)的检测是止血与凝血系统疾病的诊断以及抗凝治疗检测的重要指标.因此PT和APTT结果的准确性及实验的影响因素成为人们关注的焦点,通过实验我们发现抗凝剂的选择对试验结果有着直接的影响,现报告如下.1材料与方法1.1标本来源:测定组标本20例均为我院口服抗凝剂(华法令)治疗监测患者,正常对照组20例为我院体检健康人员.1.2仪器与试剂:ACL-200凝血分析仪及试剂均由Beckman公司提供.1.3方法1.3.1抗凝剂种类及浓度比较:①20例正常人血分别用0.109mol/L,0.129mol/L枸橼酸钠和0.54mol/L乙二胺四乙酸二钾盐(ethylenediamine tetraaceticacid,dipotassiumsalt,EDTA_K2)抗凝(1:9),用3000r/min离心10min分离血浆.②20例抗凝剂治疗监测患者分别用0.109molTL和0.129mol/L枸橼酸钠抗凝(1:9),用3000r/min离心10min分离血浆.1.3.2统计学分析:PT及APTT时间在读取了"S"及国际标准化比值(Internationdnormalizedratio,INR)后用统计学处理.数据用(±s)表示,显着性检验用t检验及方差分析q检验,以P<0.05为有显着性差异,P<0.01为有非常显着性差异.[收稿日期]2004—03—12I[修回日期]2004—12-19[作者简介]刘永春(1956一),女,河北隆尧人,河北医科大学第二医院副主任检验师,从事血液病的检验研究.【文章编号11007—3205(2005)02—0137—022结果正常对照组的同份标本,用0.109mol/L和0.129mol/L枸橼酸钠抗凝与0.54mol/LEDTA—K抗凝血浆测得的PT,无论用"S"表示,还是用"INR"表示(分别为0.98±0.05,1.00±0.07和1.30±0.3),均有显着性差异(P<0.05),APTT有非常显着性差异(P<0.01);而0.109mol/L和0.129mol/L(0.98±0.05,1.00±0.07)的枸橼酸钠抗凝测得的PT(INR),APTT均无显着性差异(P>0.05),见表1.表1抗凝剂种类对,AP1的影响(一20,±s,cB/tool?L一)患者同份标本用0.109mol/L和0.129mol/L枸橼酸钠抗凝血测得的PT用"S",INR(2.24±0.20,3.1±0.2)表示均有明显差异(P<0.01),APTT结果延长,见表2.表2不同浓度枸橼酸钠对抗凝监测者,AP1的影响(一20,±s,cB/tool?L一)3讨论由于枸橼酸钠对FⅧ,FV有一定的保护作用,国际血液学标准化委员会推荐使用3.2(0.109mol/L)枸橼酸钠作为抗凝血因子检查的抗凝剂L1].但有的实验室仍使用0.129mol/L枸橼酸钠液[2].我们检测结果显示,在一般情况下,外源性凝血因子及内源性凝血因子在0.109mol/L和0.129mo//L枸橼酸钠中均较稳定,而EDTA-能抑制或干扰138?刘永春等抗凝剂种类对部分凝血因子测定的影响纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体聚合,并对FV保护性差,而影响实验结果.故此,我们认为它不宜作为PT,APTT检测的抗凝剂.从表1及表2测得结果中显示:0.109mol/L与0.129mol/L枸橼酸钠抗凝剂对健康人PT,APTT无明显影响,但后者使口服华法令者结果延长.至于相对高浓度的枸橼酸钠使患者PT,APTT延长的机理,我们将进一步进行探讨.【参考文献】Eli丛玉隆.今日临床检验学[M].北京:科学技术出版社,1999. 207-208.[2]王学锋,王鸿利.血栓与止血的检测及应用[M].上海:世界图书出版公司,2002.167—168.病例报告?带状疱疹误诊为冠心病不稳定型心绞痛2例康红,吴文成(1.河北大学校医院内科,河北保定071002;2.河北医科大学第二医院内分泌科,河北石家庄050000)【主题词】疱疹,带状;心绞痛,不稳定型;误诊【中图分类号】R752.12【文献标识码】C带状疱疹是水痘,带状疱疹病毒引起的一种病毒性皮肤病,以沿周围神经分布的群集疱疹和神经痛为特征.本病常侵犯肋间神经,有时极易被误诊为不稳定型心绞痛.我院近1年出现2例误诊患者,现报告如下.1临床资料例1,女性,56岁.因发作性心前区疼痛5d来我院就诊.疼痛呈灼烧样,每次持续10min左右,与劳累,情绪无明显关系,且向左肩背部放散.既往无冠心病史及高血压病史.心电图示胸前导联T波低平,倒置.门诊诊为冠心病,不稳定型心绞痛.给予扩冠,抗血小板聚集等治疗,症状无明显改善.4d后,在疼痛对应部位出现群集性的丘疹,水疱,确诊为带状疱疹.例2,女性,66岁.因心前区疼痛1d来我院就诊.1d来无明显诱因出现心前区疼痛,呈持续性隐痛,阵发性加重,与劳累,情绪无明显关系,疼痛无放散,无胸闷,大汗,既往有冠心病,高血压病史.心电图示胸前导联ST段压低,T波低平或倒置.诊为冠心病,不稳定型心绞痛.给予扩冠,抗血小板聚集治疗,症状无改善,人院后3d,在疼痛部位出现聚集性的丘疹,水疱,确诊为带状疱疹.2讨论2.1误诊原因:①带状疱疹常侵犯肋间神经,表现为前胸及背部疼痛,这与心绞痛的好发部位相似.②带状疱疹最重要的临床特征是神经痛,且常发生于出疹之前,常呈阵发性加剧甚至难以忍受.不稳定型心绞痛亦表现为近期内胸痛发作频繁,程度加重以及持续时间延长等.临床若不仔细鉴[收稿日期]2004—09—16.[修回日期]2005—01—30[作者简介]康红(1967一),女,河北石家庄人,河北大学校医院主治医师,医学学士,从事内科疾病诊治研究.【文章编号】1007-3205(2005)02—0138—01别,往往极易混淆.③带状疱疹易发生于老年人及免疫功能低下者,而此类人群常合并高血压,糖尿病等冠心病的高危因素,或既往有冠心病史,因而易造成误诊.④部分患者心电图存在非特异性ST—T改变,l临床医生过分依赖心电图, 造成误诊.2.2防止误诊的措施:①详细询问病史,仔细查体.带状疱疹与不稳定型心绞痛两者胸痛特点往往不同,据此可初步作出诊断.带状疱疹的神经痛常沿肋间神经分布,表现为灼烧样或刀割样痛,阵发性加剧,夜间为甚,常无明显诱发因素,可伴有局部皮肤灼热,感觉过敏.此外常有轻微的前驱症状,如发热,乏力,全身不适,食欲不振和局部淋巴结肿痛等0],疼痛时含服硝酸甘油无效.而不稳定型心绞痛则常表现为初发劳累性心绞痛,或在原来稳定劳累性心绞痛的基础上出现活动耐力下降,表现为心前区或肋骨中上段的闷痛, 紧缩感或压榨样痛,可放射至左肩,后背及左臂内侧达无名指或至颈,咽或下颌部,疼痛时可伴有胸闷,心悸,气短,出汗,恶心,呕吐,血压升高,心率增快等,含服硝酸甘油可暂时或部分缓解疼痛.②不能单纯根据静息时心电图异常来判定患者为心肌缺血c3],要重视胸痛发作时的心电图改变.总之,对突发剧烈前胸,左肩背部疼痛,临床疑诊不稳定型心绞痛,而其症状,体征不典型尤其是胸痛时心电图无改变者,要考虑到带状疱疹的可能,并请相关专业医生会诊,以免误诊.【参考文献】[1]李学军.300例带状疱疹l临床分析EJ3.中国皮肤病学杂志, 2000,14(3):171-172.Ez]陈灏蛛.实用内科学[M].第10版.北京:人民卫生出版社, 1997.308.[3]胡大一,马长生.心脏病学实践2002一规范化治疗[M].北京: 人民卫生出版社,2002.183.。
抗凝血的实验报告
一、实验目的1. 了解抗凝血药物的基本原理和作用机制。
2. 观察不同抗凝血药物对小鼠体内凝血时间的影响。
3. 探讨抗凝血药物在实际应用中的效果。
二、实验原理抗凝血作用是指通过药物或其他方法，抑制血液凝固过程，防止血栓形成，从而达到预防和治疗血栓性疾病的目的。
实验中，我们选取了两种抗凝血药物：肝素钠和肝素钙，通过比较它们对小鼠体内凝血时间的影响，来评估其抗凝血效果。
三、实验材料1. 动物：小鼠，体重18～22g。
2. 器材：鼠笼，小动物电子秤，注射器，小鼠灌胃器，秒表，毛细玻管，针头，棉球。
3. 药品：2ml：12500u肝素钠溶液，生理盐水，肝素钙溶液。
四、实验方法1. 实验分组：将小鼠随机分为三组，每组5只，分别为生理盐水组、肝素钠组和肝素钙组。
2. 药物处理：生理盐水组注射等体积的生理盐水；肝素钠组注射2ml：12500u肝素钠溶液，肝素钙组注射等体积的肝素钙溶液。
3. 实验操作：待小鼠注射药物20分钟后，采用毛细玻管法测定小鼠的凝血时间。
- 将毛细玻管刺入小鼠眼内眦部，使血液注满玻管后迅速拔出，并启动秒表。
- 以每隔20s折断玻管1cm，并轻轻向左右拉开，观察到有血丝出现时，即为小鼠的毛细玻管法凝血时间。
4. 数据记录：记录三组小鼠的凝血时间，并计算平均值。
五、实验结果1. 生理盐水组小鼠的凝血时间为（平均值±标准差）：5.6±0.8min。
2. 肝素钠组小鼠的凝血时间为（平均值±标准差）：10.2±1.5min。
3. 肝素钙组小鼠的凝血时间为（平均值±标准差）：9.8±1.2min。
六、实验分析通过实验结果可以看出，肝素钠和肝素钙均具有抗凝血作用，能够延长小鼠的凝血时间。
其中，肝素钠组的凝血时间延长幅度较大，说明其抗凝血效果更明显。
七、实验结论1. 肝素钠和肝素钙均具有抗凝血作用，能够延长小鼠的凝血时间。
2. 肝素钠的抗凝血效果优于肝素钙。
不同抗凝剂用于血液净化治疗的效果及对患者凝血功能影响研究
连续性血液净化(CBP )治疗是临床常用的肾替代疗法,在急性胰腺炎、重度肺部感染、大手术后继发感染等引起的脓毒血症患者中具有满意的治疗效果。
抗凝技术是保证血液净化治疗顺利实施、减少患者并发症的重要技术,目前使用最广泛的抗凝剂为肝素[1]。
但在应用过程中发现,肝素具有系统性抗凝作用,可能引起血小板减少、增加出血风险,而血液净化治疗期间凝血功能障碍的发生不利于病情转归,应引起临床的高度重视[2]。
近年来,国外有研究发现枸橼酸抗凝具有与肝基金项目:秦皇岛市科技局课题(201602A227)作者单位:066001秦皇岛军工医院重症医学科(曹燕秋,王晓蕾,姚明慧);秦皇岛市第一医院外科重症监护室(刘秀娟)通信作者:曹燕秋,E-mail :996852055@[摘要]目的探讨不同抗凝剂用于血液净化治疗效果及对患者凝血功能影响。
方法选取2016年7月~2017年6月在秦皇岛军工医院重症监护室(ICU )及秦皇岛市第一医院外科重症监护室(ICU )行连续性血液净化(CBP )患者80例,采用随机数表法将患者分为普通肝素抗凝组(n =38)和枸橼酸局部抗凝组(n =42),观察两组治疗前后凝血功能、生化指标等。
结果枸橼酸局部抗凝组治疗后尿素氮(BUN )、肌酐(Scr )、丙氨酸氨基转移酶(ALT )和天门冬氨酸氨基转移酶(AST )分别为(10.11±3.02)mmol/L 、(155.40±42.39)mmol/L 、(67.39±20.04)U/L 和(65.51±23.21)U/L ,明显低于普通肝素抗凝组,差异有统计学意义(P <0.05);枸橼酸局部抗凝组凝血酶原时间(PT )、活化部分凝血活酶时间(APTT )和凝血酶时间(TT )分别为(13.20±3.20)s 、(40.12±10.21)s 和(20.11±8.38)s ,明显低于普通肝素抗凝组,差异有统计学意义(P <0.05)。
血液净化患者使用不同抗凝剂的临床疗效观察
血液净化患者使用不同抗凝剂的临床疗效观察摘要】目的探讨三种抗凝剂在血液净化治疗中抗凝的疗效。
方法将45例慢性肾衰患者分为A组、B组、C组，每组各15名，A组采用阿加曲班抗凝，B组采用普通肝素抗凝，C组采用低分子肝素钙抗凝，每3月末监测患者的活化部分凝血活酶时间(APTT）PLT值等数值；下机后观察患者有无出血及血液透析器凝血情况。
结果治疗后阿加曲班组APTT值与低分子肝素组比较无差异,但与肝素组相比明显缩短，差异具有统计学意义（P<0.01）；肝素组治疗结束后患者血脂轻度升高，但与治疗前相比差异无统计学意义（P>0.01）；治疗结束后阿加曲班组出血发生率0％，低分子肝素组出血发生率为6%，普通肝素组出血发生率为33％；阿加曲班组与肝素类组使用透析器个数治疗后基本相同。
结论使用阿加曲班的抗凝效果与肝素类基本相同,但出血等并发症明显较少。
【关键词】血液净化不同抗凝剂临床疗效血液净化是慢性肾衰尿毒症患者的一种重要治疗方法，在治疗过程中因长期使用抗凝药物后部分患者血凝功能异常，且肾衰竭后患者本身都有不同程度的贫血状况，使患者都存在高度出血倾向。
当这些患者面临围手术期、月经期时再选择肝素类药物后，治疗后极易出现不同程度的出血，影响病情。
抗凝剂主要通过抑制凝血酶发挥作用，按机理不同分为间接凝血酶抑制剂和直接凝血酶抑制剂[1]，间接凝血酶抑制剂代表药物是肝素和低分子肝素等，其优点是使用简便、经济,但长期使用后会出现剂量不易掌握、治疗后易出血、高脂血症、骨质脱钙等不良反应，而阿加曲班是一种人工合成的直接凝血酶抑制剂，在血液透析治疗过程中较好地避免了上述缺点。
我科在临床工作中对阿加曲班与肝素类药物在血液透析治疗中的抗凝效果和出血事件以及药物不良反应进行了半年的观察，现将结果报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取我院2011年3月-2011年8月共45例进行维持性血液透析治疗的患者，其中男性23例，女性22例，年龄25-67岁，入组前将血凝功能异常、血小板低于正常值、肝功能及血脂异常患者排除组外。
3种血液抗凝剂的抗凝效果及对RAPD反应影响的研究
3种血液抗凝剂的抗凝效果及对RAPD反应影响的研究
鲁云风;文祯中;原国辉;陶爱丽
【期刊名称】《南阳师范学院学报》
【年(卷),期】2004(003)012
【摘要】采用3种不同的血液抗凝剂(ACD、EDTA、肝素)检测南阳黄牛血液的抗凝效果及对RAPD反应的影响,从中挑选一种总体效果最好的抗凝剂.结果表明:选择合适的抗凝剂对实验能否取得预期结果有重要的影响.
【总页数】3页(P55-57)
【作者】鲁云风;文祯中;原国辉;陶爱丽
【作者单位】河南农业大学,植物保护学院,河南,郑州,450002;南阳师范学院,生物系,河南,南阳,473061;南阳师范学院,生物系,河南,南阳,473061;河南农业大学,植物保护学院,河南,郑州,450002;南阳师范学院,生物系,河南,南阳,473061;河南师范大学,生命科学系,河南,新乡,453002
【正文语种】中文
【中图分类】Q81
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不同抗凝剂对梅毒螺旋体抗体ELISA检测结果的影响张明霞;张根仓;赵黎娟;梁芳;杨瑞;段希玲;王建华【摘要】目的探讨CPD保养液与肝素抗凝剂对无偿献血者血标本梅毒螺旋体抗体(TP)ELISA检测结果的影响.方法收集2009年8月献血者标本1 906例;将标本分别收集在3种试管中:促凝剂管(对照组)、肝素抗凝剂管(实验组1)、CPD保养液试管(实验组2);用ELISA试剂盒检测3组样本,将所得S/CO值进行单因素方差分析.结果阴性标本共1 897例,阳性标本9例.对照组:阴性标本S/CO均值0.041,阳性标本S/CO均值11.76.实验组1:阴性标本S/CO均值0.039,阳性标本S/CO均值11.73;实验组2:阴性标本S/CO均值0.043,阳性标本S/CO均值11.59.ELISA 法检测TP时,CPD保养液、肝素抗凝剂对阴性标本的检测结果的影响无统计学意义(F=0.436,P＞0.05);阳性标本3组之间的差异有统计学意义(F=13.91,P＜0.05).含CPD保养液的样本比肝素抗凝剂和血清样本结果S/CO值低(P＜0.05),肝素抗凝剂和血清样本结果S/CO值的差异无统计学意义(P＞0.05).结论应该优先选择肝素作为抗凝剂试管.采供血机构对初次反应性样本剪取血袋上血辫进行复检时,应充分考虑到CPD保养液的因素.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2011(013)004【总页数】2页(P340-341)【关键词】CPD;血液保养液;ELISA;梅毒螺旋体抗体【作者】张明霞;张根仓;赵黎娟;梁芳;杨瑞;段希玲;王建华【作者单位】041000 山西省临汾市中心血站;041000 山西省临汾市中心血站;041000 山西省临汾市中心血站;041000 山西省临汾市中心血站;041000 山西省临汾市中心血站;041000 山西省临汾市中心血站;041000 山西省临汾市中心血站【正文语种】中文【中图分类】R446.61;R377+.1国内采供血机构对于 TP ELISA初检具有反应性的标本,须经复检确认后才能进行最终结果的判定。
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工业生产中猪血溶血因素的研究赵永斌;于长春;李新华【摘要】采用紫外分光光度计测定血浆液中血红蛋白的吸光值，分析了不同温度、不同添加抗凝剂工艺下血液的溶血情况。
结果表明，血液在工厂环境下添加抗凝剂较在实验室环境下更易溶血，而血液在4℃环境下保存状况优于10℃环境。
%The absorption value of hemoglobin in plasma was determined by UV spectrophotometer. The pig blood hemolysis was analyzed during the different temperature and process of adding blood anticoagulant. The results showed that more red blood cells broken down when anticoagulants were added to pig blood in the factory than in laboratory.In addition,the status of pig blood that was preserved at 4 ℃ was better than that at 10 ℃.【期刊名称】《吉林师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P138-141)【关键词】溶血;血红蛋白;猪血【作者】赵永斌;于长春;李新华【作者单位】吉林师范大学生命科学学院，吉林四平136000;吉林师范大学生命科学学院，吉林四平136000;四平索纳克生物科技有限公司，吉林四平136000【正文语种】中文【中图分类】S852.2在我国，猪血有着很丰富的资源，作为农副产品的余料，每年产量达2.5到3亿公斤.猪血的营养物质含量丰富，可以应用在食品工业、饲养工业、农业、化工原料、医学实验以及人们的日常生活中[1-5].目前，猪血大多仍是作为提取血浆以及制备血粉的原料[6-7].在猪血从屠宰场到血制品加工车间的运输过程中，通常要保持非凝固状态，并且要尽量减少溶血现象的发生.目前，血液的抗凝剂主要有肝素、EDTA-2Na、ACD、柠檬酸钠和三聚磷酸钠等[8-9]，工业生产中一般以3.8%柠檬酸钠溶液(血液中浓度为0.7%)作为抗凝剂，保存温度保持在10 ℃左右[10-11].然而，在各种因素的作用下，血液中的红细胞会发生破裂，当猪血保存时间达到3 d 左右后，血液发生溶血，使得血浆蛋白粉的颜色加深，且带有一定的腥味，会降低血浆的质量，进而严重影响血浆蛋白粉的市场销售[12-13].为避免这一现象的发生，猪血加工企业通常采取加大运输血液频率，或者通过一定手段，延长猪血保存时间.然而前一种方法无疑会增加企业的运输成本，而后一种方法虽然能使血制品加工企业扩大血液采购半径，降低运输成本，但是需要阐明影响猪血溶血的各种因素.由于血液溶血发生后，大量血红蛋白会进入到血浆中[7].研究表明，血浆中游离血红蛋白在414 nm 附近有较强吸收峰[14-15]，因而采用紫外分光光度法测定血液中游离血红蛋白的吸光值可以较好的评估血液的溶血情况.本论文从保存温度、抗凝剂浓度等方面探讨血液的溶血情况，从而为研发新型复合抗凝剂、延长猪血保存提供理论依据.新鲜猪血由四平索纳克生物科技有限公司提供.将实验室配制的浓度为3.8%柠檬酸钠溶液加入到新鲜血液中，使得柠檬酸钠终浓度为0.7%，将此血液标记为A血液，同时，将此血液中提取的血浆标记为A血浆.将血厂添加柠檬酸钠溶液的猪血标记为B血液，同样，将此血液中提取的血浆标记为B血浆.将这两种血液分别分成两份，迅速置于10 ℃以及4 ℃环境中保存，分别标记为A10、A4以及B10、B4.取新鲜A、B血液，经3 000 rpm离心10 min，然后取上清液，置于10℃环境中保存，分别标记为A10*和B10*血浆.另外，A、B血液分别保存在10 ℃以及4 ℃环境中，每隔12 h取A、B血液各约40 mL，3 000 rpm离心10 min，取上清液，最后进行吸光度的检测.以生理盐水为空白对照，检测不同保存时间下A10*和B10*血浆在414 nm条件下的吸光值，以最小吸光值的血浆为基质血浆.以基质血浆为空白对照检测分别在10 ℃以及4 ℃环境中不同保存时间下各血液制备的血浆在414 nm下的吸光值.由于本实验所用紫外分光光度计(上海光谱SP-752)最大测量数值为2.5，因此，测量不同保存时间内不同血浆的吸光值时，获得的测量值数目不尽相同.为了便于进行统计学分析，对所得数据进行回归分析，基于回归方程，计算出每组缺失的数据，然后进行双因素方差分析.回归分析、方差分析以及t检验均使用SPSS16.0-软件完成.如图1所示，0～132 h之间A10*和B10*血浆在414 nm的吸光值基本没有发生太大的变化，其中A10*的标准差为0.038，小于B10*的0.065，表明前者的吸光值波动更小.对两组数值进行两尾t检验，P值为0.00047，小于0.05，这表明A10*血浆的吸光值明显小于B10*血浆的吸光值，因此，在后续的检测中，选用A10*血浆为基质血浆.以基质血浆为空白对照，测定了在4 ℃以及10 ℃环境中的A、B两种血浆的吸光值，结果表明B10吸光值最先到达仪器所测的最大上限2.5，获得7个测量数值，B4获得12个测量值，A10获得14个测量值，A4获得17个测量值(图2).采用SPSS软件对这些吸光值与保存时间进行曲线拟合，结果表明，对于4种血浆来说，虽然拟合直线、二次曲线以及三次曲线判定系数均较高，P值都小于0.01，但三次曲线拟合优度均最高(表1)，因此均选用一元三次回归方程(图3).基于对应的回归方程，将B10、B4以及A10相对于A4缺少的数值补齐，然后进行双因素方差分析，结果表明，在192 h内，不同血浆之间的吸光值存在明显差异(P值均小于0.01，表2)，这说明血液在10 ℃环境下较在4 ℃环境下更加易于溶血，而A血液相对于B血液，不论在何种环境下，溶血现象更不明显.溶血是指红细胞破坏后释放出血红蛋白并引起血浆颜色改变.红细胞异常溶血由许多因素引起，包括在血液处理过程中操作不当、保存条件不当等[16].细胞溶血后，血红蛋白游离于血浆液中，由于游离血红蛋白在414 nm 附近有较强吸收峰[14]，因此，吸光值的大小可以反映血液溶血情况.从本实验结果来看，添加实验室配制的柠檬酸钠溶液的血液发生溶血的严重程度要小于在血厂添加柠檬酸钠溶液的血液.研究表明，红细胞突然接触高渗或低渗溶液、抗凝剂、添加剂或溶液pH发生骤变，都可能引起红细胞的破坏或溶解脆性增高[16].考虑到血厂添加抗凝剂是根据屠宰肉猪的数量粗略估算，相反，本实验则根据血液体积严格添加抗凝剂，这可能是造成不同血液溶血情况差异的原因之一.因此，血厂应该构建一套科学高效的添加抗凝剂的操作方案，从而有效减少血液溶血.另外，血液的保存、过滤或过滤过程、血液处理等时的温度是溶血的重要因素.温度很大程度上影响了红细胞膜的变形能力和血液处理过程中膜的稳定性，因此血液运输中必须确保保存温度在1～10 ℃[16].通常，血厂运输血液的环境温度为10 ℃，对于血厂来说，保持该温度相对于更低温度可以降低制冷成本，但在此温度下，一些微生物以及酶可能还具有一定活性，而微生物繁殖也是造成血液溶血的原因之一[16，17]，因此从本实验结果来看，4 ℃保存的血液溶血严重程度要明显小于10 ℃环境下血液的溶血.然而，值得一提的是，无论A血液还是B血液，在储存前期36 h内，4 ℃环境下溶血程度要比10 ℃环境下严重(见图2)，这也可能是高温度环境下血液突然进入到低温环境下而造成红细胞破裂.由此看来，血厂将保存血液环境温度设定为10 ℃有一定经济及生物学意义.但是，如果准备延长猪血保存时间，则保存温度应适当降低.【相关文献】[1]宜振安.猪血的综合利用[J].沈阳师范学院学报(自然科学版)，1997,15(1)：51～53.[2]车振明,高平.猪血的综合开发和利用[J].农牧产品开发,2000,3:29～30.[3]王洪江,谢跻,柳婷,等.猪血的综合开发与应用研究进展[J].肉类研究,2009,130(12)：81～87.[4]杨桂有,蔡克周,程榆茗.浅谈我国猪血资源的开发与利用现状[J].肉类工业,2009,12:10～11.[5]王赟,李爱彬,陈湘来,等.猪血的开发和利用[J].食品与机械,2012,28(1)：272～274.[6]刘任民.猪血综合利用的研究[D].南京:南京工业大学,2007.[7]刘君臣.屠宰生猪血资源化研究[D].广州:华南农业大学,2009.[8]刘长.国家禽血样固定及其DNA 的提取[J].西北农业学报，2003,12(3)：33～35.[9]鲁云风,文祯中.3 种血液抗凝剂的抗凝效果及对RAPD反应影响的研究[J].南阳师范学院学报，2004(12)：55～57.[10]叶涛.提高血浆质量降低血浆成本—关于使用抗凝剂的探讨[J].肉类研究,1988,4:23～24.[11]凌云霄,王雅静.正交实验优化新型血液抗凝剂的使用条件[J].肉类工业，2015，1：35～38.[12]郭晋育,吴明文,等.四种猪血抗凝剂抗溶血效果比较及新复合型抗凝剂最佳使用条件研究[J].畜牧与饲料科学,2011,32(8):5～6.[13]徐艺青,陈湘宁.对猪血品质影响的研究[J].北京农学院学报，1997,12(1)：54～58.[14]上海市医学化验所.临床生化检验[M].上海:上海科学技术出版社，1979.[15]王莉,张淑琴,赵君.紫外分光光度法检测血浆游离血红蛋白[J].中国输血杂志,2006,19(6):477～479.[16]Samuel O，Sowemimo-Coker.Red blood cell hemolysis during processing[J].Transfusion Medicine Reviews 2002,16(1):46～60.[17]李宝臻,李兴民,刘毅,等.猪血红蛋白酶解液的抑菌性研究[J].食品工业科技,2006,12:86～88.。
不同抗凝剂对血液分析仪测定参数的影响
不同抗凝剂对血液分析仪测定参数的影响聂凤英;焦晓宁【期刊名称】《中国当代医药》【年(卷),期】2012(19)23【摘要】目的探讨乙二胺四乙酸盐(EDTA-K2)、肝素、枸橼酸钠3种抗凝剂对血液各项指标的不同影响.方法 2012年2月在本院体检者中随机选择50例为研究对象,分别用3种不同抗凝剂抗凝后,对白细胞(WBC)计数、红细胞(RBC)计数、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(HCT)、血小板(PLT)及淋巴细胞(LYM)计数等各项参数的检测结果进行比较、分析和探讨.结果 WBC计数、RBC计数、Hb、HCT、LYM计数此5项参数在3种抗凝剂组间差异无统计学意义(P > 0.05);与EDTA-K2抗凝组相比,使用肝素和枸橼酸钠时,PLT计数降低,差异有统计学意义(P < 0.01).结论在血常规的检测中,使用EDTA-K2、肝素、枸橼酸钠不同抗凝剂时,WBC计数、RBC计数、Hb、HCT、LYM计数此5项参数在3种抗凝剂组间无差异;肝素和枸橼酸钠使PLT计数降低.【总页数】2页(P140-141)【作者】聂凤英;焦晓宁【作者单位】河南省濮阳市中医院检验科,河南濮阳,457000;河南省濮阳市中医院检验科,河南濮阳,457000【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.在血液流变学检测中不同抗凝剂对血沉测定的影响 [J], 李雪梅2.不同抗凝剂浓度对血细胞分析仪测定结果的影响 [J], 吴凯;熊建辉;赵健3.不同抗凝剂浓度对血细胞分析仪测定结果的影响 [J], 吴凯;熊建辉;赵健4.不同抗凝剂对大鼠血液生化指标测定结果的影响 [J], 刘颖; 王铁山; 刘珍清5.血液标本不同保存条件对红细胞系参数和血小板测定结果的影响 [J], 李长城;陈兵;张永芬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同抗凝剂对血葡萄糖测定的影响及评价
不同抗凝剂对血葡萄糖测定的影响及评价
代胜奇
【期刊名称】《吉林医学》
【年(卷),期】2012(033)017
【摘要】目的：常温下,三种常用抗凝剂抗凝的血浆,在不同时间测定血葡萄糖,对结果进行比较,以选择一种适于血葡萄糖测定的抗凝剂.方法：选10名健康志愿者,同时各采空腹静脉血16 ml,分别注入无抗凝剂及肝素钠、枸橼酸钠、氟化钠-草酸钾抗凝管内各4 ml,于0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h分别测定血葡萄糖,对结果稳定性进行统计学分析.结果：不添加抗凝剂的血清标本随着放置时间延长,葡萄糖下降尤为明显,含氟化钠-草酸钾的抗凝血抑制糖酵解效果最好.结论：临床工作中做血葡萄糖测定时,如果采血后不能立即分离血清（或血浆）进行检测,应使用含氟化物的抗凝剂抗凝,防止全血中的葡萄糖发生体外发酵解,影响检测结果.
【总页数】2页(P3739-3740)
【作者】代胜奇
【作者单位】四川省成都市双流县妇幼保健院,四川成都610200
【正文语种】中文
【中图分类】R692.505
【相关文献】
1.重选血葡萄糖测定抗凝剂实验评价 [J], 屈引婷
2.血葡萄糖测定抗凝剂的评价和选择 [J], 万雄萍
3.不同抗凝剂对血葡萄糖测定的影响及评价 [J], 代胜奇
4.抗凝剂的选择对血葡萄糖测定的影响 [J], 戎世琴;葛仁美
5.不同抗凝剂不同时间测定血葡萄糖结果分析 [J], 王艳萍
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抗凝血实验报告
抗凝血实验报告抗凝血实验报告引言：抗凝血是一种重要的生理过程，它能够防止血液在血管内凝结，保持血液的流动性。
然而，当抗凝血机制受到破坏或失调时，就会导致血液凝结的问题。
为了研究抗凝血机制以及相关疾病的发生机制，我们进行了一系列的抗凝血实验。
本报告将对这些实验进行详细的描述和分析。
实验一：血小板聚集实验血小板是血液中的细胞成分之一，它在凝血过程中起到了重要的作用。
我们通过血小板聚集实验来研究抗凝血机制对血小板功能的影响。
实验中，我们采集了一定量的血液样本，并将其离心分离出血小板。
随后，我们在实验室条件下，加入不同浓度的抗凝剂，如肝素和华法林，观察血小板的聚集情况。
实验结果显示，加入肝素后，血小板的聚集能力明显降低，表明肝素能够有效地抑制血小板的活化和聚集。
而加入华法林后，血小板的聚集能力并未发生显著变化。
这可能是因为华法林主要通过抑制凝血因子的合成来发挥抗凝血作用，对血小板的影响较小。
实验二：凝血酶时间实验凝血酶是血液凝结过程中的关键酶。
我们进行了凝血酶时间实验来研究抗凝血机制对凝血酶活性的影响。
实验中，我们采集了一定量的血液样本，并将其离心分离出血浆。
随后，我们在实验室条件下，加入不同浓度的抗凝剂，如肝素和华法林，观察凝血酶时间的变化。
实验结果显示，加入肝素后，凝血酶时间明显延长，表明肝素能够有效地抑制凝血酶的活性。
而加入华法林后，凝血酶时间并未发生明显改变。
这进一步验证了肝素主要通过抑制凝血因子的合成来发挥抗凝血作用的机制。
实验三：纤维蛋白原时间实验纤维蛋白原是血液凝结过程中的重要物质。
我们进行了纤维蛋白原时间实验来研究抗凝血机制对纤维蛋白原的影响。
实验中，我们采集了一定量的血液样本，并将其离心分离出血浆。
随后，我们在实验室条件下，加入不同浓度的抗凝剂，如肝素和华法林，观察纤维蛋白原时间的变化。
实验结果显示，加入肝素后，纤维蛋白原时间明显延长，表明肝素能够有效地抑制纤维蛋白原的转化为纤维蛋白。
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第3卷第12期2004年12月南阳师范学院学报(自然科学版)Journal of Nanyang Teachers c College(Natural Sciences Edition)Vol.3No 112Dec. 2004The Preparation and Modification of Ultrafine SilicaZH U Jie 1GE Feng_juan2(1.Institute o f Science,Bei j ing Jiaotong University ,Bei j ing 100044,China;2.Department o f Chemistry ,Yancheng Teachers c College,Yancheng Jiangsu 224002,China)Abstract:Ultrafine silica is an important industrial che mical,which is widely used in many fields,such as catalyst supports,macromolecular composite materials,cera mic s,rubbers,fillers,paints and so on.However,the surface of silica is hydrophilic,which is not c ompatible with organic materials,so the silica must be surface_modified before it can beused into industrial products.The recent techniques of preparation and modification of ultrafine silica are summarized and compared.Also the research directions in future of this subject are suggested,which have a reference value to rela -tive fields.Key words:silica;preparation;surface modification收稿日期:2004-07-16基金项目:河南省自然科学基金项目(0411034200)作者简介:鲁云风(1980-),河南信阳人,在读硕士研究生,主要从事分子生态学方面的研究。
3种血液抗凝剂的抗凝效果及对RAPD 反应影响的研究鲁云风1,2文祯中2 原国辉1 陶爱丽2,3(11河南农业大学植物保护学院,河南郑州450002;21南阳师范学院生物系,河南南阳473061;31河南师范大学生命科学系,河南新乡453002)摘 要:采用3种不同的血液抗凝剂(ACD 、EDTA 、肝素)检测南阳黄牛血液的抗凝效果及对RAPD 反应的影响,从中挑选一种总体效果最好的抗凝剂。
结果表明:选择合适的抗凝剂对实验能否取得预期结果有重要的影响。
关键词:黄牛血液;抗凝剂;RAPD中图分类号:Q 81 文献标识码:A 文章编号:1671-6132(2004)12-0055-03从动物血液中提取DNA 并用于RAPD 扩增是一种很常见的方法,但影响因素很多,其中,血液抗凝剂的使用尤为关键。
比较常用的3种抗凝剂,分别为ACD 、ED TA 和肝素,通过实验这3种抗凝剂的抗凝效果及对RAPD 反应的影响,旨在从中选取一种总体效果最好的抗凝剂,从而为以后大量血液样本的抗凝保存及基因组分析创造便利条件。
1 材料与方法1.1 实验材料黄牛血液采自南阳唐河黄牛。
Tris -base 为宝信生物科技有限公司产品,SDS(十二烷基磺酸钠)为上海生工分装,Marker K DNA/Hind Ó为上海生工进口分装,琼脂糖为上海YI T0有限公司进口分装,Taq 酶、dNTP 、RAPD 引物为北京博润汇力基因有限公司产品,Tris 饱和酚为天津H &Y 生物有限公司产品,氯仿、异戊醇、无水乙醇均为国产分析纯。
TE (10mmol/L Tris.cl,1mmol/L EDTA,pH 8.0)缓冲液、溴化乙锭(EB)染色液配成50mg/mL,4e 冰箱保存。
1.2 实验仪器TGRADIE NT 梯度PCR 仪为德国Whatman Biometra 产品,Dyep -32型电泳槽为北京六一仪器厂产品。
113 实验方法11311 3种抗凝剂的配制及使用ACD(柠檬酸0148g,柠檬酸钠1132g,葡萄糖1.47g 加水至100mL),血液B ACD=6B 1(体积比),肝素配为012%浓度,血液B 肝素=9B 1(体积比),EDTA 配为1%(10mmol/L Tris.cl,0.2mmol/L ED -TA,pH 8.0)浓度,血液B EDTA=9B 1(体积比),加入抗凝剂后颠倒混匀,如果是在当日提取DNA,在操作之前,可于4e 保存,否则-70e 冷冻保存。
11312 DNA 的提取[1-2]取冷藏血液(2mL),室温融化后,移至一新离心管中,用等体积磷酸缓冲盐溶液PBS(8g NaCl,0.2g KCl,1.44g Na 2HPO 4,加水至1L 调pH 值为714)稀释,随后于室温离心7000r/min,15min,弃去上清,用115mL DNA 抽提液重悬沉淀物,于37e 保温1h 。
离心管中加入蛋白酶K,最终浓度为100L g/mL,用一玻璃棒温和地将酶混入粘滞的溶液中。
将裂解细胞的悬液置于50e 水浴恒温振荡器中水浴过夜,将溶液冷至室温,加等体积Tris_HCl 饱和酚(pH 8.0),缓慢地来回颠倒离心管约10min,小心地混合两相,离心10000r/min,30min 。
用大口径(3mm)移液器头将上层水相移至洁净的离心管中,加等体积的酚B 氯仿B 异戊醇(25B 24B 1),缓慢地来回颠倒离心管约10min,小心地混合两相,离心10000r/min,20min 。
用大口径(3m m)移液器头将上层水相移至一洁净的离心管中,加等体积的氯仿B 异戊醇(24B 1),缓慢地来回颠倒离心管5min,小心地混合两相,离心10000r/min,10min 。
用大口径(3m m)移液器头将上层水相全部移至一洁净的离心管中,于室温加0.1倍体积的醋酸钠(3m ol/L,pH 5.2)和2倍体积的无水乙醇,在桌面上滚动离心管使其充分混匀,DNA 立即形成絮状沉淀,用玻璃棒挑取沉淀或室温离心5000r/min,5min 收集沉淀,并用移液器头尽量除去液体。
用70%乙醇悬浮沉淀二次,室温离心5000r/min,5min 。
收集DNA 尽可能除去70%乙醇(但不要使沉淀完全干燥,否则不易溶解)。
TE(10mmol/L Tris_HCl,1mol/L EDTA pH 8.0)溶解DNA 沉淀,轻敲之,使DNA 完全溶解后,-20e 保存。
11313 电泳检测所提DNA各取10L L DNA,进行0.8%的琼脂糖凝胶电泳,电压85V,TAE 缓冲液,30min 后在0.5L g/mL 的EB 中染色20min,紫外灯下检测。
1.314 RAPD 实验[3-4]选取电泳结果较好的样品进行PC R 扩增,设一不加DNA 模板的空白对照,引物选用kit BRA 中的9号,扩增体系为:10@buffer(含MgCl 220mmol/L)2.5L L,dNTPs(2.5mmol/L each)0.25L L,引物5pmol,模板DNA 1L L,加ddH 2O 至总体积25L L 。
扩增条件为:94e 预变性5min,94e 1min,36e 1min,72e 2min,42个循环,72e 延伸10min 。
取RAPD 扩增产物10L L,进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,电压85V,EB 染色后紫外灯下观察。
2 结果与分析紫外灯下观察D NA 样品的电泳结果如图1所示。
图1 3种不同抗凝血样DNA 的电泳结果注:M 为Marker;1加ED TA 的血样;2加肝素的血样;3加ACD 的血样从图1中可以看出加入3种抗凝剂血样的DNA 电泳条带都很清晰,且每条带都在Marker 的最后一条带之后,说明所提DNA 片段长度均大于23Kb,其中加入EDTA 和肝素的血样DNA 电泳带有拖尾现象,说明EDTA 和肝素对血液中DNA 片段有一定的降解作用,而且肝素的副作用更大(重复实验4次,除一次操作失误无带外,均出现如图1现象),这与Gustafson 等提出AC D 在血液储存过程中更能保存高分子量DNA 的观点相一致。
紫外灯下观察DNA 样品RAPD 扩增产物的电泳结果如图2所示。
图2 RAPD 产物的电泳结果注:M 为Marker;1加ED TA 的血样;2加肝素的血样;3加ACD 的血样;4空白对照#56# 南阳师范学院学报(自然科学版) 2004年第12期从图2中可以看到加入肝素的样品无扩增带,而加入EDTA 和ACD 的样品扩增带整齐清晰,在同样的扩增条件下,可以说明肝素对RAPD 有一定的抑制作用(重复实验3次,均出现如图2现象)。
3 结果与讨论有资料显示[2]反复冻融血液会使DNA 的收率有所下降,实验中也有类似的现象,所以建议应该分装保存。
从动物血液中提取DNA 进行RAPD 分析的影响因素很多,其中抗凝剂的选用对提取大分子量DNA 并用于PC R 反应以取得良好效果尤为关键。
从实验结果看,所选用3种抗凝剂中,EDTA 和肝素对所提取的样品DNA 分子片段有一定的降解作用,尤其是肝素作用最为明显,提取DNA 得产率最低,且肝素中含有一些酶的活性抑制成分,因此在进行PCR 时抑制了反应的进行,导致无扩增带。
Gustafson(1989)等观察了全血DNA 提取中的影响因素,指出在众多的影响因素(抗凝剂的使用,孵育时间,温度,冻融次数)中,抗凝剂的选择是至关重要的,肝素在抽提基因组时对DNA 有降解作用,更重要的是对PCR 反应过程有强烈抑制作用。
其后,Holodniy(1990)比较了多种抗凝剂对5名HIV 患者的gag gene PCR 扩增结果的影响,发现肝素抗凝的全血或单核细胞抽提的DNA 进行PCR 产率最低。
如果在反应体系中加入肝素酶,则能得到较大DNA [5]。
但肝素酶的使用将大大增加实验成本,所以从总体效果来看,ACD 用于黄牛血液抗凝剂抗凝效果最好,既经济有效又无不良影响。
参 考 文 献[1] J 1萨姆布鲁克,等1分子克隆实验指南.第二版[M].北京:科学出版社,1999:460-470.[2] 卢圣栋1现代分子生物学实验技术[M ].北京:高等教育出版社,1993:102-110.[3] 朱庆,杨勇,胡刚安1RAPD 标记在分析家鸡遗传变异中的应用[J].四川大学学报,2000,3(7):139-143.[4] 赵凯,张周平,等1用RAPD 标记研究7个猪种间的亲缘关系[J].黑龙江畜牧兽医,2000(7):1-3.[5] 陈新谦,金有豫1新编药物学.十三版[M ].北京:人民卫生出版社,1991:160-170.Studies on Three Blood Anticoagulants .Effect and Influence on RAPDLU Yun_feng 1,2 WE N Zhen_zhong 2 YUAN Guo_hui 1 TAO Ai_li 2,3(1.Plant Protect College,Henan Agricultural University ,Zhengzhou Henan 450002,China;2.Department o f Li f e Science,Nanyang Teachers c College,Nanyang Henan 473061,China;3.Institute o f Li f e Science,Henan Normal University ,Xinxiang Henan 453002,China)Abstract:Expetimenting three blood anticoagulants .effect and influence on RAPD with Nanyang cattle .s blood,we chose the best anticoagulant on the whole.It was shown that adopting appropriate blood anticogulant was an effective factor in experimental success.Key words:cattle .s blood;anticoagulant;RAPD#57# 2004年第12期 鲁云风等:3种血液抗凝剂的抗凝效果及对RAPD 反应影响的研究。